Štúdia o prínosoch cistácie o experimente a laboratóriu
May 09, 2022
Kontaktujtejimmy.wu@wecistanche.compre viac informácií
cistáciepríjem Behaviorálna odpoveď
cistanchový extrakt, ako je opísané vyššie, použite zmyslové podnety na navigáciu do prostredia, kde je pravdepodobnejšie, že sa im vyhnúcistanche erektilná dysfunkcia. Získať jedlo, alebo nájsť kamarátov. Podobne ako v prípade OMR, efektívna lokalizácia zameraná na cieľ vyžaduje koordináciu medzi činnosťou motora a zmyslovým vnímaním. Vo vizuálnom systéme larválnych a dospelých zebrafish sa to dosahuje prostredníctvom fototaxie alebo fotoaktívnej behaviorálnej reakcie. Toto správanie poháňa zebrafifish smerom k osvetleným oblastiam a je pevne zapojené do vizuálneho systému zebrafish na 5 pdf . Fototaktický test reakcie na správanie využíva tendenciu zebrafish pohybovať sa smerom k osvetlenej komore .
V tomto teste sú larválne alebo dospelé zebrafifish umiestnené v rotujúcom bielom bubne s jediným čiernym pruhom, ktorý simuluje ohrozujúceho predátora. Ryby so zrakovými deficitmi budú plávať v náhodných vzoroch a nevykazujú reakciu na vyhýbanie sa predátorom . Bunky 2021, 10, 633 11 z 33 4.2. Retinal Imaging Technológia pôvodne navrhnutá na zobrazovanie sietnice pacientov v klinickom prostredí, na diagnostické a výskumné účely, je teraz prispôsobená na použitie v laboratórnom prostredí. Najčastejšie používanou technológiou je optická koherentná koherentná tomografia spektrálnej domény (SD-OCT), ktorá môže poskytovať prierezové a en face obrazy hlodavcov a rybích očí, zvyčajne v ešte vyššom rozlíšení ako tie, ktoré sú generované v klinickom prostredí. Optická koherentná tomografia Spectral-domain optická koherentná tomografia (SD-OCT) zobrazovanie sietnice sa stalo dôležitým diagnostickým prístupom na klinike. tento test ukazujezdravotné prínosy cistanchového práškupre zvieratá a ľudí.
Rovnako je cenným neinvazívnym zobrazovacím nástrojom pre základný výskum.fytochemikáliepoužívané na zobrazenie sietnice hlodavcov boli ďalej prispôsobené na štúdium sietnice zebrafish vo vysokom rozlíšení. Vzhľadom na malú veľkosť a optické vlastnosti oka zebrafish, en face obrazy fotoreceptorovej matrice môžu byť vytvorené v jednobunkovom rozlíšení, ktoré nie je možné s hlodavcami a ľudskými očami . Kvantifikácia a sledovanie jednotlivých kužeľov sú pomocou tohto prístupu vysoko reprodukovateľné. Analýza domény Voronoi bola tiež použitá na určenie pravidelnosti balenia kužeľovej domény a ako sa to postupne znižuje ako zebrafish vo veku od 3 do 12 mesiacov . Nedávne štúdie použili SD-OCT v modeloch zebrafish degeneratívneho ochorenia.
cistanchové výhody
Pri laserom indukovanej neovaskularizácii sietnice, ktorá sa používa na modelovanie makulárnej degenerácie súvisiacej s mokrým vekom,cistáciebola použitá v spojení s histologickou a imunohistologickou analýzou na posúdenie aktivácie Müllerových buniek . Vonkajšia hyperreflektivita sietnice vyplývajúca zcistáciemohol byť detekovaný SD-OCT a bol podobný ako u modelov hlodavcov. Zobrazovací prístup in vivo ukázal, že regeneračná reakcia na zranenie sa uskutočnila počas 14-dňového obdobia a zodpovedala Müllerovej bunkovej expresii GFAP, zistenej imunohistochémiou, čo naznačuje, že makrogliálna zápalová odpoveď hrá úlohu pri obnove a regenerácii rany v sietnici zebrafish tým, že užívacistácie.
