Štúdium ropného éterového extraktu Cistanche Deserticola
Mar 14, 2022
Chemické zložky a inhibičná aktivita ropného éterového extraktu z Cistanche deserticola na bunkový cyklus
Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
Lu Kang, Liu Hongbing, Gu Qianqun*
(Kľúčové laboratórium morskej medicíny, Ministerstvo školstva, Inštitút morskej medicíny a výživy, Ocean University of China, Qingdao, Shandong 266003)
Cistanchedeserticola YC Ma, tiež známy akoCistanche, je rastlina patriaca do rodu Cistanche z čeľade Lydanaceae. Jeho suchá dužinatá stonka so šupinami sa používa ako tradičná čínska medicína Cistanche deserticola. Ide o originálny produkt zahrnutý v liekopise Čínskej ľudovej republiky. Cistanche je sladkej chuti a teplej povahy. Pôsobí ako "tonizujúci jin obličiek, vyživujúcu esenciu a krv, zvlhčuje črevá a preháňadlo". Môže sa použiť na liečbu mužskej impotencie, ženskej neplodnosti, bolesti v páse a kolenách, suchej zápche atď. [1].
V posledných rokoch tradičná čínska medicínaCistanchepriťahuje pozornosť ľudí vďaka svojmu pozoruhodnému zlepšeniu pamäti, proti starnutiu, únave a posilneniu imunity organizmu. O jeho chemickom zložení a farmakologických účinkoch sa uvádza viac [2, 3]. Prehľad literatúry však ukazuje, že existuje len málo súvisiacich štúdií o čerstvej púštiCistanche, iba Tu Pengfei a ďalší študovali chemické zloženie n-butanolového extraktu z jej kvetov [4]. Pri systematickom štúdiu chemických zložiek čerstvého Cistanche autor zistil, že obojepetroléterový extrakta etylacetátový extrakt majú určité protinádorové účinky. V tomto experimente sa na analýzu a identifikáciu chemického zloženia použila GC-MSpetroléterový extrakta prietoková cytometria sa použila na detekciu jeho inhibičnej aktivity na cyklus na myšie bunky rakoviny prsníka ts FT210.
1 Experimentálna časť
1. 1 Nástroje, činidlá a vzorky
Kombinovaný prístroj GC-M S Britská spoločnosť VG, typ Fiso ns M D800GC /MS. Použitie myších buniek rakoviny prsníka ts-FT210. Prietoková cytometria využíva prietokový cytometer typu Van n-tage od spoločnosti BD v Spojených štátoch a distribúcia buniek v každej fáze bunkového cyklu sa analyzuje a vypočíta pomocou softvéru Mod Fit LT. Fetálne bovinné sérum (FBS) a kultivačné médium RPM I-1640 buniek boli produkované Hyclone (kat. č. STF721) a Gibcobrl, v danom poradí. Propidium jodid (PI) a Triton X-100 vyrábala spoločnosť Sigma. Nové čerstvécistancheliečivý materiál bol zozbieraný v Alxa League vo Vnútornom Mongolsku a bol identifikovaný ako mäsitá stonka so šupinovými listamicistancheC. deserticola YC Ma od pána Liu Hongbinga z Inštitútu morskej medicíny a výskumu potravín na Ocean University of China.
1. 2 Extrakcia vzoriek
Po 450 g čerstvej púšteCistanche, liečivý materiál bol nasekaný, diafiltrovaný s {{0}}} ml petroléteru s rozsahom varu 30-60 stupňa, rozpúšťadlo bolo regenerované pri nízkej teplote a zníženom tlaku a potom vysušené nad bezvodým síran sodný, čím sa získala žltá priehľadná kvapalina, ktorá bola zapečatená a uložená pri -10 Uchováva sa v chladničke pri stupni . Výťažok bol 0,93 percenta.
1.3 GC-MS analýza petroléterového extraktu
Podmienky plynovej chromatografie: Chromatografická kolóna je 30QC2/AC5 kremenná kapilárna kolóna (30 m x 0,32 mm); teplota kolóny je 80-280 stupňov, naprogramovaný nárast teploty je 3 stupne/min; pomer delenia je 30:1; teplota odparovacej komory je 240 stupňov; Predný tlak kolóny je 82,8 kPa; nosným plynom je vysoko čistý N2.
