Účinky načasovania kontralaterálnej nefrektómie a ischemických stavov na fibrózu obličiek po jednostrannom ischemickom-reperfúznom poranení obličiek Ⅱ
Oct 27, 2023
Výsledky
Protokol 1: Účinky intervalu medzi kontralaterálnou nefrektómiou a uIRI na prechod AKI CKD Miera prežitia klesala s predĺžením intervalu medzi kontralaterálnou nefrektómiou a IRI
Ako bolo uvedené v experimente 1, trvanie ischemie bolo fixované na 24 minút s telesnou teplotou 37 °C v uIRI. Pozorujeme vplyv načasovania kontralaterálnej nefrektómie po uIRI na prežitie myší. Údaje ukázali, že v skupine na 7. deň (kontralaterálna intaktná oblička bola resekovaná 7 dní po uIRI) prežilo všetkých osem myší. V skupine 10. deň jedna myš uhynula deň po kontralaterálnej nefrektómii s mierou prežitia 87,5 %. V skupine 14. deň jedna myš zomrela prvý deň po kontralaterálnej nefrektómii a dve myši zomreli dva dni po kontralaterálnej nefrektómii, s mierou prežitia 62,5 %. Tieto výsledky ukázali, že miera prežitia myší sa postupne znižovala s rozšírením kontralaterálnej nefrektómie, keď boli ostatné dva ovplyvňujúce faktory fixované (obrázok 2 (A)).
KLIKNITE SEM A ZÍSKAJTE BYLINKOVÝ PRÍPRAVOK CISTANCHE PRE OBLIČKY
Funkcia obličiek klesala s predĺžením intervalu medzi kontralaterálnou nefrektómiou a uIRI
V porovnaní s falošnou kontrolou boli SCr a BUN významne vyššie u všetkých myší po kontralaterálnej nefrektómii (p < {{0}} 0,05), čo naznačuje, že všetky trpeli poškodením obličiek. Okrem toho sa hladiny SCr a BUN zvýšili s predĺžením intervalu medzi kontralaterálnou nefrektómiou a uIRI (p < 0,05) (obrázok 2 (B, C))
Histologické poškodenie obličiek sa zhoršilo s predĺžením intervalu medzi kontralaterálnou nefrektómiou a uIRI
Farbenie HE preukázalo, že tkanivo obličiek simulovanej skupiny bolo štrukturálne normálne 8 týždňov po uIRI. Vo všetkých skupinách uIRI sa v obličkách zistilo niekoľko patologických zmien po AKI (obrázok 3(A)), vrátane rôznych stupňov vakuolárnej degenerácie tubulárnych epitelových buniek, odlúčenia kefového lemu, fokálnej dezintegračnej nekrózy, dilatácie časti tubulárneho lúmenu a obličky edém tubulárnych epitelových buniek s variabilnou morfológiou. Okrem toho boli niektoré glomeruly zvrásnené a sklerotické, s hyperpláziou mezangiálnych buniek a rozšíreným Bowmanovým puzdrom. Infiltrácia zápalových buniek bola tiež pozorovaná v intersticiálnej obličke. Skóre tubulárneho a glomerulárneho patologického poškodenia poranenej obličky bolo vyššie ako pri simulácii (p < 0.05), čo naznačuje, že uIRI s kontralaterálnou nefrektómiou významne poškodila obličku. Skóre patologického poškodenia obličiek sa zvýšilo s rozšírením kontralaterálnej nefrektómie (p < 0,05) (obrázok 3 (B, C)). Tieto zistenia naznačujú, že patologické poškodenie obličiek sa postupne zvyšovalo s rozšírením kontralaterálnej nefrektómie po uIRI.
