Porovnanie jednorazového a opakovaného podávania protizápalových mezenchymálnych stromálnych buniek ľudskej pupočnej šnúry na myšacom modeli polymikrobiálnej sepsy
Jul 07, 2023
Zhrnutie
Mezenchymálne stromálne bunky (MSC) zlepšujú predklinickú sepsu a akútne poškodenie obličiek (SAAKI) spojené so sepsou, ale klinické štúdie jednodávkových MSC nepreukázali silnú účinnosť. Táto štúdia skúmala imunomodulačné účinky nového produktu MSC (CD362-vybrané ľudské MSC odvodené z pupočnej šnúry [hUC-MSC]) v modeloch endotoxémie a polymikrobiálnej sepsy u myší. Spočiatku myši dostali intraperitoneálny (ip) lipopolysacharid (LPS), po ktorom nasledovali jednotlivé ip dávky hUC-MSC alebo vehikula. Ďalej myši podstúpili ligáciu a punkciu slepého čreva (CLP), po ktorej nasledovali intravenózne (iv) dávky hUC-MSC po 4 hodinách alebo 4 a 28 hodinách. Analýzy zahŕňali sérové/plazmové testy biochemických indexov, zápalových mediátorov a AKI biomarkeru NGAL; viacfarebná prietoková cytometria peritoneálnych makrofágov (LPS) a subpopulácií intrarenálnych imunitných buniek (CLP) a histológia/imunohistochémia obličiek (CLP). 72 hodín po injekciách LPS hUC-MSC znížili sérové zápalové mediátory a pomer peritoneálnych makrofágov M1/M2. Opakované, ale nie jednotlivé dávky hUC-MSC podávané 48 hodín po CLP viedli k nižším sérovým koncentráciám zápalových mediátorov, nižšiemu NGAL v plazme a zvráteniu deplécie intrarenálnych subpopulácií T-buniek a myeloidných buniek spojenej so sepsou. Hierarchická zhluková analýza všetkých 48-h sérových/plazmatických analytov preukázala čiastočné spoločné zhlukovanie zvierat s opakovanou dávkou hUC-MSC CLP so skupinou Sham, ale neodhalila zreteľný znak odpovede na terapiu. Dospelo sa k záveru, že opakované dávky CD362-vybraných hUC-MSC sú potrebné na moduláciu systémových a lokálnych imunitných/zápalových príhod pri polymikrobiálnej sepse a SA-AKI. Interindividuálna variabilita a nedostatočný účinok podania jednorazovej dávky MSC v modeli CLP sú v súlade s doterajšími pozorovaniami z klinických štúdií v ranej fáze.
Kľúčové slová
Akútne poškodenie obličiek · Mezenchymálna stromálna bunka · Regeneračná medicína · Sepsa · Zápal · Bunková terapia
Kliknite sem a zakúpte si doplnok Cistanche
Úvod
Sepsa je charakterizovaná život ohrozujúcou orgánovou dysfunkciou v dôsledku dysregulovanej odpovede hostiteľa na infekciu spôsobenú bakteriálnymi, hubovými, vírusovými a parazitickými patogénmi [1]. Každý rok postihne sepsa takmer 50 miliónov ľudí na celom svete, čo často vedie k závažným systémovým následkom a poraneniam orgánov, vrátane akútneho poškodenia obličiek (AKI), čo má za následok približne 11 miliónov úmrtí [2, 3]. Mezenchymálne stromálne bunky (MSC) sú multipotentné bunky s rozsiahlymi imunomodulačnými vlastnosťami, ktoré možno izolovať z rôznych tkanív [4]. Teraz je dobre známe, že MSC ponúka potenciálnu chorobu modulujúcu terapiu sepsy a AKI spojenej so sepsou (SA-AKI) [5, 6]. Niekoľko nedávnych štúdií s použitím modelov ligácie a punkcie slepého čreva u myší a potkanov (CLP), lipopolysacharidov (LPS) alebo modelov fekálnej peritonitídy ukázalo, že systémové podávanie MSC má potenciál znížiť zápal, pôsobiť proti bakteriálnej infekcii a zlepšiť hojenie poraneného tkaniva. sepsa [7–11], vrátane SA-AKI, [10, 12–15] moduláciou rovnováhy medzi prozápalovými a protizápalovými stavmi.
Nedávna štúdia u zdravých dospelých potvrdila, že preventívna intravenózna (iv) liečba 4 × 106 MSC/kg vyvoláva skoré imunomodulačné účinky na odpoveď hostiteľa na LPS [16]. Okrem toho podávanie alogénneho MSC pacientom so septickým šokom (NCT01849237, NCT02421484 a NCT02328612) a syndrómom akútnej respiračnej tiesne súvisiacim so sepsou (NCT01775774) preukázalo dobrú bezpečnosť a znášanlivosť v klinických štúdiách fázy 1 [16–19]. Napriek týmto povzbudivým výsledkom Galstyan a kol. tiež uviedli, že jednorazová dávka iv MSC nezabránila úmrtiu v dôsledku orgánovej dysfunkcie súvisiacej so sepsou, čo zvyšuje možnosť, že na dosiahnutie významného klinického prínosu môžu byť potrebné ďalšie dávky [17]. Nedávna štúdia fázy 2 bez sepsy (NCT01602328), v ktorej sa jednotlivé dávky alogénneho MSC podávali intra-vortikálne pacientom so sterilným AKI po operácii kardiopulmonálneho by-passu, tiež nedokázala preukázať priaznivý účinok na dysfunkciu orgánov a prežitie pacientov napriek sľubným výsledky predklinického skúšania a skúšania fázy 1 [20]. To, či by opakované dávkovanie počas skorého priebehu sepsy a iných akútnych zápalových syndrómov mohlo zvýšiť alebo rozšíriť účinky MSC na moduláciu ochorenia, zostáva na predklinickej a translačnej úrovni relatívne nedostatočne preskúmané. Okrem toho neúplná znalosť mechanizmu účinku, dávkovej odpovede a optimálnych klinických ukazovateľov pre podávanie MSC pri sepse obmedzuje potenciál pre navrhovanie úspešných štúdií [5, 21, 22].
V súčasnej štúdii sme vykonali predklinické skúmanie protizápalových účinkov CD362-vybranej ľudskej MSC derivovanej z pupočnej šnúry (hUC-MSC) na myších modeloch sepsy. Tento hUC-MSC selektovaný povrchovým markerom je nový terapeutický produkt, ktorý preukázal svoju účinnosť na potkaních modeloch bakteriálnej pneumónie a sepsy, keď sa podáva skoro po nástupe ochorenia [23, 24]. Ako skúšaný liek na klinickom stupni (IMP) sa hUC-MSC v súčasnosti podrobuje skúšaniu fázy I/II u pacientov so stredne ťažkým až ťažkým syndrómom akútnej respiračnej tiesne (ARDS) v dôsledku COVID-19 (NCT03042143) a u viacpočetných pacientov autoimunitné zápalové ochorenia (POLARIZÁCIA). Zamerali sme sa na demonštráciu protizápalového potenciálu jednotlivých dávok hUC-MSC na myšacích modeloch endotoxémie/polymikrobiálnej sepsy indukovanej LPS a CLP [25, 26] a v druhom prípade určiť, či druhé podanie hUC-MSC počas skorý priebeh ochorenia viedol k väčším alebo častejším priaznivým účinkom na systémový zápal a orgánovo špecifické poškodenie, ako je napríklad SA-AKI.
