Porovnanie obsahu fenyletanolových glykozidov v dvoch rôznych hostiteľských cistanches Herba po rôznych sušeniach

Porovnávali obsahfenyletanolové glykozidyv dvoch rôznych hostiteľochCistanchesHerbapo rôznychsušiace kúryGAO Peiwen1, GUO Yehong1 *, ZHAO Fafa1, ZHANG Dan2, ZHANG Fangming11 (Agronomy College, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070, Čína)2 (State Key Laboratory of Aridland Crop Science, Lanzhou 730070, Čína)

AbstraktnéPorovnať obsah 10 fenyletanoidových glykozidov v rôznych spracovaných Cistanches Herba z rôznych hostiteľov pomocou ultra vysokoúčinnej kvapalinovej chromatografie-trojnásobnej kvadrupólovej hmotnostnej spektrometrie (UPLC-QQQ-MS). Vysušené cistanches Herba boli rozdrvené, preosiate cez 60- sito a extrahované ultrazvukom s 50 % metanolom. Separácia sa uskutočnila na kolóne Agilent Eclipse Plus C18 (2,1 mm x 150 mm, 1,8 um) s použitím gradientovej elúcie s mobilnou fázou A (0,1 % vodný roztok kyseliny mravčej) a B (acetonitril). Detekcia sa uskutočňovala v režime dynamického monitorovania viacerých reakcií s použitím zdroja elektrosprejovej ionizácie v UPLC-QQQ-MS.

Výsledky ukázali, že boli pozorované významné variácie v zložení10 fenyletanoidových glykozidovmedziCistanches Herba pestované na rôznych hostiteľocha podrobené rôznym sušeniam. Lyofilizovaný Cistanches Herba vykazoval najvyšší obsah týchto zlúčenín pre obe hostiteľské rastliny, po ktorom nasledovalo sušenie pri 80 stupňoch. Hoci lyofilizácia zachovala maximálny obsah 10 fenyletanoidných glykozidov v Cistanches Herba, sušenie pri 80 stupňoch bolo nákladovo efektívnejšie pre veľkovýrobu.

Kľúčové slová:ultravysokoúčinná kvapalinová chromatografia-trojnásobná kvadrupólová hmotnostná spektrometria; Cistanches Herba; Haloxylon ammodendron (CAMey.) Bunge; Atriplex canescens (Pursh) Nutt; fenyletanoidové glykozidy; spôsob sušenia

KLIKNITE SEM A ZÍSKAJTE PRÍRODNÝ BIO EXTRAKT CISTANCHE TUBULOSA S 30 % ECHINAKOZIDU A 12 % AKTEOZIDU

Cistanches Herbaje suchá dužinatá stonka so šupinatými listamiCistanche deserticola YCMaaleboCistanche tubulosa(Schenk) Wight. Prvýkrát bol videný v "Shen Nong's Materia Medica" a patrí medzi top triedy. Je to vzácny čínsky bylinný liek, ktorý možno použiť ako liek aj ako potravinu. Pretože väčšinou rastie v suchých oblastiach, ako je Vnútorné Mongolsko, Xinjiang, Gansu a Ningxia, je tiež známy ako „púštny ženšenCistanche deserticola je sladká, slaná a teplá a vracia sa do meridiánov obličiek a hrubého čreva; má účinkyvyživujúci jang obličiek, dopĺňanie esencie a krvi, zvlhčovanie čriev a preháňadlo a pod., a často sa používa na liečbu chorôb ako napr.nedostatočný jang obličiek, nedostatok esencie a krvi, impotencia a neplodnosť, aslabosť svalov a kostí [1 -4].Fenyletanolové glykozidysú hlavné aktívne zložky vCistanche deserticolaa sú tiež najčastejšie uvádzanými látkami vo výskume Cistanche deserticola [5]

Tradičná hostiteľská rastlina zCistanche deserticolaje Haloxylon ammodendron (CAMey.) Bunge z čeľade Chenopodiaceae. Haloxylon ammodendron však rastie pomaly a má nízku ekonomickú hodnotu. Haloxylonové rastliny ammodendron mladšie ako 3 roky sa ťažko používajú na pestovanie Cistanche deserticola. Zmierniť rozpor medzi ponukou a dopytom na trhu s liekmi Cistanche deserticola, zvýšiť produkciu Cistanche deserticola a dosiahnuť rozsiahle a štandardizované pestovanie Cistanche deserticola. Vedci úspešne predstavili Atriplex canescens (Pursh) Nutt v Gansu, ale to, či sa tento druh stromu môže použiť ako nová hostiteľská rastlina pre Cistanche deserticola a či je jeho rastový výkon lepší ako Haloxylon ammodendron, sa stalo horúcou otázkou rozšíreného záujmu [6]. . Či Atriplex truncatula môže úplne nahradiť Haloxylon ammodendron pri pestovaní Cistanche deserticola, je ešte potrebné podporiť širšími, komplexnejšími a hlbšími výsledkami základného výskumu. Aj keď sa v mojej krajine uskutočnil rozsiahly výskum na Atriplex truncatula z hľadiska introdukcie, pestovania sadeníc a analýzy komponentov [7-10], existuje len veľmi málo správ o očkovaní Atriplex truncatula Cistanche deserticola. V minulosti sa výskum sústreďoval najmä na charakteristiky vývoja a využitia Cistanche deserticola [11-14]. Avšak výskum aktívnych zložiek dvoch hostiteľov Cistanche deserticola nebol publikovaný, najmä dvoch hostiteľov Cistanche deserticola po použití rôznych procesov sušenia. Existuje len málo štúdií o rozdieloch v retencii účinných látok.

Ultra-vysokoúčinná kvapalinová chromatografia-trojitý kvadrupólová hmotnostná spektrometria (UPLC-QQQ-MS) využíva UPLC ako chromatografický separačný systém a trojitý kvadrupól (QQQ) ako analyzátor v sérii Ide o technológiu kvapalinovej hmotnostnej spektrometrie, ktorá má dobrý separačný účinok na multi -komponentné komplexné systémy a dokáže rýchlo a presne kvantitatívne analyzovať zložité komponenty tradičnej čínskej medicíny [15-16]. V tomto experimente bola použitá technológia UPLC-QQQ-MS na kvantitatívnu analýzu 10 fenyletanolových glykozidov, vrátane echinaceazidu, verbaskozidu, izobaskozidu a antokyanozidu A, v sušených produktoch dvoch hostiteľských druhov Cistanche deserticola po rôznych sušeniach. Porovnanie obsahov týchto zložiek v Cistanche deserticola pri rôznych metódach sušenia a rôznych hostiteľoch poskytuje teoretický základ pre vývoj a presné využitie fenyletanolových glykozidov v Cistanche deserticola.

1 Materiály a nástroje

Haloxylon ammodendron Cistanches a Cistanches tetrapterans boli zozbierané z pestovateľskej základne Cistanche deserticola v okrese Jingtai, provincia Gansu. Čas zberu bol marec 2023. Profesor Guo Yehong z Gansu Agricultural University identifikoval mäsité stonky Cistanche deserticola so šupinatými listami. Referenčné látky strana echinacey (C35H46O20, CAS č.: 82854-37-3, čistota 98,30 %), verbascozid (C29H36O15, CAS č.: 61276-17-3, čistota 99,35 %), tuberóza A (C37H48O21, CAS č. 112516-05-9, čistota 99,74 %), izomuraskozid (C29H36O15, č. CAS: 61303-13-7, čistota 97,77 %), gardenipozid (C17H24O10, č. CAS: 24512-63-8, čistota 99,11 %), 2 '-acetyl verbaskozid (C31H38O16, číslo CAS: 94492-24-7, čistota 97,12 %), salidrozid

(C14H20O7, CAS č.: 10338-51-9, čistota 98,43 %), materina dúška (C15H24O9, CAS č.: 52949-83-4, čistota 97,64 %), cistanchesid A (C36H48O20, CAS č.: {{15} }, čistota 93,24 %), angiozid B (C31H38O16, číslo CAS: 112516-04-8, čistota 98,57 %), Chengdu Pufeide Biotechnology Co., Ltd.; metanol a acetonitril sú chromatograficky čisté, Shanghai Anpu Testing Technology Co., Ltd. Co., Ltd.; kyselina mravčia, Tianjin Comeo Chemical Reagent Co., Ltd.; voda bola ultra čistá voda.

DESKTOP-T2G6S78\6460 ultra-vysokoúčinná kvapalinová chromatografia-trojitý kvadrupólový tandemový hmotnostný spektrometer, Agilent Company of United States; elektronické analytické váhy AL104, Mettler-Toledo Instruments Co., Ltd., Švajčiarsko; LyoQuest-85 mraziaca sušička, Telstar, španielska spoločnosť.

2 Experimentálne metódy

2.1 Príprava vzoriek Cistanche deserticola s rôznymi procesmi sušenia

Čerstvé produkty Cistanche deserticola z rôznych hostiteľov nakrájajte na plátky s hrúbkou 3 mm a spracujte ich nasledovne.

(1) Sušenie na slnku: Plátky naparujte 5 minút a potom ich položte na slnečné miesto, aby sa vysušili. Skontrolujte zmeny obsahu vlhkosti. Keď je obsah vlhkosti nižší ako 10 %, odložte ich na neskoršie použitie.

(2) Sušenie: Plátky naparujte na 5 minút a potom ich vložte do sušiarne pri teplote 40, 60 alebo 80 stupňov, kým nebude obsah vlhkosti nižší ako 10 % a odložte ich na neskoršie použitie.

(3) Vákuové sušenie vymrazovaním: Pred predchladením umiestnite plátky na 2 hodiny do chladničky -80 stupňov a potom ich vložte do vákuovej lyofilizačnej sušičky (stupeň vákua 650 Pa, teplota mrazenia -55 stupeň ) , vysušte 48 hodín a odložte na neskoršie použitie.

2.2 Chromatografické podmienky

kolóna Agilent Eclipse Plus C18 (2,1 mm x 15 0 mm, 1,8 μm); prietoková rýchlosť: 0,3 ml/min; injekčný objem 1 μl; mobilná fáza: fáza A je 0.1 % vodný roztok kyseliny mravčej a fáza B je chromatografický acetonitril. Elučná rýchlosť mobilnej fázy A a B je 0~1,5 min, 10%~15% B; 1,5~2 palca, 15%~20% B; 2-3 min, 20%-25% B; 3-4 min, 25%-30% B; 4-5 min, 30%-32% B; 5-6 min, 32%-34% B; 6-7 min, 34%-36% B; 7-8 min, 36 %-38 % B; 8-9 min, 38%-40% B; 9-9,5 min, 0%-45% B; 9,5-9,6 min, 45%-10% B; 9,6-10 minút, 10 % B.

2.3 Optimalizované podmienky hmotnostnej spektrometrie

Typ iónového zdroja: elektronický rozprašovací iónový zdroj; metóda skenovania: skenovanie záporných iónov; teplota iónového zdroja: 350 stupňov; nebulizér: 35 psi; režim monitorovania viacerých reakcií a režim dynamických viacnásobných reakcií na monitorovanie a analýzu každej zlúčeniny. Optimalizované podmienky pre hmotnostnú spektrometriu 10 látok sú uvedené v tabuľke 1.

2.4 Príprava referenčného roztoku a roztoku štandardnej krivky

Presne odvážte štandardné prášky zechinakozid,verbaskozid, anortozit A, izolebaskozid, gardeniposid, 2'-acetyl verbaskozid, salidrozid, leonín, vzdialenosti A a anorthozit B., pridajte 5 0 % metanolu, aby ste vytvorili zmiešaný referenčný roztok obsahujúci 0,2 mg na 1 ml; zriediť 50 % metanolom na štandardnú sériu zmiešaných roztokov 40,96, 102,4, 256, 640, 1 600, 4 000 ug/l, stlačte "Podmienky pod 2,2" a 2,3" sa postupne vstrekujú z z nízkej koncentrácie na vysokú koncentráciu a potom sa použije kvantitatívny softvér (agilent mass hunter) na spracovanie výsledkov detekcie pomocou štandardnej krivky prechádzajúcej počiatkom. Vykonajte lineárnu regresiu s koncentráciou látky X (ng/ml) ako osou x a iónom hodnotu odozvy Y ako ordinátu a vypočítajte regresnú rovnicu a korelačný koeficient, ako je uvedené v tabuľke 2. Existuje dobrý lineárny vzťah s hodnotou odozvy iónu v rámci rozsahu.

Podporná služba Wecistanche - Najväčší vývozca cistanche v Číne:

E-mail:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel:+86 15292862950

Nakupujte pre ďalšie špecifikácie Podrobnosti:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop