Skúmanie mechanizmu účinku celkových glykozidov Cistanche na zápalové ochorenie čriev na základe sieťovej farmakológie a experimentov na zvieratách Ⅲ

3 Výsledky a analýza

3.1 Analýza cieľových celkových glykozidov Cistanche tubulosa a cieľových chorôb

Importujte súbory trojrozmernej štruktúry zaktívne zložkydo databázy PharmMapper, aby ste získali zodpovedajúce cieľové body zodpovedajúce rôznym zložkám. Databáza UniProt bola použitá na získanie informácií o názve proteínu a názve génu zodpovedajúcich každému cieľu. Kombináciou cieľových bodov zodpovedajúcich siedmim komponentom sa získalo celkom 354 cieľov. V databáze GeneCards sa hľadali relevantné gény pomocou kľúčového slova „zápalové ochorenie čriev“ a výsledky vyhľadávania sa triedili a nakoniec sa získalo 7851 cieľov. Pomocou udalostí nakreslite Vennov diagram online, aby ste získali priesečník cieľov aktívnej zložky Cistanche tubulosa a cieľových bodov IBD. Ako je znázornené na obrázku 1, 254 cieľových hodnôt aktívnej zložkyCistanche tubulosaktoré majú ochranný účinok na IBD.

Obr.2 PPI-sieťový diagram spoločných cieľov

Obr.5 Sieť komponent-cieľ-cesta

Obr. 7 Celkové glykozidy Cistanche tubulosa downregulujú mRNA signálnych dráh TGF- a mTOR u myší s IBD

3.4 Celkové glykozidy Cistanche tubulosa zlepšujú skóre DAI indukované DSS

Výsledky testov ukázali, že okrem CZ skupiny mali ostatné tri skupiny rôzny stupeň úbytku hmotnosti a skrytú krv vo výkaloch (obrázok 6). Spomedzi nich mala kontrolná skupina DSS najvyššiu mieru straty telesnej hmotnosti, najzávažnejšiu krv v stolici, najvyšší DAI a zjavné krvácanie do stolice na 6. deň. Po intervencii celkových glykozidov Cistanche tubulosa sa skóre DAI postupne znižovalo a situácia okultnej krvi sa postupne znižovala. Skupina HZ mala najnižšiu mieru straty telesnej hmotnosti a najnižšie množstvo skrytej krvi vo výkaloch. Výsledky ukázali, že celkové glykozidy Cistanche tubulosa zlepšili fyziologické reakcie spôsobené zápalovým ochorením čriev.

CISTANCHE DOPLNOK NA LIEČBU IBD PHGS75% ECH 30% ACT 12%

3.5 Celkové glykozidy Cistanche tubulosa znižujú IBD

Expresia signálnych dráh mTOR a TGF v myšacej slezine Signálne dráhy mTOR a TGF sú dve dôležité signálne dráhy, ktoré aktivujú zápalové reakcie. Expresia mTOR a TGF- v tkanive sleziny myší bola detegovaná pomocou qRT-PCR. Výsledky ukázali, že expresia mRNA mTOR a TGF- u myší v kontrolnej skupine DSS bola významne zvýšená v porovnaní s expresiou u normálnych myší. V porovnaní s kontrolnými myšami DSS, v porovnaní s Cistanche tubulosa, bola expresia mTOR a TGF- u myší významne znížená po intervencii Cistanche tubulosa. Spomedzi nich mala skupina s vysokou dávkou najvýznamnejší pokles a hladina expresie bola v zásade konzistentná s hladinou normálnej skupiny (obrázok 7). Výsledky ukázali, že celkové glykozidy Cistanche tubulosa down-regulovali expresiu signálnych dráh mTOR a TGF.

Obr. 8 Tepelná mapa funkčného zoskupenia hojnosti PICRUST2-

3.6 Analýza funkčnej anotácie PICRUST2

PICRUST2 je bioinformatický nástroj na predpovedanie metagenomickej funkcie na základe informácií o biologickej 16S rRNA, strome ASV a géne ASV v databáze Greengene. Výber databázy COG sa použil na funkčnú predikciu a výsledky ukázali, že funkcie črevnej flóry zahŕňajú hlavne spracovanie RNA; štruktúra a dynamika chromatínu; kontrola bunkového cyklu, delenie buniek, segmentácia chromozómov; obranný mechanizmus; signalizačná biogenéza bunkovej steny/bunkovej membrány/obalu; bunky Má viac ako 20 funkcií, ako je extracelulárna štruktúra; intracelulárny transport, sekrécia a transport vezikúl; výroba a premena energie; transport sacharidov a metabolizmus. Vyberte 15 najrozšírenejších funkcií a informácie o ich hojnosti v každej vzorkePre informácie je nakreslená tepelná mapa (obrázok 8) a zoskupená z rôznych funkčných úrovní.

V porovnaní so skupinou CZ mali myši kontrolnej skupiny DZ COG1132 (viacliekový transportný systém typu ABC), COG0745 (regulátor odozvy na väzbu DNA), COG1131 (systém transportu viacerých liekov typu ABC), COG1961 (miesto špecifická DNA rekombináza súvisiaca s DNA invertáza Pin), COG0438 (zahrnutá glykozyltransferáza).v biosyntéze bunkovej steny), COG0534 (riadený Na +-).multidrogová efluxná pumpa), COG0642 (signálna transdukčná histidínkináza), COG1595 (špecializovaná sigma podjednotka RNA polymerázy riadenej DNA), COG0463 (endonukleáza), COG4974 (miestne špecifická rekombináza XerD), COG2207 (väzbová doména DNA typu AraC a AraC obsahujúci proteíny), COG1136 (systém exportu lipoproteínov typu ABCa COG1309 (regulátor transkripcie viažuci DNA) funkčné abnormality génovej expresie. Tieto gény sa podieľajú najmä na: V: obrannom mechanizme; T: mechanizmus prenosu signálu; M: biogenéza bunkovej steny/bunkovej membrány/obalu; I: transport lipidov a metabolizmus; K: transkripcia; L: replikácia, rekombinácia a oprava.

Potom, čo sa týmto šiestim funkciám podali celkové glykozidy Cistanche tubulosa, expresia týchto rôznych fyziologických funkcií bola blízka expresii normálnej skupiny. V porovnaní s myšami v skupinách CZ a DZ mali myši v skupine HZ vysokú expresiu génov COG1028 (rodina alkoholdehydrogenázy s krátkym reťazcom) a COG0451 (nukleozid-fosfát-cukrová epimeráza). Tieto dva gény súvisia s I: transport lipidov a metabolizmus. A M: Funkcie biogenézy bunkovej steny/bunkovej membrány/obalu spolu úzko súvisia. Preto sa špekuluje, že celkové glykozidy Cistanche tubulosa môžu regulovať poškodenie IBD myší reguláciou metabolizmu lipidov, metabolizmu glukózy a súvisiacich mechanizmov prenosu obranného signálu u myší.