Účinky extraktu Cistanche Deserticola na erektilnú odpoveď penisu u kastrovaných potkanov

Li Gu, Wen Ting Xiong, Yan Lei Zhuang, Jian Shuang Zhang a Xin Liu*

Výskumné centrum potravinárskeho a zdravotníckeho inžinierstva štátneho ministerstva školstva, Univerzita Sun Yat-sen, Guangzhou, Čína

Abstraktné

Cistanche deserticola (CD) sa po tisíce rokov považuje za posilňujúci prostriedok na reprodukčnú funkciu. V tejto štúdii boli skúmané účinky CD extraktu na erektilnú odpoveď penisu. Po kastračnej operácii boli potkany liečené intragastricky CD extraktom ({{0}} 0,45, 0,90 a 1,8 g/kg) denne počas štyroch týždňov. Merala sa erektilná odpoveď penisu a na konci experimentu sa testovali sérové ​​hormóny. Vyhodnotilo sa, že erektilná latencia sa predĺžila a trvanie erekcie sa výrazne skrátilo u kastrovaných potkanov v porovnaní s falošne operovanými kontrolami. CD extrakt však skrátil erektilnú latenciu a predĺžil trvanie erekcie, aby sa minimalizovali negatívne účinky kastrácie. Pri dávke 0,9 g/kg CD extrakt reguloval koncentráciu luteinizačného hormónu v sére približujúcu sa k normálnej úrovni u kastrovaných potkanov. Tieto zistenia ukázali, že CD uľahčilo erektilnú odpoveď penisu a do určitej miery modulovalo hladinu sérového hormónu.

Click cistanche tonic produkty

ÚVOD

Cistanche Hoffmg. Et Link, jeden z rodov čeľade Orobanchaceae, je rozšírený hlavne vo vyprahnutých krajinách a púšťach na severnej pologuli, ako sú autonómne oblasti Vnútorné Mongolsko, Sin-ťiang a Ningxia v Číne, Iráne, Indii, Mongolsku atď. Cistanche druhy patria k viacročným parazitickým bylinám, ktoré sa bežne prichytávajú ku koreňom rastlín viažucich piesok, ako je Haloxylox ammo dendron, H. persicum, Kalidium listnatý a Tamarix atď. (Jiang a Tu 2009).

Herba Cistanche, stonka druhu Cistanche, bola považovaná za vynikajúce tonikum a získala si česť "Ženšen púští". Spomedzi druhov Cistanche bol ako primárny zdrojový materiál Cistanche označený Cistanche deserticola YC MA (Stefanova et al. 2011). V dôsledku nadmernej úrody v posledných rokoch sú však prírodné zdroje voľne žijúcej C. deserticola (CD) nedostatočné, ktorá bola zbieraná ako jedna z rastlín triedy II, ktorá potrebuje ochranu v Číne, takže iné druhy tohto rodu, ako napr. C. salsa a C. sinensis sa v niektorých oblastiach používajú aj ako náhrada. Od prvého zaznamenania v Shen Nong's Chinese Material Medica (starodávnom farmakologickom kompendiu) sa CD považovalo za tonizáciu obličiek a povzbudenie "Yang" v klinickej praxi podľa teórie tradičnej čínskej medicíny, ktorá je údajne účinná pre reprodukciu, vývoj, a funkcia plodnosti. Medzitým sa CD varilo aj s baraním, zemiakmi alebo ryžou, aby sa vyrobilo tonizujúce jedlo na liečbu porúch spôsobených nadmernou námahou už stovky rokov, čo naznačuje, že je bezpečné ho užívať perorálne (Xiong et al. 2013). Tieto neoficiálne použitia však existujú najmä v čínskych inkunábulach s obmedzenými vedeckými informáciami diskutovanými z hľadiska moderných farmakologických konceptov.

Erektilná dysfunkcia (ED) je stav charakterizovaný buď nedostatočnou erekciou penisu alebo erekciou, ktorá u dospelých mužov netrvá dostatočne dlho (Cohan a Korenman 2000). V reakcii na moderné, sofistikované chemické látky sa obnovil záujem o hľadanie účinných a bezpečných liekov z rastlín na liečbu ED (Adimoelja 2000). Predchádzajúca štúdia (Liu et al. 2009) naznačila, že elektrina CD urýchľovala erekciu penisu u normálnych potkanov, avšak neexistujú žiadne údaje o vplyve CD na erektilnú dysfunkciu.

U zvierat sa chirurgická kastrácia s bilaterálnou orchiektómiou považovala za štandard kastrácie pri vyšetrovaní ED (Tombal 2005). Preto sa táto štúdia uskutočnila na vyhodnotenie potenciálnych účinkov CD proti ED skúmaním erektilnej latencie a trvania u kastrovaných potkanov.

MATERIÁLY A METÓDY

Chemikálie a materiály

Echinacoside (purity >98%) and acteoside (purity >98 percent) boli zakúpené od Národného inštitútu pre kontrolu potravín a liečiv (Peking, Čína). Metanol v kvalite HPLC bol zakúpený od Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). Vyčistená voda sa vyrábala pomocou systému Millipore Milli-Q Integral 3 System a systému Q-POD Milli-Q (Bedford, MA, USA). Stonky C. deserticola boli zakúpené od Shenzhen GURU Biology Co., Ltd (Guangdong, Čína) a rozomleté ​​na jemný prášok pomocou drviča, ktorý prešiel cez sito 60 mesh.

HPLC analýza a príprava rastlinného materiálu

Obsah echinakozidu a akteozidu v CD prášku bol stanovený podľa našej predchádzajúcej metódy (Zhao et al. 2011). Potom sa každých 100 g sušeného prášku uvarilo v 1,5

l vody po dobu 1,5 hodiny. Po ochladení na teplotu miestnosti sa zmes centrifugovala pri 2000 otáčkach za minútu počas 10 minút (Eppendorf 5810R, Nemecko) a zrazenina sa dvakrát reextrahovala za rovnakých podmienok. Spojené supernatanty sa skoncentrovali na vákuovej rotačnej odparke (Heidolph laborota 4001-efektívne, Nemecko) pri 60 stupňoch a potom sa lyofilizovali a získalo sa asi 42 percent sušeného práškového extraktu. Pri vykonávaní následného experimentu na zvieratách sa vysušený extrakt rozpustil v čistenej vode pri teplote miestnosti.

Pokusné zvieratá

Dospelé samce potkanov Sprague-Dawley (200-220 g) boli získané z Medicínskeho experimentálneho centra pre zvieratá v provincii Guangdong (Guangzhou, PR Čína), udržiavané v priestoroch s kontrolovanou teplotou s 12-hodinovými cyklami svetlo/tma pri izbová teplota (22-24 stupeň) a konštantná vlhkosť (40-70 percent) v laboratóriu SPF (bez špecifických patogénov) a kŕmené ad libitum. Experimentálne postupy boli v súlade s pokynmi Národného inštitútu zdravia pre starostlivosť a používanie laboratórnych zvierat.

experimentálny postup

Týždeň pred podaním bolo päťdesiat samcov potkanov SD anestetizovaných pentobarbitalom sodným intraperitoneálne (40 mg/kg) (Jung a kol. 1999) a náhodne rozdelené do piatich skupín: okrem potkanov v skupine s falošnou operáciou (Sham ), zvyšok bol bilaterálne kastrovaný cez scrotal prístup (Anderes 2003, Schlatt et al. 2002). Medzitým sa skupinám liečeným CD podávalo intragastricky 0,45 g/kg (nízka dávka CD extraktu, LCD plus Cas), 0,9 g/kg (stredná dávka CD extraktu, MCD plus Cas) a 1,8 g/kg (vysoká dávka CD extrakt, HCD plus Cas) CD extrakt, v tomto poradí, zatiaľ čo simulovaným a kastrovaným skupinám sa podávalo len zodpovedajúce množstvo vody. Meranie telesnej hmotnosti sa uskutočnilo na začiatku procedúry a potom každý týždeň. Všetky potkany podstúpili laparotómiu ihneď po smrti na odstránenie a následné zváženie nasledujúcich orgánov: predkožkové žľazy, semenný vačok, prostatická žľaza a sval levator ani.

Meranie erektilnej odozvy penisu

Erektilná funkcia potkanov v každej skupine bola hodnotená podľa predchádzajúcich metód (Ji a kol. 2009, Luo a kol. 2006). Stručne povedané, bipolárna elektróda z nehrdzavejúcej ocele (BL420F Data Acquisition & Analysis System, Tme Technology Co., Ltd, Chengdu, PR Čína) bola opatrne umiestnená na penis, kým nebol vztýčený pulzom elektrickej stimulácie (5 V) 0,2 s. Čas od stimulácie po erekciu sa zaznamenával ako erektilná latencia penisu. Keď bola pozorovaná erektilná odozva penisu, elektróda mohla byť vytiahnutá z penisu a doba, počas ktorej penis udržal erekciu, bola zaznamenaná ako trvanie erekcie.

Odber krvi a analýza sérových hormónov

Potkany boli anestetizované pentobarbitalom sodným intraperitoneálne (40mg/kg) (Jung et al. 1999). Vzorky krvi boli odobraté a zrážané pri 4 stupňoch počas 4 hodín, z ktorých sa sérum odoberalo centrifugáciou pri 4000 otáčkach za minútu počas 5 minút pri 4 stupňoch (Eppendorf 5810 R, Nemecko) a okamžite uskladnené pri -20 stupňoch mrazničky až do ďalšej analýzy . Celkové hladiny LH a FSH sa merali pomocou komerčných súprav pre rádioimunotest (RIA) (Beijing North Institute of Biological Technology, Peking, Čína) podľa pokynov výrobcu (Matsumoto et al. 1986). Na základe kompetitívnej rádioaktívnej imunitnej techniky sa v teste použil I{10}}označený LH (alebo FSH). Stručne, 100 ul I125-značeného LH (alebo FSH) činidla sa pridalo do 100 ul vzorky séra a inkubovalo sa so 100 ul purifikovanej králičej protilátky pri 4 stupňoch (alebo 37 stupňoch) cez noc. Potom sa do komplexu antigén-protilátka pridalo imunitné separačné činidlo oslia a proti králikovi a centrifugovalo sa (3500 ot./min., 15 minút), aby sa oddelil voľný a na protilátku viazaný125I-LH (alebo FSH). Potom sa merala rádioaktivita zrazeniny na čítači rádioimunitných testov (DMF-96, Zhongcheng electric technology development Co., Ltd., Hefei, Čína). Hranice citlivosti LH a FSH testu boli oba 1,0 mIU/ml.

ŠTATISTICKÁ ANALÝZA

Analýza údajov bola vykonaná pomocou softvéru SPSS verzie 16.0. Hodnoty boli vyjadrené ako priemer ± štandardná odchýlka (SD). Parametrické dáta boli analyzované pomocou analýz jednosmernej analýzy rozptylu (ANOVA), po ktorej nasledovali post hoc testy LSD. Neparametrické údaje boli analyzované Kruskal-Wallisovým testom. Rozdiely sa považovali za štatisticky významné, ak bola pravdepodobnosť odchýlky menšia ako 0,05.

VÝSLEDKY

Kvantitatívne stanovenie obsahu echinakozidu a akteozidu v CD prášku

Obsah echinakozidu a akteozidu v CD prášku bol 1,27±0.01 percento a 00,52±0,003 percenta, čo bolo v súlade s požiadavkou Čínskeho liekopisu. HPLC chromatogram CD prášku je znázornený na obr. 1.

Obr

HPLC chromatografický profil prášku Cistanche deserticola. Vrchol 1, echinakozid; Vrchol 2, akteozid. os X, retenčný čas; Os Y, jednotka absorbancie. Podmienky HPLC: systém Waters HPLC (binárna HPLC pumpa 1525, detektor indexu lomu 2414, detektor fotodiódového poľa 2996); stacionárna fáza: Symmetry C18 (4,6 mm x 25 {{10}} mm, 5 um, Waters, Milford, MA, USA); mobilná fáza: 0,5 % (V/V) vodný roztok kyseliny octovej (A) a metanol (B) zložka (0 min, A: B=25:75; 10- 30 min, A: B{{16 }}: 60; 30 min, A: B=0: 100); prietok: 1 ml/min; detekčná vlnová dĺžka: 330 nm; teplota: 30.

Obr.2

Latencia a trvanie erekcie penisu u kastrovaných potkanov. Údaje sú vyjadrené ako priemer ± SD (n=10). ##p<0.01 relative to sham-operated group, **p<0.01 relative to castrated group. Abbreviation (below): Sham, sham-operated group; Cas, castration control group; LCD +Cas (0.45g/kg), MCD +Cas (0.9g/kg) and HCD +Cas (1.8g/kg), three groups of CD extract treated in castrated rats

Obr.3

Účinky CD extraktu na koncentrácie LH v sére u kastrovaných potkanov. Údaje sú vyjadrené ako priemer ± SD (n=10). # p<0.05 relative to sham-operated group, * p<0.05 relative to castrated group.

Telesné hmotnosti a relatívna hmotnosť pomocných orgánov

Ako je uvedené v tabuľke 1, všetky potkany mali podobnú počiatočnú telesnú hmotnosť so zvýšením od 1. do 28. dňa. Priemerné hodnoty v kastrovanej skupine sa však zvýšili z 216,8 ± 9,2 g na 251,4 ± 12,7, 283,3 ± 15,1, 306,8 ± 15,4 a 322,2 ± 18,4 g, čím priberá na váhe menej v porovnaní s fiktívne ovládanými náprotivkami (p<0.05). There were no statistical differences between the sham group and CD treated group.

Obr.4

Účinky CD extraktu na koncentrácie FSH v sére u kastrovaných potkanov. Údaje sú vyjadrené ako priemer ±SD (n=10).

Hladiny hormónov v sére

Analyzovaná testom RIA bola priemerná sérová koncentrácia LH u kastrovaných potkanov 2,50±0,34 mIU/ml, čo ukazuje zvýšenie v porovnaní s falošne operovanou kontrolou (p<0.05). However, the value descended about 49.2% in the MCD +Cas group relative to that in castrated control (p<0.05) (fig. 3). Shown in fig. 4, no statistical differences were observed among all groups on FSH concentration.

DISKUSIA

Naše výsledky ukázali, že kastrácia významne predĺžila erektilnú latenciu penisu a skrátila trvanie erekcie s pozoruhodnou atrofiou pomocných orgánov. CD extrakt však uľahčil erektilnú odpoveď penisu a do určitej miery moduloval hladinu LH v sére u kastrovaných potkanov.

Spontánna erekcia je stimulovaná a udržiavaná hlavne androgénom prostredníctvom bunkových, molekulárnych a fyziologických mechanizmov, vrátane relaxácie kavernózneho hladkého svalstva (Traish a kol. 2007, Talha a kol. 2007) . Nedostatočné hladiny testosterónu vedú k zníženiu jeho relaxácie (McClure 1988), čo má za následok impotenciu u mužov (Bivalacqua et al. 2000). Najmä u potkanov je udržiavaný širokým rozsahom systémových koncentrácií testosterónu ako 10-12 percent, pod ktorými je erektilná odpoveď oslabená spôsobom závislým od dávky (Armagan et al. 2006). V tejto štúdii bola koncentrácia testosterónu v obehu príliš nízka na to, aby splnila limit citlivosti (0,02 ng/ml) u všetkých kastrovaných potkanov (údaje neboli uvedené vo výsledkoch). CD extrakt však významne skrátil erektilnú latenciu penisu pri troch dávkach a predĺžil trvanie erekcie pri 0,90 g/kg a 1,8 g/kg. Bol to pravdepodobne dôsledok androgénneho účinku CD spomínaného v niektorých predchádzajúcich štúdiách (He et al. 1996a, He et al. 1996b).

Niektoré pomocné orgány, ako je prostata a semenný vačok, sú závislé od androgénu, takže zmeny hmotnosti môžu odrážať zmeny endokrinného stavu (Trisomboon a kol. 2007, Jang a kol. 2011). Existovala prahová hladina testosterónu, pod ktorou bol metabolizmus týchto orgánov inhibovaný (Trachtenberg 1985). V našej štúdii sa potvrdilo, že kastrácia spôsobila zníženie hmotnosti pomocných reprodukčných orgánov v dôsledku nedostatku testosterónu.

Testosterón je primárne vylučovaný Leydigovými bunkami semenníkov a regulovaný hypofyzickými hormónmi, ako je luteinizačný hormón (LH) a folikuly stimulujúci hormón (FSH), ktoré zohrávajú dôležitú úlohu pri udržiavaní funkcie penisu kastrovaných zvierat (Robert et al. 2{ {6}}04). Keďže os hypotalamus-hypofýza-gonáda (HPG) je mechanizmus spätnej väzby s uzavretou slučkou, nízke hladiny gonádových hormónov môžu regulovať sekréciu LH a FSH (Morales et al. 2004). Naša štúdia zistila, že hladina LH v sére bola významne zvýšená u kastrovaných potkanov a potom klesla na normálnu hladinu CD extraktom v dávke 0,90 g/kg, čo súhlasilo s predchádzajúcim záverom, že zvýšená hladina LH bola spojená s vyšším rizikom erektilnej dysfunkcie. (Kupelian et al. 2006). V semenníkoch stimuluje LH syntézu a uvoľňovanie testosterónu, ktorého spätnoväzbová kontrola je relatívne konzistentná, zatiaľ čo FSH priamo pôsobí na Sertoliho bunky na výživu pomocou spätnoväzbového kontrolného komplexu (Hellqvist et al. 2008). Tieto zistenia poskytli väčšiu podporu pre domnienku, že CD exprimovalo účinok podobný androgénu, ktorý by mohol byť zodpovedný hlavne za zníženie sérového LH viac ako FSH.

V súčasnom pozorovaní bol vplyv kastrácie na vývoj telesnej hmotnosti u samcov potkanov podobný ako v predchádzajúcej štúdii (Christoffersen et al. 2006), na rozdiel od výsledkov u samíc potkanov (Pantaleão et al. 2010). CD extrakt nedokázal výrazne zlepšiť telesnú hmotnosť, čo bolo pravdepodobne spôsobené nedostatočnou dĺžkou liečby alebo komplexnými dopadmi na celkový zdravotný stav.

Záverom možno povedať, že kastrácia predĺžila erektilnú latenciu penisu a výrazne skrátila jej trvanie so zvýšením sérového LH a atrofiou pomocných pohlavných orgánov.

CD extrakt však uľahčil erektilnú odpoveď penisu skrátením erektilnej latencie a predĺžením trvania erekcie u kastrovaných potkanov. Tieto účinky boli pravdepodobne spôsobené účinkom podobným androgénom, ktorý bol podporený pozorovaním, že CD extrakt normalizoval sérové ​​koncentrácie LH, najmä pri dávke 0,90 g/kg. Je však potrebný ďalší dôkaz na preukázanie účinku CD extraktu proti ED na úrovni hypotalamu a limbu a tejto hodnotnej tradičnej medicíne v modernom svete by sa mohla venovať väčšia pozornosť.

POĎAKOVANIE

Táto práca bola podporená grantmi z Vedecko-technologickej podpory projektu v Ujgurskej autonómnej oblasti Sin-ťiang (PR Čína) (200840102-15).

LITERATÚRA

Adimoelja A (2000). Fytochemikálie a prielom tradičných bylín v liečbe sexuálnych dysfunkcií. Int. J. Androl., 23: 82-84.

Anderes KL (2003). Biologická charakterizácia nového, perorálne aktívneho antagonistu hormónu uvoľňujúceho gonadotropín (GnRH) s malou molekulou s použitím kastrovaných a intaktných potkanov. J. Pharmacol. Exp. Ther., 305: 688-695.

Armagan A, Kim NN, Goldstein I a Traish AM (2006). Vzťah medzi dávkou a odozvou medzi testosterónom a erektilnou funkciou: Dôkaz o existencii kritického prahu. J. Androl., 27: 517-526.

Bivalacqua TJ, šampión HC, Hellstrom WJ a Kadowitz PJ (2000). Farmakoterapia erektilnej dysfunkcie. Trendy. Pharmacol. Sci., 7: 524-540.

Christoffersen B, Raun K, Svendsen O, Fledelius C a Golozoubova V (2006). Hodnotenie kastrovaného samca potkana Sprague-Dawley ako modelu metabolického syndrómu a diabetu 2. typu. Int. J. Obes., 30: 1288- 1297.

Cohan P a Korenman SG (2000). Pokrok v erektilnej dysfunkcii a hormonálnej funkcii. J. Anti-aging Med., 3: 169-175.

Feldman HA, Goldstein I, Hatzichristou DG, Krane RJ a McKinlay JB (1994). Impotencia a jej medicínske a psychosociálne korelácie: Výsledky štúdie starnutia mužov v Massachusetts. J. Urol., 151: 54-61.

He W, Shu XF, Zong GZ, Shi ML, Xiong YL a Chen MH (1996b). Štúdie na posilnenie obličiek a Yang podporujúce pôsobenie Cistanche deserticola YC Ma pred a po príprave. Brada. J. Chin. Mater. Med., 9: 534-537.

He W, Zong GZ, Wu GL a Chen MH (1996a). Prieskum aktívnych zložiek Cistanche na účinok podobný androgénom. Brada. J. Chin. Mater. Med., 9: 564-565.

Hellqvist A, Schmitz M a Borg B (2008). Účinky kastrácie a androgénnej liečby na expresiu FSH- a LH- u lipkavec s tromi chrbticami, Gasterosteus aculeatus Rozdiely v spätnej väzbe sprostredkujúce fotoperiodickú reakciu dozrievania? Gen. Comp. Endocr., 158: 178-182.

Jang M, Min JW, In JG a Yang DC (2011). Účinky extraktu červeného ženšenu na motilitu epididymálnych spermií myší vystavených etanolu. Int. J. Toxicol., 30: 435-442.

Ji DB, Ye J, Li CL, Wang YH a Zhao J (2009). Antiaging efekt extraktu Cordyceps sinensis. Phytother. Res., 23: 116-122.

Jiang Y a Tu PF (2009). Analýza chemických zložiek v druhoch Cistanche. J. Chromatogr. A., 1216: 1970-1979.

Jung GW, Kwak JY, Kim IH, Koo MY, Park JI, Yoon S, Jung DG, Jung SI, Kwon HY a Yoon JH (1999). Úloha rastového faktora pri regenerácii nervov obsahujúcich oxid dusnatý (NOS) po kavernóznej neurotómii u potkanov. Int. J. Impot. Res., 11: 227-235.

Kupelian V, Shabsigh R, Travison TG, Page ST, Araujo AB a McKinlay JB (2006). Existuje vzťah medzi pohlavnými hormónmi a erektilnou dysfunkciou? Výsledky štúdie starnutia mužov v Massachusetts. J. Urology, 176: 2584-2588.

Liu ZR, Zhang D, Wu HJ, Li YL, Chen SP a Yang YM (2009). Účinok lektvaru Cistanche na syntázu oxidu dusnatého a výživu obličiek Yang. J. Med. & Pharm. Brada. Min., 5: 33-34.

Luo Q, Li Z, Huang X, Yan J, Zhang S a Cai YZ (2006). Polysacharidy Lycium barbarum: Ochranné účinky proti tepelnému poškodeniu semenníkov potkanov a H2O2-indukovanému poškodeniu DNA v bunkách semenníkov myší a priaznivý vplyv na sexuálne správanie a reprodukčnú funkciu hemikastrovaných potkanov. Life Sci., 79: 613-621.

Matsumoto AM, Karpas AE a Bremner WJ (1986). Chronické podávanie ľudského chorionického gonadotropínu u normálnych mužov: dôkaz, že folikuly stimulujúci hormón je nevyhnutný na udržanie kvantitatívne normálnej spermatogenézy u človeka. J. Clin. Endocrinol. Metab.,62: 1184-1192.

McClure RD (1988). Endokrinné hodnotenie a liečba erektilnej dysfunkcie. Urol. Clin. N. Am., 15: 53-64.

Morales A, Buvat J, Gooren LJ, Guay AT, Kaufman JM, Tan HM a Torres LO (2004). Endokrinné aspekty sexuálnej dysfunkcie u mužov. J. Sex Med., 1: 69-81.

Pantaleão TU, Mousovich F, Rosenthal D, Padrón ÁS, Carvalho DP a Costa VMCd (2010). Účinok hladín estradiolu a leptínu v sére na funkciu štítnej žľazy, príjem potravy a prírastok telesnej hmotnosti u samíc potkanov Wistar. Steroidy, 75: 638-642. Robert WH a Robert EB (2004). Hormonálna regulácia spermatogenézy. Int. J. Androl., 27: 335-342.

Schlatt S, Kim SS a Gosden R (2002). Spermatogenéza a steroidogenéza v tkanive semenníkov myší, škrečkov a opíc po kryoprezervácii a heterotopickom očkovaní kastrovaným hostiteľom. Reprodukcia, 124: 339-346.

Stefanova NA, Fursova AZ, Sarsenbaev KN a Kolosova NG (2011). Účinky Cistanche deserticola na správanie a príznaky katarakty a retinopatie u potkanov OXYS zrýchlených starnutím. J. Ethnopharmacol., 138: 624-632.

Talha M, Bilal G, Gökhan T, Arı Z a Coşkun B (2007). Vzťah medzi hladinami pohlavných hormónov a erektilnou dysfunkciou: Ktoré testy by sa mali robiť bežne? Yonsei. Med. J., 48:1015

Tombal B (2005). Vhodná kastrácia s agonistami hormónu uvoľňujúceho luteinizačný hormón (LHRH): Aká je optimálna hladina testosterónu? Eur. Urol. Suppl., 4: 14-19.

Trachtenberg J (1985). Optimálna koncentrácia testosterónu na liečbu rakoviny prostaty. J. Urology, 133: 888-890

Traish AM, Goldstein I a Kim NN (2007). Testosterón a erektilná funkcia: od základného výskumu k novej klinickej paradigme na zvládanie mužov s androgénnou insuficienciou a erektilnou dysfunkciou. Eur. Urol., 52: 54-70.

Trisomboon H, Watanabe G, Wetchasit P a Taya K (2007). Účinok dennej liečby thajskou bylinkou Kaempferia parviflora v Hershbergerovom teste s použitím kastrovaných nedospelých potkanov. J. Reprod. Develop, 53: 351- 356.

Xiong WT, Gu L, Wang C, Sun HX a Liu X (2013). Antihyperglykemické a hypolipidemické účinky Cistanche tubulosa u diabetických db/db myší typu 2. J. Ethnopharmacol., 150: 935-945.

Zhao SY, He XY, Jia BG, Peng QY a Liu X (2011). Produkcia akteozidu z Cistanche tubulosa beta-glukozidázou. Pak. J. Pharm. Sci., 24: 135-141.

For more information:1950477648nn@gmail.com