Cistanche tubulosa
Materiály a metódy
1. Bunky
Anti-CD362 plus-selektované hUC-MSC sa kultivovali z ľudského tkaniva pupočníka z etického zdroja získaného od Tissue Solutions Ltd. (Glasgow, UK). Primárna izolácia a expanzné kultúry CD362 plus hUC-MSC sa uskutočnili tak, ako už bolo opísané [19, 23, 27]. Kryokonzervované fľaštičky (1 x 107 v 1 ml) anti-CD362 plus-selektovaného hUC-MSC sa rozmrazili a preniesli do 9 ml fosfátom pufrovaného fyziologického roztoku (PBS). Po analýze živých/mŕtvych buniek buď pomocou farbiva trypánovej modrej alebo automatického počítadla buniek (NucleoCounter® NC-200™, Chemometec A/S, Dánsko), sa požadované množstvo buniek peletovalo centrifugáciou pri 400 x g počas 5 minút a bunky boli resuspendované v 100 ul sterilného fyziologického roztoku na intraperitoneálnu (ip) alebo iv injekciu.
2. Postupy zvierat
Všetky postupy na zvieratách sa uskutočňovali na základe licencie (č. 255/17) Etického výboru pre pokusy na zvieratách, University of Barcelona a na základe povolenia (AE19125/P082 a AE19125/P066) od Regulačného úradu pre zdravotnícke produkty, Írsko a boli schválené od Etického výboru NUI Galway pre výskum starostlivosti o zvieratá. Všetky postupy sa uskutočňovali v licencovaných zariadeniach pre zvieratá na NUI Galway a na univerzite v Barcelone.
Pre LPS model endotoxémie sa použili 10-12 týždňové samce myší C57BL/6 od Charles River Ltd., Kent, UK. Myšiam sa ip injikovalo 5 ug/g LPS (LPS 0111:B4, katalógové č. L2630, Sigma Aldrich, UK) v 100 ul sterilného fyziologického roztoku. Myši boli počas štúdie umiestnené v skupinách po 3-5 myšiach/klietka v individuálne vetraných klietkach. Jednotlivé ip injekcie 2,5 x 105 hUC-MSC alebo rovnaké objemy vehikula (sterilný fyziologický roztok) sa podávali 4 hodiny po injekciách LPS. Zvieratá sa monitorovali každé 4 hodiny až do konca štúdie s použitím hárku o skóre núdze a podporných opatrení podľa vopred stanoveného protokolu. Humánna eutanázia sa uskutočnila v definovanom koncovom bode experimentu alebo skôr, ak zvieratá prekročili vopred definovaný prah skóre závažnosti. V čase eutanázie sa peritoneálne exsudáty odobrali na analýzu prietokovou cytometriou opatrným vylovením 5 ml sterilného PBS do a z peritoneálnej dutiny.
Podviazanie a punkcia slepého čreva (CLP) sa uskutočnilo na {{0}} týždňových samcoch myší C57BL/6 (Charles River Ltd., UK). Myši dostali buprenorfín {{1{{20}}}.1 mg/kg (Richter Pharma AG, Rakúsko) subkutánne 25-30 min pred zákrokom a boli anestetizované 1.{{8 }} percent izofluránu (s prietokom O2 0,5 l/min) na NUI Galway alebo s Anesketinom (100 mg/ml; Dechra Veterinary Products SLU, Španielsko) a Rampunom (20 mg/ml; Bayer, Nemecko) na Barcelonskej univerzite. Spodná polovica brucha sa oholila a vyčistila 4 percentami chlórhexidínu alebo povidón-jódu a narezala 1 cm vertikálne pozdĺž stredovej čiary. Slepé črevo bolo externalizované a distálnych 50 percent bolo podviazaných pomocou 4.{19}},0 M stehov. Cekálny materiál sa uvoľnil punkciou „cez a skrz“ ihlou s mierkou 21-a kvapka fekálnej hmoty sa vytlačila pred opätovným zavedením slepého čreva do peritoneálnej dutiny a zašitím svalu a kože sa uzavreli. Myši s falošnou operáciou podstúpili rovnaký postup, vrátane otvorenia pobrušnice a obnaženia čreva, ale bez podviazania a perforácie slepého čreva. Myši dostali 0,5 ml Gelofusine (Braun Melsungen AG, Nemecko) ip instiláciou pred uzavretím rany. Pooperačná podpora pozostávala z buprenorfínu nariedeného subkutánne (sc) každých 8-12 h až do vopred určených koncových bodov (48 alebo 72 h pre jednotlivé experimenty). Podávanie 1 x 106 hUC-MSC alebo ekvivalentných objemov vehikula (sterilný fyziologický roztok) sa uskutočnilo iv cez chvostovú žilu 4 hodiny alebo 4 a 28 hodín po CLP. Časté monitorovanie a podpora boli vykonávané podľa eticky schváleného protokolu. Humánna eutanázia sa uskutočnila v definovanom koncovom bode experimentu alebo skôr, ak zvieratá prekročili vopred stanovený prah skóre závažnosti.
Bunkové dávky pre dva zvieracie modely použité v štúdii boli vybrané na základe predchádzajúcich správ o protizápalových účinkoch ľudských MSC v podobných modeloch [9, 13, 14, 28, 29]. Veľkosti skupín pre štúdiu LPS boli vybrané empiricky na základe relevantných predchádzajúcich správ pre tento model [30, 31]. Veľkosti skupín pre štúdiu CLP boli určené pre primárny výsledok plazmatického NGAL 24 hodín po operácii. S použitím údajov z pilotného experimentu sa vypočítala veľkosť vzorky 9 zvierat na skupinu, aby poskytla 90-percentnú silu za predpokladu 5-percentnej hladiny významnosti a obojstranného testu (http://www.3rs-reduction.co.uk/html /6__výkon_a_vzorka_veľkosť.html). Na výber konečnej veľkosti skupiny n=10 sa použila očakávaná miera opotrebovania 10 percent.
Extrakt z cistanche
3. Odber vzoriek krvi a odber tkaniva
Vzorky venóznej krvi do maximálneho objemu 20 μl sa prerušovane odoberali z chvostových a tvárových žíl aseptickou technikou s použitím ihiel s kalibrom 25-21 a odoberali sa do skúmaviek obsahujúcich heparín (VWR International, Dublin, Írsko). Konečná vzorka krvi bola odobratá srdcovou punkciou v čase eutanázie. Sérum sa odoberalo do mikroskúmaviek so sérovým gélom a aktivátorom zrážanlivosti (Sarstedt, Wexford, Írsko). Vzorky plazmy a séra sa pripravili centrifugáciou pri 10,000xg počas 10 minút. Vzorky séra boli skladované pri -80 stupňoch a následne analyzované na biochemické parametre NationWide Laboratories (Lancashire, UK). Slezina, pľúca, obličky a pečeň boli vypreparované ihneď po eutanázii.
