Dichotomické reakcie na chronickú fetálnu hypoxiu vedú k vopred určenému fenotypu starnutia Ⅱ
Nov 29, 2023
Hypoxický
Fetálne obličky
Ukázať profil deregulovanej expresie proteínov Na objasnenie molekulárnych dráh, ktoré sú základom hypoxiou poháňaného IUGR, boli čerstvo izolované obličky z hypoxických alebo normoxických plodov E18.5 podrobené profilovaniu proteómu zdola nahor pomocou systému nano-LC (Dionex UltiMate 3{{9 }}00 RSLC) spojený s hmotnostným spektrometrom orbitrap s vysokým rozlíšením (Thermo QExactive). Analýza hlavnej zložky ukázala výrazné rozdiely medzi hypoxickými a normoxickými obličkami (obr. 2A). Celkovo bolo identifikovaných 6307 proteínov (FDR < 0,01, doplnková tabuľka S2), z ktorých 436 bolo významne deregulovaných (FDR < 0,05); 284 so zvýšenou početnosťou a 152 so zníženou početnosťou. Zhlukovanie funkčných anotácií pomocou génovej ontológie (18–20) odhalilo obohatenie špecifických mitochondriálnych, lyzozomálnych, RNA- a DNA-viažucich proteínov, ako aj proteínov zapojených do špecifických metabolických procesov alebo vrodených imunitných reakcií (obr. 2, B–D). . Tieto proteíny sme kategorizovali s ohľadom na (1) tvorbu nefrónov, (2) metabolickú adaptáciu a (3) zrýchlené starnutie, ako je uvedené a diskutované v nasledujúcich odsekoch.
ZÍSKAJTE PRÍRODNÝ BIO EXTRAKT CISTANCHE S 25 % ECHINAKOZIDU A 9 % AKTEOZIDU NA INFEKCIU OBLIČIEK
Potlačená replikácia DNA a syntéza proteínov prispievajú k obmedzenej tvorbe nových nefrónov pri chronickej hypoxii
Nežiaduce udalosti počas vývoja, ako je chronická hypoxia plodu, boli často spojené so zníženým počtom nefrónov (27, 29–32). Avšak základný mechanizmus presvedčivo vysvetľujúci toto zistenie mohol byť len zriedkavo preukázaný. Zoskupenie všetkých 64 deregulovaných proteínov patriacich do GO-pojmov „DNA-binding“ a „RNA-binding“ (teplotná mapa je znázornená na doplnkovom obr. S2) pomocou databázy STRING (22) odhalilo viacero podsietí vrátane opravy DNA, replikácie DNA, zostrih mRNA a ribozomálne proteíny (obr. 3A). Podrobnejší zoznam obohatených procesov alebo ciest je znázornený na obrázku 3B (FDR < 0.05). Z týchto „ribozómov“ a „replikácie DNA“ patrili medzi hlavné termíny potláčaných proteínov, zatiaľ čo zostrih mRNA a „degradácia RNA“ patrili medzi top termíny indukovaných proteínov. Procesy opravy DNA ukázali bipartitný vzor expresie. Tu boli proteíny zapojené do nukleotidovej excízie alebo opravy nesúladu potlačené, ale boli indukované tie, ktoré sprostredkúvajú "základnú excíziu opravy". Okrem toho bola hladina množstva inhibítora bunkového cyklu p27Kip1 dvojnásobne zvýšená (obr. 3C) a hladina proliferačného markera Ki67 bola 3.4-krát znížená (obr. 3D), čo spolu naznačuje spomalenie bunky proces delenia. Najmä hladina expresie mRNA Mki67, génu kódujúceho Ki67, bola významne potlačená v myších primárnych proximálnych tubulárnych bunkách kultivovaných v hypoxických podmienkach (obr. 3E). Táto represia bola sprostredkovaná hypermetyláciou oblasti promótora Mki67 v hypoxických obličkách plodu (obr. 3F). Zdá sa teda, že vo fetálnych hypoxických obličkách je syntéza DNA, translácia mRNA a väčšina procesov opravy DNA zablokovaná, čím sa znižuje schopnosť buniek rásť a proliferovať. V súhrne tu po prvýkrát údaje o profilovaní proteómu poskytujú molekulárny dôkaz potenciálne vysvetľujúci zníženú tvorbu nefrónov.
Pri chronických hypoxických stavoch sa aktivuje vrodený imunitný systém a oxidačný stres
Jedným z najviac obohatených výrazov vyskytujúcich sa vo funkčnej anotačnej analýze všetkých 436 proteínov a najvyšší pre indukované proteíny bol „degranulácia neutrofilov“ (obr. 2, B a C), čo naznačuje prebiehajúcu aktiváciu vrodeného imunitného systémuhypoxické obličky plodu. Z 34 asociovaných proteínov bolo 29 indukovaných a päť potlačených (ružové na obr. 4A). Medzi indukovanými proteínmi bolo veľa glykolytických a lyzozómových súvisiacich enzýmov, niekoľko členov proteínovej rodiny S100A, inhibičný faktor migrácie zápalových cytokínov makrofágov (MIF), ako aj neutrofilný granulový proteín primárnych a sekundárnych granulovaných proteínov (NGP), myeloperoxidáza (MPO) , katelicidín (CAMP), proteín rozpoznávajúci peptidoglykán 1 (PGLYRP1) a laktoferín (LTF). Na overenie predpokladanej invázie neutrofilov v hypoxických obličkách plodu a na odhalenie ich umiestnenia v tkanive sa rezy obličiek zafarbili na MPO. MPO-pozitívne bunky tvorili zhluky v nefrogénnej zóne renálnej kôry, v blízkosti krvných ciev, priľahlých k proximálnemu tubulu a príležitostne sa mohli nachádzať v medulárnych oblastiach hypoxických vzoriek (obr. 4D a doplnkový obr. S3, A –C). Na rozdiel od toho normoxické obličky plodu nevykazovali infiltráciu alebo akumuláciu neutrofilov (obr. 4C). Ukázalo sa, že kaveolín{11}} (CAV1) zvyšuje transcelulárnu migráciu imunitných buniek (33). V súlade s tým bol CAV1 indukovaný v hypoxických obličkách plodu (doplnkový obr. S3D), čo ukazuje na zvýšené zafarbenie obličkových krvných ciev vrátane tých, ktoré prechádzajú kortikálnou oblasťou obličky plodu (obr. 4, E a F). Degranulácia neutrofilov vytvára lokálny výbuch reaktívnych foriem kyslíka, čo vedie k zvýšenému oxidačnému stresu a poškodeniu tkaniva vrátane oxidácie DNA. Dôležitým markerom oxidácie DNA je 8-hydroxy-2′-deoxyguanozín (8-OHdG), ktorý bol posilnený v proximálnych tubuloch a v nefrogénnej zóne hypoxických fetálnych obličiek (obr. 4, G a H), v blízkosti zhluku neutrofilov. Toto zvýšenie 8-OHdG poškodenej DNA nastalo napriek súčasnej indukcii MGMT a OGG1 (obr. 4, I a J), dvoch enzýmov zodpovedných za odstránenie 8-OHdG. Tieto výsledky demonštrujú pokračujúcu aktiváciu vrodeného imunitného systému vo vyvíjajúcej sa obličke, ktorá okrem hypoxického stresu spôsobuje ešte väčšie poškodenie tkaniva. Spolu s neúčinnou opravou týchto tkanivových lézií sa môže spustiť začarovaný kruh, ktorý ďalej zhoršuje nefrogenézu.
Obr. 2. Proteomické profilovanie odhaľuje viaceré zmeny spojené s hypoxiou. Analýza hlavnej zložky proteomických údajov ukázala jasné oddelenie medzi normoxickými a hypoxickými obličkami plodu. B–D, funkčné anotačné zoskupenie všetkých významne deregulovaných proteínov (B), indukovaných proteínov (C) a redukovaných proteínov (D) Výrazne zmenená frakcia dráhy (os x) je vynesená oproti jej významu obohatenia (y- os). Veľkosť každého bodu kóduje celkový počet členov v tejto dráhe. Indukované proteíny vykazovali obohatenie metabolických procesov (glykolýza), mitochondriálnych alebo lyzozomálnych proteínov a proteínov zapojených do reakcie imunitného systému (degranulácia neutrofilov), zatiaľ čo redukované proteíny sú obohatené o väzbové dráhy DNA a RNA (štrukturálna zložka ribozómu).
(PGLYRP1) a laktoferín (LTF). Na overenie predpokladanej invázie neutrofilov v hypoxických obličkách plodu a na odhalenie ich umiestnenia v tkanive sa rezy obličiek zafarbili na MPO. MPO-pozitívne bunky tvorili zhluky v nefrogénnej zóne renálnej kôry, v blízkosti krvných ciev, priľahlých k proximálnemu tubulu a príležitostne sa mohli nachádzať v medulárnych oblastiach hypoxických vzoriek (obr. 4D a doplnkový obr. S3, A –C). Na rozdiel od toho normoxické obličky plodu nevykazovali infiltráciu alebo akumuláciu neutrofilov (obr. 4C). Ukázalo sa, že kaveolín{5}} (CAV1) zvyšuje transcelulárnu migráciu imunitných buniek (33). V súlade s tým bol CAV1 indukovaný v hypoxických obličkách plodu (doplnkový obr. S3D), čo ukazuje na zvýšené zafarbenie obličkových krvných ciev vrátane tých, ktoré prechádzajú kortikálnou oblasťou obličky plodu (obr. 4, E a F). Degranulácia neutrofilov vytvára lokálny výbuch reaktívnych foriem kyslíka, čo vedie k zvýšenému oxidačnému stresu a poškodeniu tkaniva vrátane oxidácie DNA. Dôležitým markerom oxidácie DNA je 8-hydroxy-2′-deoxyguanozín (8-OHdG), ktorý bol zosilnený v proximálnych tubuloch a v nefrogénnej zóne hypoxických fetálnych obličiek (obr. 4, G a H), v blízkosti zhluku neutrofilov. K tomuto nárastu DNA poškodenej 8-OHdG došlo napriek súčasnej indukcii MGMT a OGG1 (obr. 4, I a J), dvoch enzýmov zodpovedných za odstránenie 8-OHdG. Tieto výsledky demonštrujú pokračujúcu aktiváciu vrodeného imunitného systému vo vyvíjajúcej sa obličke, ktorá okrem hypoxického stresu spôsobuje ešte väčšie poškodenie tkaniva. Spolu s neúčinnou opravou týchto tkanivových lézií sa môže spustiť začarovaný kruh, ktorý ďalej zhoršuje nefrogenézu.
Metabolické adaptácie na hypoxiu vedú k výraznej glykolýze vo fetálnej obličke
Chronická hypoxia je závažný stav, ktorému sa bunky musia prispôsobiť prostredníctvom metabolických zmien, aby prežili. V prvom rade je to udržanie bunkovej produkcie ATP, ktorá pri absencii dostatočného okysličovania vyžaduje posun od oxidačnej fosforylácie ku glykolýze. Zo všetkých termínov vyplývajúcich z funkčnej anotácie bol najvýznamnejší „glykolytický proces“ (obr. 2B). Všetkých desať enzýmov (červená ①–⑩ na obr. 5A) potrebných na premenu glukózy na pyruvát bolo indukovaných vhypoxické obličky ploduv porovnaní s normoxickými kontrolami (teplotná mapa je znázornená na obr. 5C). Okrem toho boli tiež zvýšené expresie glukózového transportéra 1 (SLC2A1, oranžová na obr. 4A) a laktátdehydrogenázy A (LDHA, tmavočervená na obr. 5A), čo by malo uľahčiť zvýšené vychytávanie glukózy do bunky a rozšírené zníženie pyruvát na laktát, resp. Zdá sa, že alternatívnemu využitiu pyruvátu v cykle kyseliny citrónovej (1) bráni zvýšená expresia pyruvátdehydrogenázovej kinázy 1 (PDK1, tmavočervená na obr. 5A), ktorá inaktivuje pyruvátdehydrogenázový komplex v mitochondriách a tým aj oxidáciu pyruvátu na acetyl-CoA; a (2) zníženými hladinami pyruvátkarboxylázy (PC), ktorá katalyzuje konverziu pyruvátu na oxalacetát. Na druhej strane, fruktóza-1,6-bisfosfatáza 