Protinádorové a protizápalové účinky oligosacharidov z extraktu Cistanche Deserticola pri poranení miechy

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

Hong Zhang a kol

Abstraktné

V tejto štúdii boli farmakologické účinky oligosacharidov zCistanchedeserticolaextraktnazápalskúmal sa oxidačný stres a apoptóza u samcov albínov potkanov s poranením miechy. Peroxidácia lipidov, GSH, kataláza, superoxiddismutáza, acetylcholínesteráza, GPx, ROS a kyselina dusičná boli významne zmenené u potkanov s poranením miechy. Hladiny expresie mRNA IL-6, TNF-, cyklooxygenázy-2, iNOS,p53, kaspázy-3, Bax a pro-NGF sa po doplnení extraktu znížili o 20 percent. Hladiny proteínovej expresie kaspázy-3 a pro-NGF boli tiež znížené o N20 percent. Počet buniek pozitívnych na p53 bol 1, 79, 54, 33 a 19 v skupinách GI–GV, v uvedenom poradí, a zodpovedajúci počet buniek pozitívnych na kaspázu-3 bol 2, 87, 51, 23 a 14. Na základe súčasných výsledkov je použitie oligosacharidov zCistanchedeserticolaextrakt bol účinný protizápaloxidačný stres a apoptóza u samcov potkaních albínov s poranením miechy.

Kľúčové slová:Cistanche deserticola, zápaly, oxidačný stres, apoptóza, potkany

1. Úvod

Poškodenie miechy zahŕňa poškodenie miechy, ktoré vedie k funkčnej zmene so stratou citlivosti, svalov a autonómnych funkcií [1]. Okrem toho môže byť v oligodendrocytoch a neurónoch indukovaná apoptóza, čo vedie k dysfunkcii miechy v dôsledku demyelinizácie a axonálnej degenerácie [2,3]. Poranenie miechy vyvoláva značný oxidačný stres azápalpo nástupe apoptózy v oligodendrocytoch a neurónoch [2,4]. Reaktívne formy kyslíka (ROS) a prozápalové cytokíny sa uvoľňujú počas neurodegenerácie a mikroglie sú životne dôležité počas neurodegeneratívnych a zápalových procesov [5–7]. Interleukíny (IL) sú dôležité cytokíny zapojené do rôznych imunologických procesov [8]. Yune et al., [9] uviedli, že pro nervový rastový faktor (pro-NGF) uvoľnený z mikroglií vedie k apoptotickej bunkovej smrti. Preto nové a silné terapeutické činidlá proti oxidačnému stresu azápalsú potrebné.

RastlinaCistanchedeserticolaje bežne známy ako metla púštna a je holoparazitickým členom čeľade Orobanchaceae [10].Cistanche deserticolachýba mu chlorofyl a vodu a živiny získava parazitickým spôsobom zo saxaula bieleho (Haloxylon persicum) a saxaula čierneho (Haloxylon ammodendron). TheCistanchedeserticolatrváca rastlina, známa ako Rou Cong Rong, môže dorásť do veľkosti 160 cm a má žlté kvety. Je veľmi hojný v Číne a Mongolsku [11] a v tradičnej čínskej medicíne je vynikajúcim zdrojom na liečbu niekoľkých chorôb. Slúži tiež ako primárna bylinná liečba na povzbudenie Yang a tonizáciu obličiek [11]. Koo a spol. [12] uviedli, že glykozidy zCistanchedeserticolapôsobia ako účinné látky v centrálnom nervovom systéme (CNS). Niekoľko výskumníkov uviedlo jeho antiapoptotické, protizápalové a antioxidačné vlastnostiCistanchedeserticola[13,14]. Antioxidanty a protizápalové molekuly získané z potravy môžu slúžiť ako chemopreventívne látky proti chronickým ochoreniam [15]. Vzhľadom na vyššie uvedené terapeutické výhody, terapeutická účinnosť oligosacharidov zCistanchedeserticolaextrakt protizápal, oxidačný stres a apoptóza sa skúmali v tejto štúdii s použitím modelu potkanieho samca albína s poranením miechy.