Podmienky hmotnostnej spektrometrie: EI-MS, energia elektrónu 70 eV; teplota iónového zdroja 200 stupňov; prúd vlákna 4,1 A; hmotnostný rozsah 35-450 m/z; perióda skenovania 1 s; Systém LAB-BASE na spracovanie údajov s využitím Spojených štátov amerických Knižnica NBS National Bureau of Standards bola prehľadaná a potvrdená referenciou.
1. 4 Test protinádorovej aktivity
Pozri metódu z literatúry [5] s použitím prietokovej cytometrie na detekciu inhibičnej aktivity cykluCistanchedeserticolapetroléterový extraktna bunkách tsFT210.
2. Výsledky
2. 1 Identifikácia chemického zloženia extraktu z petroléteru
Po analýze a identifikácii kombinovaným prístrojom GC-MS bolo v analyzátore detegovaných celkom 46 píkovpetroléterový extraktzCistanchedeserticola, ktorý bol prehľadaný v knižnici NBS Národného úradu pre štandardy a potvrdený referenciou, a celkovo bolo identifikovaných 25 zlúčenín, ktoré zodpovedajú oblasti píku. Zo 75,03 percent sú výsledky uvedené v tabuľke 1. Výsledky ukázali, že estery a alkány sú hlavnými zložkami petroléterového extraktu Cistanche. Najvyššiu hmotnostnú frakciu tvorí metylester kyseliny 14-metyl-pentadekanovej (13,61 percenta), nasleduje etylester kyseliny hexadekánovej (12,39 percenta) 2,5,6-trimetyloktán. Alkán (7,60 percenta).
2.2 Protinádorová aktivita
Výsledky prietokovej cytometrie ukázali, že petroléterový extrakt zCistanchedeserticola mala zjavnú inhibičnú aktivitu fázy G{0}}/G1 na bunky tsFT210 pri 10 ug/ml (obrázok 1).
Tabuľka 1 Zložkypetroléterový extraktz čerstvej C. deserticola
3. Diskusia
V súčasnosti prebieha výskum biologickej aktivityCistancheje zameraný hlavne na zlepšenie pamäti, proti starnutiu a posilnenie imunitnej funkcie organizmu. Neexistuje žiadna správa o protinádorovom aspekte. V tomto experimente sa prietoková cytometria použila na predbežné vyhodnotenie inhibičnej aktivity na bunkový cyklus čerstvej Cistanche deserticolapetroléterový extraktna bunkový cyklus tsFT210 rakoviny prsníka u myší a na analýzu jeho chemického zloženia použite GC-MS. Medzi petroléterové extrakty zCistanche deserticola, sú to najmä alkány a alkanoátové estery a malý počet fenolov a zlúčenín cyklohexanónu. Protinádorová aktivita týchto zlúčenín ešte nebola opísaná. Preto protinádorové aktívne zložky vpetroléterový extraktzCistanchedeserticola potrebuje ďalší výskum na určenie.
Poďakovanie: GC-MS určil profesor Ding Jingkai, Kunming Institute of Botany.
Referencie
[1] Jiangsu New Medical College. Slovník čínskej medicíny Materia Medi ica (Slovník čínskej medicíny) [M ]. Sh shanghai: Shanghai People e's Publishing House, 1997.
[2] Song ZH, Lei L, Tu P F. Pokroky vo výskume farmakologickej aktivity v rastlináchCistancheHuffing. et Link [J]. Chin Tra dit Herb Drugs (čínska bylinná medicína), 2003, 34( 9): 16-17.
[3] Zhang LH, Du N S. Pokroky vo výskume chemických zložiek v rastlinách HerbaCistanche[J]. Chin Trad it Pat Med (čínska patentová medicína), 2003, 25(4): 323-327.
[4] Tu PF, He YP, Lou Z C. Štúdie o chemických zložkách čerstvých kvetenstiev púštnej žijúcej cisty Anche (Cistanchedeserticola) [J]. Chin Trad it Herb Drugs (čínska bylinná medicína), 1994, 25(9): 451-452.
[5] Liu HB, Cui CB, Cai B a kol. Izolácia, identifikácia a protinádorová aktivita triterpénov z Pterocar ya tonkinesis (francúzsky) Dode [J]. Chin J Med Chem (Chinese Journal of Medicinal Chemistry), 2004, 14(3): 168-170.
Od: Čínske tradičné a bylinné drogy; Ročník 36 Číslo 4. apríla 2005.