4. Imunologické testy
Koncentrácia lipokalínu asociovaného s neutrofilnou želatinázou (NGAL) v plazme sa kvantifikovala pomocou vývojového kitu myšieho Lipocalin-2/NGAL Duo-Set ELISA (R&D Systems, Minneapolis, MI, USA) podľa protokolu navrhnutého výrobcom (podrobnosti v doplnkových metódach ). Na multiplexnú kvantifikáciu cytokínov a chemokínov v sére sa použil štandardný 23-plex test na myšie cytokíny Bio-Plex Pro (Bio-Rad, Accuscience) podľa pokynov výrobcu. Vzorky sa analyzovali na systéme Bioplex 200 multiplex ELISA (BioRad, Accuscience).
5. Semikvantitatívne hodnotenie rezov obličkového tkaniva
Zafarbené rezy obličiek sa analyzovali zaslepeným spôsobom svetelnou mikroskopiou pri 40-násobnom zväčšení pomocou mikroskopu Olympus BX43 s jasným poľom (Olympus, Centre Valley, PA) a pomocou softvéru IS TCapture (Tucsen Photonics Co., Fujian, Čína). Pre každú obličku bolo zachytených dvadsať neprekrývajúcich sa polí zafarbeného rezu a pozitívne zafarbená oblasť bola hodnotená zaslepeným pozorovateľom na (A) tubulárnu dilatáciu, odliatok a nekrózu (PAS) a (B) expresiu NGAL [32]. Bodovanie sa uskutočňovalo na 0-4 semikvantitatívnej bodovacej škále (podrobnosti v doplnkových metódach). Priemerné skóre sa vypočítalo pre každú obličku a konečné výsledky sa vyjadrili ako priemer skupiny ± SD.
Cistanche prášok
Diskusia
Sepsa a jej častá komplikácia SA-AKI sú hlavnými výzvami v oblasti verejného zdravia v dôsledku pretrvávajúceho nedostatku účinnej liečby a neuspokojivých výsledkov z klinických štúdií v poslednom štádiu [2, 3]. Niekoľko nedávnych predklinických štúdií uviedlo výsledky naznačujúce, že MSC rôznych zdrojov a ich produkty majú pozitívne účinky na závažnosť ochorenia a prežívanie v modeloch sepsy a AKI [7, 8, 11–15]. Klinický prínos MSC pri sepse a SA-AKI však zostáva nepreukázaný, pričom od ľudských pacientov sú k dispozícii len obmedzené údaje [5]. Doteraz klinické štúdie dokumentovali, že jednodávková iv infúzia MSC v prostredí podávania LPS, sepsy a ARDS je bezpečná a uskutočniteľná [16–19], ale zjavne neznižuje úmrtnosť na zlyhanie orgánov súvisiace so sepsou [17]. . V tejto štúdii sme porovnávali účinky jednorazovej a dvojitej dávky iv podávania výrazného ľudského terapeutického produktu MSC (CD362- vybraný hUC-MSC) na myšom CLP modeli polymikrobiálnej sepsy. Spočiatku, v súlade s nedávno oznámenými výsledkami pre ten istý produkt MSC na modeloch bakteriálnej pneumónie a sepsy u potkanov [23, 24], sme potvrdili potenciál včasného podania hUC-MSC na moduláciu systémového zápalu vyvolaného LPS u myší. V myšom modeli CLP polymikrobiálnej sepsy však naše výsledky ukázali, že jednotlivé dávky hUC-MSC podávané iv 4 hodiny po indukcii fekálnej peritonitídy nevykazovali žiadny jasný priaznivý účinok na systémový zápal alebo orgánovo špecifické (renálne) poškodenie tkaniva. Naopak, podanie druhej iv dávky hUC-MSC o 24 hodín neskôr viedlo k viacnásobným signálom zmiernenia zápalu a poškodenia obličiek do 48 hodín po nástupe sepsy. Napriek tomu nebol preukázaný prínos prežitia pre režim s dvojitou dávkou. Naše výsledky zdôrazňujú dôležitosť vykonávania in vivo štúdií terapeutických produktov MSC vo viacerých modeloch a hlásenia pozitívnych aj negatívnych predklinických výsledkov, aby sa lepšie informovali o klinickom preklade a návrhu štúdie. Celkovo naše výsledky tiež poskytujú dôkaz, že obmedzený alebo žiadny prínos skorých jednodávkových režimov protizápalových MSC produktov v štúdiách sepsy možno aspoň čiastočne prekonať opakovaným dávkovaním.
V myšom modeli LPS jediná skorá dávka hUCMSC modulovala systémové hladiny vrodených aj adaptívnych zápalových mediátorov počas najmenej 72 hodín, aj keď bez zjavného účinku na skóre závažnosti a prežitie. Fenotypová analýza peritoneálnych makrofágov poskytla dôkaz, že podávanie hUC-MSC bolo spojené s predpokladaným lokálnym imunomodulačným účinkom – vychýlenie makrofágov smerom k polarizácii M2, čo je spojené s vyriešením zápalového poškodenia a podporou opravy tkaniva [29, 35] a je pravdepodobne sprostredkovaná MSC cross-talk s rezidentnými myeloidnými bunkami [36]. Nedávne štúdie skutočne uvádzajú, že terapeutická imunomodulácia pomocou MSC pri sepse môže závisieť od ich fagocytózy myeloidnými bunkami (mononukleárnymi fagocytmi), ktoré potom podliehajú alternatívnej aktivácii vedúcej k produkcii IL-10 a iných parakrinných anti- zápalových mediátorov [7, 27, 37]. Aj keď by bolo zaujímavé určiť, či sú výhody takejto imunomodulácie zosilnené opakovanými dávkami hUC-MSC po podaní LPS, usúdili sme, že experimentálny model, ktorý lepšie odráža vyvíjajúcu sa sepsu, by mal väčší klinický význam. Po potvrdení biologickej aktivity hUC-MSC u myší s použitím podávania LPS sa teda myšací model CLP použil na charakterizáciu protizápalových účinkov súvisiacich s opakovaným dávkovaním a kvantifikáciu účinkov hUC-MSC špecifických pre obličky v podmienkach polymikrobiálnej sepsy. a SA-AKI. V našich rukách bol tento model spojený so stredne ťažkou sepsou (približne 70 percent, 50 percent a 40 percent prežívania po 48, 96 a 168 hodinách u neliečených zvierat) bez zjavného zlyhania pečene a obličiek. Naše pozorovania pre model, vrátane mier úmrtnosti a trendov v parametroch pečene v sére a albumíne, sú v súlade s veľmi komplexným profilovaním myšacieho CLP, ktoré uvádza Li et al. [38], ktorý tiež dokumentuje zníženú telesnú teplotu, krvný tlak a srdcovú frekvenciu počas prvých 48 hodín po CLP. Je zaujímavé, že zatiaľ čo Li a spol. zdokumentované zvýšenie sérového kreatinínu a dusíka močoviny v krvi 8 a 16 hodín po CLP, ich výsledky naznačujú, že tieto renálne funkčné biomarkery klesli na normálnu (alebo pod normálnu) úroveň do 48 hodín – možno v dôsledku vyvíjajúcich sa účinkov zmeneného metabolizmu/svalovej hmoty na tieto biomarkery ako model postupuje [38]. V súlade s tým analýza séra/plazmy a tkaniva obličiek po 48 hodinách ukázala významný systémový zápal a reakciu na poškodenie obličiek bez zjavného dôkazu ischemického poškodenia/nekrózy. Tieto posledné uvedené analýzy poskytli najjasnejšie dôkazy o modulačnom účinku režimu s dvojitou dávkou hUCMSC na závažnosť polymikrobiálnej sepsy v porovnaní s podaním jednej dávky, ktorá bola na rozdiel od výsledkov nedávno zaznamenaných na modeli CLP potkanov [24] nerozoznateľná. zo skupiny CLP liečenej fyziologickým roztokom naprieč všetkými skúmanými indexmi. Najmä klinicky relevantný biomarker AKI, NGAL, sa v tomto modeli ukázal ako cenný diskriminátor závažnosti sepsy a liečebného účinku a môže byť dôležitým biomarkerom pre budúce klinické štúdie bunkových terapií pri sepse a SA-AKI [33, 39 ].