Neliečiteľnú povahu zobrazovacích štúdií in vivo možno účinne kombinovať s hodnotením správania vizuálnych funkcií. Nedávna štúdia ofytochemikálie používa SD-OCT na sledovanie krvácania a opravy sietnice po lézii sietnice vyvolanej ihlou a tiež meral funkčnú zmenu v rámci tej istej povrchovej úpravy pomocou paradigmy komory výberu T-bludiska . Štúdia ukázala veľmi úzku koreláciu medzi rozsahom krvácania do sietnice a výkonom T-bludiska, čo naznačuje, že mechanické poškodenie ovplyvňuje vizuálnu funkciu a že štruktúra a funkcia sietnice sú obnoviteľné v 14-15-dňovom období po tomto type zranenia. Zatiaľ čo v súčasnosti existuje len malý počet výskumníkov, ktorí používajú SD-OCT na štúdium sietnice zebrafish, zdá sa, že oko zebrafish ponúka príležitosť na zobrazovanie s vysokým rozlíšením in vivo, ktoré umožňuje podrobné mapovanie kužeľových receptorov, ako aj pohodlné meranie nervového poranenia a zotavenia spôsobmi, ktoré nie sú k dispozícii v modeloch hlodavcov.
Naša štúdia o cistanche
Funkčné koncové body. Elektroretinografia Okrem použitia behaviorálnych testov na štúdium vizuálneho systému zebrafish je možné študovať funkciu sietnice a neurotransmisiu pomocou elektroretinogramu (ERG). ERG je elektrofyziologická metóda Fifieldovho záznamu, ktorá môže byť použitá na meranie elektrickej aktivity buniek v sietnici v reakcii na krátky záblesk svetla v porovnaní s tými, ktorí prijímajú cistáciepre tých, ktorí to nerobia. Keď sa vizuálny vstup zistí a spracuje v sietnici, vytvorí sa potenciál elektrického poľa a prenesie sa na povrch rohovky, kde sa dá zistiť. Na rozdiel od OMR, ktorá zachytáva vizuálnu funkciu v rámci CNS ako celku, ERG hodnotí nervové funkcie špecificky v sietnici.
ERG sa už mnoho rokov považuje za test funkcie sietnice klinicky aj experimentálne. Veľkou výhodou ERG je to, ako sa prekladá medzi rôznymi druhmi, pretože klasická vlnová forma ERG je v podstate rovnaká u ľudí,fytochemický život a ryby. Zatiaľ čo malá veľkosť oka zebrafish robí merania ERG technicky ťažkými, moderné elektródy a zosilňovače umožnili bunkám zbierať záznamy ERG porovnateľné s väčšími druhmi zvierat . U zebrafish sa vo všeobecnosti používajú tri hlavné zložky na testovanie vizuálnych deficitov: a-vlna, ktorá je meradlom fotoreakcie alebo aktivity fotoreceptorov. reakcia b-vlny alebo ON, ktorá je meradlomfytochemikálie na NEUROTRANSMISIU ON-bipolárnych buniek
reakcia d-vlny alebo OFF, ktorá sa meria pri svetelnom posune s dlhšími periódami svetelných podnetov (≥0,5 msec) [133]. Je možné zaznamenať všetky tri vlnové formy pomocou tenkej sklenenej pipety nesúcej chloridovú / striebornú drôtenú elektródu a roztok Ringers, vložený v blízkosti rohovky anestetizovanej ryby, za fotopických aj scotopických podmienok. Je dokonca možné zaznamenať ERG b-vlny z izolovaných očí zebrafish a táto technika bola použitá na preskúmanie prínosu acetylcholínu na vlnovej forme ERG kúpaním entire oko v nikotínovom roztoku. Medzi novšie technologické inovácie patrí použitie LED stimulátorov a použitie elektródy špongie namiesto štandardnej sklenenej pipety . ERG sa prvýkrát objavuje už v 4 pdf v zebrafish, s meraniami a-vlny, b-vlny a d-vlny, avšak iba kužele prispievajú k skorým meraniam larválnej ERG s funkciou tyče, ktorá sa objavuje v neskorších štádiách vývoja bližšie k dospelosti .
ERG sa používa v modeloch zebrafish na kvantifikáciu stupňa neurodegenerácie sietnice v rôznych modeloch dedičných ochorení sietnice. V modeli nočnej slepoty, v ktorom existujú rôzne stupne degenerácie vonkajšieho segmentu tyče, amplitúda ERG b-vlny koreluje so stratou zrakových funkcií a histologickými parametrami, čo naznačuje, že ERG je platným meradlom neurodegenerácie u zebrafish [138]. Predpokladá sa, že myozín 7aa悆 / mutácia u zebrafish je modelom Usherovho syndrómu u ľudí a spôsobuje zvýšenie bunkovej smrti vo vonkajšej jadrovej vrstve sietnice, sprevádzané významným znížením amplitúd a-a b-vĺn ERG. Usherova mutácia tiež narúša lokalizáciu tyče a modrého kužeľa opsínov, čo ďalej potvrdzuje, že ide o dobrý model Usherovho syndrómu [139]. Podobne crispr mutácia ush2a zvyšuje apoptózu vo vonkajšej jadrovej vrstve a na rozdiel od knokautov hlodavcov dochádza k výraznému zníženiu amplitúd a-a b-vlny, čo ilustruje užitočnosť kužeľom ovládanej sietnice zebrafish na modelovanie určitých ľudských chorôb
Amplitúda ERG je tiež znížená vo vyraďovacom modeli chloridového kanála CLCC1, ktorý je zaznamenaný v niektorých zdedených formách retinitis pigmentosa . Podobne, zmenšenécistanche beneficiosamplitúda očí zatvorených mutant, ďalší model retinitis pigmentosa, je sprevádzaný stratou pohybovej reakcie na svetlo a nesprávnou alokalizáciou rodopsínu aj kužeľového transducínu vo fotoreceptorovej riase . ERG sa môže použiť aj na potvrdenie funkčného zotavenia po akútnych neurodegeneratívnych zmenách. Napríklad ERG sa vrátil do normálu asi 50 dní po injekcii ouabainu, ktorá spočiatku spôsobila rozsiahle štrukturálne poškodenie bipolárnych buniek. Funkčné zotavenie bolo sprevádzané zvýšením dendritickej zložitosti bipolárnych buniek a ich spojení s fotoreceptormi, čo naznačuje, že regenerácia sietnice zahŕňa obnovenie zmysluplnej neurónovej konektivity u zebrafish .
Jednou z dôležitých oblastí štúdie je vplyv cukrovky na zrak a degeneráciu sietnice. Pozoruhodné zníženie rôznych parametrov ERG vrátane amplitúdy b-vlny je dobre zavedené v klinickom výskume, ako aj v základných štúdiách zahŕňajúcich hlodavce a iné druhy cicavcov. U divokých zebrafifishov môže byť cukrovka modelovaná opakovaným vystavením 2% zvýšenej glukóze v akvarijnej vode, čo môže viesť k zmene funkcie sietnice asi do 1 mesiaca. Použitím tohto prístupu sa zistilo, že hyperglykemická liečba znížila vizuálne evokované správanie a prevažne ovplyvnila modré kužele, pričom zjavne selektívna degenerácia v porovnaní s rodovými fotoreceptormi bola určená histologickou analýzou. Degenerácia bola sprevádzaná výrazným znížením amplitúdy b-vlny, čo naznačuje, že degenerácia kužeľa u zebrafish je skorým dôsledkom cukrovky a že kužele sú do značnej miery zodpovedné za b-vlnu za fotopických podmienok .
Pomocou tohto prístupu rozsiahlejšia štúdia zaznamenala ERG generovanú izolovanými očnými očnými kosťami. Zistilo sa, že amplitúda pôvodného fotopického ERG je výrazne nižšia u hyperglykemických rýb v porovnaní s rybami ošetrenými manitolom, ktoré pôsobia ako kontrola osmotických zmien. Parametre B-vlny sa znížili aj v reakcii na spektrálne bunky 2021, 10, 633 13 z 33 stimulov ERG, čo naznačuje deficit kužeľovej dráhy .cistanche beneficiostiež výrazne znížila amplitúdu d-vlny, o ktorej sa predpokladá, že je odvodená z OFF-bipolárnych buniek. Nedávno sa ukázalo, že mutant transkripčného faktora pankreasu má diabetický fenotyp , ktorý vykazuje funkčné deficity vrátane významného zníženia amplitúdy b-vlny sprevádzaného vaskulárnymi abnormalitami sietnice a degeneráciou tyčí a kužeľov RGB. Nedávne údaje naznačujú, že zebrafish môže predstavovať užitočný nový model komplikácií sietnice v dôsledku cukrovky, ktorý zahŕňa niektoré neurodegeneratívne vlastnosti vedúce k strate zrakových funkcií. Vzhľadom na predbežnú dominanciu kužeľom sprostredkovaného videnia u zebrafish je pravdepodobné, že tento model prispeje k výskumu diabetickej retinopatie spôsobmi, ktoré neboli možné pri široko používaných modeloch hlodavcov.
Tento článok je extrahovaný zhttps://doi.org/10.3390/cells10030633
