Heterológny režim aktivácie AZD1222 a posilňovacieho režimu BNT162b2 účinnejšie vyvoláva neutralizačné protilátky, ale nie pamäťové T bunky, ako homológny režim BNT162b2
Aug 07, 2023
abstraktné
Pozadie: Na vytvorenie účinných režimov na kontrolu COVID-19 sú potrebné porovnávacie analýzy špecifických imunitných reakcií SARS-CoV{1}} vyvolaných rôznymi režimami prime-boost. Metóda: V tejto prospektívnej observačnej kohortovej štúdii, hrotovo špecifický imunoglobulín G (IgG) a neutralizačné protilátky (nAbs) spolu s hrotovo špecifickými T-bunkovými odpoveďami vo vekovo zodpovedajúcich skupinách homológneho očkovania BNT162b2/BNT162b2 alebo AZD1222/AZD1222, heterológne AZD Vyhodnotilo sa očkovanie BNT162b2 a predchádzajúca infekcia/očkovanie divokým typom SARS-CoV{19}}. Výsledky: Maximálne imunitné odpovede boli dosiahnuté po druhej dávke vakcíny v naivných očkovaných skupinách a po prvej dávke v skupine s predchádzajúcou infekciou/očkovaním. Maximálne titre anti-spike IgG a nAb boli signifikantne vyššie v skupinách očkovaných AZD1222/BNT162b2 a predchádzajúcej infekcii/očkovaní ako v skupinách BNT162b2/BNT162b2 alebo AZD1222/AZD1222. Avšak frekvencia CD4 plus T buniek produkujúcich interferón-c bola najvyššia v skupine očkovania BNT162b2/BNT162b2. Podobné výsledky boli pozorované pri analýze polyfunkčných T buniek. Keď sa analyzovali reakcie nAb a CD4 plus T-buniek proti variantu Delta, skupina s predchádzajúcou infekciou/očkovaním vykazovala vyššie reakcie ako skupiny iných homológnych alebo heterológnych vakcinačných režimov. Záver: nAb sú účinne vyvolané heterológnou vakcináciou AZD1222/BNT162b2, ako aj predchádzajúcou infekciou/očkovaním, zatiaľ čo spike špecifické reakcie CD4 plus T-buniek sú účinne vyvolané homológnou vakcináciou BNT162b2. Imunita rozpoznávajúca varianty sa účinnejšie vytvára predchádzajúcou infekciou/očkovaním ako iné homológne alebo heterológne vakcinačné režimy.
cistanche tubulosa - zlepšenie imunitného systému
1. Úvod
Ťažký akútny respiračný syndróm koronavírus 2 (SARS-CoV-2) sa celosvetovo šíri od svojho vzniku v decembri 2019 a vývoj účinných vakcín proti koronavírusovej chorobe 2019 (COVID-19) sa urýchlil [1 ]. Úspech tohto úsilia bol viditeľný pomerne rýchlo a niekoľko vakcín využívajúcich spike (S) proteín ako antigén vakcíny úspešne preukázalo bezpečnosť a účinnosť pri prevencii symptomatického COVID-19. Konkrétne vakcína na báze mRNA BNT162b2 (Comirnaty, Pfifizer-BioNTech) a vakcína na báze adenovírusového vektora AZD1222 (Vaxzevria, AstraZeneca) boli pôvodne schválené a široko podávané ako dvojdávkový primárny-boost režim. Dve dávky BNT162b2 mali 95-percentnú (95-percentný interval spoľahlivosti [CI], 90 – 98 percent ) účinnosť proti symptomatickému COVID-19 [2] a dve dávky AZD1222 mali 70 percent (95 percent CI, 55 – 81 percentá) účinnosti [3]. Je zaujímavé, že heterológne režimy prime-boost licencovaných vakcín COVID{31}} získali značný záujem a následne sa začali v niekoľkých krajinách napriek nedostatočným údajom o imunogenicite a bezpečnosti. BNT162b2 podaný ako posilňovacia dávka u jedincov po primárnej vakcinácii s AZD1222 vyvolal silné titre protilátok (Ab) imunoglobulínu G (IgG) špecifického pre S, reakcie neutralizačných protilátok (nAb) a T bunky interferónu-c plus (IFN-c plus ) [4 ,5]. Len málo štúdií však hodnotilo účinnosť heterológnej vakcinácie AZD1222/BNT162b2 v porovnaní s homológnou vakcináciou BNT162b2/BNT162b2 [6–8] a týmto štúdiám chýbalo komplexné vyhodnotenie S-špecifických T-bunkových reakcií. V súlade s tým zostáva nejasné, či heterológna vakcinácia AZD1222/BNT162b2 vedie k silným krížovým variantom nAb alebo odpovedí T-buniek. Ďalší príklad heterológneho priming-boostingu možno vidieť u jedincov, ktorí boli infikovaní SARS-CoV-2 a neskôr očkovaní proti vírusu. Niekoľko štúdií naznačilo, že hladiny špecifických väzbových Ab a nAb sa detegujú vo vysokých hladinách u jedincov s predchádzajúcou infekciou a očkovaním, hoci neexistovali žiadne porovnávacie analýzy [9,10]. Zdravotnícki pracovníci s predchádzajúcou infekciou SARS-CoV-2 majú vyššie titre Ab v reakcii na jednu dávku vakcíny mRNA ako tí, ktorí predtým neboli infikovaní [11]. Okrem toho jedinci s predchádzajúcou infekciou vykazujú zvýšené S-špecifické reakcie T-buniek a odpovede pamäťových B-buniek vylučujúcich Ab po primárnej dávke bez posilňovacej dávky [12]. V tejto štúdii sme komplexne skúmali humorálnu a bunkovú imunogenicitu homológnych a heterológnych režimov prime-boost v prospektívnej pozorovacej kohorte s vedľajším porovnaním S-špecifických väzbových Ab, nAb a špecifických reakcií CD4 plus T-buniek. . Hodnotili sme aj imunologické výsledky u účastníkov, ktorí boli infikovaní divokým typom SARS-CoV-2 a dostali vakcíny proti COVID{76}}, aby sme zistili, či predchádzajúca infekcia a očkovanie účinne vyvolávajú imunitné reakcie proti variantu Delta.