Obrázok 2. Účinky časových intervalov medzi kontralaterálnou nefrektómiou a unilaterálnym ischemicko-reperfúznym poškodením (uIRI) na mieru prežitia a funkciu obličiek. Ľavá oblička bola podrobená IRI v deň 0 a resekcia pravej obličky bola vykonaná v rôznych časových bodoch (deň 7, deň 10 a deň 14) s ischemickým trvaním fixovaným na 24 minút s telesná teplota fixovaná na 37 C počas ischémie obličiek. (A): Prežitie myší v každej skupine bolo hodnotené a prezentované ako percento. (B a C): Funkcia obličiek bola odhadnutá pomocou sérového kreatinínu (SCr) a dusíka močoviny v krvi (BUN). n ¼ 5–8/skupina. p < 0,05.
Obrázok 3. Účinky časových intervalov medzi kontralaterálnou nefrektómiou a unilaterálnym ischemicko-reperfúznym poškodením (uIRI) na histologické poškodenie obličiek. Ľavá oblička bola podrobená IRI v deň 0 a resekcia pravej obličky bola vykonaná v rôznych časových bodoch (deň 7, deň 10 a deň 14) s ischemickým trvaním fixovaným na 24 minút s telesná teplota fixovaná na 37 °C počas ischémie obličiek. Histologické poškodenie obličiek sa stanovilo farbením hematoxylín-eozín (HE). (A): Reprezentatívne HE farbenie poškodenej obličky, ktoré ukázalo typické histopatologické znaky post-AKI patologických zmien, vrátane rôznych stupňov tubulárnej epitelovej bunkovej degenerácie vakuoly, odlúčenia kefového lemu, fokálnej dezintegračnej nekrózy, dilatácie časti tubulárneho lúmenu (# ), edém tubulárnych epiteliálnych buniek obličiek s variabilnou morfológiou a infiltrácia zápalových buniek (%). Niektoré glomeruly boli zvrásnené a sklerotické, s hyperpláziou mezangiálnych buniek (&) a rozšíreným Bowmanovým puzdrom (zväčšenie, 400 um). (B): Semikvantifikácia tubulárneho poškodenia. (C): Semikvantifikácia glomerulárneho poškodenia. n ¼ 5–8/skupina. p < 0,05.
Fibróza obličiek sa zhoršila s predĺžením intervalu medzi kontralaterálnou nefrektómiou a uIRI Hmotnosť obličiek.
Transformácia z AKI na CKD je typicky charakterizovaná fibrózou obličiek [19] a zníženie hmotnosti obličiek je makroskopickým indikátorom fibrózy obličiek [2]. Takže sme zmerali hmotnosť obličiek (váha dieťaťa kalibrovaná podľa telesnej hmotnosti), aby sme predbežne preskúmali vplyv časových intervalov medzi UIRI a oneskorenou kontralaterálnou nefrektómiou na prechod AKI-CKD. V porovnaní s falošnou skupinou všetky skupiny uIRI vykazovali významné zníženie hmotnosti obličiek (p < 0 0,05), čo naznačuje, že všetky myši v skupinách uIRI mali fibrózu obličiek. Rozdiel v hmotnosti obličiek sa významne zmenil, keď bol rozdiel v časovom intervale medzi kontralaterálnou nefrektómiou a uIRI 3 dni, a hmotnosť obličiek sa postupne znižovala so zvyšujúcim sa časovým intervalom (obrázok 4 (A)).
Massonova trichrómová škvrna.
Massonovo trichrómové farbenie sa uskutočnilo na ďalšie sledovanie účinku časových intervalov medzi kontralaterálnou nefrektómiou a uIRI na fibrózu obličiek. V simulovanej skupine nebola pozorovaná žiadna významná intersticiálna fibróza obličiek, zatiaľ čo rôzne stupne fibrotických zmien v obličkách všetkých skupín uIRI boli pozorované 8 týždňov po uIRI (obrázok 4 (B)). Semikvantitatívna analýza fibrotickej oblasti ukázala, že fibrotická oblasť obličky v skupinách s uIRI bola významne zvýšená v porovnaní s oblasťou v simulovanej skupine (p < 0.05), čo naznačuje, že bol úspešne vykonaný prechodový model AKI CKD. Navyše, s oneskorením kontralaterálnej nefrektómie sa fibróza obličiek stala čoraz závažnejšou (p < 0, 05), čo naznačuje, že stupeň fibrózy obličiek sa významne zmenil, keď bol interval medzi kontralaterálnou nefrektómiou a uIRI 3 dni. S predĺženým časovým intervalom medzi kontralaterálnou nefrektómiou a uIRI sa stupeň fibrózy obličiek ešte viac zhoršil (obrázok 4 (C)).
