skJazyk
Domov / Vedomosti / Obsah

Vedomosti

Echinakozid potláča dexametazónom indukovanú inhibíciu rastu a apoptózu v osteoblastických MC3T3-E1 bunkách

Mar 11, 2022

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

Abstraktné.

Glukokortikoidy (GC) sa široko používajú na liečbu chronických ochorení. Dlhodobé a/alebo predávkovanie GC má mnoho vedľajších účinkov na ľudské zdravie vrátane GC-indukovanej osteoporózy (GIOP). V tomto vyšetrovaní bolo cieľom posúdiť vplyv, žeechinakozid z cistanche(ECH) pôsobí na myšie osteoblastické bunky MC3T3-E1 ošetrené dexametazónom. Zistili sme, že ECH(echinakozid z cistanche) (5, 10, 20, and 40 mg/l) inhibited dexamethasone (1,000 nM)-suppressed cell viability as demonstrated by Cell Counting Kit-8 (CCK-8) assay. The dose of 10 mg/l was selected for the following experiments because this dose had a better effect than the dose of 5 mg/l, and the doses >10 mg/l malo podobný účinok ako táto dávka. ECH(echinakozid z cistanche)(10 mg/l) alebo pifitrín (PFT-) (inhibítor p53, 20 µM) potlačil apoptózu MC3T3-E1 indukovanú dexametazónom, ako je znázornené analýzou prietokovej cytometrie s dvojitým značením Annexin V/propídiumjodid (PI) . ECH(echinakozid z cistanche)alebo liečba PFT tiež zmiernila účinok dexametazónu pri inhibícii expresie Bcl-2, ako aj účinok dexametazónu pri stimulácii expresie p53 a Bax. Okrem toho nadmerná expresia p53 sprostredkovaná lentivírusom zvrátila účinky ECH(echinakozid z cistanche)v bunkách MC3T3-E1 ošetrených dexametazónom, čo naznačuje, že ECH(echinakozid z cistanche)indukovali antiapoptotické účinky v osteoblastoch liečených dexametazónom prostredníctvom ap53-závislej dráhy. Stručne povedané, ECH(echinakozid z cistanche)má ochranný účinok proti apoptóze osteoblastických buniek vyvolanej dexametazónom, čo naznačuje, že ECH(echinakozid z cistanche)môžu mať potenciál na klinické využitie pri liečbe GIOP.

cistanche to treat osteoporosis

Cistanche deserticola má mnoho účinkov, kliknite sem a dozviete sa viac

Úvod

Glukokortikoidy(GC) sa často používajú na liečbu širokého spektra chronických ochorení vrátane zápalu, rakoviny a autoimunitných porúch (1). Avšak dlhodobé a/alebo predávkovanie GC má mnoho vedľajších účinkov, ako je hypertenzia, hyperglykémia, glaukóm, osteonekróza a osteoporóza (2-4). Je zrejmé, že používanie GC zvyšuje stratu kostnej hmoty a riziko zlomenín (3-6). GC môžu indukovať apoptózu osteoblastov a zhoršiť funkciu týchto buniek. Napríklad dexametazón, hormón GC, môže upregulovať expresiu p53 v osteoblastických MC3T3-E1 bunkách, a tak spôsobiť bunkovú apoptózu (7,8). Apoptóza osteoblastov vedie k zníženej tvorbe kostí. Perorálne použitie bisfosfonátov (alendronát a risedronát) (9,10) sa zaviedlo na liečbu osteoporózy vyvolanej GC (GIOP). Nízka miera adherencie však obmedzuje účinnosť perorálnych bisfosfonátov. Iné lieky majú tiež obmedzenia, ako je nepohodlné podávanie [kyselina zoledrónová (11)] a vysoká cena [PTH 1-34 (teriparatid) (12,13)]. V dôsledku toho existuje potreba vývoja nových možností liečby GIOP.