cistanche výhody pre mužov - posilnenie imunitného systému
2. Metódy
2.1. Študovať dizajn
V marci 2021 bola založená multicentrická prospektívna kohorta na štúdium imunitných reakcií na očkovanie proti COVID{1}}. Účastníci tejto kohorty boli dobrovoľne prijatí medzi zdravotníckych pracovníkov a pôvodne mali dostať dve dávky BNT162b2 v 3-týždennom intervale alebo AZD1222 v 12-týždennom intervale. Avšak časť jedincov, ktorí boli primárne očkovaní AZD1222, dostala posilňovaciu dávku BNT162b2 medzi májom a júnom 2021 a bola zaradená do očkovacej skupiny AZD1222/BNT162b2. Medzi účastníkmi v kohorte boli tí, ktorí mali predchádzajúcu infekciu SARSCoV-2 divokého typu a dostali BNT162b2 alebo AZD1222, ako skupina predchádzajúcej infekcie/očkovania. Všetci príjemcovia vakcín analyzovaní v tejto štúdii boli v rámci skupín vekovo zhodní. Vzorky periférnej krvi boli odobraté od všetkých účastníkov v kohorte v každom časovom bode (T): pred a 3 týždne po 1. dávke vakcíny (T1 a T2, v tomto poradí), 5 týždňov po prvej dávke BNT162b2 alebo 11 týždňov po 1. dávka AZD1222 (T3) a 14 týždňov po prvej dávke vakcíny (T4). Schematické znázornenie protokolu štúdie je uvedené na obr. 1. Na porovnanie, rekonvalescentné vzorky boli získané od neočkovaných pacientov infikovaných SARSCoV-2 Delta variantom potvrdeným reverznou transkripčnou polymerázovou reťazovou reakciou v reálnom čase pomocou Seegene Allplex { {38}}súprava nCoV Assay (Seegene, Kórea) a súprava na sekvenovanie celého genómu Illumina BTSeq SARS-CoV-2 (Celemics Inc, Kórea) na sekvenátore MiSeq (režim párového konca 150-bp; Illumina, San Diego, CA, USA). Sekvencia báz získaná prostredníctvom BTseq sa porovnala s referenčnou sekvenciou NCBI NC_045512.2 pomocou softvéru IGV 2.10 na potvrdenie variantu Delta. Štúdia bola schválená inštitucionálnymi revíznymi radami každého zúčastneného inštitútu a vykonaná podľa zásad Helsinskej deklarácie. Všetci účastníci poskytli pred registráciou písomný informovaný súhlas.
2.2. Účastníci štúdie
Táto kohorta pozostávala z 22 účastníkov, ktorí dostali homológne očkovanie BNT162b2/BNT162b2 (priemerný vek 38.0 rokov; 31,8 percenta mužov), 20 účastníkov, ktorí dostali homológne očkovanie AZD1222/AZD1222 (priemerný vek 39,7 rokov; 23,8 percenta mužov) a 9 účastníkov, ktorí dostali heterológne očkovanie AZD1222/BNT162b2 (priemerný vek, 38,2 rokov; 33,3 percenta mužov). Z 11 účastníkov s predchádzajúcou infekciou SARS-CoV-2 divokého typu (priemerný vek 38,5 roka; 27,3 percenta mužov) boli 2 a 9 očkovaní vakcínou BNT162b2/BNT162b2 a AZD1222/AZD1222. Demografia rôznych očkovaných skupín je uvedená v doplnkovej tabuľke 2. Všetci účastníci s predchádzajúcou infekciou SARS-CoV{43}} divokého typu prekonali asymptomatický alebo mierny COVID{44}} a 3 z nich mali zápal pľúc. Medián času od potvrdenia COVID-19 po prvé očkovanie bol 121,5 (interkvartilný rozsah [IQR], 102,3 – 252,5) dní. Demografia účastníkov s predchádzajúcou infekciou divokým typom SARS-CoV-2 a očkovaním sú uvedené v doplnkovej tabuľke 1. Rekonvalescentné vzorky boli získané od 17 pacientov (priemerný vek 53 rokov; 52,9 percenta mužov) infikovaných SARS -CoV-2 Delta variant a hospitalizovaný pre stredne závažný až kritický COVID-19 (stredne závažný, 17,6 percent; ťažký, 35,3 percenta; kriticky chorý, 47,1 percenta). Medián času od nástupu symptómov súvisiacich s COVID{70}} po odber vzoriek bol 24 (IQR, 22–32) dní. Demografické údaje účastníkov rekonvalescencie SARS-CoV{75}} Delta sú uvedené v doplnkovej tabuľke 2 a tabuľke 3.
2.3. Väzbové protilátky
SARS-CoV-2 S-špecifické väzbové Abs sa analyzovali pomocou komerčného imunotestu. Elecsys anti-S proteínový test (Roche Diagnostics, Nemecko) je elektrochemiluminiscenčný imunotest používaný na detekciu SARS-CoV-2 S-špecifických protilátok na analyzátore Cobas e411 (Roche Diagnostics, Nemecko), s rozsahom merania od { {8}},4 U/ml až 250 U/mL (do 2 500 U/ml s integrovaným riedením 1:10 a do 12 500 U/ml s integrovaným riedením 1:50). Rekombinantná receptor viažuca doména S proteínu bola použitá s dvojitým antigénovým sendvičovým princípom. Antigény v činidle zachytávajú prevažne anti-SARSCoV-2 IgG. Anti-nukleokapsidový proteínový test Elecsys (Roche Diagnostics, Nemecko) sa použil na detekciu predchádzajúcich infekcií SARS-CoV-2 s hraničným indexom 1,0.
výhody doplnku cistanche-zvýšenie imunity
2.4. Neutralizačný test na redukciu plakov
Neutralizačné testy na redukciu plakov pre vírusy SARS-CoV- 2 divokého typu (BetaCoV/Kórea/KCDC03/2020) a Delta variant kmeň YS117 (prírastkové číslo GenBank MZ798798 a prírastkové číslo GISAID EPI{101} {8}}ISL_3411836) boli uskutočnené pomocou vzoriek plazmy. Vírus bol pestovaný na bunkách Vero E6 v laboratóriu úrovne 3 biologickej bezpečnosti v Avison Biomedical Research Center v Soule, Kórea. Vzorky inaktivovanej plazmy (135 ul) vzoriek inaktivovanej plazmy sa 2-násobne sériovo zriedili (1:40 až 1:1280) a pridali sa do rovnakého objemu 100-násobku 50-percentnej infekčnej dávky pre tkanivové kultúry (TCID50) vírus. Izoláty obsahujúce 100-násobok TCID50 sa inkubovali v 96-jamkových platniach počas 60 minút pri 37 °C. Zmesi vírus-plazma sa inkubovali 60 minút pri 37 °C v CO2 inkubátore. Zmesi vírus-plazma sa potom pridali k bunkám Vero E6 nasadeným na 24-jamkovú platňu s 1 x 105 buniek/jamku a inkubovali sa 1 hodinu pri 37 °C. Prekrývacie médium zložené z 2 percent fetálneho bovinného séra (FBS) v DMEM a k bunkám E6 sa pridalo 1 percento agaru a inkubovalo sa 3 dni pri 37 °C v CO2 inkubátore. Po vytvorení plaku sa na fixáciu a zafarbenie vrstvy bunkovej kultúry použil 10 percentný roztok formaldehydu a 0,33 percent neutrálnej červenej vo fosfátom pufrovanom fyziologickom roztoku (PBS). Neutralizačné riedenie každej vzorky sa určilo identifikáciou jamky s najvyšším riedením plazmy bez pozorovateľného cytopatického účinku. 50-percentné neutralizačné dávky (ND50) boli vyjadrené ako recipročné riedenie plazmy, čo viedlo k 50-percentnému zníženiu počtu plakov v porovnaní s pozitívnou vírusovou kontrolou. Na výpočet titrov ND50 sa použila Spearman-Kärberova metóda. V porovnaní s medzinárodnými štandardnými sérami WHO (NIBSC 20–136; titer nAb: 1000 IU/ml) boli titre nAb prevedené na medzinárodné jednotky na mililiter (IU/ml).
Obr. 1. Schematické znázornenie kohorty príjemcov vakcíny. Schéma štúdie na detekciu špecifických väzbových protilátok SARS-CoV{2}}, neutralizujúcich protilátok a reakcií T-buniek vo vzorkách periférnej krvi od jedincov očkovaných proti COVID-19. Štúdia zahŕňa BNT162b2/BNT162b2 (n=22), AZD1222/AZD1222 (n=20), AZD1222/BNT162b2 (n=9) a predchádzajúci divoký typ SARS-CoV{{20 }} skupín infekcie/očkovania (n=11). Z predchádzajúcej infekcie/očkovania divokým typom SARS-CoV-2 bolo 2 a 9 očkovaných s BNT162b2/BNT162b2 a AZD1222/AZD1222, v uvedenom poradí. Anamnéza infekcie SARS-CoV-2 bola potvrdená pozitívnym testom nukleokapsidových protilátok proti SARS-CoV-2. T, časový bod; týždne, týždne.
2.5. T-bunkové testy
Mononukleárne bunky periférnej krvi (PBMC) sa izolovali centrifugáciou v hustotnom gradiente s použitím skúmaviek Leucosep (Greiner Bio-One) obsahujúcich médium na separáciu lymfocytov. Po centrifugácii pri 800 g počas 15 minút s brzdením sa obohatená bunková frakcia pozostávajúca z PBMC zozbierala a premyla 20 ml PBS. Po centrifugácii pri 300 g počas 10 minút sa bunková peleta resuspendovala v 10 ml PBS na počítanie. Po centrifugácii pri 300 g počas 10 minút boli bunky kryokonzervované v FBS s 10 percentami dimetylsulfoxidu pri 180 °C až do použitia. Na farbenie intracelulárnych cytokínov (ICS) IFN-c, interleukínu-2 (IL-2) a faktora nekrózy nádorov (TNF) sme použili peptidové pooly 15-mérnych peptidov prekrývajúcich sa o 11 aminokyseliny pokrývajúce imunodominantné časti proteínu SARS-CoV-2 Wuhan S (aminokyseliny 304–338, 421–475, 492–519, 683–707, 741–770, 785–802 a 885–1273; Miltenyi Biotec). Na porovnanie reakcií T-buniek proti kmeňom Wuhan a Delta sme použili dva rôzne súbory poolov peptidov S obsahujúcich nekonzervované oblasti sekvencií S medzi kmeňmi Wuhan a Delta (línia B.1.617.2) (Miltenyi Biotec). Po rozmrazení PBMC a ich ponechaní cez noc boli 1 106 PBMC stimulované peptidovými zásobami v konečnej koncentrácii 1 mg/ml a anti-humánnym CD28/CD49d (1 mg/ml; BD Biosciences) počas 1 hodiny v { {45}}doštička s jamkami v RPMI{46}} médiu obsahujúcom 1 percento penicilínu-streptomycínu, 2 mM L-glutamínu a 10 percent FBS. Kultúra PBMC sa inkubovala ďalších 5 hodín po pridaní brefeldínu A a monenzínu (BD Biosciences) pri 37 °C v 5 percentách CO2. Po stimulácii boli bunky premyté PBS a zafarbené Live/Dead-Aqua (Invitrogen) počas 20 minút pri izbovej teplote, po čom nasledoval kokteil povrchových Abs počas 20 minút pri izbovej teplote, vrátane anti-CD14- BV510, anti-CD19-BV510, anti-CD4- BV650, anti-CD3-BV786 a anti-CD8-APC-Cy7 (BD Bioscience). Bunky boli fixované a permeabilizované pomocou Foxp3/Transcription Factor Stained Buffer Set (eBioscience) a potom zafarbené kokteilom intracelulárnych protilátok, vrátane anti-TNF-FITC, anti-IL{78}}PE (eBioscience) a anti- IFN-c-APC (BD Biosciences) počas 20 minút pri teplote miestnosti. Po dokončení farbenia sa bunky analyzovali na prístroji LSR II s FACSDiva (BD Biosciences) a údaje sa analyzovali v softvéri FlowJo (FlowJo LLC).
cistanche rastlina zvyšujúca imunitný systém
2.6. Štatistická analýza
Údaje vynesené v lineárnej mierke boli vyjadrené ako priemer ± štandardná odchýlka. Údaje vynesené v logaritmických mierkach boli vyjadrené ako geometrický priemer ± geometrická štandardná odchýlka. Mann–Whitney U alebo Wilcoxonov test sa použili na nepárové alebo párové porovnania. Štatistické analýzy boli {{0}}koncované, pričom P < 0,05 sa považovalo za významné. Všetky analýzy boli vykonané v R studio alebo GraphPad Prism v9.0.
