Kŕmenie raz denne je spojené s lepším zdravím spoločenských psov: Výsledky projektu starnutia psov, časť 1

AbstraktnéRôzne diéty boli študované na možné účinky proti starnutiu. Najmä štúdie prerušovaného hladovania a časovo obmedzeného kŕmenia u laboratórnych hlodavcov našli dôkazy o priaznivých zdravotných výsledkoch. Spoločné psy predstavujú jedinečnú príležitosť študovať stravu veľkého cicavca, ktorý zdieľa ľudské prostredie. Projekt Dog Aging Project od roku 2019 zbiera údaje o tisíckach spoločenských psov všetkých rôznych vekových skupín, veľkostí a plemien. Tento rôznorodý súbor prierezových údajov sme využili na preskúmanie súvislostí medzi frekvenciou kŕmenia a kognitívnymi funkciami (n=10, 474), ako aj deväť širokých kategórií zdravotných stavov (n=24,238). Pri kontrole pohlavia, veku, plemena a iných potenciálnych rušivých faktorov sme zistili, že psy kŕmené raz denne, a nie častejšie, mali nižšie priemerné skóre na stupnici kognitívnej dysfunkcie a nižšiu pravdepodobnosť, že budú mať gastrointestinálne, zubné, ortopedické, obličkové/močové a poruchy pečene/pankreasu. Preto sme zistili, že kŕmenie raz denne je spojené s lepším zdravím vo viacerých oblastiach. Budúci výskum s dlhodobými údajmi môže poskytnúť silnejší dôkaz o možnom kauzálnom účinku frekvencie kŕmenia na zdravie spoločenských psov.

Glykozid cistanche môže tiež zvýšiť aktivitu SOD v tkanivách srdca a pečene a výrazne znížiť obsah lipofuscínu a MDA v každom tkanive, účinne zachytáva rôzne reaktívne kyslíkové radikály (OH-, H₂O₂ atď.) a chráni pred poškodením DNA. OH-radikálmi. Cystanche fenyletanoidové glykozidy majú silnú schopnosť zachytávať voľné radikály, vyššiu redukčnú schopnosť ako vitamín C, zlepšujú aktivitu SOD v suspenzii spermií, znižujú obsah MDA a majú určitý ochranný účinok na funkciu membrány spermií. Polysacharidy Cistanche môžu zvýšiť aktivitu SOD a GSH-Px v erytrocytoch a pľúcnych tkanivách experimentálne starnúcich myší spôsobenú D-galaktózou, ako aj znížiť obsah MDA a kolagénu v pľúcach a plazme a zvýšiť obsah elastínu. dobrý čistiaci účinok na DPPH, predĺženie doby hypoxie u starnúcich myší, zlepšenie aktivity SOD v sére a oddialenie fyziologickej degenerácie pľúc u experimentálne starnúcich myší Experimenty ukázali, že pri bunkovej morfologickej degenerácii má Cistanche dobrú antioxidačnú schopnosť a má potenciál byť liekom na prevenciu a liečbu chorôb starnutia kože. Zároveň má echinakozid v Cistanche významnú schopnosť vychytávať voľné radikály DPPH a dokáže vychytávať reaktívne formy kyslíka, predchádzať voľným radikálom vyvolanej degradácii kolagénu a má tiež dobrý reparačný účinok na poškodenie aniónom voľných radikálov tymínu.

Kliknite na Cistanche Side Effects Reddit

【Ďalšie informácie: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:{0}}】

Kľúčové slováPes · Kognitívna dysfunkcia psov · Frekvencia kŕmenia · Zdravé starnutie · Časovo obmedzené kŕmenie

Úvod

Už takmer storočie je známe, že kalorická reštrikcia predlžuje životnosť a odďaľuje patológiu súvisiacu s vekom u laboratórnych zvierat [1–5]. Nedávno boli u zvierat aj u ľudí opísané rôzne alternatívne spôsoby stravovania proti starnutiu, ktoré poskytujú nové mechanické poznatky a potenciálne klinické aplikácie [6]. Tieto diéty zahŕňajú prerušovaný pôst [7, 8], diéty napodobňujúce hladovanie [9, 10], ketogénne diéty [11–15], obmedzenie bielkovín alebo esenciálnych aminokyselín [16, 17] a časovo obmedzené kŕmenie [18–20]. .