2. Materiály a metódy

2.1. Materiály

Primery tumor necrosis factor-alpha (TNF- ), IL-6, cyklooxygenáza, indukovateľná syntáza oxidu dusnatého (iNOS), p53, Bax, kaspáza-3, BCL-2,pro-NGF a glyceraldehyd 3-fosfátdehydrogenáza (GAPDH) boli zakúpené od Thermo Fisher Scientific (Peking, Čína). Primárne protilátky pre kaspázu-3 (AV00021), p53 (P5813-100UL), monoklonálnu anti-kozí/ovčí IgG-peroxidázu (A9452) a anti-myší IgG fluoresceín izotiokyanát (FITC; F{{15} }ML) boli zakúpené od Sigma-Aldrich China, Inc. (Shanghai, PR China).

2.2. Potkany

Samce potkanov kmeňa Wistar albino (180 – 220 g) boli zakúpené od chovu zvierat West China Hospital, Sichuan University, Čína. Potkanom sa podávalo jedlo a voda ad libitum. 12-h svetlo: 12-h tmavý cyklus sa udržiaval v polypropylénových klietkach pre potkany pri relatívnej vlhkosti. Všetky experimenty na potkanoch boli schválené etickou komisiou WestChina Hospital, Sichuan University, Čína. Boli dodržané všetky platné medzinárodné, národné a inštitucionálne smernice pre starostlivosť o zvieratá a ich používanie.

2.3. Vyvolanie poranenia miechy

Poranenie miechy bolo vyvolané pozdĺžnym chirurgickým rezom po expozícii halotanu (1,5 percenta). Celý chirurgický zákrok prebiehal pri izbovej teplote. Rez bol vedený od spodných až po stredné hrudné stavce na zadnej strane zvieraťa. Hmotnosť 20–25 g bola umiestnená na exponovaný povrch Th12 na 30 minút, aby sa vyvolalo zranenie. Po odstránení závažia z povrchu Th12 bola koža a svaly zošité a na dolných končatinách bola vyvolaná dočasná reprodukovateľná paralýza [16,17]. Potkany sa udržiavali 24 h za vhodných podmienok a veterinárnej kontroly.

2.4. Príprava extraktu Cistanche deserticola a kvantitatívna analýza

RastlinaCistanchedeserticola(1 kg) sa odobral z Gansuprovince, Čína, vysušil sa na vzduchu a rozdrvil pomocou elektrického drviča. Prášok sa extrahoval v etanole (70 percent) počas 60 minút, prefiltroval a skoncentroval za zníženého tlaku. Koncentrát sa vákuovo sušil na prášok [18]. Kvantitatívna analýzaCistanchedeserticolaextrakt sa uskutočnil pomocou vysokoúčinnej kvapalinovej chromatografie (HPLC), ako už bolo opísané [11].

2.5. Liečba

Experimentálne skupiny boli nasledovné: skupina I (GI), normálne kontrolné potkany; skupina II (GII), potkany s poranením miechy (simulované kontroly); a skupiny III–V (GIII–V), potkany s poranením miechy, ktoré dostávali 100, 200 alebo 400 mg/kg oligosacharidov zCistanchedeserticolaextrakt, resp. Každá skupina obsahovala šesť potkanov aCistanchedeserticolaExtrakt sa perorálne podával potkanom počas 6 po sebe nasledujúcich týždňov.

2.6. Odber krvi

Na konci liečby sa krv (5–6 ml) odobrala 5 ml injekčnou striekačkou s ihlou 23G1 cez srdcovú punkciu a potkany sa anestetizovali hydrochloridom ketamínu (100 mg/kg telesnej hmotnosti) a xylazínom (10 mg/kg telesnej hmotnosti hmotnosť) a usmrtené dekapitáciou.

2.7. Príprava tkanivového homogenátu

Na konci liečby boli potkany anestetizované ketamín hydrochloridom (100 mg/kg telesnej hmotnosti) a xylazínom (10 mg/kg telesnej hmotnosti) a usmrtené dekapitáciou. Vzorky miechy (12 mm) boli odobraté z operovanej oblasti. Tkanivá miechy boli narezané na malé kúsky a homogenizované v Tris-HCl pufri (pH 7,4, 50 mM) pri 6000 ot./min. počas 5 minút. Homogenát sa odstredil a supernatant sa zozbieral na ďalšie experimenty. Všetky prípravy homogenátu a supernatantu sa uskutočňovali pri 4 stupňoch.

2.8. Biomarkery oxidačného stresu

Peroxidácia lipidov bola stanovená podľa obsahu malondialdehydu (MDA) meraním reaktívnych druhov kyseliny tiobarbiturovej (TBARS). Konečný produkt sa meral pri 534 nm [19]. ROS boli stanovené pomocou dichlórfluoresceínového testu [20]. Znížený obsah glutatiónu (GSH) bol stanovený meraním konečného produktu pri 405 nm [21]. Aktivita enzýmov superoxiddismutázy (SOD), glutatiónperoxidázy (Gpx), katalázy a acetylcholínesterázy (AChE) sa merala pomocou spektrofotometrie [19].

2.9. Zápalové markery

Hladiny TNF- a IL-6 v sére boli stanovené pre všetky skupiny [22]. Obsah dusitanu bol meraný ako index hladiny oxidu dusnatého (NO) a bol vyjadrený v mM [23,24]. Hladiny expresie mRNA TNF-, IL-6, iNOS, cyklooxygenázy-2 a GAPDH boli stanovené podľa Moon et al. [25]. Priméry použité v tejto štúdii sú uvedené v tabuľke 1.

2.10. Biomarkery apoptózy

Hladiny expresie mRNA kaspázy{0}}, p53, bcl{2}}, bax, pro-NGF a GAPDH boli stanovené podľa Moona a kol. [25]. Hladiny proteínovej expresie kaspázy-3, p53, bcl-2, bax, pro-NGF a GAPDH boli stanovené podľa Lobos et al. [26]. TUNEL farbenie kaspázy{10}} a p53 sa uskutočnilo v neurónových rezoch [25]. Priméry používané pre RT-PCR sú uvedené v tabuľke 1.

2.11. Štatistické analýzy

Hodnoty sú prezentované ako priemery so štandardnou chybou priemeru (SEM). Ovládanie aCistanchedeserticolaskupiny liečené extraktom sa porovnávali pomocou nepárového Studentovho t-testu. Na viacnásobné porovnania sa použila jednosmerná analýza variancie (ANOVA). P-hodnoty ˂0.05 sa považovali za indikátor štatistickej významnosti.

3. Výsledky

V tejto štúdii je terapeutická účinnosť oligosacharidov zCistanche deserticolaextrakt protizápal, oxidačnéstresskúmala sa apoptóza u samcov potkanov albínov s poranením miechy. VCistanche deserticolaextrakt (obr. 1). Obsah MDA, meraný ako konečný produkt peroxidácie lipidov, bol 22,58 nmol/g u normálnych kontrolných potkanov (GI) a bol drasticky zvýšený o 179,5 percent u falošných kontrolných potkanov (GII). Liečba potkanov oligosacharidmi zCistanchedeserticolaextrakt významne znížil obsah MDA o 50,1 percenta v skupine GV (tabuľka 2, Pb 0,05). Obsah GSH bol 85,31 mg/g v skupine GI a drasticky sa znížil o 61,1 percenta v skupine GII. Liečba sCistanchedeserticolaextrakt u potkanov s poranením miechy významne zvýšil obsah GSH o 121,6 percent v skupine GV (tabuľka 2, Pb0.05).

Aktivita SOD bola 6,2 U/mg v skupine GI a bola podstatne znížená o 51,1 percent v skupine GII. Potkany s poranením miechy doplnené oligosacharidmi zCistanchedeserticolaextrakt vykazoval signifikantne zvýšenú aktivitu SOD, o 91,4 percent v skupine GV (tabuľka 2, P b0.05). Aktivita katalázy bola 12,8 U/g v skupine GI a bola podstatne znížená o 59,3 percent v skupine GII. Poškodenie miechy potkanov doplnené oligosacharidmi zCistanche deserticolaextrakty ukázali významne zvýšenú aktivitu katalázy, o 106,1 percenta v skupine GV (tabuľka 2, Pb 0.05). Aktivita GPx bola 0,87 (mg/proteín) v skupine GI a bola znížená o 55,2 percent v skupine GII. Aktivita GPx bola zvýšená o 100 percent v skupine GV (tabuľka 2, P b 0,05). Aktivita AChE bola 9,3 (μmol/min/mg proteínu) v skupine GI a bola znížená o 54,8 percent v skupine GII. Poškodenie miechy potkanov doplnené oligosacharidmi zCistanchedeserticolaextrakt vykazoval signifikantne zvýšenú aktivitu AChE, o 26,2, 57,1 a 107,1 percenta v skupinách GIII, GIV a GV, v tomto poradí (tabuľka 2, Pb 0,05).