3. Výsledky
3.1. Kinetika imunitných odpovedí vyvolaných rôznymi režimami očkovania
Najprv sme skúmali anti-S IgG titre po očkovaní rôznymi režimami. Ako sa očakávalo, prvá dávka významne zvýšila titre anti-S IgG (T2) a druhá dávka ďalej významne zvýšila titre anti-S IgG pri homológnej vakcinácii BNT162b2/BNT162b2 (T3) a AZD1222/AZD1222 (T4) a heterológnej AZD1222/ BNT162b2 vakcinačné skupiny (T4) (obr. 2A). V skupine s predchádzajúcou infekciou/očkovaním prvá dávka maximálne zvýšila titre anti-S IgG (T3), ale druhá dávka ďalej nezvýšila titre anti-S IgG (T4). Tiež sme skúmali S-špecifické CD4 plus T-bunkové reakcie po priamej ex vivo stimulácii s peptidovými zásobami pokrývajúcimi SARSCoV-2 Wuhanovú sekvenciu S proteínu divokého typu. Na základe ICS prvá dávka významne zvýšila frekvenciu buniek produkujúcich IFN-c medzi CD4 plus T bunkami a druhá dávka ďalej významne zvýšila frekvenciu v skupinách očkovania BNT162b2/BNT162b2 (T3) a AZD1222/BNT162b2 (T4). (obr. 2B). V skupinách AZD1222/AZD1222 a predchádzajúcej infekcii/očkovaní prvá dávka významne zvýšila frekvenciu IFN-c plus buniek medzi CD4 plus T bunkami, ale druhá dávka frekvenciu ďalej nezvyšovala.
3.2. Porovnanie titrov Ab medzi rôznymi režimami
Ďalej sme porovnávali maximálne titre väzbovej Ab medzi rôznymi vakcinačnými režimami. Ako vrcholové titre sme vybrali titre anti-S IgG po druhej dávke v očkovacích skupinách BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 a AZD1222/BNT162b2 a po prvej dávke v skupine s predchádzajúcou infekciou/očkovaním. Maximálne titre anti-S IgG boli signifikantne vyššie v skupine očkovanej AZD1222/BNT162b2 ako v skupine očkovanej BNT162b2/BNT162b2 alebo AZD1222/AZD1222 (obr. 3A). Podobne vrcholové titre anti-S IgG boli signifikantne vyššie v skupine s predchádzajúcou infekciou/očkovaním ako v skupinách očkovania BNT162b2/BNT162b2 alebo AZD1222/AZD1222. Medzi skupinami AZD1222/BNT162b2 a predchádzajúcou infekciou/očkovaním nebol žiadny rozdiel v titroch anti-S IgG. Hodnotili sme aj titre nAb v najvyšších časových bodoch: po druhej dávke v očkovacích skupinách BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 a AZD1222/BNT162b2 a po prvej dávke v skupine s predchádzajúcou infekciou/očkovaním. Je pozoruhodné, že titre nAb boli významne vyššie v skupine očkovanej AZD1222/BNT162b2 ako v skupine očkovanej BNT162b2/BNT162b2 alebo AZD1222/AZD1222 (obr. 3B). Okrem toho titre nAb boli významne vyššie v skupine s predchádzajúcou infekciou/očkovaním ako v skupine s vakcináciou BNT162b2/BNT162b2 alebo AZD1222/AZD1222. Nebol žiadny rozdiel v titroch nAb medzi skupinami AZD1222/BNT162b2 a predchádzajúcou infekciou/očkovaním. Úroveň humorálnej odpovede vyvolanej rôznymi očkovacími režimami bola kategorizovaná na silnú, strednú a žiadnu/slabú odpoveď na základe percentilového poradia. Podiel silných respondentov bol najvyšší v skupine s predchádzajúcou infekciou/očkovaním, po ktorej nasledovala skupina očkovania AZD1222/BNT162b2, čo sa týka analýzy anti-S IgG (obr. 3C) a nAb (obr. 3D). Celkovo tieto výsledky naznačujú, že heterológna primárna aktivácia a boosting, vrátane vakcinácie AZD1222/BNT162b2 a predchádzajúcej infekcie/očkovania, sú účinnejšie pri vytváraní humorálnych odpovedí ako homológne primovanie a posilňovanie.
3.3. Porovnanie S-špecifických CD4 plus T-bunkových reakcií medzi rôznymi režimami
Porovnali sme tiež S-špecifické reakcie CD4 plus T-buniek medzi rôznymi očkovacími režimami v časových špičkách: po druhej dávke v očkovacích skupinách BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 a AZD1222/BNT162b2 a po prvej dávke v predchádzajúcej dávke infekčná/očkovacia skupina. Na rozdiel od titrov anti-S IgG a nAb bola frekvencia IFN-c plus buniek medzi CD4 plus T bunkami najvyššia v skupine očkovania BNT162b2/BNT162b2 (obr. 4A). Podiel silných respondentov bol tiež najvyšší v skupine očkovanej BNT162b2/BNT162b2, po ktorej nasledovala skupina s predchádzajúcou infekciou/očkovaním (obr. 4B). Tieto výsledky ukazujú, že imunizácia druhou homológnou posilňovacou dávkou BNT162b2 účinnejšie vyvoláva reakcie pamäťových T-buniek ako druhá heterológna posilňovacia vakcinácia alebo očkovanie prvou dávkou po prirodzenej infekcii SARS-CoV-2. Naopak, pri heterológnych režimoch prime-boost je pravdepodobnejšie, že sa vyvinú vyššie hladiny humorálnych imunitných reakcií. Analyzovali sme aj relatívnu frekvenciu polyfunkčných CD4 plus T buniek, ktoré súčasne produkujú viacero cytokínov (tj IFN-c, IL-2 a/alebo TNF). Vakcinačná skupina BNT162b2/BNT162b2 vykazovala významne vyššie frekvencie polyfunkčných buniek produkujúcich 2 cytokíny medzi S-špecifickými CD4 plus T bunkami ako vakcinačné skupiny AZD1222/AZD1222 alebo AZD1222/BNT162b2 (obr. 4C). Medzi skupinami očkovanými proti BNT162b2/BNT162b2 a predchádzajúcou infekciou/očkovaním nebol žiadny rozdiel vo frekvencii. Frekvencia polyfunkčných buniek bola signifikantne vyššia v skupine očkovania AZD1222/BNT162b2 ako v skupine očkovania AZD1222/AZD1222. Koláčové grafy predstavujúce jedno-, dvoj- a trojnásobne pozitívne CD4 plus T bunky, pokiaľ ide o produkciu cytokínov reagujúcich na S prekrývajúce sa peptidové pooly, tiež ukázali relatívne vysokú frekvenciu dvojito alebo trojnásobne pozitívnych buniek v očkovaní BNT162b2/BNT162b2 a pred skupiny infekcie/- vakcinácie (obr. 4D).
