Zápaly pri progresii rakoviny a protinádorovej imunite

Inflammasómy sú kritickými regulátormi vrodenej imunity, zápalu a bunkovej smrti a ukázali sa ako dôležité regulátory rozvoja a kontroly rakoviny. Inflammasómy sú zostavené receptormi rozpoznávania vzorov (PRR) po snímaní mikrobiálnych alebo s nebezpečenstvom spojených molekulárnych vzorov (MAMP / DAMP) a vyvolávajú zápal prostredníctvom oligomerizácie a aktivácie zápalových kaspáz. Tieto cysteinyl-aspartátové proteázy štiepia prozápalové cytokíny IL-1 a IL-18 na ich biologicky aktívnu zrelú formu. Úloha zápalov a súvisiacich prozápalových cytokínov sa značne líši v závislosti od typu rakoviny. Tu diskutujeme o nedávnych štúdiách zdôrazňujúcich kontrastné úlohy inflammasómovej dráhy pri potláčaní verzus podporovaní tumorigenézy. Na jednej strane sa zápaly podieľajú na stimulácii protinádorovej imunity, ale tiež sa ukázalo, že prispievajú k imunosupresii alebo priamo podporujú prežitie, proliferáciu a metastázy nádorových buniek. Lepšie pochopenie inflammasómových funkcií pri rôznych rakovinách je preto rozhodujúce pre návrh nových imunoterapií rakoviny.

Výhody cistanche tubulosa-Protinádorové

Kľúčové slová: Inflammasóm, kaspáza, pyroptóza, nádor, imunoterapia, makrofágy, imunosupresia, metastázy

cistanche výhody pre mužov - posilnenie imunitného systému

ÚVOD

Cancer development is a complex process that integrates tumor cell-intrinsic and -extrinsic signals that favor cellular transformation, unhinged growth, invasion, and metastasis. Among the hallmarks of cancer (Hanahan and Weinberg, 2011), inflammation and tumor escape from immune destruction exert determining roles. Indeed, cancer control is intricately linked to the potency of the immune response. The fundamental understanding of immune surveillance, immune editing (Dunn et al., 2002) (a process in which the immune 'pressure' shapes tumor immunogenicity), and immune escape has resulted in breakthroughs in cancer immunotherapies, such as immune checkpoint inhibitors (ICI) or chimeric antigen receptor (CAR)-T cell therapy, among others. Such therapies have revolutionized cancer treatment by significantly improving patient survival and quality of life. Notably, the eligibility of patients to ICI immunotherapy has increased from 1.5% in 2011 to 43.6% in 2018, and >V súčasnosti je schválených 29 imunoterapií. Napriek tomuto pôsobivému pokroku však klinická realita odhaľuje niekoľko nesplnených výziev: 1) relatívne nízky podiel pacientov vykazuje objektívne reakcie na tieto terapie ako samostatnú liečbu a u podskupiny pacientov sa rozvinie hyper-progresívne ochorenie, 2) účinnosť imunoterapie je často spojené so zápalovými toxicitami, ktoré si vyžadujú klinické zvládnutie alebo prerušenie liečby, 3) u podskupiny reagujúcich pacientov, ktorí dostávajú imunoterapiu, dôjde k relapsu a rozvinutiu agresívneho ochorenia; 4) účinnosť protirakovinových terapií, vrátane chemoterapie, ICI, adoptívnej T bunkovej terapie a iných imunoterapií vyžaduje signály z mikrobioty; 5) systémové a bunkové metabolizmus ovplyvňujú rakovinu a protinádorovú imunitu; a 6) imunitné reakcie podporujú klonálnu selekciu, transformáciu mikroprostredia nádoru (TME) a ​​vytvorenie premetastatickej niky. Heterogénna odpoveď pacientov odráža medzery vo vedomostiach, najmä v chápaní orgánovo špecifických nádorových makro- a mikroprostredí a interakcií medzi systémami, konkrétne systémom imunitného, ​​metabolického a mikrobiálneho systému pri kontrole rakoviny. Vrodený imunitný systém je našou prvou obrannou líniou, pretože rýchlo sníma signály „nebezpečenstva“ (Matzinger, 2002) prostredníctvom receptorov na rozpoznávanie vzorov (PRR), napr. receptory a poskytuje adjuvantné účinky na úplné zapojenie adaptívnej imunity. Čo sa týka protinádorovej imunity, PRR ligandy sa považujú za sľubnú cestu v imunoterapii rakoviny. Napríklad tri agonisty TLR, a to Bacillus Calmette-Guérin (BCG), monofosforyl lipid A (MPL) a imichimod sú schválené na použitie u pacientov s rakovinou a ďalšie ligandy PRR, predovšetkým mimetiká nukleových kyselín, sú v súčasnosti v klinickom skúšaní. Inflammasómy sú centrálnymi efektormi vrodenej imunity a ukázalo sa, že majú dôležité, aj keď kontrastné, úlohy pri tumorigenéze, protinádorovej imunite a reakcii na liečbu rakoviny. V tomto prehľade diskutujeme o nedávnej práci skúmajúcej inflammasómové funkcie pri rakovine a potenciál vývoja imunoterapií založených na zápaloch.

OBRÁZOK 1|Rôzne mechanizmy aktivácie zápalu. Aktivácia zápalového tkaniva kanonickou dráhou sa opiera o dva signály, prvý alebo primárny signál umožňujúci transkripciu zložiek zápalu a druhý alebo aktivačný signál spúšťajúci zostavenie komplexu. Receptory lešenia zápalu patria do rôznych rodín (NLR, ALR a PYRIN), z ktorých každá rozpoznáva rôzne MAMP alebo DAMP. Kaspáza-1 je ústredná pri katalyzovaní zápalových funkcií, pričom štiepi prozápalové cytokíny na ich bioaktívnu formu a gastrín D (GSDMD) na N-terminálnu doménu tvoriacu póry, ktorá vyvoláva pyroptózu. Nekanonická cesta je sprostredkovaná priamou väzbou LPS alebo fosfolipidov na kaspázu-4/-5 u ľudí alebo -11 u myší.