Obrázok 4. Účinky časových intervalov medzi kontralaterálnou nefrektómiou a unilaterálnym ischemicko-reperfúznym poškodením (uIRI) na fibrózu obličiek. Ľavá oblička bola podrobená IRI v deň 0 a resekcia pravej obličky bola vykonaná v rôznych časových bodoch (deň 7, deň 10 a deň 14) s ischemickým trvaním fixovaným na 24 minút s telesná teplota fixovaná na 37 C počas ischémie obličiek. Fibróza obličiek bola hodnotená hmotnosťou obličiek, Massonovým trichrómovým farbením a expresiou fibronektínu (FN), kolagénu I (COL-I) a a-aktínu hladkého svalstva (a-SMA). (A): Hmotnosť obličiek k telesnej hmotnosti. (B): Reprezentatívne Massonovo trichrómové farbenie poranenej obličky, ktoré ukázalo typické fibrotické zmeny (%) (zväčšenie, 200 ). (C): Semikvantifikácia fibrotickej oblasti detegovaná Massonovým trichrómovým farbením. (D): Kvantitatívne analýzy RT-PCR na expresiu FN v obličkách. (E): Kvantitatívne analýzy RT-PCR na expresiu COL-I v obličkách. (F): Reprezentatívne obrázky Western blot pre FN, COL-I a a-SMA. (G): Stĺpcový graf znázorňujúci expresiu FN proteínu normalizovanú b-aktínom. (H): Stĺpcový graf ukazujúci expresiu proteínu COL-I normalizovanú b-aktínom. I: Stĺpcový graf znázorňujúci expresiu a-SMA proteínu normalizovanú b-aktínom. n ¼ 5–8/skupina. p < 0,05.
Akumulácia extracelulárnej matrice (ECM).
Intersticiálna fibróza obličiek je charakterizovaná ukladaním ECM [2], ako je FN a COL-I, v intersticiálnej oblasti obličky. Analýza Western blot a RT-PCR ukázala, že expresia FN a COL-I v obličkách bola významne zvýšená vo všetkých skupinách uIRI v porovnaní s falošnou skupinou (p < 0.05), čo naznačuje že všetky detské ney podstúpili fibrotické zmeny. Hladiny expresie FN a COL-I v obličkách boli vyššie s oneskorením kontralaterálnej nefrektómie (p < 0,05) (obrázok 4 (D–H)).
Myofibroblasty v obličkách.
Fibróza obličiek je charakterizovaná akumuláciou myofibroblastov a následnou produkciou ECM [20]. a-SMA sa použil na detekciu množstva myofibroblastov 8 týždňov po IRI. Analýza Western blot ukázala, že expresia a-SMA v obličkových tkanivách sa významne zvýšila vo všetkých skupinách uIRI v porovnaní s falošnou skupinou (p < 0 0,05), čo naznačuje, že myofibroblasty boli výrazne viac v obličkách všetkých zranených myši. Expresia a-SMA bola vyššia s oneskorením kontralaterálnej resekcie obličky (p < 0,05) (obrázok 4 (F, I)). Tieto výsledky ukázali, že myofibroblasty v tkanive obličiek uIRI sa významne zmenili v priebehu 3 dní medzi uIRI a kontralaterálnou nefrektómiou a že myofibroblasty sa postupne zväčšovali s dlhšími intervalmi.
