Charakterizované poklesom fyziologických funkcií v jednotlivých orgánových systémoch

Pre viac informácií prosím kontaktujte

SÚHRN

Čierny čaj je najrozšírenejší čajový nápoj na svete a neustále sa uvádza, že má účinky proti starnutiu. Či sa však theaflavíny, jeden typ charakteristických fytochemikálií v extraktoch z čierneho čaju, podieľajú na regulácii starnutia a dĺžky života konzumentov, zostáva veľkou neznámou. V tejto štúdii sme ukázali, že theaflavíny zohrávajú prospešnú úlohu pri prevencii presakovania čriev a dysbiózy s nástupom veku, čím odďaľujú starnutie u Drosophila. Mechanisticky theaflavíny regulujú zostavu kondenzátu Imd, aby negatívne riadili nadmernú aktiváciu signálov Imd v črevách ovocných mušiek. Okrem toho teaflavíny zabraňujú kolitíde vyvolanej DSS u myší, čo naznačuje, že teaflavíny zohrávajú úlohu pri modulácii črevnej integrity. Celkovo naša štúdia odhaľuje molekulárny mechanizmus, ktorým theaflavíny regulujú črevnú homeostázu pravdepodobne prostredníctvom kontroly koalescencie Imd.

Ak chcete vedieť viac, kliknite sem

ÚVOD

Starnutie, charakterizované poklesom fyziologických funkcií v jednotlivých orgánových systémoch a rastúcim rizikom chorôb a smrti, zahŕňa akumuláciu poškodenia molekúl, buniek a tkanív (Alavez a kol., 2011; Bartke a kol., 2019; Engeet al., 2017). Identifikácia funkčných materiálov alebo chemikálií zabraňujúcich biologickému zhoršovaniu s cieľom oddialiť proces starnutia a predĺžiť životnosť je nepochybne kľúčová (Bar-ardo et al., 2017; Kapahi et al., 2017). Predchádzajúce štúdie uvádzajú, že čierny čaj, najrozšírenejší čaj na svete, má významné aktivity, ktoré odďaľujú starnutie (Cameron a kol., 2008; Fei a kol., 2017; Kumar a Rizvi, 2017; Naumovski a kol., 2019 Peng a kol., 2009; Xiao a kol., 2020). Doplnok stravy s výťažkami z čierneho čaju účinne predlžuje životnosť pokusných zvierat, ako sú červy (Feet al., 2017), ovocné mušky (Peng et al., 2009; Site al., 2011), myši (Site al., 2011 Xiao et al., 2020) a potkany (Kumar a Rizvi, 2017).

Je dobre známe, že extrakty z čierneho čaju obsahujú hlavne dva druhy fytochemikálií, a to katechíny a theaflavíny (TF) (Cameron a kol., 2008; Kondo a kol., 2019; Li a kol., 2013), z ktorých posledný sa vyrábajú z katechínov endogénnou polyfenoloxidázou a peroxidázou počas oxidačného procesu pri výrobe čierneho čaju (Li et al., 2013). Séria štúdií identifikovala úlohu katechínov proti starnutiu prostredníctvom zlepšenia oxidačného stresu a zápalu súvisiaceho s vekom a zníženia poškodenia tkaniva (Cameron a kol., 2008; Niu a kol., 2013; Peng a kol., 2009; Si a kol. 2011; Waaner a kol., 2015). Funkčné štúdie o príspevkoch TF k starnutiu však výrazne zaostávajú za štúdiami na katechínoch, pretože je ťažké extrahovať dostatočné množstvo TF z listov čierneho čaju na lekárske štúdie (Takemoto a Takemoto, 2018). Nedávno bolo vyvinutých niekoľko biosyntetických metód na masovú produkciu TF (Takemoto a Takemoto, 2018), čo umožňuje preskúmať presné biologické účinky TF a základné regulačné mechanizmy.

Nedávno narastajúce súbory údajov zdôraznili kľúčové úlohy čriev pri starnutí a modulácii dĺžky života (Guo a kol., 2014; Jji a kol., 2019; Maynard a Weinkove, 2018; Rothenberg a Zhang, 2019; Salazar a kol. ,2018). Črevný epitel, ktorý pôsobí ako selektívna bariéra, umožňuje absorpciu živín, iónov a vody a obmedzuje kontakt hostiteľa so škodlivými entitami vrátane mikroorganizmov, potravinových antigénov a environmentálnych toxínov (Capo et al., 2019; Nicholson et al. , 2012; Ryu a kol., 2010). Ako tkanivo s vysokým obratom u jednotlivcov poskytuje črevný trakt najlepšie životné prostredie pre symbiotické mikroorganizmy vrátane prirodzených anaeróbnych podmienok, dostatok živín a vhodnú teplotu a pH.

Obrázok 1. Theaflavíny predlžujú životnosť Drosophila a zlepšujú schopnosť šplhania

(A a B) Samice ovocných mušiek boli kultivované so štandardnými potravinami, ktoré boli doplnené 1 mg/ml alebo 2,5 mg/ml theaflavínov (TF) alebo bez TF ako bazálnych. Muchy boli prenesené do čerstvých fľaštičiek obsahujúcich nové médium každý druhý deň a mŕtve muchy boli hodnotené počas dospelého života, boli analyzované a zobrazené krivky prežitia (A) a priemerná dĺžka života (B) samíc múch.

(Cand D) Samice w18 boli kŕmené štandardnými krmivami pre Drosophila (označované ako bazálne) alebo krmivami doplnenými o 1 mg/ml alebo 2,5 mg/ETF. Šesť nezávislých skupín múch v uvedenom veku (10 dní, 30 dní, 40 dní a 50 dní, v uvedenom poradí) bolo podrobených testom café (C) a fluoresceínového kŕmenia (D). hodnotu, tvoriace niky obsadené špecifickými druhmi baktérií v tele (Bonfini et al., 2016; Buchon et al., 2013; Nicholson et al., 2012). Medzitým tieto symbiotické mikroorganizmy a ich metabolity tiež priamo alebo nepriamo ovplyvňujú spracovanie živín; trávenie a vstrebávanie; energetická bilancia; imunitná funkcia; vývoj a dozrievanie gastrointestinálneho traktu; a mnoho ďalších dôležitých fyziologických aktivít (Bonfini et al., 2016; Broderick, 2016; Maynard a VVeinkove, 2018; Nicholson et al., 2012). Vzájomne výhodný vzťah medzi týmito dvoma symbiontmi môže udržiavať stabilitu a dynamickú rovnováhu črevného mikroekosystému (Bonfini a kol., 2016; Brodeerick, 2016; Broderick a kol., 2014; Guo a kol., 2014; May-nard a Weinkove, 2018; Nicholson a kol., 2012).