SNÍMKA ZÁPALOV: ŠTRUKTÚRA A AKTIVÁCIA

Inflammasómový termín nazval v roku 2002 Dr. Jürg Tschopp, ktorý ako prvý opísal zápal NLRP1 (Nod-like receptor s pyrinovou doménou) ako intracelulárny multiproteínový komplex, pozostávajúci zo senzora NLRP1 (Nodlike receptor s pyrinovou doménou), tzv. adaptér ASC (proteín podobný škvrnám spojený s apoptózou obsahujúci CARD) a obe zápalové kaspázy-1 a -5 (Martinon et al., 2002). Odvtedy bolo charakterizovaných viac ako dvanásť rôznych zápalov, menovite NLRP1, NLRP2, NLRP3, NLRP6, NLRP7, NLRP9, NLRP12, NLCR4/NAIP, AIM2, IFI16, CARD8 a PYRIN. Väčšina zápalových senzorov patrí do rodiny Nod-like receptorov (NLR), ktorá pozostáva z 22 členov u ľudí a 34 u myší (Ariffin a Sweet, 2013), pričom všetky majú centrálnu nukleotidovú väzbovú a oligomerizačnú doménu (NOD) a C -terminálna repetícia bohatá na leucín (LRR). Členovia rodiny NLR sú ďalej klasifikovaní do štyroch podrodín podľa povahy ich N-terminálnej domény, aktivačnej domény (NLRA), domény repetície (BIR) bakulovírusového inhibítora proteínu apoptózy (IAP) (NLRB), aktivácie a náboru kaspázy. doména (CARD) doména (NLRC) alebo pyrínová doména (NLRP). Okrem NLRA sa uvádza, že členovia iných podrodín NLR zostavujú zápaly (obrázok 1). Zatiaľ čo predpokladané mikrobiálne alebo hostiteľské ligandy boli identifikované pre niektoré zápaly, zostávajú nepolapiteľné pre zvyšok. Príklady známych zápalových ligandov zahŕňajú cytoplazmatického hostiteľa alebo patogénu (bakteriálneho alebo vírusového) dvojvláknovú DNA, ktorá aktivuje neprítomný melanóm (AIM)2 (Bürckstümmer a kol., 2009; Fernandes-Alnemri a kol., 2009; Hornung a kol., 2009), jadrová vírusová DNA, ktorá spúšťa receptory podobné AIM (ALR), IFN-indukovateľný faktor IFI204 u myší a IFI16 u ľudí (Kerur et al., 2011) a intracelulárne bakteriálne proteíny, konkrétne bičík a zložky bakteriálny sekrečný systém typu III, ako sú ihličkové a vnútorné tyčinkové proteíny, ktoré zapájajú zápaly NAIP/NLRC4 (Lightfield a kol., 2008; Zhao a kol., 2011; Rayamajhi a kol., 2013; Yang a kol., 2013; Reyes Ruiz a kol., 2017; Tenthorey a kol., 2017). Na druhej strane, ligandy zápalov NLRP zostávajú nepolapiteľné. Napríklad NLRP1 je aktivovaný po jeho „funkčnej degradácii“ závislej od proteozómu, ktorá uvoľňuje jeho C-terminálnu CARD, aby interagovala s kaspázou-1 a vytvorila zápal. Takáto funkčná degradácia je vyvolaná efektormi patogénov, ako je letálny faktor Bacillus anthracis (LF) (Klimpel a kol., 1994; Fink a kol., 2008), proteázová zložka letálneho toxínu alebo Shigella flexneri E3 ubikvitín ligáza IpaH7.8 (Sandstrom et al., 2019), a preto poukazuje na NLRP1 ako senzor vlastnej stability v reakcii na aktivitu patogénu. Deplécia ATP vyvolaná infekciou Toxoplasma gondii alebo Listeria monocytogenes tiež aktivuje zápal NLRP1 (Liao a Mogridge, 2013; Neiman Zenevich et al., 2017). Nedávno Bauernfried a kol. demonštrovali ešte ďalší aktivátor ľudského, ale nie myšacieho NLRP1, konkrétne vírusovú dsRNA, bonafidový ligand, ktorý sa viaže na repetície bohaté na leucín (LRR) NLRP1 (Bauernfried et al., 2021).

Čínska bylina cistanche rastlina-Protinádorová

Pokiaľ ide o NLRP1, zápal Pyrinu cíti „zmenu“ indukovanú infekciou, konkrétne inaktiváciu malých GTPáz rodiny Rho bakteriálnymi toxínmi modifikujúcimi Rho (Xu et al., 2014). Napokon, ligandy zodpovedné za priamu aktiváciu NLRP3 zostávajú neznáme. NLRP3 je aktivovaný širokou škálou MAMP a DAMP, vrátane pevných častíc, kryštálov cholesterolu, bunkových metabolitov, poškodenia lyzozómov, defektnej mitofágie a iónových porúch, ako je eflux K+ a influx Ca{6}}. Aktivácia NLRP3 tiež vyžaduje niekoľko posttranslačných modifikácií, tj ubikvitináciu, fosforyláciu a sumoyláciu a väzbu kinázy 7 súvisiacej s NIMA (NEK7) na jej LRR (prehľad v (Swanson et al., 2019)). Aktivácia nekanonického zápalu NLRP3 sa spúšťa priamou väzbou cytosolického lipopolysacharidu (LPS) na kaspázu-11 u myší alebo kaspázu-4/-5 u ľudí (Shi et al., 2014 ). Oxidovaný fosfolipid (oxPAPC) sa viaže na kaspázu{19}} a vyvoláva aktiváciu zápalu v dendritických bunkách (Zanoni et al., 2016), ale súťaží s väzbou LPS a inhibuje nekanonickú aktiváciu zápalu v makrofágoch, ktoré poskytujú ochranu proti gramnegatívnej bakteriálnej sepse (Chu a kol., 2018). Posledné, aj keď menej dobre študované, mechanizmy aktivácie iných zápalov NLRP, konkrétne NLRP2 (Zhang a kol., 2020), NLRP6 (Shen a kol., 2021), NLRP7 (Radian a kol., 2015), NLRP9 (preskúmané v (Mullins a Chen, 2021)) a NLRP12 (preskúmané v (Tuladhar a Kanneganti, 2020)). Zostavenie zápalu vedie k multioligomerizácii zápalového senzora, adaptéra ASC a proformy kaspázy-1 a/alebo −11/−4/−5 do perinukleárneho agregátu známeho ako „škvrna“ ASC s prionoidné znaky (Franklin et al., 2014). Aktivácia kaspázy podporuje uvoľňovanie bioaktívneho IL-1 a IL-18 a v niektorých prípadoch zápalovú bunkovú smrť nazývanú pyroptóza prostredníctvom štiepenia gastrínu-D na N-terminálnu doménu, ktorá vytvára póry v plazmatická membrána vedúca k osmotickej lýze [prehľad v (Broz et al., 2020)]. Inflammasómy sú najlepšie známe pre svoju funkciu pri obrane hostiteľa proti patogénom. Avšak aberantná aktivácia zápalu bola tiež spojená s rozvojom rakoviny. Úloha signalizácie zápalu pri rakovine sa líši podľa typu rakoviny, etiológie rakoviny a buniek aktivujúcich zápalovú dráhu v mikroprostredí nádoru. V tomto prehľade poskytujeme syntézu nedávnej literatúry skúmajúcej úlohu rôznych zápalov v progresii rakoviny alebo protinádorovej imunite. Diskutujeme o dôkazoch získaných z myších modelov in vivo, či už s použitím farmakologických inhibítorov alebo genetických modelov so stratou funkcie, ako aj dôkazov z kohort pacientov a klinických štúdií.

cistanche výhody pre mužov-posilnenie imunitného systému

PROTUMORÁLNE FUNKCIE ZÁPALOVEJ DRÁHY

Propagácia prežitia, šírenia a invázie rakovinových buniek primárne sprostredkovaná IL-1

Úloha zápalu zápalu pri podpore rakoviny je často sprostredkovaná IL-1, ktorý je produkovaný rôznymi bunkami v nádore vrátane makrofágov spojených s nádorom (TAM) a fibroblastov spojených s rakovinou (CAF). Skutočne, myeloidná alebo CAF špecifická delécia génov zapojených do aktivácie zápalu Nlrp3 vedie k zníženému rastu nádoru. Napríklad sa ukázalo, že sfingolipidový sfingozín-1-fosfátový (S1P) receptor aktivuje zápal Nlrp3 v TAM a myeloidná špecifická delécia S1pr redukovala IL-1 -poháňanú lymfangiogenézu a pľúcne metastázy v polyóme stredného T ( PyMT) myšací model rakoviny prsníka (Weichand et al., 2017). Použitím rovnakého modelu Ershaid a kol. ukázali, že CAF-špecifická genetická ablácia Nlrp3 alebo Il1b oneskorila rast nádoru a zoslabila pľúcne metastázy (Ershaid et al., 2019). Mechanicky IL-1 podporoval progresiu nádoru a metastázy riadením imunosupresívneho nádorového mikroprostredia (TME) a ​​indukciou expresie adhéznych molekúl na endotelových bunkách (Ershaid et al., 2019). Okrem toho sa ukázalo, že IL-1 sprostredkovaný zápalom Nlrp3 indukuje produkciu cytokínu podporujúceho rakovinu IL-22 pamäťovými CD4+ T bunkami. Toto sa preukázalo na modeloch rakoviny prsníka a pľúc, v ktorých neutralizácia signalizácie IL-1R pomocou anakinry zrušila produkciu IL-22 a znížila rast nádoru (Voigt et al., 2017). IL-1 produkovaný TAM alebo uvoľnený z rakovinových buniek môže tiež zvýšiť protumorogénnu aktivitu CAF, čo zdôrazňuje jeho úlohu hlavného orchestrátora tumorigenézy (Brunetto et al., 2019). Okrem účinkov na TME sa ukázalo, že autokrinná signalizácia IL-1 pôsobí ako priama hnacia sila proliferácie rakovinových buniek. Toto bolo demonštrované použitím dietylnitrozamínového (DEN) myšacieho modelu hepatocelulárneho karcinómu (HCC), v ktorom bol mitofágový efektor FUNDC1 špecificky deletovaný v hepatocytoch, čo viedlo k aberantnej aktivácii zápalu Nlrp3 a hyperproliferácii hepatocytov riadenej IL-1 - (Wenhui Li a kol., 2019). Toto bolo hlásené aj v myšacom modeli AML riadenej onkogénnou dráhou KrasG12D, ktorá aktivovala zápal Nlrp3 prostredníctvom Kras-RAC1-indukovanej produkcie ROS. Delécia Nlrp3 znížila abnormálnu myeloproliferatívnu a obnovila normálnu hematopoézu (Hamarsheh et al., 2020). Okrem indukcie proliferácie a prežitia rakovinových buniek môže IL-1 tiež podporovať ich migráciu a inváziu. V modeli kolorektálneho karcinómu (CRC) sa ukázalo, že IL odvodený od makrofágov-1 vyvoláva produkciu sérového amyloidu A1 (SAA1) nádorovými bunkami, čo vpred privádzalo makrofágy k vyššej regulácii metaloproteinázy{{45} } sekrécia umožňujúca migráciu rakoviny a vytvorenie metastáz (Sudo et al., 2021) (obrázok 2A). Zatiaľ čo väčšina dôkazov poukazuje na IL{48}} ako hlavnú hnaciu silu inflamasómových nádorových účinkov, nedávna štúdia Hofbauera a kol., ktorá študovala mnohopočetný myelóm na myšom modeli, opísala úlohu Nlrp{50 }}závislá IL-18 pri deštrukcii kostí a proliferácii mnohopočetného myelómu (Hofbauer et al., 2021). Nakoniec boli hlásené funkcie nezávislé od zápalu pri podpore nádoru. Qi a spol. ukázali, že zatiaľ čo stimulácia polydA: dT troch bunkových línií NSCLC aktivovala zápal AIM2, nemala vplyv na ich rast alebo prežitie. Na rozdiel od toho AIM2 podporoval rast nádoru NSCLC in vivo reguláciou dynamiky mitochondriálnej fúzie a aktiváciou ERK (Qi et al., 2020).

OBRÁZOK 2|Protumorálne funkcie inflammasómovej dráhy. (A) Inflammasóm, primárne NLRP3, podporuje prežitie, proliferáciu a inváziu nádorových buniek prostredníctvom IL-1. Boli tiež preukázané funkcie AIM2 nezávislé od zápalu, v ktorých AIM2 riadi mitochondriálnu dynamiku a aktivuje onkogénnu aktiváciu ERK prostredníctvom reaktívnych foriem kyslíka (ROS). (B) Inflammasóm môže podporovať tumorigenézu prostredníctvom indukcie chronického zápalového stavu. V čreve sa IL-18 aj IL{8}} zbiehajú s produkciou IL-22, ktorá poháňa hyperproliferáciu črevných epitelových buniek. Chronický zápalový stav je tiež vyvolaný produkciou IL{10}}, ktorá získava granulocyty na zosilnenie odpovede. V pečeni je poškodenie pečene spojené s aktiváciou zápalu AIM2 v Kupfferových bunkách aj v makrofágoch ascitickej tekutiny. IL-1 v tomto prípade podporuje hyperproliferáciu hepatocytov. V koži vedú mutácie zárodočnej línie v NLRP1 k chronickému zápalu a tumorigenéze. (C) Inflammasómy môžu nepriamo podporovať vývoj nádoru potlačením protinádorovej imunity. Ukázalo sa, že IL-1 zvyšuje nábor supresorových buniek odvodených od myeloidov (MDSC) do miesta nádoru a podporuje tolerogénnu diferenciáciu T buniek.

Podpora chronického zápalu, opravy tkaniva a fibrózy

V reakcii na poškodenie tkaniva vybrané zápalové cytokíny podporujú proces opravy. Keď je táto reakcia aberantná, ako v kontexte chronického zápalu, nadmerná oprava tkaniva môže viesť k neoplastickému rastu. Toto je najlepšie znázornené na CRC a HCC spojenom s kolitídou. My a iní sme už čoskoro ukázali, že produkcia IL-18 závislá od zápalu je potrebná na opravu črevného tkaniva u myších modelov kolitídy a že nadmerná signalizácia zápalu podporuje črevnú tumorigenézu [prehľad v (Saleh a Trinchieri, 2011)]. Huber a kol. neskôr ukázali, že IL-18 podporuje biologickú aktivitu IL-22, dôležitého reparatívneho cytokínu, inhibíciou produkcie proteínu viažuceho IL-22-(IL-22BP), a rozpustná forma IL-22 receptora a negatívny regulátor IL-22 (obrázok 2B). Knock-out Il22bp, ktorý viedol k zvýšenému pomeru IL- 22/IL-22BP, urýchlil tumorigenézu v CRC myšom modeli CRC spojenom s kolitídou dextránsulfátu sodného (DSS)-azoxymetán (AOM), ako aj v Apcmin /+ myši, u ktorých sa vyvinú črevné adenómy (Huber et al., 2012). Okrem IL-18 nadmerná produkcia IL-1 v čreve poháňa produkciu IL-17 bunkami CD4+ Th17 a vrodenými lymfocytmi (ILC) 3, ktoré získavajú granulocyty a spúšťajú črevné zápalu (Coccia et al., 2012). Nedávno Dmitrieva-Posocco O a kol. preukázali bunkovo ​​špecifickú funkciu IL-1 signalizácie pri intestinálnej tumorigenéze. Zatiaľ čo delécia Il1ra špecifická pre T bunky znížila tumorigenézu závislú od IL-17A/IL{32}}, ablácia Il1ra v neutrofiloch narušila ich funkciu pri bakteriálnej kontrole, čo viedlo k mikrobiálnej invázii nádoru, ktorá vyvolala exacerbovaný zápal a CRC ( Dmitrieva-Posocco a kol., 2019). Rovnako ako v prípade CRC, chronický zápal a cirhóza vyvolaná poškodením pečene predisponuje k HCC. Uvádza sa, že zápal AIM2 je aktivovaný u pacientov s pokročilou cirhózou, najmä v makrofágoch ascitu (Lozano-Ruiz et al., 2015) (obrázok 2B). Neskôr sa ukázalo, že tento zápalový kameň poháňa HCC v myšom modeli DEN, kde myši Aim2-/- alebo Casp1-/- znížili karcinogénne poškodenie pečene a rast rakoviny (Martínez-Cardona et al., 2018). V ľudskej koži je NLRP1 prevládajúcim zápalovým senzorom. V roku 2016 Franklin a spol. hlásili zárodočné mutácie so ziskom funkcie v NLRP1, ktoré vedú k familiárnemu zápalovému ochoreniu kože a súvisiacemu karcinómu. Autori ukázali, že aktivácia zápalu v keratinocytoch vedie k autokrinnému IL-1, ktorý riadi epidermálnu hyperpláziu (Zhong et al., 2016).

cistanche výhody pre mužov - posilnenie imunitného systému

Kliknite sem pre zobrazenie produktov Cistanche Enhance Immunity

【Požiadať o viac】 E-mail:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Podpora imunosupresie

Nádory využívajú viacero spôsobov, ako sa vyhnúť protinádorovej imunite. Napríklad si môžu uzurpovať zápalové cesty, aby vytvorili imunosupresívne prostredie. Inflammasómová dráha je jednou z takýchto dráh, u ktorých sa preukázalo, že pri niektorých rakovinách podporuje imunosupresiu podporou genézy a náboru supresorových buniek odvodených od myeloidu (MDSC) alebo indukciou diferenciácie TAM na tolerogénny fenotyp (obrázok 2C). V roku 2010 s použitím slabo imunogénneho modelu melanómu B16-F10 van Deventer et al. ukázali, že zápal Nlrp3 potlačil reakciu myši na vakcíny proti nádorom dendritických buniek prostredníctvom náboru MDSC (van Deventer et al., 2010). V modeli pankreatického duktálneho adenokarcinómu (PDAC) Daley et al. ďalej implikoval signalizáciu Nlrp3 v imunosupresii sprostredkovanej TAM. Ukázali, že delécia alebo inhibícia zložiek zápalu Nlrp3 bola ochranná proti PDAC. IL-1 sprostredkoval tolerogénnu funkciu Nlrp3 reguláciou produkcie IL{13}} a diferenciácie T buniek na Treg, Th2 a Th17 bunky (Daley et al., 2017). Nádorové bunky PDAC okrem TAM aktivujú aj zápal Nlrp3 a pôsobia ako významný zdroj IL-1 (Das et al., 2020). IL odvodený z nádoru-1 môže tiež pôsobiť prostredníctvom zápalovej slučky IL-6-STAT3 na rozšírenie MDSC a vyvolanie imunosupresie (Tengesdal et al., 2021a). Tengesdal a kol. preukázali to pomocou modelu melanómu B16-F10 a ďalej ukázali, že inhibícia Nlrp3 pomocou dapan sutrile (OLT1177) zrušila expresiu imunosupresívnych génov v PMN-MDSC a zvýšila protinádorovú imunitu in vivo (Tengesdal et al., 2021b). Zatiaľ čo sa zdá, že NLRP3 má prevládajúcu úlohu pri tlmení protinádorovej imunity, ako je znázornené vyššie, v tomto procese sa podieľajú aj iné zápaly. Napríklad sa ukázalo, že dráha NLRP1-IL- 18 podporuje tvorbu zrelých MDSC pri mnohopočetnom myelóme (Nakamura et al., 2018) a zápal Nlrc4 pri kontrole metastáz CRC do pečene v nealkoholické tukové ochorenie pečene (NAFLD) (Ohashi et al., 2019). Okrem toho zápal AIM2 vyvoláva imunosupresiu po fagocytóze buniek závislej od protilátky (ADCP) a snímaní DNA nádorových buniek zvýšením expresie PD-L1 a IDO, ktoré inhibujú protinádorovú imunitu NK a T bunkami (Su et al., 2018). Najmä cytokíny závislé od zápalu, ako je IL-1, môžu byť produkované v TME nezávisle od zápalov. Nedávna práca s použitím myších modelov nemalobunkového karcinómu pľúc (NSCLC) a trojnásobne negatívneho karcinómu prsníka (TNBC) ukázala, že sekrécia IL-1 myeloidnými bunkami bola nezávislá od aktivácie zápalu a tvorby pórov gastrínu D. IL-1 podporoval imunosupresiu náborom neutrofilov do lôžka nádoru. Autori ukázali, že nádorová infiltrácia neutrofilov bola zrušená u myší Il1b−/−, čo malo za následok stratu imunosupresie a obnovenie protinádorovej imunity počas liečby antiangiogénnymi látkami zameranými na VEGF. Hoci kaspáza{51}} bola aktivovaná v myeloidných bunkách infiltrujúcich nádor, jej delécia nebola dostatočná na úplné blokovanie uvoľňovania bioaktívneho IL{53}} a infiltrácie neutrofilov (Kiss et al., 2021). Za zmienku tiež stojí, že boli zdokumentované funkcie NLRP3 alebo AIM2 nezávislé od cytokínov pri imunosupresii. Petrilli a kolegovia oznámili imunosupresívnu úlohu dráhy Nlrp3- Asc-kaspázy{60}}, ktorá oslabila nábor a aktiváciu nádoru NK buniek, ale bola nezávislá od IL-1, IL{{62 }} alebo IL-1 receptorovú signalizáciu. Ukázalo sa to pomocou ortotopickej implantácie bunkovej línie rakoviny prsníka 4T1 u myší BALB/c alebo pomocou MMTV NeuV664E na pozadí BALB/c skrížených s myšami s deficitom zápalových zložiek C57Bl/6 (Guey et al., 2020). Okrem toho Theivanthiran a spol. ukázali, že anti-PD1 imunoterapia vedie k upregulácii PD-L1 na povrchu nádorovej bunky, ktorá konverguje k aktivácii NLRP3 a downstream uvoľňovaniu proteínu tepelného šoku (HSP) 70. Autokrinným a parakrinným spôsobom snímanie HSP70 pomocou TLR4 a následná expresia a sekrécia Wnt5a podporila produkciu CXCL5, ktorá priťahuje PMN-MDSC do nádoru (Theivanthiran et al., 2021).

OBRÁZOK 3|Protinádorové funkcie zápalovej dráhy. (A) Inflammasóm môže potlačiť proliferáciu nádorových buniek a podporiť homeostázu tkanív a diferenciáciu buniek. (B) Aktivácia zápalu podporuje protinádorovú imunitu zvýšením tumorigénnych aktivít NK a CD8 T buniek. Toto je primárne sprostredkované IL-18. Inflammasómové spúšťače zvyšujú účinnosť inhibítorov imunitného kontrolného bodu. (C) Pyroptotická bunková smrť po aktivácii zápalu vytvára imunogénne prostredie prostredníctvom uvoľnenia niekoľkých DAMP a imunostimulačných molekúl. Pyroptóza je iniciovaná spracovaním gasderminov závislým od kaspázy, ktoré tvoria póry vedúce k osmotickej lýze bunky. Niektoré chemoterapie vyvolávajú toxicitu v dôsledku pyroptickej smrti zdravých buniek prostredníctvom štiepenia mastermind E kaspázou-3.

PROTINÁDOROVÉ FUNKCIE ZÁPALOVEJ DRÁHY

Udržiavanie homeostázy tkaniva, podpora diferenciácie buniek a inhibícia proliferácie

Zápal je ochranná biologická reakcia vyvolaná fyziologicky, aby sa zabránilo patogénnej infekcii alebo poškodeniu tkaniva. Prvé štúdie od nás a iných ukázali, že inflammasómová dráha má ochrannú úlohu pri poškodení vyvolanom DSS podporou opravy črevného tkaniva prostredníctvom IL-18-sprostredkovanej regenerácie IEC (Dupaul-Chicoine et al., 2010). V súlade s tým strata Nlrp3, Asc alebo kaspázy-1 viedla k závažnej kolitíde, ale aj k CRC súvisiacemu s kolitídou (CAC) (Allen et al., 2010). Podobne aj úloha zápalov Nlrp6 (Elinav a kol., 2011), Nlrc4 (Rauch a kol., 2017), Aim2 (Man a kol., 2015) a pyrínu (Sharma a kol., 2018) pri udržiavaní črevnej homeostázy a bol hlásený boj proti CAC (obrázok 3A). Flavell, Elinav a kolegovia ukázali, že to bolo sprostredkované zmenami v črevnej mikrobiálnej ekológii spôsobenej nedostatkom produkcie antimikrobiálnych peptidov (AMP) podľa pokynov IL (Elinav a kol., 2011; Levy a kol., 2015 ). Takáto dysbióza mikroorganizmov podporovala infiltráciu neutrofilov, chronický zápal a hyperproliferáciu črevných epitelových buniek (IEC) riadenú IL (Hu et al., 2013). Okrem kontroly homeostázy tkaniva spustením kompenzačnej proliferácie, inflammasómová signalizácia bráni tumorigenéze upreguláciou diferenciačných programov. V modeli myši MMTV-PyMT Castaño Z et al. preukázali antimetastatickú úlohu IL-1. Ukázali, že myeloidný IL-1 uvalil diferenciačný „blok“ na bunky iniciujúce metastázy (MIC) zvýšením regulácie diferenciácie závislej od ZEB1-, ktorá pôsobila proti ich proliferačnej kapacite (Castaño et al., 2018) ( Obrázok 3A). Zatiaľ čo vo väčšine prípadov základné mechanizmy zápalu zahŕňajú IL-18 alebo IL-1, boli opísané aj úlohy nezávislé od zápalu. Napríklad sa ukázalo, že Aim2 obmedzuje CAC a sporadickú rakovinu hrubého čreva potlačením signalizácie Akt (Wilson et al., 2015) (obrázok 3A). Funkcie nezávislé od zápalu boli hlásené aj pre Nlrc4 v modeli subkutánneho myšieho melanómu B16-F10. Expresia Nlrc4 v TAM podporovala ochrannú protinádorovú odpoveď, na rozdiel od kaspázy-1 alebo Asc, čo naznačuje, že Nlrc4 pôsobil prostredníctvom alternatívneho mechanizmu (Janowski et al., 2016).

Podpora protinádorovej imunity cytokínmi závislými od zápalu

Vývoj nádoru závisí od rovnováhy medzi schopnosťou nádoru uniknúť imunitnému dozoru a protinádorovými imunitnými odpoveďami. Cytokíny závislé od zápalu IL-18 a IL-1 hrajú ústrednú úlohu v protinádorovej imunite. V roku 2009 Ghiringhelli a spol. prvý oznámil, že uvoľňovanie ATP z nádorových buniek je snímané receptorom P2X7 na dendritických bunkách (DC), ktorý aktivuje zápal Nlrp3 a spúšťa uvoľňovanie IL-1. Nedostatok kaspázy-1 alebo IL{10}}r narušil aktiváciu CD8+ T buniek produkujúcich INF (Ghiringhelli et al., 2009) (obrázok 3B). Kondicionovanie IL{15}} konzistentne umožňuje lepšiu odpoveď adoptívne prenesených protinádorových T-buniek. Mechanicky IL-1 podporuje nasmerovanie T-buniek do miesta nádoru a zlepšuje prežitie a aktiváciu T-buniek (Lee et al., 2019). Pokiaľ ide o IL-1, IL-18 je základným induktorom protinádorovej imunity. Na jednej strane zvyšuje dozrievanie NK buniek a lytickú aktivitu sprostredkovanú FasL, ako sa ukázalo na modeli metastáz CRC do pečene (Dupaul-Chicoine et al., 2015) (obrázok 3B). Na druhej strane IL-18 zvyšuje počet lymfocytov infiltrujúcich nádor (TIL), ako je znázornené na subkutánnom modeli melanómu (Zhou et al., 2020). Avšak IL-18 predtým nedokázala preukázať účinnosť v klinických štúdiách rakoviny. Potenciálnou príčinou by mohla byť expresia IL-18BP, negatívneho regulátora, ktorý potláča cirkulujúci IL-18. Ukázalo sa, že variant IL-18 rezistentný voči IL-18BP vyvoláva zvýšenú frekvenciu a funkciu TIL a rozširuje intratumorálne kmeňové TCF1+ CD8+ T bunky v myších nádoroch (Zhou et al., 2020). Podobne ako jeho úloha v prirodzenej protinádorovej imunite, inflammasóm tiež sprostredkováva syntetickú protinádorovú imunitu riadenú určitými inhibítormi imunitného kontrolného bodu a inhibítormi ektonukleotidáz s malými molekulami. Napríklad inhibícia CD39, ktorá vedie k extracelulárnej akumulácii ATP, zvýšila anti-PD- 1 protinádorové imunitné reakcie zapojením P2x7-Nlrp3- IL-18 dráhy (Xian- Yang Li a kol., 2019; Yan a kol., 2020) (obrázok 3B). Podobne uvoľnenie aktivity Nlrp3 prostredníctvom inhibície transmembránového proteínu 176B (TMEM176B), imunoregulačného katiónového kanála, zvýšilo protinádorovú aktivitu TIL v reakcii na inhibítory imunitného kontrolného bodu (Segovia et al., 2019). Nedávno Kuchroo a kolegovia preukázali, že inhibícia imunitného kontrolného bodu TIM- 3 na migrujúcich DC viedla k silnej protinádorovej imunite sprostredkovanej aktiváciou zápalu Nlrp3 riadenou ROS (Dixon et al., 2021) (obrázok 3B ).

cistanche rastlina zvyšujúca imunitný systém

Imunogénna bunková smrť nádorových buniek pyroptózou

Pyroptóza je lytická a imunogénne regulovaná bunková smrť, ktorá je indukovaná aktiváciou kaspázy. Hlavný mechanizmus pyroptózy zahŕňa spracovanie GSDMD na doménu tvoriacu póry. Rodina GSDM je dobre zachovaná u stavovcov a pozostáva zo šiestich paralógov u ľudí, GSDMA, GSDMB, GSDMC, GSDMD, GSDME (DFNA5) a GSDMF (DFNB59). Myšiam chýba homológ GSDMB a majú tri homológy GSDMDA, štyri homológy GSDMC, GSDMD, GSDME a GSDMF [prehľad v (Zou et al., 2021)]. Pyroptóza nádorových buniek uvoľňuje spektrum molekúl umožňujúcich účinnú protinádorovú imunitnú odpoveď a regresiu nádoru. Toto bolo elegantne demonštrované v biortogonálnom systéme u myší, ktorý odhalil, že pyroptóza menej ako 15 % nádorových buniek postačovala na vyčistenie celého nádorového štepu. Takáto protinádorová odpoveď je sprostredkovaná kompetentným imunitným systémom, pretože imunodeficientné myši alebo myši s deficitom T-buniek neboli schopné vyvolať protinádorovú imunitu (Wang et al., 2020). Okrem GSDMD môže pyroptózu spustiť aj GSDME. Ukázalo sa, že jeho štiepenie kaspázou{10}} po prúde TNF alebo chemoterapeutických liekov spúšťa pyroptózu (Wang et al., 2017). Nádorové bunky, ale nie normálne bunky, majú tendenciu znižovať reguláciu GSDME, čo čiastočne vysvetľuje mimocieľovú toxicitu niektorých terapií rakoviny (obrázok 3C). Dôsledne boli myši Gsdme - / - chránené pred poškodením tkaniva vyvolaným chemoterapiou (Wang et al., 2017). Na rozdiel od GSDME je GSDMC v nádorových bunkách upregulovaná. Prostredníctvom interakcie so Stat3 kontroluje PD-L1 transkripciu GSDMC. TNF uvoľňovaný TAM aktivuje kaspázu-8, ktorá spracováva GSDMC, čo vedie k pyroptóze (Hou et al., 2020).