Naše výsledky pre účinok iv MSC na prežitie u malých zvieracích modelov sepsy sú v rozpore s niektorými inými správami [28, 40], ale najmä sú v súlade s pozorovanými účinkami alogénnych MSC v klinických štúdiách na ľuďoch [5, 16– 18, 41]. V tejto súvislosti by sme zdôraznili potenciálnu úlohu skreslenia publikácií – konkrétne selektívneho zverejňovania výsledkov odrážajúcich pozitívne účinky – ako dôležitej hnacej sily nerealistických očakávaní účinnosti jednodávkových režimov MSC a iných pokročilých terapií v najskorších štádiách klinického skúšania. preklad [42]. Sun a kol. v nedávnej metaanalýze 29 štúdií na zvieratách o účinnosti terapií MSC pri sepse skutočne odhalili v týchto predklinických správach významnú publikačnú zaujatosť a nedostatok jasnosti, pokiaľ ide o optimálnu dávku buniek [43]. Napriek tomu uvádzame aj výrazné pozitívne zistenia, ktoré môžu pomôcť posunúť translačné ciele pre UC-MSC pri sepse alebo iných systémových a orgánovo špecifických zápalových ochoreniach, ako sú AKI, pečeň alebo respiračné ochorenia. V oboch modeloch tieto molekulárne zmeny naznačujú komplexné interakcie hUC-MSC s imunitnou odpoveďou Th1 a Th2. Takéto účinky na aktiváciu T-efektorových buniek a rovnováhu fenotypov pomocníkov T môžu hrať kľúčovú úlohu pri modulácii akútnej fázy sepsy, pretože nerozlišujúca, dysregulovaná aktivácia imunitných efektorov, ktorá vedie k vysokým hladinám cirkulujúcich cytokínov, prispieva k multiorgánovému zlyhaniu [44]. a v prípade T-buniek môže nasledovať rozsiahla apoptóza a následné imunitné nedostatočnosti [45]. Ukázalo sa tiež, že podávanie MSC môže znížiť lokalizovaný zápal tkaniva reguláciou homeostázy cytokínov a znížením prenosu imunitných buniek do orgánov [44]. V súlade s tým naša kvantitatívna analýza radu populácií intrarenálnych imunitných buniek 48 hodín po sepse vyvolanej CLP odhalila nedostatky vyvolané sepsou ovplyvňujúce vrodené aj adaptívne efektory, vrátane straty dvojito negatívnych T buniek, ktoré boli nedávno hlásené. byť včasnými odpoveďami na AKI [46]. Pozoruhodné je, že v prípade zvierat liečených hUC-MSC s dvojitou, ale nie jednou dávkou, bola preukázaná reverzia deplécie intrarenálnych imunitných buniek. Keďže podobné trendy boli pozorované aj v pľúcach a slezine, naše výsledky naznačujú potenciál opakovaného iv podávania MSC na rozsiahle zlepšenie deplécie imunitných buniek z nelymfoidných a lymfoidných orgánov – aspekt sepsy, ktorý je spojený s následnou úmrtnosťou v dôsledku sekundárna infekcia [47, 48]. Na základe dodatočného pozorovania zvýšenej bunkovej smrti medzi intrarenálnymi CD45 plus bunkami u neliečených zvierat CLP je pravdepodobné, že to odráža priame alebo nepriame účinky hUC-MSC na zníženie mitochondriálnej dysfunkcie a proapoptickej signalizácie [49–51]. Napriek tomu budú potrebné cielenejšie experimenty na úplné objasnenie mechanizmov, ktorými systémové podávanie MSC zachováva počet myeloidných a/alebo lymfoidných buniek pri sepse, a na určenie, či ich možno terapeuticky využiť.
Kapsuly Cistanche
Vzhľadom na inherentnú variabilitu, ktorú my a iní pozorujeme s individuálnymi výsledkami pre myšací model CLP, sme predpokladali, že hierarchická zhluková analýza kvantitatívnych hodnôt pre celý rad cirkulujúcich mediátorov súvisiacich so zápalom po 48 hodinách by pomohla lepšie definovať charakteristický „podpis odpovede“. medzi zvieratami liečenými MSC. Hoci sa 60 percent skupiny s dvojitou dávkou zoskupilo do vzoru, ktorý ich oddeľoval od väčšiny skupín s jednou dávkou a neliečených skupín a bolo bližšie k falošnej skupine, nebolo možné identifikovať žiadny veľmi jasný multianalytický profil modulácie ochorenia. Prístup analýzy hlavných komponentov (PCA) priniesol podobný záver (údaje nie sú uvedené). Malo by sa uznať, že údaje od zvierat, ktoré neprežili do 48 hodín, nebolo možné získať a je možné, že analýzy v jednom alebo viacerých skorších časových bodoch by mohli poskytnúť výraznejšie oddelenie reagujúcich/neodpovedajúcich. Napriek tomu táto analýza poukazuje na zložitosť interindividuálnych variácií, ktoré sú vlastné zvieracím modelom sepsy a bunkových terapií, dokonca aj s veľkou pozornosťou na princípy dobrého experimentálneho dizajnu [52, 53], a ktorá odráža podobné výzvy, ktorým čelia pri klinickej aplikácii nové terapie sepsy [18, 20, 41, 54, 55].