Protokol 2: Účinky teploty jadra tela počas ischémie na prechod AKI-CKD
Miera prežitia klesala so zvýšením telesnej teploty počas ischémie
Ako je uvedené v experimente 2, aby sa preskúmal vplyv teploty tela počas ischémie na prechod AKI-CKD, trvanie ischémie sa stanovilo na 24 minút a kontralaterálna intaktná oblička sa odstránila 14 dní po uIRI. Údaje ukázali, že v skupine 36 °C (teplota tela myší počas ischémie bola kontrolovaná pri 36 °C) jedna myš zomrela prvý deň po kontralaterálnej nefrektómii a miera prežitia bola 87,5 %. V skupine 36,5 C zomreli dve myši počas prvých 2 dní po kontralaterálnej nefrektómii so 75% mierou prežitia. V porovnaní so skupinou 36,5 C uhynula o jednu myš viac na druhý deň po kontralaterálnej nefrektómii s mierou prežitia 62,5 % v skupine 37 C. V skupine 37,5 C, s výnimkou troch myší, ktoré uhynuli v prvých 2 dňoch po kontralaterálnej nefrektómii, jedna myš zomrela 3 dni po kontralaterálnej nefrektómii, s mierou prežitia 50 %. Okrem toho, čo sa stalo v skupine 37,5 C, jedna myš zomrela 5 dní po kontralaterálnej nefrektómii v skupine 38 C a miera prežitia bola 37,5 %. Tieto výsledky ukázali, že miera prežitia myší postupne klesala so zvýšením telesnej teploty počas ischémie (obrázok 5 (A)).
Funkcia obličiek sa znížila so zvýšením telesnej teploty počas ischémie
V porovnaní s falošnou skupinou viedlo uIRI k významnému zvýšeniu SCr a BUN vo všetkých skupinách uIRI (p < {{0}}.05), čo naznačuje, že všetky myši v skupinách uIRI sa vyvinuli poškodenie obličiek po kontralaterálnej nefrektómii. Porovnania medzi dvoma skupinami so susednými teplotami ukázali, že SCr a BUN u myší sa zvýšili so zvýšením ischemickej telesnej teploty o 0,5 C, ale nebol zaznamenaný žiadny štatistický rozdiel (p > 0,05) , čo naznačuje, že počas ischémie boli menej výrazné zmeny vo funkcii obličiek s rozdielom teploty v jadre o 0,5 °C. SCr a BUN sa však významne zvýšili, keď sa telesná teplota počas ischémie zvýšila o 1 C alebo viac (p < 0,05), čo naznačuje, že funkcia obličiek sa významne zmenila s rozdielom 1 C v telesnej teplote počas ischémie. Funkcia obličiek výraznejšie klesala so zvyšujúcou sa ischemickou telesnou teplotou (obrázok 5 (B, C)).
Poškodenie tkaniva obličiek sa zhoršilo so zvýšenou telesnou teplotou počas ischémie
Podľa farbenia HE bola štruktúra tkaniva obličiek u myší v simulovanej skupine normálna. Patologické zmeny vyvolané IRI boli pozorované vo všetkých skupinách používateľov, ako sú rôzne stupne vakuolárnej degenerácie tubulárnych epiteliálnych buniek, oddelenie kefového lemu, fokálna disintegračná nekróza, dilatácia časti tubulárneho lúmenu a edém tubulárnych epiteliálnych buniek obličiek s premenlivou morfológiou. ako zvrásnené a sklerotické glomeruly, hyperplázia mezangiálnych buniek a dilatované Bowmanovo puzdro, infiltrácia zápalových buniek v intersticiálnej obličke (obrázok 6(A)).
Skóre patologického poškodenia obličkových tubulov a glomerulov ukázalo, že v porovnaní so simulovanou skupinou bolo patologické poškodenie obličiek vo všetkých skupinách uIRI významne závažnejšie (p < {{0}}}.05 ), čo naznačuje, že zjavné patologické poškodenie obličiek sa objavilo vo všetkých skupinách uIRI a že model AKI-CKD bol úspešne vyvinutý. Porovnanie medzi dvoma skupinami so susednými teplotami ukázalo, že došlo k zvýšeniu skóre patologického poškodenia obličiek s 0,5 °C zvýšením telesnej teploty počas ischémie, ale nemalo to žiadnu štatistickú významnosť (p > 0,05), zatiaľ čo obličky patologické poškodenie sa významne zvýšilo so zvýšením telesnej teploty o 1 °C a viac počas ischémie (p < 0,05) (obrázok 6 (B, C)). Tieto výsledky ukázali, že histopatologické poškodenie obličky sa významne zmenilo s rozdielom 1 C telesnej teploty počas ischémie a postupne sa zvyšovalo so zvýšenou telesnou teplotou počas ischémie.
