Pokrok vo výskume a aplikácia technológie odtlačkov prstov na čínskej Materia Medica Ⅱ

1.2 Elektrochemický odtlačok prsta

Elektrochémia je jednoduchá analytická metóda založená na elektrochemických vlastnostiach a princípoch testovanej látky, ktorá je lacná, vysoko citlivá a vyžaduje málo spotrebného materiálu [19]. Táto metóda má však určité obmedzenia a v súčasnosti je použiteľná najmä na analýzu čínskych liekov, ktoré obsahujú chemické zložky, ako sú terpény (ako Angelica sinensis), flavonoidy (ako je Scutellaria baicalensis), alkaloidy (ako je Aconite) a antrachinóny ( ako je rebarbora), ktoré môžu podliehať elektrochemickým reakciám.

Wu Di a kol. [20] použili elektrochemický odtlačok prsta na stanovenie optimálneho procesu extrakcie Scutellaria baicalensis Georgi, čo predstavuje dobrú metódu na racionálne využitie čínskych liečivých materiálov. Shi Huihui a kol. [21] použili technológiu chemickej oscilácie Belousov-Chabotinsky (BZ) na skúmanie účinkov teploty, rýchlosti rotácie a počtu liečivých materiálov pridaných k experimentálnym výsledkom a vytvorili primerané experimentálne podmienky na získanie elektrochemického odtlačku Magnolia biondii Pamp. ., poskytujúce novú metódu kontroly kvality Magnolia biondii. Zou Guihua a kol. [22] vytvorili nelineárny elektrochemický odtlačok Codonopsis pilosula (Franch.) Nannf. A Gentiana macrophylla Pall. Elektrochemické odtlačky prstov týchto dvoch liečivých materiálov sú vizuálne odlišné, čo možno použiť ako jednoduchú a účinnú metódu na rozlíšenie Codonopsis pilosula od Gentiana macrophylla. Dai Hongxia a kol. [23] vykonali elektrochemickú analýzu na 20 šaržiach Angelica sinensis (Oliv.) Diels s dobou rastu 1, 2 a 3 roky. V kombinácii s analýzou hlavných komponentov sa zistilo, že elektrochemické odtlačky prstov a parametre oscilácií (vrátane doby indukcie oscilácie, maximálneho potenciálu, životnosti oscilácie, maximálnej amplitúdy, potenciálu zastavenia a počtu cyklov) Angelica sinensis v rôznych obdobiach rastu boli výrazne odlišné, ktoré možno použiť ako základ pre identifikáciu Angelica sinensis v rôznych obdobiach.

ČÍNSKY MATERIÁL LIEČEBNÁ BYLINA CISTANCHE HPLC ODtlačok prstov

1.3 Chromatografický odtlačok prsta

1.3.1 Chromatografia na tenkej vrstve

Chromatografia na tenkej vrstve je chromatografická metóda, ktorá dosahuje separáciu tým, že sa spolieha na rôzne adsorpčné kapacity toho istého adsorbentu pre rôzne chemické zložky. Je to najbežnejšie používaná metóda na identifikáciu tradičnej čínskej medicíny s výhodami ľahkej obsluhy, jednoduchého vybavenia, dobrej citlivosti, vysokej porovnateľnosti, vysokej špecifickosti a ľahkého vývoja farieb. Autentickosť liečivého materiálu môže byť určená prítomnosťou alebo absenciou škvŕn na tenkovrstvovej platni. Hĺbka a veľkosť farby škvŕn môže do určitej miery odrážať kvalitu liečivého materiálu[24]. V súčasnosti vysokoúčinná tenkovrstvová chromatografia(HPTLC) sa často používa na nahradenie vysokoúčinnej kvapalinovej chromatografie (HPLC) na kvalitatívnu a kvantitatívnu identifikáciu produktov tradičnej čínskej medicíny vďaka svojej jednoduchosti, presnosti, nízkej cene, vysokej účinnosti a rýchlosti. HPTLC odtlačky prstov majú lepšie rozlíšenie a dokážu primerane a presne odhadnúť aktívne zložky v lieku v kratšom čase[25]. V dôsledku veľkého množstva ovplyvňujúcich faktorov (vlhkosť, teplota atď.) je však reprodukovateľnosť výsledkov v porovnaní s HPLC slabá. Loescher a kol. [26] použili HPLC a HPTLC na analýzu extraktu z Calendula officinalis a zistili, že HPLC je vhodnejšia na kvantitatívnu analýzu ako HPTLC.