Tieto diéty boli najrozsiahlejšie študované na hlodavcoch v kontrolovaných laboratórnych podmienkach kvôli ľahkému podávaniu diét podľa špecifického rozvrhu a zvýšenej schopnosti oddeliť mechanizmy, prostredníctvom ktorých pôsobia. Štúdie časovo obmedzeného kŕmenia u hlodavcov naznačujú zlepšenie niekoľkých metabolických parametrov vrátane homeostázy glukózy a inzulínu, výdaja energie, hepatálnej patológie, odolnosti voči rôznym obezogénnym diétam a zlepšeného udržiavania cirkadiánneho rytmu počas starnutia [21–23]. V jednej štúdii myši, ktoré mali časovo obmedzené kŕmenie, preukázali 11-percentné predĺženie života [18]. Okrem toho niekoľko štúdií ukazuje, že kalorická reštrikcia a prerušovaný pôst zohrávajú ochrannú úlohu pri udržiavaní a zlepšovaní kognitívnych funkcií vrátane pamäte a priestorového učenia [24–28]. Zostáva však nejasné, či sú tieto prínosy u laboratórnych zvierat vo všeobecnosti spôsobené zníženým príjmom kalórií alebo frekvenciou jedla, alebo oboma [6].

Napriek bežnej popularizácii niekoľkých z týchto diét u ľudí sú priaznivé zdravotné účinky časovo obmedzeného kŕmenia mimo laboratórneho prostredia menej jasné. V niektorých štúdiách na ľuďoch boli zistené len mierne zlepšenia v zložení tela a kardiovaskulárnych rizikových faktoroch [29], aj keď subjekty tiež znížili svoj denný kalorický príjem [30]. V iných štúdiách boli pozorované škodlivé účinky na glukózovú homeostázu pri časovo obmedzenom kŕmení [31]. Nakoniec, zatiaľ čo niektoré štúdie zistili potenciálne kognitívne výhody, najmä pre pamäť u starších dospelých [32, 33], iné štúdie nepreukázali žiadny vplyv pôstu na kogníciu [34, 35].

Spoločné psy poskytujú potenciálne silný zvierací model na objasnenie vzťahu medzi stravou a zdravotnými výsledkami súvisiacimi s vekom [36]. Spoloční psi, ktorí sa spolu s ľuďmi vyvíjali tisíce rokov [37], zdieľajú ľudské prostredie, zažívajú podobné choroby a dostávajú podobnú lekársku starostlivosť. Kŕmenie psov jedenkrát denne slúži ako prirodzený model pre protokoly prerušovaného hladovania/časovo obmedzeného kŕmenia, ktoré sa v súčasnosti študujú na predklinických modeloch na hlodavcoch aj na ľuďoch [38].

The Dog Ageing Project je rozsiahla výskumná iniciatíva, ktorá sleduje tisíce spoločenských psov počas ich života, aby lepšie pochopila, ako biológia, životný štýl a životné prostredie ovplyvňujú zdravé starnutie [39, 40]. Zúčastnení majitelia každoročne podávajú správy o rôznych aspektoch týkajúcich sa stravy ich psa, primárnych a sekundárnych aktivít, sociálneho a fyzického prostredia, liekov a zdravotného stavu. V súčasnej štúdii sme použili prierezové údaje zozbierané v prvom roku Projektu starnutia psov, aby sme sa spýtali, či frekvencia kŕmenia súvisí s kognitívnymi funkciami a zdravotnými stavmi. Konkrétne sme predpokladali, že psy kŕmené raz denne by vykazovali nižšiu mieru fyzických zdravotných problémov a lepšie kognitívne skóre v porovnaní so psami kŕmenými častejšie.

Metódy

Predmety

Všetci psi boli prijatí do projektu Dog Aging Project (DAP) prostredníctvom bežných médií, sociálnych médií alebo ústneho podania. Ich majitelia následne medzi 26. decembrom 2019 a 31. decembrom 2020 vyplnili príslušné online prieskumy [41]. Údaje zo štúdie sa zbierali a spravovali pomocou nástrojov elektronického zberu údajov REDCap hostovaných prostredníctvom DAP [42, 43]. REDCap (Research Electronic Data Capture) je bezpečná webová softvérová platforma navrhnutá na podporu zberu údajov pre výskumné štúdie, ktorá poskytuje (1) intuitívne rozhranie na overené získavanie údajov, (2) audit traily na sledovanie manipulácie s údajmi a postupov exportu, (3) automatizované postupy exportu pre bezproblémové sťahovanie údajov do spoločných štatistických balíkov a (4) postupy pre integráciu údajov a interoperabilitu s externými zdrojmi.

Nástroje

Prvý prieskum, ktorý účastníci vyplnili, bol prieskum zdravia a životných skúseností (HLES), ktorý zhromažďuje informácie týkajúce sa demografických údajov psov, fyzickej aktivity, prostredia, správania psov, stravy, liekov a preventívnych opatrení, zdravotného stavu a demografických údajov majiteľov. V súčasnom vyšetrovaní sme sa predovšetkým zaujímali o frekvenciu kŕmenia a zdravotný stav a a priori sme identifikovali zdravotné podmienky, ktoré by mohla frekvencia kŕmenia pravdepodobne ovplyvniť.

Po absolvovaní HLES bola všetkým účastníkom ponúknutá možnosť absolvovať prieskum sociálneho a naučeného správania psov (CSLB), ktorý meria kognitívne funkcie. CSLB, premenovaná DAP, je rovnaká ako škála hodnotenia kognitívnej dysfunkcie psov (CCDR) [44], len s niekoľkými malými zmenami v znení. CCDR bola validovaná ako klinický nástroj na detekciu kognitívnej dysfunkcie nad špecifickým prahom. V tejto práci používame CSLB ako kvantitatívne skóre na zisťovanie zhoršenia smerom k kognitívnej dysfunkcii a uznávame, že ešte nie je na tento účel overené. Hodnotiaca stupnica kognitívnej dysfunkcie psov bola účastníkom prezentovaná ako prieskum sociálneho a naučeného správania psov, aby sa predišlo negatívnym konotáciám frázy „kognitívna dysfunkcia“. Tento nástroj žiada majiteľov, aby uviedli frekvenciu, s akou ich psy prejavujú správanie svedčiace o demencii (tj odpojenie od sociálnej aktivity; ťažkosti s navigáciou, hľadaním a rozpoznávaním). Na základe odpovedí majiteľa dostávajú psy skóre v rozsahu od 16 do 80, pričom vyššie skóre naznačuje horšiu kognitívnu funkciu (tj viac kognitívnej dysfunkcie).

Počas sledovaného obdobia ukončilo HLES 27 541 účastníkov DAP a CSLB 20 096 účastníkov DAP.

Etická poznámka

IRB University of Washington usúdila, že nábor majiteľov psov pre projekt starnutia psov a správa a obsah prieskumu DAP Health and Life Experience Survey (HLES) je výskum na ľuďoch, ktorý spĺňa podmienky na získanie štatútu výnimky kategórie 2 (IRB ID č. 5988 s účinnosťou od 30.10.2018). Nevyskytli sa žiadne interakcie medzi výskumníkmi a psami v súkromnom vlastníctve; preto sa dohľad IACUC nevyžadoval.

Kritériá zaradenia/vylúčenia

Vzhľadom na to, že frekvencia jedla sa upravuje, keď šteniatka dospievajú, špecifikovali sme vek zaradenia ako 1 Menší alebo rovný veku<18  years for all health outcomes. For the  CSLB outcome, we specified the age of inclusion as  6≤age<18  years, as 6  years is the youngest age indicated in the literature where signs of cognitive decline can start to appear in dogs [45–47]. Less than 5% of dogs in the DAP are intact, and these dogs   were excluded, as well as dogs (<1%) whose owners reported that their diet was "not at all consistent."  Thus, in our final sample, all dogs were spayed or neutered due to exclusion criteria, and slightly less than half of the dogs were male. About one-fifth of dogs received daily or more frequent omega-3 or other fatty acid supplementation in their diet.

Študovali sme zdravotné stavy, ktoré boli hlásené v deviatich širokých kategóriách na HLES, ktoré by mohli byť pravdepodobne ovplyvnené frekvenciou kŕmenia: ochorenia zubov alebo ústnej dutiny, kožné poruchy, ortopedické poruchy, gastrointestinálne poruchy, rakovina alebo nádory, poruchy obličiek alebo močových ciest, srdcové poruchy, neurologické poruchy. poruchy a poruchy pečene alebo pankreasu. Ďalšie široké kategórie zdravotných stavov uvádzaných v HLES neboli analyzované, pretože boli založené buď na dočasných situačných a/alebo environmentálnych faktoroch, a preto je nepravdepodobné, že by boli spojené s frekvenciou kŕmenia (napr. trauma, požitie toxických látok, infekčné alebo parazitárne poruchy), boli hlásené zriedkavo, a preto mali veľmi malú veľkosť vzorky (menej ako 3,5 percenta z celkovej vzorky; napr. respiračné poruchy, endokrinné poruchy, poruchy reprodukčného systému, imunitne podmienené poruchy a poruchy krvotvorby), alebo neexistovalo žiadne presvedčivé zdôvodnenie, prečo by ich frekvencia kŕmenia ovplyvnila (napr. poruchy ucha, nosa a hrdla, poruchy oka).

