Črevná permeabilita a depresia u pacientov so zápalovým ochorením črievⅠ
Dec 20, 2023
Abstrakt: Depresia je globálny zdravotný problém, ktorý si vyžaduje včasnú a presnú diagnózu, aby sa zabezpečil rýchly prístup k vhodnej liečbe. Nedávna pozornosť sa zamerala na analýzu osi mozog-črevo-mikrobiota medzi viacerými psychopatologickými cestami. Črevná bariéra hrá kľúčovú úlohu a dysfunkcie vyskytujúce sa na tejto úrovni majú dôsledky na duševné zdravie. Cieľom tejto štúdie bolo preskúmať úlohu biomarkerov intestinálnej permeability, tj kalprotektín, zonulín, lipopolysacharid viažuci proteín (LBP) a črevný proteín viažuci mastné kyseliny (I-FAB), pri depresii u pacientov so zápalovým ochorením čriev (IBD). ).
Ide o prvú štúdiu tohto druhu, ktorá sa uskutočňuje v Rumunsku vo východnej Európe s dôrazom na pacientov s Crohnovou chorobou a ulceróznou kolitídou. Zistené korelácie medzi depresiou a kalprotektínom a depresiou a LBP majú potenciál objasniť proces rýchlej diagnostiky depresie pomocou biomarkerov. Keďže depresia koreluje so znížením kvality života hospitalizovaných pacientov s IBD, potreba prístupu k vhodnej liečbe musí byť naliehavá.
1. Úvod
Depresia je individuálne, profesionálne a sociálne postihnutie spojené so somatickými chorobami [1,2] a s vysokým rizikom úmrtnosti na samovraždu [3]. Prístup k odborníkom, správna diagnóza a účinná liečba sú však obmedzené [4]. Včasná a presná diagnóza [5,6], ako aj personalizovaný výber liečby [7] sú nevyhnutné na zníženie utrpenia a finančnej záťaže choroby [3]. Podľa diagnostických kritérií v Diagnostic and Statistical Manual of MentalDisorders (DSM V) [8] je depresia afektívna porucha s heterogénnou skupinou symptómov. Na diagnostiku je potrebná prítomnosť piatich z deviatich nasledujúcich príznakov: depresívna nálada, nedostatok potešenia, ťažkosti so spánkom a chuťou do jedla, nízka hladina energie, kognitívne zmeny, pocity viny a viny a samovražedné myšlienky. patofyziologické mechanizmy na úžitok z účinnej liečby nie sú známe. Niekoľko mechanizmov bolo spochybnených, ale teórie sa stále vyvíjajú.
Skúmali sa teda dysfunkcie na osi hypotalamus – hypofýza, neurotransmitery, nervus vagus, metabolity mastných kyselín s krátkym reťazcom, tryptofán, zápalové faktory a os mozog – črevo – mikrobiota [9–12]. Je dokázané, že nielen poruchy súvisiace so stresom prinášajú zmeny v zložení črevnej mikrobioty cez os hypotalamus-hypofýza-nadobličky, ale aj črevo ovplyvňuje
centrálny nervový systém prostredníctvom vagovej stimulácie, črevnej permeability a uvoľňovania zápalových a protizápalových zlúčenín a zmien v cirkulujúcich látkach v krvi [13]. V priebehu posledných dvoch desaťročí nabrala na intenzite štúdium osi mozog-črevo-mikrobiota pri duševných poruchách [9,14]. V tejto súvislosti sa viac pozornosti venuje úlohe syndrómu presakujúceho čreva [15,16].
Črevná bariéra má hlavnú úlohu pri trávení a absorpcii živín, sekundárne prísne kontroluje transport antigénov z lúmenu do submukózy a udržiava rovnováhu medzi toleranciou a imunitnou odpoveďou, ktorá spôsobuje zápal. Integrita črevnej bariéry môže byť ovplyvnená stravou, dysbiózou črevnej mikrobioty alebo inými faktormi. Tieto majú potenciál spôsobiť imunitnú aktiváciu translokáciou mikrobiálnych antigénov a metabolitov. V súčasnosti sa ako črevná permeabilita analyzuje sérový zonulín, črevný proteín viažuci mastné kyseliny (IFABP/FABP2) a LBP, ako aj fekálny albumín, kalprotektín a zonulín. markery [17].Kalprotektín je proteín, ktorý viaže vápnik a zinok, pôvodne izolovaný z leukocytov;je užitočný pri odlíšení zápalového ochorenia čriev od syndrómu dráždivého čreva.Hraje hlavnú úlohu pri zápale a považuje sa za proteín akútnej fázy [18 ].
