Identifikácia biomarkerov dysfunkcie Meibomovej žľazy v kohorte pacientov postihnutých DM typu II časť Ⅰ

Abstrakt:

(1) Východiská: Dysfunkcia Meibomovej žľazy (MGD) u pacientov s diabetes mellitus (DM) je častým prejavom syndrómu suchého oka (DES).

(2) Metódy: Účelom tejto štúdie je identifikovať klinické parametre a biomarkery užitočné na zlepšenie sledovania a liečby týchto pacientov. Použili sme dotazník indexu ochorenia očného povrchu (OSDI), Schirmerov test I/II, čas rozpadu slzného filmu (TF-BUT), farbenie fluoresceínom plus lissamínovou zelenou, Marxovu líniu (ML) a morfológiu Meibomovej žľazy (MGs). pomocou Sirius® Topographer (CSO, Costruzione Strumenti Oftalmici, Florencia, Taliansko). Analýza vzoriek krvi zahŕňala glukózu, glykovaný hemoglobín, lipidový profil, kortizol, dehydroepiandrosterón sulfát (DHEA-S), androstendión (ASD) a testosterón.

(3) Výsledky: Kortizol a ASD pozitívne korelovali so zvýšením tortuozity MG a zvýšená hladina triglyceridov bola spojená so znížením dĺžky MG. Hladiny DHEAS sa s vekom znižovali a súviseli so zafarbením povrchu oka.

(4) Závery: Budúce štúdie, možno vrátane analýzy lipidov meibum a hladín cytokínov sĺz, môžu tiež ďalej objasniť spojenie medzi týmito parametrami, architektúrou MG a funkciou.

Kliknite pre testosterón cistanche deserticola vs tubulosa

Kľúčové slová: dysfunkcia meibomskej žľazy; cukrovka; hormóny; biomarkery

1. Úvod

Meibomské žľazy (MG) sú modifikované mazové žľazy v hornej a dolnej tarzálnej platni a sú distribuované vertikálne k okraju očného viečka. MG sú hojnejšie v horných viečkach a sú dlhšie, ukladajú dvojnásobný počet lipidov v porovnaní s MG dolných viečok [1]. Lipid vylučovaný MG sa nazýva meibum, ktorý sa uvoľňuje z ich viditeľných otvorov tesne za mukokutánnym spojením pozdĺž okraja očného viečka. Meibum hrá kľúčovú úlohu v stabilite slzného filmu, znižuje odparovanie vodnej vrstvy a chráni povrch oka ako hydrofóbna bariéra [1].

Poškodenie MG vedie k dysfunkcii meibomických žliaz (MGD), chronickému zápalu, ktorý vedie k oklúzii terminálnych kanálikov a modifikovanej sekrécii lipidov. MGD je najčastejšou príčinou syndrómu evaporatívneho suchého oka (DES). Pacienti často trpia dlhotrvajúcou suchosťou, pálením a pocitom cudzieho telesa a môžu mať zníženú kvalitu života [2]. Početné štúdie naznačili súvislosť medzi MGD a systémovými faktormi, akými sú deficit androgénov [3], hyperlipidémia [4] a diabetes mellitus (DM) [5]. Nedávno sa zistilo, že DM je významným rizikovým faktorom pre rozvoj MGD [4].

Súvislosť medzi DM a rizikom rozvoja DES podporuje aj nedávna metaanalýza, ktorá zohľadnila viac ako 2,5 milióna pacientov z celkovo 17 štúdií [6]. Táto asociácia má patogenetické opodstatnenie vzhľadom na to, že MG je modifikovaná mazová žľaza a že štruktúra a funkcia mazových žliaz sú u diabetických jedincov zmenené [4,5]. Predpokladalo sa, že zmenená produkcia/reakcia inzulínu a hyperglykémia sú kľúčovými prvkami v patogenéze MGD u diabetických subjektov. Inzulín je základom pre správny metabolizmus mazových žliaz; nedostatok inzulínu by podporil dysfunkciu [5].

Okrem toho je hyperglykémia stimulom pre lipolýzu v adipocytoch a táto odpoveď v MG môže znížiť kvalitu meibum [7]. Tieto patogenetické mechanizmy sú podporené nedávnymi dôkazmi, ktoré ukazujú, že inzulín môže stimulovať proliferáciu imortalizovaných ľudských epiteliálnych buniek meibomických žliaz (HMGEC), pričom sa zistilo, že vysoká hladina glukózy je toxická pre HMGEC [5]. Po MGD a súvisiacej strate sĺz odparovaním nasleduje nárast zápalu na povrchu oka s rastom bakteriálnych populácií podporovaných abnormálnymi lipidmi ako substrátmi [8]. Nedávno sa tiež zistilo, že chronický zápalový stav u pacientov s MGD súvisí s vysokými koncentráciami zápalových cytokínov v slznom filme [9,10]. V našej štúdii sa zaoberáme sérovými markermi a vývojom MGD u pacientov s DM.

2. Materiál a metódy

Táto prierezová štúdia zahŕňala pacientov s DM typu II a symptómami MGD, ktorí navštevovali Očné oddelenie v nemocnici A. Fiorini v Terracine (Latina, Taliansko) v posledných šiestich mesiacoch. Štúdia bola vykonaná v súlade so zásadami Helsinskej deklarácie, Medzinárodnej konferencie o harmonizácii a odporúčaní správnej klinickej praxe. Informovaný súhlas bol získaný od všetkých subjektov pred začiatkom štúdie. Kritériá zaradenia boli pacienti postihnutí DM typu II so symptómami MGD. Kritériá vylúčenia zahŕňali: nedávne očné infekcie, sezónne alergie, akákoľvek anamnéza očnej chirurgie, používanie akýchkoľvek liekov alebo očných kvapiek, o ktorých je známe, že ovplyvňujú povrch oka, súčasný alebo predchádzajúci nositeľ kontaktných šošoviek, tehotná na základe vlastného hlásenia, ochorenie štítnej žľazy, autoimunitné ochorenie , užívanie antikoncepcie, fajčiarky a antiandrogénna a menopauzálna hormonálna substitučná liečba.

Všetci jedinci boli požiadaní, aby vyplnili Index očných povrchových chorôb (OSDI) Allergan, Inc., Irvine, CA, USA. Dotazník [11]. Stručne povedané, pacienti označujú intenzitu svojich symptómov na škále 0–4 (0: žiadny čas, 1: občas, 2: polovica času, 3: väčšinou času, 4: stále). Konečné skóre sa meralo a pohybovalo sa od 0 do 1{10}}0 (skóre 0–12: normálne, 13–22: mierne ochorenie suchých očí, 23–32: stredne závažné ochorenie suchých očí, vyššie ako 33 : závažné ochorenie suchého oka). Uskutočnilo sa biomikroskopické vyšetrenie predného segmentu a okraj očného viečka sa analyzoval na prítomnosť telangiektázie, abnormality okraja viečka, okludované otvory MG a predný/zadný posun mukokutánneho spojenia. Ten bol hodnotený podľa Yamaguchi et al. [12]. Skóre Marxovej čiary (ML) je uvedené v tabuľke 1.

Čas rozpadu slzného filmu (TFBUT) bol stanovený nasledovne: subjekty boli požiadané, aby žmurkli 3 až 4-krát po instilácii fluoresceínu do dolného fornixu. TFBUT bolo hodnotené podľa času medzi posledným žmurknutím a objavením sa prvej čiernej škvrny; boli zaznamenané výsledky troch meraní. [13] Farbenie povrchu oka pomocou lissamínovej zelene sa použilo na určenie skóre Van Bijstervelda (vBS): povrch oka je rozdelený na tri oblasti; nazálna bulbárna spojovka, temporálna bulbárna spojovka a rohovka. Každá oblasť sa hodnotí na stupnici od 0 do 3, pričom 0 označuje žiadne zafarbenie a 3 označuje súvislé zafarbenie; maximálne dosiahnuteľné skóre s týmto systémom je 9 [13].

Schirmerov test hodnotí tvorbu vodných sĺz a vykonáva sa pomocou sterilných papierových prúžkov aplikovaných na dolno-temporálnu stranu spojovkového vaku oboch očí. Navlhčená dĺžka v milimetroch sa meria po 5 minútach. Existujú dve verzie testu: bez lokálnej anestézie na posúdenie celkovej sekrécie sĺz, ktorá je súčtom reflexného a bazálneho prietoku sĺz (Schirmerov test I), a s topickou anestézou na kvantifikáciu bazálnej sekrécie sĺz (Schirmerov test II) [14 ]. Do výsledkov boli zahrnuté iba údaje z toho istého oka, kde bola vykonaná meibografia. Meibografia bola vykonaná na jednom náhodne vybranom oku každého subjektu pomocou prístroja Sirius® Topographer (CSO, Costruzione Strumenti Oftalmici, Florencia, Taliansko) [15].

Only upper eyelids were analyzed. Three images for each eye were recorded. The device determines the dropout area semi-automatically by percentage and assesses meiboscore as follows: grade 0, no loss at all; grade 11 4, ≤25%; grade 2, 26–50%; grade 3, 51–75%; and grade 4, >75 percent (obrázok 1).

2.1. Analýza obrazu

Na analýzu dĺžky, šírky a plochy MG sa vybrali tri najlepšie zaostrené reprezentatívne obrázky jedného náhodného oka s dobrým jasom a kontrastom obrazu. Dvaja maskovaní pozorovatelia (AF a FA) vykonali mamografickú analýzu obrazu. Stručne, dĺžka MG bola kvantifikovaná pomocou Neuron, doplnku ImageJ (http://www.imagescience.org/Beijing/software, (prístup 10. októbra 2022)), ktorý sa predtým používal na poloautomatické sledovanie rohovkového nervu [16]. ale môže byť tiež užitočný na kvantifikáciu dĺžky a šírky MG (obrázok 2).

Hlavné MG boli definované ako celkový počet MG na jednom obrázku; Dĺžky MG boli MG dĺžka/plocha snímky prevedené na mm/mm2. Šírka MG sa vypočítala v hornej, strednej a dolnej časti každej žľazy a uviedla sa ako šírka MG/plocha rámu prevedená na mm/mm2. Celkový počet MG a dĺžka a šírka MG sa vypočítali súčtom hlavných MG, dĺžky a šírky. Oblasť MG bola analyzovaná pomocou predchádzajúcej uvedenej metódy [15,17], ale na rozdiel od tejto metódy sme nastavili vonkajší obraz na bielu a vnútorný na čiernu, aby sme vytvorili binárnu základnú masku pravdy. Okolo žliaz bol vytvorený a uložený polygónový okraj. Hodnota bola uvedená ako plocha v mm2 (obrázok 3).

Nalačno sa odobrala vzorka krvi na analýzu hladín glukózy, glykovaného hemoglobínu (HbA1c) triglyceridov, celkového cholesterolu, HDL (lipoproteínu s vysokou hustotou) cholesterolu, LDL (lipoproteínu s nízkou hustotou), dehydroepiandrosterón sulfátu (DHEA-S), androstendiónu (ASD) , hladina kortizolu a testosterónu.

2.2. Štatistická analýza

Spojité premenné boli vyjadrené ako priemer ± štandardná chyba priemeru. Pokiaľ ide o Kolmogorov-Smirnovov test a Shapiro-Wilkov test, naše údaje boli približne normálne rozdelené. p-hodnoty boli vyššie ako 0.05 pre všetky premenné okrem hladiny testosterónu. Spearmanova korelácia sa uskutočnila na meranie intenzity a smeru asociácie medzi dvoma premennými. Na porovnanie viacerých vzoriek bol použitý jednosmerný test ANOVA. Lineárna regresná analýza sa uskutočnila na analýzu biomarkerov podľa premenných MG získaných pomocou meibografie. Na identifikáciu najdôležitejšej premennej spojenej s MGD sa uskutočnila regresná analýza pomocou metódy párového výberu. Vnútrotriedny korelačný koeficient (ICC) bol vypočítaný medzi dvoma maskovanými pozorovateľmi pre dĺžku, šírku a plochu MG. Štatistická analýza sa uskutočnila pomocou SPSS verzie 22 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA) a p-hodnota menšia ako 0,05 sa považovala za významnú.

Mechanizmus Cistanche zvyšuje účinok testosterónu

Zistilo sa, že Cistanche zvyšuje hladinu testosterónu niekoľkými spôsobmi. Po prvé, obsahuje zlúčeniny známe ako echinakozid a akteozid, u ktorých bolo preukázané, že zvyšujú produkciu luteinizačného hormónu (LH) v hypofýze. LH stimuluje Leydigove bunky v semenníkoch k produkcii testosterónu. Cistanche tiež obsahuje polysacharidy a fenyletanoidové glykozidy, u ktorých sa preukázalo, že majú antioxidačné a protizápalové vlastnosti. To môže pomôcť znížiť oxidačný stres a zápal v semenníkoch, čo môže narušiť produkciu testosterónu. Okrem toho sa zistilo, že Cistanche zvyšuje expresiu génov zapojených do syntézy testosterónu a znižuje aktivitu enzýmov, ktoré testosterón rozkladajú, ako napríklad {{1} }alfa-reduktázy. Celkovo sa predpokladá, že kombinácia týchto mechanizmov prispieva k účinkom Cistanche na zvýšenie testosterónu.

Pokračovanie nabudúce...

Alessandro Abbouda 1,* , Antonio Florido 1,2 , Filippo Avogaro 1,2 , John Bladen 3 a Enzo Maria Vingolo 1,2

1 Oftalmologické oddelenie, Nemocnica Alfreda Fioriniho, 04019 Terracina, Taliansko

2 Katedra biotechnológie a medicínsko-chirurgických vied, Univerzita Sapienza v Ríme, 04100 Latina, Taliansko

3 Okuloplastické oddelenie King's College Hospital NHS Foundation Trust, Denmark Hill, Londýn SE5 9RS, Spojené kráľovstvo