KLINICKÉ SKÚŠKY ZACIELENÉ NA ZÁPALOVÚ DRÁHU

Na zacielenie zápalovej aktivity možno použiť viacero prístupov, vrátane inhibície upstream signálnych dráh, inhibície zložiek zápalu alebo neutralizácie cytokínov (doplnková tabuľka S1). Štiepenie cytokínov závislých od zápalu kaspázou-1 z neho robí atraktívny terapeutický cieľ. Talidomid, ktorý sa zameriava na kaspázu- 1, je účinný protizápalový a antiangiogénny liek. Jeho terapeutické použitie bolo schválené na liečbu zápalových kožných ochorení a niektorých druhov rakoviny. Pri mnohopočetnom myelóme dosiahlo testovanie talidomidu v kombinácii s inými terapiami fázu III alebo IV klinických skúšok. Iné inhibítory kaspázy-1 používané pri zápalových ochoreniach, ako napríklad Pralnacasan alebo VX-765 (Belnacasan), sa zatiaľ nepoužívajú v klinických štúdiách rakoviny. Zaujímavým prístupom je tiež inhibícia špecifických zápalových receptorov, ako je NLRP3. Liečivo inhibujúce uvoľňovanie cytokínov (CRID)3 známe tiež ako MCC950 a Dapansutrile (OLT1177) sú inhibítory NLRP3, ktoré ukázali sľubné výsledky u myší (Hamarsheh a Zeiser, 2020; Tengesdal a kol., 2021b; Oizumi a kol., 2021), Očakáva sa, že sa presunú do klinických skúšok. V klinických štúdiách je však blokáda cytokínov najúspešnejším prístupom a IL-1 sa javí ako jeden z najsľubnejších cieľov. Na základe štúdie CANTOS, ktorá hodnotila účinok kanakinumabu na prevenciu nežiaducich srdcových príhod, vedie Novartis niekoľko klinických štúdií zameraných na IL{17}} pri rakovine, vrátane troch vo fáze III pri NSLC. CANOPY-A (NCT03447769) je klinická štúdia kombinujúca kanakinumab s cisplatinou u pacientov s NSLC po chirurgickej resekcii na prevenciu relapsu. CANOPY-1 (NCT03631199) hodnotila kanakinumab ako liečbu prvej línie pokročilého alebo metastatického NSCLC v kombinácii s pembrolizumabom a chemoterapiou dubletu na báze platiny. Nedosiahol však primárne koncové ukazovatele celkového prežívania (OS) a prežívania bez progresie (PFS). CANOPY-2 (NCT03626545) skúmal kombináciu kanakinumabu s docetaxelom v terapii druhej alebo tretej línie oproti samotnému docetaxelu pri NSCLC. Nedosiahol však ani svoj prvý koncový bod. MABp1, monoklonálna protilátka Janssen zameraná na IL-1, preukázala klinický prínos v klinickej štúdii fázy III (NCT02138422), čím sa zvýšila medián prežitia pacientov s CRC refraktérnym na štandardnú liečbu. Klinická štúdia fázy II z Mayo Clinic (NCT00635154) skúmala účinok anakinry u pacientov s mnohopočetným myelómom v počiatočnom štádiu. Výsledky naznačujú, že IL-1Ra potláča markery progresie ochorenia. Ďalším skúmaným prístupom je stimulácia protinádorovej imunity aktiváciou zápalu NLRP3. Klinická štúdia fázy III (NCT03329846) hodnotí BMS-986299, liek vyvinutý na aktiváciu zápalu NLRP3 v kombinácii s Nivolumabom u pacientov s pokročilým melanómom. Použitie rekombinantných cytokínov je tiež spôsob podpory protinádorovej aktivity a SB-485232, rekombinantný ľudský IL-18, bol použitý v siedmich klinických štúdiách, aj keď bez preukázania účinnosti.

ZÁVER

Inflammasómy hrajú dvojsečné úlohy v tumorigenéze a protinádorovej imunite. Na jednej strane podporujú rast rakoviny a metastázy inštrukciou imunosupresívnej TME, najmä prostredníctvom IL-1 a stimuláciou proliferácie nádorových buniek v autokrinných a parakrinných amplifikačných slučkách. Okrem toho vyvolávajú kompenzačné proliferačné mechanizmy v reakcii na trvalé poškodenie tkaniva podporujúce tumorigenézu. Na druhej strane aktivácia zápalu zvyšuje tumorigénnu aktivitu CD8+ T buniek a NK buniek spôsobom závislým od IL{4}}a ďalej podporuje protinádorovú imunitu prostredníctvom pyroptózy, imunogénnej bunkovej smrti, ktorá aktivuje antigén - prezentácia buniek prostredníctvom uvoľňovania nádorových antigénov a adjuvans v TME. Vzhľadom na rôzne zložky zápalu a ich následné zápalové cytokíny sa v súčasnosti skúma niekoľko atraktívnych terapeutických cieľov založených na zápale. Pred zovšeobecnením takýchto potenciálnych imunoterapií je však stále potrebné veľa práce, pretože väčšina tu citovanej predklinickej práce vyžaduje validáciu v iných modeloch rakoviny, translačných štúdiách a skorých klinických štúdiách. Okrem toho, ak vezmeme do úvahy pleiotropné úlohy zápalov a ich cytokínov, ako aj pri iných imunoterapiách, pri týchto prístupoch je potrebná osobitná pozornosť potenciálnym zápalovým toxicitám alebo škodlivým imunosupresívnym účinkom.

LITERATÚRA

Allen, IC, Tekippe, EM, Woodford, RM, Uronis, JM, Holl, EK, Rogers, AB, a kol. (2010). Inflammasóm NLRP3 funguje ako negatívny regulátor tumorigenézy počas rakoviny spojenej s kolitídou. J. Exp. Med. 207, 1045-1056. doi:10.1084/jem.20100050

Ariffin, JK a Sweet, MJ (2013). Rozdiely v repertoári, regulácii a funkcii Toll-like receptorov a Inflammasóm-tvoriacich nod-like receptorov medzi človekom a myšou. Curr. Opin. Microbiol. 16, 303-310. doi:10.1016/j.mib.2013.03.002

Bauernfried, S., Scherr, MJ, Pichlmair, A., Duderstadt, KE a Hornung, V. (2021). Ľudský NLRP1 je senzor pre dvojvláknovú RNA. Veda 371, eabd0811. doi:10.1126/science.abd0811

Brož, P., Pelegrín, P. a Shao, F. (2020). Gasderminovci, proteínová rodina spôsobujúca bunkovú smrť a zápal. Nat. Rev. Immunol. 20, 143-157. doi:10,1038/s41577-019-0228-2

Brunetto, E., De Monte, L., Balzano, G., Camisa, B., Laino, V., Riba, M., a kol. (2019). Os receptora IL-1/IL{2}} a adaptér zápalových buniek uvoľnených z nádorových buniek ASC sú kľúčovými regulátormi sekrécie TSLP fibroblastmi spojenými s rakovinou pri rakovine pankreasu. J. Immunotherapy Cancer 7, 45. doi:10.1186/ s40425-019-0521-4

Bürckstümmer, T., Baumann, C., Blüml, S., Dixit, E., Dürnberger, G., Jahn, H. a kol. (2009). Ortogonálny proteomicko-genomický screen identifikuje AIM2 ako cytoplazmatický DNA senzor pre zápal. Nat. Immunol. 10, 266-272. doi:10.1038/ni.1702

Castaño, Z., San Juan, BP, Spiegel, A., Pant, A., DeCristo, MJ, Laszewski, T., et al. (2018). IL-1 Zápalová odpoveď vyvolaná primárnou rakovinou prsníka bráni kolonizácii buniek spúšťajúcej metastázy. Nat. Cel Biol 20, 1084-1097. doi:10,1038/s41556-018-0173-5

Chu, LH, Indramohan, M., Ratsimandresy, RA, Gangopadhyay, A., Morris, EP, Monack, DM, a kol. (2018). Oxidovaný fosfolipid oxPAPC chráni pred septickým šokom zacielením na nekanonický zápal v makrofágoch. Nat. komun. 9, 996. doi:10.1038/s41467-018-03409-3

Coccia, M., Harrison, OJ, Schiering, C., Asquith, MJ, Becher, B., Powrie, F., a kol. (2012). IL-1 sprostredkováva chronický črevný zápal tým, že podporuje akumuláciu IL-17vylučujúcich vrodených lymfoidných buniek a CD4+ buniek Th17. J. Exp. Med. 209, 1595–1609. doi:10.1084/jem.20111453

Daley, D., Mani, VR, Mohan, N., Akkad, N., Pandian, GSDB, Savadkar, S., et al. (2017). Signalizácia NLRP3 poháňa adaptívnu imunitnú supresiu vyvolanú makrofágmi pri karcinóme pankreasu. J. Exp. Med. 214, 1711–1724. doi:10. 1084/jem.20161707

Das, S., Shapiro, B., Vucic, EA, Vogt, S. a Bar-Sagi, D. (2020). IL1 odvodený z nádorových buniek podporuje desmoplaziu a imunosupresiu pri rakovine pankreasu. Cancer Res. 80, 1088-1101. doi:10.1158/0008-5472.CAN-19-2080

Dixon, KO, Tabaka, M., Schramm, MA, Xiao, S., Tang, R., Dionne, D., a kol. (2021). TIM-3 obmedzuje protinádorovú imunitu reguláciou aktivácie zápalu. Príroda 595, 101–106. doi:10,1038/s41586-021-03626-9

Dmitrieva-Posocco, O., Dzutsev, A., Posocco, DF, Hou, V., Yuan, W., Thovarai, V., et al. (2019). Reakcie bunkového typu na interleukín{4}} kontrolujú mikrobiálnu inváziu a nádorom vyvolaný zápal pri kolorektálnom karcinóme. Imunita 50, 166–180. e167. doi:10.1016/j.immuni.2018.11.015

Dunn, GP, Bruce, AT, Ikeda, H., Old, LJ a Schreiber, RD (2002). Cancer Immunoediting: od Imunosurveillance k Tumor Escape. Nat. Immunol. 3, 991-998. doi:10.1038/ni1102-991

Dupaul-Chicoine, J., Arabzadeh, A., Dagenais, M., Douglas, T., Champagne, C., Morizot, A., et al. (2015). Inflammasóm Nlrp3 potláča metastatický rast kolorektálneho karcinómu v pečeni podporovaním nádorovej aktivity prirodzených zabíjačských buniek. Imunita 43, 751-763. doi:10.1016/j.immuni.2015. 08.013

Dupaul-Chicoine, J., Yeretssian, G., Doiron, K., Bergstrom, KS, McIntire, ČR, LeBlanc, PM, a kol. (2010). Kontrola intestinálnej homeostázy, kolitídy a kolorektálneho karcinómu súvisiaceho s kolitídou zápalovými kaspázami. Imunita 32, 367–378. doi:10.1016/j.immuni.2010.02.012

Elinav, E., Strowig, T., Kau, AL, Henao-Mejia, J., Thaiss, CA, Booth, CJ, a kol. (2011). Inflammasóm NLRP6 reguluje mikrobiálnu ekológiu hrubého čreva a riziko kolitídy. Cela 145, 745-757. doi:10.1016/j.cell.2011.04.022

Ershaid, N., Sharon, Y., Doron, H., Raz, Y., Shani, O., Cohen, N., a kol. (2019). Zápal NLRP3 vo fibroblastoch spája poškodenie tkaniva so zápalom pri progresii rakoviny prsníka a metastázach. Nat. komun. 10, 4375. doi:10. 1038/s41467-019-12370-8

Fernandes-Alnemri, T., Yu, JW, Datta, P., Wu, J. a Alnemri, ES (2009). AIM2 aktivuje zápal a smrť buniek v reakcii na cytoplazmatickú DNA. Príroda 458, 509–513. doi:10.1038/nature07710

Fink, SL, Bergsbaken, T. a Cookson, BT (2008). Letálny toxín antraxu a salmonela vyvolávajú bežnú dráhu bunkovej smrti pri pyroptóze závislej od kaspázy-1- prostredníctvom odlišných mechanizmov. Proc. Natl. Akad. Sci. 105, 4312-4317. doi:10.1073/pnas.0707370105

Franklin, BS, Bossaller, L., De Nardo, D., Ratter, JM, Stutz, A., Engels, G., a kol. (2014). Adaptér ASC má extracelulárne a „prionoidné“ aktivity, ktoré šíria zápal. Nat. Immunol. 15, 727-737. doi:10.1038/ni.2913

Ghiringhelli, F., Apetoh, L., Tesniere, A., Aymeric, L., Ma, Y., Ortiz, C., a kol. (2009). Aktivácia zápalu NLRP3 v dendritických bunkách indukuje IL-1 - závislú adaptívnu imunitu proti nádorom. Nat. Med. 15, 1170-1178. doi:10.1038/nm.2028