Mali by sa uznať určité obmedzenia štúdie. V prvom rade sme sa zamerali na skúmanie in vivo účinkov CD362-vybraného hUC-MSC, keďže tento bunkový produkt prechádza klinickými skúškami pre iné zápalové ochorenia vrátane ARDS súvisiaceho s COVID-19-. Tento dizajn štúdie zabránil získaniu ďalšieho prehľadu o komparatívnych účinkoch testovaného bunkového produktu pri sepse a SA-AKI s účinkami neselektovaného hUC-MSC alebo s MSC odvodeným z kostnej drene alebo iných tkanív. Po druhé, keďže použité dávky buniek boli zvolené na základe predchádzajúcich štúdií protizápalových účinkov ľudského MSC u myší, nie je možné určiť, či viacnásobné podania vyššieho alebo nižšieho počtu buniek poskytujú väčší prínos. Napokon, keďže veľkosti skupín pre experimenty s modelom CLP boli zamerané na riešenie účinkov hUC-MSC na systémový zápalový biomarker závažnosti sepsy/SA-AKI, je možné, že väčšie veľkosti skupín by jasnejšie definovali účinky opakovaných dávok na prežitie. Zatiaľ čo tieto problémy ďalej zdôrazňujú potrebu sekvenčných predklinických experimentov, ktoré sa čo najviac pridržiavajú kľúčových parametrov požadovaných pre optimálny návrh klinického skúšania, výsledky, ktoré tu uvádzame, podporujú pokračujúce zameranie sa na viacdávkové režimy protizápalových MSC pri sepse a SA-AKI.
Referencie
1. Singer, M., Deutschman, CS, Seymour, CW, Shankar-Hari, M., Annane, D., Bauer, M., Bellomo, R., Bernard, GR, Chiche, JD, Coopersmith, CM, Hotchkiss , RS, Levy, MM, Marshall, JC, Martin, GS, Opal, SM, Rubenfeld, GD, van der Poll, T., Vincent, JL, & Angus, DC (2016). Tretia medzinárodná konsenzuálna definícia sepsy a septického šoku (sepsa-3). The Journal of the American Medical Association, 315 (8), 801-810. https://doi.org/10.1001/jama.2016.0287
2. Hoste, EA, Bagshaw, SM, Bellomo, R., Cely, CM, Colman, R., Cruz, DN, Edipidis, K., Forni, LG, Gomersall, CD, Govil, D., Honore, PM, Joannes-Boyau, O., Joannidis, M., Korhonen, AM, Lavrentieva, A., Mehta, RL, Palevsky, P., Roessler, E., Ronco, C., a kol. (2015). Epidemiológia akútneho poškodenia obličiek u kriticky chorých pacientov: Medzinárodná štúdia AKI-EPI. Intenzívna medicína, 41 (8), 1411–1423. https://doi.org/ 10.1007/s00134-015-3934-7
3. Rudd, KE, Johnson, SC, Agesa, KM, Shackelford, KA, Tsoi, D., Kievlan, DR, Colombara, DV, Ikuta, KS, Kissoon, N., Finfer, S., Fleischmann-Struzek, C Machado, FR, Reinhart, KK, Rowan, K., Seymour, CW, Watson, RS, West, TE, Marinho, F., Hay, SI, a kol. (2020). Globálna, regionálna a národná incidencia a úmrtnosť sepsy, 1990-2017: Analýza globálnej záťaže štúdie chorôb. Lancet, 395 (10219), 200-211. https://doi. org/10.1016/S0140-6736(19)32989-7
4. Arutyunyan, I., Elchaninov, A., Makarov, A., & Fatkhudinov, T. (2016). Pupočná šnúra ako perspektívny zdroj terapie založenej na mezenchymálnych kmeňových bunkách. Stem Cells International, 2016, 6901286. https://doi.org/10.1155/2016/6901286
5. Fazekas, B. a Grifn, MD (2020). Terapie akútneho poškodenia obličiek založené na mezenchymálnych stromálnych bunkách: Pokrok v poslednom desaťročí. Kidney International, 97 (6), 1130–1140. https://doi.org/10. 1016/j.kint.2019.12.019
6. Hickson, LJ, Herrmann, SM, McNicholas, BA a Grifn, MD (2021). Pokrok smerom ku klinickej aplikácii mezenchymálnych stromálnych buniek a iných regeneračných terapií modulujúcich ochorenie: Príklady z oblasti nefrológie. Obličky 360, 2(3), 542–557. https://doi.org/10.34067/kid.0005692020
7. Weiss, ARR, Lee, O., Eggenhofer, E., Geissler, E., Korevaar, SS, Soeder, Y., Schlitt, HJ, Geissler, EK, Hoogduijn, MJ, & Dahlke, MH (2020). Diferenciálne účinky tepelne inaktivovaného, sekretómovo deficitného msc a metabolicky aktívneho msc pri sepse a alogénnej transplantácii srdca. Kmeňové bunky, 38 (6), 797-807. https://doi.org/10.1002/stem.3165
8. Jerkic, M., Gagnon, S., Rabani, R., Ward-Able, T., Masterson, C., Otulakowski, G., Curley, GF, Marshall, J., Kavanagh, BP, & Lafey, JG (2020). Mezenchymálne stromálne bunky ľudskej pupočníkovej šnúry čiastočne zmierňujú systémovú sepsu zvýšením zabíjania peritoneálnych makrofágov prostredníctvom indukcie hemoxygenázy-1 u potkanov. Anestéziológia, 132(1), 140–154. https://doi.org/10.1097/ ALN.0000000000003018
9. Wu, KH, Wu, HP, Chao, WR, Lo, WY, Tseng, PC, Lee, CJ, Peng, CT, Lee, MS, & Chao, YH (2016). Expresia signalizácie Toll-like receptor 4 v časových sériách u septických myší liečených mezenchymálnymi kmeňovými bunkami. Šok, 45 (6), 634–640. https://doi. org/10.1097/SHK.0000000000000546
10. Chang, CL, Leu, S., Sung, HC, Zhen, YY, Cho, CL, Chen, A., Tsai, TH, Chung, SY, Chai, HT, Sun, CK, Yen, CH a Yip , HK (2012). Vplyv apoptotických mezenchymálnych kmeňových buniek odvodených z tukového tkaniva na zmiernenie poškodenia orgánov a zníženie úmrtnosti pri syndróme sepsy u potkanov vyvolanom punkciou slepého čreva a ligáciou. Journal of Translational Medicine, 10, 244. https://doi. org/10.1186/1479-5876-10-244
11. Hall, SR, Tsoyi, K., Ith, B., Padera Jr., RF, Lederer, JA, Wang, Z., Liu, X., & Perrella, MA (2013). Mezenchymálne stromálne bunky zlepšujú prežitie počas sepsy v neprítomnosti hemoxygenázy-1: Význam neutrofilov. Kmeňové bunky, 31(2), 397–407. https://doi.org/10.1002/stem.1270
12. Zhang, G., Zou, X., Huang, Y., Wang, F., Miao, S., Liu, G., Chen, M., & Zhu, Y. (2016). Extracelulárne vezikuly odvodené z mezenchymálnych stromálnych buniek chránia pred akútnym poškodením obličiek prostredníctvom antioxidácie zvýšením aktivácie nrf2/are u potkanov. Výskum obličiek a krvného tlaku, 41 (2), 119–128. https://doi.org/10. 1159/000443413
13. Luo, CJ, Zhang, FJ, Zhang, L., Geng, YQ, Li, QG, Hong, Q., Fu, B., Zhu, F., Cui, SY, Feng, Z., Sun, XF a Chen, XM (2014). Mezenchymálne kmeňové bunky zlepšujú akútne poškodenie obličiek spojené so sepsou u myší. Šok, 41 (2), 123–129. https://doi. org/10.1097/SHK.0000000000000080
14. Condor, JM, Rodrigues, CE, Sousa Moreira, R., Canale, D., Volpini, RA, Shimizu, MH, Camara, NO, Noronha Ide, L., & Andrade, L. (2016). Liečba mezenchymálnymi kmeňovými bunkami získanými z rôsolu ľudského Whartona zmierňuje poškodenie obličiek vyvolané sepsou, poškodenie pečene a endoteliálnu dysfunkciu. Stem Cells Translational Medicine, 5 (8), 1048–1057. https://doi.org/10.5966/sctm. 2015-0138
15. Zullo, JA, Nadel, EP, Rabadi, MM, Baskind, MJ, Rajdev, MA, Demaree, CM, Vasko, R., Chugh, SS, Lamba, R., Goligorsky, MS, & Ratliff, BB (2015 ). Sekretóm endotelových progenitorových buniek uložených v hydrogéli a mezenchymálnych kmeňových buniek inštruuje polarizáciu makrofágov pri endotoxémii. Stem Cells Translational Medicine, 4(7), 852–861. https://doi.org/10. 5966/sctm.{8}}
16. Perlee, D., van Vught, LA, Scicluna, BP, Maag, A., Lutter, R., Kemper, EM, van 't Veer, C., Punchard, MA, Gonzalez, J., Richard, MP , Dalemans, W., Lombardo, E., de Vos, AF, & van der Poll, T. (2018). Intravenózna infúzia ľudských tukových mezenchymálnych kmeňových buniek modifikuje odpoveď hostiteľa na lipopolysacharid u ľudí: Randomizovaná, jednoducho zaslepená, paralelná skupina, placebom kontrolovaná štúdia. Kmeňové bunky, 36(11), 1778–1788. https://doi.org/10.1002/stem.2891
17. Gennadiy Galstyan, PM, Parovičnikova, E., Kuzmina, L., Troitskaya, V., Gemdzhian, E., & Savchenko, V. (2018). Výsledky pilotnej randomizovanej ruskej klinickej štúdie s mezenchymálnymi stromálnymi bunkami u ťažko neutropenických pacientov so septickým šokom (RUMCESS). International Journal Blood Research and Disorders, 5(1), 33. https://doi.org/10.23937/2469-5696/1410033
18. McIntyre, LA, Stewart, DJ, Mei, SHJ, Courtman, D., Watpool, I., Granton, J., Marshall, J., Dos Santos, C., Walley, KR, Winston, BW, Schlosser, K., Fergusson, DA, & Canadian Critical Care Trials Group, & Canadian Critical Care Translational Biology Group. (2018). Bunková imunoterapia pre septický šok. Fáza I klinického skúšania. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine, 197 (3), 337-347. https://doi.org/10. 1164/rccm.{8}}OC
19. Matthay, MA, Calfee, CS, Zhuo, H., Thompson, BT, Wilson, JG, Levitt, JE, Rogers, AJ, Gotts, JE, Wiener-Kronish, JP, Bajwa, EK, Donahoe, MP, McVerry , BJ, Ortiz, LA, Exline, M., Christman, JW, Abbott, J., Delucchi, KL, Caballero, L., McMillan, M. a kol. (2019). Liečba alogénnymi mezenchymálnymi stromálnymi bunkami pre stredne ťažký až ťažký syndróm akútnej respiračnej tiesne (štúdia START): Randomizovaná bezpečnostná štúdia fázy 2a. The Lancet Respiratory Medicine, 7 (2), 154–162. https://doi.org/10. 1016/S2213-2600(18)30418-1
20. Swaminathan, M., Staford-Smith, M., Chertow, GM, Warnock, DG, Paragamian, V., Brenner, RM, Lellouche, F., FoxRobichaud, A., Atta, MG, Melby, S., Mehta, RL, Wald, R., Verma, S., Mazer, CD, & vyšetrovatelia, A.-A. (2018). Alogénne mezenchymálne kmeňové bunky na liečbu AKI po operácii srdca. Journal of the American Society of Nephrology, 29 (1), 260–267. https://doi.org/10.1681/ASN.2016101150
21. Gotts, JE a Matthay, MA (2018). Bunková terapia pri sepse. O krok bližšie. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine, 197 (3), 280-281. https://doi.org/10.1164/rccm. 201710-2068ED
22. Griffin, MD, & Swaminathan, S. (2020). Úvodník: Inovatívne biologické látky a lieky na zacielenie zápalu obličiek. Frontiers in Pharmacology, 11, 38. https://doi.org/10.3389/fphar.2020.00038
23. Horie, S., Masterson, C., Brady, J., Loftus, P., Horan, E., O'Flynn, L., Elliman, S., Barry, F., O'Brien, T. , Lafey, JG a O'Toole, D. (2020). CD362(plus) mezenchymálne stromálne bunky derivované z pupočníkovej šnúry pre napr. coli pneumónia: Vplyv dávkovacieho režimu, pasáže, kryokonzervácie a antibiotickej terapie. Stem Cell Research & Therapy, 11(1), 116. https://doi.org/10.1186/s13287-020-01624-8