V reakcii na tento účinok Li Xiangjun a kol. [27] vytvorili sériu zodpovedajúcich riešení, vrátane vykonania experimentu vyvolávania v chladničke alebo utesneného zariadenia s regulovanou teplotou na zníženie vplyvu teploty a pridania rôznych pomerov kyseliny sírovej na jeden koniec vyvíjacieho valca na kontrolu vlhkosti.

ČÍNSKY MATERIÁL LEKÁRSKE BYLINA CISTANCHE HPLC LABLE

Patil a kol. [28] stanovili HPTLC odtlačok petroléterového extraktu Catsia tora Linn. Výsledky ukázali, že listy, semená a kvety obsahovali 10, 7 a 11 druhov prísad. Táto metóda sa môže použiť na identifikáciu pravosti Catsia tora Linn. Xiao Honghua a kol. [29] použili tenkovrstvovú chromatografiu kombinovanú s hmotnostnou spektrometriou na stanovenie tenkovrstvovej chromatografickej odtlačky chromónov, organických kyselín a triterpenoidných saponínov v Cimicifuga foetida L. a vykonali analýzu podobnosti, zhlukovú analýzu a analýzu hlavných zložiek na 16 šaržiach Vzorky Cimicifuga z piatich zdrojov, ktoré poskytujú základ pre kontrolu kvality Cimicifuga.

Guzelmeric a kol. [30] použili etylacetát-kyselinu mravčiu-kyselinu octovú-vodu (30:1,5:1,5:3) ako vyvíjacie rozpúšťadlo na vytvorenie HPTLC odtlačku apigenín{10}}glukozidu, aktívneho markera Matricaria chamomilla L., ktorý možno použiť ako hlavný návod na hodnotenie kvality rumančeka. Bazylko a kol. [31] stanovili HPTLC odtlačok piatich flavonoidných zlúčenín, menovite tagetoidov, kvercetínu, flavonoidov, kyseliny kávovej a kyseliny chlorogenovej, z Galinsoga parviflora Cav. Táto metóda sa môže použiť na identifikáciu Galinsoga parviflora. Ethanolic a kol. [32] zistili odtlačok etanolového extraktu Acacia catechu (L. f.) Willd. Pomocou HPTLC sa vykonalo jednoduché a rýchle kvantitatívne vyhodnotenie rutínu a kvercetínu v extrakte. Agatonovic-Kustrin a kol. [33] použili HPTLC na kvantitatívnu analýzu apigenínu, Matricaria a bisabololu v extraktoch z listov a kvetov Pyrethrum parthenium (L.) Smith, Matricaria chamomilla L. a Calendula officinalis L., v kombinácii s metódou DPPH na porovnanie antioxidantu kapacita týchto komponentov. Táto metóda je jednoduchá, rýchla, spoľahlivá a lacná a možno ju použiť aj na skríning antioxidačnej aktivity rastlinných extraktov.

1.3.2 Metóda HPLC HPLC je univerzálna analytická metóda na detekciu rôznych chemických zložiek v tradičnej čínskej medicíne.

Je široko používaný pri detekcii chemických zložiek v tradičnej čínskej medicíne vďaka svojim výhodám vysokého tlaku, vysokej citlivosti, vysokej účinnosti a automatizácie [34]. K tomu možno pripojiť UV detektor, detektor diódového poľa (DAD), elektrochemický detektor, odparovací svetelný detektor atď., ktoré ukazujú svoju nenahraditeľnú prevahu.

Qiao a kol. [35] použili komplexnú dvojrozmernú kvapalinovú chromatografiu s reverznou fázou × reverznou fázou (RP × RP 2DLC) na oddelenie fenolových zlúčenín získaných extrakciou sladkého drievka etylacetátom Glycyrrhiza uralensis Fisch.

311 zlúčenín bolo detegovaných v priebehu 40 minút a štruktúry 21 neznámych zlúčenín boli predbežne charakterizované hmotnostnou spektrometriou, pričom 8 z nich bolo prvýkrát nájdených v lykožrútovi. Výsledky ukázali, že systém RP×RP2DLC/MS má dobrý vplyv na separáciu komplexných extraktov tradičnej čínskej medicíny a na kvalitatívnu analýzu prírodných produktov. Peng Liang a kol. [36] analyzovali flavonoidové zložky 10 šarží Gynostemma pentaphyllum (Thunb.) Spoločnosť Makino stanovila HPLC fingerprint Gynostemma pentaphyllum a kalibrovala 11 spoločných charakteristických píkov. Výsledky analýzy podobnosti ukázali, že najvyššia podobnosť 10 šarží odtlačkov prstov Gynostemma pentaphyllum v porovnaní s referenčným spektrom bola 0,989 a najnižšia bola 0,128, čo naznačuje, že flavonoidové zložky Gynostemma pentaphyllum rôznych pôvodov boli podobné v typu, ale mali výrazné rozdiely v obsahu. Sun a kol. [37] použili metódu HPLC-DAD na analýzu podobnosti chemických zložiek Bupleurum chinense DC. a B. scorzonerifolium Willd. Prvýkrát a zistilo sa, že tieto dva mali 12 spoločných flavonoidových píkov a 4 saponínové píky a súčasne každý mal 6 jedinečných flavonoidových píkov a 5 saponínových píkov. Výsledky ukázali, že táto metóda môže primerane a efektívne odrážať rozdiel v chemických zložkách medzi Bupleurum a Bupleurum chinense. Korelácia medzi nimi je slabá. Preto sa má Bupleurum chinense v klinickej praxi používať opatrne. On a spol. [38] kvantitatívne analyzovali 10 druhov bioaktívnej kyseliny galovej, kyseliny chlorogenovej, kofeínu a katechínov obsiahnutých v 10 dávkach zeleného čaju Ziyang. Vyvinutý HPLC fingerprint bol jednoduchý a spoľahlivý. Li a spol. [39] stanovili HPLC odtlačok šupky granátového jablka. Vybrali 15 charakteristických píkov a vyhodnotili podobnosť 10 šarží šupiek z granátového jablka na 0,968. Tiež oddelili a kvantitatívne analyzovali v nej obsiahnutý punicalagin, kyselinu galovú, katechín, kyselinu chlorogenovú, kyselinu kávovú, epikatechín, rutín a kyselinu ellagovú, čím poskytli spoľahlivú a účinnú metódu na identifikáciu pravosti a kontroly kvality šupky z granátového jablka. Sumathy a kol. [1] použili HPLC kombinovanú s HPTLC a plynovú chromatografiu-hmotnostnú spektrometriu (GC-MS) na určenie chemického zloženia metanolového extraktu Ixora chinensis Lam. HPLC analýza ukázala prítomnosť biochínu A, myricetínu, kvercetínu, rutínu, daidzeínu a formononetínu; kyselina ursolová bola nájdená v odtlačku HPTLC; GC-MS sa našlo 24 fytochemických zložiek; táto kombinovaná kvalitatívna a kvantitatívna metóda môže ľahko vyhodnotiť kvalitu a stabilitu Ixora chinensis Lam. Ge a spol. [40] stanovili UHPLC-DAD odtlačok prsta Radix Angelicae Pubescentis, kvantitatívne analyzovali kumaríny a fenolové kyseliny obsiahnuté v Radix Angelicae Pubescentis a kvalitatívne identifikovali jeho aktívne zložky pomocou hmotnostnej spektrometrie s kvadrupólovým časom letu (Q-TOF-MS). Našli 9 fenolových kyselín, 30 kumarínov a 41 zlúčenín myrhy a adenozínu. Kombinovali metódu diskriminačnej analýzy, aby efektívne a rýchlo rozlíšili 32 šarží Radix Angelicae Pubescentis z rôznych provincií. Táto metóda poskytuje nový nápad na kontrolu kvality Radix Angelicae Pubescentis.

ZOZNAM ŠPECIFIKÁCIÍ CISTANCHE

Yang a kol. [41] použili detektor ultra vysokoúčinnej kvapalinovej chromatografie (UPLC)-DAD a technológiu ESI-MS na získanie odtlačku HPLC a hmotnostnej spektrometrie tabliet Xiaoyanlidan. Analyzovali 113 vzoriek tabliet Xiaoyanlidan a získali 39 píkov, z ktorých 26 bolo z Quassia, 9 z Andrographis paniculata a 4 z Rhizoma Cynoglossi. Pomocou chemometrických metód podobnosti a PCA určili, že piatimi významnými zložkami boli 4-metoxy-5-hydroxyferocefalostomón, andrografolid, dehydroandrografolid, neoandrografolid a kyselina rozmarínová. Zaviedli systematický a komplexný odtlačok prsta na zlepšenie a vyhodnotenie kvality tabliet Xiaoyanlidan. Fan a kol. [42] stanovili HPLC a UPLC odtlačky flavonoidových glykozidov v Lophatherum gracile Brongn. a izolovali nový flavonoidový C-glykozid luteolín 6-C- -kyselina D-glukurónová-(1→2){{19 }}D-pyranoglukozid prvýkrát. Tiež prvýkrát objavili optické izoméry dvoch zlúčenín, flavonoidného flavonoidu a flavonoidného hydroxyflavonoidu. Na rozlíšenie a určenie ich štruktúr použili jednorozmernú a dvojrozmernú nukleárnu magnetickú rezonanciu a hmotnostnú spektrometriu, čím poskytli novú metódu kontroly kvality Lophatherum gracile Brongn. Tshibangu a kol. [43] použili HPLC-DAD v kombinácii s tenkovrstvovou chromatografiou, nukleárnou magnetickou rezonanciou a hmotnostnou spektrometriou na efektívne oddelenie hlavných biflavonoidných zlúčenín GB1, GB2, GB-1a a flavonoidov z Garcinia kola Linn. a potvrdili ich štruktúru , ktorý možno použiť ako rutinnú analytickú metódu pre farmaceutické prípravky. Zhao a kol. [44] stanovili HPLC-UV-MS odtlačok Andrographis paniculata (Burm. f.) Nees, kvantitatívne určili andrografolid a dehydroandrografolid obsiahnutý v Andrographis paniculata a vyhodnotili rozdiely 10 šarží Andrographis paniculata kombináciou analýzy podobnosti a PCA. Táto metóda poskytuje základ pre kontrolu kvality Andrographis paniculata.

Ahmed a spol. [45] použili HPLC na získanie odtlačku živice Commiphora wightii (Arn.) Bhandari a kvantitatívne analyzovali trans- a cis-sterolón, ktorý obsahuje. Zároveň táto metóda dokáže efektívne rozlíšiť 22 šarží živice Commiphora wightii a 9 šarží falšovanej živice, čo možno použiť ako metódu na identifikáciu pravosti živice Commiphora wightii.

2 Biologické odtlačky prstov

Biologické odtlačky prstov sú použitie metód analýzy sekvencií génov na molekulárnej úrovni na rozlíšenie a klasifikáciu geografického rozloženia a zmien v čínskych medicínskych materiáloch vrátane genómových odtlačkov prstov, proteomických odtlačkov prstov[60] a odtlačkov prstov DNA[61]. V súčasnosti existuje menej štúdií o biologických odtlačkoch prstov čínskych liekov ako o chemických odtlačkoch prstov. Najčastejšie používané metódy sú elektroforéza na polyakrylamidovom géli (PAGE), technológia molekulových markerov s náhodnou amplifikovanou polymorfnou DNA (RAPD), polymerázová reťazová reakcia.

(PCR) a iné metódy.

Liu Li a kol.[62] použili markery RAPD v kombinácii s PCR a klastrovou analýzou na účinnú identifikáciu Panax notoginseng (Burk.) f. H. Chen, Panax ginseng CA Mey. a American ginseng Panaxquinquefolium L. Fan Wei et al. [63] prvýkrát vytvorili proteínový odtlačok SDS-PAGE Eupolyphaga sinensis Walker, Bombyx mori Linnaeus a Scolopendra dotácie mutilans L. Koch, ktorý poskytuje spoľahlivú a účinnú metódu na identifikáciu týchto troch liečivých materiálov. Wei Yicong a kol. [64] navrhli priméry špecifické pre dve miesta a skonštruovali multiplexnú PCR Rýchla identifikácia dvoch liečivých materiálov, Houttuynia cordata Thunb. A Gymnotheca chinensis Decne., dokáže súčasne tieto dva druhy pozitívne identifikovať a určiť, či sú zmiešané. Wang Fu a kol. [65] použili sekvenciu ITS2 (interný transkribovaný spacer 2) ako čiarový kód DNA na presnú identifikáciu čínskej medicíny Zanthoxylumbungeanum Maxim. A jeho korenie Zanthoxylumbungeanum Maxim., poskytujúce základ pre identifikáciu čínskej medicíny Zanthoxylumbungeanum a jeho korenia Zanthoxylumbungeanum.