3.4. Imunitné reakcie proti variantu Delta medzi rôznymi režimami
Nakoniec sme analyzovali imunitné reakcie proti variantu Delta. Do tejto analýzy sme na porovnanie zahrnuli rekonvalescentných jedincov, ktorí sa zotavili z infekcie SARS-CoV-2 Delta. Titre nAb špecifické pre delta variant boli významne vyššie v skupine s predchádzajúcou infekciou/očkovaním ako v skupinách očkovaných BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 alebo AZD1222/BNT162b2 a boli dokonca vyššie ako u jedincov v rekonvalescencii Delta (obr. 5A) . Tiež sme skúmali reakcie CD4 plus T-buniek proti S proteínu variantu Delta. V tejto analýze sme vykonali ICS IFN-c po priamej ex vivo stimulácii s použitím dvoch rôznych súborov S peptidových poolov obsahujúcich nekonzervované oblasti S sekvencií medzi kmeňmi Wuhan a Delta a vypočítali sme pomer frekvencie Delta Sšpecifického IFN-c plus buniek na frekvenciu Wuhan S-špecifických IFN-c plus buniek. Ako sa očakávalo, pomer bol najvyšší u jedincov v rekonvalescencii Delta. Je zaujímavé, že pomer bol vyšší v skupine s predchádzajúcou infekciou/očkovaním ako v skupine očkovanej BNT162b2/BNT162b2 (obr. 5B), hoci Wuhan S-špecifické CD4 plus T-bunkové reakcie boli najvyššie v skupine očkovania BNT162b2/BNT162b2 (obr. 4A). Celkovo tieto výsledky naznačujú, že reakcie nAb a CD4 plus T-buniek, ktoré krížovo rozpoznávajú variant Delta, sú účinnejšie generované predchádzajúcou infekciou/očkovaním ako homológne alebo heterológne vakcinačné režimy.
Obr. 2. Protilátkové a T-bunkové reakcie vyvolané rôznymi režimami prime-boost. Pozdĺžne imunitné odpovede podľa schémy odberu vzoriek od pred vakcináciou do 14 týždňov po prvej vakcinácii. (A) SARS-CoV-2 špecifické väzbové protilátky sa merali v BNT162b2/BNT162b2 (n=22), AZD1222/AZD1222 (n=20), AZD1222/ BNT162b2 (n {{ 20}}) a skupiny predchádzajúcej infekcie/očkovania (n=6). (B) SARS-CoV-2 špecifické reakcie CD4 plus T-buniek boli merané v BNT162b2/BNT162b2 (n=19), AZD1222/AZD1222 (n=18), AZD1222/BNT162b2 (n=9) a skupiny predchádzajúcej infekcie/očkovania (n=7). Údaje sú prezentované ako geometrický priemer ± geometrická SD (A) alebo priemer ± SD (B). Štatistické analýzy medzi časovými bodmi v rámci každej skupiny sa uskutočňovali pomocou Wilcoxonovho testu so znamienkom. ns, nevýznamné; *P < 0.05, **P < 0,01, ***P < 0,001, ****P < 0,0001.
Obr. 3. Humorálne imunitné odpovede v časových bodoch vrcholu. (A) SARS-CoV-2 špecifické väzbové protilátky sa porovnávali medzi BNT162b2/BNT162b2 (n=22), AZD1222/AZD1222 (n=20), AZD1222/BNT162b2 (n {{ 15}}) a skupiny predchádzajúcej infekcie/očkovania (n=6) v časových špičkách. (B) Neutralizačné protilátky sa porovnávali medzi BNT162b2/BNT162b2 (n=22), AZD1222/AZD1222 (n=20), AZD1222/BNT162b2 (n=9) a predchádzajúcou infekciou/očkovaním ( n=11) skupín v časových špičkách. Vrcholové časové body boli vybrané nasledovne: po druhej dávke v očkovacích skupinách BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 a AZD1222/BNT162b2 a po prvej dávke v skupine s predchádzajúcou infekciou/očkovaním. Údaje sú prezentované ako geometrický priemer ± geometrická SD a analyzované na významnosť pomocou Mann-Whitneyho testu. (C a D) Percento účastníkov s rôznymi úrovňami humorálnych imunitných reakcií. Kvantifikácia typu respondenta (silný, stredný a žiadny/slabý) je vyjadrená ako zlomok počtu príjemcov vakcíny v každej skupine. Typy respondentov boli určené percentilovým skóre vypočítaným zo všetkých očkovaných účastníkov. ns, nevýznamné; *P < {{40}}.05, **P < 0,01, ***P < 0,001, ****P < 0,0001.