Normálne hodnoty sú medzi 10 a 50 alebo 60 (ug/g). Hodnoty nad 200 (ug/g) môžu naznačovať zápalové ochorenie a hodnoty nad 500–600 (ug/g) určite poukazujú na existenciu črevného ochorenia [19]. Lipopolysaccharide-binding protein (LBP) je základná lipidová zložka vonkajšej membrány gramnegatívnych baktérií [20], čo spôsobuje endotoxémiu [21]. LBPis produkovaný hepatocytmi, tukovým tkanivom a črevnými bunkami funguje ako proteín akútnej fázy I a hrá dôležitú úlohu v imunitnej odpovedi [22]. LBP je prítomný v sére v koncentráciách 5–15 mg/ml a počas akútnej fázy reakcie sa zvyšuje 10 až 50-krát. Bariérovú funkciu udržiava zoulin, známy ako jediný fyziologický modulátor blízkych intracelulárnych spojení (TJ) [15,23, 24]. Zonulín reverzibilne otvára TJ, pričom pôsobí na proteázou aktivovaný receptor 2 umiestnený v intracelulárnom priestore junkčného komplexu [25]. Stredná hodnota zonulínu je 34 ng/ml [26].
Intestinálny proteín viažuci mastné kyseliny (I-FABP/FABP2) je jedným z deviatich rôznych identifikovaných FABP, ktoré patria do superrodiny proteínov, ktoré viažu lipidy. Hlavnou úlohou je vnútrobunkový transport a regulácia absorpcie mastných kyselín [27]. Keď dôjde k poškodeniu epiteliálnej črevnej bariéry, I-FABP sa uvoľní do obehu a zvýši sa jeho plazmatická koncentrácia [28]. Prahová hodnota pre I-FAPB sa považuje za 2 ng/ml. V tejto súvislosti sme sa zamerali na skúmanie úlohy biomarkerov intestinálnej permeability pri depresii u pacientov so zápalovým ochorením čriev (IBD) (i) skúmaním vzťahu medzi kalprotektínom, zonulínom, LBP , IFABP/FABP2 a depresie a (ii) hodnotením vplyvu depresie na kvalitu života.
2. Materiály a metódy
2.1. Študijná skupina
Počiatočná skupina zahŕňala 60 pacientov z gastroenterologickej kliniky klinickej nemocnice v okrese Constanta v období od apríla do júna 2021. Kritériá zaradenia boli diagnóza IBD, vek 18 a viac rokov, znalosť čítania a písania a súhlas s účasťou na štúdii. Kritériami vylúčenia boli odmietnutie súhlasu, ťažká depresia alebo iné ťažké duševné poruchy, kvôli ktorým boli nasmerovaní na špecializovanú psychiatrickú službu. Po informovanom súhlase boli pacienti telefonicky kontaktovaní výskumníkom, aby aplikovali sociodemografický dotazník o depresii a dotazník o kvalite života. Do štúdie bolo zahrnutých 30 pacientov, ktorí prešli všetkými štádiami štúdie.
2.2. Použité dotazníky
Dotazník o zdravotnom stave pacienta-9 (PHQ-9) [29] bol aplikovaný na účastníkov na posúdenie úrovne depresie, ktorou boli ovplyvnení. Tento štandardný dotazník obsahuje deväť položiek, na ktoré je potrebné odpovedať na základe symptómov, ktoré mal pacient počas posledných 14 dní. Skóre sú klasifikované nasledovne: 1–4 minimálna depresia, 5–9 mierna depresia, 10–14 stredne ťažká depresia, 15–19 stredne ťažká depresia a 20–27 ťažká depresia Podobne sme použili dotazník pre kvalitu života (EQ{{ 14}}D) [30,31] na zber údajov týkajúcich sa kvality života. Položky zahrnuté v tomto nástroji sú mobilita pacienta, starostlivosť o seba, zapojenie sa do bežných činností, bolesť alebo nepohodlie a prežívaná úzkosť alebo depresia. Položky sú zodpovedané na päťstupňovej škále.
2.3. Odber vzoriek a laboratórna analýza
Sérologické vzorky pre zonulín, IFABP/FABP2, LBP a vzorky stolice pre kalprotektín sa odoberali podľa protokolu na odber a transport potenciálne infekčných biologických vzoriek. Vzorky séra sa odoberali venóznou punkciou, nalačno a vo vákuu s aktivátorom. Vzorky výkalov sa odoberali zo spontánne emitovaných stolíc do nádob bez nosného média. Sérum bolo testované na zonulín pomocou súpravy MyBioSource Kit, Inc. (San Diego, CA, USA). a IFABP/FABP2 a LBP so súpravou Wuhan Fine Biotech Co., Ltd. (Wuhan, Čína). Vzorky boli testované na kalprotektín pomocou súpravy EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG. Všetky testy boli uskutočnené enzýmovým imunosorbentovým testom (ELISA) na ADALTIS Analyzer GEN-4 a Victor X4 podľa pokynov výrobcu súpravy.
Rozsah normálnych hodnôt definoval výrobca súpravy len pre kalprotektín nasledovne: Menšie alebo rovné 50.0 mcg/g ako normálne, 50,1– 120,0 mcg/g ako limitná hodnota a väčšia alebo rovná 120,1 mcg/g ako pozitívna na črevné ochorenie. Pre zonulín výrobca reakčnej súpravy nešpecifikoval žiadne spodné detekčné limity. Spodný limit detekcie pre súpravu IFABP/FABP2 bol 0,156 ng/ml, 3,125 ng/ml pre LBP a 3,125 ng/ml pre kalprotektín. Pre zonulín, I-FABP/FABP2 a LBS/LBP výrobca súpravy neuviedol rozsah normálnych hodnôt a použili sa hodnoty, ktoré použili iní autori vo svojich štúdiách. Sérum sa extrahovalo z každej vzorky krvi centrifugáciou pri 3000 x g 30 minút s použitím centrifúgy Thermo Scientific SL16R.
Všetky získané séra sa uchovávali zmrazené pri -200 °C až do vykonania analýz. Pre IFABP/FABP2 a LBP sa vzorky pred testovaním zriedili na 1/2 tlmivým roztokom na riedenie vzoriek. Vzorky stolice boli až do dňa testovania uchovávané pri -20 ◦C. Extrakcia vzorky stolice sa uskutočnila s použitím 980 iuextrakčného pufra spolu s 20 mg stolice, miešala sa 30 s a potom sa centrifugovala pri 2000 x g počas 10 minút s použitím centrifúgy Thermo Scientific SL16R. Zriedenie vzoriek sa potom uskutočnilo s 980 iu vzorkového pufra a 20 iu extrakčného supernatantu.
Pre štyri markery sa použili mikrodoštičky s 96 jamkami potiahnutými záchytnými protilátkami: anti-kalprotektínové protilátky, anti-IFABP/FABP2 protilátky, anti-LBP protilátky alebo antizonulínové protilátky. Princípy testu boli rovnaké na základe technológie imunologického testovania súvisiaceho s enzýmom (ELISA). Do jamiek sa neskôr pridali štandardné vzorky, testovacie vzorky a detekčné protilátky konjugované s biotínom. Substráty TMB (3,30,5,50-tetrametylbenzidín) sa použili na vizualizáciu enzymatickej reakcieHRP (chrenová peroxidáza). HRP katalyzovala TMB za vzniku modrého produktu, ktorý sa po pridaní roztoku na zastavenie kyseliny zmenil na žltý.
Hustota žltej škvrny bola úmerná množstvu vzorky zachytenej na platni. Intenzita farby sa merala pri 450 nm v čítačke mikrodoštičiek a potom sa vypočítala cieľová koncentrácia.
2.4. Štatistická analýza
Štatistická analýza sa uskutočnila pomocou štatistického softvéru IBM SPSS verzie 23 (Armonk, NY, USA: IBM Corp.). Údaje sú prezentované ako medián a IQR (interkvartilrozsah P75–P25) pre spojité premenné v prípade skreslených distribúcií alebo ako percentá pre kategorické premenné.
Keďže Shapiro-Wilkov test normality ukázal v prípade analyzovaných spojitých premenných štatistické hodnoty testu, ktorých pravdepodobnosť (p) bola nižšia ako hladina významnosti {{0}}.05, podmienka normalita nebola splnená, s výnimkou premenných LBP a PHQ 9, pre ktoré p >=0,05. Za vhodnejší sme považovali neparametrický prístup k štúdiu korelácie medzi predmetnými premennými s uvedením Spearmanovho rho korelačného koeficientu (ρ) a pravdepodobnosti (p) s ním spojenej. Hladina významnosti bola stanovená na 0,05.
Prírodný bylinný liek na zmiernenie zápchy-Cistanche
Cistanche je rod parazitických rastlín, ktorý patrí do čeľade Orobanchaceae. Tieto rastliny sú známe svojimi liečivými vlastnosťami a už po stáročia sa používajú v tradičnej čínskej medicíne (TCM). Druhy Cistanche sa vyskytujú prevažne v suchých a púštnych oblastiach Číny, Mongolska a iných častí Strednej Ázie. Rastliny cistanche sú charakteristické svojimi mäsitými, žltkastými stonkami a sú vysoko cenené pre svoje potenciálne zdravotné prínosy. V TCM sa verí, že Cistanche má tonické vlastnosti a bežne sa používa na výživu obličiek, zvýšenie vitality a podporu sexuálnej funkcie. Používa sa tiež na riešenie problémov súvisiacich so starnutím, únavou a celkovou pohodou. Zatiaľ čo Cistanche má dlhú históriu používania v tradičnej medicíne, vedecký výskum jeho účinnosti a bezpečnosti prebieha a je obmedzený. Je však známe, že obsahuje rôzne bioaktívne zlúčeniny, ako sú fenyletanoidové glykozidy, iridoidy, lignany a polysacharidy, ktoré môžu prispievať k jeho liečivým účinkom.
Wecistanche'scistanche prášok, cistanche tablety, cistanche kapsulya ďalšie produkty sa vyvíjajú pomocoupúšťcistancheako suroviny, pričom všetky majú dobrý vplyv na zmiernenie zápchy. Špecifický mechanizmus je nasledovný: Predpokladá sa, že Cistanche má potenciálne výhody na zmiernenie zápchy na základe jeho tradičného použitia a určitých zlúčenín, ktoré obsahuje. Zatiaľ čo vedecký výskum konkrétne o účinku Cistanche na zápchu je obmedzený, predpokladá sa, že má viacero mechanizmov, ktoré môžu prispieť k jeho potenciálu zmierniť zápchu. Laxatívny účinok:Cistanchesa už dlho používa v tradičnej čínskej medicíne ako liek na zápchu. Predpokladá sa, že má mierny laxatívny účinok, ktorý môže pomôcť podporiť pohyby čriev a vyvolať zápchu. Tento účinok možno pripísať rôznym zlúčeninám v Cistanche, ako sú fenyletanoidové glykozidy a polysacharidy. Zvlhčovanie čriev: Na základe tradičného používania sa Cistanche považuje za látku s hydratačnými vlastnosťami, ktorá je špecificky zameraná na črevá. Podpora hydratácie a lubrikácie čriev môže pomôcť zmäkčiť nástroje a uľahčiť priechod, čím sa zmierni zápcha. Protizápalový účinok: Zápcha môže byť niekedy spojená so zápalom v tráviacom trakte. Cistanche obsahuje určité zlúčeniny, vrátane fenyletanoidných glykozidov a lignanov, o ktorých sa predpokladá, že majú protizápalové vlastnosti. Znížením zápalu v črevách môže pomôcť zlepšiť pravidelnosť vyprázdňovania a zmierniť zápchu.