Spôsob výroby divičiny biokatalytickou transformáciou čerstvého cistanche

Abstraktné

Predložený vynález navrhuje spôsob výroby divičiny pomocoubiokatalytická transformáciazčerstvé Cistanche. Spôsob podľa tohto vynálezu využíva čerstvé cistanches ako surovinu, prostredníctvom systémového procesu drvenia buniek, extrakcie suspenzie a procesu vysokoteplotnej inaktivácie enzýmov, inaktivovaná bunková suspenzia cistanches sa používa ako substrát katalytickej reakcie a priemyselný enzým -glukozidáza imobilizovaný enzým sa používa ako biokatalyzátor na vykonávanie prerušovanej alebo kontinuálnej katalytickej reakcie na katalýzu hydrolýzy epifýzového glukozidu v substráte na jeho výrobu. úpravou podmienok separačného a purifikačného procesu môže percento čistoty zozbieranej mulleínovej monomérnej zlúčeniny dosiahnuť 50 percent -90 percent. Monomérna zlúčenina diveínu má vlastnosti malej molekuly a nízkej polarity, ktorá vykazuje dobrú rýchlosť absorpcie a špeciálnu farmakologickú aktivitu pri absorpcii liečiva.

Kliknutím sem získate extrakt 8-16 percent Acteoside Cistanche

Popis

Spôsob výroby mulleínu biokatalytickou transformáciou čerstvých cistanches

Technická oblasť

Predložený vynález sa týka spôsobu výroby mulleínových monomérnych zlúčenín biokatalytickou transformáciou čerstvých cistanches.

Technológia pozadia

Herba Cistanches, trváca parazitická bylina, je známa tonizujúca čínska medicína s účinkami blahodarnej esencie, tonizácie obličiek a oddialením starnutia. Moderná analýza ukazuje, že hlavnými účinnými zložkami Herba Cistanches sú fenyletanolové glykozidy, benzylalkoholové glykozidy, cyklické enoléterterpénové glykozidy, lignanové glykozidy, deriváty oligosacharidov, D-manitol a betaín. Medzi fenyletanoidné glykozidy (Ph Gs) patria účinné látky ako naprEchinakozidaakteozida prostredníctvom metabolizmu črevných baktérií sa zistilo, že proces pohybu fenyletanoidových glykozidov v gastrointestinálnom trakte musí byť katalyzovaný mikrobiálnymi enzýmami v hrubom čreve, aby sa premenili naakteozid. Metabolický kanál pineálneho glykozidu v gastrointestinálnom trakte je hlavným faktorom vedúcim k významnému rozdielu v biologickej dostupnosti a účinnosti po perorálnom podaní. Monomérna zlúčenina diveínu má vlastnosti malej molekuly a nízkej polarity, čo preukazuje dobrú rýchlosť absorpcie a výnimočnú farmakologickú aktivitu pri absorpcii liečiva.

Obsah vynálezu

Účelom tohto vynálezu je poskytnúť spôsob výroby monomérnych zlúčenín mulleínových glykozidov z čerstvých cistanches ako suroviny systematickým procesným spracovaním a katalytickou konverziou v priemyselnom imobilizovanom enzýmovom reaktore.

Spôsob podľa tohto vynálezu je použiť čerstvú Cistanche ako surovinu, upraviť ju drvením buniek, procesom extrakcie kalu a vysokoteplotným procesom inaktivácie enzýmu, použiť suspenziu inaktivovaných Cistanche buniek ako substrát katalytickej reakcie, imobilizovať enzým pomocou -glukozidázy priemyselný enzýmový prípravok ako biokatalyzátor, katalyzuje hydrolýzu pineálneho glukozidu v substráte, aby prerušil koniec glukozylového ligandu a premenil ho na vysoko aktívny marokaínový monomér. zlúčenina sa zozbierala; teplota procesu katalytickej reakcie bola 38 stupňov -60 stupňa, pH bolo 4.0-5,8, čas bol 4 h-8 h a aktivita -glukozidázy v reakčnom produkte bola 2 U/g -1000U/g; úpravou podmienok separačného a purifikačného procesu mohla získaná mulleínová monomérna zlúčenina Percentuálna čistota zozbieraných divizových monomérov dosiahnuť 50 percent -90 percent.

Špecifické kroky spôsobu podľa tohto vynálezu zahŕňajú:

1. výber čerstvých dužinatých stoniek cistanche tubulosa, ich umiestnenie do umývacej nádrže a ich opláchnutie studenou vodou alebo čistou priemyselnou vodou; ich zbieranie, ich umiestnenie do bežného priemyselného drviaceho a mlecieho zariadenia na drvenie a mletie mäsitých stoniek cistanche tubulosa, pridávanie priemyselnej čistej vody alebo predchladenej priemyselnej čistej vody na umytie rozbitých buniek, aby sa z nich stala drvená bunková buničina cistanche tubulosa; potom použitím bežného priemyselného kalolisu na lisovanie a filtráciu alebo priemyselnej odstredivky na ich oddelenie a získanie bunkovej buničiny cistanche tubulosa; Potom sa zvyšok filtra môže pridať do priemyselnej čistej vody alebo predchladenej priemyselnej čistej vody raz alebo niekoľkokrát (zvyčajne 1 až 3-krát) a ďalej rozdrviť na kašu pomocou obvyklého priemyselného drviaceho a mlecieho stroja a rozdrvené bunky môžu byť extrahované bežným priemyselným ultrazvukovým extrakčným zariadením v rovnakom čase a potom oddelené priemyselným kalolisom alebo priemyselnou odstredivkou, aby sa získala bunková buničina cistanche tubulosa. proces cistanche tubulosa drvená bunková drvina a bunková drť sa regulujú pri nízkej teplote pod 20 stupňov (zvyčajne 4-20 stupňov);

2, buničina cistanche získaná v kroku 1 sa inaktivuje pri vysokej teplote obvyklým priemyselným vykurovacím zariadením alebo sa uskutoční priemyselná okamžitá inaktivácia pri ultravysokej teplote; inaktivovaná bunková buničina cistanche sa používa ako substrát pre katalytickú reakciu a ako biokatalyzátor sa používa imobilizovaný enzýmový prípravok -glukozidázový priemyselný enzýmový prípravok získaný zvyčajným imobilizovaným enzýmom priemyselnej výroby adsorpčnej metódy a reakcia sa uskutočňuje bežným priemyselným imobilizovaným enzýmom. enzymatický reaktor Prerušovaná alebo kontinuálna katalytická reakcia, katalytická hydrolýza na odstránenie glukózovej skupiny na konci glukozylového ligandu substrátu pineálneho glukozidu, smerová konverzia na mulleínovú monomérnu zlúčeninu; teplota procesu katalytickej reakcie je 38 stupňov ~ 6 0 stupňov, najlepšia teplota je 42 stupňov ~ 48 stupňov; pH je 4,0 ~ 5,8, najlepšie pH je 4,5 ~ 5,3; čas je 4h ~ 8h, najlepší čas je 5h ~ 6h. -glukozidázová aktivita reakčného produktu v procese katalytickej reakcie bola 2U/g-1000U/g a najlepšia enzýmová aktivita bola 25U/g-150U/g; miera konverzie pineálneho glukozidu na monomérnu zlúčeninu myricetínu v reakčnom produkte v procese katalytickej reakcie bola nameraná ako 78 percent -95 percent

3, reakčný roztok po reakcii z kroku 2, s použitím bežnej priemyselnej ultrafiltračnej membránovej separácie, selektívneho preosievania a zadržania polysacharidov, proteínov a iných veľkých molekúl nečistôt, ako aj častíc a čiastočiek nečistôt; a potom použitím bežnej priemyselnej nanofiltračnej membránovej separácie, selektívneho preosievania a retencie aminokyselín, D-manitolu, betaínu a iných nečistôt s malými molekulami; môže byť tiež opäť použitý s použitím bežného priemyselného separačného procesu adsorpcie na makroporéznej živici alebo/a použitím bežného procesu separácie a čistenia v priemyselnej chromatografickej kolóne alebo/a bežného analógového separačného systému chromatografie s pohyblivým lôžkom alebo bežného multifunkčného chromatografického separačného procesu pre ďalšie separácia a čistenie; úpravou vyššie uvedených podmienok separačného a purifikačného procesu možno získať extrakty mulleínových monomérnych zlúčenín rôznej čistoty; a

4, extrakt mulleínovej monomérnej zlúčeniny získanej v kroku 3, prostredníctvom bežného priemyselného procesu vákuovej koncentrácie alebo priemyselného procesu odparovania na tenkej vrstve, aby sa získal obsah pevných látok 30 percent až 50 percent koncentrátu; a potom prostredníctvom priemyselného procesu sušenia rozprašovaním alebo obvyklých iných priemyselných spôsobov sušenia, čím sa získa prášok alebo sušina monomérnej zlúčeniny diviny. Percentuálny obsah čistoty zozbieraných mulleínových monomérnych zlúčenín môže dosiahnuť 50 až 90 percent.

ČerstvéCistanche surovinazapojené do spôsobu podľa tohto vynálezu môžu byť čerstvo zozbierané (nechladené, mrazené a konzervované) dužinaté stonky Cistanche alebo čerstvé mäsité stonky Cistanche konzervované v priemyselných mrazničkách alebo čerstvé mäsité stonky Cistanche zmrazené v priemyselných mrazničkách; alebo nakrájané alebo nastrúhané mäsité stonky čerstvého Cistanche, ako je uvedené vyššie.

Cistanche opísaný v tomto vynáleze is cistanche tubulosa YC MaaleboCistanche tubulosa (Schrenk)Wight z čeľade Lietangidae, ktorý je zahrnutý vo vydaní liekopisu Čínskej ľudovej republiky z roku 2005.

Spôsob podľa vynálezu zahŕňa použitie priemyselného uchovávania v chladiarenskom sklade, pričom teplota zásobníka je vo všeobecnosti 1 stupeň ~ 13 stupňov, najlepšie uchovávanie teploty zásobníka v chladiarenskom sklade je 4 stupne ~ 10 stupňov; použitie priemyselného mraziaceho chladenia na teplotu zásobníka je vo všeobecnosti -52 stupňov ~ -10 stupňov, najlepšie chladenie v mrazničke na teplotu zásobníka je -36 stupeň ~ -18 stupeň; použitie studenej vody umiestnenej v nádrži na vodu Teplota vody je 1 stupeň ~ 20 stupňov, najlepšia teplota studenej vody je 4 stupne ~ 10 stupňov Množstvo priemyselnej čistej vody alebo priemyselnej čistej vody pridanej predchladením zakaždým je 100 percent do 400 percent (hmotnostný pomer) rozdrvených buniek alebo filtračného zvyšku cistanche tubulosa a najlepší prídavok je 200 percent až 300 percent (hmotnostný pomer); teplota vody priemyselnej čistej vody predchladením je 1 stupeň až 20 stupňov a najlepšia teplota vody je 4 stupne až 10 stupňov.

Spôsob podľa vynálezu zahŕňa priemyselnú výrobu adsorpčnej metódy na získanie imobilizovaného enzýmu, zvyčajne -glukozidázový priemyselný enzýmový prípravok na prípravu enzýmového roztoku a kontakt s adsorbentom, a potom premytím na odstránenie neadsorbovaného enzýmového roztoku môže byť imobilizovaný enzým; vrátane metódy fyzikálnej adsorpcie, metódy adsorpcie iónov; adsorbent vrátane mikroporézneho skla, hydroxyapatit, celofán, makroporézna syntetická živica, špeciálna keramika, DEAE - celulóza, DEAE-dextránový gél, Amberlite IRA-93, IRA-410, IRA-900, Dowex{{ 7}}, Amberlite CG-50, IRC-50, IR-120, ktoré je možné vybrať z bežných zahraničných a domácich komodít.

Spôsob podľa predloženého vynálezu zahŕňa prípravu -glukozidázového priemyselného enzýmu, vrátane -glukozidázy a celulázy obohatenej o -glukozidázu, rastlinný extrakt zložený z enzýmu, rastlinný hydrolytický enzým.

Spôsob podľa predloženého vynálezu zahŕňa vysokoteplotnú inaktiváciu enzýmu vo všeobecnosti od 75 stupňov do 100 stupňov a čas je všeobecne od 3 minút do 10 minút; teplota okamžitej inaktivácie enzýmu pri ultravysokej teplote je všeobecne od 135 stupňov do 141 stupňov.

Priemyselný reaktor s imobilizovaným enzýmom zahrnutý v spôsobe podľa tohto vynálezu môže byť bežný priemyselný miešaný tankový reaktor, reaktor s imobilizovaným lôžkom alebo reaktor s fluidným lôžkom.

Relatívna molekulová hmotnosť ultrafiltračnej membrány použitej v spôsobe podľa vynálezu je 1000 až 4500 a najlepšia relatívna molekulová hmotnosť je 1500 až 3500; relatívna molekulová hmotnosť nanofiltračnej membrány je 200 až 300 a najlepšia relatívna molekulová hmotnosť je 250 až 280; ultrafiltračná membrána je vybraná zo série membránových modelov CA alebo CTA, PAN, PS, PSA, PES, PVDF, PEK, SPS Pre nanofiltračné membrány 4040-UHT-ESNA alebo 8540-UHY-ESNA , ESNA-FREE650, ESNA-FREE1700, NTR7450HG, NTR729HG, sú použité membrány NF-CA, valcované prvky NF-CA a diely z dutých vlákien; pre makroporézne adsorpčné živice, XAD, Diaion, SP HPD500, HPD600, HPD8, H107, JD-KW, LD601, LD605, ME-1, ME-2, ME-3, NKA{{ modely radu 30}}, NKA-9, RA, S8, SIP, WLD a X{34}}; separačný systém chromatografie so simulovaným pohyblivým lôžkom a multifunkčný chromatografický separačný systém, môžete si vybrať preparačný chromatografický separačný chromatograf MB, MD, ME, MF, experimentálny typ SMBC, pilotný typ SMBC, typ XZ12E-4L, XZ20Z-2 Typ L a SMBC priemyselná kontinuálna príprava chromatografický typ chromatografického separačného systému. Ultrafiltračná membrána, nanofiltračná membrána, makroporézna adsorpčná živica, neiónový polymérny adsorbent, priemyselná chromatografická kolóna, chromatografický separačný systém s pohyblivým lôžkom a multifunkčný chromatografický separačný systém zahrnuté v spôsobe podľa tohto vynálezu môžu byť vybrané z bežných zahraničných a domácich komodít.

Spôsob podľa vynálezu zahŕňa proces priemyselnej vákuovej koncentrácie alebo proces koncentrácie odparovania priemyselného filmu, teplota je všeobecne 42 stupňov ~ 80 stupňov, najlepšia teplota je 45 stupňov ~ 65 stupňov; priemyselný proces sušenia rozprašovaním používaný v sušiacej veži vstupná teplota vzduchu je vo všeobecnosti 125 stupňov ~ 285 stupňov, najlepšia teplota vstupného vzduchu je 135 stupňov ~ 185 stupňov.

Iné spôsoby priemyselného sušenia zahrnuté v spôsobe podľa tohto vynálezu zahŕňajú bežné priemyselné sušenie v bubne alebo sušenie prúdením vzduchu, sušenie vo fluidnom lôžku, mikrovlnné vákuové sušenie, mikrovlnné sušenie, vákuové sušenie alebo cirkulačné sušenie horúceho vzduchu, teplota sušenia je všeobecne 50 až 50 °C. 100 stupňov, najlepšie je 58 až 80 stupňov.

Prášková alebo sušená mulleinová monomérna zlúčenina vyrobená spôsobom podľa tohto vynálezu sa môže použiť priamo ako farmaceutické suroviny alebo ako kozmetické suroviny, alebo ako suroviny alebo zložené suroviny na výrobu funkčnej zdravej výživy, ako je perorálna tekutina, kapsula, tableta, granula, punč, pilulka alebo sáčkový čaj. Propagácia a implementácia spôsobu podľa tohto vynálezu spôsobí, že cistanche tubulosa, cenná čínska medicína, bude lepšie prospievať ľudskému zdraviu.

Percentá (percentá) rôznych množstiev zahrnutých v spôsobe podľa tohto vynálezu sú hmotnostné percentá, pokiaľ nie je uvedené inak.

Špecifické uskutočnenia

Predložený vynález je podrobnejšie opísaný nižšie v spojení s uskutočneniami.

Príklad 1:

1, vyberte čerstvé mäsité stonkycistanche tubulosaumiestnené v priemyselnom chladiarenskom sklade pri teplote 4 stupne, prepláchnite ich vo vodnej umývacej nádrži studenou vodou s teplotou 18 stupňov, vyberte ich, umiestnite do priemyselného drviaceho a mlecieho zariadenia na drvenie a mletie mäsitých stoniek cistanche tubulosa, pridajte priemyselnú čistú vodu na umývanie rozdrvených buniek, aby sa stalicistanche tubulosadrvená buničina, množstvo pridanej vody je 300 percent hmotnosti rozdrvených buniek; potom použite priemyselný kalolis Teplota drvenej bunkovej buničiny cistanche tubulosa a bunkovej buničiny počas procesu drvenia a mletia a separácie bola testovaná na 20 stupňov;

2, vysoká teplota inaktiváciecistanche tubulosabunková suspenzia priemyselným mikrovlnným vykurovacím zariadením, teplota je 100 stupňov, čas je 3 minúty; suspenzia inaktivovaných buniek cistanche tubulosa sa používa ako substrát pre katalytickú reakciu, zvyčajná priemyselná výroba metódy fyzikálnej adsorpcie hydroxyapatit ako metóda fixácie adsorbenta na získanie enzýmu imobilizovaného glukozidázou ako biokatalyzátora, cez zvyčajný reaktor s imobilizovaným lôžkom pre Katalytická reakcia sa uskutočnila kontinuálne v reaktore s imobilizovaným lôžkom, aby sa katalyzovalo odstránenie glukózovej skupiny na konci glukozylového ligandu substrátu pinealozidu a cielená konverzia na monomérnu zlúčeninu mulleínu; proces katalytickej reakcie sa uskutočňoval pri teplote 46 stupňov, pH 4,9 a doba katalytickej reakcie bola 5,5 hodiny na dávku a kontinuálne sa uskutočnilo 10 dávok katalytickej reakcie; aktivita -glukozidázy v reaktantoch počas procesu katalytickej reakcie bola 10 U/g; testovaním, že konverzia pineálneho glukozidu na myricetínovú monomérnu zlúčeninu v substráte dosiahla 94 percent;

3. Reakčný roztok po vyššie uvedenej katalytickej reakcii bol oddelený ultrafiltračnou membránou s relatívnou molekulovou hmotnosťou 4000 a potom nanofiltráciou pomocou nanofiltračnej membrány s relatívnou molekulovou hmotnosťou 250, po ktorej nasledovala adsorpčná separácia priemyselnou makroporéznou adsorpčnou živicou typu AB{ {3}} a separácia a čistenie pomocou priemyselnej chromatografickej kolónovej separácie a procesu čistenia a potom ďalšia separácia a čistenie pomocou XZ12E-4L multifunkčného chromatografického separačného systému na získanie extraktu s vyššou čistotou mulleínovej monomérnej zlúčeniny;

4, vyššie uvedený extrakt sa zahustil procesom priemyselnej vákuovej koncentrácie pri teplote 60 stupňov, čím sa získal koncentrát so 42 percentami pevných látok; ďalej sušený procesom priemyselného vákuového sušenia pri teplote 58 stupňov, čím sa získa vysušená mulleinová monomérna zlúčenina; percentuálny obsah čistoty mulleínovej monomérnej zlúčeniny v zozbieranom sušenom materiáli (v sušine) bol 87,5 percent, ako bolo stanovené analýzou.

Príklad 2:

1. vyberte čerstvé dužinaté stonky cistanche tubulosa umiestnené v priemyselnom chladiarenskom sklade pri skladovacej teplote 10 stupňov, opláchnite ich vo vodnej umývacej nádrži studenou vodou s teplotou 4 stupňov, vyberte ich, vložte do priemyselného drvenia a mlecie zariadenie na drvenie a mletie mäsitých stoniek cistanche tubulosa, pridajte priemyselnú čistú vodu predchladenú na teplotu vody 4 stupne, aby sa rozdrvené bunky umyli, aby sa z nich stala kaša rozdrvených buniek cistanche tubulosa, pričom množstvo pridanej vody je 200 percent hmotnosť rozdrvených buniek Suspenzia sa potom oddelila pomocou priemyselnej odstredivky, čím sa získala suspenzia buniek cistanche tubulosa; a zvyšok filtra sa pridal do priemyselnej čistej vody, pričom množstvo pridanej vody bolo 200 percent hmotnosti zvyšku filtra, a ďalej sa rozdrvil na kašu pomocou obvyklého priemyselného drviaceho a mlecieho stroja a rozdrvené bunky sa extrahovali ultrazvukové extrakčné zariadenie a potom oddelené priemyselnou odstredivkou na ďalšie získanie suspenzie buniek cistanche tubulosa; po testovaní bol proces drvenia a mletia a separácie Teplota drvenej bunkovej buničiny a bunkovej buničiny cistanche tubulosa bola 18 stupňov;

2, vysokoteplotná inaktivácia bunkovej suspenzie cistanche tubulosa priemyselným vykurovacím zariadením, teplota je 100 stupňov, čas je 5 minút; suspenzia inaktivovaných buniek cistanche tubulosa sa používa ako substrát pre katalytickú reakciu, zvyčajná priemyselná výroba fyzikálnej adsorpčnej metódy celofán ako metóda fixácie adsorbentu, na získanie enzýmu imobilizovaného glukozidázou ako biokatalyzátora prostredníctvom bežného priemyselného imobilizačného reaktora pre kontinuálny typ Katalyzátor reakcia sa uskutočňovala pri 45 stupňoch, pH 4,5 a doba katalytickej reakcie bola 6,0 h na dávku a kontinuálne sa uskutočňovalo 12 dávok katalytickej reakcie. Konverzia pineálneho glukozidu na monomérnu zlúčeninu myricetínu v substráte bola zistená ako 95 percent;

3, reakčným roztokom po vyššie uvedenej katalytickej reakcii bola nanofiltrácia s použitím nanofiltračnej membrány s relatívnou molekulovou hmotnosťou 300 a potom oddelená adsorpciou s použitím priemyselnej makroporéznej adsorpčnej živice typu XAD a čistená procesom separácie a čistenia v priemyselnej chromatografickej kolóne. a potom sa ďalej separuje a čistí použitím multifunkčného chromatografického separačného systému typu XZ20Z-ZL, aby sa získal extrakt s vyššou čistotou mulleínovej monomérnej zlúčeniny;

4, vyššie uvedený extrakt prešiel procesom koncentrácie priemyselným filmovým odparovaním pri 55 stupňoch, aby sa získal koncentrát s obsahom pevných látok 45 percent; ďalej prejsť procesom priemyselného bubnového sušenia pri 55 stupňoch, aby sa získala vysušená monomérna zlúčenina Myristica fragrans; po analýze a stanovení bola percentuálna čistota monomérnej zlúčeniny Myristica fragrans v zozbieranom sušenom materiáli (v sušine) 89,9 percent.

Požiadajte o ďalšie podrobnosti:

E-mail:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel: plus 86 15292862950