Pre kategórie zdravia skúmané v tomto vyšetrovaní bolo všetkým účastníkom priradené binárne skóre (ovplyvnené/neovplyvnené). Psy boli považované za „postihnuté“, ak ich majiteľ nahlásil, že majú aspoň jeden relevantný stav v rámci danej kategórie. Nepovažovali sme však žiadne vrodené zdravotné výsledky za ovplyvnené: keďže zvieratá sa narodili s týmito stavmi, ich režim kŕmenia bol podľa definície zavedený po nástupe, a preto nemohol ovplyvniť vývoj stavu. Podobne poruchy spojené s prechodnými situačnými faktormi, vrátane infekčných chorôb a traumy, sa nepovažovali za ovplyvnené, pretože vzhľadom na okolnosti týchto prípadov je nepravdepodobné, že by boli ovplyvnené frekvenciou kŕmenia.

Pozrite si doplnkové informácie 1, kde nájdete podrobnosti o všetkých kritériách zaradenia/vylúčenia, ako aj o špecifických stavoch, ktoré kvalifikovali psa ako postihnutého v rámci ochorenia zubov alebo ústnej dutiny, kožných porúch, ortopedických porúch, gastrointestinálnych porúch, rakoviny alebo nádorov, porúch obličiek alebo močových ciest, kategórie porúch srdca, neurologických porúch a porúch pečene alebo pankreasu.

Po uplatnení vylučovacích kritérií konečnú vzorku tvorili odpovede z 24 238 prieskumov HLES a 10 474 prieskumov CSLB. CSLB bola ukončená vždy minimálne 1 týždeň po ukončení HLES. Väčšina účastníkov v konečnej vzorke (88 percent ) ukončila CSLB do 3 mesiacov od ukončenia HLES a vždy do roka (rozsah: 7 až 352 dní, priemer: 47 dní).

Vysvetľujúce premenné

Analyzovali sme frekvenciu kŕmenia ako binárnu expozíciu, porovnávajúc psy kŕmené raz denne so psami kŕmenými častejšie. Majitelia sa konkrétne pýtali: "Koľkokrát za deň je váš pes kŕmený?" Psy majiteľov, ktorí odpovedali „Raz“ boli zaradení do kategórie raz denne, zatiaľ čo psi majiteľov, ktorí odpovedali „Dvakrát“, „Tri alebo viac“ alebo „Voľne kŕmené (dopĺňajú misku, keď je prázdna alebo majú vždy jedlo dostupné)“ boli zaradené do kategórie častejšie kŕmené. Vo všetkých analýzach bolo 8 percent z celkovej vzorky kŕmených raz denne (tabuľky 1 a 2).

V našich analýzach sme upravili pohlavie (kastrovaná sučka alebo kastrovaný pes), vek, plemeno pre čistokrvných psov a telesnú veľkosť (podľa hmotnosti) pre psov zmiešaných plemien. Upravili sme aj to, či majiteľ hlásil denné doplnenie stravy omega-3 (alebo inou mastnou kyselinou) pri všetkých analýzach okrem porúch zubov/ústnej dutiny a porúch pečene/pankreasu, keďže v literatúre existuje dôkaz, že mastné kyseliny môžu mať priaznivé účinky na kognitívne funkcie, kožné, srdcové, gastrointestinálne, renálne, ortopedické a neoplastické výsledky [48–56]. Pre analýzu CSLB sme dodatočne upravili dva faktory, o ktorých sa predpokladá, že ovplyvňujú kognitívne funkcie: úroveň fyzickej aktivity [57] a to, či má pes v minulosti výcvik (podľa primárnej alebo sekundárnej aktivity psa uvedenej majiteľom; napr. výstavné psy, služobné psy a psy trénované na terénne skúšky vs. domáce zvieratá/spoločníci; úplné podrobnosti nájdete v Doplnkových informáciách 2) [58].

Upravili sme pre plemeno čistokrvných psov ako kategorickú premennú. Po kontrole rozloženia hmotnosti podľa plemena sme štandardné pudlíky na analýzu rozdelili do dvoch plemien, veľkých pudlov (hmotnosť väčšia alebo rovná 13,6 kg (30 lb)) a malých pudlov (hmotnosť<13.6  kg (30  lb)). Although there are over  200 breeds represented in DAP data, for each analysis, we only included breeds that had at least one exposed and one unexposed dog because breeds without variance in the exposure cannot inform the exposure-outcome association. We also restricted our analyses to breeds with at least 10 dogs meeting the inclusion criteria. These restrictions reduced the number of breeds to 76 breeds for the CSLB analysis and 100   breeds for the analyses of health outcomes.