1 (FBP1, modrá na obr. 5A) bola znížená, čím sa ďalej zvýšil potenciálny tok glukózy smerom k pyruvátu. Všetky tieto enzymatické zmeny podporujú produkciu laktátu a skutočne, koncentrácia laktátu bola zvýšená v hypoxických obličkách plodu (obr. 5B). Zvýšená tvorba laktátu môže viesť k nepriaznivému okysleniu. Napriek tomu sme medzi obohatenými proteínmi našli monokarboxylátové transportéry SLC16A3 a SLC5A8 (oranžové na obr. 5A), o ktorých je známe, že vylučujú laktát do extracelulárneho priestoru, aby sa vyhli toxickým účinkom cytoplazmatickej acidifikácie. Náš model teda demonštruje pozoruhodnú schopnosť fetálnych obličiek prispôsobiť sa chronickej hypoxii zvýšením glykolytickej aktivity,
Obr. 3. Tvorba nových nefrónov pri hypoxii je spojená s potlačenou replikáciou DNA a syntézou proteínov. Sieť proteínových interakcií významne zmenených proteínov viažucich DNA a RNA odvodených z databázy STRING ukazuje niekoľko proteínových zhlukov: ribozomálne proteíny (modré), proteíny zapojené do replikácie DNA (zelené), opravy DNA (fialové) a zostrih mRNA ( červená). Proliferačný marker Ki67 (Mki67) je označený čiernou farbou, čo zvýrazňuje jeho blízky vzťah k oprave DNA a replikácii DNA. B, výber dráh významne zmenených proteínov viažucich DNA a RNA z databáz KEGG a Reactome, ktoré vykazovali najvýznamnejšie zmeny vhypoxické obličky, zobrazené v zostupnom poradí významnosti. Procesy zostrihu RNA a degradácie RNA boli obohatené (červená), zatiaľ čo dráhy translácie RNA, replikácie DNA a opravy boli potlačené (modrá). Iba procesy s FDR<0.05 are shown. C and D, the cell cycle inhibitor p27Kip1 was enhanced (unpaired two-tailed t test, Welch's correction, p = 0.0095), whereas the expression of the proliferation marker Ki67 was reduced (unpaired two-tailed t test, Welch's correction, p = 0.0078) in hypoxic fetal kidneys. E, hypoxia reduced the mRNA expression level of Mki67 in mouse primary proximal tubular cells (unpaired two-tailed t test, p < 0.0001). F, this reduction was mediated by hypermethylation of the Mki67 promoter in hypoxic fetal kidneys. Open circle unmethylated, black circle methylated (Fisher's exact test, p = 0.0016; Mann–Whitney U-test, p = 0.0431)
Obr. 4. Proteíny zapojené do zápalovej reakcie a oxidačného stresu sú obohatené o novotvoriace sa nefróny pri hypoxii. A, zobrazenie všetkých 34 významne zmenených proteínov pre anotáciu nazývanú degranulácia neutrofilov (ružové krúžky) medzi všetkými významnými (väčšie sivé krúžky) a nevýznamnými (menšie sivé krúžky) proteínmi nášho súboru údajov. 29 malo vyššiu úroveň abundancie, zatiaľ čo päť bolo znížených. B, tepelná mapa zobrazujúca všetky ružové proteíny v (A) a ich indukciu alebo represiu pri hypoxii, znázornenú v klesajúcom poradí podľa množstva proteínov. C–H, reprezentatívne imunohistochemické obrazy E18.5 normoxických resphypoxické obličkyukazujúci infiltráciu neutrofilov a oxidačný stres. C a D, imunohistochémia pre neutrofilný marker myeloperoxidázu (MPO) odhalila zhlukovanie týchto buniek v blízkosti novotvoriacich sa nefrónov (hviezdička) a priľahlých k renálnym krvným cievam (šípka) hypoxických fetálnych obličiek (D). V normoxických kontrolách (C) boli MPO-pozitívne bunky prítomné len zriedka. (Mierka 100 μm). E a F, imunohistochémia znázorňujúca zvýšenú expresiu kaveolínu-1 (CAV1) v obličkových krvných cievach hypoxických fetálnych obličiek (F) v porovnaní s kontrolami (E) (stĺpce 200 μm). G a H, 8-hydroxy-2′-deoxyguanozín (8-OHdG), marker oxidačného poškodenia DNA, sa výrazne zvýšil v novotvoriacich sa nefrónoch (hviezdička) v obličkovej kôre a v bunky proximálnych tubulov (šípka) hypoxických obličiek (H), zatiaľ čo len niekoľko buniek bolo zafarbených v normoxickom tkanive (G) (mierka 200 um). I a J, k tomuto zvýšeniu poškodenia DNA došlo napriek súčasnému zvýšeniu O-6-metylguanín-DNA metyltransferázy (MGMT; nepárový obojstranný t test, p=0.0002) (I) a {{ 15}} oxoguanín glykozyláza (OGG1; nepárový dvojstranný t-test, p=0.0063) (J), dva enzýmy zapojené do opravy oxidovanej DNA.
čo zaisťuje dostatočnú tvorbu ATP a prežitie za tohto nepriaznivého stavu.
Fetálna hypoxia podporuje import kompenzačného mitochondriálneho proteínu a zostavenie dýchacieho reťazca
Okrem zvýšenej glykolýzy sme našli viacero zmien v úrovni hojnosti mitochondriálnych proteínov (teplotná mapa je uvedená na doplnkovom obr. S4). Generovanie proteínových sietí pomocou STRING odhalilo niekoľko zhlukov obsahujúcich proteíny zapojené do translokácie proteínov do mitochon.dria, oxidačnej fosforylácie a mitochondriálnych ribozomálnych proteínov (obr. 5, D a E). Za zmienku stojí, že boli indukované viaceré proteíny spojené s vnútornou mitochondriálnou membránou, miestom, kde prebieha oxidačná fosforylácia (OXPHOS). OXPHOS zahŕňa päť multiproteínových komplexov usporiadaných pozdĺž vnútornej mitochondriálnej membrány. Medzi indukovanými proteínmi boli zložky OXPHOSkomplexov (NDUSF6), III (UQCR10), IV (COX6B1, COXC a COX7A2) a V (ATP5J, MTATP8), ale aj UQCC3 a SCO2, ktoré sú potrebné pre správnu zostavu a funkciu. komplexu a IV (obr. 5D a doplnkový obr. S4). SDHC a SDHD, podjednotky komplexu II, boli tiež upregulované (16- a 2{17}}násobne), ale nedosiahli štatistickú významnosť. Navyše nielen zložky dýchacieho reťazca boli obohatené o plodhypoxické obličky, ale aj množstvo proteínov sprostredkujúcich ich import do mitochondrií. To zahŕňalo členov vonkajšej membránovej translokázy (TOM - TOMM22) a vnútorného membránového translokázového komplexu TIM22 (TIMM22, TIMM9 a TIMM10 a súvisiaceho komplexu TIMM8-TIMM13- (obr. 5D a doplnkový obr. .S4).Medzi 21 mitochondriálnymi proteínmi so zníženým množstvom boli štyri mitochondriálne ribozomálne proteíny, ako aj proteíny zapojené do katabolizmu aminokyselín, biosyntézy vitamínov alebo beta-oxidácie mastných kyselín (obr. 5, D a E a doplnkový obr. S4).Tieto zistenia poukazujú na potenciálnu mitochondriálnu dysfunkciu a zjavné úsilie o regeneráciu poškodených proteínov (34), napriek zvýšenej glykolýze a celkovo zníženej syntéze proteínov.
Lysozomálna biogenéza a autofágia sú posilnené vHypoxické fetálne obličkyLysozóm bol druhou organelou, ktorá sa zdá byť obohatená za hypoxických podmienok. Avšak v porovnaní s mitochondriami, kde bolo znížených 36 % proteínov, boli takmer všetky proteíny súvisiace s lyzozómami upregulované (obr. 6, A a B). Medzi nimi bolo deväť lyzozomálnych kyslých hydroláz, ktoré predstavujú takmer 20 % lyzozomálnych kyslých hydroláz anotovaných v KEGG dráhe pre lyzozómy: štyri proteázy (CTSA, CTSF, CTSZ, TPP1), tri glykozidázy (GAA, NAGA, NEU1), lyzozomálne kyslá fosfatáza 2 (ACP2) a lyzozomálna kyslá lipáza A (LIPA). Ďalej sme našli dôkaz o zvýšenej biogenéze lyzozómov a príbuzných organel. Tri z ôsmich komponentov BLOC1 (biogenéza lyzozómového organelového komplexu 1) boli významne indukované (obr. 6, C–E), ako aj výmenný transportér H/Cl 5 (CLCN5), ktorý je kľúčovým hráčom v okyslenie endozómov (obr. 6F). Je potrebné poznamenať, že Snapin (podjednotka 7 BLOC1) tiež hrá úlohu pri acidifikácii lyzozómov a pri dozrievaní a funkcii autofagozómov. Ďalšie indukované proteíny, o ktorých je známe, že hrajú úlohu v autofágii, boli Atg7 a Bnip3 (obr. 6, G a H). Ďalšou požiadavkou na autofagický tok je perinukleárne zhlukovanie lyzozómov sprostredkované lyzozomálnym komplexom Ragulator (35, 36) a dvoma protiľahlými rodinami motorických proteínov. Prekvapivo štyri z piatich členov podjednotiek lešenia regulátora (LAMTOR1, 2, 3 a 5) boli významne indukované (obr. 6, A a B); LAMTOR4 bol tiež 1.{29}}krát indukovaný, ale nedosiahol štatistickú významnosť. Okrem toho kinezíny, ktoré sprostredkúvajú pohyb organel smerom von, vykazovali tendenciu k potlačeniu, zatiaľ čo členovia rodiny dyneínov, ktorí uľahčujú pohyb dovnútra, boli vyvolané, aj keď nie štatisticky významné (doplnkový obr. S5). Súhrnne tieto zistenia poskytujú silný dôkaz o tom, že funkčná funkcia lyzozómov je posilnenáhypoxické obličky plodu, plne kompatibilné s predpokladanou potrebou obnovy poškodených mitochondrií.
Predčasne
Starnutie ilustruje Janusove aspekty hypoxickej adaptácie Na rozdiel od kompenzačných mechanizmov opravy a omladzovania sme našli 15 deregulovaných proteínov patriacich do GO termínu „Starnutie“ (obr. 7A), ktoré predstavujú tretiu kategóriu hypoxických adaptácií: zrýchlené starnutie . Zatiaľ čo väčšina týchto proteínov hrá úlohu v jednom z vyššie opísaných procesov degranulácie neutrofilov a lyzozómov (MIF, MPO, PSEN1), mitochondrií (NDUFS6, FADS1, MTCO1, CYP27B1), glykolýzy (ALDOC) a opravy DNA (OGG1) ; bolo opísané, že niektoré priamo ovplyvňujú dĺžku života myší. Najmä množstvo proteínu klotho a sirtuínu 6 bolo znížené v hypoxickom E18.5obličky plodu(obr. 7, B a C). Sirtuín 6 je všadeprítomne exprimovaný enzým s proteínovou deacetylázou a mono-ADP ribozyltransferázovou aktivitou zapojenou do regulácie niekoľkých bunkových funkcií, vrátane zápalu, glykolýzy a opravy DNA. Jeho knockout vedie k závažnej progérii u myší so zníženou dĺžkou života 1 až 3 mesiace (37, 38). Oblička je hlavným miestom syntézy klotho (tj distálny stočený tubul – DCT prispieva väčšinou proteínu s ďalšou syntézou v proximálnych stočených tubuloch), kde pôsobí lokálne ako membránovo viazaná beta-glukuronidáza. Zdá sa, že znížené množstvo klotho je špecifický proces, pretože iné proteíny DCT vrátane CALB1 neboli zmenené. Klotho sa tiež vylučuje do obehu buď štiepením extracelulárnej časti membránovo viazanej formy alebo transláciou alternatívneho zostrihového variantu. Úroveň cirkulujúceho klotho (sKL) klesá s vekom (39, 40), čo nás viedlo k zhodnoteniu jeho koncentrácie a koncentrácie sirtuínu 6 v krvi trupu hypoxických alebo normoxických plodov E18.5. V skutočnosti boli koncentrácie sKL a sirtuínu 6 významne znížené u hypoxických plodov E18.5 (obr. 7, D a E). Okrem toho a čo je dôležité, sérové hladiny klotho a sirtuínu 6 boli tiež stále významne znížené u starých myší (obr. 7, F a G), čo naznačuje trvalé zníženie týchto dvoch proteínov počas života. Pre Klotho sa to zdá byť spôsobené výrazne zníženými hladinami expresie mRNA v obličkách 15-mesačných hypoxických potomkov (obr. 7H). Avšak hladiny renálnej mRNA expresie sirtuínu 6 boli medzi starými normoxickými a hypoxickými myšami nezmenené (obr. 71). Ďalej sa ukázalo, že zmeny v metylácii DNA sú jedným z najdôležitejších mechanizmov nielen pre obnovu a diferenciáciu progenitorových buniek nefrónu (41), ale aj pre expresiu klotho (42, 43). Avšak, na rozdiel od hypermetylácie Mki67 (obr. 3F), promótor klotho bol hypometylovaný počas chronickej hypoxie (doplnkový obr. S6). Metylačný vzor Sirt6 nebolo možné určiť. Podľa našich najlepších vedomostí je náš model IUGR prvý, ktorý načrtáva mechanizmus vedúci k fenotypu predčasného starnutia prostredníctvom synergie zápalového poškodenia, neúčinnej opravy, zmeneného metabolizmu a zníženého množstva proteínov proti starnutiu, ktoré sa vyskytujú už pri narodení.
Zníženie antiagingových proteínov v reakcii na chronickú hypoxiu je zachované medzi myšami a mužmi V poslednej sérii experimentov sme sa pýtali, či súhra medzi chronickou hypoxiou a zníženými hladinami antiagingových proteínov v sére je evolučne konzervovaný jav. Na tento účel boli vzorky séra z kontrolovanej štúdie (10) deviatich zdravých dobrovoľníkov (osem mužov, jedna žena) odobraté 2 týždne predtým (hladina mora, SL), v troch časových bodoch počas neprerušovaného 28-dňa pobyt vo výške 3454 m (vysoká nadmorská výška, HA3, HA9, HA28) a 1, 7 a 14 dní po ich návrate do SL (RSL1, RSL7, RSL14) boli analyzované na sKL a SIRT6 (obr. 8). Vzorky získané na SL slúžili ako kontroly pre každého účastníka. Sérové hladiny sKL a SIRT6 klesali vo vysokých nadmorských výškach a obe dosiahli štatistickú významnosť pri H28. Po návrate na hladinu mora sa sKL zvýšil na úrovne vyššie ako pred pobytom vo vysokej nadmorskej výške na RSL7 a vrátil sa do normálu na RSL14 (obr. 8A). Na druhej strane, SIRT6 po návrate na hladinu mora naďalej klesal a opäť sa začal zvyšovať až pri RSL14 (obr. 8B), čo naznačuje rozdielnu reguláciu týchto dvoch proteínov proti starnutiu. V súhrne tieto zistenia naznačujú, že znížené hladiny klotho a sirtuínu 6 v sére môžu vo všeobecnosti vyžadovať vystavenie chronickým hypoxickým stavom, a preto môžu predstavovať evolučný vysoko konzervovaný proces.
Podporná služba Wecistanche - Najväčší vývozca cistanche v Číne:
E-mail:wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/Tel:+86 15292862950
Nakupujte pre ďalšie špecifikácie Podrobnosti:
https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop
