Experimentálna štúdia o experimentoch proti únave a proti žiareniu s mäkkými kapsulami s cistanche ako hlavnou surovinou

Mar 10, 2022


Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com


Abstrakt:

Cieľ Preskúmať účinky proti únave a proti žiareniu mäkkých kapsúl vyrobených z Bossica cistanche, Acanthopanax senticosus a Jujube ako hlavných surovín. Metódy: Boli vytvorené tri experimentálne skupiny a myšiam boli intragastricky podávané mäkké kapsuly 0.18, 0.36 a 1.08 g/kg·bw každý deň, a vytvorila sa prázdna kontrolná skupina. Meranie sa uskutočnilo po kontinuálnom intragastrickom podávaní počas 30 dní. Na stanovenie ich účinkov proti únave sa použili nosný čas plávania myší, obsah pečeňového glykogénu, hladina močoviny v sére po cvičení, plocha pod krivkou kyseliny mliečnej v krvi a ďalšie ukazovatele; myšiam boli podávané vyššie uvedené dávky sondou každý deň a súčasne bola vytvorená radiačná kontrolná skupina. Po kontinuálnej sondáži počas 21 dní boli vybrané rôzne expozičné dávky pre rôzne indikátory a každá skupina bola raz ožiarená rovnakou dávkou 7 lúčov a vzorky pokračovali aj po ožiarení. Počet bielych krviniek v periférnej krvi sa robil pred, na 3. a 14. deň po ožiarení, na 3. deň po ožiarení sa vykonal test počtu jadrových buniek kostnej drene a mikronukleový test buniek kostnej drene, aktivita sérovej superoxiddismutázy (SOD) sa merala dňa 7. deň a aktivita sérovej superoxiddismutázy (SOD) sa merala na 14. deň. Sérový hemolyzín na stanovenie jeho antiradiačného účinku. Výsledky Dávky 0, 36 a 1,08 g/kg · telesnej hmotnosti môžu predĺžiť nosný čas plávania myší, 1,08; dávky g/kg·bw môžu významne znížiť hladinu močoviny v sére myší po cvičení a významne znížiť hladinu kyseliny mliečnej v krvi myší Plocha pod krivkou; počet leukocytov periférnej krvi v skupinách so strednou a vysokou dávkou na 3. a 14. deň po ožiarení dávkou 3GY bol signifikantne vyšší ako v kontrolnej skupine s modelom žiarenia; na 3. deň bol počet jadrových buniek kostnej drene myší v skupine s vysokou dávkou významne vyšší ako v kontrolnej skupine. V skupine bola miera mikronukleáru buniek kostnej drene významne nižšia ako v kontrolnej skupine. Na 7. deň po ožiarení dávkou 6GY bola aktivita sérovej superoxiddismutázy (SOD) myší v skupine s vysokou dávkou významne vyššia ako v kontrolnej skupine. Rozdiel je štatisticky významný (P<0.05 or="" p=""><0.01). conclusion:="" the="" soft="" capsules="" with="" cistanche,="" acanthopanax="" senticosus,="" and="" jujube="" as="" the="" main="" raw="" materials="" have="" anti-fatigue="" and="" anti-radiation="">

Kľúčové slová: Cistanche; Acanthopanax senticosus; Jujube; Proti únave; Proti žiareniu

To explore the anti-fatigue and anti-radiation effects of soft capsules made of Bossica cistanche

Cistanche deserticola má mnoho účinkov, kliknite sem a dozviete sa viac



Cistancheje dužinatá stonka so šupinatými listami cistanche cistanche, jedného zo vzácnych čínskych bylinných liečiv so širokým spektrom použitia. . Štúdie ukázali, že má funkcie posilnenia imunitnej funkcie tela, podpory pamäti, zlepšenia inteligencie, regulácie nervového systému, zlepšenia sexuálnej funkcie, proti starnutiu, preháňadla a žiarenia. Acanthopanax senticosus, tiež známy ako Acanthopanax senticosus a Acanthopanax senticosus, je koreň a podzemok rastliny Acanthopanax senticosus z čeľade Araliaceae. Vedci doma aj v zahraničí overili, že obsahuje množstvo účinných látok a dokáže posilniť nešpecifickú obranyschopnosť organizmu prostredníctvom rozsiahlych výskumov a experimentov. Schopnosť s imunitnou reguláciou, protinádorové účinky, účinky proti starnutiu, proti radiačnému poškodeniu a proti únave. Jujube je zrelý plod jujuby Rhamnus. Nazýva sa päť starovekých plodov Číny spolu s broskyňou, slivkou, prosom a marhuľou. Štúdie zistili, že má imunitnú stimuláciu, antioxidačné, proti starnutiu, protinádorové, protimutačné, proti alergii typu I a proti únave. Tento produkt sa vyrába do mäkkých kapsúl sCistanche, Acanthopanax senticosus a Jujube ako hlavné suroviny. Uskutočnili sme pokusy na zvieratách o jeho komplexných účinkoch proti únave a proti žiareniu.

Cistanche

Cistanche

1. Materiál a metódy

1.1 Testovaná látka

Mäkká kapsula, 1.08 g/viečko, ktorú poskytuje spoločnosť, je vyrobená hlavne z Cistanche, Acanthopanax senticosus, jujuby a ďalších surovín prostredníctvom vedeckého spracovania. Odporúčaná dávka na perorálne podanie človeku je 0,036 g/kg·bw. Vezmite obsah kapsuly na experiment. Výsledky toxikologického testu nášho laboratória ukázali, že akútne orálne podanie tejto mäkkej kapsuly samcom a samiciam myší Kunming bolo väčšie ako 21 500 ms/kg·bw a bolo netoxické. Tri testy genetickej toxicity (Amesov test, polychromatický erytrocytový mikronukleový test kostnej drene myši, test deformity myších spermií) boli všetky negatívne. Kŕmenie počas 30 dní nevyvolalo zjavné toxické a vedľajšie účinky na pozorovacie indexy potkanov.

1.2. Pokusné zvieratá

K dispozícii je 200 čistých myších samíc Kunming a 160 myších samcov s hmotnosťou 18-22g, ktoré poskytlo oddelenie technických služieb laboratórnych zvierat Dongchuang, okres Kaifu, mesto Changsha, a číslo licencie na výrobu experimentálnych zvierat je SCXK (Xiang) {{3} }. Počas experimentu bola teplota experimentálneho prostredia 22-24 stupňov a vlhkosť 52 percent -58 percent . Experimentálne prostredie je bariérový systém. Registračné číslo pokusného zvieraťa je SYXK (Xiang) ZOO3—0002.

1.3 Nastavenie dávky a metóda podávania testovanej látky

Nízke, stredné a vysoké dávky sú {{0}},18, 0,36 a 1,08 g/kg·bw (v tomto poradí ekvivalentné 5, 10 a 30-násobku odporúčanej dávky pre ľudí ). Vezmite obsah mäkkých kapsúl a pridajte jedlý rastlinný olej na požadovanú koncentráciu. Kontrolnej skupine sa podával rovnaký objem jedlého rastlinného oleja a sonda sa podávala raz denne s objemom 0,1 ml/10 g.bw. V experimente proti únave, nepretržitej žalúdočnej sonde počas 30 dní a experimente proti žiareniu počas 21 dní po nepretržitej žalúdočnej sonde začali merať rôzne pozorovacie indexy.

1.4 Hlavné prístroje a činidlá

Súpravu na testovanie močoviny v sére poskytla spoločnosť Shanghai Fosun Long March Medical Science Co., Ltd.; súpravu na testovanie kyseliny mliečnej v krvi poskytla britská spoločnosť RANDOX; súpravu na testovanie glykogénu poskytol Nanjing Jiancheng Bioengineering Research Institute.

1.5 Metóda a meranie pozorovacieho indexu

200 samíc Kunming čistej úrovne bolo rozdelených do skupín I, II, III, IV a V5. Uskutočnil sa test počtu bielych krviniek v periférnej krvi, test počtu jadrových buniek kostnej drene, mikronukleový test buniek kostnej drene u myší a krvný superoxid. Test aktivity dismutázy (sOD) a test sérového hemolyzínu. Každá veľká skupina pridá zvieratá a každá veľká skupina sa náhodne rozdelí na kontrolnú skupinu s modelom žiarenia, skupiny s nízkou, strednou a vysokou dávkou, pričom v každej skupine je 10 zvierat. Po 21 dňoch nepretržitej sondy boli dávková skupina a kontrolná skupina radiačného modelu ožiarené rovnakou dávkou 7-lúča raz celé telo a boli vybrané rôzne dávky podľa rôznych indikátorov. Po ožiarení sa sondou pokračovalo až do konca každého experimentu.

1.5.1 Experiment s počtom bielych krviniek v periférnej krvi

Skupine s dávkou aj kontrolnej skupine s modelom žiarenia bola raz podaná dávka 3Cy 7 lúčov. Krv z konca chvosta 20 sa odobrala pred ožiarením, 3 dni po ožiarení a 14 dní po ožiarení a pridala sa k 0,38 ml 1% kyseliny chlorovodíkovej. Po zmiešaní bol spočítaný celkový počet bielych krviniek.

1.5.2 Experiment na počte jadrových buniek kostnej drene

Dávková skupina aj kontrolná skupina radiačného modelu boli ožiarené celé telo 7 lúčmi v dávke 3 Gy. Na 3. deň po ožiarení boli myši usmrtené cervikálnou dislokáciou, stehenné kosti boli zbavené a všetky bunky kostnej drene vo femuroch boli vymyté Hankovým roztokom. Počítajte pod zrkadlom. Vypočítajte počet buniek s jadrami na ml buniek kostnej drene.

1.5.3 Kostná dreň myši

Skupina testovanej s mikrojadrom buniek a kontrolná skupina s modelom žiarenia boli ožiarené celé telo 7 lúčmi v dávke 3Gy. Na 3. deň po ožiarení boli myši usmrtené cervikálnou dislokáciou, hrudná kosť bola odstránená, tekutina z kostnej drene bola vytlačená a zmiešaná s teľacím sérom, bežnými nátermi, fixovaná metanolom, farbením Giemsa, premytá destilovanou vodou a vysušená . Pod optickým mikroskopom každé zviera spočítal počet mikrojadier v 1,000 polychromatických erytrocytoch.

1.5.4 Test aktivity sérovej superoxiddismutázy (SOD).

Dávková skupina aj kontrolná skupina radiačného modelu boli ožiarené celé telo 7 lúčmi v dávke 6 Gy. Na 7. deň po ožiarení boli odstránené očné buľvy, bola odobratá krv, centrifugovaná a bolo odobraté sérum. Aktivita sérovej superoxiddismutázy (so/)) bola stanovená podľa inštrukcií súpravy.

1.5.5 Sérový hemolyzínový test

Dávková skupina aj kontrolná skupina radiačného modelu boli raz ožiarené celým telom dávkou 2Gy so 7 lúčmi. Do 20 dní po ožiarení sa zmerala hodnota polovičnej hemolýzy v sére (Rico). Každá myš bola imunizovaná intraperitoneálnou injekciou 2 % (obj./obj., pripravené s fyziologickým roztokom) baleného objemu RBC 0,2 ml. Po 5 dňoch boli očné buľvy odstránené a krv bola zozbieraná do centrifugačnej skúmavky, centrifugovaná pri 20,000 otáčkach za minútu počas 10 minút a bolo odobraté sérum. Stanovte hodnotu polovičnej hemolýzy (HC50). 1.6 Experiment proti únave 160 samcov myší Kunming čistého stupňa sa rozdelilo do 4 skupín I, Ⅱ, Ⅲ, iV, 40 zvierat v každej skupine a vykonal sa test plávania na nosnosť, močovina v sére, kyselina mliečna v krvi a pečeňový glykogén. merané. . Každá veľká skupina bola náhodne rozdelená na kontrolnú skupinu, skupinu s nízkou dávkou, skupinu so strednou dávkou a skupinu s vysokou dávkou, pričom v každej skupine bolo 10 zvierat.

1.6.1 Skúška plávania so záťažou

Po poslednom podaní testovanej látky na 30 minút sa myši umiestnili do plaveckého boxu, aby mohli plávať. Hĺbka vody bola asi 30 era a teplota vody bola 2^5 stupňa ±1. O °C je koreň potkanieho chvosta zaťažený 5 percentami telesnej hmotnosti olovenej kože. Čas od začiatku plávania do úhynu myší sa zaznamenával ako čas plávania nesúci váhu (s).

1.6.2 Stanovenie močoviny v sére

Po poslednom podaní testovanej látky na 30 minút myši plávajú nezaťažené 90 minút vo vode s teplotou 30 °C a po 60 minútach odpočinku sa odoberú očné buľvy na odber krvi. Po státí pri 4 °C počas 3 hodín, centrifugácii pri 2000 otáčkach za minútu počas 15 minút, bolo odobrané sérum a sérová močovina bola stanovená plne automatickým biochemickým analyzátorom.

1.6.3 Stanovenie pečeňového glykogénu

Antrónová metóda:30 minút po poslednom podaní testovanej látky myšiam boli zvieratá usmrtené a bolo im odobraných 100 mg pečene a pečene a pečeňový glykogén bol stanovený podľa návodu súpravy.

1.6.4 Stanovenie kyseliny mliečnej v krvi

Po 30 minútach od posledného podania testovanej látky sa 20 minút odoberala krv z mediálneho venózneho plexu a potom sa plávalo vo vode s teplotou 30 °C bez záťaže počas 10 minút a potom sa zastavilo. Krv sa odoberala 0 a 20 minút po cvičení. Pod oblasťou.

1.7 Experimentálne spracovanie údajov

Na štatistickú analýzu použite softvér Spss.

cistanche to Anti-radiation

2 výsledky

2.1 Vplyv testovanej látky na hmotnosť myší

In the anti-radiation experiment, the mice gained normal weight before irradiation, and the mice in each group decreased after irradiation. In the anti-fatigue experiment, the weight of mice in each dose group was compared with the control group during the experiment, and the difference was not statistically significant (P>0.05).

2.2 Účinok na počet bielych krviniek v periférnej krvi u myší

Pozri tabuľku 1. Počet bielych krviniek v kontrolnej skupine radiačného modelu na 3. deň po ožiarení sa porovnal s počtom pred ožiarením. Rozdiel bol štatisticky významný (P<0.01), indicating="" that="" the="" radiation="" damage="" model="" was="" established.="" on="" the="" 3rd="" day="" after="" irradiation,="" the="" white="" blood="" cell="" counts="" of="" the="" medium="" and="" high="" dose="" groups="" and="" the="" medium-dose="" group="" on="" the="" 14th="" day="" were="" significantly="" higher="" than="" those="" of="" the="" radiation="" model="" control="" group,="" and="" the="" difference="" was="" statistically="" significant="" (p=""><0.05 or="" p=""><>

Effect of test substance on peripheral blood leukocyte counts in mice before and after irradiation

2.3 Účinok na počet jadrových buniek v kostnej dreni myší a rýchlosť mikrojadier buniek kostnej drene u myší

Pozri tabuľku 2. Na 3. deň po ožiarení bol počet jadrových buniek kostnej drene v skupine s vysokou dávkou významne vyšší ako v kontrolnej skupine a miera mikronukleáru buniek kostnej drene v skupine s vysokou dávkou bola významne vyššia nižšia ako v kontrolnej skupine. Rozdiel bol štatisticky významný (P<0.>


Effect on the number of bone marrow nucleated cells and the micronucleus rate of bone marrow cells in mice

2.4 Účinok na aktivitu myšacej sérovej superoxiddismutázy (SOD) a polovičnú hemolýzu myši (HC50)

Na 7. deň po ožiarení bola aktivita sérovej superoxiddismutázy (so/) myší v skupine s vysokou dávkou významne vyššia ako v kontrolnej skupine a rozdiel bol štatisticky významný (P<0.05). on="" the="" 14th="" day="" after="" irradiation,="" the="" half="" hemolysis="" value="" (he50)="" of="" the="" mice="" in="" each="" dose="" group="" was="" compared="" with="" the="" control="" group,="" and="" the="" difference="" was="" not="" statistically="" significant="" (p="">0.05).

2.5 Vplyv obsahu testovanej látky na nosný čas plávania, sérovú močovinu a zásoby glykogénu v pečeni myší

Čas plávania s nosnosťou myší v skupinách so strednou a vysokou dávkou bol dlhší ako v kontrolnej skupine a rozdiel bol štatisticky významný (P<0.05). the="" serum="" urea="" of="" mice="" in="" the="" high-dose="" group="" was="" lower="" than="" that="" in="" the="" control="" group="" (p=""><0.05). the="" liver="" glycogen="" reserves="" of="" mice="" in="" each="" dose="" group="" were="" compared="" with="" those="" in="" the="" control="" group,="" and="" the="" difference="" was="" not="" statistically="" significant="" (p="">0.05)

cistanche

3 Diskusia

Po pôsobení ionizujúceho žiarenia na telo môže pôsobiť priamo na DNA, bielkoviny a enzýmy, čo spôsobuje ionizáciu a rozbitie chemických väzieb, denaturáciu molekúl a zničenie bunkovej štruktúry; môže tiež pôsobiť na molekuly vody v tele, ionizovať a excitovať molekuly vody, čo vedie k veľkému množstvu voľných radikálov so silnými oxidačnými vlastnosťami nepriamo spôsobujú degeneráciu buniek tkaniva a nekrózu, spôsobujú metabolické poruchy a spôsobujú regulačné dysfunkcie v imunitnom systéme, nervový a endokrinný systém_4J. Celkový počet bielych krviniek v periférnej krvi, počet jadrových buniek v kostnej dreni, mikronukleárna rýchlosť polychromatických erytrocytov kostnej drene myši, aktivita superoxiddismutázy (SoD) v krvi a sérový hemolyzín sú všetky citlivé indikátory, ktoré odrážajú radiačné poškodenie tela. Výsledky tejto štúdie ukázali, že po ožiarení celého tela myší určitou dávkou 7-lúčov sa výrazne zvýšila miera mikrojadra polychromatických erytrocytov kostnej drene v kontrolnej skupine myší s modelom žiarenia, periférna krv biela počet krviniek, jadrové bunky kostnej drene, aktivita SOD a hemolýza v sére V testovanej skupine bol u myší testovanej skupiny počet bielych krviniek v periférnej krvi, počet buniek s jadrom v kostnej dreni a aktivita superoxiddismutázy (SOD) v sére. výrazne vyššie ako v kontrolnej skupine s modelom žiarenia; miera mikronukleu buniek kostnej drene bola významne nižšia ako v kontrolnej skupine; ukazuje, že testovaná mäkká kapsula má určitý účinok proti poškodeniu radiáciou. Tentokrát sa pozorovalo, že sérový hemolyzín v skupine s testovanou látkou mal tendenciu stúpať, ale nebol tam žiadny významný rozdiel v porovnaní s kontrolnou skupinou s modelom žiarenia. Je možné, že skúšobná vzorka nebola podávaná dostatočne dlho. V experimentálnej štúdii zameranej na boj proti únave bol čas plávania v testovacej skupine myší so záťažou výrazne dlhší ako v prípade fotoskupiny v stĺpci a hladina močoviny v sére a plocha pod krivkou kyseliny mliečnej v krvi u myší po cvičení boli významne nižšie ako v kontrolnej skupine, čo naznačuje, že testované mäkké kapsuly majú účinky proti únave.

13-

Mäkké kapsuly sCistanche, Acanthopanax senticosus a extrakt z jujuby ako hlavné zložky majú významné antiradiačné poškodenie a zmierňujú fyzickú únavu. Je to najmä preto, že obsahujú celý rad účinných látok, z ktorých každá zohráva inú úlohu. Hlavné účinné látky zCistanchecistancheglykozidy,echinakozidy, cimicifuga glykozidy, cistanche polysacharidy, D-manitol a tak ďalej. Experimenty ukazujú, že l1.5.6], celkové glykozidy zcistanchemajú silný ochranný účinok na funkciu T lymfocytov u myší poranených ožiarením. Glykozidy posilňujú funkciu osi hypotalamus-hypofýza-nadobličky, podporujú uvoľňovanie príbuzných hormónov v tele a pomáhajú zlepšovať telesné funkcie. Cistanchecistanchepolysacharidy hrajú významnú úlohu pri podpore rastu imunitných orgánov, fagocytárnej schopnosti fagocytového systému a humorálnych a bunkových imunitných funkcií.Polysacharid Cistanchea D-manitol majú účinky na oddialenie starnutia, aktiváciu superoxiddismutázy a zníženie akumulácie lipofuscínu v tele.Cistanchemôže upraviť ultraštruktúru pečeňových buniek, podporovať syntézu bielkovín a antagonizovať rozklad bielkovín spôsobený záťažovým cvičením, takže dusík močoviny v sére je výrazne znížený. Hlavnými zložkami Acanthopanax senticosus sú glykozidy, polysacharidy a oligosacharidy, stopové prvky a aminokyseliny. Štúdie potvrdili, že _2J, Acanthopanaxsenticosuspolysacharidy a glykozidy môžu významne zlepšiť schopnosť buniek indukovať interferón a sú ideálnymi zosilňovačmi imunity. Môžu podporovať funkcie T buniek, B buniek, NK buniek a makrofágov. Môže tiež podporovať produkciu interleukínu, interferónu, faktora nekrózy nádorov a iných cytokínov. Mechanizmus proti únave Acanthopanax senticosus môže spočívať v stimulácii sekrécie určitých hormónov, zvýšení schopnosti tela absorbovať kyslík počas cvičenia a zmene účinku zásobovania tela energiou. Energetický metabolizmus sa mení zo svalového glykogénu na tuk, čím sa šetrí svalový glykogén a účinne sa odďaľuje únava z cvičenia Produkovať _8J. Jujube obsahuje kyseliny, glykozidy, alkaloidy, flavonoidy, bielkoviny, aminokyseliny, vitamíny atď. Štúdie ukázali, že polysacharid z jujuby má zjavnú antikomplementovú aktivitu, môže podporovať proliferáciu buniek myšacej sleziny, môže podporovať spontánnu proliferáciu buniek sleziny myší a reakciu zmiešanej kultúry lymfocytov a predpokladá sa, že má vplyv na neaktivované bunky myšacej sleziny. Podporovať šírenie; Surové polysacharidy z jujuby, neutrálne polysacharidy, kyslé polysacharidy, všetky podporujú proliferáciu lymfocytov, môžu výrazne zlepšiť fagocytárnu funkciu buniek brušnej dutiny myší, podporujú hemolyzín a hemolytické plaky, podporujú transformáciu lymfocytov a zvyšujú rozpad lymfocytov periférnej krvi. Polysacharid z jujuby má účinok vychytávania voľných radikálov, má teda účinok proti peroxidácii lipidov.

Výsledky tejto štúdie ukazujú, že vedecké spracovanie Cistanche, Acanthopanaxsenticosusa jujuba v mäkkých kapsulách má dobrý účinok na zmiernenie fyzickej únavy, zvýšenie odolnosti tela a prevenciu alebo zníženie poškodenia ľudského zdravia ožiarením. Tento článok poskytuje vedecký základ pre výskum a vývoj prírodných zdravých potravín, ktoré môžu zmierniť fyzickú únavu a chrániť pred poškodením žiarením.

cistanche

Referencie:

[1] Li Qingdao, Yang Laixiu. Pokrok vo výskume farmakologických účinkov Cistanche [J]. Tradičná čínska medicína Vnútorné Mongolsko, 2001, 4:35.

[2] Wang Zhirui, Lin Jingming, Zhang Zhongyi atď. Pokrok vo výskume chemických zložiek a farmakológie Acanthopanax senticosus [J]. Chinese Medicinal Materials, 2003, 26(8): 603-605.

[3] Miao Mingsan, Sun Limin. Moderný výskum jujuby [J]. Henan Tradičná čínska medicína, 2O03, 26(3): 59-60.

[4] Zhang Chunsheng, Peng Shanzhuo. Úloha antioxidantov v ochrane pred žiarením [J]. Chinese Journal of Industrial Medicine, 2003, 16: 222-224.

[5] Chen Shaoshu, He Shenghu, Cao Xiaozhen atď. Gansu Animal Husbandry and Veterinary Medicine, 2005, 3 (celkovo 182): 41-43.

[6] Liu Fuxiang, Xu Min, Wang Jian atď. Farmakologický výskum a perspektívaCistanche[J]. Anhui Agricultural Science Bulletin, 2006, 12 (13): 92~93.

[7] Yang Chunhua, Liu Gang, Zhang Chongxi atď. Pokrok vo výskume Acanthopanax senticosus. Ginseng Research, 2004, 1: 17-20.

[8] Pan Xiang, Xu Feng. Pokrok experimentálneho výskumu protiúnavovej funkcie Acanthopanax senticosus [J]. Laboratory Animal Science and Management, 2005, 22(2): 39-41.

[9] Ministry of Health "Technical Specifications for Health Food Inspection and Evaluation>Es]. (vydanie 2O03)



Tiež sa vám môže páčiť