Zmeny hladín fenyletanoidových glykozidov, antioxidačná aktivita a ďalšie kvalitatívne znaky v plátkoch Cistanche Deserticola spracovaním parou

Cistanche deserticola Y. C. MA(Orobanchaceae), bežne známy ako „púštny ženšen“, sa už dlho používa ako tonikum v Číne a Japonsku. Mäsité stonky sa nakrájajú na plátky na liečbu rôznych chorôb vrátane impotencie, ženskej neplodnosti, pocitu chladu v bedrách a kolenách a staršej zápchy. V posledných rokoch niekoľko štúdií odhalilo jeho účinnosť na experimentálnych modeloch, ktoré súvisia s neurologickými poruchami, najmä Alzheimerovou chorobou a Parkinsonovou chorobou.Trh so zdravou výživou sa čoraz viac zaujíma o tento užitočný prírodný doplnok stravy. Víno a čaj zo šťavnatých stoniek sú obľúbené zdravé potraviny, ktoré zmierňujú únavu a zlepšujú učenie a pamäť.C. deserticolaje bohatým zdrojom fenyletanoidných glykozidov, polysacharidov a rozpustných cukrov, ktoré majú hlavne antioxidačné účinky,neuroprotektívne,hepatoprotektívne,posilnenie imunity,preháňadlo,a proti starnutiu účinky, medzi ktorými sa antioxidačná aktivita považuje za základ ostatných farmakologických účinkov. Echinakozid a akteozid sú reprezentatívnymi markermi pre kontrolu kvality Cistanches Herba v Čínskom liekopise (vydanie 2015) vzhľadom na ich prevládajúce množstvo, rodovú špecifickosť a pozoruhodné bioaktivity. Stanovenie zriedených extraktov rozpustných v etanole je tiež súčasťou kontroly kvality Cistanches Herba. Bolo tiež hlásené, že cistanosid A, izoakteozid a 2'-acetylakteozid sú vo veľkom množstveC. deserticola. 

PRÍRODNÝ VÝTAŽOK CISTANCHE PROTI ÚNAVE DOPLNOK STRAVY PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Zvyšovaniedopyt po C. deserticola výrazne podnietil jej pestovanie. C. deserticola patrí medzi viacročnú parazitickú bylinu, ktorá rastie najmä v suchých alebo polosuchých oblastiach severozápadnej Číny. Ihneď po zbere sa tieto vysoko sladké, ťažké surové stonky musia vysušiť, aby sa predišlo strate obsahu živín a znehodnoteniu. Čerstvé stonky zvyčajne obsahujú 75–85 % vody a hladina vody by sa mala znížiť pod 10 %, aby sa zachovali. Vo väčšine oblastí produkujúcich Cistanche sa celé čerstvé stonky umiestňujú na otvorené polia na približne 2 mesiace na predbežné sušenie. Vysušený materiál sa potom prepravuje do tovární, namočí sa do vody, nakrája sa na plátky a znova sa suší. Oneskorenie pri spracovaní plátkov môže byť dôsledkom nedostatočne vzdelaných alebo nedostatočne vybavených farmárov. Hlavným problémom je však nedostatok vedomostí a technológií, ktoré by umožnili efektívny výrobný proces.

Vysokotepelné ošetrenie sa široko používa na zelenine a ovocí a môže inhibovať rast mikróbov a predĺžiť trvanlivosť. Môže však spôsobiť aj zmeny vzhľadu a zloženia živín. Ukázalo sa, že určité bioaktívne zložky a farmakologické aktivity, ako je antioxidačná aktivita, sa v liečivých bylinách po naparení zvyšujú. Varenie C. deserticola teda môže zlepšiť niekoľko zdravotných výhod. Bolo tiež hlásené, že použitie dusenia alebo blanšírovania čerstvo nakrájanej C. deserticola zvyšuje množstvoechinakozid a akteozid.19,20) Neuskutočnil sa však žiadny podrobný výskum na porovnanie zmien v bioaktívnych zlúčeninách a antioxidačnej aktivite čerstvo nakrájanej C. deserticola počas procesu parenia. Cieľom tejto štúdie bolo preto preskúmať vplyv doby parenia (1, 3, 5, 7 min) na množstvo fenyletanoidných glykozidov, polysacharidov, rozpustných cukrov, zriedených extraktov rozpustných v etanole, úbytok hmotnosti a antioxidačné vlastnosti. v plátkoch C. deserticola v porovnaní s tromi ďalšími skupinami (čerstvé, priamo sušené v peci, blanšírované).

Experimentálne

Chemikálie

Chemikálie analytickej kvality: metanol, etanol, D-glukóza, kyselina sírová, hydrogenfosforečnan draselný a monohydrát dihydrogenfosforečnanu draselného boli získané od Beijing Chemical Works (Peking, Čína). Kyselina mravčia a fenol boli zakúpené od Sinopharm Chemical Reagent Co. (Shanghai, Čína). Metanol v kvalite HPLC bol zakúpený od Fisher Scientific (Toronto, Kanada). Deionizovaná voda sa získala pomocou systému Milli-Q (Millipore Corp., Bedford, MA, USA). 2,2-difenyl-1-pikrylhydrazyl (DPPH) poskytol Alfa Aesar (Ward Hill, MA, USA) a 2,2'-azobis(2-amino-propán) dihydrochlorid (AAPH ) od Adamas-beta (Shanghai, Čína). Kyselina 6-metoxy-2,5,7,8-tetrametylchromán-2-karboxylová (Trolox), 2,6-di-terc-butyl-p-krezol (BHT) a fluoresceín (sodná soľ) (FL) boli získané od TCI (Tokio, Japonsko) a testovacia súprava celkovej antioxidačnej kapacity (T-AOC) od Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute (Nanjing, Čína). Štandardy pre akteozid (111530-200706) a echinakozid (111670-200503) boli zakúpené od Národného inštitútu pre kontrolu potravín a liečiv (Peking, Čína). Normy pre2'-acetylakteozid, cistanozid A a izoakteozid boli prezentované ako dar od Dr. Zhiguo Ma. Čistota každej referenčnej zlúčeniny bola stanovená na viac ako 98 % normalizáciou plochy piku detegovanej detektorom HPLC-diódového poľa (DAD).

Ošetrenie materiálu a určenie chudnutia

Vzorky boli odobraté na jar 2{{10}}14 na plantáži Ningxia of Cistanches Herba (106.08 stupňa N, 38,24 stupňa E, 1124,2 m ) v Číne a identifikovaný jedným z nás (prof. Jun Chen). Vzor poukážky bol uložený v Inštitúte vývoja liečivých rastlín, Čínska akadémia lekárskych vied, Peking Union Medical College. Náhodne sa zozbierali asi 3 kg stoniek C. deserticola, ktoré sa opláchli čistou vodou. Keramickým nožom sa odstránili časti kvetenstva, stonky sa potom narezali na 3 mm plátky. Každý 100 g plátok sa meral v hmotnosti (W0) ako replikát. Vyhodnotilo sa sedem experimentálnych ošetrení s tromi opakovaniami na ošetrenie. Na varenie v pare boli štyri dávky plátkov vložené do 93 stupňovej vodnej pary na 1, 3, 5 alebo 7 minút. Na blanšírovanie sa jedno ošetrenie vložilo do 96 stupňovej vody na 5 minút. Čerstvé a priamo v peci sušené plátky boli ďalšie dve úpravy uvedené v tomto experimente. Ošetrené plátky sa odvážili (W1) a vysušili pri 60 stupňoch v sušiarni. Vysušené plátky sa potom znovu odvážili (W2), pomleli a rozdrvili na prášok (65 mesh). Prášky vzoriek sa skladovali vo vákuových vreckách pri teplote -20 stupňov až do dňa analýzy. Strata hmotnosti sa vypočítala takto: strata hmotnosti po vysokotepelnom spracovaní (%)=[(W0−W1)/W0]×100, strata hmotnosti po sušení v peci (%)=[(W0 −W2)/W0]× 100, kde W0 je počiatočná hmotnosť a W1 a W2 sú hmotnosti namerané po vysokotepelnom spracovaní a sušení v peci.

Fenyletanoidové glykozidy a antioxidačné vlastnosti

Extrakcia vzoriek

{{0}}.5-g prášková vzorka bola extrahovaná 25 ml 60 % metanolovo-vodného roztoku pomocou ultrazvuku KQ-250DE (Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Jiangsu, Čína) pri 40 kHz, 200 W a 40 stupňoch počas 30 minút. Po extrakcii boli ošetrené vzorky centrifugované počas 10 minút pri 4600 x g (TD5; Hunan Herexi Instrument & Equipment Co., Hunan, Čína). Supernatant sa prefiltroval cez filter s veľkosťou pórov 0,{14}} um na následné analýzy.

Stanovenie fenyletanoidných glykozidov

Stanovenie echinakozidu, cistanozidu A,akteozid, izoakteozid a 2'-acetylakteozidzo vzoriek C. deserticola sa uskutočnilo tak, ako to opísali Ma et al.21) s určitými modifikáciami. Analýza sa uskutočnila pomocou prístroja 2695–2996 HPLC (Waters Corp., Milford, MA, USA) s ultrafialovou absorpciou monitorovanou pri 330 nm. Separácia sa uskutočnila na kolóne Merck Purospher® Star RP-C18 (250 mm x 4,6 mm, 5 um) prevádzkovanej pri 30 stupňoch. Mobilná fáza s prietokovou rýchlosťou 1 ml/min pozostávala z rozpúšťadla A (metanol) a rozpúšťadla B (0,1 % vodná kyselina mravčia, obj./obj.). Gradientová elúcia prebiehala takto: 28 % A ({{30}}}–10 min), 28–38 % A (10–30 min), 38 % A (30– 45 minút) a objem injekcie bol 10 ul. Zmiešaný roztok obsahujúci päť referenčných štandardov sa pripravil rozpustením referenčných štandardov v 60 % metanole na konečnú koncentráciu 0,20 mg/ml pre echinakozid, 0,21 mg/ml pre akteozid, 0,20 mg/ml pre 2'-acetylakteozid, 0,05 mg/ ml pre cistanozid A a 0,05 mg/ml pre izoakteozid. Roztok sa potom zriedil na sedem rôznych koncentrácií, aby sa vytvorili kalibračné krivky. Koncentrácia fenyletanoidných glykozidov vzoriek bola vyjadrená v g/kg čerstvej hmotnosti (FW).

PRÍRODNÝ EXTRAKT CISTANCHE ZLEPŠUJE PAMÄŤ DOPLNOK STRAVY PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Stanovenie kyslíkovej radikálovej absorbčnej kapacity (ORAC)

Test ORAC sa uskutočnil tak, ako je opísané v Huang et al.22) s niektorými modifikáciami. Ako pozitívna kontrola bol použitý syntetický antioxidant BHT. Stručne povedané, 25 ul zriedených extraktov vzoriek a 16 0 ul FL sa zmiešalo v 96-jamkovej mikroplatni. Zmes sa inkubovala pri 37 stupňoch počas 15 minút pred pridaním 20 ul AAPH. Fluorescencia sa monitorovala s použitím 485 nm (excitácia) a 520 nm (emisia) v 3-min intervaloch počas 72 minút pomocou Fluoroskan Ascent FL (Thermo Scientific, Waltham, MA, USA). Ako referenčný štandard sa použil Trolox (2,5–50,0 µmol/l) a výsledky sa vyjadrili ako mikromóly Troloxu na hmotnosť čerstvého plátku, µmol TE/g FW.

Stanovenie 2,2-difenyl-1-pikrylhydrazylovej aktivity zachytávania voľných radikálov (DPPH)

Test DPPH sa uskutočnil tak, ako je opísané v Goupy et al.23) s niektorými modifikáciami. Ako pozitívna kontrola bol použitý syntetický antioxidant BHT. Stručne povedané, 1 ml zriedeného extraktu vzorky sa zmiešal s 1 ml roztoku 0,2 mmol/l DPPH v metanole. Roztoky sa udržiavali v tme pri 25 stupňoch počas 9 0 min, potom sa merala absorbancia pri 517 nm. Trolox (4,0–119,5 µmol/l) sa použil ako referenčný štandard a výsledky sa vyjadrili ako mikromóly Troloxu na hmotnosť čerstvého plátku, µmol TE/g FW.

Stanovenie vlastností antioxidantu redukujúceho železo (FRAP)

Test FRAP sa uskutočnil pomocou testovacej súpravy T-AOC podľa pokynov výrobcu.

Rozpustné cukry a polysacharidy

Príprava vzorky rozpustných cukrov

0.5-g prášková vzorka bola extrahovaná 25 ml 80 % etanolového vodného roztoku pomocou ultrazvuku KQ-250DE pri 40 kHz, 150 W a 80 stupňoch počas 30 minút. Prvý extrakčný roztok sa prefiltroval a preniesol do 50-ml odmernej banky. Sedimenty sa znovu extrahovali a filtrát sa spojil s prvým extrakčným roztokom v 50-ml odmernej banke a naplnil sa po značku 80% vodným roztokom etanolu.

Potom bol 1 ml tohto roztoku napipetovaný do 10-ml sklenenej skúmavky, aby sa odparil etanol vo vriacom vodnom kúpeli. Na rozpustenie zvyšku sa pridala destilovaná voda (5 ml), potom sa preniesla do 100-ml odmernej banky a naplnila sa po značku destilovanou vodou. Nakoniec sa 2 ml tohto zriedeného roztoku použili na stanovenie rozpustných cukrov.

Príprava vzorky polysacharidov

Sedimenty z extrakcie rozpustných cukrov sa vysušili na vzduchu a extrahovali 25 ml destilovanej vody pomocou ultrazvuku KQ- 250DE pri 40 kHz, 150 W a 80 stupňoch počas 30 minút. Prvý extrakčný roztok sa prefiltroval a preniesol do 50-ml odmernej banky. Sedimenty sa znovu extrahovali a filtrát sa spojil s prvým extrakčným roztokom v 50-ml odmernej banke a naplnil sa po značku destilovanou vodou. Potom bol tento 5-ml roztok napipetovaný do 50-ml odmernej banky a naplnený po značku destilovanou vodou. Nakoniec sa 2 ml tohto zriedeného roztoku použili na stanovenie polysacharidov.

Stanovenie rozpustných cukrov a polysacharidov

Stanovenie rozpustných cukrov a polysacharidov sa uskutočňovalo použitím metódy fenol-kyselina sírová, ako je opísané vo Wang et al.24) Jeden mililiter 6% roztoku fenolu sa pridal do 2 ml roztoku vzorky a dobre sa premiešal. Potom sa rýchlo pridalo 5 ml koncentrovanej kyseliny sírovej a pretrepávalo sa 5 minút. Zmes sa preniesla na 15 minút do vriaceho vodného kúpeľa a rýchlo sa ochladila na teplotu miestnosti na ultrafialovú detekciu. Absorpcia ultrafialového žiarenia sa monitorovala pri 49 0 nm v spektrofotometri UV2550 (Shimadzu Co., Kyoto, Japonsko). Ako slepý pokus sa použila destilovaná voda. Referenčný štandard bezvodej D-glukózy sa presne odvážil a rozpustil v destilovanej vode na konečnú koncentráciu 0,10 mg/ml. Potom sa 1, 2, 3, 4, 5, 6 a 7 ml zásobného roztoku odpipetovalo do siedmich 10- ml odmerných baniek a naplnilo sa po značku destilovanou vodou. Potom sa použilo sedem rôznych koncentrácií štandardných roztokov na zostavenie kalibračných kriviek.

Zriedené extrakty rozpustné v etanole

Vzorky (4.0 g) sa presne odvážili, aby sa určili ich zriedené extrakty rozpustné v etanole, podľa metódy opísanej v Čínskom liekopise (vydanie z roku 2015).25 Prášková vzorka sa odvážila (W3) a extrahovala 100 ml 50% vodného roztoku etanolu v 250-ml kónickej banke s občasným pretrepávaním počas 6 hodín a ponechaním stáť 18 hodín. Extrakčný roztok sa prefiltroval a 20 ml filtrátu sa odparilo do sucha, sušilo sa pri 105 °C počas 3 hodín a chladilo sa v exsikátore (silikagél) počas 30 minút. Nakoniec bolo množstvo presne odvážené (W4). Obsah zriedeného extraktu rozpustného v etanole bol vyjadrený ako g/kg FW vzorky. Zriedené extrakty rozpustné v etanole sa vypočítali takto: zriedené extrakty rozpustné v etanole (g/kg FW)=[(W4×5)/W3]×(100−W5)×10, kde W3 je počiatočná hmotnosť , W4 je hmotnosť nameraná po extrakcii a W5 je strata hmotnosti po sušení v peci (%).

Štatistická analýza

Na objasnenie akýchkoľvek rozdielov medzi liečebnými skupinami sa použila jednosmerná ANOVA s použitím SPSS 13.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Rozdiely boli hodnotené pomocou Duncanovho testu s limitom významnosti 0,05. Údaje boli vyjadrené ako štandardná odchýlka (SD) (n=3).

Výsledky a diskusia

Strata váhy

Hmotnosť plátkov C. deserticola priamo určuje jej komerčnú hodnotu na trhu liečivých bylín. Ako je uvedené v tabuľke 1, úbytok hmotnosti C. deserticola sa analyzoval po vysokotepelnom spracovaní a sušení v peci. Nižšie úrovne úbytku hmotnosti sa zistili, keď sa plátky priamo sušili v rúre a nie dusili alebo blanšírovali. Blanšírované vzorky mali najvyššie úrovne straty hmotnosti. Vzorky pripravené v pare mali vyššiu úroveň straty hmotnosti pri dlhšom čase prípravy v pare. Sedem minút dusenia, najdlhší čas, počas ktorého čerstvo narezané plátky držali tvar, sa výrazne prejavilo (str<0.05) higher levels of weight loss after oven-drying than 5 min of steaming. Since phenylethanoid glycosides had been detected in the hot water (data not shown), it suggested that blanching/steaming promoted more water-soluble compounds to be dissolved in the hot water. Concerning weight loss after high-heat exposure, samples steamed for 1 minute exhibited extremely low weight loss. Therefore, 1 min of steaming was too short to make the Cistanche tissue brittle, so it was less able to release bioactive compounds (such as phenylethanoid glycosides) during the subsequent extraction procedure, compared with samples that had been steamed longer.

Fenyletanoidové glykozidy

Hladiny echinakozidu, cistanozidu A, akteozidu, izoakteozidu a 2'-acetylakteozidu v plátkoch C. deserticola spracovaných rôznymi metódami sú znázornené na obr. 1. Vzorky naparované počas 7 minút obsahovali 2,16 g/kg FW echinakozidu a {{6} },29 g/kg FW cistanozidu A, čo je zvýšenie -140 a -6-násobok v porovnaní s čerstvými plátkami. Obsah fenyletanoidových glykozidov prudko vzrástol, keď boli čerstvé vzorky ošetrené vysokým teplom a sušením, najmäakteozid, izoakteozid a 2′-acetylakteozid,zatiaľ čo v čerstvých vzorkách neboli zistené. Jedným z možných dôvodov by mohla byť degradácia fenyletanoidných glykozidov peroxidázou a -glukozidázou. Tieto enzýmy by boli inaktivované vo vzorkách vysušených vysokými teplotami a zníženým obsahom vody, čo by viedlo k zadržaniu vysokých hladín fenyletanoidných glykozidov v extraktoch. Okrem toho sú fenyletanoidové glykozidy fenolové zlúčeniny, ktoré by sa syntetizovali v čerstvých rastlinách v reakcii na stres z vysokej teploty a straty vlhkosti.