cistanche môže proti starnutiu

Séria štúdií ukázala, že vrodená imunitná odpoveď je rozhodujúca pre udržanie homeostázy črevnej mikrobioty a je zachovaná od bezstavovcov po stavovce (Guillouet al., 2016; Guo a kol., 2014; Ryu a kol., 2006, 2010; Vijay- Kumar a kol., 2010). V Drosophila sa na vrodených imunitných odpovediach podieľajú dve hlavné signálne dráhy, a to Toll a imunitná nedostatočnosť (Imd) (Lu a kol., 2020; Myllymakiet al., 2014; Valanne a kol., 2011). Je pozoruhodné, že dráha Drosophila Toll zdieľa podobnosti s cicavčím receptorom interleukínu-1 (IL-1R) a dráhami Toll-like receptora (TLR) závislými od MyD{11}}, zatiaľ čo dráha Imd je podobná k dráhe receptora tumor nekrotizujúceho faktora (TNFR) a TRIF-dependentnej TLR dráhe u cicavcov (Imler, 2014; Myllymaki et al., 2014; Valanne et al., 2011). Tieto dve dráhy kontrolujú expresiu antimikrobiálnych peptidov (AMP) prostredníctvom aktivácie NF-KB transkripčných faktorov (Imler, 2014; Myllymaki a kol., 2014; Valanne a kol., 2011).bioflavonoidySignálna dráha Imd je normálne aktivovaná gramnegatívnou bakteriálnou infekciou a vedie k expresii ďalšej sady AMP, ako je Attacin, Cecropin a Diptericin (Kleino a Silverman, 2014; Myllymaki et al., 2014). Expresia týchto AMP vyžaduje receptor peptidoglykánového rozpoznávacieho proteínu (PGRP)-LC v dráhe Imd a signálovo závislé štiepenie a jadrovú translokáciu Relish, transkripčného faktora rodiny NF-kB (Kleino a Silverman, 2014; Myllymaki et al., 2014). Nedávna štúdia ukázala, že na aktiváciu dráhy Drosophila Imd po rozpoznaní bakteriálnych peptidoglykánov je potrebná tvorba amyloidu (Kleino et al., 2017). Či sa však tento kondenzát Imd podieľa na iných biologických procesoch, ako je udržiavanie črevnej homeostázy a regulácia starnutia, zostáva veľkou neznámou.

V tejto štúdii sme použili ovocné mušky a myši ako zvieracie modely na skúmanie úloh TF pri kontrole črevnej integrity a starnutia. Ukázali sme, že TF oneskorujú nadmernú proliferáciu črevných kmeňových buniek s nástupom veku, chránia pred dysbiózou črevného mikrobiómu a zabraňujú aktivácii signálnej dráhy Imd, čím sa predlžuje životnosť u Drosophila. Ďalšie mechanické štúdie ukázali, že TF negatívne prispievajú k signalizácii Imd, môže byť skôr blokovaním kondenzácie Imd než jeho ubikvitináciou. Okrem toho sme zistili, že TF sú vysoko účinné pri prevencii kolitídy vyvolanej DSS u myší. Celkovo naše zistenia odhaľujú potenciálnu úlohu TF pri modulácii správania Imd, čo by mohlo byť kľúčovým faktorom v ich pozitívnych príspevkoch k črevnej homeostáze a predĺženiu životnosti.

VÝSLEDKY

Doplnok stravy theaflavínov predlžuje životnosť Drosophila

Aby sme preskúmali, či theaflavíny (TF) ovplyvňujú starnutie a dĺžku života u Drosophila, vychovali sme samice múch w'118 štandardnými krmivami pre chov, ktoré boli doplnené 1 mg/ml alebo 2,5 mg/ml TF a vykonali sme testy životnosti, ako už bolo opísané (Ji et al. .,2019). Muchy kŕmené stravou doplnenou rovnakým objemom rozpúšťadla TF (H2O) boli považované za kontroly. Ako je znázornené na obrázku 1A, diétny prídavok relatívne nízkej koncentrácie TF (1 mg/ml) mierne predĺžil životnosť ovocných mušiek a vysoká koncentrácia TF (2,5 mg/ml) mala výrazne pozitívny vplyv na predĺženie životnosti. Pozoruhodné je, že dlhodobé vychytávanie vysokých koncentrácií TF (2,5 mg/ml) viedlo k približne 8-dňovému zvýšeniu priemernej dĺžky života samíc múch (obrázok 1B), čo naznačuje prospešnú úlohu TFsínu pri regulácii dlhovekosti u Drosophila. Podobné výsledky sa získali, keď sme testovali potenciálne účinky ďalších TF na životnosť samcov múch w'*'''8 (obrázky S1A a S1B).

Obrázok 2. Theaflavíny zabraňujú dysfunkcii čriev a mikrobiotickej dysbióze u Drosophila

(A a B) Strata črevnej integrity bola testovaná testom Smurftest vo veku 10 dní, 30 dní, 40 dní a 50 dní u dospelých žien w18. Príklady non-Smurf a Smurf boli uvedené v (A). Percentá Šmolkov v rôznych uvedených skupinách boli analyzované a uvedené v (B).

(C) Bakteriálne množstvo uložené pomocou qPCR génu 16S rRNA v ženských súboroch w18 z rôznych uvedených skupín sa analyzovalo a ukázalo.

(DF) Uskutočnilo sa sekvenovanie komenzálneho bakteriálneho génu 16S rRNA. Boli analyzované a prezentované podiely bakteriálnych taxónov (D), tepelná mapa hlavných mikrobiálnych taxónov (F) a relatívna abundancia gamaproteobaktérií (F).

Obrázok 2. Pokračovanie

(G a H) Črevá boli vyrezané z uvedených samíc múch kŕmených 2,5 mg/ml TF alebo bez TF ako kontrola vo veku 10 dní a 40 dní. Obrázky sklíčok stredného čreva boli zachytené fluorescenčnou mikroskopiou pre signály GFP (G). Štatistická analýza ukazujúca percentá GFP-pozitívnych buniek je uvedená v (H).

(I) Črevá z uvedených samíc múch boli odobraté a podrobené testom imunofarbenia s použitím protilátok proti fosforylovanému histónu 3(pH3). Analyzovali sa a ukázali štatistické výsledky kvantifikujúce pH3-pozitívne bunky na črevo. V B, C, H a sú údaje analyzované obojstranným Studentovým testom a sú uvedené ako priemer ± SEM.NS, nevýznamné,*p<><0.001. see="" also="" figure="">

Je známe, že ETF majú horkú chuť a spotrebitelia vrátane ovocných mušiek a cicavcov sa zvyčajne vyhýbajú horkým potravinám (Yamazaki et al., 2014; Yang et al., 2018). Potom sme sa snažili objasniť, či TF môžu ovplyvniť príjem potravy Drosophila, pretože predchádzajúce štúdie preukázali, že diétne obmedzenie vedie k predĺženiu života u stavovcov aj bezstavovcov (Hudry a kol., 2019; Kapahi a kol., 2017; Moger-Reischer a kol. ., 2020). Aby sme to dosiahli, najprv sme vykonali test kaviarne, široko používaný prístup na priame a presné meranie rýchlosti podávania pomocou kapilárneho podávača obsahujúceho tekuté médium, ako už bolo opísané (Ja et al., 2007). Ako je znázornené na obrázkoch 1C a S1C, diétne doplnky TF (1 mg / ml a 2, 5 mg / ml, v danom poradí) takmer nezmenili spotrebu potravy testovaných múch. Aby sme to ďalej potvrdili, potom sme použili fluoresceín ako indikátor potravy (Rera a kol., 2012; Wang a kol., 2005) a vykonali sme test prirodzeného kŕmenia (Danilov a kol., 2015). Ako je znázornené na obrázkoch 1D a S1D, nepodarilo sa nám pozorovať žiadne korelácie medzi suplementáciou TF a hladinami príjmu potravy. Celkovo naše výsledky naznačujú, že prospešné úlohy TF pri predlžovaní dĺžky života nemusia byť spôsobené diétnym obmedzením u Drosophila.

Na ovplyvnenie energetickej homeostázy Drosophila sú potrebné ďalšie TF

Predpokladá sa, že polyfenoly čierneho čaju majú pozitívny vplyv na prevenciu obezity inhibíciou trávenia, absorpcie a príjmu lipidov a sacharidov, čím sa znižuje príjem kalórií (Cameron et al., 2008). Potom sme sa snažili objasniť, či predĺženie životnosti LDrosophila regulované TF je spôsobené zmenami v absorpcii živín a skladovaní energie. Aby sme to urobili, najprv sme skúmali hladiny triacylglyceridu (TAG), jedného z najčastejšie detegovaných lipidových metabolitov (Tennessen et al., 2014), u samíc múch počas celého ich života, ako už bolo opísané (Fan et al., 2017).kúpiť cistancheAko je znázornené na obrázku 1E, liečba TF sotva ovplyvnila celkové množstvo TAG v rôznych vekových bodoch. Keď sme ďalej detegovali obsah glykogénu a kvantifikovali cirkulujúce sacharidy (glukózu a trehalózu) pomocou súpravy Hexokinase (Li et al., 2018; Ten-nessen et al., 2014), výsledky ukázali, že medzi vzorkami s alebo bez liečby TF (obrázky 1F-1H). Je potrebné poznamenať, že konzistentné výsledky sa získali, keď sme skúmali metabolické fenotypy využívajúce samčie w118 ako zvieracie modely (obrázky S1E-S1H). Súhrnne tieto údaje naznačujú, že potravinové doplnky TF sú nevyhnutné na reguláciu homeostázy sacharidov a energie počas celého života Drosophila.

Ďalej sme skúmali kinetiku prirodzeného starnutia Drosophila pri diétnom zásahu TF vykonaním rýchlych iteračných negatívnych testov geotaxie (RING), ako už bolo opísané (Dilliane a kol., 2017; Staats a kol., 2018). Ako je znázornené na obrázkoch 1l, 1J, S1l a S1J, indexy stúpania vo veku (40 dní) w1118 (ženy aj muži) v skupinách suplementácie TF sa výrazne zlepšili (takmer 12 percentný nárast u žien a takmer 18 percentný nárast u mužov ) v porovnaní s kontrolnými skupinami, čo naznačuje, že TF potenciálne zlepšujú lezenie Drosophila a lokomotorické aktivity.

Theaflavíny zabraňujú presakovaniu čriev a dysbióze mikroorganizmov

Predchádzajúce štúdie ukázali, že pohybové aktivity a dĺžka života ovocných mušiek vo veľkej miere súvisia so zdravotným stavom hostiteľa, ako je pohlavie, strava, vek a genotyp (Caruso et al., 2013; Heintz a Mair, 2014). Nedávno niekoľko dôkazov dokázalo, že zachovanie homeostázy intestinálnej signalizácie Imd zlepšuje integritu čreva tým, že bráni nadmernej proliferácii ISC a prekurzorových buniek a odďaľuje črevnú epiteliálnu dysfunkciu s nástupom veku, čo zase pozitívne prispieva k zdraviu organizmu (Clark et al. , 2015; Guo a kol., 2014). U Drosophila je skrátená dĺžka života úzko spojená s dysfunkciou črevnej epiteliálnej bariéry a vývoj integrity tejto bariéry počas starnutia vedie k predĺženiu životnosti (Clark et al., 2015; Guoet al., 2014; Jet al., 2019). Snažili sme sa teda určiť, či TF menia integritu čreva vykonaním testu Smurf, čo je metóda, ktorá bola opísaná skôr (Clark a kol., 2015; Rera a kol., 2011). Ako je znázornené na obrázku 2A, testované ovocné mušky, v ktorých boli modré farbivá obmedzené na tráviaci trakt, boli označené ako nešmolkové (ľavý panel na obrázku 2A). Ak boli pozorované modré farbivá

Obrázok 3. Pokračovanie

(EG) Črevá sa izolovali zo súborov ženského w1118 kŕmených 2,5 mg/ml TF alebo bez TF ako bazálnych vo veku 10 dní, 30 dní, 40 dní a 50 dní. Celková RNA bola extrahovaná a podrobená ART-PCR analýzam. Hladiny expresie mRNA diptericínu (F), atacínu (F) a cekropínu A1(G) sa analyzovali a ukázali. V EG sú dáta analyzované obojstranným Studentovým t-testom a sú znázornené ako priemer ± SEM.NS, nevýznamné, *p<><><0.001. see="" also="" figure="">

unikajúci z čriev do brucha, hostitelia sa počítali ako Šmolko (pravý panel na obrázku 2A). V súlade s predchádzajúcimi zisteniami (Clark et al., 2015) sa podiely Šmolka počas starnutia postupne zvyšovali (obrázok 2B). Zaujímavé je, že podiel dospelých Šmolkov sa výrazne znížil v skupinách kŕmených TF v porovnaní s kontrolami rovnakého veku u oboch žien (z 8,2 percenta na 3,7 percenta, z 19,4 percenta na 15,6 percenta a z 35,4 percenta na 27,1 percenta v skupinách vo veku 30 dní, 40 dní a 50 dní, v uvedenom poradí, obrázok 2B) a dospelí muži (od 2,7 percenta do 0,9 percenta , od 6,9 percenta do 0,9 percenta a od 8,3 percenta do 2,7 percenta vo veku 30 rokov dní, 40 dní a 50 dní, v tomto poradí, obrázok S2A), čo naznačuje, že TF môžu zabrániť dysfunkcii črevnej bariéry u starých ovocných mušiek. Za zmienku stojí, že sme pozorovali väčšie zníženie percenta Šmolkov u mužov (znížené takmer o 65,8 percenta , 86,9 percenta a 67,4 percenta vo veku 30 dní, 40 dní a 50 dní, v uvedenom poradí) ako vo veku -zhodné samice (znížené o takmer 54,1 percenta, 19,5 percenta a 23,3 percenta vo veku 30 dní, 40 dní a 50 dní, v uvedenom poradí), čo naznačuje, že TF môžu hrať lepšiu úlohu pri znižovaní presakovania čriev u samcov múch.

Predchádzajúce štúdie naznačili, že dysfunkcia črevnej bariéry s nástupom veku často koreluje s dysbiózou črevnej mikroflóry (Clark a kol., 2015; Guo a kol., 2014). Skúmali sme teda črevné komenzálne bakteriálne zloženie po doplnení TF. Najprv sme použili univerzálne priméry a vykonali sme kvantitatívne PCR experimenty na kvantifikáciu hladín bakteriálneho génu 16S rRNA. Ako je znázornené na obrázku 2C, vo vekových rezoch celková bakteriálna populácia z intervenčných skupín TF vykazovala výrazné zníženie (takmer 45 percent -55 percent) v porovnaní s kontrolami, čo naznačuje, že suplementácia TF pravdepodobne zabraňuje expanzii mikrobioty počas starnutia . Potom sme vykonali metagenomiku, aby sme podrobne preskúmali zmeny v črevnej mikrobiálnej komunite spôsobené doplnkom stravy TF. Ako je znázornené na obrázkoch 2D-2F, podiel gamaproteobaktérií, ktorých expanzia je úzko spojená so zlyhaním črevnej bariéry (Clark et al., 2015), bol zjavne znížený suplementáciou TF vo starých črevách ( takmer 7-percentné zníženie), čo znamená, že TF pozitívne prispievajú k homeostáze črevnej mikroflóry počas starnutia u Drosophila.

Theaflavíny zlepšujú črevnú proliferatívnu homeostázu u Drosophila

We further examined the intestinal integrity of flies that were treated with or without TFs. First, we employed the widely-used P{Esg-Gal4}/P{Uasp-GFP};{Tub-Gal80*s}strain(referred to as esgts>GFP), v ktorom boli črevné kmeňové bunky (ISC) a progenitorové bunky označené GFP. Ako je znázornené na obrázkoch 2G a 2H, počet GFP-pozitívnych buniek v intervenčných skupinách TF vo veku 40 dní (počítalo sa 20 čriev) bol oveľa nižší (takmer 29,7 percenta) ako v kontrolách zodpovedajúceho veku (takmer 47,6 percent a Počítalo sa 19 čriev), čo naznačuje, že TF môžu inhibovať nadmernú proliferáciu ISC s nástupom veku. Okrem toho sme uskutočnili experimenty s imunofarbením s použitím protilátok proti fosfo-histónu 3 (pH3), špecifickému markeru pre mitotické bunky v tkanivách čriev. Pozorovali sme menej pH3-pozitívnych buniek v črevách u starších dospelých s doplnkom TF (priemerný počet bol 20,6) ako u tých z kontrol (priemerný počet bol 39,5, obrázok 2). Celkovo naše výsledky naznačujú, že výživové doplnky s TF zlepšujú intestinálnu proliferatívnu homeostázu a bránia dysplázii mikroflóry s nástupom veku, čím sa oneskoruje starnutie u Drosophila.

Theaflavíny negatívne modulujú črevné Imd signály

Aby sme preskúmali základné molekulárne mechanizmy, ktorými TF pozitívne prispievajú k homeostáze čreva Drosophila, vykonali sme analýzu RNA-seq s použitím črevných vzoriek zodpovedajúcich veku od dospelých žien w1118 liečených s TF alebo bez nich. Analýzy fragmentov na kilobázu na milión (FPKM) naznačili, že celkové vzorce génovej expresie boli medzi týmito dvoma experimentálnymi skupinami podobné (obrázok 3A). Ďalšia analýza diferenciálnej expresie však identifikovala celkom 229 odlišne exprimovaných génov, z ktorých 99 bolo upregulovaných a 126 bolo downregulovaných (obrázok 3B). Je zaujímavé, že analýza génovej ontológie týchto génov odhalila, že dráha imunitnej odpovede bola vysoko zmenená doplnkom stravy s TF (obrázok 3C).

U Drosophila sa ukázalo, že vrodené imunitné signálne dráhy hrajú dominantnú úlohu pri regulácii črevnej homeostázy a dlhovekosti s nástupom veku (Clark a kol., 2015; Guo a kol., 2014). Potom sme sa zamerali na skúmanie vzorcov expresie antimikrobiálnych peptidov (AMP) po prúde vrodených imunitných signálov. Ako je znázornené

Obrázok 4. Pokračovanie

(D) Purifikované Imd proteíny sa inkubovali s rôznymi koncentráciami TF (50 uM, 100 uM a 200 uM, v danom poradí) pri teplote miestnosti počas 5 minút. Vzorky sa potom podrobili fluorescenčnej emisnej spektrálnej analýze s použitím uvedených vlnových dĺžok (excitácia pri 430 nm, emisia od 450 nm do 550 nm so šírkou štrbiny 5 nm). Vzorka bez TF bola použitá ako základná kontrola.