Echinakozid z cistanche (ECH)je fenyletanoidový glykozid izolovaný z tradičnej čínskej medicínyHerbaCistanches(14). ECH(echinakozid z cistanche)má ochranné účinky na neurónový systém (15-20), pečeň (21,22) a pľúca (23) prostredníctvom podpory bunkovej proliferácie a inhibície zápalovej reakcie, produkcie reaktívnych foriem kyslíka (ROS) a bunkovej apoptózy. Hoci ECH(echinakozid z cistanche)môže tiež podporovať osteoblastickú regeneráciu kostí a má mimoriadnu antiosteoporotickú aktivitu na modeloch potkanov (24, 25), neexistujú žiadne záznamy popisujúce účinky ECH(echinakozid z cistanche)na GC-indukovanú apoptózu osteoblastických buniek. Skúmali sme teda vplyv, ktorý má ECH(echinakozid z cistanche)pôsobí na dexametazónom indukovanú apoptózu osteoblastických buniek a objasnil predbežný mechanizmus v MC3T3-E1 bunkách.


CISTANCHE

Materiály a metódy

Kultivácia z bunky. Bunková banka Čínskej akadémie vied (Shanghai, Čína) poskytla myšie osteoblastické bunky MC3T3-E1. Rast buniek prebiehal v -minimálnom esenciálnom médiu (-MEM) (Hyclone; GE Healthcare, Logan, UT, USA) obsahujúcom 10 percent fetálneho bovinného séra (FBS; Gibco; Thermo Fisher Scientific, Inc., Grand Island, NY, USA ) a penicilín/streptomycín (Beijing Solar Science and Technology Co., Ltd., Peking, Čína). Údržba buniek prebiehala v prostredí s 95 percentami vzduchu a 5 percentami oxidu uhličitého pri teplote 37 °C.

Thevýrobyzlentivírusnadmerná expresia p53. Na vytvorenie expresného konštruktu p53 sa syntetizovala oblasť sekvencie kódujúcej proteín (CDS) myšacieho génu p53 a vložila sa doEcoRI/BamHI reštrikčné miesta lentivírusového expresného vektora pLVX-puro (Clontech Laboratories, Inc., Palo Alto, CA, USA) od Genewiz, Inc. (Peking, Čína). Konštrukt sa overil sekvenovaním DNA. Bunky 293T (Shanghai GeneChem Co., Ltd., Shanghai, Čína) boli transfekované zmesou plazmidov, vrátane vírusových baliacich plazmidov a expresného plazmidu p53 (pLVX-p53) alebo kontrolného plazmidu (pLVX) prostredníctvom Lipofectamine 2000 (Invitrogen: Thermo Fisher Scientific, Inc., Carlsbad, CA, USA) na základe pokynov výrobcu. Vírusový supernatant sa odobral 48 hodín po transfekcii a použil sa na infekciu buniek MC3T3-E1. Hodnotenie expresie p53 sa uskutočnilo 48 hodín po vírusovej infekcii.

Kvantitatívnepolymerázareťazreakciu(qPCR). Na oddelenie celkovej RNA a buniek MC3T3-E1 sme použili činidlo TRIzol (Invitrogen: Thermo Fisher Scientific, Inc.) a súpravu na syntézu cDNA RevertAid™ First Strand (Thermo Fisher Scientific, Inc., Rockford, IL, USA) podľa pokynov výrobcu na reverznú transkripciu celkovej RNA. Hladina p53 mRNA bola detegovaná pomocou qPCR na ABI Prism 7300 Sequence Detection System (Applied Biosystems: Thermo Fisher Scientific, Inc., Foster City, CA, USA). Priméry boli nasledovné: 5'-CCC CTGTCATCTTTTGTCCCT-3' a 5'-AGCTGGCAGAAT AGCTTATTGAG-3' pre p53, 5'-CTGCCCAGAACATCA TCC-3' a 5'-CTCAGATGCCTGCTTCAC{{{ 18}}' pre GAPDH.

Potom sme hodnotili hladiny p53 mRNA prostredníctvom 2-Metóda ΔΔCT (26) s GAPDH ako vnútornou kontrolou.