24. Gonzalez, H., Keane, C., Masterson, CH, Horie, S., Elliman, SJ, Higgins, BD, Scully, M., Lafey, JG, & O'Toole, D. (2020). CD362(plus) mezenchymálne stromálne bunky derivované z pupočníkovej šnúry oslabujú polymikrobiálnu sepsu vyvolanú podviazaním a punkciou slepého čreva. International Journal of Molecular Sciences, 21(21). https://doi.org/10.3390/ijms21218270
25. Lewis, AJ, Seymour, CW a Rosengart, MR (2016). Súčasné myšacie modely sepsy. Chirurgické infekcie, 17 (4), 385–393. https://doi.org/10.1089/sur.2016.021
26. Remick, DG, & Ward, PA (2005). Hodnotenie endotoxínových modelov na štúdium sepsy. Šok, 24 (Suppl 1), 7-11. https://doi.org/10.1097/01.shk.0000191384.34066.85
27. de Witte, SFH, Luk, F., Sierra Parraga, JM, Gargesha, M., Merino, A., Korevaar, SS, Shankar, AS, O'Flynn, L., Elliman, SJ, Roy, D. , Betjes, MGH, Newsome, PN, Baan, CC a Hoogduijn, MJ (2018). Imunomodulácia terapeutickými mezenchymálnymi stromálnymi bunkami (MSC) sa spúšťa prostredníctvom fagocytózy msc monocytovými bunkami. Kmeňové bunky, 36(4), 602–615. https://doi.org/10.1002/stem.2779
28. Zhao, X., Liu, D., Gong, W., Zhao, G., Liu, L., Yang, L., & Hou, Y. (2014). Ligandy Toll-like receptora 3, poly(I:C), zlepšujú imunosupresívnu funkciu a terapeutický účinok mezenchymálnych kmeňových buniek na sepsu prostredníctvom inhibície mir-143. Kmeňové bunky, 32(2), 521–533. https://doi.org/10.1002/stem.1543
29. Nemeth, K., Leelahavanichkul, A., Yuen, PS, Mayer, B., Parmelee, A., Doi, K., Robey, PG, Leelahavanichkul, K., Koller, BH, Brown, JM, Hu, X., Jelinek, I., Star, RA, & Mezey, E. (2009). Stromálne bunky kostnej drene zmierňujú sepsu prostredníctvom preprogramovania hostiteľských makrofágov závislých od prostaglandínu E(2), aby sa zvýšila ich produkcia interleukínu-10. Nature Medicine, 15 (1), 42–49. https://doi.org/10.1038/nm.1905
30. Fletcher, AL, Elman, JS, Astarita, J., Murray, R., Saeidi, N., D'Rozario, J., Knoblich, K., Brown, FD, Schildberg, FA, Nieves, JM, Heng , TS, Boyd, RL, Turley, SJ, & Parekkadan, B. (2014). Transplantácie fibroblastických retikulárnych buniek lymfatických uzlín vykazujú silnú terapeutickú účinnosť pri sepse myší s vysokou mortalitou. Science Translational Medicine, 6(249), 249ra109. https://doi.org/10.1126/scitranslmed.3009377
31. Gonzalez-Rey, E., Anderson, P., Gonzalez, MA, Rico, L., Buscher, D., & Delgado, M. (2009). Ľudské dospelé kmeňové bunky odvodené z tukového tkaniva chránia pred experimentálnou kolitídou a sepsou. Gut, 58(7), 929-939. https://doi.org/10.1136/gut.2008. 168534
32. Kaucsar, T., Godo, M., Revesz, C., Kovacs, M., Mocsai, A., Kiss, N., Albert, M., Krenacs, T., Szenasi, G., & Hamar, P. (2016). Pomer lipokalínu spojený s neutrofilnou želatinázou v moči/plazme je citlivým a špecifickým markerom subklinického akútneho poškodenia obličiek u myší. PLoS One, 11(1), e0148043. https://doi.org/10.1371/journ al.pone.0148043
33. Park, HK, Kim, S., Lee, S.-S., Kim, H.-J., Ahn, H.-S., Song, JY, Um, T.-H., Cho, C .-R., Jung, H., Koo, H.-K., Sim, YS, Song, J.-U., & Park, J.-H. (2015). Pomáha plazmatický NGAL pri predikcii akútneho poškodenia obličiek u pacientov so sepsou?: Systematický prehľad a metaanalýza. European Respiratory Journal, 46 (suppl 59), PA2148. https://doi.org/10.1183/13993003.congr ess-2015.PA2148
34. Koeze, J., van der Horst, ICC, Keus, F., Wiersema, R., Dieperink, W., Kootstra-Ros, JE, Zijlstra, JG, & van Meurs, M. (2020). Lipkalín spojený s plazmatickou neutrofilnou želatinázou pri prijatí na jednotku intenzívnej starostlivosti ako prediktor progresie akútneho poškodenia obličiek. Clinical Kidney Journal, 13(6), 994–1002. https://doi. org/10.1093/ckj/sfaa002
35. Lee, KY (2019). M1 a M2 polarizácia makrofágov: mini-prehľad. Lekárska biologická veda a inžinierstvo, 2 (1), 1–5. https://doi.org/10.30579/mbse.2019.2.1.1
36. Eggenhofer, E., Luk, F., Dahlke, MH, & Hoogduijn, MJ (2014). Život a osud mezenchymálnych kmeňových buniek. Frontiers in Immunology, 5, 148. https://doi.org/10.3389/fmmu.2014.00148
37. Luk, F., de Witte, SF, Korevaar, SS, Roemeling-van Rhijn, M., Franquesa, M., Strini, T., van den Engel, S., Gargesha, M., Roy, D. , Dor, FJ, Horwitz, EM, de Bruin, RW, Betjes, MG, Baan, CC a Hoogduijn, MJ (2016). Inaktivované mezenchymálne kmeňové bunky si zachovávajú imunomodulačnú kapacitu. Kmeňové bunky a vývoj, 25 (18), 1342–1354. https://doi.org/10.1089/scd. 2016.0068
38. Li, JL, Li, G., Jing, XZ, Li, YF, Ye, QY, Jia, HH, Liu, SH, Li, XJ, Li, H., Huang, R., Zhang, Y., & Wang, H. (2018). Hodnotenie biomarkerov spojených s klinickou sepsou v modeli septických myší. Journal of International Medical Research, 46 (6), 2410–2422. https://doi.org/10.1177/0300060518764717
39. Cai, L., Rubin, J., Han, W., Venge, P., & Xu, S. (2010). Pôvod viacerých molekulárnych foriem v moči HNL/NGAL. Clinical Journal of the American Society of Nephrology, 5(12), 2229–2235. https://doi.org/10.2215/CJN.00980110
40. Capcha, JMC, Rodrigues, CE, Moreira, RS, Silveira, MD, Dourado, P., Dos Santos, F., Irigoyen, MC, Jensen, L., Garnica, MR, Noronha, IL, Andrade, L. & Gomes, SA (2020).
41. Schlosser, K., Wang, JP, Dos Santos, C., Walley, KR, Marshall, J., Fergusson, DA, Winston, BW, Granton, J., Watpool, I., Stewart, DJ, McIntyre, LA, Mei, SHJ, & Canadian Critical Care Trials, G., & the Canadian Critical Care Translational Biology, G. (2019). Účinky liečby mezenchymálnymi kmeňovými bunkami na systémové hladiny cytokínov vo fáze 1 bezpečnostnej štúdie s eskaláciou dávky u pacientov so septickým šokom. Critical Care Medicine, 47(7), 918–925. https://doi.org/10.1097/CCM.000000000003657
42. van Rhijn-Brouwer, FCC, Gremmels, H., Fledderus, JO, & Verhaar, MC (2018). Charakteristiky mezenchymálnych stromálnych buniek a regeneračný potenciál pri kardiovaskulárnych ochoreniach: Dôsledky pre bunkovú terapiu. Bunková transplantácia, 27 (5), 765-785. https://doi.org/10.1177/0963689717738257
43. Sun, XY, Ding, XF, Liang, HY, Zhang, XJ, Liu, SH, Bing, H., Duan, XG, & Sun, TW (2020). Účinnosť terapie mezenchymálnymi kmeňovými bunkami pri sepse: Metaanalýza predklinických štúdií. Stem Cell Research & Therapy, 11(1), 214. https://doi.org/ 10.1186/s13287-020-01730-7
44. Laroye, C., Gibot, S., Reppel, L., & Bensoussan, D. (2017). Stručný prehľad: Mezenchymálne stromálne/kmeňové bunky: Nová liečba sepsy a septického šoku? Kmeňové bunky, 35(12), 2331–2339. https://doi.org/10.1002/stem.2695
45. Brady, J., Horie, S., & Lafey, JG (2020). Úloha adaptívnej imunitnej odpovede pri sepse. Intensive Care Medicine Experimental, 8 (Suppl 1), 20. https://doi.org/10.1186/s40635-020-00309-z
46. Martina, MN, Noel, S., Saxena, A., Bandapalle, S., Majithia, R., Jie, C., Arend, LJ, Allaf, ME, Rabb, H., & Hamad, AR (2016 ). Dvojito negatívne alfa-beta T bunky včas reagujú na Aki a nachádzajú sa v ľudských obličkách. Journal of the American Society of Nephrology, 27(4), 1113–1123. https://doi.org/10.1681/ ASN.2014121214
47. Hotchkiss, RS, Tinsley, KW, Swanson, PE, Schmieg Jr., RE, Hui, JJ, Chang, KC, Osborne, DF, Freeman, BD, Cobb, JP, Buchman, TG, & Karl, IE (2001 ). Apoptóza vyvolaná sepsou spôsobuje u ľudí progresívnu hlbokú depléciu B a CD4 plus T lymfocytov. The Journal of Immunology, 166(11), 6952–6963. https://doi.org/10.4049/jimmunol.166.11.6952
48. Condotta, SA, Cabrera-Perez, J., Badovinac, VP, & Grifth, TS (2013). Imunita sprostredkovaná T-bunkami a úloha TRAIL pri imunosupresii vyvolanej sepsou. Critical Reviews in Immunology, 33(1), 23–40. https://doi.org/10.1615/critrevimmunol.{12}}
49. Khosrojerdi, A., Soudi, S., Hosseini, AZ, Eshghi, F., Shafee, A., & Hashemi, SM (2021). Imunomodulačné a terapeutické účinky mezenchymálnych kmeňových buniek na orgánovú dysfunkciu pri sepse. Šok, 55 (4), 423–440. https://doi.org/10.1097/SHK.0000000000 001644
50. Nie, P., Bai, X., Lou, Y., Zhu, Y., Jiang, S., Zhang, L., Tian, N., Luo, P., & Li, B. (2021) . Ľudské mezenchymálne kmeňové bunky z pupočníkovej šnúry znižujú oxidačné poškodenie a apoptózu pri diabetickej nefropatii aktiváciou Nrf2. Stem Cell Research & Therapy, 12(1), 450. https://doi.org/10.1186/s13287-021-02447-x
51. dos Santos, CC, Murthy, S., Hu, P., Shan, Y., Haitsma, JJ, Mei, SH, Stewart, DJ, & Liles, WC (2012). Sieťová analýza transkripčných reakcií vyvolaných liečbou experimentálnej sepsy mezenchymálnymi kmeňovými bunkami. American Journal of Pathology, 181(5), 1681–1692. https://doi.org/10.1016/j.ajpath.2012.08.009
52. von Kortzfeisch, VT, Karp, NA, Palme, R., Kaiser, S., Sachser, N., & Richter, SH (2020). Zlepšenie reprodukovateľnosti vo výskume na zvieratách rozdelením študovanej populácie do niekoľkých „mini-experimentov“. Scientifc Reports, 10(1), 16579. https://doi.org/10. 1038/s41598-020-73503-4
53. Tanavde, V., Vaz, C., Rao, MS, Vemuri, MC, & Pochampally, RR (2015). Výskum s použitím mezenchymálnych kmeňových/stromálnych buniek: Metrika kvality smerom k vývoju referenčného materiálu. Cytoterapia, 17(9), 1169–1177. https://doi.org/10.1016/j.jcyt.2015. 07.008
54. Pickkers, P., Heemskerk, S., Schouten, J., Laterre, PF, Vincent, JL, Beishuizen, A., Jorens, PG, Spapen, H., Bulitta, M., Peters, WH, & van der Hoeven, JG (2012). Alkalická fosfatáza na liečbu akútneho poškodenia obličiek vyvolaného sepsou: Prospektívna randomizovaná dvojito zaslepená placebom kontrolovaná štúdia. Critical Care, 16(1), R14. https://doi.org/10.1186/cc11159
55. Pickkers, P., Mehta, RL, Murray, PT, Joannidis, M., Molitoris, BA, Kellum, JA, Bachler, M., Hoste, EAJ, Hoiting, O., Krell, K., Ostermann, M ., Rozendaal, W., Valkonen, M., Brealey, D., Beishuizen, A., Meziani, F., Murugan, R., de Geus, H., Payen, D., a kol. (2018). Účinok ľudskej rekombinantnej alkalickej fosfatázy na 7-dňový klírens kreatinínu u pacientov s akútnym poškodením obličiek spojeným so sepsou: Randomizovaná klinická štúdia. The Journal of the American Medical Association, 320(19), 1998– 2009. https://doi.org/10.1001/jama.2018.14283
Barbara Fazekas1 · Senthilkumar Alagesan2 · Luke Watson2 · Olivia Ng1,2 · Callum M. Conroy1,2 · Cristina Català3 · Maria Velascode Andres3 · Neema Negi1 · Jared Q. Gerlach4 · Sean O. Hynes5,6 · Francisco Lozano3,7,8 · Stephen J. Elliman2 · Matthew D. Grifn1,9,10
1 Inštitút regeneratívnej medicíny pri CÚRAM Center for Research in Medical Devices, School of Medicine, National University of Ireland Galway, Galway, Ireland
2 Orbsen Therapeutics Ltd., Galway, Írsko
3 Institut d'Investigacions Biomèdiques August Pi i Sunyer, Barcelona, Španielsko
4 Glycoscience Group, Národné centrum pre vedu biomedicínskeho inžinierstva, National University of Ireland Galway, Galway, Írsko
5 Disciplína patológie, Lekárska fakulta, National University of Ireland Galway, Galway, Írsko
6 Histopatologické oddelenie, Univerzitné nemocnice Galway, Galway, Írsko
7 Servei d'Immunologia, Hospital Clinic de Barcelona, Barcelona, Španielsko
8 Department de Biomedicina, Universitat de Barcelona, Barcelona, Španielsko
9 Oddelenie nefrológie, Saolta University Health Care Group, Galway University Hospitals, Galway, Írsko
10 National University of Ireland Galway, REMEDI, Biomedical Sciences, Corrib Village, Dangan, Galway H91 TK33, Írsko
