Predikcia mechanizmu a overovanie Cistanche Deserticola pri liečbe zápalového ochorenia čriev ⅱ
Nov 15, 2024
| Názov zloženia (čínština) | TCMSP ID | Molekulová hmotnosť | Orálna biologická dostupnosť |
|---|---|---|---|
| -Sitosterol (植物甾醇) | Mol000358 | 36.91 | 0.75 |
| Anchidonolol (安诺炼) | Mol005320 | 45.57 | 0.20 |
| Suchillinolol (苏沟酚) | Mol005384 | 57.52 | 0.56 |
| Yangambul (杨安补) | Mol007563 | 57.53 | 0.81 |
| Quercitrin (槲皮素) | Mol000098 | 46.43 | 0.28 |
| myricetín (桑椹素) | Mol001454 | 37.05 | 0.68 |
| acetosid (毛蕨花酷) | Mol003333 | 2.94 | 0.62 |
| Ecdisteroid (脱皮激素) | Mol003734 | 3.14 | 0.38 |
| Poliamosid (金合欢苷) | Nat | Nat | Nat |
| Cistanosid A (肥皂树 a) | Mol008856 | 3.62 | 0.36 |
| Cistanosid B (肥皂树 B) | Mol008872 | 4.27 | 0.35 |
| Cistanosid C (肥皂树 C) | Nat | Nat | Nat |
| Cistanosid D (肥皂树 D) | Mol008882 | 5.19 | 0.69 |
| tubulosid A (管花草 a) | Nat | Nat | Nat |
| tubulosid b (管花草 b) | Nat | Nat | Nat |
| izoacreosid (异亮芨芨草) | Mol107795 | 1.52 | 0.66 |
| 2- acetyLacteosid (乙酰柠檬晶) | Nat | Nat | Nat |
| L-arabinóza (l- 阿拉伯糖) | Mol010200 | 54.12 | 0.03 |
| galaktozid (半乳糖) | Mol010203 | 10.22 | 0.55 |
| Dulciol (半乳醇) | Nat | Nat | Nat |
| Kyselina D-glucarová (D- 葡萄糖酸) | Mol012957 | 60.80 | 0.06 |
| Mannitol (甘露醇) | Mol000003 | 17.73 | 0.03 |
| fruktóza (果糖) | Mol000053 | 1.68 | 0.03 |
| xylóza (木糖) | Mol000731 | 58.74 | 0.03 |
| glukóza (葡萄糖) | Mol000734 | 24.44 | 0.03 |
| Rhamnose (鼠李糖) | Mol004690 | 40.73 | 0.03 |
| sacharóza (蔗糖) | Mol000842 | 7.17 | 0.23 |
| manóza (甘露糖) | Mol000951 | 1.76 | 0.03 |
Tu je tabuľka preložená do angličtiny:
| Názov zloženia (čínština) | TCMSP ID | Molekulová hmotnosť | Orálna biologická dostupnosť |
|---|---|---|---|
| fruktóza (果糖) | Mol000053 | 1.68 | 0.03 |
| xylóza (木糖) | Mol000731 | 58.74 | 0.03 |
| glukóza (葡萄糖) | Mol000734 | 24.44 | 0.03 |
| Rhamnose (鼠李糖) | Mol004690 | 40.73 | 0.03 |
| sacharóza (蔗糖) | Mol000842 | 7.17 | 0.23 |
| manóza (甘露糖) | Mol000951 | 1.76 | 0.03 |
| cistanin (肉桂素) | Mol008855 | 71.78 | 0.06 |
| cistachlór (肉桂苷素) | Nat | Nat | Nat |
| Kankanosid A (甘菊苷 a) | Nat | Nat | Nat |
| Kankanosid B (甘菊苷 B) | Nat | Nat | Nat |
| 8- kyselina epiloganová (8- 表乙酸) | Mol003203 | 98.51 | 0.09 |
| glukozid (榈苷) | Nat | Nat | Nat |
| liriodendrin (鹤掌枫脂素) | Mol007927 | 5.19 | 0.29 |
| citrusín A (柑橘素 a) | Mol013438 | 25.04 | 0.73 |
| Kyselina palmitová (棕榈酸) | Mol000069 | 19.30 | 0.10 |
| niacín (烟酸) | Mol000421 | 47.65 | 0.02 |
Obrázok 1 Interakčná sieť „Drog-ingredience-Target-Disease“
3.1.4 Analýza obohatenia KEGG
Ako je znázornené na obrázkoch 3 a 4, biologický proces cistanche Deserticola pri liečbe IBD súvisí hlavne s fosforyláciou proteínov, negatívnou reguláciou apoptózy, reakciou na exogénnu stimuláciu atď., Ktoré zahŕňajú hlavne signálne dráhy, ako je napríklad PI3K/Akt a EGFR Tyozínkinázová inhibítorová rezistencia.
3.1.5 Overenie molekulárneho dokovania
Výsledky overovania molekulárneho dokovania (tabuľka 2) ukazujú, že väzbové energie základných cieľov a jadrových komponentov sú nižšie ako -4. 7 kJ/mol, čo naznačuje, že molekuly ligandu sa môžu dobre viazať na receptorový proteín. Medzi nimi je najlepšia kombinácia viazaná energia Akt1 a -siterolu.
Nový bylinkový cistanche perorálny doplnok na zápchu
Podporná služba WeCistanche-najväčšieho vývozcu cistanche v Číne:
E -mail: wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/tel: +86 15292862950
3.2 Výsledky experimentu na zvieratách
3.2.1 Vplyv CE na telesnú hmotnosť myši
V porovnaní s prázdnou kontrolnou skupinou bola telesná hmotnosť myší v modelovej skupine významne znížená (p ＜ {{0}}. 0 1); V porovnaní so skupinou modelu sa významne zvýšila telesná hmotnosť myší v pozitívnej kontrolnej skupine a skupinách dávky CE (P ＜ 0,05 alebo P ＜ 0,01). Výsledky sú uvedené v tabuľke 3.
Obrázok 4 Analýza dráhy KEGG potenciálnych cieľov Cistche Deserticola pri liečbe IBD
Tabuľka 2 Dokovacie výsledky základných komponentov a základných cieľových proteínov (KJ/mol)
| Zmes | TNF | Acti | Stat3 | Egfr | Src |
|---|---|---|---|---|---|
| Oleanolová kyselina | -6.2 | -10.0 | -7.9 | -7.6 | -8.6 |
| Kyselina | -5.2 | -10.0 | -8.0 | -7.7 | -8.0 |
| Kyselina glycyrhetinová | -6.4 | -11.3 | -8.0 | -9.2 | -8.3 |
| 18 - kyselina glycyrhetinová | -4.8 | -6.8 | -5.2 | -4.8 | -5.5 |
Tabuľka 3 telesná hmotnosť, DAI, dĺžka hrubého čreva a patologické skóre myší v každej skupine (x ± s)
| Zoskupenie | n | Váha (G) | Dĺžka tela (cm) | Dai (%) | Patologické skóre |
|---|---|---|---|---|---|
| Ovládanie | 8 | 20.84 ± 0.61 | 7.48 ± 0.18 | 0 | 0.13 ± 0.22 |
| Model | 7 | 14.24 ± 0.92a | 5.77 ± 0.35* | 3.30 ± 0.50* | 2.85 ± 0.61* |
| Nízka dávka | 7 | 17.59 ± 0.75b | 7.47 ± 0.70b | 1.99 ± 0.45b | 0.93 ± 0.36b |
| Nízka dávka CE | 7 | 16.23 ± 0.99b | 7.27 ± 0.42b | 2.66 ± 0.48b | 2.22 ± 0.60b |
| Stredná dávka CE | 8 | 17.07 ± 0.67b | 7.37 ± 0.34b | 2.06 ± 0.31b | 1.51 ± 0.29b |
| Vysoká dávka CE | 8 | 17.37 ± 0.41b | 7.43 ± 0.62b | 1.85 ± 0.43b | 1.13 ± 0.77b |
Odpoveď: V porovnaní s kontrolnou skupinou, P<0.01; b: Compared to the model group, P<0.01; c: Compared to the model group, P<0.05.
3.2.2 Vplyv CE na dĺžku myši Dai a dĺžky hrubého čreva
V porovnaní s slepou kontrolnou skupinou sa DAI myší v modelovej skupine významne zvýšil a dĺžka hrubého čreva sa významne skrátila (P<0.01); compared with the model group, the DAI of rats in the positive control group and CE groups at each dose was significantly reduced, and the colon length was significantly shortened (P<0.01). All increased significantly (P＜0.05 or P＜0.01). The results are shown in Table 3 and Figure 5.
3.2.3 Účinky CE na histopatologickú morfológiu myšieho hrubého čreva
Mukóza hrubého čreva myší v slepej kontrolnej skupine bola úplná a jasná v štruktúre a neboli nájdené žiadne infiltrácie zápalových buniek a vredy; Mukóza hrubého čreva myší v modelovej skupine bola neúplná, väčšina žliaz bola zničená, niektoré poháriové bunky zmizli a štruktúra krypty bola zničená; V porovnaní s modelom porovnávaním skupín sa zlepšilo poškodenie tkaniva hrubého čreva v pozitívnej kontrolnej skupine a skupiny CE, infiltrácia zápalových buniek a deštrukcia žľazy v tkanive hrubého čreva sa významne znížilo, výrazne sa znížil (P ＜ {{{{{}}}}}. 05.<0.01). The results are shown in Figure 6 and Table 3.
3.2.4 Vplyv CE na hladiny zápalových faktorov v tkanive myši hrubého čreva
V porovnaní s Blank Control Group sa úrovne IL {{0}}, IL -1, MPO a TNF- v tkanive hrubého čreva v skupine s modelom sa výrazne zvýšili (p {{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{} {} {} {}. a úroveň IL -10 sa výrazne znížila. (P <0,01); V porovnaní so skupinou modelu boli úrovne IL -6, IL -1, MPO a TNF- v hrubom čreve myší v kladnej kontrolnej skupine a skupinách CE významne znížené (p <0,05 alebo p <0,01), IL -10
Úroveň sa významne zvýšila (p ＜ 0. 01). Výsledky sú uvedené v tabuľke 4.
3.2.5 Hladiny expresie jadrových cieľových proteínov v tkanive myši hrubého čreva
V porovnaní s prázdnou kontrolnou skupinou, hladiny proteínovej expresie PI3K, P-PI3K, EGFR, TNF-, STAT3, P-STAT3, AKT1, P-AKT1 a SRC v tkanive hrubého čreva myší v modelovej skupine sa významne zvýšili (P< 0.05 or P＜0.01); compared with the model group, the expression levels of the above proteins in the colon tissue of mice in the positive control group and CE groups were significantly reduced (P＜0.05 or P＜0.01).
Výsledky sú znázornené na obrázku 7 a tabuľke 5.
Tabuľka 4 Porovnanie hladín zápalových faktorov v tkanive myši hrubého čreva (x ± s)
| Zoskupenie | n | Il -10 (pg/ml) | Il -6 (pg/ml) | Il -1 (pg/ml) | TNF- (pg/ml) | MPO (u/l) |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Ovládanie | 8 | 47.0 ± 4.70 | 17.35 ± 0.64 | 291.27 ± 72.33 | 387.71 ± 116.76 | 23.06 ± 7.26 |
| Model | 7 | 3.68 ± 0.32a | 145.08 ± 23.86a | 338.94 ± 95.11a | 635.27 ± 135.15a | 97.06 ± 28.07a |
| Nízka dávka | 7 | 44.74 ± 8.34b | 23.23 ± 4.64b | 300.52 ± 84.71b | 448.21 ± 123.28b | 38.60 ± 16.78b |
| Nízka dávka CE | 7 | 12.87 ± 3.26b | 81.12 ± 18.95b | 331.24 ± 95.80b | 510.81 ± 110.63b | 51.61 ± 11.62b |
| Stredná dávka CE | 8 | 21.80 ± 4.12b | 50.75 ± 22.16b | 323.62 ± 79.21b | 508.68 ± 146.97b | 45.53 ± 15.21b |
| Vysoká dávka CE | 8 | 31.10 ± 7.40b | 27.55 ± 41.22b | 294.13 ± 86.05b | 461.42 ± 140.30b | 44.26 ± 13.58b |
Odpoveď: V porovnaní s kontrolnou skupinou, P<0.01; b: Compared to the model group, P<0.01.
A: Blank Control Group; B: Model Group; C: pozitívna kontrolná skupina; D: Skupina vysokej dávky CE; E: CE Stredná dávka; F: CE nízka dávka skupiny.
Obrázok 7 Elektroforéza expresie jadrového proteínu v tkanive hrubého čreva myší v každej skupine
4 Diskusia
V tejto štúdii výsledky experimentov s molekulárnymi dokovaním ukázali, že základné zložky kvercetínu, suzilide, -siterolu a cistache glykozid H vykazovali silnú väzbovú schopnosť na základné ciele TNF, AKT1, STAT3, EGFR a SRC. Odráža synergické charakteristiky multi-komponentov a multi ciele Cistanche Deserticola.
Štúdie ukázali, že kvercetín môže významne inhibovať sekréciu a uvoľňovanie zápalových faktorov a zápalových mediátorov a má dobré protizápalové účinky [17]. Suzilid môže účinne podporovať sekréciu gama-interferónu imunitnými bunkami a má za následok zvýšenie vitality imunitných buniek a zníženie životaschopnosti nádorových buniek. Suzilide a kvercetín majú tiež za následok podporu sekrécie gama-interferónu imunitnými bunkami. Synergia [18].
-Sitosterol môže zmierniť progresiu kolitídy znížením hladín zápalových faktorov, ako sú IL -6, IL -1 a TNF- [19]. Cistancheside H môže regulovať oxidačný stres a zápalové reakcie prostredníctvom signálnych dráh, ako je metabolizmus glycerofosfolipidov a metabolizmus kyseliny arachidónovej [20].
Je zrejmé, že kvercetín, suzilide, -sitosterol a cistanche glykozid H môžu byť pri liečbe IBD materiálnym základom Cistche Deserticola.
Analýza dráhy KEGG ukázala, že Deserticola Cistanche hrá terapeutický účinok na IBD hlavne regulačnými signálnymi dráhami, ako sú napríklad rezistencia na inhibíciu tyrozínkinázy PI3K/Akt a EGFR. Štúdie poukázali na to, že aktivácia signálnej dráhy PI3K/AKT môže podporovať uvoľňovanie zápalových faktorov a spôsobiť zápalové poškodenie [21].
SRC je protiprúdová signálna molekula signálnej dráhy PI3K/AKT. DSS vstupujúce do buniek môže rýchlo aktivovať signálnu dráhu SRC/PI3K/AKT a podporovať nábor vrodených imunitných buniek, ako sú makrofágy a neutrofily na zápalové poškodené tkanivá, čím sa urýchľuje uvoľňovanie zápalových faktorov zápalovej reakcie tela [22].
EGFR sa môže fosforylovať väzbou na proteíny súvisiace s proti prúdu, aktivovaním signálnej dráhy PI3K/AKT a potom spoluprácou so signálnou dráhou WNT na sprostredkovanie zápalových reakcií [23]. Akt1 môže aktivovať jadrový faktor KB, čím podporuje syntézu a uvoľňovanie prozápalových faktorov a urýchľuje zápalovú odpoveď [24].
STAT3 je hlavným cieľovým proteínom signálnej dráhy JAK/STAT. Ak je STAT3 rýchlo aktivovaný, môže urýchliť uvoľňovanie zápalových faktorov, ako sú IL -6 a IL -1, čo vedie k zvýšeniu zápalovej infiltrácie [25]
. TNF- je prvý cytokín uvoľňovaný v imunitnej odpovedi, môže sprostredkovať zápal čreva rôznymi mechanizmami a môže tiež priamo indukovať apoptózu črevných epitelových buniek [26].
Je zrejmé, že TNF-, AKT1, STAT3, EGFR a SRC môžu byť hlavnými cieľmi Cistche Deserticola pri liečbe IBD. Ďalšie experimenty na zvieratách zistili, že CE môže znížiť hladiny expresie vyššie uvedených proteínov, čo dokazuje presnosť predikcie cieľa siete farmakológie.
Stručne povedané, táto štúdia systematicky potvrdila účinok Cistanche Deserticola pri liečbe IBD prostredníctvom sieťovej farmakológie a experimentov na zvieratách. Jeho špecifický mechanizmus účinku môže súvisieť s reguláciou signálnej dráhy SRC/EGFR/PI3K/AKT.