4. Diskusia
V súčasnosti povolené mRNA vakcíny a adenovírusové vektorové vakcíny preukázali pozoruhodnú účinnosť pri prevencii COVID-19. Zvažuje sa však, že heterológna prime-boost vakcinácia zlepšuje imunogenicitu a zmierňuje občasný nedostatok dodávok [13]. Okrem toho sa objavili problémy s bezpečnosťou vakcín proti adenovírusovým vektorom po rozpoznaní závažných nežiaducich účinkov, vrátane život ohrozujúcej venóznej trombózy spojenej s očkovaním AZD1222, najmä u mladších žien [14,15]. Tie viedli k heterológnej mRNA booster imunizácii u tých, ktorí už dostali prvú dávku AZD1222. Hoci neboli k dispozícii žiadne údaje o účinnosti, mnohé národné zdravotnícke úrady prijali heterológne režimy autorizovaných vakcín proti COVID-19. Porovnávacia štúdia humorálnych a bunkových imunitných odpovedí vyvolaných rôznymi očkovacími režimami prime-boost je teda informatívna a pomáha lepšie pochopiť výzvy v reálnom svete. V tejto štúdii sme demonštrovali rozdielnu indukciu humorálnej a bunkovej imunity heterológnymi primárnymi očkovaniami (doplnková tabuľka 4). V ostrom kontraste s hladinami špecifických väzbových Ab a neutralizačnými titrami, ktoré boli najvyššie v očkovacej skupine AZD1222/BNT162b2, boli S-špecifické CD4 plus T-bunkové reakcie najvyššie v očkovacej skupine BNT162b2/BNT162b2, nie v očkovanej skupine AZD1222/BNT162b2 skupina. Relatívne nízke úrovne S-špecifických CD4 plus T bunkových reakcií u účastníkov očkovaných AZD1222/BNT162b2- boli neočakávané a stále môžu týchto jedincov vystavovať riziku závažnej infekcie SARS-CoV-2. Naše zistenia sa líšia od zistení uvádzaných Schmidtom a kolegami, ktorí navrhli, že po heterológnom posilnení BNT162b2 sa titre nAb a odpovede T-buniek významne zvýšili u jedincov primovaných AZD1222- [7]. Avšak absolútna frekvencia CD69 plus IFN-c plus buniek medzi CD4 plus T bunkami bola zvýšená len okrajovo a táto štúdia vylúčila hĺbkové analýzy polyfunkčnosti S-špecifických T-bunkových reakcií. U jedincov, ktorí boli predtým infikovaní, môže prvá dávka vakcíny pôsobiť ako posilňovacia imunizácia a silne indukovať humorálne a bunkové odpovede [16,17]. Keďže sa predpokladá, že titer nAb je kľúčovým korelátom ochrany proti infekcii SARS-CoV-2 [18], naše výsledky dobre zodpovedajú nedávnemu zisteniu prospešného posilnenia imunity získanej infekciou s upravenou účinnosťou vakcíny. > 90 percent po prvej dávke u príjemcov vakcíny, ktorí mali predchádzajúcu infekciu SARS-CoV-2 [19]. Okrem toho, napriek značnému úniku odpovedí nAb proti variantu Delta medzi účastníkmi štúdie sme pozorovali najvyššie hladiny nAb krížovo rozpoznávajúcich variant Delta v skupine účastníkov s predchádzajúcou infekciou SARS-CoV-2 divokého typu a očkovanie. Avšak v súlade s heterológnou vakcinačnou skupinou AZD1222/BNT162b2 tí s predchádzajúcou infekciou, ktorí boli očkovaní, mali slabšiu S-špecifickú odpoveď CD4 plus T-buniek ako jedinci s homológnou vakcináciou BNT162b2/BNT162b2 bez predchádzajúcej infekcie. Naše výsledky ukazujú, že dve dávky BNT162b2 vedú k spoľahlivej a silnej indukcii S-špecifických reakcií CD4 plus T-buniek, ktoré sú výrazne vyššie ako iné očkovacie režimy prime-boost. Tieto zistenia sú v súlade s nedávnou správou o štyroch rôznych vakcínach proti COVID{74}} [20], zatiaľ čo naša analýza zahŕňala heterológne režimy prime-boost a hybridnú imunitu z predchádzajúcej infekcie a očkovania. V súlade s tým môžu byť platformy vakcín mRNA vybrané pre ich schopnosť indukovať silné pamäťové CD4 plus T bunkové reakcie. Keďže výskyt prelomovej infekcie po očkovaní celosvetovo narastá, rastie záujem o imunitu chrániacu pred závažným ochorením COVID-19. Keďže sa stále objavujú nové varianty SARS-CoV{80}} a vyhýbajú sa humorálnej imunitnej obrane, bunková imunita, ktorá sa zameriava na široké spektrum epitopov SARS-CoV-2 rozpoznávaných T bunkami, môže poskytnúť stabilnú ochrannú imunitu [21 ], hoci determinanty bunkových odpovedí pri ochrane sprostredkovanej vakcínou ešte nie sú presne definované. Či sa teda zvýšená humorálna imunogenicita heterológnej vakcinácie AZD1222/BNT162b2 konzistentne premieta do zlepšenej ochrany, zostáva nejasné, a to si vyžaduje ďalšiu štúdiu. Okrem toho je potrebné preskúmať, či ľudia, u ktorých sa po očkovaní vyvinuli slabé reakcie T-buniek, ako napríklad tí, ktorí boli primovaní AZD1222, môžu mať prospech z formulácií vakcíny proti T-buniek [22]. Imunita vyvolaná infekciou aj imunita vyvolaná vakcínou časom prirodzene ubúda; Zdá sa však, že väčšia ochrana sa poskytuje osobám, ktoré boli predtým infikované SARS-CoV-2 [23]. U očkovaných jedincov indukuje prelomová infekcia variantom Omicron menšie odpovede nAb ako infekcia variantom Delta [24] a relatívne málo je známe o potenciálnych dôsledkoch hybridnej imunity spôsobenej infekciou a očkovaním rôznymi kmeňmi. Prítomnosť polyfunkčných S-špecifických T buniek u predtým infikovaných a očkovaných účastníkov našej štúdie je však v súlade s pomalším poklesom ochrany proti závažnému COVID-19 v tejto populácii a môže prispieť k zmene závažnosti ochorenia po reinfekcii SARS -CoV{100} varianty [25,26]. Súčasná štúdia má niekoľko obmedzení. Po prvé, malé veľkosti vzoriek v kohorte robia robustnú štatistickú analýzu náročnou; preto bude potrebné naše zistenia ďalej overiť vo väčších kohortách. Po druhé, neboli sme schopní testovať vzorky v neskorších časových bodoch, aby sme určili trvanlivosť a slabnutie humorálnych a bunkových imunitných reakcií. Po tretie, naše výsledky môžu podceňovať vplyv subdominantných epitopov T-buniek mimo dominantných epitopov. Po štvrté, študovali sme iba cirkulujúce lymfocyty a budúce štúdie drenážnych lymfatických uzlín po očkovaní môžu byť potrebné na pochopenie mechanizmov, ktoré sú základom tu pozorovaných rozdielnych reakcií. Stručne povedané, súčasná štúdia s priamymi, vekovo zodpovedajúcimi porovnaniami vrhá svetlo na nezhodnú humorálnu a bunkovú imunogenicitu heterológnej primárnej aktivácie a boostingu v kontexte expozícií antigénu SARS-CoV{106}}. Naše zistenia zdôrazňujú, ako individuálna imunologická skúsenosť formuje následnú imunitnú odpoveď vyvolanú očkovaním proti COVID{107}}. Dodatočné údaje o účinnosti v reálnom svete a laboratórne výskumy budú ďalej informovať o najvhodnejšej očkovacej stratégii na ochranu pred vznikajúcimi variantmi SARS-CoV{110}} s dôsledkami pre vývoj platforiem vakcín novej generácie.
Obr. 4. Bunkové imunitné odpovede v časových bodoch vrcholu. (A) Frekvencie hrotovo špecifických IFN-c plus buniek medzi CD4 plus T bunkami sa porovnávali medzi BNT162b2/BNT162b2 (n=19), AZD1222/AZD1222 (n=18), AZD1222/BNT162b2 ( n=9) a skupiny predchádzajúcej infekcie/očkovania (n=7) v časových špičkách. Vrcholové časové body boli vybrané nasledovne: po druhej dávke v očkovacích skupinách BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 a AZD1222/BNT162b2 a po prvej dávke v skupine s predchádzajúcou infekciou/očkovaním. (B) Percento účastníkov s rôznymi úrovňami bunkových imunitných reakcií. Kvantifikácia typu respondenta (silný, stredný a žiadny/slabý) je vyjadrená ako zlomok počtu príjemcov vakcíny v každej skupine. Typy respondentov boli určené percentilovým skóre vypočítaným zo všetkých očkovaných účastníkov. (C) Frekvencie polyfunkčných hrotovo špecifických CD4 plus T buniek produkujúcich akúkoľvek kombináciu IFN-c, IL-2 alebo TNF v každej skupine očkovaných účastníkov. (D) Frakcia spikovo špecifických CD4 plus T buniek je pozitívna pre daný počet cytokínov. Údaje sú prezentované ako priemer ± SD. Významnosť sa analyzovala pomocou Mann-Whitneyho testu (A a C). ns, nevýznamné; *P < 0.05, **P < 0.01, ***P < 0,001, ****P < 0,0001.
Navyše zložka tradičnej čínskej medicínybylina cistanchemôže tiež zvýšiť imunitu, Mechanizmus Cistanche deserticola pri zvyšovaní imunity
Výhody doplnku cistanche-ako posilniť imunitný systém
Kliknite sem pre zobrazenie produktov Cistanche Enhance Immunity
【Požiadať o viac】 E-mail:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692
Cistanche tubulosapolysacharidy môžu podporovať proliferáciu T a B lymfocytov, ale proliferačný účinok B lymfocytov je výrazne silnejší ako T lymfocytov. Polysacharidy Cistanche deserticola podporujú uvoľňovanie cytokínu IL22 z lymfocytov, čo súvisí s podporou proliferácie lymfocytov v slezine. Cistanche deserticola dokáže aktivovať makrofágy a regulovať imunitný systém. Polysacharidy Cistanche deserticola, echinasid a pilozid majú významné účinky na tvorbu a aktivitu ľudských lymfocytov. Môže zvýšiť proliferačnú odpoveď lymfocytov, a tým posilniť imunitnú funkciu tela.
extrakt z cistanche
Funkčné komponenty zCistanche tubulosacelkové glykozidy majú významný vplyv na obnovu buniek po poškodení žiarením 60Coy a môžu tiež posilniť imunitnú funkciu proti poškodeniu žiarením.
Extrakt z Cistanche tubulosa dokáže nielen kompenzovať vrodenú imunitnú nedostatočnosť, ale aj posilniť získanú imunitu.
Obr. 5. Krížové varianty imunitnej odpovede proti Delta vyvolané rôznymi režimami prime-boost. (A) Vzorky plazmy sa analyzovali pomocou neutralizačných testov na redukciu plakov pre variant SARS-CoV-2 Delta v BNT162b2/BNT162b2 (n {{10}}), AZD1222/AZD1222 (n {{ 13}}), AZD1222/BNT162b2 (n=9), predchádzajúca infekcia/očkovanie (n=11) a delta-konvalescentné (n {{2{57}}}}) skupiny. Protilátky neutralizujúce delta sa porovnávali medzi skupinami v nasledujúcich časových bodoch: po druhej dávke v skupinách očkovania BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 a AZD1222/BNT162b2 a po prvej dávke v skupine s predchádzajúcou infekciou/očkovaním. (B) PBMC boli analyzované intracelulárnym farbením na IFN-c po priamej ex vivo stimulácii s použitím dvoch rôznych súborov S peptidových poolov obsahujúcich nekonzervované oblasti bodových sekvencií medzi kmeňmi Wuhan a Delta v BNT162b2/BNT162b2 (n {{37} }), AZD1222/AZD1222 (n {{40}}), AZD1222/BNT162b2 (n=9), predchádzajúca infekcia/očkovanie (n=7) a delta-konvalescent ( n=17) skupín. V každej skupine sa vypočítal pomer frekvencie CD4 plus T buniek produkujúcich IFN-c proti zvýšeniu Delta k frekvencii CD4 plus T buniek produkujúcich IFN-c proti zvýšeniu Wuhan. Údaje sú prezentované ako geometrický priemer ± geometrická SD (A) alebo priemer ± SD (B) a analyzované na významnosť pomocou Mann-Whitneyho testu. ns, nevýznamné; *P < 0,05, **P < 0,01, ***P < 0,001, ****P < 0,0001.
Referencie
[1] Bok K, Sitar S, Graham BS a kol. Zrýchlený vývoj vakcíny proti COVID{1}}: míľniky, lekcie a vyhliadky. Imunita 2021;54:1636–51. https://doi. org/10.1016/j.immuni.2021.07.017.
[2] Polack FP, Thomas SJ, Kitchin N, a kol. Bezpečnosť a účinnosť vakcíny BNT162b2 mRNA Covid{3}}. N Engl J Med 2020;383:2603–15. https://doi.org/ 10.1056/NEJMoa2034577.
[3] Falsey AR, Sobieszczyk ME, Hirsch I, et al. Fáza 3 Bezpečnosť a účinnosť vakcíny AZD1222 (ChAdOx1 nCoV-19) Covid-19. N Engl J Med 2021;385:2348–60. https://doi.org/10.1056/NEJMoa2105290.
[4] Borobia AM, Carcas AJ, Pérez-Olmeda M, et al. Imunogenicita a reaktogenita posilňovacej dávky BNT162b2 u účastníkov s primárnou aktiváciou ChAdOx1-S (CombiVacS): multicentrická, otvorená, randomizovaná, kontrolovaná štúdia fázy 2. Lancet 2021;398:121–30. https://doi.org/10.1016/S0140-6736(21) 01420-3.
[5] Barros-Martins J, Hammerschmidt SI, Cossmann A, a kol. Imunitné odpovede proti variantom SARS-CoV-2 po heterológnej a homológnej vakcinácii ChAdOx1 nCoV-19/BNT162b2. Nat Med 2021;27:1525–9. https://doi.org/ 10.1038/s41591-021-01449-9.
[6] Hillus D, Schwarz T, Tober-Lau P, a kol. Bezpečnosť, reaktogenita a imunogenicita homológnej a heterológnej primárnej imunizácie s ChAdOx1 nCoV-19 a BNT162b2: prospektívna kohortová štúdia. The Lancet Respir Med 2021;9:1255–65. https://doi.org/10.1016/S2213-2600(21)00357- X.
[7] Schmidt T, Klemis V, Schub D a kol. Imunogenicita a reaktogenita heterológnej vakcinácie ChAdOx1 nCoV-19/mRNA. Nat Med 2021;27:1530–5. https://doi.org/10.1038/s41591-021-01464-w.
[8] Liu X, Shaw RH, Stuart ASV a kol. Bezpečnosť a imunogenicita heterológnych verzus homológnych schém prime-boost s adenovírusovým vektorom a mRNA COVID-19 vakcínou (Com-COV): jednoducho zaslepená, randomizovaná, non-inferiorita štúdia. Lancet 2021;398:856–69. https://doi.org/10.1016/S0140- 6736(21)01694-9.
[9] Krammer F, Srivastava K, Alshammary H, et al. Protilátkové reakcie u séropozitívnych osôb po jednorazovej dávke mRNA vakcíny SARS-CoV-2. N Engl J Med 2021;384:1372–4. https://doi.org/10.1056/NEJMc2101667.
[10] Bradley T, Grundberg E, Selvarangan R, a kol. Protilátkové reakcie po jednorazovej dávke mRNA vakcíny SARS-CoV-2. N Engl J Med 2021;384:1959–61. https://doi.org/10.1056/NEJMc2102051.
[11] Saadat S, Rikhtegaran Tehrani Z, Logue J a kol. Titre väzbových a neutralizačných protilátok po jednorazovej dávke vakcíny u zdravotníckych pracovníkov, ktorí boli predtým infikovaní SARS-CoV-2. JAMA 2021;325:1467–9. https://doi.org/ 10.1001/jama.2021.3341.
[12] Reynolds CJ, Pade C, Gibbons JM a kol. Predchádzajúca infekcia SARS-CoV-2 zachraňuje reakcie B a T buniek na varianty po prvej dávke vakcíny. Science 2021;372:1418–23. https://doi.org/10.1126/science.abh1282.
[13] Ledford H. Mohlo by miešanie vakcín proti COVID posilniť imunitnú odpoveď? Príroda 2021;590:375–6. https://doi.org/10.1038/d41586-021-00315-5.
[14] Schultz NH, Sorvoll IH, Michelsen AE, a kol. Trombóza a trombocytopénia po očkovaní ChAdOx1 nCoV-19. N Engl J Med 2021;384:2124–30. https://doi.org/10.1056/NEJMoa2104882.
[15] Greinacher A, Thiele T, Warkentin TE a kol. Trombotická trombocytopénia po očkovaní ChAdOx1 nCov-19. N Engl J Med 2021;384:2092–101. https://doi.org/10.1056/NEJMoa2104840.
[16] Mazzoni A, Di Lauria N, Maggi L, a kol. Očkovanie prvou dávkou mRNA je dostatočné na reaktiváciu imunologickej pamäte na SARS-CoV-2 u jedincov, ktorí sa vyliečili z COVID-19. J Clin Invest 2021;131:e149150.
[17] Samanovic MI, Cornelius AR, Gray-Gaillard SL, et al. Silné imunitné reakcie sa pozorujú po jednej dávke dávky vakcíny BNT162b2 mRNA u jedincov, ktorí už dostali SARS-CoV-2-. Sci Transl Med 2022;14:eabi8961.. https://doi.org/ 10.1126/scitranslmed.abi8961.
[18] Khoury DS, Cromer D, Reynaldi A, a kol. Hladiny neutralizačných protilátok vysoko predpovedajú imunitnú ochranu pred symptomatickou infekciou SARS-CoV-2. Nat Med 2021;27:1205–11. https://doi.org/10.1038/s41591-021-01377-8.
[19] Hala V, Foulkes S, Insalata F, et al. Ochrana proti SARS-CoV-2 po očkovaní proti Covid- 19 a predchádzajúcej infekcii. N Engl J Med 2022;386:1207–20. https://doi.org/10.1056/NEJMoa2118691.
[20] Zhang Z, Mateus J, Coelho CH, a kol. Humorálna a bunková imunitná pamäť na štyri vakcíny proti COVID-19. Cell 2022;185:2434–51. https://doi.org/10.1016/ j.cell.2022.05.022.
[21] Vardhana S., Baldo L., Morice WG a kol. Pochopenie reakcií T-buniek na COVID-19 je nevyhnutné pre informovanie o stratégiách verejného zdravia. Sci Immunol 2022;7:eabo1303.. https://doi.org/10.1126/sciimmunol.abo1303.
[22] Moss P. Imunitná odpoveď T buniek proti SARS-CoV-2. Nat Immunol 2022;23:186–93. https://doi.org/10.1038/s41590-021-01122-w.
[23] Goldberg Y, Mandel M, Bar-On YM a kol. Ochrana a oslabenie prirodzenej a hybridnej imunity voči SARS-CoV-2.N Engl. J Med 2022;386:2201–12. https://doi. org/10.1056/NEJMoa2118946.
[24] Rossler A, Knabl L, von Laer D, a kol. Neutralizačný profil po zotavení z omikrónovej infekcie SARS-CoV-2. N Engl J Med 2022;386:1764–6. https://doi. org/10.1056/NEJMc2201607.
[25] Guerrera G, Picozza M, D'Orso S, a kol. Očkovanie BNT162b2 indukuje trvalé SARS-CoV-2-špecifické T bunky s fenotypom s pamäťou kmeňových buniek. Sci Immunol 2021;6(eabl5344). https://doi.org/10.1126/sciimmunol.abl5344.
[26] Goldblatt D. SARS-CoV-2: od stádovej imunity k hybridnej imunite. Nat Rev Immunol 2022;22:333–4. https://doi.org/10.1038/s41577-022-00725-0.