Štatistické metódy

Všetky štatistické analýzy boli vykonané v R v.4.{1}}.3 [59]. Vek bol flexibilne modelovaný pomocou prirodzených splajnov s vnútornými uzlami vo veku 7, 10 a 14 rokov pre analýzu CSLB a vnútornými uzlami vo veku 2, 7 a 13 rokov pre zdravotné výsledky [60]. Hmotnosť bola podobne modelovaná pomocou prirodzených drážok s vnútornými uzlami na 14, 48 a 79 libier. V každom prípade sú vnútorné uzly približne na 10., 50. a 90. percentile každej premennej. Preskúmali sme prepracovanejšie modely úprav (napr. 4 alebo 5 vnútorných uzlov), ale tieto neboli podporované metrikami, ako je AIC, a preskúmanie niektorých výsledkov naznačovalo nadmerné vybavenie.

Aby sme sa prispôsobili fyzickej aktivite, vykonali sme analýzu hlavných komponentov na troch premenných aktivity hlásených HLES: úroveň aktivity životného štýlu (uvádzaná ako neaktívna, stredne aktívna alebo veľmi aktívna za posledný rok), priemerná úroveň intenzity aktivity (hlásená ako nízka: chôdza , stredná: behanie alebo energická: šprint, ako je hranie aportu alebo frisbee, a priemerný denný čas strávený fyzickou aktivitou (uvádzaný v hodinách a minútach). Paralelná analýza odporučila ponechať jeden hlavný komponent. Táto hlavná zložka zachytila ​​52 percent rozptylu a zaťaženie prvej hlavnej zložky sme použili ako skóre fyzickej aktivity (PA-skóre). Upravili sme skóre PA pomocou prirodzených spline s vnútornými uzlami na približne 10., 50. a 90. percentile.

Psy zmiešaných plemien boli zaradené ako samostatná kategória plemien a pre psov zmiešaných plemien sme upravili telesnú veľkosť meranú podľa hmotnosti iba vytvorením premennej hmotnosti*MB, kde hmotnosť je hmotnosť psa a MB=1 pre zmiešané plemená psov a MB=0 pre čistokrvných psov. Je to analogické so zoskupovaním psov zmiešaných plemien podľa hmotnosti a zahrnutím každej skupiny ako plemena, s výnimkou toho, že náš prístup používa nepretržité informácie o hmotnosti.

Na analýzu CSLB sme použili lineárnu regresiu a na analýzu všetkých zdravotných výsledkov logistickú regresiu. V prípade lineárnej regresie veľký počet parametrov v modeli v dôsledku 76 plemien nespôsobuje štatistické problémy. Veľké modely sú však problematické pre logistickú regresiu pri použití konvenčného prispôsobenia modelu maximálnej pravdepodobnosti [61]. Preto sme použili logistické modely pomocou podmienenej pravdepodobnosti, kde bola podmienenosť na kategórie plemien. Tento prístup umožnil plemenu byť v modeli bez potreby odhadu 100 parametrov plemena. Vzhľadom na veľkú veľkosť súboru údajov nebolo maximalizovanie presnej podmienenej pravdepodobnosti výpočtovo možné a použili sme Efronovu aproximáciu (uvedenú v doplnkových informáciách 3). Pre všetky regresné analýzy sme použili robustné odhady štandardnej chyby. Všetky testy hypotéz boli obojstranné a neprispôsobili sme sa viacnásobným porovnaniam.

Na analýzu CSLB sme vykonali analýzu citlivosti s vylúčením 2 percent psov so skóre<20  (n=10,288), as these very low scores are implausible and highly suggestive that the owner did not recognize that some survey questions reflected a bidirectional rather than a unidirectional scale.

Na analýzu deviatich kategórií zdravotného stavu sme zopakovali analýzu s použitím iba psov zmiešaných plemien a psov z 10 najbežnejších plemien, pričom sme model vybavili bežnou logistickou regresiou. 10 najbežnejších plemien bolo austrálsky ovčiak, bígle, border kólia, čivava, jazvečík, nemecký ovčiak, zlatý retriever, labradorský retriever, pudlík (veľký) a mopslík (tabuľka 2). Tieto analýzy sme tiež považovali za sekundárne analýzy, aby sme posúdili robustnosť našich zistení vrátane robustnosti vzhľadom na použitie Efronovej aproximácie pre primárne analýzy.

Pre všetkých desať výsledkov sme zopakovali naše primárne analýzy, ale analyzovali sme frekvenciu kŕmenia ako štvorúrovňový neusporiadaný kategorický faktor.

【Ďalšie informácie: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:{0}}】