Účinky predoperačnej vysokej záťaže orálneho proteínu na krátkodobé a dlhodobé výsledky obličiek po kardiochirurgickom zákroku: kohortová štúdia

Abstraktné pozadie:Akútne poškodenie obličiek (AKI) po operácii srdca je spojené so zvýšenou mortalitou. Jedlo s vysokým obsahom bielkovín zvyšuje prietok krvi obličkami arýchlosť glomerulárnej filtrácie(GFR) a môže chrániť obličky pred akútnymi ischemickými záchvatmi. Preto sme hodnotili účinok predoperačnej vysokej dávky orálneho proteínu na funkciu obličiek po srdcovej chirurgii a použili sme experimentálne modely na objasnenie mechanizmov, ktorými by proteín mohol stimulovať účinky na produkciu obličiek.

Metódy:perspektívny"Predoperačná funkčná rezerva obličiek predpovedáSledovanie štúdie Riziko AKI po operácii srdca" sa predĺžilo na pooperačných 12 mesiacov u 109 pacientov. Na identifikáciu kontrolnej skupiny (n=214) na porovnateľné vyhodnotenie účinkov sa použila metóda porovnávania skóre sklonu v pomere 1:2 predoperačnej proteínovej záťaže a štandardnej starostlivosti. Primárnymi cieľovými ukazovateľmi bol vývoj AKI a odhadovaná strata GFR (eGFR) po 3 a 12 mesiacoch. Hodnotili sme aj sekréciu tkanivových inhibítorov metaloproteáz-2 (TIMP{{9} }) a inzulínu podobný rastový faktor viažuci proteín 7 (IGFBP7), biomarkery podieľajúce sa na sprostredkovanímechanizmy na ochranu obličiekvľudská obličkatubulárnych buniek, ktoré sme vystavili rôznym koncentráciám proteínov.

Výsledky:Miera AKI sa nelíšila medzi proteínovou záťažou a kontrolnou skupinou (13,6 vs. 12,3 %; p=0,5). Priemerná strata eGFR však bola nižšia v prvom prípade po 3 mesiacoch (0,1 [95% CI-1,4,-1,7] vs.-3,3 [95% CI-4,4,-2,2] ml/min/ 1,73 m2) a 12 mesiacov (-2,7 [95 % CI-4,2, −1,2] vs -10,2 [95 % CI-11,3, -9,1] ml/min/1,73 m2; p<0.001 for both). On stratification based on AKI development, the eGFR loss after 12 months was also found to be lower in the former (−8.0 [95% CI−14.1,−1.9] vs.−18.6 [95% CI−23.3,−14.0] ml/min/1.73 m2; p=0.008). A dose–response analysis of the protein treatment of the primary human proximal and distal tubule epithelial cells in culture showed significantly increased IGFBP7 and TIMP-2 expression. 

Závery:Predoperačná vysoká perorálna proteínová záťaž neznížila vývoj AKI, ale bola spojená s väčším zachovaním funkcie obličiek u pacientov s AKI a bez AKI 12 mesiacov po srdcovej operácii. Potenciálne mechanizmy účinku, ktorými môže proteínová záťaž vyvolať ochrannú reakciu obličiek, môžu zahŕňať inhibíciu bunkového cyklurenálne tubulárne epitelové bunky. Registrácia klinickej štúdie ClinicalTrials.gov: NCT03102541 (retrospektívne zaregistrovaná 5. apríla 2017) a klinické štúdie. gov: NCT03092947 (spätne zaregistrovaná 28. marca 2017).

Kľúčové slová: Akútne poškodenie obličiek, Chronické ochorenie obličiek,Záťažový test obličiek, Renálna obnova

KLIKNITE SEM A ZÍSKAJTE PRÍRODNÝ BIO EXTRAKT CISTANCHE S 25 % ECHINAKOZIDU A 9 % AKTEOZIDU PRE FUNKCIU OBLIČIEK

Pozadie

Akútne poškodenie obličiek(AKI) je najčastejšou závažnou komplikáciou kardiochirurgie a je nezávisle spojená so zvýšenou krátkodobou a dlhodobou morbiditou a mortalitou [1, 2]. Hoci mnohí pacienti vykazujú reverziu AKI v priebehu dní až týždňov od vývoja, údaje naznačujú silnú súvislosť medzi AKI a následným chronickým ochorením obličiek (CKD) [3, 4]. Preto sú účinné prístupy na prevenciu rozvoja AKI životne dôležité pre zníženie záťaže CKD. Patofyziológia AKI po kardiochirurgickom výkone je pravdepodobne charakterizovaná postihnutím viacerých dráh poranenia v rôznej miere u pacientov pred operáciou, počas operácie a po operácii [5]. Medzi navrhovanými mechanizmami sa považujú za dôležité zmeny v perfúzii obličiek počas kardiopulmonálneho bypassu a pooperačnom ischemickom poškodení obličiekprispievateľov do AKI [6].

U zdravých ľudí a dospelých, ktorí majú podstúpiť srdcovú operáciu, vysoká bielkovinová záťaž údajne zvyšuje rýchlosť glomerulárnej filtrácie (GFR) prostredníctvom globálneho zvýšenia prietoku krvi obličkami v dôsledku aferentnej arteriolárnej dilatácie a zníženia renálnej vaskulárnej rezistencie, čo vedie k glomerulárnej hyperfiltrácii [7] ]. To sa pravdepodobne deje prostredníctvom modulácie mechanizmu tubuloglomerulárnej spätnej väzby a zmien hladín vazoaktívnych zlúčenín [8, 9]. Naproti tomu obmedzenie bielkovín je spojené so znížením prietoku krvi obličkami aGFR[10]. Zvieracie modely ukázali, že aminokyseliny môžu chrániť obličky pred akútnymi ischemickými poruchami, pravdepodobne tým, že udržujú prietok krvi obličkami, a tým zlepšujú ischemické a zápalové poškodenia, ktoré by mohli prispieť k AKI [11].

Avšak zásahy, ktoré zvyšujú prietok krvi obličkami (napr. aplikácia dopamínu), boli rovnako neúčinné pri prevencii alebo liečbe AKI. Možným dôvodom je, že proteínová záťaž môže zaťažovať obličky rovnakým spôsobom ako priamy alebo vzdialený ischemický preconditioning (RIPC) [12, 13]. Tento vedľajší „stres“ môže spustiť ochranné mechanizmy v obličkách. Uvoľňovanie tkanivových inhibítorov metaloproteáz-2 (TIMP-2) a inzulínu podobného rastového faktora viažuceho proteínu 7 (IGFBP7), ktoré vyvolávajú zastavenie bunkového cyklu, sa javí ako marker tejto ochrannej reakcie [ 12, 13].

Predtým sme uviedli hodnotu renálnej funkčnej rezervy (RFR), meranú na základe predoperačnej vysokej orálnej bielkovinovej záťaže, na predikciu AKI u pacientov podstupujúcich elektívnu kardiochirurgickú operáciu [14]. V tejto štúdii sme sa snažili preskúmať, či samotné zaťaženie proteínom môže ovplyvniť vývoj AKI a dlhodobej renálnej funkcie po srdcovej operácii v porovnaní s kontrolnými skupinami s podobnými demografickými, rizikovými a chirurgickými profilmi, ktoré dostali štandardnú predoperačnú starostlivosť. Ďalej sme použili in vitro modely bunkovej kultúry zahŕňajúce bunky primárnych ľudských obličkových proximálnych a distálnych tubulov na objasnenie potenciálneho mechanizmu, ktorým by proteín mohol stimulovať ochranné účinky obličiek priamo na tubulárnej úrovni.

Metódy Návrh štúdie a účastníci

Táto jednocentrová, nezaslepená kohortová štúdia zahŕňala pacientov zaradených do prospektívnej štúdie „Preoperative RFR Predicts Risk of AKI after Cardiac Operation“ [14]. Štúdia zahŕňala 110 dospelých s hodnotami eGFR [15] vyššími alebo rovnými 60 ml/min/1,73 m2, ktorí mali podstúpiť elektívnu srdcovú operáciu (bypass koronárnej artérie, náhrada chlopne, kombinácia oboch alebo iná operácia s kardiopulmonálnou bypass) v období od novembra 2014 do októbra 2015 na oddelení srdcovej chirurgie v nemocnici San Bortolo, Vicenza, Taliansko. Podrobné metódy vrátane chirurgickej starostlivosti sú popísané v dodatočnom súbore 1. Najmä pacienti, ktorí neprerušili liečbu blokátormi renín-angiotenzínového systému (súčasť štandardného postupu na oddelení srdcovej chirurgie vo Vicenze) minimálne 48 hodín pred prijatie bolo vylúčené.

Protokol štúdie bol podrobne opísaný inde [14]. Stručne povedané, pacienti dostávali vysokú perorálnu bielkovinovú záťaž (1,2 g/kg telesnej hmotnosti nesoleného červeného vareného mäsového proteínu bez prísad) na posúdenie ich RFR deň pred operáciou popri štandardnej predoperačnej starostlivosti [14] a 3 mesiace po operácii ambulantne [16]. Približne týždeň pred hodnotením RFR dostali účastníci presné inštrukcie o liekoch (žiadne nesteroidné protizápalové lieky, žiadne blokátory renín-angiotenzínového systému), ktoré boli povolené ráno v deň vyšetrenia. Odhady potenciálneho účinku a rozptylu príjmu bielkovín na GFR boli získané z predchádzajúcich publikácií [17, 18]. Okrem toho, vysoká perorálna bielkovinová záťaž bola definovaná podľa nedávneho testovania dávok, ktoré naznačovali stropný efekt s hornou hranicou maximálnej dosiahnuteľnej GFR po vysokom perorálnom príjme bielkovín 1 g/kg telesnej hmotnosti alebo rovnajúcej sa 19 ]. Výsledky bioimpedančnej vektorovej analýzy v proteínovej záťažovej skupine sú uvedené v doplnkovom súbore 1: Tabuľka S1. Kontrolná skupina bola identifikovaná prostredníctvom analýzy skóre sklonu vykonanej na kovariátoch veku, pohlavia, rasy, ochorenia srdca a východiskovej hodnoty eGFR, ktorá podstúpila podobné postupy v období, počas ktorého kohorta RFR podstúpila operáciu (rozsah: 0–3 mesiacov) pomocou metódy porovnávania pomeru 1:2 (ďalšie kritériá oprávnenosti pozri v dodatočnom súbore 1). Kontrolným pacientom bola poskytnutá štandardná predoperačná starostlivosť, ktorá bola definovaná pragmaticky. Štúdia bola schválená miestnou etickou komisiou (79/16F) a bola v súlade s princípmi Helsinskej deklarácie. Pacienti boli oslovení na zaradenie počas prijímacích konzultácií a poskytli písomný informovaný súhlas.

Postupy a merania Hodnotenie funkcie obličiek

AKI bola definovaná podľa kritérií pracovnej skupiny KDIGO ako zvýšenie SCr o väčšie alebo rovné {{0}},3 mg/dl do 48 hodín alebo väčšie alebo rovné 1,5-násobku základnej hodnoty do 7 hodín dní alebo výdaj moču < 0,5 ml/kg/h počas 6 h [20]. Východisková hodnota SCr bola stanovená na základe všetkých dostupných hodnôt SCr z nemocničných a ambulantných lekárskych záznamov za predchádzajúcich 90 dní. Pre tých, ktorých východiskové údaje o hladine SCr neboli k dispozícii, sme rozšírili skríningové kritériá na zvýšenie alebo zníženie SCr o 0, 3 mg / dl počas pobytu v nemocnici. Pozitívna bilancia tekutín a hemodilúcia sa zvažujú pri diagnostike a stagingu AKI pomocou nasledujúceho vzorca [21]:

Upravená úroveň SCr=SCr × korekčný faktor

kde korekčný faktor{{0}}(hmotnosť (kg) pri prijatí do nemocnice ×0.6+Σ (denná kumulatívna bilancia tekutín (liter)))/hmotnosť pri prijatí do nemocnice × 0,6

Reverzia AKI bola definovaná ako absencia akéhokoľvek štádia AKI pri prepustení z nemocnice [22]. Všetky prípady boli preskúmané od prípadu k prípadu, aby sa potvrdila každá diagnóza AKI a zvrátenie AKI zaslepeným rozhodovacím výborom pozostávajúcim z troch odborných nefrológov zaslepených klinickými údajmi. Ak dvaja recenzenti nesúhlasili, tretí recenzent poskytol informácie a bol vyvinutý konsenzus. Bodový moč na albuminúriu sa odoberal pred operáciou a po 3 a 12 mesiacoch sledovania. Albuminúria bola normalizovaná na koncentráciu kreatinínu v moči, aby sa zohľadnilo riedenie moču. Informácie o odbere vzoriek a laboratórnych metódach sú uvedené v dodatočnom súbore 1.

Sledovanie a koncové body

Clinical outcomes were evaluated for 1  year after discharge. Changes in medication for clinical reasons were permitted. At 3 and 12  months of follow-up, analyses were conducted at the Outpatient Nephrology Department, and patients were contacted via the telephone 1  week before the follow-up analyses and advised to maintain their usual dietary habits and avoid high dietary protein intake (>0.8 g/kg telesnej hmotnosti na deň). Strava s vysokým obsahom perorálnych bielkovín počas obdobia sledovania nebola zamýšľaná podľa protokolu štúdie. Pacientom sa opäť odporučilo, aby vysadili blokátory renín-angiotenzínového systému a nesteroidné protizápalové lieky minimálne 48 hodín pred ambulantnou prezentáciou. Primárnym cieľovým ukazovateľom bola AKI do 7 dní po operácii srdca. Ďalšie merania zahŕňali rozdiel v eGFR 3 a 12 mesiacov po operácii v porovnaní s predoperačnými hodnotami (dodatočná časť 1: Obr. S2). Počas pobytu v nemocnici bolo zaznamenané užívanie akýchkoľvek potenciálne nefrotoxických liekov.

Proteínová záťaž a sekrécia biomarkerov v bunkách tubulov ľudských obličiek

Sekrécia AKI biomarkerov IGFBP7 a TIMP-2 po naložení proteínu bola hodnotená pomocou našich zavedených in vitro modelových systémov primárnych ľudských buniek proximálneho a distálneho tubulu [23]. Imunoafnity izolované bunky proximálneho a distálneho tubulu sa kultivovali v konfluencii na priepustných nosičoch Transwell v hormonálne definovanom médiu bez séra, aby sa vytvorili epitelové monovrstvy. Bunky sa potom ošetrili na apikálnej strane zvyšujúcimi sa koncentráciami (0, 2,5, 5, 10, 20 a 50 uM) proteínu (Life Extension, Wellness Code® Whey Protein Concentrate; profil aminokyselín uvedený v časti Ďalšie súbor 1) počas 6 hodín pri 37 stupňoch v 5 % CO2. Apikálne kondicionované médiá sa podrobili SDS-PAGE a imunoblotovej analýze na detekciu secernovaných IGFBP7 a TIMP-2 pomocou kozích polyklonálnych protilátok od Astute Medical Inc. Surové imunoblotové signály boli normalizované na koncentráciu lyzátu a signál zo srvátkového- ošetrené bunky sa porovnali s neošetrenými bunkami a vytvorili sa grafy. Použili sa štyri samostatné izoláty darcu na hodnotenie IGFBP7 a tri samostatné izoláty na hodnotenie TIMP-2. Priemerná uM koncentrácia srvátkového proteínu bola založená na molekulovej hmotnosti -laktoglobulínu.

Štatistická analýza

Opisné premenné boli vyjadrené ako medián (medzikvartilový rozsah) alebo priemer [95 % interval spoľahlivosti] pre spojité premenné a n (%) pre kategorické premenné. Rozdiely v distribúciách medzi skupinami boli testované pomocou Mann-Whitney U testov pre numerické premenné a chí-kvadrát testov pre kategorické premenné. Zmeny eGFR a SCr boli vypočítané u pacientov ako rozdiel v hodnotách pri sledovaní a 1 deň pred operáciou (pred zaťažením proteínom). Analýzy boli upravené podľa veku, pohlavia, indexu telesnej hmotnosti, hypertenzie a cukrovky. Podmienené distribúcie premenných odozvy vykazovali dostatočne dobrú aproximáciu k normálnemu rozdeleniu, ako bolo hodnotené pomocou normálnych kvantilovo-kvantilových grafov. Údaje boli analyzované pomocou R 3.6.{6}} (R Center for Statistical Computing, Viedeň, Rakúsko) [24]. Obojstranné hodnoty p < 0.05 boli považované za indikátory štatistickej významnosti. Odhad veľkosti vzorky bol založený na nedávnej observačnej štúdii u podobnej populácie pacientov [25] a na primárnom koncovom ukazovateli (tj rozvoj AKI do 7 dní po operácii srdca). Použitím Fisherovho presného testu sme vypočítali, že 339 pacientov (226 pacientov v kontrolnej skupine a 113 pacientov v skupine s vysokým obsahom bielkovín) by potrebovalo poskytnúť 80% výkon pri chybe typu 1 5% na zistenie pomer AKI 0.2 a 0.05 a hmotnosť skupiny 2:1, v tomto poradí. Na výber pacientov liečených štandardnou starostlivosťou, ktorí majú byť zaradení do kontrolnej skupiny, sa použila zhoda najbližšieho suseda so vzdialenosťou posuvného meradla 0,1. Použila sa metóda porovnávania pomeru 1:2. Optimálna zhoda kvality bola definovaná ako štandardizovaný priemerný rozdiel (SMD) menší alebo rovný 0,1 na zhodnú premennú medzi pacientmi v štúdii a kontrolnými skupinami. Časový priebeh hodnôt eGFR vzhľadom na predoperačné hodnoty sa analyzoval lineárnym zmiešaným modelom s použitím logaritmu relatívnych hodnôt eGFR. Rozdiely v kategorických premenných medzi skupinami boli analyzované pomocou Fisherovho exaktného testu. Pre in vitro štúdie sa imunoblotové filmy zobrazili a kvantifikovali pomocou ImageJ a párovej funkcie t-testu GraphPad Prism 8.0 (GraphPad Software, La Jolla, CA).

Výsledky Základné charakteristiky

Z 540 pacientov kontrolovaných v rámci štúdie bolo 324 zaradených a zahrnutých do analýzy. 110 pacientov dostalo predoperačné vysoké perorálne zaťaženie proteínom ako súčasť štúdie RFR, zatiaľ čo 214 pacientov bolo zaradených do skupiny s proteínovým zaťažením (doplnkový súbor 1: Obr. S1). Kvalita zhody sa považovala za vynikajúcu, čo odráža SMD menšie alebo rovné 0,1 pre všetky zodpovedajúce premenné. Základné charakteristiky a chirurgické údaje boli medzi oboma skupinami podobné (tabuľka 1). Hodnoty eGFR pri prijatí do nemocnice boli podobné v skupine s proteínovou záťažou aj v kontrolnej skupine (90 [95 % interval spoľahlivosti (CI) 87–92] vs. 90 ml/min/1,73 m2 [95 % CI 88–92]; p=0.914).

Hodnoty AKI Te miera AKI sa nelíšila medzi proteínovou záťažou a kontrolnou skupinou (15/110 [13,6 %] oproti 26/214 [12,1 %], p=0,5; s použitím plného AKI inscenácia: p=0.945; tabuľka 2). Všetci pacienti, u ktorých sa vyvinula AKI, mali počas pobytu v nemocnici iba jednu zreteľnú epizódu AKI. Korekcia SCr na rovnováhu tekutín neovplyvnila diagnostiku a staging AKI. Všetkých 15 pacientov v skupine s naložením proteínov vyvinulo AKI podľa kritérií SCr a žiadny nespĺňal kritériá vylučovania moču. Naopak, v kontrolnej skupine sa staging uskutočňoval podľa kritérií SCr a moču u 19 (9,0 %) a 4 (1,9 %) pacientov, v uvedenom poradí; 3 (1,4 %) pacienti splnili obe kritériá (p=00,110). Je potrebné poznamenať, že dvaja pacienti v kontrolnej skupine vyžadovali pooperačnú substitučnú terapiu obličiek, zatiaľ čo žiadny v skupine s naložením proteínov takúto terapiu nevyžadoval. Všetkých 15 pacientov v skupine s vysokým obsahom bielkovín, u ktorých sa vyvinul AKI, vykazovalo reverziu AKI pred prepustením z nemocnice, ale iba 21 z 26 pacientov v kontrolnej skupine, ktorí mali AKI, vykazovalo reverziu AKI pred prepustením z nemocnice (100 % vs. 80,8 %; p{{34 }}.139). Súhrnné štatistiky všetkých pacientov kategorizovaných podľa AKI sú uvedené v doplnkovom súbore 1: Tabuľka S2. U ľudí s AKI bola väčšia pravdepodobnosť, že budú starší ako u ľudí bez AKI; majú vyšší index telesnej hmotnosti; majú hypertenziu, diabetes mellitus, periférnu vaskulopatiu a dyslipidémiu; a majú nižšie hodnoty eGFR pri prijatí.

Podporná služba Wecistanche - Najväčší vývozca cistanche v Číne:

E-mail:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel:+86 15292862950

Nakupujte pre ďalšie špecifikácie Podrobnosti:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

KLIKNITE SEM A ZÍSKAJTE PRÍRODNÝ BIO EXTRAKT CISTANCHE S 25 % ECHINAKOZIDU A 9 % AKTEOZIDU PRE FUNKCIU OBLIČIEK