NATURAL CISTANCHE TUBULOSA ZLEPŠENIE FUNKCIE OBLIČIEK PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Uvádza sa, že varenie v pare aj blanšírovanie čerstvo nakrájanej C. deserticola zvyšuje obsah echinakozidu a akteozidu.19,20) V tejto štúdii však blanšírovanie poskytlo významný (p<0.05) lower concentration of acteoside and cistanoside A than drying directly. Regarding the total concentration of the five phenylethanoid glycosides, the blanched samples were still lower than the directly oven-dried ones (1.73, 2.35 g/kg FW, respectively). Slices steamed for 5 and 7 min contained significantly (p<0.05) higher amounts of acteoside, isoacteoside, and 2′-acetylacteoside than directly oven-dried samples. In general, the highest levels of phenylethanoid glycosides were found in the steamed samples, suggesting that the above-mentioned pharmacological activities produced by fenyletanoidové glykozidyv C. deserticola plátky môžu byť posilnené úpravou na pare.

Ďalej sme zistili, že čas parenia bol rozhodujúci pri určovaní obsahu fenyletanoidových glykozidov. Echinakozid, cistanozid A, akteozid a izoakteozid vykazovali počas procesu naparovania podobný rastúci trend, ktorý sa prudko zvýšil (po 1, 3 min) a dosiahol svoje maximálne hladiny po 7 min. Neboli pozorované žiadne významné zmeny v štyroch vyššie uvedených fenyletanoidových glykozidoch počas procesu parenia od 3 do 7 minút. Naopak, 2'-acetylakteozid sa výrazne zvýšil (str<0.05) with processing time. Notably, the levels of phenylethanoid glycosides in slices steamed for 1 min were significantly (p<0.05) lower than in directly oven-dried slices, except isoacteoside. Therefore, 1 min steaming of 3-mm fresh-cut C. deserticola was not long enough to inactivate the above-mentioned enzymes. Higher total levels of the five phenylethanoid glycosides were observed when the slices were steamed for 5 and 7 min (3.20, 3.52 g/kg FW, respectively) rather than directly oven drying. Steaming from 5 to 7 min more effectively promoted the extraction of phenylethanoid glycosides from C. deserticola, leading to a higher level of phenylethanoid glycosides in the extracts.

Obr. 1. Koncentrácia (g/kg FW) echinakozidu (A), cistanozidu A (B), akteozidu (C), izoakteozidu (D) a 2'-acetylakteozidu (E) v plátkoch Cistanche deserticola podľa rôznych spôsobov spracovania Rôzne písmená (a–e) označujú štatisticky významné rozdiely medzi liečbami (Duncanov test, s<0.05, n=3).

Antioxidačná aktivita

Antioxidačné vlastnosti rezov, ako boli testované pomocou ORAC, DPPH a FRAP, sú uvedené na obr. 2. Ako sa očakávalo, hodnoty ORAC vykazovali medzi vzorkami veľké rozdiely v rozsahu od 13,34 µmol TE/g FW v čerstvých vzorkách až po 108,62 umol TE/g FW pri 7 minútach parenia. Počas procesu naparovania sa hodnota ORAC medzi 1 a 7 minútou naparovania 4-násobne zvýšila. Podobné trendy sa pozorovali v testoch DPPH aj FRAP, čo ukazuje rýchly nárast počas spracovania v pare. Aj keď vzorky ošetrené parou mali spočiatku nižšie antioxidačné hodnoty (po 1 minúte), vykazovali oveľa lepšie zachovanie antioxidačnej kapacity počas procesu. V prípade blanšírovania neboli pozorované žiadne významné rozdiely v antioxidačných vlastnostiach v porovnaní s priamym sušením v peci.

Obr. 2. Hladiny (µmol TE/g FW) kapacity absorpcie kyslíkových radikálov (ORAC) (A), 2,2-difenyl-1-pikrylhydrazylovej aktivity zachytávania voľných radikálov (DPPH) (B) a Antioxidačné vlastnosti redukujúce železo (FRAP) (C) rezov Cistanche deserticola podľa rôznych metód spracovania Rôzne písmená (a–f) označujú štatisticky významné rozdiely medzi ošetreniami (Duncanov test, s.<0.05, n=3).

Antioxidačná aktivita ORAC v surových stonkách alebo plátkoch C. deserticola nebola predtým hlásená. Etanolové extrakty surových stoniek C. deserticola však boli merané v testoch DPPH a FRAP,28) vykazujúce vysokú antioxidačnú aktivitu, mierne nižšiu ako 2(3)-t-butyl-4-hydroxyanizol (BHA) a vyššia ako BHT. Okrem toho fenyletanoidové glykozidy izolované z C. deserticola vykazovali silné vychytávacie aktivity DPPH, o niečo nižšie ako kyselina askorbová29) a vyššie ako -tokoferol.2) C. deserticola môže byť potenciálnym zdrojom prírodných antioxidantov, pretože antioxidačné vlastnosti izolovaných čistých zlúčenín z C. deserticola boli vyššie ako u niektorých syntetických antioxidantov. Ako je uvedené v tabuľke 2, BHT sa výrazne prejavil (str<0.05) higher antioxidant properties than C. deserticola slices steamed for 7 min. Therefore, there is still a big gap between C. deserticola slices and synthetic antioxidants of equal quality.

Test DPPH využíva mechanizmy prenosu atómov vodíka (HAT) aj prenosu jedného elektrónu (SET), zatiaľ čo testy ORAC a FRAP sa riadia princípmi reakcií HAT a SET.30) V tejto štúdii sú všeobecné trendy antioxidačnej kapacity hodnotené tromi testami boli veľmi podobné. Potvrdili sme teda, že sušené plátky C. deserticola (dusené, priamo sušené v rúre a blanšírované) mali výrazne (p<0.05) higher levels of antioxidant activity than fresh ones. Furthermore, steaming for 5 and 7 min significantly (p<0.05) enhanced levels of antioxidant activity compared with direct oven drying and blanching. Overall, our results showed that steaming fresh-cut C. deserticola slices was effective in preserving phenylethanoid glycoside levels and antioxidant activity.

Rozpustné cukry, polysacharidy a zriedené extrakty rozpustné v etanole

As shown in Fig. 3, levels of soluble sugars and polysaccharides exhibited the following descending order: fresh>directly oven-dried>steamed>blanšírované. Blanšírované plátky mali veľmi nízke hladiny rozpustných cukrov, polysacharidov a zriedeného extraktu rozpustného v etanole, correspodobre s ich vysokým úbytkom hmotnosti. Čerstvé vzorky mali výrazne (s<0.05) higher content of soluble sugars (62.89 g/kg FW) and polysaccharides (17.36 g/kg FW) than the other samples, suggesting that heat treatment (oven drying, steaming, blanching) on fresh-cut samples would reduce the extraction of soluble sugars and polysaccharides. Heat treatment inhibited the hydrolysis of phenylethanoid glycosides to release the glucose, rhamnose, and so on. Moreover, heat treatment, used as an abiotic stress factors on fresh slices, gave rise to the synthesis of several phenylpropanoid compounds including phenylethanoid glycosides.27) Particularly, sugars contained in the slices were dissolved in the hot water to different extents by steaming or blanching. Thus, it is not surprising to see that the content of soluble sugars decreased by 23.88% in steaming and by 60.82% in blanching, while the content of polysaccharides decreased by 41.33% in steaming and by 53.83% in blanching, compared with fresh slices. It has been reported that the steaming process can increase reducing sugars and acidic polysaccharides in Ginseng Radix et Rhizoma,18) and mono sugars, including galactose and glucose, in Rehmanniae Radix.17) However, the whole dried crude drugs studied in the above-mentioned literature were quite different from the fresh-cut slices used in the present study.

Obr. 3. Koncentrácia (g/kg FW) rozpustných cukrov (A), polysacharidov (B) a zriedených extraktov rozpustných v etanole (C) plátkov Cistanche deserticola podľa rôznych metód spracovania Rôzne písmená (a–e) označujú štatisticky významné rozdiely medzi liečbami (Duncanov test, s<0.05, n=3).

Plátky priamo sušené v sušiarni mali najvyšší obsah zriedených extraktov rozpustných v etanole (89,26 g/kg TH), zatiaľ čo blanšírované plátky mali najnižší obsah (47,60 g/kg TH). Hoci všetky spracované plátky C. deserticola spĺňali štandard Čínskeho liekopisu (vydanie z roku 2015), aby mohli byť kvalifikované ako Cistanches Herba, blanšírované plátky by priniesli menej zdravotných výhod ako vzorky priamo sušené v peci pre výraznú stratu zriedeného etanolu rozpustného extrakty. Pokiaľ ide o proces parenia, trend rozpustných cukrov bol veľmi podobný trendu pozorovanému pre zriedené extrakty rozpustné v etanole, postupne klesal bez výrazných zmien pozorovaných od 3 do 7 minút. Koncentrácia polysacharidov počas celej doby parenia kolísala s miernym nárastom. Pozoruhodné je, že 7 minút parenia ukázalo dobré uchovanie polysacharidov, ale veľkú stratu rozpustných cukrov, zatiaľ čo 5 minút parenia ukázalo opačný výsledok v porovnaní s priamym sušením v peci.

Záver

Prvýkrát sme informovali o vplyve parenia na bioaktívne zlúčeniny a antioxidačnú aktivitu v čerstvo rezanej C. deserticola a poskytli dôležité informácie pre vývoj účinných procesov na pozberovú úpravu stoniek C. deserticola. Čerstvé plátky vykazovali najhoršiu účinnosť pri extrakcii fenyletanoidných glykozidov a antioxidačných zlúčenín, čo odhalilo, že tieto látky boli náchylné na enzymatickú degradáciu. Naproti tomu vzorky pripravené v pare mali najvyššie hladiny fenyletanoidových glykozidov a antioxidačné aktivity. Hoci blanšírovanie mierne zvýšilo obsah akteozidu, izoakteozidu a 2'-acetylakteozidu v porovnaní s priamym sušením v peci, hodnoty hmotnosti, rozpustných cukrov, polysacharidov a zriedených extraktov rozpustných v etanole sa všetky dramaticky znížili. Pre proces naparovania sa hladiny fenyletanoidných glykozidov a polysacharidov časom mierne zvýšili. Výrazné naparovanie počas 5 a 7 minút (str<0.05) enhanced total levels of the five phenylethanoid glycosides than directly oven drying. However, the longer the steaming process, the greater the decrease in weight, soluble sugars, and dilute ethanol-soluble extracts. No significant decrease in soluble sugars was observed when slices were steamed from 1 to 5 min compared with directly oven-dried samples. The steaming time had a consistent effect on the antioxidant properties, with a significant increase evaluated by the DPPH, ORAC, and FRAP assays. It was concluded that C. deserticola slices can be successfully treated with 5 to 7 min of steaming to improve the phenylethanoid glycoside levels and antioxidant activity while preserving the amounts of soluble sugary, polysacharidy a zriedené extrakty rozpustné v etanole.

Cistanche TUBULOSA ANTI-OXIDANT PHGS 75% ECH 30% ACT 12%