Fibróza obličiek sa zhoršuje so zvýšením telesnej teploty počas ischémie Hmotnosť obličiek.
V porovnaní s falošnou skupinou spôsobil uIRI významný pokles hmotnosti obličiek vo všetkých skupinách uIRI a u myší s rôznymi ischemickými telesnými teplotami sa vyvinuli rôzne stupne fibrózy obličiek. Porovnania medzi dvoma skupinami so susednými teplotami ukázali, že pokles hmotnosti obličiek nemal žiadny významný rozdiel, keď sa telesná teplota zvýšila o {{0}},5 C počas ischémie (p > 0.{{{{101} 7}}5), čo naznačuje, že rozdiel 0,5 C v telesnej teplote počas ischémie nemal žiadny významný vplyv na zmenu hmotnosti obličiek. Keď mala telesná teplota počas ischemickej periódy rozdiel 1 C, hmotnosť obličiek sa výrazne zmenila (p < 0,05) a postupne sa znižovala so zvyšujúcou sa ischemickou telesnou teplotou (obrázok 7 (A)).
Obrázok 7. Účinky telesnej teploty počas ischémie na fibrózu obličiek u myší s uIRI a oneskorenou kontralaterálnou nephrektómiou. Ľavá oblička bola podrobená IRI v deň 0 a resekcia pravej obličky bola vykonaná pri rôznych telesných teplotách (36 °C, 36,5 °C, 37 °C, 37,5 °C a 38 °C) s ischemickým časom ľavej oblička fixovaná po 24 minútach a pravá oblička bola odstránená 14 dní po IRI ľavej obličky. Fibróza obličiek bola hodnotená hmotnosťou obličiek, Massonovým trichrómovým farbením a expresiou fibronektínu (FN), kolagénu I (COL-I) a a-aktínu hladkého svalstva (a-SMA). (A): Hmotnosť obličiek k telesnej hmotnosti. (B): Reprezentatívne Massonovo trichrómové farbenie poranenej obličky, ktoré ukázalo typické fibrotické zmeny (%) (zväčšenie, 200 ). (C): Semikvantifikácia fibrotickej oblasti detegovaná Massonovým trichrómovým farbením. (D): Kvantitatívne analýzy RT-PCR na expresiu FN v obličkách. (E): Kvantitatívne analýzy RT-PCR na expresiu COL-I v obličkách. (F): Reprezentatívne obrázky Western blot pre FN, COL-I a a-SMA. (G): Stĺpcový graf znázorňujúci expresiu FN proteínu normalizovanú b-aktínom. (H): Stĺpcový graf ukazujúci expresiu proteínu COL-I normalizovanú b-aktínom. (I): Stĺpcový graf znázorňujúci expresiu a-SMA proteínu normalizovanú b-aktínom. n ¼ 3–7/skupina. p < 0,05. NS: nevýznamné.
Massonova trichrómová škvrna.
8 týždňov po uIRI výsledky Massonovho trichrómového farbenia ukázali, že v porovnaní so simulovanou skupinou bola fibrotická oblasť tkanív obličiek vo všetkých skupinách uIRI významne zvýšená (p < 0.05), čo naznačuje, že fibrotický výsledok sa vyskytol vo všetkých skupinách uIRI. Porovnania medzi dvoma skupinami so susediacimi teplotami ukázali, že oblasť fibrózy obličiek sa zvýšila, ale bez štatistickej významnosti, keď sa telesná teplota zvýšila o 0,5 °C počas ischémie (p > 0.{{10} } 5), čo naznačuje, že rozdiel 0, 5 C v telesnej teplote počas ischémie nemal žiadny významný vplyv na fibrózu obličiek. Pri každom zvýšení telesnej teploty o 1 °C počas ischémie sa oblasť intersticiálnej fibrózy obličiek významne zvýšila (p < 0,05), čo naznačuje, že zvýšenie telesnej teploty o 1 °C počas ischémie malo významný vplyv na intersticiálnu fibrózu obličiek a fibrózu obličiek sa postupne zhoršovali so zvýšením telesnej teploty počas ischémie (obrázok 7(B,C)).
