Stratégie na posilnenie imunoterapie založené na aptamére v TNBC časť 2

Okrem toho aptaméry tolerujú niekoľko chemických modifikácií, ktoré zlepšujú účinnosť cielenia, farmakokinetický profil a stabilitu v biologickom prostredí, ktoré sú potrebné pre ich aplikácie in vivo [47]. Ako sa podrobne uvádza inde [27,48], medzi najpoužívanejšie modifikácie aplikované na aptaméry, či už počas SELEX alebo po SELEX, na zvýšenie ich odolnosti voči nukleázam patria (obrázok 3): nahradenie 2 0 -OH skupín ribóza s fluórovými, metoxylovými, tiolovými alebo aminoskupinami; zakrytie alebo cyklizáciu koncov oligonukleotidov; substitúciu fosfodiesterového hlavného reťazca fosforotioátovým hlavným reťazcom; a zavedenie uzamknutých nukleových kyselín. Okrem toho sa môžu generovať L-aptaméry, nazývané spiegelméry, ktoré nukleázy nerozoznávajú, pretože sú to enantioméry prírodných nukleových kyselín. Chemické modifikácie sa tiež aplikujú na prekonanie rýchlej renálnej filtrácie malých aptamérov ich konjugáciou príliš objemných molekúl, ako je polyetylénglykol (PEG) alebo cholesterol, čím sa zvyšuje ich čas cirkulácie bez ovplyvnenia dostupnosti k cieľu. Boli vyvinuté aj sofistikované prístupy na chemickú konjugáciu aptamérov so sekundárnymi terapeutikami v kombinovanej terapii a zaujímavé je, že sa skúmali inovatívne stratégie na zavedenie exotických chemických skupín do molekuly aptaméru s cieľom rozšíriť ich funkčnosť a prekonať nedostatok chemickej diverzity v nukleových kyselinách [49 ].

Nukleázy označujú enzýmy, ktoré môžu urýchliť hydrolytickú reakciu RNA alebo DNA a majú široké spektrum biologických funkcií. V imunitnom systéme sú nukleázy dôležitými nástrojmi na rozpoznanie a odstránenie vírusových infekcií. Potom, čo vírus infikuje bunku, uvoľní do bunky RNA alebo DNA. Tieto molekuly nukleovej kyseliny budú rozpoznané a hydrolyzované nukleázou infikovanej bunky, čím sa zabráni replikácii vírusu a šíreniu infekcie.

Okrem toho sa nukleázy podieľajú aj na regulácii vrodených a adaptívnych imunitných reakcií. Nukleázy môžu regulovať hladiny génovej expresie reguláciou degradácie a stability RNA alebo DNA. V imunitných bunkách nukleázy regulujú imunitné reakcie, ako je apoptóza, prezentácia antigénu a diferenciácia T-buniek.

Celkovo hrajú nukleázy dôležitú úlohu v imunitnej odpovedi, rozpoznávajú vírusovú infekciu, modulujú génovú expresiu a modulujú imunitnú odpoveď. Existuje teda viacero mechanizmov vplyvu na imunitu. Z tohto hľadiska je potrebné dbať na zlepšenie imunity. Cistanche zvyšuje imunitu. Cistanche je bohatá na rôzne antioxidačné látky, ako je vitamín C, vitamín C, karotenoidy atď. Tieto zložky dokážu odstraňovať voľné radikály, znižovať oxidačný stres a zlepšovať imunitu. odolnosť imunitného systému.

Kliknite na výhody cistanche tubulosa

Ďalšiu stratégiu na zlepšenie väzbovej afinity, cieľovej selektivity a in vivo biologickej dostupnosti aptamérov predstavuje generovanie aptamérov modifikovaných pomalou rýchlosťou (SOMAméry). Sú to aptaméry DNA, ktoré nesú chemicky modifikované nukleotidy funkcionalizované v polohe 5- uridínu so skupinami, ktoré sa môžu nielen podieľať na interakciách s cieľovým proteínom, ale môžu tiež vytvárať nové sekundárne a terciárne štrukturálne motívy, ktoré výrazne rozširujú repertoár dostupných cieľov. na aptaméry [50].

K dnešnému dňu bol jeden značne chemicky modifikovaný aptamér (nazvaný Macugen), zameraný na izoformu 165 vaskulárneho endotelového rastového faktora, schválený na liečbu vekom podmienenej degenerácie makuly a jedenásť aptamérov je v klinických štúdiách na liečbu rôznych ľudských chorôb. [51,52]. Spomedzi nich anti-nukleolínový aptamér AS1411 a aptamér faktora 1 NOX-A12 odvodený od stromálnych buniek už dokončili fázu II klinických skúšok liečby rakoviny. Navyše anti-proteín tyrozínkináza-7 Sgc8 DNA aptamér, značený 68Ga, je v ranej fáze I na hodnotenie svojej diagnostickej hodnoty u kolorektálnych pacientov (ClinicalTrials.gov Identifier: NCT03385148).

3. Imunitné stratégie na liečbu TNBC založené na aptaméri

Genetické a epigenetické mutácie v rakovinových bunkách vedú k prítomnosti mnohých antigénov spojených s nádorom, ktoré IS rozpoznáva ako cudzie, a preto ničí mutované bunky. Je však dobre známe, že rakovinové bunky si vyvíjajú niekoľko mechanizmov na únik z imunitnej deštrukcie a menia okolité mikroprostredie vo svoj prospech, čo vedie k rastu nádoru, invázii a metastázovaniu (53 55].

Cieľom imunoterapie rakoviny je posilniť alebo obnoviť schopnosť IS detekovať a ničiť rakovinové bunky prekonaním mechanizmov, ktorými sa nádory vyhýbajú a potláčajú imunitnú odpoveď. V posledných rokoch boli vyvinuté nápadné stratégie založené na aptaméroch na obnovenie Is smerom k protinádorovému stavu v TNBC. Ako je uvedené nižšie, zvyšujúce sa dôkazy ukazujú schopnosť aptaméru zosilňovať cytotoxickú aktivitu imunitných buniek, blokovať imunitné kontrolné body alebo získavať imunitné bunky do rakovinových buniek (obrázok 4).

3.1. Lymfocyty infiltrujúce nádor

Hlavnými typmi imunitných buniek v mikroprostredí TNBC sú TIL a ich prítomnosť je významne spojená s lepšími výsledkami prežitia u pacientov s neliečenými nádormi v ranom štádiu [56]. TIL zahŕňajú všetky CD3 plus T bunky, ktoré môžu podporovať deštrukciu nádoru (CD8 plus cytotoxické T bunky) a protinádorovú odpoveď (CD4 plus T-helper 1) alebo obmedziť protinádorové imunitné reakcie (CD4 plus T-helper 2, vrátane Forkhead box P3 ( FOXP3), CD4 plus regulačné T bunky).

Nedávno Zhao a spol. navrhli originálnu stratégiu, ktorá využíva schopnosť zacielenia aptamérov na konštrukciu „supercytotoxických T lymfocytov“ na zvýšenie protinádorovej odpovede v imunoterapii rakoviny [59]. Vygenerovali kyslom odbúrateľné nanočastice na báze kovov a lyzozómov zacielené na lyzozómy, ktoré boli naplnené perforínom a granzýmom B, dvoma protinádorovými toxínmi obsiahnutými v lyzozómoch CD8 plus T buniek, a funkcionalizované aptamérom zacieleným na CD63 receptor na lyzozóme. Ca2 plus bol nanesený na nano platformu, aby sa zlepšila jeho biokompatibilita a stabilita a zosilnila sa aktivita toxínov. Autori uspeli pri použití takejto platformy riadenej aptamérom (nazvanej LYS-NP) na obohatenie cytotoxického obsahu lyzozómov CD8 plus T buniek.

Pri testovaní na myšom modeli TNBC 4T1 sa T bunky predaktivovali spracovanými 4T1- špecifickými antigénmi a rekombinovali sa pomocou LYS-NP a uvoľnili lyzozomálny obsah do imunologických synapsií, čím sa spustila silná protinádorová reakcia (obrázok 4). Navrhovaná imunoterapia na báze aptamérov má veľký potenciál prekonať významné výzvy v imunoterapii T-buniek pre solídne nádory, ktoré predstavujú najmä silné imunosupresívne signály, ktoré indukujú nízku aktiváciu T-buniek a zníženú syntézu a uvoľňovanie cytotoxických proteínov [60].

3.2. Bunky vyjadrujúce imunitný kontrolný bod

Alatrashova skupina uviedla, že expresia génu PD-L1 u pacientov s TNBC je významne vyššia ako u pacientov bez TNBC (19). PD-L1, jeden z hlavných kontrolných bodov imunity asociovaných s nádorovými bunkami, je exprimovaný v rôznych imunitných bunkách , ako sú makrofágy, niektoré aktivované T bunky, B bunky a v mnohých bunkách solídnych nádorov vrátane buniek BC. Jeho receptor transmembránový proteín PD-1 je exprimovaný na membránovom povrchu TIL, NK buniek, makrofágov, dendritické bunky a monocyty [61].Väzba medzi PD-L1 a PD-1 spôsobuje inhibíciu CD8 plus TIL, transformuje ich do anergickej formy a následne imúnny únik rakoviny.

Okrem toho os PD{0}}/PD-L1 moduluje v nádorových bunkách rôzne signálne dráhy proliferácie a prežitia, ako sú PI3K/AKT, MAPK a JAK/STAT [62], a čo je veľmi dôležité, v TNBC aktiváciu tejto osi podporuje epitelovo-mezenchymálny prechod (EMT), fenotyp spojený s vysoko agresívnymi a metastatickými nádormi [63].

V súčasnosti sa skúmajú rôzne prístupy založené na aptaméroch v TNBC na zvrátenie účinkov PD-1/PD-L1 (obrázok 5).

Obrázok 5. Schematické znázornenie stratégií založených na aptaméroch na blokovanie osi PD-1/PD-L1 v TNBC. (a) TNBC aptamérom zdobené nanočastice naplnené anti-PD-L1 siRNA; (b) anti-CD44 a anti-PD-L1 aptamérom zdobené lipozómy naplnené doxorubicínom aj anti-IDO1 siRNA; (c) antiPD-L1 aptamér konjugovaný s paklitaxelom; (d) anti-EGFR aptamér kovalentne spojený s anti-PD-L1 alebo anti-CTLA-4 mAb (podrobnosti nájdete v texte). Vytvorené pomocou BioRender.com (prístup 2. marca 2023).

V tejto súvislosti naša skupina po prvýkrát skúmala kombináciu medzi anti-PD-L1 mAb s aptamérom receptora rastového faktora odvodeného od krvných doštičiek (PDGFR) s názvom Gint4.T v TNBC [64]. Gint4.T je 20 -fluórpyrimidínový (20F-Py) RNA aptamér odolný voči nukleáze, ktorý sa viaže na a inhibuje PDGFR exprimovaný na povrchu rôznych ľudských rakovinových buniek, vrátane buniek TNBC [65] a zložiek TNBC TME, vrátane mezenchymálnych kmeňových buniek [66] a T buniek [64]. Je zaujímavé, že pri intravenóznej injekcii do syngénnych myší TNBC 4T1 aptamér silne zosilňuje účinok antiPD-L1 mAb pri inhibícii rastu nádoru a tvorby pľúcnych metastáz pôsobením na nádorové bunky aj zložky TME [64].

Okrem toho kombinovaná blokáda PDGFR a PD-L1 spôsobuje depléciu FOXP3 plus Treg buniek a zvýšenie CD8 plus T buniek a granzýmu B konzistentnejšie ako jednotlivé monoterapie. Tieto výsledky položili základ pre konštrukciu bišpecifického imunokonjugátu pozostávajúceho z anti-PD-L1 protilátky kovalentne spojenej s aptamérom Gint4.T, čím sa optimalizuje účinnosť kombinovanej terapie. Bišpecifické konštrukty získané kovalentným spojením 20F-Py RNA aptaméru receptora anti-epidermálneho rastového faktora (EGFR) s imunomodulátormi anti-PD-L1 (10_12) [67] alebo anti-CTLA-4 (ipilimumab) [68] mAb boli vytvorené Passariello et al. a preukázalo sa, že zachováva biologické funkcie oboch rodičovských skupín, čím vykazuje silnú cytotoxickú aktivitu proti bunkám BC.