（E and F）Lysates of guts from NP11>Muchy Myc-Imd boli pripravené a inkubované s TF (100 μM) pri teplote miestnosti počas 30 minút. Na analýzu agregátov proteínov Imd sa uskutočnili testy SDD-AGE (horný panel v E) a SDS-PAGE (dolný panel v E). Tubulín sa použil ako kontrola plnenia.cistanchNa kvantifikáciu kondenzátov Imd v rôznych vzorkách sa uskutočnila denzitometrická analýza a výsledky boli uvedené v (F). (G) Reprezentatívny chromatogram vzorky TF.

(H a I) Purifikované proteíny Flag-Imd sa inkubovali s TF, TF1, TF2a, TF2b alebo TF3 (100 μM pre každú vzorku) alebo s rovnakým objemom pufra (kontrola) pri teplote miestnosti počas 30 minút, ako je uvedené. Vzorky sa potom podrobili testom SDD-AGE (horný panel v H) a SDS-PAGE (dolný panel v H), aby sa určili agregačné vzory Imd. Uskutočnila sa denzitometrická analýza na kvantifikáciu kondenzátov Imd v rôznych vzorkách a znázornená v (). V C, F a I sú údaje analyzované obojstranným Studentovým testom a znázornené ako priemer ± SEM.***p< 0.001.="" see="" also="" figure="">

na obrázku 3D sú gény AMP riadené dráhou imunitnej nedostatočnosti (Imd), vrátane diptericínu A (DptA), diptericínu B (DptB), atacínu A (AttA), cekropínu A1 (CecA1), cekropínu A2 (CecA2) a cekropínu C (Cece), boli významne znížené (o 39,4 percenta, 72,3 percenta, 10,5 percenta, 86,5 percenta, 99,8 percenta a 36,1 percenta, v uvedenom poradí) v skupinách liečených TF v porovnaní s kontrolnými skupinami. Aby sme ďalej potvrdili výsledky získané z analýzy RNA-seq, uskutočnili sme kvantitatívnu reverznú transkripčnú polymerázovú reťazovú reakciu (gRT-PCR), aby sme kvantifikovali relatívne hladiny expresie génov AMP súvisiacich s Imd vo vzorkách čreva Drosophila získaných v štyroch rôznych vekových bodoch. vrátane 10 dní, 30 dní, 40 dní a 50 dní. Ako je znázornené na obrázkoch 3E-3G, hladiny expresie mRNA určitých génov, vrátane diptericínu, atatacínu a cekropínu A1, boli významne znížené (o takmer 35,9 percenta -66,6 percenta) u TF liečených zostarnuté črevá. Súhrnne naše údaje odhalili, že TF potenciálne antagonizovali aktiváciu Imd signálnej dráhy v črevných bunkách Drosophila počas starnutia.

Theaflavíny sú nevyhnutné na transkripčnú reguláciu Imd dráhy alebo ubikvitináciu Imd

Snažili sme sa preskúmať asociáciu medzi TF a Imd a vykonali sme test povrchovej plazmónovej rezonancie (SPR), ako už bolo opísané (Lan et al., 2020). Ako je znázornené na obrázku 4A. TF vykazovali miernu väzbovú afinitu s purifikovaným Imd proteínom pri odhadovanej Kp konštante 8,078 uM. Potom máme tendenciu určiť, ako TF kontrolujú črevnú signálnu dráhu Imd. Na základe výsledkov analýzy transkriptómu z údajov RNA-seq sme zistili, že hladiny expresie kľúčových regulačných faktorov v signálnej dráhe Imd, ako sú PGRP-LC, Imd a Relish, sa liečbou TF takmer nezmenili (obrázok S3A ). Ďalej sme zhromaždili vzorky čriev z múch, ktoré boli podrobené doplneniu stravy s alebo bez TF v rôznom veku, a vykonali sme experimenty qRT-PCR na špecifickú detekciu vzorcov expresie týchto génov. Ako je znázornené na obrázku S3B, hladiny mRNA určitých génov, vrátane effete, faded, tak1, pgrp-Ica, uev1a, bendless, relish, imd, pgrp-sc2, tab2, ird5 Kenny a diap2, boli medzi kontrolnými skupinami podobné. a intervenčné skupiny TF, čo naznačuje, že TF sa nezúčastňujú na regulácii signálov Imd na transkripčnej úrovni.

Ďalej sme skúmali profily ubikvitinácie Imd, pretože predchádzajúce štúdie naznačili, že ubiguitinácia Imd je nevyhnutná pre následnú signálnu transdukciu v dráhe Imd (Myllymaki a kol., 2014; Zhou a kol., 2005). Najprv sme vykonali in vitro test posunu E1 a zistili sme, že ošetrenie TF nemá žiadny zjavný vplyv na enzymatické reakcie E1 a ubikvitínu za vzniku konjugovaného E1 / Ub (obrázok S4A). Okrem toho sme transfekovali bunky Drosophila S2 plazmidmi exprimujúcimi Flag-značený Imd spolu s HA-značeným Ub a potom sme bunky ošetrili s alebo bez TF. Ďalšie testy ubikvitinácie naznačujú, že suplementácia TF sotva ovplyvnila hladiny ubikvitinovaného Imd v kultivovaných bunkách (obrázky S4B a S4C). Na určenie vzťahov medzi TF a ubikvitináciou Imd in vivo sme použili transgénnu muchu P {NP1-Gal4}/P{Uasp-Myc-Imd};P{Tub-Gal80*} (označovanú ako NP1* s > Myc-Imd), v ktorom bol proteín Imd označený Myc vysoko exprimovaný v črevných bunkách (obrázok S4D). Naše experimenty s ubikvitináciou ukázali, že doplnok stravy s TF bol nevyhnutný na moduláciu ubikvitinácie Imd v tkanivách čriev (obrázky S4D a S4E). Celkovo naše výsledky ukázali, že TF negatívne riadia signály Drosophila Imd tým, že neovplyvňujú vzor ubikvitinácie Imd.

Theaflavíny zabraňujú hromadeniu kondenzátu Imd

Nedávna štúdia naznačila, že agregácia Imd je nevyhnutná pre aktiváciu downstream génov v dráhe Imd (Kleino et al., 2017). Potom sme sa snažili preskúmať, či TF regulujú proces

Obrázok 5. Pokračovanie

(F a G) Samice w18 (označované ako imd plus / plus), imd' heterozygotné a homozygotné mutanty (označované ako imd plus /- a imd-/-, v uvedenom poradí) boli chované v štandardnom krmive pre Drosophila (označované ako Basal) alebo doplnenie stravy s 2,5 mg/ml (označované ako TF) a potom boli podrobené testu životnosti Krivka prežitia (F) a priemerná dĺžka života (G) boli analyzované a znázornené.

V a F sa na štatistickú analýzu použil test Log Rank. V BE sa na štatistickú analýzu použil obojstranný Studentov t-test a údaje sú sh ako priemer ± SEM. NS, bezvýznamné, *s<0.05, **p="" <="" 0.01,=""><0.001. see="" also="" figure="">

Imd tvorba agregátov. Najprv sme purifikovali proteíny Imd označené Myc z kultivovaných buniek S2 a inkubovali proteíny s rôznymi koncentráciami TF (obrázok 4B). Je zaujímavé, že sme zistili, že TF výrazne zabránili agregácii Imd (znížené o 81,7 percenta -89,7 percenta, obrázky 4B a 4C), ako naznačujú naše testy elektroforézy na semidenaturačnom detergente na agarózovom géli (SDD-AGE). Na potvrdenie tohto zistenia sme ďalej vykonali väzbové testy tioflavín-T a získali konzistentné výsledky (obrázok 4D). Nakoniec sme vychovali transgénne muchy NP1ts > Myc-Imd, ktoré boli podrobené doplnkom stravy s TF alebo bez nich a odobrali sme vzorky čriev od starších dospelých. Experimenty SDD-AGE naznačili, že agregácia Imd bola výrazne znížená TF v črevných bunkách (znížená o 16,7 percent -22 percent, obrázky 4E a 4F).

Aby sme určili, ako TF prispievajú k riadeniu zostavy kondenzátu Imd, podrobili sme TF analýze HPLC a zistili sme, že obsahujú hlavne štyri druhy monomérov (obrázok 4G), konkrétne theaflavín (TF1), theaflavín 3-O-galát ( TF2a), theaflavín 3'-O-galát (TF2b) a theaflavín 3,3'-di-O-galát (TF3), ktoré boli v súlade s predchádzajúcimi správami (Li et al., 2013; Takemoto a Takemoto, 2018) . Potom sme inkubovali každú z týchto chemikálií s purifikovaným Imdproteínom a vykonali sme experimenty SDD-AGE. Ako je znázornené na obrázkoch 4H a 4l, ošetrenie všetkých týchto monomérov TF viedlo k výraznému zníženiu (o 59,5 percenta, 60,9 percenta, 58,4 percenta, 58,2 percenta a 55,8 percenta pre TF, TF1, TF2a, TF2b a TF3, v tomto poradí) v súhrnné úrovne Imd. Naše výsledky spoločne naznačujú, že TF negatívne regulujú signálnu dráhu Drosophila Imd pravdepodobne riadením správania kondenzátov Imd.

Theaflavíny predlžujú životnosť Drosophila spôsobom závislým od Imd

To examine whether TFs prolong Drosophila lifespan depending on their regulatory role in Imd, we specifically knocked down Imd in gut tissues using the transgenic flies P{NP1-gal4)PITub-gal80*}/P{Uasp-imd-IR(KK)} (referred to as Imd RNAi). As shown in Figures 5A and 5B, dietary supplementation of TFs extended the lifespan of controls (elevation of nearly 7.2 days in the mean lifespan), whereas prevention of Imd expression in guts apparently reversed the lifespan extension caused by TFs. Consistent results were obtained when we utilized male Imd RNAi and control flies to perform lifespan assays (Figures S5A and S5B). Further qRT-PCR assays showed that the mRNA expression levels of AMP genes at ages of 10 days, 30 days, 40 days, and 50 days, including diptericin, attacin, and cecropin A1.hardly changed in the gut tissues of Imd RNAi flies(Figures 5C-5E), whereas additional TFs caused reductions of 31%-72.3% in mRNA abundances of these genes in samples from control groups. To confirm these results from Imd RNAi flies, we first performed lifespan assays using w18(control, referred to as imd+/+), imd' heterozygous (referred to as imd+/-), and homozygous(referred as imd-/-)mutant flies. We found that TFs addition extended lifespan and increased mean life longevity of imd+/-flies (elevation of nearly 6.2 days, Figures 5F and 5G). However, this lifespan extension effect by TFs was almost abolished in imd-/-flies (Figures 5F and 5G). Next, we performed lifespan assays utilizing Relish RNAi(NP1's>Relish RNAi and control(NP1ts>plus )muchy. pretože Relish je kľúčovým transkripčným faktorom zodpovedným za expresiu génu AMP v smere Imd (Myllymaki et al., 2014). Ako je znázornené na Fiqures S5C a S5D. diétne pridávanie TF výrazne predĺžilo životnosť kontrolných múch a tomuto predĺženiu životnosti sa významne zabránilo u muchy Relish RNAi. Súhrnne naše údaje naznačili, že výživové doplnky TF pozitívne prispievajú k dĺžke života Drosophila, pravdepodobne v závislosti od črevných Imd signálov.

Aby sme zistili, či sa predĺženie životnosti pomocou TFcill vyskytuje na axenickom pozadí, vykonali sme testy životnosti s použitím žien w1118 v axenických podmienkach. Ako je znázornené na obrázkoch S5E a S5F, pridanie rôznych koncentrácií TF (1 mg / ml a 2, 5 mg / ml) sotva ovplyvnilo pomery úmrtnosti a priemernej dĺžky života u dospelých w18. Pretože axenické podmienky chovu môžu do značnej miery zabrániť hojnej mikroflóre, čím sa obmedzujú signály Imd v rezoch (Clarke al., 2015), naše údaje naznačujú, že TF predlžujú životnosť Drosophila prostredníctvom modulácie vrodených imunitných signálov regulovaných črevnou mikrobiotou.

Obrázok 6. Teaflavíny zmierňujú DSS-indukovanú kolitídu u CD-1 myší

(A) Liečba TF neovplyvnila spotrebu vody u rôznych skupín CD-1 myší.

(BD) Podávanie rôznych koncentrácií TF sondou (1 mg/ml, 2,5 mg/ml a 5 mg/ml) zlepšilo skrátenie hrubého čreva a zväčšenie sleziny spôsobené DSS u CD-1 myší. Boli zobrazené reprezentatívne snímky (B) a štatistické analýzy hrubého čreva (C) a sleziny (D). (E) Podávanie rôznych koncentrácií TF (1 mg/ml, 2,5 mg/ml a 5 mg/ml, v uvedenom poradí) zabránilo presakovaniu čriev vyvolanému DSS u CD{10}} myší. (F a G) Z uvedených skupín myší sa odobrali hrubé črevá. Celková RNA bola extrahovaná a podrobená qRT-PCR testom na detekciu hladín expresie mRNA TNFa(F) a IL-6 (G).

(HL) Hrubé črevá z rôznych skupín myší sa zbierali pozdĺžne a podrobili sa testom farbenia HE. Vzorky sa skúmali mikroskopicky a získali a ukázali sa reprezentatívne obrázky uvedených vzoriek （HL）. Mierka, 40 μm. (MQ') SEM snímky ukazujúce mikrotrichómy hrubého čreva z rôznych indikovaných vzoriek. Mierka, 50 um (MQ) a 4 um (M'-Q').

V CG sú údaje analyzované obojstranným Studentovým testom a zobrazené ako priemer ± SEM.NS, nevýznamné, *p<><><0.001. see="" also="" figure="">

Theaflavíny zmierňujú kolitídu vyvolanú DSS u CD-1 myší

Na ďalšie skúmanie potenciálnej úlohy TF pri udržiavaní črevnej homeostázy u cicavcov sa CD-1 myši použili na vyvolanie kolitídy pomocou dextránsulfátu sodného (DSS). Myšiam boli intragastricky podávané rôzne koncentrácie TF (1 g/l, 2,5 g/l alebo 5 a/l) alebo vody ako kontrola počas štyroch týždňov, po čom nasledovala liečba 2 percentami DSS v pitnej vode počas 7 dní. Aby sme zistili, či TF ovplyvňujú množstvo pitia DSS v rôznych skupinách myší, monitorovali sme pitie myší každý deň. Ako je uvedené vo Fiqure6A, liečba TF je nevyhnutná na ovplyvnenie konzumácie nápojov u myší s kolitídou vyvolanou DSS, myši liečené DSS vykazovali syndróm kolitídy s hnačkou a / alebo hematochéziou, ktorým sa predchádzalo liečbou TF závislou od dávky (obrázky S6A-S6E).cistanche AustráliaOkrem toho intervencia s TF zachránila zníženie dĺžky hrubého čreva spôsobené DSS a zlepšilo zväčšenie sleziny (obrázky 6B-6D).

Potom sme použili dextrán{0}}FITC (FITC-DX) na preskúmanie funkcie črevnej bariéry týchto myší. Ako je znázornené na obrázku 6E, myši zo skupín liečených DSS vykazovali vysokú koncentráciu FITC-DX vo vzorkách krvi, čo naznačuje únik čreva u týchto zvierat, avšak intervencia s TF významne zabránila transportu FITC-DX z tráviacich orgánov do obehového systému (znížené o 56,1 percenta -77,5 percenta, obrázok 6E). Je pozoruhodné, že podávanie TF nezmenilo črevnú permeabilitu myší za normálnych podmienok (obrázok S6F). Pretože zápal hrá kľúčovú úlohu vo vývoji kolitídy na myšom modeli, ďalej sme vykonali experimenty qRT-PCR, ktoré ukazujú, že liečba TF významne znížila expresiu IL-6 a TNF v črevách myší liečených DSS (obrázky 6F a 6G).

Na ďalšiu analýzu patologických zmien v hrubom čreve sme vykonali testy farbenia hematoxylín-eozín (HE). Ako je znázornené na obrázkoch 6H-6L a S6G-S6J, závažné poškodenie epitelu vyvolané DSS sa výrazne zlepšilo liečbou TF v závislosti od dávky. Zobrazovanie týchto črevných vzoriek skenovacím elektrónovým mikroskopom ďalej poskytlo konzistentné výsledky (obrázky 6M-6Q' a S6K-S6N'). Celkovo naše zistenia ukázali, že TF hrajú prospešnú úlohu pri ochrane funkcie črevnej bariéry u hmyzu aj cicavcov.

DISKUSIA

V tejto štúdii sme skúmali fyziologické funkcie TF pri modulácii črevnej homeostázy a dlhovekosti a základných molekulárnych mechanizmov. Ukázali sme, že suplementácia stravy s TF pozitívne prispieva k prevencii dysbiózy črevnej mikroflóry s nástupom veku a oddialeniu dysfunkcie črevného epitelu, čím sa predlžuje životnosť Drosophila. Naše in vitro a in vivo mechanické štúdie odhalili, že TF pravdepodobne hrajú negatívnu úlohu pri kontrole signálnej dráhy Imd blokovaním koalescencie Imd. Okrem toho sme zistili, že kolitída vyvolaná DSS môže byť účinne zmiernená suplementáciou TF u CD-1 myší. Naše výsledky podporujú názor, že TF výhodne prispievajú k črevnej homeostáze u bezstavovcov aj stavovcov.

Doplnok stravy s theaflavínmi predlžuje životnosť Drosophily

Konzumácia čaju je celosvetovo populárna a je na druhom mieste po spotrebe vody (Rothenberg a Zhang, 2019). Početné štúdie sa zamerali na fyziologické funkcie často prostredníctvom experimentálnych aj klinických prístupov (Cameron a kol., 2008; Niu a kol., 2013; Peng a kol., 2009; Rothenberg a Zhang. 2019; Spindleret al., 2013; Takemoto a Takemoto, 2018; Unno a kol., 2020; Zhou a kol., 2020. Bolo dokázané, že čaj prospieva zdraviu znížením hladín lipidov a prostredníctvom účinkov proti obezite a hlavnými funkčnými zlúčeninami v čaji sú katechíny, najmä epigalokatechín galát (EGCG) (Abbas a Wink, 2009; Modernelli a kol., 2015; Niu a kol., 2013; Wagner a kol., 2015; Xiong a kol., 2018). Predchádzajúce štúdie tiež ukázali, že zelený čaj a čierny čaj môže predĺžiť zdravie a životnosť ovocných mušiek (Site al., 2011; Wagner a kol., 2015), červov (Fei a kol., 2017; Xiong a kol., 2018) a potkanov (Imran a kol. .,2018; Niu et al.2013). a hlavným regulačným mechanizmom je účinná prevencia oxidačného stresu pomocou EGCG prostredníctvom modulácie ROSsignálov.cistanche výhody,Či však TF, ako charakteristické „zlaté“ zlúčeniny v čiernom čaji, zohrávajú úlohu pri regulácii starnutia a dĺžky života, zostáva veľkou neznámou. Táto štúdia poskytuje presvedčivé dôkazy naznačujúce, že intervencia TF je nevyhnutná na ovplyvnenie príjmu potravy a dlhodobé prijímanie TF prostredníctvom stravy výrazne predlžuje životnosť u samcov aj samíc ovocných mušiek. Tieto zistenia poskytujú usmernenia pre ďalšie štúdie o funkciách TF v dlhovekosti cicavcov.

Theaflavíny zlepšujú dysbiózu mikroflóry s nástupom veku a podporujú črevnú homeostázu Progresívna nerovnováha proliferatívnej homeostázy a regeneračnej kapacity je charakteristickým znakom starnutia a chorôb súvisiacich s vekom (Clark et al., 2015; Heintz a Mair, 2014; Maynard a Weinkove, 2018; a kol., 2012). Chronický zápal je spojený so stratou homeostázy a zvýšeným výskytom rakoviny u starnúcich organizmov (Bartke a kol., 2019; Kapahi a kol., 2017; Xiao a kol., 2020). Toto je obzvlášť významné v bariérovom epiteli, ako je črevný epitel (Guo et al., 2014; Maynard a Weinkove, 2018). S modelom vývoja dysplázie súvisiacej s vekom v starnúcom čreve sme preukázali, že zlepšenie interakcií hostiteľ-komenzálnych v epiteli starnúcej bariéry by mohlo podporiť zdravie a dĺžku života. Použili sme množstvo neinvazívnych prístupov na testovanie črevnej funkcie a dynamiky mikrobioty počas starnutia. Po prvé, test Smurf ukázal pozitívnu úlohu TF pri regulácii dysfunkcie epitelovej bariéry počas starnutia. Potom test imunofarbenia s použitím niekoľkých transgénnych múch odhalil, že TF oneskorili nadmernú proliferáciu ISC a obrat diferencovaných buniek. Nakoniec sekvenovanie mikrobiómu naznačilo, že TF znižujú expanziu črevnej komenzálnej mikroflóry s nástupom veku. Tieto výsledky silne naznačujú, že TF hrajú kľúčovú úlohu pri oddialení procesu starnutia hostiteľa udržiavaním homeostázy čriev.

Theaflavíny zmierňujú nadmerné imunitné reakcie v čreve negatívnou reguláciou Imd signalizácie

Bolo navrhnuté, že je potrebné udržiavať jemnú rovnováhu medzi črevnou imunitnou funkciou a mikrobiotou, aby sa zabezpečila dlhodobá homeostáza bariérového epitelu (Guo et al., 2014; Maynard a Weinkove, 2018). Predchádzajúce štúdie tiež ukázali, že chronický nadmerný zápal v čreve je spojený s dysfunkciou bariérového epitelu súvisiacou s vekom a je charakteristickým znakom starnutia (Clark a kol., 2015; Guo a kol., 2014; Ji a kol., 2019) . Udržiavanie zdravej komenzálnej populácie zachovaním vrodenej imunitnej homeostázy v takomto epiteli je teda sľubným prístupom k podpore zdravia a dlhovekosti (Bonfini a kol., 2016; Broderick, 2016; Clark a kol., 2015). Preskúmať molekulárne mechanizmy pomocou ktoré TF oneskorujú starnutie, vykonali sme analýzu RNA-seq pomocou pitvaných čriev s liečbou TF alebo bez nej. Naše údaje naznačujú, že skupina génov vysoko exprimovaných v črevách kontrolných ovocných mušiek v porovnaní so skupinou zvierat liečených TF bola obohatená o gény klasifikované ako gény „imunitnej odpovede“. Ďalšia bioinformatická analýza a testy get-PCR odhalili, že expresia génov AMP súvisiacich s Imd bola dramaticky inhibovaná pridaním TF do stravy. Výsledky experimentov na myšiach CD-1 využívajúcich DSS na vyvolanie abnormálnych imunitných reakcií v črevách ďalej potvrdili názor, že TF fungujú ako ochrancovia pred zápalom čriev.

Theaflavíny potláčajú signály stanovením amyloidnej zostavy Imd

Ako TF negatívne regulujú signálnu dráhu Imd? Na základe výsledkov transkriptómovej analýzy sme zistili, že TF sú nevyhnutné na transkripčnú reguláciu kľúčových faktorov v signálnej dráhe Imd. Zaujímavé je, že sme pozorovali zjavnú väzbovú afinitu TF s purifikovaným proteínom Imd testom SPR, čo naznačuje pravdepodobnosť, že TF môžu hrať úlohu pri kontrole správania proteínu Imd alebo jeho posttranslačného modifikačného procesu. Predchádzajúce štúdie zdôraznili kľúčovú úlohu ubikvitinácie pri prenose signálu Imd (Kleino a Silverman, 2014; Myllymaki et al., 2014) a prevencia ubikvitinácie Imd vedie k hlbokému vypnutiu Imd signalizácie (Myllymaki et al., 2014; Thevenon a kol., 2009). Naše in vitro a in vivobikvitinačné testy však ukázali, že TF sotva ovplyvňujú ubikvitinačný vzor Imd. Nedávna štúdia ukázala, že na aktiváciu dráhy Drosophila Imd po rozpoznaní bakteriálnych peptidoglykánov je potrebná tvorba amyloidu (Kleino et al., 2017). Je zaujímavé, že naše testy SDD-AGE a ThTbinding naznačujú, že koalescencii Imd bránia TF. Prevencia agregácie Imd znížením alebo mutáciou Imd v črevných bunkách zjavne zvrátila priaznivé účinky TF na predĺženie životnosti. Aby sme ďalej potvrdili naše zistenie, bolo by zaujímavé preskúmať, či TF už nie sú funkčné na predĺženie životnosti v ovocných lietadlách, keď je konzervovaný kryptický motív RHIM (cRHIM, aminokyseliny od 118 do 121 h) Imd špecificky vyradený zničený, na základe zistenia, že zločin v Imd je nevyhnutný pre jeho agregáciu a tvorbu amyloidu (Kleino et al., 2017). Naša štúdia však zdôrazňuje kľúčovú úlohu TF pri kontrole črevnej homeostázy a procesu starnutia, možno prostredníctvom modulácie koalescencie Imd. Budúce štúdie by sa mali zamerať na skúmanie, ktoré zvyšky alebo oblasti Imd sú viazané TF a ako táto väzba vedie k prevencii kondenzácie Imd. Naše zistenia v systéme cicavcov navyše ukázali, že TF môžu účinne chrániť hrubé črevo pred zápalom spôsobeným exogénnou jedovatou chemikáliou DSS, čo naznačuje zachovanú regulačnú úlohu TF pri udržiavaní črevnej homeostázy. Stojí za to preskúmať, či TF hrajú úlohu pri riadení zostavovania proteínov v tkanivách cicavcov.

Tento článok je extrahovaný z zhongwenxie@ahau.edu.cn