Western blotting. Lýza buniek MC3T3-E1 sa uskutočnila v rádioimunoprecipitačnom testovacom pufri s inhibítormi proteázy (Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd.) a centrifugácia lyzátov pokračovala 15 minút pri teplote 4˚C pri 9 600 xg aby bolo možné odstrániť zrážky. Následne sme zhodnotili množstvo proteínu pomocou testovacej súpravy BCA (Thermo Fisher Scientific, Inc.). Rovnaké množstvo proteínu sa pridalo na 10 alebo 15 percent SDS-PAGE a prenieslo sa na nitrocelulózovú membránu (EMD Millipore, Bradford, MA, USA). Membrány boli blokované 5 percentným odstredeným mliekom a testované primárnymi protilátkami. Po trojnásobnom premytí fyziologickým roztokom pufrovaným fosfátom (PBS) sa uskutočnila inkubácia membrán so sekundárnou protilátkou konjugovanou s chrenovou peroxidázou (1:1,000; kat. č. A0208; Beyotime Institute of Biotechnology, Shanghai, China). . Uskutočnili sme testy westernovým prenosom pomocou súpravy na rozšírenú chemiluminiscenciu (ECL) (EMD Millipore). GAPDH sa použil ako vnútorný štandard. Zdroje primárnych protilátok boli nasledujúce: Bax (Sc-493) a Bcl{19}} (Sc{20}}), oba od Santa Cruz Biotechnology, Inc. (Santa Cruz, CA, USA); p53 (č. 2524) a GAPDH (č. 5174), oba od Cell Signaling Technology, Inc. (Danvers, MA, USA).

Experimentálne zoskupenie. Na určenie vhodnej dávky dexametazónu sa ošetrenie buniek MC3T3-E1 uskutočnilo sériou množstiev dexametazónu (0, 1, 10, 100 a 1,000 nM; Sigma -Aldrich; Merck KGaA, St. Louis, MO, USA). 48 hodín po inkubácii buniek sa uskutočnili testy súpravy Cell Counting Kit{11}} (CCK{12}}) na detekciu bunkovej proliferácie.

Na výber vhodnej dávky ECH(echinakozid z cistanche)ošetrenie buniek MC3T3-E1 sa uskutočnilo s 1,000 nM dexametazónu a rôznymi dávkami ECH (0, 2,5, 5, 10, 20 a 40 mg/l; Shanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd., Šanghaj, Čína). Bunky pestované za normálnych podmienok (napodobenina) slúžili ako kontrola. Test CCK-8 sa uskutočnil po 48 hodinách kultivácie.

Pre všetky ostatné experimenty boli bunky MC3T3-E1 rozdelené do piatich skupín: skupina 1 (falošná), bunky sa kultivovali za normálnych podmienok; skupina 2 boli bunky transdukované lentivírusom pLVX; skupina 3, bunky kultivované s 10 mg/l ECH(echinakozid z cistanche); skupina 4, bunky s 20 uM pifitrinu- (PFT-; Selleck Chemicals, Houston, TX, USA); skupina 5, bunky transdukované lentivírusom pLVX-p53 a ošetrené 10 mg/l ECH(echinakozid z cistanche). Bunky v skupinách 2-5 boli ošetrené 1,000 nM dexametazónu. Bunková apoptóza a expresia proteínu sa merali po 48 hodinách kultivácie.

Bunkaproliferačný test.Bunky MC3T3-E1 sme naočkovali do 96-jamkových doštičiek v množstve 3x103bunky/jamku a kultivovali ich za normálnych podmienok cez noc. Bunky boli ošetrené tak, ako je uvedené. Po 48 hodinách kultivácie sa potom uskutočnil test CCK8 (Signalway Antibody LLC, College Park, MD, USA) podľa pokynov výrobcu. V stručnosti, kultivačné médium v ​​každej jamke sa nahradilo 100 ul 10 percentného roztoku CCK{4}} v médiu. Po inkubácii buniek počas 1 hodiny pri teplote 37 °C sme hodnotili absorbanciu pri vlnovej dĺžke 450 nm pomocou čítačky mikrodoštičiek. Vypočítala sa relatívna životaschopnosť buniek (v percentách) s napojením na kontrolné jamky.

Bunkahodnotenie apoptózy. Použili sme súpravu na apoptózu buniek Annexin V-FITC (Beyotime Institute of Biotechnology) na kvantifikáciu buniek, ktoré prechádzajú včasnou apoptózou podľa pokynov výrobcu. Stručne povedané, odber ošetrených buniek sa uskutočnil trypsinizáciou. Bunky sa premyli pomocou PBS a resuspendovali sa s anexínovým väzbovým pufrom. Inkubácia buniek sa uskutočňovala cez Annexin V-FITC počas 15 minút pri teplote 4 °C, po čom nasledovala inkubácia s propídium jodidom (PI) počas 5 minút pri 4 °C. Bunky v dolnom pravom kvadrante (Annexin V-FITC pozitívne a PI negatívne) sa považovali za aktívne podstupujúce skorú apoptózu.

Štatistickéanalýza. Údaje sú priemery ± SD pre všetky tri nezávislé experimenty. Tukeyho viacnásobný porovnávací test a jednosmerná analýza rozptylu sa vykonali na analýzu rozdielov medzi skupinami pomocou softvéru GraphPad Prism (verzia 6.0; GraphPad Software, Inc., San Diego, CA, USA). P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">

CISTANCHE

Výsledky

Založenieza vhodná dávkazdexametazón.Na určenie vhodnej dávky dexametazónu boli bunky MC3T3-E1 vystavené zvyšujúcemu sa množstvu dexametazónu (0, 1, 10, 100 a 1,000 nM) počas 48 hodín . Ako je znázornené na obr. 1, relatívna životaschopnosť buniek bola stanovená testom CCK{11}} bola zvýšená v bunkách ošetrených nízkymi koncentráciami dexametazónu (1 a 10 nM) a významne znížená v bunkách vystavených vysokým koncentráciám dexametazónu (100 a 1,000 nM).

Establishment of the suitable dose of DEX. Concentrations of 0, 1, 10, 100 or 1,000 nM of DEX were added to MC3T3-E1 cells for 48 h, and CCK-8 was then performed

Najvýraznejšie zníženie bolo pozorované v bunkách s 1,000 nM dexametazónu. V následných testoch sa teda vybralo 1,000 nM dexametazónu.

Účinok ECH(echinakozid z cistanche)na dexametazónom indukovanú inhibíciu rastu buniek. Potom sme skúmali účinok ECH(echinakozid z cistanche)na dexametazónom indukovanú inhibíciu rastu buniek. Ošetrenie buniek MC3T3-E1 sa uskutočnilo s 1,000 nM dexametazónu a rôznymi dávkami ECH(echinakozid z cistanche)(0, 2,5, 5, 10, 20 a 40 mg/l; obr. 2). 48 hodín po ošetrení pridanie ECH(echinakozid z cistanche)pri dávkach 5, 10, 20 a 40 mg/l výrazne znížilo poškodenie buniek vyvolané dexametazónom. ECH(echinakozid z cistanche)pri dávke 10 mg/l má zreteľnejší účinok ako pri dávke 5 mg/l. Životaschopnosť buniek bola podobná v bunkách ošetrených 10, 20 a 40 mg/l ECH(echinakozid z cistanche). Preto 10 mg/l ECH(echinakozid z cistanche)bol použitý v nasledujúcich experimentoch.

Nadmerná expresia p53 konštrukciou lentivírusu. Dexametason môže upregulovať p53, čím indukuje apoptózu osteoblastov (8). Študovať účinky ECH(echinakozid z cistanche) on dexamethasone-induced p53 expression, we constructed a lentivirus encoding p53 (pLVX-p53) and transduced the virus into MC3T3-E1 cells. The expression of p53 was analyzed at 48 h after transduction. Fig. 3 shows that p53 mRNA and protein levels were increased to >2-krát v bunkách transdukovaných pLVX-p{2}} v porovnaní s bunkami s kontrolným vírusom (pLVX). p53 sa podieľal na účinku ECH (echinakozid z cistanche) na dexametazónom indukovanú apoptózu. Bunky MC3T3-E1 boli ošetrené Plavixom alebo pLVX-p53, 10 mg/l ECH(echinakozid z cistanche), 20 uM PFT- (inhibítor p53) a 1,{4}} nM dexametazónu, a potom sa merala apoptóza buniek pomocou súpravy na apoptózu Annexin V-FITC. Ako je znázornené na obr. 4A, ošetrenie dexametazónom pozoruhodne indukovalo bunkovú apoptózu v porovnaní s bunkami kultivovanými za normálnych podmienok (simulácia). ECH(echinakozid z cistanche) a ošetrenie PFT významne chránilo bunky MC3T3‑E1 pred apoptózou vyvolanou dexametazónom. Okrem toho nadmerná expresia p53 zvrátila ochranné účinky ECH (echinakozid z cistanche).

Je známe, že Bcl-2 a Bax ako dôležité regulátory apoptózy sú regulované p53 (27). Western blotting ukázal, že zmeny expresie proteínu p53 a Bax boli konzistentné so zmenami bunkovej apoptózy, zatiaľ čo expresia Bcl-2 sa zmenila v opačnom smere (obr. 4B a C). Je pozoruhodné, že hladiny proteínu p53 boli významne potlačené pomocou ECH(echinakozid z cistanche)a ošetrenie PFT v bunkách nadmerne exprimujúcich p53 a ošetrených dexametazónom (obr. 4C). Tieto údaje naznačujú, že ECH(echinakozid z cistanche)môžu mať ochranné účinky na apoptózu indukovanú dexametazónom prostredníctvom inhibície expresie p53.

15_1

Účinky cistanche echinakozidu

Diskusia

Antiapoptózna funkcia ECH(echinakozid z cistanche)bol opísaný v modeli akútneho poškodenia pečene vyvolaného D-galaktozamínom (D-GalN) a lipopolysacharidom (LPS) a v bunkách ľudského neuroblastómu (SH-SY5Y) indukovanom tumor nekrotizujúcim faktorom- alebo 1-metyl{{6 }}fenylpyridíniumión (MPP plus) (17,22,28). Bolo publikované, že liečba dexametazónom môže inhibovať proliferáciu a indukovať apoptózu MC3T3-E1 buniek (8,29). V súčasnej štúdii bola relatívna životaschopnosť buniek významne znížená v bunkách vystavených vysokým koncentráciám dexametazónu (100 a 1,000 nM), čo bolo v súlade s predchádzajúcou štúdiou (8). Ďalšia liečba ECH (5-40 mg/l) pozoruhodne inhibovala životaschopnosť buniek potlačenú dexametazónom. Okrem toho expozícia dexametazónu (1,000 nM) stimulovala apoptózu buniek MC3T3-E1, ktorú liečba ECH do značnej miery obmedzila. Správa poskytla prvé zobrazenie toho, ako je ECH chránená proti apoptóze osteoblastových buniek indukovanej dexametazónom, a naznačila, že ECH môže mať potenciál na klinickú aplikáciu v GIOP.

Ďalej sme sa pokúsili preskúmať predbežný mechanizmus ochranných účinkov ECH(echinakozid z cistanche). Dexametazón môže zvýšiť transkripciu p53, a tým vyvolať apoptózu osteoblastov a zastavenie bunkového cyklu (8). p53 je downregulovaný pomocou ECH v bunkách SH-SY5Y (28). Tu mal PFT- (inhibítor p53) podobné ochranné účinky ako ECH, zatiaľ čo nadmerná expresia p53 zvrátila ochranné účinky ECH. Zmeny expresie proteínu p53 za rôznych podmienok boli v súlade so zmenami bunkovej apoptózy. Tieto výsledky naznačujú, že ECH môže mať ochranné účinky na apoptózu osteoblastických buniek indukovanú dexametazónom prostredníctvom inhibície expresie p53. Proteíny rodiny Bcl{12}}, ako napríklad Bcl{13}} a Bax, môžu zmeniť permeabilitu mitochondriálnej membrány, aktivovať efektorové kaspázy a spôsobiť apoptózu buniek (30). Je dobre známe, že p53 môže regulovať Bcl-2 a Bax (27). Tu je liečba PFT- alebo ECH(echinakozid z cistanche) zoslabili inhibičné účinky dexametazónu na hladiny antiapoptózneho proteínu Bcl-2, ako aj stimulačné účinky, ktoré má dexametazón na hladiny proapoptózneho proteínu Bax, zatiaľ čo nadmerná expresia p53 zvrátila účinky ECH. Tieto výsledky ďalej demonštrovali zapojenie p53 do ochrannej funkcie ECH.

V súhrne sme preukázali, že ECH(echinakozid z cistanche)má sľubný ochranný účinok na apoptózu osteoblastických buniek indukovanú dexametazónom, čo naznačuje, že ECH môže mať potenciál na klinickú aplikáciu pri liečbe GIOP.

effects of echinacoside from cistanche

Účinky echinakozidu z cistanche

Referencie

  1. Buttgereit F, Burmester GR a Lipworth BJ: Optimalizovaná glukokortikoidná terapia: Ostrenie starého oštepu. Lancet 365: 801-803, 2005.

  2. Schäcke H, Döcke WD a Asadullah K: Mechanizmy zapojené do vedľajších účinkov glukokortikoidov. Pharmacol Ther 96: 23-43, 2002.

  3. Fukushima W, Fujioka M, Kubo T, Tamakoshi A, Nagai M a Hirota Y: Celoštátny epidemiologický prieskum idiopatickej osteonekrózy hlavice stehennej kosti. Clin Orthop Relat Res 468: 2715-2724, 2010.

  4. Civitelli R a Ziambaras K: Epidemiológia osteoporózy vyvolanej chladom glukokortikom. J Endocrinol Invest 31 (Suppl): 2-6, 2008.

  5. Gudbjornsson B, Juliusson UI a Gudjonsson FV: Prevalencia dlhodobej liečby steroidmi a frekvencia rozhodovania o prevencii osteoporózy vyvolanej steroidmi v každodennej klinickej praxi. Ann Rheum Dis 61: 32-36, 2002.

  6. van Staa TP, Geusens P, Pols HA, de Laet C, Leufkens HG a Cooper C: Jednoduché skóre na odhad dlhodobého rizika zlomeniny u pacientov užívajúcich perorálne glukokortikoidy. QJM 98: 191-198, 2005.

  7. Rickard DJ, Sullivan TA, Shenker BJ, Leboy PS a Kazhdan I: Indukcia rýchlej diferenciácie osteoblastov v stromálnych bunkových kultúrach kostnej drene potkanov dexametazónom a BMP-2. Dev Biol 161: 218-228, 1994.

  8. Li H, Qian W, Weng X, Wu Z, Li H, Zhuang Q, Feng B a Bian Y: Glukokortikoidný receptor a sekvenčná aktivácia P53 dexametazónom sprostredkúvajú apoptózu a zastavenie bunkového cyklu osteoblastických MC3T3-E1 buniek. PLoS One 7: e37030, 2012.

  9. Stoch SA, Saag KG, Greenwald M, Sebba AI, Cohen S, Verbruggen N, Giezek H, West J a Schnitzer TJ: Perorálny alendronát 70 mg raz týždenne u pacientov s úbytkom kostnej hmoty vyvolaným glukokortikoidmi: A 12- mesačná randomizovaná, placebom kontrolovaná klinická štúdia. J Rheumatol 36: 1705-1714, 2009.

  10. Wallach S, Cohen S, Reid DM, Hughes RA, Hosking DJ, Laan RF, Doherty SM, Maricic M, Rosen C, Brown J, et al: Účinky liečby risedronátom na hustotu kostí a zlomeniny stavcov u pacientov na kortikosteroidnej terapii. Calcif Tissue Int 67: 277-285, 2000.

  11. Reid DM, Devogelaer JP, Saag K, Roux C, Lau CS, Reginster JY, Papanastasiou P, Ferreira A, Hartl F, Fashola T a kol; Výskumníci HORIZONT: Kyselina zoledrónová a risedronát v prevencii a liečbe osteoporózy vyvolanej glukokortikoidmi (HORIZON): Multicentrická, dvojito zaslepená, dvojito slepá, randomizovaná kontrolovaná štúdia. Lancet 373: 1253-1263, 2009.

  12. Langdale BL, Rajzbaum G, Jakob F, Karras D, Ljunggren O, Lems WF, Fahrleitner-Pammer A, Walsh JB, Barker C, Kutahov A a kol.: Zníženie počtu zlomenín a bolesti chrbta a zvýšená kvalita života u žien po menopauze liečených teriparatidom: 18-mesačné údaje z European Forster Observational Study (EFOS). Calcif Tissue Int 85: 484-493, 2009.

  13. Saag KG, Zanchetta JR, Devogelaer JP, Adler RA, Eastell R, Pozri K, Krege JH, Krohn K a Warner MR: Účinky teriparatidu verzus alendronát na liečbu osteoporózy vyvolanej glukokortikoidmi: Tridsaťšesťmesačné výsledky randomizovaného, dvojito zaslepený, kontrolovaný pokus. Arthritis Rheum 60: 3346-3355, 2009.

  14. Jia Y, Guan Q, Guo Y a Du C: Echinakozid stimuluje bunkovú proliferáciu a zabraňuje apoptóze buniek v črevných epiteliálnych bunkách MODE-K zvýšením regulácie expresie transformujúceho rastového faktora- 1. J Pharmacol Sci 118: 99-108, 2012.

  15. Kuang R, Sun Y, Yuan W, Lei L a Zheng X: Ochranné účinky echinakozidu, jedného z fenyletanoidných glykozidov, na cytotoxicitu indukovanú H(2)O(2) v bunkách PC12. Planta Med 75: 1499-1504, 2009.

  16. Kuang R, Sun Y a Zheng X: Potlačenie oxidu dusnatého podieľajúceho sa na ochrannom účinku echinakozidu na H2O2-indukované poškodenie buniek PC12. Nat Prod Commun 5: 571-574, 2010.

  17. Deng M, Zhao JY, Tu PF, Jiang Y, Li ZB a Wang YH: Echinakozid zachraňuje neurónové bunky SHSY5Y pred apoptózou indukovanou TNFalfa. Eur J Pharmacol 505: 11-18, 2004.

  18. Geng X, Tian X, Tu P a Pu X: Neuroprotektívne účinky echinakozidu na myšom MPTP modeli Parkinsonovej choroby. Eur J Pharmacol 564: 66-74, 2007.

  19. Zhao Q, Gao J, Li W a Cai D: Neurotrofické a neurozáchranné účinky echinakozidu v subakútnom MPTP myšom modeli Parkinsonovej choroby. Brain Res 1346: 224-236, 2010.

  20. Zhu M, Lu C a Li W: Prechodná expozícia echinakozidu je dostatočná na aktiváciu signalizácie Trk a ochranu neurónových buniek pred rotenónom. J Neurochem 124: 571-580, 2013.

  21. Wu Y, Li L, Wen T a Li YQ: Ochranné účinky echinakozidu na hepatotoxicitu vyvolanú tetrachlórmetánom u potkanov. Toxicology 232: 50-56, 2007.

  22. Li X, Gou C, Yang H, Qiu J, Gu T a Wen T: Echinakozid zlepšuje akútne poškodenie pečene vyvolané D-galaktozamínom a lipopolysacharidom u myší prostredníctvom inhibície apoptózy a zápalu. Scand J Gastroenterol 49: 993-1000, 2014.

  23. Zhang Y, Xing J, Ai T, Wen T, Guan L a Zhao J: Ochrana echinakozidu pred akútnym poškodením pľúc spôsobeným kyselinou olejovou u potkanov. Free Radic Res 41: 798-805, 2007.


Tiež sa vám môže páčiť