ROS sa merali a vyjadrili v relatívnych fluorescenčných jednotkách (RFU): intracelulárne ROS bolo 44,23 v skupine GI, čo bolo zvýšené o 349 percent v skupine GII. Suplementácia oligosacharidmi zCistanchedeserticolaextrakty významne znížili intracelulárne hladiny ROS o 61,9 percent v skupine GV (obr. 2A, Pb 0.05). Obsah dusitanu sa meral ako index hladiny NO a vyjadril sa v mM. Hladina NO bola 3,7 (mM) v skupine GI, ktorá bola zvýšená o 349 percent v skupine GII. Suplementácia oligosacharidmi zCistanchedeserticolaextrakt významne znížil hladiny NO o 63,6 percent v skupine GV (obr. 2B, Pb 0.05).

Hladiny IL{0}} a TNF- boli merané a vyjadrené ako pg/mg proteínu. Hladiny IL-6 a TNF- boli podstatne zvýšené o 912,7 a 695,4 percent v skupine GII. Avšak suplementácia oligosacharidmi zCistanchedeserticolaextrakt významne znížil hladinu IL{{0}} a TNF- o N60 percent v skupine GI v porovnaní so skupinou GII (obr. 3, Pb 0.{{16 }}5). Expresia mRNA zápalových markerov, ako je IL-6, TNF-, cyklooxygenáza-2 a iNOS, bola kvantifikovaná a vyjadrená ako násobok zmien. Hladiny expresie mRNA IL 6, TNF-, cyklooxygenázy-2 a iNOS sa zvýšili o 0.72-, 0.81-,0.54- a 0.{19}}záhyb v skupine GII. Doplnenie sCistanchedeserticolaextrakt znížil hladiny expresie mRNA IL{{0}}, TNF-, cyklooxygenázy-2 a iNOS o N20 percent v skupine GV v porovnaní so skupinou GII (obr. 4, Pb 0,05).

Stanovila sa aj mRNA expresia apoptotických markerov kaspáza {{0}}, p53, bcl-2, bax a pro-NGF. Hladiny expresie mRNA p53, kaspázy-3, bax a pro-NGF sa zvýšili o 0.97-,1.{{10}}, 1.{101} {12}} a 0.76-násobok v skupine GII a úroveň expresie mRNA thebcl-2 bola znížená 0.67-násobne . Ošetrenie extraktom významne znížilo hladiny expresie mRNA p53, kaspázy-3, bax a pro-NGF o N30 percent, zatiaľ čo hladina expresie bcl-2 mRNA sa zvýšila o 178 percent (obr. 5, Pb 0,05). Na základe western bloanalysis sa hladiny kaspázy-3 a pro-NGF proteínu významne zvýšili, 0,{30}}krát a 0{32}}krát, v skupine GII, v tomto poradí. Suplementácia oligosacharidmi odCistanchedeserticolaextrakt významne znížil hladiny expresie kaspázy{{0}} a pro-NGF proteínu o N20 percent v skupine GI v porovnaní so skupinou GII (obr. 6, Pb 0,05). Na detekciu počtu p53- a kaspázových-3-pozitívnych buniek sa použil test farbenia TUNEL. Počet p53-pozitívnych buniek bol 1, 79, 54, 33 a 19 v skupinách GI–GV. Počet kaspázovo{14}pozitívnych buniek bol 2, 87, 51, 23 a 14 v skupinách GI–GV, v tomto poradí (obr. 7–8, Pb 0,05).

4. Diskusia

V tejto štúdii je terapeutická účinnosť oligosacharidov zCistanchedeserticolaextrakt protizápalskúmal sa oxidačný stres a apoptóza u samcov potkanov albínov s poranením miechy. Liuet al. [27] uviedli, že suplementácia antioxidantom by mohla byť účinná proti niekoľkým neurodegeneratívnym ochoreniam. Prítomnosť echinakozidu (fenyletanoidového glykozidu) bola hlásená vCistanchedeserticolaextrakt [10] a niekoľko výskumníkov preukázalo protizápalové a antinociceptívne vlastnostiCistanche deserticola[28,29]. V tejto štúdii sa pozorovalo, že oligosacharidy, akteozid, echinakozid a kyselina 8-epiloganová sú hlavnými zložkami extraktu z Cistanche deserticola.

Po liečbe echinakozidom sa v neurónových bunkách SH-SY5Y pozorovali poruchy správania a apoptóza zlepšené TNF [30,31]. Nan a kol. [32] uviedli zníženie hladín TNF-, T-tau a IL-1 u pacientov s Alzheimerovou chorobou a zlepšenie obnovy hipokampálnej atrofie a kognitívnych schopností po suplementácii Cistanche herba. Terapeutické účinkyCistanchedeserticolaextrahovať nazápal, oxidačný stres a apoptóza neboli predtým hlásené. Toto je prvá správa o farmakologických účinkochCistanchedeserticolaextrakt v modeli poranenia miechy.

Niekoľko výskumníkov uviedlo, že liečba akteozidmi výrazne znížila oxidačný a črevný streszápalu myší vyvolaných zápalovým ochorením čriev [33]. Nam a kol. [34] uviedli, že protizápalová aktivita izoakteozidu z Abeliophyllum distichum v ľudských žírnych bunkách. Protizápalové fenylpropanoidové glykozidy z listov Clerodendron trichotomum boli hlásené na myšom modeli [35]. Zhou a kol. [36] uviedli, že protizápalová aktivita oligosacharidov v bunkách makrofágov RAW 264.7. Oligosacharidové monoméry boli opísané na inhibíciuzápalv LPS-stimulovaných makrofágoch prostredníctvom supresie MAPK a NF-κB dráh [37].

Fahnestock a kol. [38] uviedli, že pro-NGF je prevládajúcou formou v mozgu a je zvýšená u pacientov s Alzheimerovou chorobou. Niekoľko štiepených proteínov okrem pro-NGF aktivuje antiapoptotické bunkové reakcie [39]. Pomer medzi zrelým NGF- a pro-NGF hrá rozhodujúcu úlohu pri vyrovnávaní prežitia buniek a miery smrti [40]. Ke Zhang a kol. [18] uviedli zníženú tvorbu nádorov a dlhšiu životnosť u myší s doplnkomCistanchedeserticolaextrakt. Neuroprotektívne účinkyCistanchedeserticolaextrakt na neurotoxínmi indukované poškodenie už boli publikované [41]. Xuan a Liu a kol. [42] zaznamenali zlepšenie imunitnej funkcie, pamäte, učenia a antioxidácie u myší s doplnkomCistanchedeserticolaextrakt. Suplementácia extraktom z Cistanche deserticola znížila MDA a zvýšila hladiny GPxand SOD v modeli ischemicko-reperfúzneho potkana. Okrem toho bola pozorovaná downregulácia kaspázy-3 so súčasným zvýšením pomeru bax/BCL-2 [43], čo je v súlade s našimi zisteniami poukazujúcimi na znížené hladiny oxidačných, zápalových a apoptotických markerov v mieche. poranenie šnúry potkanov doplnené oCistanchedeserticolaextrakt.

5. Záver

Stručne povedané, kvantitatívna analýza odhalila prítomnosť oligosacharidov, akteozidu, echinakozidu a kyseliny 8-epiloganovej vCistanchedeserticolaextrakt.Zápal, oxidačný stres a markery apoptózy boli podstatne znížené u potkanov s poranením miechy doplnených oligosacharidmi z extraktu Cistanche deserticola.

Obmedzenia štúdie

Táto štúdia, hoci odhaľuje protinádorové a protizápalové účinky,Cistanchedeserticolaextrakt má určité obmedzenia. Zaznamenali sme akútny účinokCistanchedeserticolaextrakt na nádor azápalpri poranení miechy.

Financovanie

Túto štúdiu podporuje Národná nadácia pre prírodné vedy v Číne (Grant č. 31370984, 81501879, 31870961, GZ1219), Oddelenie vedy a technológie provincie Sichuan (č. 2015HH004) Projekt vedeckého výskumu Komisie pre zdravie a plánovanie rodiny No Sichuan 100097).

Konkurenčné záujmy

Všetci autori vyhlasujú, že nemajú žiadne konkurenčné záujmy.

Príspevky autorov

Hong Zhang, Zhou Xiang, Xin Duan a Juan li Jiang vykonali experimenty a vypracovali rukopis. Yi Ming Xing, Cheng Zhu a Qiang Song zhromaždili recenzie literatúry, vykonali analýzu nespracovaných údajov a interpretáciu údajov. Qin Rong Yu zrevidoval intelektuálny obsah rukopisu.

Od: ' Protinádorové aanti-zápalovéúčinky oligosacharidov zCistanchedeserticolaextrakt pri poranení miechy' týmHong Zhang a kol

---H. Zhang a kol. / International Journal of Biological Macromolecules 124 (2019) 360–367

Referencie

[1] MO Krucoff, S. Rahimpour, MW Slutzky, VR Edgerton, DA Turner, Zlepšenie zotavenia nervového systému prostredníctvom neurobiológie, tréningu nervového rozhrania a neurorehabilitácie, Front. Neurosci. 10 (2016) 584.
[2] TY Yune, JY Lee, MH Jiang, DW Kim, SY Choi, TH Oh, Systémové podávanie fúzneho proteínu PEP-1-SOD1 zlepšuje funkčné zotavenie inhibíciou smrti neurónových buniek po poranení miechy, voľný radikál. Biol. Med. 45 (2008) 1190-1200.

[3] SM Lee, TY Yune, SJ Kim, DW Park, YK Lee, YC Kim, YJ Oh, GJ Markelonis, TH Oh, Minocyklín znižuje bunkovú smrť a zlepšuje funkčné zotavenie po traumatickom poranení miechy u potkana, J. Neurotrauma 20 (2003) 1017-1027.

[4] F. Bao, D. Liu, Peroxynitrit generovaný v mieche potkana vyvoláva smrť neurónov a neurologické deficity, Neuroscience 115 (2002) 839–849.

[5] L. Qin, Y. Liu, T. Wang, SJ Wei, ML Block, B. Wilson, B. Liu, JS Hong, NADPH oxidáza sprostredkúva neurotoxicitu indukovanú lipopolysacharidmi a expresiu prozápalových génov v aktivovaných mikrogliách, J. Biol . Chem. 279 (2004) 1415-1421.
[6] ML Block, JS Hong, Microglia azápal-sprostredkovaná neurodegenerácia: viaceré spúšťače so spoločným mechanizmom, Prog. Neurobiol. 76 (2005) 77-98.
[7] KJ Min, HK Pyo, MS Yang, KA Ji, I. Jou, EH Joe, Gangliosidy aktivujú mikroglie prostredníctvom proteínkinázy C a NADPH oxidázy, Glia 48 (2004) 197–206.
[8] J. Hussein, M. El-Banna, TA Razik, ME El-Naggar, Biokompatibilné nanokryštály oxidu zinočnatého stabilizované prostredníctvom hydroxyetylcelulózy na zmiernenie diabetických komplikácií, Int. J. Biol. Macromol. 107 (Pt A) (2018) 748–754.
[9] TY Yune, JY Lee, GY Jung, SJ Kim, MH Jiang, YC Kim, YJ Oh, GJ Markelonis, TH Oh, Minocyklín zmierňuje smrť oligodendrocytov inhibíciou produkcie pro-nervového rastového faktora v mikrogliách po poranení miechy, J. Neurosci. 27 (2007) 7751-7761.
[10] GQ Sheng, JR Zhang, XP Pu, J. Ma, CL Li, Ochranný účinok verbascozidu na neurotoxicitu vyvolanú 1-metyl-4-fenylpyridíniovým iónom v bunkách PC12, Eur. J. Pharmacol. 451 (2002) 119-124.
[11] Y. Jiang, PF Tu, Analýza chemických zložiek v druhoch Cistanche, J. Chromatogr. 1216 (2009) 1970–1979.
[12] KA Koo, SH Sung, JH Park, SH Kim, KY Lee, YC Kim, In vitro neuroprotektívne aktivity fenyletanoidových glykozidov z Callicarpa dichotoma, Planta Med. 71 (2005) 778-780.
[13] Q. Dong, J. Yao, JN Fang, K. Ding, Štrukturálna charakterizácia a imunologická aktivita dvoch polysacharidov extrahovateľných studenou vodou zCistanchedeserticolaYC Ma, Carbohydr. Res. 342 (2007) 1343–1349.
[14] LW Lin, HT Lin, FH Tsai, WH Wang, CR Wu, antinociceptívna a protizápalová aktivita spôsobenáCistanchedeserticolau hlodavcov, J. Ethnopharmacol. 83 (2002) 177-182.
[15] J. Hussein, M. El-Bana, E. Refaat, ME El-Naggar, Syntéza nanoemulzie na báze karvakrolu na liečbu neurodegeneratívnych porúch pri experimentálnom diabete, J. Funct. Potraviny 37 (2017) 441–448.
[16] M. Sakanaka, P. Zhu, B. Zhang, TC Wen, F. Cao, YJ Ma, K. Samukawa, N. Mitsuda, J. Tanaka, M. Kuramoto, H. Uno, R. Hata, Intravenózne infúzia dihydro-ginsenosidu Rb1 zabraňuje kompresívnemu poraneniu miechy a ischemickému poškodeniu mozgu prostredníctvom upregulácie VEGF a Bcl-xL, J. Neurotrauma 24 (2007) 1037–1054.
[17] S. Naruo, K. Okajima, Y. Taoka, M. Uchiba, T. Nakamura, H. Okabe, K. Takagi, Prostaglandin E1 znižuje poranenie miechy vyvolané kompresiou u potkanov hlavne inhibíciou aktivácie neutrofilov, J Neurotrauma 20 (2) (2003) 221-228.
[18] K. Zhang, X. Ma, W. He, H. Li, S. Han, Y. Jiang, H. Wu, L. Han, T. Ohno, N. Uotsu, K. Yamaguchi, Z. Ma , P. Tu, Extracts ofCistanchedeserticolamôže antagonizovať imunosenescenciu a predĺžiť životnosť u myší náchylných na starnutie 8 (SAM-P8), Evid. Založený doplnok. Alternatíva. Med. 2014 (2014), 601383.
[19] T. Kaddour, K. Omar, AT Oussama, H. Nouria, B. Iméne, A. Abdelkader, Akútna neurotoxicita u potkanov vyvolaná hliníkom: liečba vodným extraktom z Arthrophytum (Hammada scoparia), J. Acute Dis. 5 (6) (2016) 470–482.
[20] TV Arutyunyan, AF Korystova, LN Kublik, MKh Levitman, VV Shaposhnikova, YN Korystov, Taxifolin a fukoidan rušia ožiarením vyvolané zvýšenie produkcie reaktívnych foriem kyslíka v potkanej aorte, Bull. Exp. Biol. Med. 160 (2016) 635–638.
[21] M. Erden Inal, A. Akgün, A. Kahraman, Účinky exogénneho glutatiónu na zníženú hladinu glutatiónu, aktivity glutatiónperoxidázy a glutatiónreduktázy u potkanov rôzneho veku a pohlavia po celotelovom Γ-žiarení, J. Am . Starnutie doc. 26 (2003) 55-58.
[22] J. Tavakkol Afshari, N. Ghomian, A. Shameli, MT Shakeri, MA Fahmidehkar, E. Mahler, R. Khoshnavaz, M. Emadzadeh, Stanovenie koncentrácií interleukínu-6 a tumor nekrotizujúceho faktora-alfa v Iránsko-chorasanské pacientky s preeklampsiou, BMC Tehotenstvo Pôrod 5 (2005) 14.
[23] D. Medhat, J. Hussein, ME El-Naggar, MF Attia, M. Anwar, YA Latif, HF Booles, S. Morsy, AR Farrag, WKB Khalil, Z. El-Khayat, Účinok Au-dextránu NPS ako protinádorové činidlo proti EAC a solídnym nádorom u myší pomocou biochemických hodnotení a histopatologických výskumov, Biomed. Pharmacother. 91 (2017) 1006–1016.
[24] TI Shaheen, MI El-Naggar, JS Hussein, M. El-Bana, E. Emara, Z. El-Khayat, MMG Fouda, H. Ebaid, A. Hebeish, Antidiabetické hodnotenie; in vivo štúdia zlata a nanočastíc striebra a zlata s jadrom-plášťom na streptozotocínom indukovaných diabetických potkanoch, Biomed. Pharmacother. 83 (2016) 865 – 875.
[25] YJ Moon, JY Lee, MS Oh, YK Pak, KS Park, TH Oh, TY Yune, Inhibíciazápala oxidačný stres extraktom Angelica dahuricae radix znižuje apoptotickú bunkovú smrť a zlepšuje funkčné zotavenie po poranení miechy, J. Neurosci. Res. 90 (1) (2012) 243–256.
[26] E. Lobos, C. Gebhardt, A. Kluge, K. Spanel-Borowski, Expresia izoforiem nervového rastového faktora (NGF) v maternici potkana počas tehotenstva: akumulácia prekurzora proNGF, Endocrinology 146 (4) (2005) 1922–1929.
[27] J. Liu, E. Head, AM Gharib, W. Yuan, RT Ingersoll, TM Hagen, CW Cotman, BN Ames, Strata pamäte u starých potkanov je spojená s mitochondriálnym rozpadom mozgu a oxidáciou RNA/DNA: čiastočné zvrátenie podávanie acetyl-L-karnitínu a/alebo kyseliny R-_-lipoovej, Proc. Natl. Akad. Sci. USA 99 (2002) 2356-2361.
[28] ZD Nan, KW Zeng, SP Shi, MB Zhao, Y. Jiang, PF Tu, Fenyletanoidové glykozidy s protizápalovými aktivitami zo stoniekCistanchedeserticolakultivované v Tarimskej púšti, Fitoterapia 89 (2013) 167–174.
[29] XM Wu, XM Gao, KWK Tsim, PF Tu, arabinogalaktán izolovaný zo stoniekCistanchedeserticolaindukuje proliferáciu kultivovaných lymfocytov, Int. J. Biol. Macromol. 37 (2005) 278-282.
[30] M. Deng, JY Zhao, PF Tu, Y. Jiang, ZB Li, YH Wang, Echinacoside zachraňuje neurónové bunky SHSY5Y pred apoptózou indukovanou TNF-alfa, Eur. J. Pharmacol. 505 (2004) 11-18.
[31] X. Geng, X. Tian, ​​P. Tu, X. Pu, Neuroprotektívne účinky echinakozidu v myšom MPTP modeli Parkinsonovej choroby, Eur. J. Pharmacol. 564 (2007) 66-74.

[32] L. Nan, W. Jianping, M. Jun, G. Zhiqiang, J. Chao, Y. Lie, F. Xiaojie, Neuroprotektívne účinky cistanches herba therapy na pacientov so stredne ťažkou Alzheimerovou chorobou, Evid. Založený doplnok. Alternatíva. Med. (2015) 103985.

[33] M. Hausmann, F. Obermeier, DH Paper, K. Balan, N. Dunger, K. Menzel, K. Rogler, In vivo liečba bylinným fenyletanoidným akteozidom zlepšuje črevnézápalpri kolitíde vyvolanej dextránsulfátom sodným, Clin. Exp. Immunol. 148 (2) (2007) 373–381.

[34] SY Nam, HY Kim, MS Yoou, AH Kim, BJ Park, HJ Jeong, HM Kim, Protizápalové účinky izoakteozidu z Abelophyllum distichum, Immunopharmacol. Imunotoxikol. 37 (3) (2015) 258–264.
[35] KH Kim, S. Kim, MY Jung, IH Ham, WK Whang, Protizápalové fenylpropanoidové glykozidy z listov Clerodendron trichotomum, Arch. Pharm. Res. 32 (1) (2009) 7-13.
[36] R. Zhou, X. Shi, Y. Gao, N. Cai, Z. Jiang, X. Xu, Protizápalová aktivita guluronátových oligosacharidov získaných oxidačnou degradáciou z alginátu v bunkách myšieho makrofágu RAW 264.7 aktivovaného lipopolysacharidmi, J. Agric. Food Chem. 14;63 (1) (2015) 160–168.
[37] W. Wang, P. Liu, C. Hao, L. Wu, W. Wan, X. Mao, Neoagaro-oligosacharidové monoméry inhibujúzápalv LPS-stimulovaných makrofágoch prostredníctvom supresie MAPK a NF-KB dráh, Sci. Rep. 7 (7) (2017), 44252.
[38] M. Fahnestock, B. Michalski, B. Xu, MD Coughlin, Prekurzorový pronerve rastový faktor je prevládajúcou formou nervového rastového faktora v mozgu a je zvýšený pri Alzheimerovej chorobe, Mol. Bunka. Neurosci. 18 (2001) 210-220.
[39] R. Lee, P. Kermani, KK Teng, BL Hempstead, Regulácia prežitia buniek vylučovanými proneurotropínmi, Science 294 (2001) 1945–1948.
[40] MV Chao, M. Bothwell, Neurotrofíny: štiepiť či neštiepiť, Neuron 33 (2002) 9–12.
[41] Q. Xiong, K. Hase, Y. Tezuka, T. Tani, T. Namba, S. Kadota, Hepatoprotektívna aktivita fenyletanoidov zCistanchedeserticola, Planta Med. 64 (2) (1998) 120-125.
[42] GD Xuan, CQ Liu, Výskum účinku fenyletanoidových glykozidov (PEG)Cistanchedeserticolao anti-aging u starých myší vyvolanom D-galaktózou, J. Chin. Med. Mater. 31 (9) (2008) 1385–1388.
[43] Q. Yu, X. Li, X. Cao, Kardioprotektívne účinky extraktu bohatého na fenyletanoidové glykozidy zCistanchedeserticolapri ischémiou-reperfúziou indukovanom infarkte myokardu u potkanov, Ann. Vasc. Surg. 34 (2016) 234–242.