Alternatívna stratégia k anti-PD-L1 mAb pre PD-L1 cielenie predstavuje potlačenie PD-L1 prostredníctvom umlčania génov, ktoré má potenciál prekonať niektoré opakujúce sa prekážky liečby založenej na mAbs, ako je ich čas a náklady. -náročná produkcia, potenciál pre imunogenicitu a nízka stabilita. Okrem toho táto stratégia umožňuje blokovanie vnútornej protumorogénnej úlohy cytoplazmatického PD-L1 [69], ktorá namiesto toho nie je prístupná protilátkam. Možnosť syntetizovať aptaméry zacielené na rakovinové bunky s funkčnými skupinami na ich konci, čo umožňuje konjugáciu s nano vektormi, je pozoruhodným prístupom, ako dodať, konkrétne do nádoru, malé interferujúce náklady RNA (siRNA), naložené v nano vektore. , čím sa prekoná zraniteľnosť siRNA voči nukleázam a ich neschopnosť vstúpiť do cieľových buniek. Nedávno boli nanočastice na báze poly(laktát-ko-glykolová)-blok-PEG (PLGAb-PEG) naplnené anti-PD-L1 siRNA a ozdobené 20F-Py RNA aptamérom schopným viazať sa a internalizovať špecificky do TNBC buniek. [70,71].

Výsledné nano vektory konjugované s aptamérom po 90-minútovej inkubácii na TNBC bunkách účinne dodávali siRNA do cieľových buniek, čo bolo schopné spôsobiť takmer úplné potlačenie expresie PD-L1 [72]. Najmä nanonosiče zdobené aptamérom ponúkajú možnosť spájať rôzne ligandy s povrchom NP, čím sa zvyšuje špecifickosť zacielenia a zapuzdrenie viacerých terapeutík do NP, čo umožňuje účinné kombinované terapie. Napríklad súčasné podávanie cisplatiny [40] a siPD-L1 [72] polymérnymi nanočasticami PLGA, ktoré sme vybavili aptamérmi TNBC, môže nielen podporiť zníženie toxických vedľajších účinkov, ale aj pôsobiť proti hlásenému negatívnemu účinku cisplatiny. podaní na obohatenie PD-L1 plus imunitne vyhýbavých TNBC buniek [73].

V tomto ohľade Kim a spol. pripravili multifunkčný nanosystém s dvoma DNA aptamérmi konjugovanými na vonkajšom povrchu lipozómov a dvoma rôznymi terapeutikami vo vnútri nano vektorov pre synergickú chemoimunoterapiu v TNBC [74]. Konkrétne použili na zacielenie buniek TNBC predtým vybrané anti-CD44 [75] a anti-PD-L1 [76] DNA aptaméry, z ktorých každý je modifikovaný tiolom a kovalentne konjugovaný s maleimidovými skupinami PEGylovaných-DSPE micel pomocou tiol-maleimidu. chémia. Nanorozmerné lipozómy boli naplnené doxorubicínom aj siRNA, ktoré interferujú s expresiou IDO1, proteínu, ktorý uprednostňuje imunosupresívny TME a je upregulovaný liečbou doxorubicínom. Pri intravenóznej injekcii myšiam s nádorovým xenoštepom TNBC 4T1 nano vektory silne znížili rast nádoru a inhibovali tvorbu metastáz synergickým kombinovaním indukcie imunogénnej bunkovej smrti zacielenej na rakovinové bunky a zvrátením imunosupresie [74].

Nedávno boli vytvorené a testované rôzne PD-L1 aptaméry ako samostatné antagonisty, bišpecifické konjugáty a dodávacie činidlá terapeutík v modeloch myší s nádorom pľúc, pečene a hrubého čreva, ktoré, podobne ako anti-PD-L1 protilátky, interferujú s os PD-1/PD-L1 blokovaním PD-L1 (tabuľka 2). Jeden aptamér, nazvaný XQ-P3, bol vytvorený pozitívnou selekciou na PD-L1 nadmerne exprimujúcich MDA-MB-231 bunkách s použitím PD-L1 knockoutovaných buniek na kontraselekciu [77]. Aj keď ešte nebol testovaný in vivo, zdá sa, že je vysoko účinný v spoločných kultúrach buniek TNBC MDA-MB-231 a imunitných buniek Jurkat tým, že blokuje interakciu s PD-1 a obnovuje funkciu T buniek. Okrem toho konjugát XP-Q3 aptamér-paklitaxel vykazoval antiproliferačnú účinnosť v bunkách TNBC s nadmernou expresiou PD-L1 [77].

3.3. Makrofágy

Makrofágy spojené s nádorom (TAM) patria medzi najhojnejšie imunitné bunky v TME širokého spektra rakovín a môžu pôsobiť tak, že podporujú alebo potláčajú protinádorové imunitné reakcie [86,87]. V skutočnosti sa vďaka svojmu vysokému stupňu plasticity posúvajú k dvom odlišným fenotypom v reakcii na rôzne mikroenvironmentálne stimuly: klasicky aktivovaný, prozápalový M1 a alternatívne aktivovaný protizápalový M2, ktoré vykazujú rozdielne profily expresie voči markerom bunkového povrchu a odlišná produkcia cytokínov a chemokínov. Makrofágy M1 typicky vykonávajú protinádorové funkcie, zatiaľ čo makrofágy M2 podporujú progresiu nádoru. Vo väčšine agresívnych nádorov vrátane TNBC majú TAM tendenciu podobať sa fenotypu podobnému M2-, ktorý do značnej miery zodpovedá za zlyhanie konvenčných terapií a terapií inhibujúcich imunitný kontrolný bod. Z tohto dôvodu sa niekoľko inovatívnych imunoterapeutických prístupov zameriava na cielenie a depléciu M2 makrofágov alebo ich preprogramovanie na požadovaný fenotyp [88,89].

Na výber aptamérov zacielených na ľudské makrofágy podobné M{0}} sa použil prvý prístup bunkovej SELEX na ľudské makrofágy odvodené z monocytov niekoľkých darcov a polarizované na fenotyp podobný M2- [90]. Hoci najlepší M2-cieliaci DNA aptamér pochádzajúci zo selekcie nebol schopný odlíšiť cieľové bunky od nediferencovaných M0-podobných a monocytov a tiež sa v menšom rozsahu viazal na M1-podobné makrofágy, rýchlo sa internalizoval do CD14 plus monocytov, čím si udržal potenciál pre aplikácie na podávanie liečiv cielené na monocyty.

Ďalšia nápadná aplikácia aptamérov na imunoterapiu solídnych nádorov pozostáva zo zosilnenia špecificity M1 makrofágu pre nádorové bunky ich skonštruovaním s aptamérmi zacielenými na rakovinové bunky. Imunoterapia chimerickým antigénovým receptorom T (CAR-T), ktorá podáva pacientom infúzne bunky CAR-T, preukázala veľkú účinnosť pri liečbe niektorých leukémií a lymfómov, ale len mierne výsledky pri solídnych nádoroch v dôsledku obtiažnosti penetrácie nádorov [91] . Kvôli vnútornej schopnosti makrofágov prenikať do nádorových tkanív bolo nedávno navrhnutých niekoľko prístupov, ktoré ich geneticky upravili tak, aby exprimovali chimérické CAR (CAR-M) na cielenie nádorových buniek a iniciovali cielenú protinádorovú odpoveď [92]. Na prekonanie hlavných nevýhod spojených s tradičnými terapiami CAR-M, ako je nízka reprodukovateľnosť umelých proteínov a bezpečnostné problémy, Qian a kol. navrhol nový prístup CAR-M založený na použití aptamérov [93].

Myšia stabilná makrofágová bunková línia, RAW 264.7, sa najprv inkubovala s činidlom na značenie metabolického glykoproteínu a lipopolysacharidom, aby sa vytvorili azidocukry na povrchu buniek M1. Potom boli bunky M1 konjugované kliknutím chemickou reakciou na aptamér AS1411, ktorý sa viaže na nukleolín exprimovaný na niekoľkých rakovinových bunkách, a na aptamér PD-L1 na súčasné zacielenie na nádor a blokádu kontrolného bodu imunity. Dôležité je, že in vivo zobrazovanie myší nesúcich 4T1 TNBC a intravenózne injikovaných M1 bunkami, funkcionalizovanými fluorescenčnými aptamérmi, ukázalo väčšiu akumuláciu v nádoroch v porovnaní s nemodifikovanými M1 bunkami. Okrem toho, keď sa testovala protinádorová aktivita, M1 skonštruovaný duálnym aptamérom spôsobil silné zníženie rastu nádoru a tvorby metastáz, čo bolo sprevádzané preprogramovaním imunitného TME so zvýšenou infiltráciou T buniek v nádore a zvýšenou cytotoxicitou T buniek.

Alternatívne Chen a kol. navrhli polyvalentné sférické aptaméry (PSA) ako stratégiu makrofágového inžinierstva [94]. PSA boli generované funkcionalizáciou zlatých nanočastíc s tiolom modifikovaným AS1411 aptamérom a DNA linkerom, ktorý nesie na voľnom konci funkčnú skupinu pre reakciu s azidovými značkami vytvorenými na M0 makrofágoch prostredníctvom vyššie uvedeného metabolického značenie a biortogonálne klikacie reakcie (obrázok 6). Fenotypová transformácia upravených nepolarizovaných makrofágov na podtyp M1 bola aktivovaná röntgenovými lúčmi in vitro a potvrdená u myší nesúcich nádorové xenoimplantáty 4T1, čo spôsobilo silné nádorovo špecifické zabíjanie bez známok systémovej toxicity.

3.4. Natural Killer Cells

NK bunky sú cytotoxické lymfocyty patriace k vrodenému IS, schopné produkovať zápalové cytokíny a chemokíny. Nazývajú sa „prvá línia obrany“, pretože na rozdiel od T lymfocytov neexprimujú antigén-špecifické receptory T buniek, ale pôsobia proti mutovaným bunkám bez predchádzajúcej senzibilizácie alebo klonálnej expanzie [95]. Adoptívna imunoterapia NK bunkami nepreukázala účinnosť pri liečbe solídnych nádorov, čiastočne kvôli imunosupresívnemu TME a nedostatočnej špecifickosti NK buniek k nádoru [96].

Preto sa medzi prístupmi na zlepšenie protirakovinovej terapeutickej účinnosti NK buniek veľké úsilie sústreďuje na udelenie špecifickosti rakoviny prostredníctvom expresie CAR alebo konjugácie ligandov zacielených na nádor [97]. Zu a kolegovia skúmali aptaméry ako aktívne činidlá zacielené na rakovinu spojením aptaméru, schopného špecificky rozpoznať receptor CD30, na bunkách lymfómu na povrch buď komerčnej NK bunkovej línie alebo NK buniek získaných od troch zdravých darcov [98]. Tento aptamér typu DNA bol predtým vybraný tou istou skupinou prostredníctvom hybridného prístupu SELEX, v ktorom po krokoch selekcie na CD30 plus lymfómových bunkách nasledovali selekčné kroky na rekombinantnom proteíne CD30 [99]. Aptamér bol na 30 koncoch modifikovaný lipofilnými dvojitými C18 uhľovodíkovými reťazcami na ukotvenie do membrány NK buniek, ktoré sú tak špecificky navádzané na bunky lymfómu, aby ich zabili [98]. Nedávno tí istí autori použili rovnaký prístup v TNBC pripojením DNA aptaméru schopného viazať zatiaľ neznámy proteín exprimovaný na TNBC bunkách na povrch NK buniek. NK bunky skonštruované aptamérom inhibovali pľúcne metastázy z buniek MDA-MB-231 intravenózne injikovaných myšiam bez vedľajšej toxicity na normálne tkanivá [100].

Na ďalšie zvýšenie nádorovej špecifickosti NK buniek v solídnych nádoroch sa vytvorili NK bunky vybavené duálnym aptamérom s použitím aptaméru zacieleného na bunky hepatocelulárneho karcinómu a aptaméru AptPD-L1 [81]. Výsledné skonštruované NK bunky boli účinnejšie ako bunky nekonjugované alebo konjugované iba s jedným z dvoch aptamérov pri inhibícii rastu hepatocelulárneho karcinómu u adoptívne prenesených myší. Ďalším limitom účinnosti imunoterapie NK bunkami je ich nedostatočná infiltrácia do solídnych nádorov. Aptaméry sa opäť ukázali ako vynikajúce nástroje na prekonanie tohto problému. Hockova skupina vytvorila bišpecifický konjugát na báze aptaméru schopný súčasne sa viazať na c-Met, receptor vysoko exprimovaný na niekoľkých nádorových bunkách, a na Fcg receptor III (CD16a), proteín exprimovaný na NK bunkách [101]. Konjugát sa skladá z dvoch vysoko špecifických c-Met a CD16a DNA aptamérov, ktoré boli fúzované rôznymi linkermi, pričom sa zachováva ~65 Á-ideálna vzdialenosť pre súčasné naviazanie na dva receptory. Konjugát bol schopný účinne napodobňovať bunkovú cytotoxicitu závislú od protilátky náborom NK buniek do rakovinových buniek. Neskôr bol rovnaký aptamér CD16 fúzovaný s aptamérom PD-L1 DNA, aby sa vytvoril konštrukt schopný získavať NK bunky do PD-L1 plus nádorových buniek a narušiť imunosupresívnu os PD-1/PD-L1 reaktiváciou TIL proti nádorovým bunkám u myší s nádorom [82]. Tento prístup je indikovaný najmä pre tie solídne nádory s vysokými hladinami PD-L1, ako je TNBC.

4. Závery

Nedávne štúdie, o ktorých sa tu diskutuje, jasne demonštrujú veľký potenciál oligonukleotidových aptamérov na amplifikáciu nášho IS v boji proti rakovine. Aptaméry sa môžu použiť ako protirakovinové činidlá rovnakým spôsobom ako mAb, ale sú lacnejšie, vyrábajú sa rýchlejšie a s vyššou reprodukovateľnosťou a sú menej imunogénne ako protilátky. Je však potrebné uznať, že príchod aptamérov na kliniku sa ukazuje byť pomalší, než sa očakávalo; v skutočnosti, hoci od prvého SELEX-u uplynulo viac ako 30 rokov [25,26], v súčasnosti sú v klinických štúdiách na liečbu rakoviny len tri aptaméry [51].

Toto spomalenie je väčšinou spôsobené niektorými problémami, ktoré obmedzujú účinnosť aptamérov u pacientov, ako je ich neistá stabilita a polčas rozpadu, najmä v komplexnom a kontinuálne sa vyvíjajúcom mikroprostredí, ktoré obklopuje nádor. Napriek tomu, úžasné stratégie, ktoré boli vyvinuté v niekoľkých posledných rokoch na prekonanie vyššie uvedených obmedzujúcich problémov a nedávny pokrok v objavovaní aptamérov a modifikáciách na ich prispôsobenie ľubovoľným požadovaným aplikáciám, umožňujú tvrdiť, že praktické používanie aptamérov bude čoskoro byť realizované pre rakoviny, ako je TNBC, ktoré naliehavo potrebujú nové terapeutické možnosti.

Príspevky autora:

Konceptualizácia, LC; písanie – príprava pôvodného návrhu, LC; písanie – recenzia a úprava LA, Ad, RN, MF, SC a LC Všetci autori si prečítali publikovanú verziu rukopisu a súhlasili s ňou.

Financovanie:

Tento výskum bol financovaný Fondazione AIRC per la Ricerca sul Cancro, IG 23052, pre LCLA bola podporená štipendiom AIRC pre Taliansko.

Vyhlásenie inštitucionálnej revíznej rady:

Nepoužiteľné.

Vyhlásenie o dostupnosti údajov:

Nepoužiteľné.

Poďakovanie:

Sme vďační A. Caliendovi za fundované diskusie.

Konflikt záujmov:

Autori nedeklarujú žiadny konflikt záujmov.

Referencie

1. Dent, R.; Trudeau, M.; Pritchard, KI; Hanna, WM; Kahn, HK; Sawka, CA; Lickley, LA; Rawlinson, E.; Sun, P.; Narod, SA Triple-negatívna rakovina prsníka: Klinické znaky a vzorce recidívy. Clin. Cancer Res. 2007, 13, 4429–4434. [CrossRef]

2. Derakhshan, F.; Reis-Filho, JS Patogenéza trojnásobne negatívneho karcinómu prsníka. Annu. Pathol. 2022, 17, 181–204. [CrossRef]

3. Lu, JY; Alvarez Soto, A.; Anampa, JD Krajina systémovej terapie pre včasné štádium triple-negatívnej rakoviny prsníka. Expert Opin. Pharmacother. 2022, 23, 1291–1303. [CrossRef]

4. Lehmann, BD; Bauer, JA; Chen, X.; Sanders, ME; Chakravarthy, AB; Shyr, Y.; Pietenpol, JA Identifikácia ľudských trojnásobne negatívnych podtypov rakoviny prsníka a predklinické modely na výber cielených terapií. J. Clin. Vyšetrovať. 2011, 121, 2750–2767. [CrossRef]

5. Lehmann, BD; Jovanovič, B.; Chen, X.; Estrada, MV; Johnson, KN; Shyr, Y.; Mojžiš, HL; Sanders, ME; Pietenpol, JA Spresnenie trojnásobne negatívnych molekulárnych podtypov rakoviny prsníka: Dôsledky pre výber neoadjuvantnej chemoterapie. PLoS ONE 2016, 11, e0157368. [CrossRef]

6. Burstein, MD; Tsimelzon, A.; Poage, GM; Covington, KR; Contreras, A.; Fuqua, SA; Savage, MI; Osborne, CK; Hilsenbeck, SG; Chang, JC; a kol. Komplexná genomická analýza identifikuje nové podtypy a ciele trojnásobne negatívnej rakoviny prsníka. Clin. Cancer Res. 2015, 21, 1688–1698. [CrossRef]

7. Park, JH; Ahn, JH; Kim, SB Ako budeme liečiť skorý triple-negatívny karcinóm prsníka (TNBC): Od súčasného štandardu po nadchádzajúce imuno-molekulárne stratégie. ESMO Open 2018, 3, e000357. [CrossRef]

8. Li, S.; Bao, C.; Huang, L.; Wei, JF Súčasné terapeutické stratégie pre metastatický triple-negatívny karcinóm prsníka: Z pohľadu farmaceutov. J. Clin. Med. 2022, 11, 6021. [CrossRef]

9. MROSS, K.; Kratz, F. Limity konvenčnej chemoterapie rakoviny. In Dodávka liekov v onkológii: Od základného výskumu k terapii rakoviny; Kratz, F., Senter, P., Steinhagen, H., Eds.; John Wiley & Sons, Ltd.: Hoboken, NJ, USA, 2011; 1. zväzok, s. 1–31.

10. Ferrari, P.; Scatena, C.; Ghilli, M.; Bargagna, I.; Lorenzini, G.; Nicolini, A. Molekulové mechanizmy, biomarkery a vznikajúce terapie pre TNBC rezistentné voči chemoterapii. Int. J. Mol. Sci. 2022, 23, 1665. [CrossRef]

11. Gonzalez-Angulo, AM; Timms, KM; Liu, S.; Chen, H.; Litton, JK; Potter, J.; Lanchbury, JS; Stemke-Hale, K.; Hennessy, BT; Arun, BK; a kol. Výskyt a výsledok mutácií BRCA u neselektovaných pacientov s trojitým receptorom negatívnym karcinómom prsníka. Clin. Cancer Res. 2011, 17, 1082–1089. [CrossRef]

12. Robson, M.; Im, SA; Senkus, E.; Xu, B.; Domchek, SM; Masuda, N.; Delaloge, S.; Li, W.; Tung, N.; Armstrong, A.; a kol. Olaparib pre metastatický karcinóm prsníka u pacientov s mutáciou zárodočnej línie BRCA. N. Engl. J. Med. 2017, 377, 523–533. [CrossRef] [PubMed]

13. Eikesdal, HP; Yndestad, S.; Elzawahry, A.; Llop-Guevara, A.; Gilje, B.; Blix, ES; Espelid, H.; Lundgren, S.; Geisler, J.; Vagstad, G.; a kol. Monoterapia olaparibom ako primárna liečba neselektovaného triple-negatívneho karcinómu prsníka. Ann. Oncol. 2021, 32, 240–249. [CrossRef] [PubMed]

14. Litton, JK; Rugo, HS; Ettl, J.; Hurvitz, SA; Gonçalves, A.; Lee, KH; Fehrenbacher, L.; Yerushalmi, R.; Mina, LA; Martin, M.; a kol. Talazoparib u pacientov s pokročilým karcinómom prsníka a zárodočnou mutáciou BRCA. N. Engl. J. Med. 2018, 379, 753–763. [CrossRef]

15. Keung, MY; Wu, Y.; Badar, F.; Vadgama, JV Reakcia buniek rakoviny prsníka na inhibítory PARP je nezávislá od stavu BRCA. J. Clin. Med. 2020, 9, 940. [CrossRef] [PubMed]

For more information:1950477648nn@gmail.com