ECM v tkanive obličiek. Údaje ukázali, že v porovnaní so simulovanou skupinou boli expresie FN a COL-I v tkanivách obličiek všetkých skupín uIRI významne zvýšené (p < 0.05), čo bolo v súlade s výsledky Massonovho farbenia. Porovnania medzi dvoma skupinami so susednými teplotami ukázali, že expresia FN a COL-I v tkanivách obličiek sa zvýšila o 0,5 °C zvýšenie telesnej teploty počas ischémie, ale nebol tam žiadny štatisticky významný rozdiel (p > {{8 }}.05), čo naznačuje, že 0,5 °C rozdiel v telesnej teplote počas ischémie nemal významný vplyv na ukladanie ECM, zatiaľ čo expresia FN a COL-I sa významne zvýšila so zvýšením o 1 C telesná teplota počas ischémie (p < 0,05) a mali výraznejší nárast so zvyšujúcou sa telesnou teplotou. Záverom možno povedať, že ukladanie ECM alebo fibrotický výsledok v tkanivách obličiek sa zvyšoval s vyššou telesnou teplotou počas ischémie (obrázok 7 (D–H)).
Myofibroblasty v tkanive obličiek.
V porovnaní s falošnou skupinou boli expresie a-SMA v tkanive obličiek všetkých skupín uIRI významne zvýšené (p < 0.05), čo naznačuje, že myofibroblasty boli významne zvýšené vo všetkých skupinách uIRI . Porovnania medzi dvoma skupinami so susednými teplotami ukázali, že expresia a-SMA v obličkách sa zvýšila, keď sa telesná teplota zvýšila o 0,5 C počas ischémie, ale nebol tam žiadny významný rozdiel (p > 0 .05), čo naznačuje, že rozdiel 0,5 C v ischemickej telesnej teplote nemal žiadny významný vplyv na zmeny obličkových myofibroblastov. Okrem toho sa expresia a-SMA v tkanivách obličiek významne zvýšila so zvýšením ischemickej telesnej teploty o 1 ° C a zvýšenie expresie a-SMA bolo významnejšie so zvyšujúcou sa telesnou teplotou (p < 0,05), čo naznačuje, že myofibroblasty sa významne zmenili, keď rozdiel telesnej teploty počas ischémie bol 1 C alebo viac. Spolu so zvýšením telesnej teploty počas ischémie sa postupne zvyšovali myofibroblasty v tkanivách obličiek (obrázok 7 (F, I)).
Protokol 3: Účinky trvania ischemickej choroby na prechod AKI-CKD
Miera prežitia sa znižovala so zvyšujúcim sa trvaním ischemickej choroby Ako bolo uvedené v experimente 3, aby sa preskúmal účinok trvania ischemickej choroby na prechod AKI-CKD, ischemická telesná teplota bola počas uIRI fixovaná na 37 °C a kontralaterálna oblička bola odstránená 14 dní po uIRI. Výsledky ukázali, že v 21-minútovej skupine (trvanie ischemickej choroby bolo 21 minút) jedna myš zomrela 1 deň a 2 dni po odstránení kontralaterálnej obličky, s mierou prežitia 75 %, a jedna myš zomrela 2 dni po kontralaterálnej nefrektómii. v skupine po 24 minútach s mierou prežitia 62,5 %. V 27-minútovej skupine zomreli štyri myši, dve myši, jedna myš a jedna myš 1 deň, 3 dni, 5 dní a 7 dní po kontralaterálnej nefrektómii a miera prežitia bola {{ 18} %. Podobne päť myší, dve myši a jedna myš uhynuli 1 deň, 2 dni a 3 dni po kontralaterálnej nefrektómii v 30-minútovej skupine a miera prežitia bola 0 %. To naznačuje, že miera prežitia klesala so zvyšujúcim sa trvaním ischemickej choroby, pretože všetky myši v 27-minútovej skupine a 30-min skupine zomreli 7 dní a 3 dni, v uvedenom poradí, po kontralaterálnej nefrektómii (obrázok 8(A)).
Funkcia obličiek sa znížila s dlhším trvaním ischémie
Údaje ukázali, že v porovnaní so simulovanou skupinou, 21-minútová aj 24-minútová skupina vykazovali významné zvýšenie SCr a BUN (p < 0.05), čo naznačuje pokles funkcie obličiek. V porovnaní s 21-minútovou skupinou vykazovala 24-minútová skupina výraznejšie zvýšenie SCr a BUN (p < 0,05), čo naznačuje, že funkcia obličiek sa významne zmenila s 3-minútovým rozdielom v trvaní ischemickej choroby a zreteľnejším poklesom funkcie obličiek bolo možné vidieť s dlhším trvaním ischemickej choroby (obrázok 8 (B, C)).
Obrázok 8. Účinky trvania ischemickej choroby na mieru prežitia a funkciu obličiek u myší s uIRI a oneskorenou kontralaterálnou nefrektómiou. Ľavá oblička bola podrobená IRI v deň 0 a resekcia pravej obličky bola vykonaná v rôznych ischemických časoch (21 min, 24 min, 27 min a 30 min) s pevnou telesnou teplotou pri 37 °C počas ischémie obličiek a pravá oblička bola odstránená 14 dní po IRI ľavej obličky. (A): Prežitie myší v každej skupine bolo hodnotené a prezentované ako percento. (B a C): Funkcia obličiek bola odhadnutá pomocou sérového kreatinínu (SCr) a dusíka močoviny v krvi (BUN). n ¼ 5–6/ skupina. p < 0,05.
Histopatologické poškodenie obličiek sa zhoršilo s dlhším trvaním ischémie
Podľa farbenia HE bola štruktúra tkaniva obličiek u myší v simulovanej skupine normálna. V porovnaní s falošnou skupinou mali 21-minútová a 24-minútová skupina patologické zmeny v rôznych stupňoch, vrátane degenerácie tubulárnych epitelových buniek vakuoly, odlúčenia kefového lemu, fokálnej dezintegračnej nekrózy, dilatácie časti tubulárneho lúmenu, edému tubulárnych epiteliálnych buniek obličiek s variabilnou morfológiou , vráskavé a sklerotické glomeruly, hyperplázia mezangiálnych buniek a dilatované Bowmanovo puzdro a infiltrácia zápalových buniek v intersticiálnom priestore (obrázok 9(A)). Skóre patologického poškodenia obličkových tubulov a glomerulov bolo signifikantne vyššie v 21-minútových aj 24-minútových skupinách v porovnaní so simulovanou skupinou (p < 0.05), čo naznačuje, že významné patologické poškodenie obličiek sa vyvinulo v r. obe skupiny užívateľov. Okrem toho skupina 24 minút mala vyššie skóre patologického poškodenia obličiek a závažnejšie patologické poškodenie v porovnaní s 21 minútovou skupinou (p < 0,05) (obrázok 9 (B, C)), čo naznačuje, že patologické poškodenie obličiek malo významné zmeny s 3 min rozdiel v trvaní ischémie. Čím dlhšie trvá ischémia, tým závažnejšie je patologické poškodenie obličiek
Fibróza obličiek sa zhoršila s dlhším trvaním ischémie Hmotnosť obličiek.
V porovnaní so simulovanou skupinou vykazovali 21-minútové aj 24-minútové skupiny významné zníženie hmotnosti obličiek (p < 0.05) a 24-minútová skupina mala výraznejší pokles hmotnosti obličiek v porovnaní so skupinou po 21 minútach (p < 0,05). Tieto naznačovali, že 3-minútový rozdiel v trvaní ischémie viedol k významnej zmene hmotnosti obličiek a zreteľnejšie zníženie hmotnosti obličiek možno pozorovať pri dlhšom trvaní ischémie (obrázok 10(A)).
Massonova trichrómová škvrna. Massonovo trichrómové farbenie a semikvantifikácia analýzy fibrotickej oblasti ukázali, že nedošlo k žiadnej významnej intersticiálnej fibrotickej zmene v simulovanej skupine, zatiaľ čo rôzne stupne fibrotických zmien boli pozorované v intersticiálnej obličke v 21 min aj 24 min skupinách (p < { {3}}.05). V porovnaní s 21-minútovou skupinou mala 24-minútová skupina vyšší fibrotický stupeň obličkového tkaniva (p < 0,05), čo naznačuje, že fibróza obličiek sa významne zmenila s 3-minútovým rozdielom v trvaní ischemickej choroby a že závažnejšia fibróza obličiek by sa stala s dlhšou ischemickou chorobou. trvanie (obrázok 10(B,C)).
ECM v tkanive obličiek. Analýza Western blot a RT-PCR ukázala, že v porovnaní s falošnou skupinou sa expresia FN a COL-I významne zvýšila v 21-minútovej aj 24-minútovej skupine (p < 0.05) , čo naznačuje, že ECM indukovaná IRI sa významne zvýšila v skupinách uIRI a oblička prešla významnou fibrotickou progresiou. V porovnaní s 21-minútovou skupinou boli expresie FN a COL-I výraznejšie v obličkovom tkanive v 24-minútovej skupine (p < 0,05), čo naznačuje, že ukladanie ECM v obličkových tkanivách sa významne zmenilo s 3-minútovým rozdielom v trvanie ischemie a ukladanie ECM sa zvyšovalo s predĺženým trvaním ischemickej choroby (obrázok 10 (D–H)).
Myofibroblasty v tkanive obličiek. Analýza Western blot ukázala, že v porovnaní so simulovanou skupinou sa výrazne zvýšila expresia a-SMA v obličkách v skupinách po 21 a 24 minútach (p < 0.05), čo naznačuje, že myofibroblasty mali signifikantné zvýšenie v obličkách v skupinách uIRI a došlo k významnej fibrotickej progresii. Expresia a-SMA sa významne zvýšila s 3-minútovým zvýšením trvania ischemickej choroby (p < 0,05) a našlo sa viac myofibroblastov s predĺženým trvaním ischemickej choroby (obrázok 10 (F, I)).
Obrázok 9. Účinky trvania ischemickej choroby na histologické poškodenie obličiek u myší s uIRI a oneskorenou kontralaterálnou nefrektómiou. Ľavá oblička bola podrobená IRI v deň 0 a resekcia pravej obličky bola vykonaná v rôznych ischemických časoch (21 min, 24 min, 27 min a 30 min) s pevnou telesnou teplotou pri 37 °C počas ischémie obličiek a pravá oblička bola odstránená 14 dní po IRI ľavej obličky. Histologické poškodenie obličiek sa stanovilo farbením hematoxylín-eozín (HE). (A): Reprezentatívne HE farbenie poškodenej obličky, ktoré ukázalo typické histopatologické znaky post-AKI patologických zmien, vrátane rôznych stupňov tubulárnej epitelovej bunkovej degenerácie vakuoly, odlúčenia kefového lemu, fokálnej dezintegračnej nekrózy, dilatácie časti tubulárneho lúmenu (# ), edém tubulárnych epiteliálnych buniek obličiek s variabilnou morfológiou a infiltrácia zápalových buniek (%). Niektoré glomeruly boli zvrásnené a sklerotické, s hyperpláziou mezangiálnych buniek (&) a rozšíreným Bowmanovým puzdrom (zväčšenie, 400 um). (B): Semikvantifikácia tubulointersticiálneho poškodenia. (C): Semikvantifikácia glomerulárneho poškodenia. n ¼ 5–6/skupina. p < 0,05.
Podporná služba Wecistanche - Najväčší vývozca cistanche v Číne:
E-mail:wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/Tel:+86 15292862950
Nakupujte pre ďalšie špecifikácie Podrobnosti:
https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop
