Pohlavné rozdiely v plazmatických autoprotilátkach proti proteínom centrálneho nervového systému u veteránov vojny v Perzskom zálive oproti zdravým a symptomatickým kontrolám
Mar 22, 2022
Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com
Mohamed B. Abou-Donia 1,*, Maxine H. Krengel 2, Elizabeth S. Lapadula 1, Clara G. Zundel 2, Jessica LeClair 3, Joseph Massaro 3, Emily Quinn 3, Lisa A. Conboy 4, Efi Kokkotou 4, Daniel D. Nguyen 5, Maria Abreu 6,7, Nancy G. Klimas 6,7 a Kimberly Sullivan 5,*
1 Katedra farmakológie a biológie rakoviny, Duke University Medical Center, Durham, NC 27710, USA;
2 Neurologické oddelenie, Lekárska fakulta Bostonskej univerzity, Boston, MA 02118, USA;
3 Katedra bioštatistiky, Boston University School of Public Health, Boston, MA 02118, USA;
4 Department of Medicine, Harvard Medical School, Boston, MA 02115, USA;
5 Department of Environmental Health, Boston University School of Public Health, Boston, MA 02118, USA;
6 Dr. Kiran C. Patel College of Osteopathic Medicine, Institute for Neuroimmune Medicine, Nova Southeastern University, Fort Lauderdale, FL 33314, USA;
7 Department of Immunology, Miami VA Medical Center, Miami, FL 33125, USA
Abstrakt:
Veteráni z vojny v Perzskom zálive (GW) v roku 1991 trpeli chorobou vojny v Perzskom zálive (GWI) už takmer 30 rokov. Toto ochorenie zahŕňa viaceré telesné systémy vrátane centrálneho nervového systému (CNS). Diagnostika a liečba GWI je náročná, pretože neexistuje objektívny diagnostický biomarker. Nedávno sme informovali o novo vyvinutom biomarkeri krvi, ktorý rozlišuje GWI od zdravých kontrol GW a symptomatických kontrol so syndrómom dráždivého čreva (IBS) a myalgickou encefalomyelitídou / syndrómom chronickej únavy (ME / CFS). Táto štúdia bola navrhnutá tak, aby porovnala hladiny týchto biomarkerov medzi mužmi a ženami s GWI, ako aj pohlavne špecifické účinky v porovnaní so zdravými veteránmi GW a symptomatickými kontrolami (IBS, ME / CFS). Výsledky ukázali, že muži a ženy s GWI sa líšia v 2 z 10 plazmatických autoprotilátok, pričom muži vykazujú výrazne zvýšené hladiny. Muži a ženy s GWI vykazovali významne odlišné hladiny autoprotilátok v 8 z 10 biomarkerov voči neurónovým a gliovým proteínom v plazme v porovnaní s kontrolami. Stručne povedané, táto štúdia sa zaoberala užitočnosťou použitia plazmatických autoprotilátok pre proteíny CNS na rozlíšenie medzi mužmi a ženami veteránmi s GWI a inými zdravými a symptomatickými kontrolnými skupinami.
Kľúčové slová: CNS autoprotilátka; choroba z vojny v Perzskom zálive; rod; biomarkery; proteíny; myalgická encefalomyelitída/syndróm chronickej únavy; syndróm dráždivého čreva
1. Úvod
Veteráni z vojny v Perzskom zálive (GW) trpeli stavom známym ako choroba z vojny v Perzskom zálive (GWI), ktorá zahŕňa viaceré telesné systémy vrátane centrálneho nervového systému (CNS) [1–3]. Tento chronický stav postihuje približne 250000 GW veteránov vrátane veľkej časti zo 40000 žien, ktoré boli nasadené do vojny. GWI má prekrývajúce sa, ale odlišné symptómy od iných porúch, ktoré postihujú aj ženy, vrátane myalgickej encefalomyelitídy/chronického únavového syndrómu (ME/CFS) a syndrómu dráždivého čreva (IBS). Nedostatok objektívnych diagnostických markerov minimalizoval schopnosť súdržne diagnostikovať a liečiť množstvo symptómov GWI. Nedávno sme hodnotili kandidátsky plazmatický biomarker pre GWI a preukázali sme rozdiely medzi jednotlivcami, ktorí spĺňajú kritériá pre GWI v porovnaní so zdravými GW a neveteránskymi kontrolami s IBS a CFS. Vzhľadom na rozdielne symptómy GWI u mužov a žien bolo naším ďalším cieľom posúdiť možné rozdiely v týchto plazmatických biomarkeroch medzi pohlaviami [4–8]. Určenie, či sa autoprotilátky CNS líšia medzi mužmi a ženami s GWI a ich príslušnými kontrolami, pomôže pri ďalšom spresnení ich diagnostickej užitočnosti ako plazmatických biomarkerov. Ženy, ktoré slúžili v roku 1991 GW, hlásili početné zdravotné problémy, z ktorých mnohé sú špecifické pre pohlavie. Niektoré štúdie naznačili zvýšený výskyt zdravotných problémov žien a infekcií močového mechúra v porovnaní s veteránmi z obdobia GW [9]. Vo Ft. Zistilo sa, že kohorta Devensa (FDC) veteránov GW, žien GW v porovnaní s kontrolnými osobami bez veteránov majú vyššie riziko cukrovky, ale nižšie riziko hypertenzie v porovnaní s národným prieskumom zdravia a výživy (NHANES) vek a pohlavie. zhodná kohorta [8].
Na rozdiel od toho muži s nasadením GW hlásili zvýšený výskyt siedmich chronických zdravotných stavov v porovnaní s mužmi NHANES vrátane výrazne vyššej pravdepodobnosti hlásenia hypertenzie, vysokého cholesterolu, srdcového infarktu, cukrovky, mŕtvice, artritídy a chronickej bronchitídy [8]. Pretože táto štúdia ukázala, že muži GW boli vystavení zvýšenému riziku zdravotných stavov, ktoré sú známymi rizikovými faktormi pre neskoršie kardiovaskulárne a cerebrovaskulárne ochorenia (tj hypertenzia, vysoký cholesterol, diabetes), muži GW môžu vykazovať zvýšenú mieru biomarkerov CNS v porovnaní s ich ženami, veteránkami. náprotivky. V nedávnej štúdii využívajúcej veľkú kohortu biorepozitárov z éry GW (GWEBC) však ženy s nasadením GW výrazne častejšie hlásili symptómy súvisiace s kognitívnymi, neurologickými problémami a problémami s náladou ako ženy z éry GW [4]. Preto ženy GW môžu tiež vykazovať zvýšené biomarkery súvisiace s CNS v porovnaní s inými kohortami žien. Okrem toho pri porovnaní nasadených veteránov GW oproti ženám sa zistilo, že veteránky GW viac využívajú ambulantnú a ústavnú zdravotnú starostlivosť 5 rokov po nasadení [10]. Zistilo sa tiež, že ženy GW majú vyššiu mieru ťažkých a stredne ťažkých prípadov GWI v porovnaní s ich mužskými kolegami [5,11–13]. Niekoľko faktorov môže zodpovedať za pozorované rozdiely medzi pohlaviami v GWI a jednotlivých symptómoch vrátane rozdielov medzi pohlaviami v náchylnosti na expozíciu neurotoxickým látkam v divadle a/alebo vyššej expozícii medzi mužským personálom. Už v roku 1996 sme špekulovali, že chemické expozície v čase GW boli vyvolávajúcim faktorom GWI [14,15].
účinkyextrakt z cistanche tubulosa
V experimentálnych štúdiách sme preukázali, že kombinovaná expozícia pesticídom a pyridostigmíniumbromidu (PB) spôsobila neurotoxické účinky, ktoré interferujú s funkciou neurónových a gliových buniek, čo vedie k dlhotrvajúcim a potenciálne neurodegeneratívnym účinkom [14–16]. Neurodegenerácia zahŕňa smrť neurónových a gliových buniek a uvoľnenie ich obsahu do obehu cez porušenú hematoencefalickú bariéru (BBB), ktorú potom možno detegovať prostredníctvom autoprotilátok CNS v plazme [17]. Už predtým sme ukázali zmeny BBB v našich zvieracích modeloch expozície GWI [18]. Už predtým sme tiež ukázali, že tieto plazmatické markery možno detegovať v nízkych hladinách u jedincov bez signifikantného ochorenia, ale zvyšujú sa u jedincov s väčšou symptomatológiou [16,19]. CNS má dva typy buniek: neuróny a podporné gliové bunky. Neurónové bunky obsahujú niekoľko cytoskeletálnych proteínov vrátane tau a neurofilamentov [20,21]. Spolu s mikrotubulmi vyrobenými z tubulínu tvoria kostru axonálneho cytoskeletu. Tieto proteíny sa podieľajú na axonálnom transporte základných živín, aminokyselín a organel po axóne [22]. Proteíny spojené s mikrotubulami (MAP)-2 a tau podporujú polymerizáciu a stabilizáciu mikrotubulov v axónoch, neurofilamenty s krížovými mostíkmi a mikrotubuly, ktoré sa navzájom spájajú; to pomáha udržiavať cytoskelet pre axonálny transport [23]. Tau proteíny sú lokalizované primárne v axónoch v neurónových bunkách. Podporné gliové bunky, oligodendrocyty v CNS a Schwannove bunky v periférnom nervovom systéme (PNS), produkujú myelínový bázický proteín (MBP) a myelínom asociovaný glykoproteín (MAG), čo sú membránové proteolipidy [24]. Gliové astrocytové proteíny produkujú gliový fibrilárny kyslý proteín (GFAP), zložku cytoskeletu astroglie, ktorý je vysoko špecifický pre CNS a po poškodení CNS sa uvoľňuje z astrocytu do extracelulárneho priestoru [25]. Proteín S100B viažuci vápnik je tiež uvoľňovaný astrocytickými gliovými bunkami (obrázok 1).
Mnohé z týchto neuronálnych cytoskeletálnych a najmä gliových proteínov sa nachádzajú iba v CNS a ich autoprotilátky sa nachádzajú v periférnej krvi, ak tieto proteíny v určitom bode unikli cez BBB a imunitný systém na ne vytvorí autoprotilátkovú odpoveď [18,26]. . Časový priebeh tohto porušenia BBB sa u týchto jedincov mohol vyskytnúť niekedy v minulosti, čo viedlo k úniku týchto proteínov z neurónov a / alebo glií. Takže aj keď sa S100B, marker súčasného kompromisu BBB, nelíšil v našej predchádzajúcej štúdii u veteránov s GWI, neznamená to, že porušenie BBB sa nevyskytlo niekedy v minulosti, čo by spôsobilo trvalé detegovateľné autoprotilátky proti týmto proteínom CNS v krvi. . Brain Sci. 2020, 10, x PRE PEER REVIEW 3 z 16, ktorý je vysoko špecifický pre CNS a po poranení CNS sa uvoľňuje z astrocytu do extracelulárneho priestoru [25]. Proteín S100B viažuci vápnik je tiež uvoľňovaný astrocytickými gliovými bunkami (obrázok 1). Mnohé z týchto neuronálnych cytoskeletálnych a najmä gliových proteínov sa nachádzajú iba v CNS a ich autoprotilátky sa nachádzajú v periférnej krvi, ak tieto proteíny v určitom bode unikli cez BBB a imunitný systém na ne vytvorí autoprotilátkovú odpoveď [18,26]. . Časový priebeh tohto porušenia BBB sa u týchto jedincov mohol vyskytnúť niekedy v minulosti, čo viedlo k úniku týchto proteínov z neurónov a / alebo glií. Takže aj keď sa S100B, marker súčasného kompromisu BBB, nelíšil v našej predchádzajúcej štúdii u veteránov s GWI, neznamená to, že porušenie BBB sa nevyskytlo niekedy v minulosti, čo by spôsobilo trvalé detegovateľné autoprotilátky proti týmto proteínom CNS v krvi. .
Táto štúdia skúma účinky pohlavia na prítomnosť cirkulujúcich autoprotilátok triedy imunoglobulínu G (IgG) proti CNS špecifickým neurónovým a gliovým proteínom v plazme GW veteránov s a bez GWI, ako aj u symptomatických neveteránskych kontrol (IBS, a ME/CFS). Konkrétne sme predpokladali, že muži a ženy veteráni s GWI sa budú navzájom líšiť v distribúcii proteínov autoprotilátok CNS a že muži a ženy GW budú mať vyššie hladiny proteínov autoprotilátok CNS ako iné symptomatické skupiny s chronickými ochoreniami vrátane IBS a ME/CFS. . V dôsledku expozície počas vojny mohli mať všetci veteráni GW určitú úroveň narušenia BBB, čo dokazujú autoprotilátky CNS v plazme, ale predpokladali sme, že tí s GWI budú mať vyššie hladiny týchto krvných markerov.
2. Materiály a metódy
2.1. Študijná populácia
Metódy sú rovnaké ako v našej nedávno publikovanej štúdii [19]. Stručne, plazmu od veteránov GW poskytlo Konzorcium pre výskum chorôb z vojny v Perzskom zálive (GWIC), štúdia Dynamické modelovanie GWI z Nova Southeastern University, štúdia financovaná Kongresom riadeným lekárskym výskumným programom (CDMRP) pre Nadáciu pre záležitosti veteránov na južnej Floride. and Education, Inc., akupunktúrnu liečbu a biorepozitár štúdie dráždivého čreva na Harvarde/BIDMC. Schválenie Institutional Review Board (IRB) bolo získané od Bostonskej univerzity, Nova Southeastern University v Miami VAMC a Harvardskej univerzity. Rovnaké štandardné operačné postupy sa použili pre každé miesto štúdie na flebotómiu, separáciu plazmy a alikvóty. Vzorky plazmy sa získali od jedincov nalačno a skladovali sa pri -80 ◦C. Až do analýz zostali zmrazené. Účastníci súhlasili so svojimi príslušnými štúdiami s použitím usmernení Medzinárodnej konferencie o dobrej klinickej praxi (ICH GCP). Na určenie prípadov GWI a kontrol sa použili Kansasské kritériá GWI [27]. Kritériá GWI v Kansase vyžadujú, aby veteráni GW podporovali symptómy v aspoň 3 zo 6 domén symptómov (únava, bolesť, kognitívne/neurologické/náladové, gastrointestinálne, respiračné a kožné). Kontroly veteránov zahŕňali nasadených veteránov z GW 1991, ktorí nespĺňali Kansas GWI alebo vylučovacie kritériá. Kritériá vylúčenia GWI v Kansase vylučujú jednotlivcov, ktorí uvádzajú, že im bol diagnostikovaný iný zdravotný stav, ktorý by mohol vysvetľovať ich chronické zdravotné symptómy, vrátane veteránov s anamnézou predchádzajúceho centrálneho nervového systému alebo závažných psychiatrických porúch, ktoré môžu ovplyvniť kognitívne funkcie (napr. epilepsia, mŕtvica, mozog nádor, skleróza multiplex, Parkinsonova choroba, Alzheimerova choroba, schizofrénia). Vzorky plazmy zo symptomatických kontrol pochádzali z predchádzajúcich štúdií jedincov s ME/CFS a IBS [28,29]. Prípady ME/CFS boli stanovené pomocou kritérií Centra pre kontrolu a prevenciu chorôb (CDC) z roku 1994 [28]. Účastníci IBS splnili kritériá Rím III [29]. Úplné kohorty boli opísané v predchádzajúcich článkoch (GWIC, CFS, IBS, podvzorka GWIC [16,30–33]).
2.2. Materiály
Zdroje bielkovín boli tiež opísané skôr [19]: Tubulín (ľudský rekombinantný, Prospec kat. č. PRO-982), Proteín 2 spojený s mikrotubulami (MAP-2, ľudský rekombinantný, Origene, kat. č. TP316775, ľudský rekombinantný), Tau-381 (ľudský rekombinantný, Millipore kat. č. AG952), neurofilamentový proteín (NFP, Prospec, kat. č. PRO-523), kalmodulín kináza II (ľudská rekombinantná, CaMKII, Novus Biologické látky, kat. č. H000000H15-P01), alfasynukleín (ľudský rekombinantný, AnaSpec kat. č. AS-55555), myelínový základný proteín (MBP, človek, Fitzgerald kat. č. 30R- AM030), myelínom asociovaný glykoproteín (MAG, ľudský rekombinantný, sinobiologická kat. 131-86 H02H), gliový vláknitý kyslý proteín (GFAP, ľudský, CalBiochem kat. č. 345996), S100B proteín (ľudský, Millipore kat. č. 30R -AS002). Kozí antihumánny IgG konjugovaný s chrenovou peroxidázou a vylepšené chemiluminiscenčné činidlo sa získali od Amersham Pharmacia Biotech (Piscataway, NJ, USA). Gély dodecylsulfátu sodného (SDS), 2–20 percentný gradient (8 x 8) a 15 mM tris-glycín sa získali od spoločnosti Invitrogen (Carlsbad, CA, USA). Všetky ostatné materiály boli zakúpené od Amersham.
prínos extraktu z cistanche tubulosa
2.3. Etické vyhlásenie
Schválenie na použitie uskladnených vzoriek krvi zo všetkých miest štúdie pre túto štúdiu bolo získané od Inštitucionálneho revízneho výboru pre klinické skúšania pri Duke University Health System dňa 10. 9. 2017 a od Inštitucionálneho revízneho výboru Bostonskej univerzity Medical Campus 19. 1. 2018. Špecifické komponenty protokolu pre Duke University boli: ID protokolu: Pro00003202, Referenčné ID: 335940, Hlavný riešiteľ: Mohamed Abou Donia, Názov protokolu: 'Poranenie nervového systému'. Špecifické komponenty protokolu pre Bostonskú univerzitu boli ID protokolu: H-34334, Referenčné ID: 1288716, Hlavný riešiteľ: Kimberly Sullivan, Názov protokolu: „Nové biomarkery autoprotilátok v sére a cerebrospinálnej tekutine u veteránov s vojnovou chorobou v Perzskom zálive“. Vzorky plazmy boli zdieľané z úložísk schválených IRB zo štúdií na Bostonskej univerzite (IRB č. H-32768), NOVA Southeastern University/Miami VA Medical Center (IRB č. 4987,76 a IRB č. 4987,75), Beth Israel Hospital/Harvard University ( IRB č. 2011P-000124) a Škola akupunktúry v Novom Anglicku (IRB č. 09-204).
2.4. Postupy
2.4.1. Plazmové procedúry
Všetky miesta sa riadili rovnakým protokolom: pre venepunkciu, manipuláciu s krvou, separáciu plazmy, alikvóty a skladovanie pri -80 ◦C. Rovnaký protokol o flebotómii a vzorke bol distribuovaný písomne na všetky miesta a zahŕňal pôst pred odberom krvi ráno. Všetky analyzované vzorky boli základné krvné vzorky odobraté pred intervenčnou liečbou. Vzorky použité v tejto štúdii neboli predtým rozmrazené a vizuálnou kontrolou boli bez hemolýzy.
2.4.2. Western Blot Assay
V tejto štúdii sa použila analýza Western blot na stanovenie autoprotilátok proti špecifickým proteínom vo vzorke plazmy prípadov GWI a zdravých a symptomatických kontrol podľa pohlavia. Tento test umožnil stanovenie autoprotilátok a súvisiacich izoforiem antigénu. Ako už bolo opísané, každá vzorka plazmy sa analyzovala trojmo [19]. Všetky proteíny boli nanesené v množstve 10 ng/dráha okrem IgG, ktorý bol nanesený ako 100 ng/dráha. Proteíny boli denaturované a podrobené elektroforéze na SDS-PAGE (gradient 4 percentá až 20 percent) zakúpenom od Invitrogen (Carlsbad, CA, USA). Na každú vzorku séra sa použil jeden gél. Proteíny sa preniesli na polyvinylidénfluoridové (PVDF) membrány (Amersham). Nešpecifické väzbové miesta boli blokované Tris-tlmeným fyziologickým roztokom Tween (TBST) (40 mM Tris (pH 7,6), 300 mM NaCl a 0,1 % Tween 20) obsahujúcim 5 % beztukového sušeného mlieka počas 1 hodiny pri 22 °C. Membrány sa inkubovali so vzorkami séra pri riedení 1:100 v TBST s 3 percentami odtučneného sušeného mlieka cez noc pri 4 °C. Po piatich premytiach v TBST boli membrány inkubované s 1:2000 zriedeným kozím anti-ľudským IgG konjugovaným s chrenovou peroxidázou (Amersham). Membrány boli vyvinuté zosilnenou chemiluminiscenciou s použitím protokolu výrobcu (Amersham) a záznamníka s variabilným modelom Typhoon 8600 (GE Lifesciences, Marlborough, MA, USA). Intenzita signálu bola kvantifikovaná pomocou softvéru na analýzu obrazu Bio-Rad verzie 4.5 (Hercules, CA, USA). Všetky testy boli vykonané s výskumníkmi zaslepenými voči kontrole prípadov a rodovému statusu vzoriek.
2.4.3. Špecifickosť plazmatických autoprotilátok
Predtým sme overili špecificitu autoprotilátok v plazme a sére vykonaním testu kompetitívneho peptidu/antigénu, v ktorom boli sérum a plazma obohatené o cieľový proteín alebo peptid [34]. Sérum z náhodných zdravých kontrol bolo zmiešané s tau, MAP2 alebo MBP alebo bez nich. Proteínová zmes sa centrifugovala pri 15, 000 otáčkach za minútu, aby sa vyčerpali všetky imunitné komplexy. Supernatanty sa potom opatrne odstránili a použili na Western blotting. Špecifickosť autoprotilátok proti všetkým testovaným proteínom bola potvrdená v následnej štúdii [35].
2.5. Štatistiky
Súhrnné údaje sú prezentované ako priemer ± SD pre kontinuálne premenné a počet a percento účastníkov v každej kategórii pre kategorické premenné. Demografické hodnoty subjektov boli porovnané s kontrolnými skupinami pomocou Studentovho t-testu kontinuálneho a chí-kvadrátu pre kategorické premenné. Priemerné hodnoty autoprotilátok GWI mužov a žien boli porovnané pomocou analýzy kovariancie (ANCOVA), upravenej podľa veku a rasy. Rasa sa používala dichotomicky (kaukazská alebo nie). Ďalej sa porovnávali priemerné hodnoty GWI žien so zdravými ženami GW a potom sa opakovali pre GWI mužov a GW zdravých mužov. Nakoniec, priemerné hodnoty GWI žien boli porovnané s kombinovanými 3 kontrolnými skupinami (GW kontroly, IBS, ME/CFS) pomocou ANCOVA, s úpravou podľa veku a rasy; táto analýza sa potom opakovala pre mužov. Obojstranná p-hodnota < 0,05="" bola="" prijatá="" ako="" štatisticky="" významná="" pre="" všetky="" analýzy="" a="" analýzy="" neboli="" upravené="" pre="" viacnásobné="" porovnania.="" analýzy="" sa="" uskutočnili="" pomocou="" sas="" verzie="" 9.4="" (sas="" institute="" inc.="" 2013.="" cary,="" nc,="">
prínos extraktu z cistanche tubulosa
2.6. Výpočty
Meranie optickej hustoty pre prípady a kontroly sa vydelilo koncentráciou sérového IgG; táto hodnota pre každý subjekt bola normalizovaná na kontroly a vyjadrená ako zmena od zdravých kontrol. Preto sú výsledky vyjadrené ako priemerné hodnoty trojnásobného testu arbitrárnych jednotiek optickej hustoty normalizovaných na optickú hustotu IgG v porovnaní so zdravými kontrolami.
2.7. CNS Autoprotilátkový index (CAI)
Tento index určuje celkový neurodegeneratívny stav jedinca na základe hladiny autoprotilátok v plazme. Vypočíta sa sčítaním všetkých hodnôt autoprotilátok pre každý nervový proteín a potom vydelením súčtu počtom použitých autoprotilátok. Nakoniec sa hodnota vynásobí 10, aby sa získalo ľahké skóre CAI, ako sa predtým uvádzalo pod predchádzajúcim názvom index neurodegenerácie [19].
3. Výsledky
3.1. Demografické údaje účastníkov
Študijná vzorka zahŕňala celkovo 171 veteránov s GWI (137 mužov, 34 žien), celkom 56 GW mužských zdravých kontrol a 4 GW ženy veteránov zdravých kontrol, celkom 3 mužov a 32 žien IBS kontrol a celkovo 5 mužov a 45 žien CFS symptomatických kontrol (tabuľka 1). Niektoré zo skupín (GWI mužov verzus ženy GWI a GWI verzus všetky kombinované kontroly) sa významne líšili vo veku a rase (kaukazskej alebo inej), takže všetky ďalšie analýzy kontrolovali tieto demografické premenné.
Táto štúdia uvádza výsledky použitia našich novo vyvinutých plazmatických neurodegeneratívnych biomarkerov na rozlíšenie mužov a žien, ktorí slúžili v GW 1990/1991 a vyvinuli symptómy GWI alebo zostali zdraví. Okrem toho sa vykonali analýzy na zistenie rozdielov medzi ženami s GWI oproti ženám GW a potom kombinovanou kontrolnou skupinou žien (zdraví veteráni GW, IBS, ME/CFS) a medzi mužmi s GWI vs. GW zdravými mužmi a potom s kombinovanou kontrolná skupina mužov. Hladiny 10 cirkulujúcich autoprotilátok proti nervovým proteínom boli analyzované v plazme mužov a žien veteránov s GWI, zdravých mužov a žien GW a symptomatických mužov a žien s CFS a IBS, ktoré boli použité ako kontroly.
3.2. Účinky pohlavia na hladiny autoprotilátok proti plazmatickým nervovým proteínom
3.2.1. Výsledky autoprotilátok analyzované podľa pohlavia pre prípady GWI a GW len zdravé
Táto štúdia zahŕňala 171 vzoriek plazmy od veteránov s GWI, vrátane 137 (80,2 percenta ) mužov (priemerný vek 49.{5}}rokov) a 34 žien (19,9 percenta) (s priemerným vekom 46,9 rokov) (tabuľka 1 ). Rozdiely medzi mužmi a ženami s ohľadom na autoprotilátky v plazme v rámci skupín s GWI boli také, že muži s GWI vykazovali významne vyššie hladiny tubulínu a MAG v porovnaní so ženami veteránkami s GWI (tabuľka 2, obrázok 2). Neexistovali žiadne protilátky, kde by ženy mali vyššie priemery ako muži. Porovnali sme tiež 56 GW zdravých mužov (priemerný vek 50,5 roka) so 4 GW zdravými ženami (priemerný vek 56,5 roka). Hoci nám chýbala štatistická sila, nezistili sa žiadne významné rozdiely medzi mužskými a ženskými zdravými kontrolami GW na žiadnej z autoprotilátok (údaje nie sú uvedené).
3.2.2. Výsledky autoprotilátok v plazme veteránov s GWI oproti zdravým veteránom a potom žien s GWI oproti zdravým veteránom
Druhá analýza porovnávala mužských veteránov s GWI (N=137) so zdravými mužmi GW (N=56) a ženami GWI (N=34) so zdravými ženami GW (N=4 ). V porovnaní so zdravými mužmi mali muži s GWI významne vyššie hodnoty autoprotilátok pre 9 z 10 autoprotilátok s výnimkou S100B. V porovnaní so zdravými ženami mali ženy s GWI signifikantne vyššie hodnoty autoprotilátok pre 2 z 10 autoprotilátok, vrátane GFAP a tubulinu (tabuľka 3).
3.2.3. Výsledky autoprotilátok v plazme mužov GWI veteránov verzus všetky kontroly mužov a žien GWI veteránov verzus všetky kontroly žien
Tretia analýza porovnávala mužských veteránov s GWI (n {{0}}) a kombinovala IBS, ME/CFS a zdravých kontrolných GW veteránov (n=64) a veteránky s GWI (n=34) a kombinované IBS, ME/CFS a GW veteránky s kontrolou zdravia (n=81) (tabuľka 4). V porovnaní s čistou mužskou kontrolou vykazovali muži s GWI významne vyššie (p < 0,01)="" priemerné="" hladiny="" 9="" z="" 10="" autoprotilátok="" proti="" nervovým="" proteínom="" (tubulín,="" tau,="" map-2,="" mbp,="" nfp,="" mag,="" camkii,="" -syn="" a="" gfap).="" pre="" s100b="" nebol="" pozorovaný="" žiadny="" významný="" rozdiel.="" ženy="" veteránky="" s="" gwi="" vykazovali="" významne="" zvýšené="" (p="">< 0,01)="" priemerné="" hladiny="" 8="" z="" 10="" autoprotilátok="" v="" porovnaní="" s="" kombinovanou="" ženskou="" kontrolnou="" skupinou="" (ibs,="" me/cfs,="" zdravé="" kontrolné="" veteránky="" gw)="" vrátane="" tubulínu,="" tau,="" map{{17}="" },="" mbp,="" mag,="" nfp,="" camkii="" a="" -syn="" (tabuľka="">
3.2.4. Hodnoty CAI podľa pohlavia u mužov a žien Prípady GWI verzus kontroly mužov a žien
Keď sa všetky autoprotilátky skombinovali do CAI skóre, muži s GWI mali najvyššie hodnoty celkových kombinovaných autoprotilátok, ako naznačuje skóre CAI 41,1, a ženy s GWI vykazovali skóre CAI 32,4. Tieto hodnoty sa štatisticky významne líšili podľa ANCOVA, upravením podľa veku a rasy (p=0.007). Skóre CAI kontrolných mužov GW malo priemer 21,4, čo bolo štatisticky nižšie ako muži GWI (p < 0.0001)="" (obrázok="" 3).="" skóre="" cai="" kontrolných="" žien="" gw="" malo="" priemerné="" skóre="" 12,0,="" čo="" bolo="" štatisticky="" nižšie="" ako="" u="" žien="" gwi="" (p="">< 0,021).="" kombinovaná="" mužská="" kontrolná="" skupina="" mala="" priemerný="" cai="" 21,5,="" čo="" bolo="" štatisticky="" významne="" nižšie="" ako="" gwi="" mužská="" skupina="" (p="">< 0,0001).="" okrem="" toho="" kombinovaná="" kontrolná="" skupina="" žien="" mala="" priemerný="" cai="" 18,7,="" čo="" bolo="" tiež="" významne="" nižšie="" ako="" skupina="" žien="" s="" gwi="" (p="">< 0,0001).="" v="" tejto="" štúdii="" naše="" výsledky="" mužov="" aj="" žien="" s="" gwi="" ukázali,="" že="" ich="" hodnoty="" cai="" boli="" vyššie="" ako="" u="" 90="" percent="">
4. Diskusia
Táto štúdia s použitím našich predtým overených biomarkerov autoprotilátok CNS v plazme ukazuje, že medzi mužmi a ženami veteránmi s GWI bol rozdiel, pričom mužskí veteráni mali významne vyššie hladiny 2 z 10 autoprotilátok (tubulín, MAG), ktoré súvisia s axonálnymi a funkcie oligodendrocytov (obrázok 2). Pri kombinovaní všetkých autoprotilátok do CNS autoprotilátkového neurodegeneratívneho indexu (CAI) je významný
bol pozorovaný rozdiel medzi mužmi s GWI a ženami s GWI, takže muži s GWI mali väčšiu celkovú proteínovú záťaž autoprotilátkami a významne vyššiu hodnotu CAI. Naša druhá sada analýz porovnávala veteránov s GWI so zdravými kontrolami mužov GW a potom opakovala analýzy pre veteránky s GWI v porovnaní so zdravými ženami GW. Naše ďalšie analýzy porovnávali mužských veteránov s GWI s výlučne mužskými kontrolami z našej predchádzajúcej štúdie (zdraví veteráni GW, neveteráni s IBS alebo ME/CFS) [19]. Potom sme vykonali rovnaké analýzy porovnávajúce ženy veteránky s GWI s kombinovanou čistou ženskou kontrolnou skupinou (neveteránky s IBS a ME / CFS). Výsledky ukázali, že muži s GWI mali významne vyššie hladiny autoprotilátok pre 9 z 10 autoprotilátok v porovnaní so zdravými mužskými veteránmi GW alebo s kombinovanou mužskou kontrolnou skupinou.
Ženy s GWI vykazovali signifikantne vyššie hodnoty pre 2 z 10 autoprotilátok v porovnaní so ženami zdravými veteránmi GW a s 8 z 10 autoprotilátok v porovnaní s ich príslušnou kombinovanou kontrolnou skupinou žien (neveteránky s IBS a ME/CFS). Analýzy CAI porovnávajúce GWI mužov s ich mužskou kontrolnou skupinou a GWI žien s ich príslušnou kontrolnou skupinou tiež ukázali významne vyššie hodnoty pre GWI mužov a ženy, s dvojnásobnými hodnotami v porovnaní s príslušnými kontrolami. Tieto výsledky sa pridávajú k našim predchádzajúcim zisteniam, ktoré naznačujú, že použitie hranice 30 alebo viac v skóre CAI by rozlišovalo medzi GWI a inými chronickými poruchami. Tieto výsledky naznačujú, že táto hranica zodpovedá mužom aj ženám veteránom s GWI. Hoci muži a ženy veteráni s GWI mali vyššie hladiny autoprotilátok ako ich príslušné kontrolné skupiny, líšili sa od seba iba dvoma autoprotilátkovými proteínmi CNS. Celkové kombinované skóre CAI však malo výrazne vyššiu hodnotu pre mužov s GWI. Dva významne odlišné proteíny zahŕňali tubulín a MAG, ktoré súvisia s fungovaním axónov a oligodendrocytov, ktoré sú spojené s anamnézou miernych traumatických poranení mozgu (mTBI) a vystavením chemickým zbraniam. Tieto výsledky korešpondujú s našimi predchádzajúcimi štúdiami, ktoré ukazujú zvýšené miery vystavenia mTBI a chemickým zbraniam počas vojny, najmä u mužských veteránov s GWI [30,36,37].
V skutočnosti táto hypotéza viacnásobného zásahu naznačuje, že tí, ktorí sú vystavení mTBI aj chemickým zbraniam, by hlásili viac chronických zdravotných symptómov, ktoré môžu súvisieť s týmito axonálnymi a myelínovými patobiologickými markermi. V súlade s tým Carney a kol. porovnávali bojové skúsenosti, pracovné a iné služby súvisiace s expozíciou a zdravotnou starostlivosťou mužov a žien veteránov GW a uvádzali podobné vojenské skúsenosti, ale s mužskými veteránmi, ktorí sa častejšie zúčastňujú na aktivitách súvisiacich s bojom. Nezistili sa však žiadne významné rozdiely medzi pohlaviami v expozícii rozpúšťadlám/petrochemickým látkam, infekčným chorobám, neurotoxínom, tepelnému stresu, traume alebo žiareniu [38]. Okrem toho sa veteránky s GWI líšili od zdravých kontrol GW žien v dvoch markeroch, vrátane gliového markera (GFAP) a neuronálneho cytoskeletálneho markera (Tubulin). Tieto výsledky naznačujú, že sa zdá, že ženy s GWI vykazujú viac neuronálnych cytoskeletálnych a neurozápalových zmien v porovnaní so zdravými kontrolami GW alebo ženami s IBS alebo ME/CFS. Muži veteráni s GWI sa líšili od zdravých mužov GW s vyššími hodnotami všetkých autoprotilátok s výnimkou akútneho gliálneho BBB markera S100B a hodnoty CAI, ktorá bola dvakrát vyššia ako u kontrol.
Keď boli ženy s GWI porovnané s kombinovanou kontrolnou skupinou, vykazovali vyššie hladiny autoprotilátok na všetkých markeroch okrem gliových markerov GFAP a S100B. Opäť bola ich hodnota CAI takmer dvojnásobná v porovnaní s kombinovanými kontrolami. Podobne ako v predchádzajúcej analýze sa mužskí veteráni s GWI nelíšili od svojich príslušných kontrol pre aktiváciu glií a akútny BBB marker S100B. To naznačuje, že mužskí veteráni GWI môžu vykazovať viac chronickej aktivácie glií, poškodenia neurónov a neurozápalu ako ich mužské zdravé a symptomatické náprotivky s IBS a ME/CFS, pretože S100B je markerom súčasného narušenia BBB a GFAP je markerom súčasného neurozápalu. [39,40]. Je to preto, že GFAP je vylučovaný aktivovanými astrocytmi, čo vedie k neurozápalu [41–43]. Pokiaľ ide o integráciu našich zistení do širšieho rozsahu výskumu GW relevantného pre rozdiely medzi pohlaviami, ukázalo sa, že existujú rozdiely v imuno-zápalových markeroch a v celkovej miere zdravotných symptómov medzi veteránmi GW a ženami [5,8,13 ,44–46]. Súčasná štúdia dopĺňa literatúru tým, že GW veteráni majú vyššie celkové hodnoty autoprotilátok (hodnotené pomerom CAI) a že zistenia sú v súlade s mužmi a ženami, u ktorých sa potenciálne vyskytujú zvýšené autoprotilátky v podobnej miere, ale s menšou zvýšenie autoprotilátok u žien spojené s väčšou symptómovou záťažou. Tieto výsledky naznačujú, že je zaručená ďalšia štúdia citlivosti CAI cutoff 30 pre mužov aj ženy veteránov s GWI. Autoprotilátky proti nervovým proteínom okrem toho, že sú krvnými biomarkermi, sú tiež indikáciou neurodegenerácie a môžu vysvetliť mechanizmy mozgových ochorení a účinky starnutia [26,47].
výhody extraktu z cistanche tubulosa
V súčasnosti sú jedinými konzistentnými rizikovými faktormi pre GWI chemická expozícia a anamnéza mTBI [30,36,37,48–51]. Tieto chemikálie zahŕňajú pyridostigmín bromid, pesticídy vrátane insekticídov permetrín a lindán, ako aj repelent proti hmyzu DEET (N,N-dietyl-m-toluamid), organofosfátové (OP) insekticídy a nervové plyny, sarín a cyklosarín, ktoré sú teraz o ktorých je známe, že nepriaznivo ovplyvňujú CNS nevýznamné alebo kombinované dávky [3,14,15,48,51–58]. Výskumy mechanizmov, ktorými zlúčeniny OP spôsobujú neurodegeneráciu, preukázali, že OP zvyšujú aktivitu a expresiu kalcium-kalmodulínkinázy II (CaMKII), ktorá spôsobuje hyperfosforyláciu nervových proteínov, čo vedie k ich agregácii a spomaleniu axonálneho transportu, čo vedie k smrti neurónových buniek. [51,59–62]. V súlade s tým je naše predchádzajúce zistenie, že posádky leteckých spoločností, ktoré boli vystavené OP, si vyvinuli autoimunitné protilátky proti nervovým proteínom [34]. Zvýšené autoprotilátky proti neurónovým proteínom, ako sú Tau, NFP, MAG, MBP a GFAP, sú v súlade so štúdiou zobrazovania mozgu v inej skupine posádok leteckých spoločností, ktorá preukázala zníženú mikroštruktúru bielej hmoty mozgu a cerebrálnu perfúziu, čo môže byť potenciálnymi príčinami kognitívnych porúch a deficity nálady hlásené posádkami lietadiel [63]. Význam tohto zistenia je, že GFAP je marker aktivácie astrocytov a astrocyty môžu priamo interagovať a obmedzovať vaskulatúru mozgu vrátane kapilár, ktoré sa podieľajú na cerebrálnej perfúzii a neurozápale. Sťažnosti na zdravotné symptómy hlásené veteránmi GW sú v súlade s následkami po expozícii pesticídom, ako sú organofosfáty, pyretroidy a DEET [51,64,65].
Zvýšené množstvo autoprotilátok proti neurofilamentu, tau, tubulínu a myelínovým základným proteínom, ktoré sú biomarkermi pre myelínové a neuronálne cytoskeletálne poruchy vrátane nestability mikrotubulov, axonálnej degenerácie a zmeneného axonálneho transportu, boli nájdené v mnohých bunkových a zvieracích štúdiách modelov toxických látok vyvolaných GWI [66–74]. Naše výsledky sú v súlade s predchádzajúcimi správami, ktoré ukazujú zvýšené množstvo rôznych autoprotilátok v menšej a potom väčšej štúdii vzoriek krvi veteránov GW [16,19,75–78]. Pokiaľ je nám známe, toto je prvá štúdia na hodnotenie pohlavných účinkov týchto autoprotilátok u veteránov s GWI v porovnaní so zdravými a symptomatickými porovnávacími skupinami. Stručne povedané, výsledky súčasného skúmania vplyvu pohlavia na krvné biomarkery ukázali, že hladiny autoprotilátok boli signifikantne vyššie u mužov aj žien GW veteránov v porovnaní s kontrolami [19]. Keď bol rozdiel medzi pohlaviami, muži veteráni s GWI vykazovali vyššie hladiny autoprotilátok, ako aj celkové skóre CAI ako ženy veteránky s GWI. To je v súlade so situáciou vo vojnovom divadle, že hoci muži a ženy mali podobné vojenské skúsenosti, muži sa častejšie zúčastňovali bojov a mali vyššiu mieru mTBI [30,36–38]. To neznamená, že ženy-veteránky nemajú zvýšené hladiny iných symptómov tejto multifaktoriálnej poruchy, ale skôr to, že muži-veteráni zrejme vykazujú viac rozdielov v autoprotilátkach CNS ako ženy-veteránky, ako naznačujú vyššie celkové hodnoty CAI.
Obmedzenia
Ako väčšina štúdií, aj naša štúdia mala obmedzenia. V niektorých analýzach sme mali malé skupiny, ktoré znížili našu schopnosť vidieť rozdiely medzi skupinami. To platilo najmä pre porovnávanie žien. Pretože hlavným zameraním tejto štúdie bolo posúdiť GWI vs. symptomatické kontrolné skupiny, nemali sme na porovnanie zdravú kontrolnú skupinu bez veteránov, čo mohlo poskytnúť väčšiu jasnosť výsledkov, ak by bola táto skupina zahrnutá. V tejto štúdii sme použili Kansaské kritériá pre GWI, ktoré by mali vylúčiť známe prípady porúch vrátane Alzheimerovej choroby (AD), Parkinsonovej choroby (PD) a iných chronických ochorení, ktoré mohli zodpovedať za ich chronické symptómy [27]. V tejto štúdii sme preukázali asociácie medzi autoprotilátkami, najmä u veteránov GWI, v porovnaní so zdravými a symptomatickými kontrolami stratifikovanými podľa pohlavia. Časový vzťah medzi týmito stavmi a produkciou autoprotilátok však zostáva nejasný. Je potrebný ďalší výskum, aby sa zistilo, či ide o krvné proteíny CNS z expozície pred 30 rokmi alebo či prebiehajú zmeny CNS, ktoré vyvolávajú tieto autoprotilátkové proteíny. Ďalšie väčšie štúdie so ženami-veteránmi by tiež pomohli ďalej potvrdiť patobiologický vplyv GWI na ženy-veteránky. Hlavnou silnou stránkou našej štúdie je, že predstavuje zdravé aj symptomatické skupiny veteránov GW, ako aj symptomatické neveteránske kontroly s ME/CFS alebo IBS. To naznačuje, že muži aj ženy veteráni s GWI sa líšia nielen od svojich zdravých kontrol veteránov GW, ale majú aj viac rozdielov v CNS ako iné skupiny mužov a žien s chronickými multisymptómovými ochoreniami. Okrem toho sa analýzy autoprotilátok CNS vykonali s laboratórnym personálom, ktorý nevidel stav prípadu všetkých účastníkov.
5. Závery
Tento rok si pripomíname 30. výročie vojny v Perzskom zálive v rokoch 1990/1991. Počas väčšiny tohto obdobia bol nedostatok diagnostických nástrojov na presnú diagnostiku poruchy, čo bránilo presnej diagnóze a veľmi potrebnej liečbe veteránov. Naše laboratórium bolo jedným z prvých, ktorí navrhli a zdokumentovali, že GWI súvisí s chemickými expozíciami počas vojny a že tieto expozície nepriaznivo ovplyvnili CNS. Okrem toho sme zdokumentovali rozdiely v autoprotilátkach medzi GWI a GWhealthy a symptomatickými kontrolami. Táto štúdia dokumentuje, že u týchto skupín existuje sexuálny efekt u mužov a žien s GWI, ktorí vykazujú vyššie hladiny autoprotilátok ako ich príslušné kontrolné skupiny, au mužov – veteránov s GWI, ktorí vykazujú najväčšiu záťaž autoprotilátkami. Po ďalšom overení dúfame, že naše novo vyvinuté súhrnné skóre indexu neurodegenerácie CNS autoprotilátok (CAI) s hodnotou 30 alebo viac bude možné použiť na vývoj objektívnych diagnostických markerov GWI a na porovnanie účinnosti liečebných pokusov u mužov a žien, veteránov GW.
Toto je náš produkt proti únave! Pre viac informácií kliknite na obrázok!
Referencie
1. Racgwi, R. Choroba z vojny v Perzskom zálive a zdravie veteránov vojny v Perzskom zálive: Odporúčania pre výskum; Úrad vlády USA pre tlač: Washington, DC, USA, 2008.
2. Racgwi, R. Choroba z vojny v Perzskom zálive a zdravie veteránov vojny v Perzskom zálive: Aktualizácia výskumu a odporúčania, 2009–2013; Úrad vlády USA pre tlač: Washington, DC, USA, 2014.
3. biela, RF; Steele, L.; O'Callaghan, JP; Sullivan, K.; Binns, JH; Golomb, BA; Bloom, FE; Bunker, JA; Crawford, F.; Graves, JC; a kol. Nedávny výskum chorôb z vojny v Perzskom zálive a iných zdravotných problémov u veteránov z vojny v Perzskom zálive v roku 1991: Účinky vystavenia toxickým látkam počas nasadenia. Cortex 2016, 74, 449–475. [CrossRef] [PubMed]
4. Sullivan, K.; Krengel, M.; Heboyan, V.; Schildroth, S.; Wilson, CC; Iobst, S.; Klimas, N.; Coughlin, Prevalencia SS a vzory symptómov medzi ženskými veteránmi z éry vojny v Perzskom zálive v roku 1991: 25 rokov neskôr. J. Zdravie žien 2020, 29, 819–826. [CrossRef] [PubMed]
5. Heboyan, V.; Krengel, M.; Sullivan, K.; Iobst, S.; Klimas, N.; Wilson, CC; Coughlin, SS Rozdiely medzi pohlaviami pri chorobe z vojny v Perzskom zálive: Reanalýza údajov zo štúdie vzdušných síl CDC s použitím CDC a modifikovaných definícií prípadov v Kansase. J. Occup. Environ. Med. 2019, 61, 610–616. [CrossRef] [PubMed]
6. Coughlin, SS; Heboyan, V.; Sullivan, K.; Krengel, M.; Wilson, CC; Iobst, S.; Klimas, N. Kardiovaskulárne ochorenie medzi veteránkami z éry vojny v Perzskom zálive v roku 1991. J. Environ. Health Sci. 2019, 5, 24–25. [CrossRef] [PubMed]
7. Coughlin, SS; Krengel, M.; Sullivan, K.; Pierce, PF; Heboyan, V.; Wilson, CC Prehľad epidemiologických štúdií zdravia veteránok vojny v Perzskom zálive. J. Environ. Health Sci. 2017, 3. [CrossRef] [PubMed]
8. Zündel, CG; Krengel, MH; Heeren, T.; Áno, MK; Grasso, CM; Janulewicz Lloyd, PA; Coughlin, SS; Sullivan, K. Miera chronických zdravotných stavov u veteránov vojny v Perzskom zálive v roku 1991 v porovnaní so všeobecnou populáciou. Int. J. Environ. Res. Verejné zdravie 2019, 16, 949. [CrossRef] [PubMed]
9. Pierce, PF Monitorovanie zdravia žien veteránov vojny v Perzskom zálive. Federálna cena za ošetrovateľskú službu. Mil. Med. 2005, 170, 349–354. [CrossRef]
10. Pierce, PF; Antonakos, C.; Deroba, BA Využitie zdravotnej starostlivosti a spokojnosť s rodovo špecifickými zdravotnými problémami u vojenských žien. Mil. Med. 1999, 164, 98-102. [CrossRef]
11. Wolfe, J.; Proctor, SP; Erickson, DJ; Hu, H. Rizikové faktory pre multisymptomové ochorenie u veteránov americkej armády z vojny v Perzskom zálive. J. Occup. Environ. Med. 2002, 44, 271-281. [CrossRef]
12. Steele, L.; Šastre, A.; Jurkovič, MM; Cook, MR Komplexné faktory v etiológii choroby vojny v Perzskom zálive: Vojnové expozície a rizikové faktory v podskupinách veteránov. Environ. Zdravotný výhľad. 2012, 120, 112–118. [CrossRef]
13. Ďurša, EK; Barth, SK; Porter, BW; Schneiderman, AI Zdravotný stav žien a mužov vojny v Perzskom zálive a veteránov z éry Perzského zálivu: populačná štúdia. Zdravotné problémy žien 2019, 29, S39–S46. [CrossRef] [PubMed]
14. Abou-Donia, MB; Wilmarth, KR; Abdel-Rahman, AA; Jensen, KF; Oehmen, FW; Kurt, TL Zvýšená neurotoxicita po súbežnej expozícii pyridostigmíniumbromidu, DEET a chlórpyrifosu. Fundam. Appl. Toxicol. 1996, 34, 201-222. [CrossRef] [PubMed]
15. Abou-Donia, MB; Wilmarth, KR; Jensen, KF; Oehmen, FW; Kurt, TL Neurotoxicita vyplývajúca zo spoločnej expozície pyridostigmín bromidu, deetu a permetrínu: Dôsledky vystavenia chemikáliám vojny v Perzskom zálive. J. Toxicol. Environ. Zdravie 1996, 48, 35–56. [CrossRef] [PubMed]
16. Abou-Donia, MB; Conboy, LA; Kokkotou, E.; Jacobson, E.; Elmasry, EM; Elkafrawy, P.; Neely, M.; Bass, CRD; Sullivan, K. Skríning nových biomarkerov centrálneho nervového systému u veteránov s chorobou z vojny v Perzskom zálive. Neurotoxikol. Teratol. 2017, 61, 36–46. [CrossRef]
17. Bowyer, JF; Sarkar, S.; Burks, SM; Hess, JN; Tolani, S.; O'Callaghan, JP; Hanig, JP mikrogliálna aktivácia a reakcie na vaskulatúru, ktoré sú výsledkom akútnej expozície LPS. Neurotoxikológia 2020, 77, 181–192. [CrossRef]
18. Abdel-Rahman, A.; Shetty, AK; Abou-Donia, MB Porušenie hematoencefalickej bariéry a smrť neurónových buniek v cingulárnom kortexe, gyrus dentatus, talame a hypotalame na potkanom modeli syndrómu vojny v Perzskom zálive. Neurobiol. Dis. 2002, 10, 306-326. [CrossRef]
19. Abou-Donia, MB; Lapadula, ES; Krengel, MH; Quinn, E.; LeClair, J.; Massaro, J.; Conboy, LA; Kokkotou, E.; Abreu, M.; Klimas, NG; a kol. Použitie plazmových autoprotilátok proteínov centrálneho nervového systému na rozlíšenie veteránov s chorobou z vojny v Perzskom zálive od zdravých a symptomatických kontrol. Brain Sci. 2020, 10, 610. [CrossRef]
20. Lee, G.; Cowan, N.; Kirschner, M. Primárna štruktúra a heterogenita tau proteínu z mozgu myši. Science 1988, 239, 285–288. [CrossRef]
21. Tagliaferro, P.; Ramos, AJ; Onaivi, ES; Evrard, SG; Lujilde, J.; Brusco, A. Neurónový cytoskelet a synaptické hustoty sú zmenené po chronickej liečbe agonistom kanabinoidného receptora WIN 55,212-2. Brain Res. 2006, 1085, 163–176. [CrossRef]
22. Laferrière, NB; MacRae, TH; Brown, syntéza a zostavenie DL tubulínu v diferencujúcich neurónoch. Biochem. Cell Biol. 1997, 75, 103-117. [CrossRef]
23. Hoshi, M.; Akiyama, T.; Shinohara, Y.; Miyata, Y.; Ogawara, H.; Nishida, E.; Sakai, H. Proteín-kinas-C-katalyzovaná fosforylácia domény viažucej mikrotubuly proteínu 2 asociovaného s mikrotubulmi inhibuje jeho schopnosť indukovať polymerizáciu tubulínu. Eur. J. Biochem. 1988, 174, 225–230. [CrossRef] [PubMed]
24. Jauch, EC; Lindsell, C.; Broderick, J.; Fagan, SC; Tilley, BC; Levine, SR Asociácia sériových biochemických markerov s akútnou ischemickou cievnou mozgovou príhodou: Štúdia mŕtvice s aktivátorom rekombinantného tkanivového plazminogénu Národným ústavom neurologických porúch a cievnej mozgovej príhody. Mŕtvica 2006, 37, 2508–2513. [CrossRef] [PubMed]
25. Kövesdi, E.; Lückl, J.; Bukovics, P.; Farkaš, O.; Pál, J.; Czeiter, E.; Szellár, D.; Dóczi, T.; Komoly, S.; Büki, A. Aktualizácia proteínových biomarkerov pri traumatickom poranení mozgu s dôrazom na klinické využitie u dospelých a pediatrie. Acta Neurochir. 2010, 152, 1–17. [CrossRef] [PubMed]
26. Mayne, K.; White, JA; McMurran, CE; Rivera, FJ; de la Fuente, AG Starnutie a neurodegeneratívne ochorenie: Je adaptívny imunitný systém priateľ alebo nepriateľ? Predné. Starnutie Neurosci. 2020, 12, 572090. [CrossRef] [PubMed]
27. Steele, L. Prevalencia a vzorce choroby z vojny v Perzskom zálive u veteránov z Kansasu: asociácia symptómov s charakteristikami osoby, miesta a času vojenskej služby. Am. J. Epidemiol. 2000, 152, 992-1002. [CrossRef] [PubMed]
28. Fukuda, K.; Straus, SE; Hickie, I.; Sharpe, MC; Dobbins, JG; Komaroff, A. Syndróm chronickej únavy: Komplexný prístup k jeho definícii a štúdiu. Medzinárodná študijná skupina pre chronický únavový syndróm. Ann. Stážista. Med. 1994, 121, 953-959. [CrossRef]
29. Longstreth, GF; Thompson, WG; Chey, WD; Houghton, LA; Mearin, F.; Spiller, RC Funkčné poruchy čriev. Gastroenterológia 2006, 130, 1480–1491. [CrossRef]
30. Janulewicz, P.; Krengel, M.; Quinn, E.; Heeren, T.; Toomey, R.; Killiany, R.; Zundel, C.; Ajama, J.; O'Callaghan, J.; Steele, L.; a kol. Hypotéza viacnásobného zásahu pre chorobu z vojny v Perzskom zálive: vystavenie chemickým/biologickým zbraniam a mierne traumatické poranenie mozgu. Brain Sci. 2018, 8, 198. [CrossRef]
31. Janulewicz, PA; Seth, RK; Carlson, JM; Ajama, J.; Quinn, E.; Heeren, T.; Klimas, N.; Lasley, SM; Horner, RD; Sullivan, K.; a kol. Črevný mikrobióm u veteránov vojny v Perzskom zálive: predbežná správa. Int. J. Environ. Res. Verejné zdravie 2019, 16, 751. [CrossRef]
32. Conboy, L.; St John, M.; Schnyer, R. Účinnosť akupunktúry pri liečbe choroby z vojny v Perzskom zálive. Contemp Clin. Pokusy 2012, 33, 557–562. [CrossRef]
33. Conboy, L.; Gerke, T.; Hsu, KY; St John, M.; Goldstein, M.; Schnyer, R. Účinnosť individualizovaných akupunktúrnych protokolov pri liečbe choroby z vojny v Perzskom zálive: Pragmatická randomizovaná klinická štúdia. PLoS ONE 2016, 11, e0149161. [CrossRef]
34. Abou-Donia, MB; Abou-Donia, MM; Elmasry, EM; Monro, JA; Mulder, MFA Autoprotilátky proti proteínom špecifickým pre nervový systém sú zvýšené v sére členov letovej posádky: Biomarkery poškodenia nervového systému. J. Toxicol. Environ. Zdravie A 2013, 76, 363–380. [CrossRef] [PubMed]
35. Abou-Donia, MB; Suliman, HB; Siniscalco, D.; Antonucci, N.; ElKafrawy, P. De novo Krvné biomarkery pri autizme: Autoprotilátky proti neurónovým a gliovým proteínom. Správaj sa. Sci. 2019, 9, 47. [CrossRef] [PubMed]
36. Áno, MK; seichepin, DR; Janulewicz, PA; Sullivan, KA; Proctor, SP; Krengel, MH Self-Reported Traumatické poškodenie mozgu, zdravie a miera chronických multisymptomových ochorení u veteránov z 1990-1991 vojny v Perzskom zálive. J. Head Trauma Rehabil. 2016, 31, 320–328. [CrossRef]
37. Áno, MK; Janulewicz, PA; seichepin, DR; Sullivan, KA; Proctor, SP; Krengel, MH Viacnásobné mierne traumatické poranenia mozgu sú spojené so zvýšeným výskytom zdravotných symptómov a chorôb z vojny v Perzskom zálive v kohorte 1990-1991 veteránov vojny v Perzskom zálive. Brain Sci. 2017, 7, 79. [CrossRef]
38. Carney, CP; Sampson, TR; Voelker, M.; Woolson, R.; Thorne, P.; Doebbeling, BN Women in the Gulf War: Bojové skúsenosti, expozície a následná zdravotná starostlivosť o nás. Mil. Med. 2003, 168, 654-661. [CrossRef]
39. Kapural, M.; Križanac-Bengez, L.; Barnett, G.; Perl, J.; Masaryk, T.; Apollo, d.; Rasmussen, P.; Mayberg, MR; Janigro, D. Sérum S-100beta ako možný marker narušenia hematoencefalickej bariéry. Brain Res. 2002, 940, 102-104. [CrossRef]
40. Siracusa, R.; Fusco, R.; Cuzzocrea, S. Astrocyty: Úloha a funkcie v mozgových patológiách. Predné. Pharm. 2019, 10, 1114. [CrossRef]
41. O'Callaghan, JP; Jensen, KF; Miller, DB Kvantitatívne aspekty astrogliózy vyvolanej liekmi a toxickými látkami. Neurochem. Int. 1995, 26, 115-124. [CrossRef]
42. Ing, LF; Ghirnikar, RS GFAP a astroglióza. Mozgový patol. 1994, 4, 229-237. [CrossRef]
43. Aurell, A.; Rosengren, LE; Karlsson, B.; Olsson, JE; Zborníková, V.; Haglid, KG Stanovenie koncentrácií S-100 a gliových fibrilárnych kyslých proteínov v mozgovomiechovom moku po infarkte mozgu. Mŕtvica 1991, 22, 1254–1258. [CrossRef] [PubMed]
44. Hnedá, MC; Sims, KJ; Gifford, EJ; Goldstein, KM; Johnson, MR; Williams, CD; Provenzale, D. Rodové rozdiely medzi veteránmi vojny v Perzskom zálive v rokoch 1990–1991: Demografia, správanie životného štýlu a zdravotný stav. Zdravotné problémy žien 2019, 29 (Suppl. 1), S47–S55. [CrossRef] [PubMed]
45. Craddock, TJ; Fritsch, P.; Rice, MA, Jr.; del Rosario, RM; Miller, DB; Fletcher, MA; Klimas, NG; Broderick, G. Úloha homeostatického pohonu pri udržiavaní komplexného chronického ochorenia: Vojna v Perzskom zálive a syndróm chronickej únavy. PLoS ONE 2014, 9, e84839. [CrossRef]
46. Smylie, AL; Broderick, G.; Fernandes, H.; Razdan, S.; Barnes, Z.; Collado, F.; Sol, C.; Fletcher, MA; Klimas, N. Porovnanie pohlavne špecifických imunitných podpisov pri chorobe vojny v Perzskom zálive a syndróme chronickej únavy. BMC Immunol. 2013, 14, 1–14. [CrossRef] [PubMed]
47. Lobo, PI Úloha prirodzených IgM autoprotilátok (IgM-NAA) a IgM anti-leukocytových protilátok (IgM-ALA) pri regulácii zápalu. Curr. Hore. Microbiol. Immunol. 2017, 408, 89–117.
48. Sullivan, K.; Krengel, M.; Bradford, W.; Stone, C.; Thompson, TA; Heeren, T.; White, RF Neuropsychologické fungovanie vo vojenských aplikátoroch pesticídov z vojny v Perzskom zálive: Účinky na rýchlosť spracovania informácií, pozornosť a vizuálnu pamäť. Neurotoxikol. Teratol. 2018, 65, 1–13. [CrossRef]
49. Chao, LL; Rothind, JC; Cardenas, VA; Meyerhoff, DJ; Weiner, MW Účinky nízkej úrovne vystavenia sarínu a cyklosarínu počas vojny v Perzskom zálive v roku 1991 na funkciu mozgu a štruktúru mozgu u amerických veteránov. Neurotoxikológia 2010, 31, 493–501. [CrossRef]
50. Chao, LL; Abadjian, L.; Hlavin, J.; Meyerhoff, DJ; Weiner, MW Účinky nízkej hladiny sarínu a cyklosarínu a choroba z vojny v Perzskom zálive na štruktúru a funkciu mozgu: Štúdia na 4T. Neurotoxikológia 2011, 32, 814–822. [CrossRef]
51. Golomb, BA inhibítory acetylcholínesterázy a choroby z vojny v Perzskom zálive. Proc. Natl. Akad. Sci. USA 2008, 105, 4295–4300. [CrossRef]
52. Michalovicz, LT; Kelly, KA; Sullivan, K.; O'Callaghan, JP Expozícia inhibítorov acetylcholínesterázy ako iniciačný faktor vo vývoji choroby z vojny v Perzskom zálive, chronickej neuroimunitnej poruchy u nasadených veteránov. Neurofarmakológia 2020, 171, 108073. [CrossRef]
53. O'Callaghan, JP; Kelly, KA; skrinka, AR; Miller, DB; Lasley, SM Kortikosterón spúšťa neurozápalovú odpoveď na DFP u myší: Potenciálny zvierací model choroby z vojny v Perzskom zálive. J. Neurochem. 2015, 133, 708–721. [CrossRef] [PubMed]
54. Winkenwerder, W. Správa o environmentálnej expozícii: Záverečná správa o pesticídoch Ministerstvo obrany USA, Úrad osobitného asistenta námestníka ministra obrany (personál a pripravenosť) pre choroby z vojny v Perzskom zálive pre zdravotnú pripravenosť a vojenské nasadenie; Úrad vlády USA pre tlač: Washington, DC, USA, 2003.
55. Cherry, N.; Creed, F.; Silman, A.; Dunn, G.; Baxter, D.; Smedley, J.; Taylor, S.; Macfarlane, GJ Health a expozície veteránov vojny v Zálive Spojeného kráľovstva. Časť II: Vzťah zdravia k expozícii. Obsadiť. Environ. Med. 2001, 58, 299-306. [CrossRef] [PubMed]
56. Haley, RW; Kurt, TL Samostatne ohlásené vystavenie neurotoxickým chemickým kombináciám vo vojne v Perzskom zálive. Prierezová epidemiologická štúdia. JAMA 1997, 277, 231–237. [CrossRef] [PubMed]
57. Nisenbaum, R.; Barrett, DH; Reyes, M.; Reeves, stresory z nasadenia WC a chronické multisymptomové ochorenie medzi veteránmi vojny v Perzskom zálive. J. Nerv. Ment. Dis. 2000, 188, 259-266. [CrossRef]
58. Sullivan, K.; Krengel, M.; Proctor, SP; Devine, S.; Heeren, T.; Biele, RF kognitívne fungovanie u veteránov vojny v Perzskom zálive hľadajúcich liečbu: Použitie pyridostigmínbromidu a PTSD. J. Psychopatol. Správaj sa. Posúdiť. 2003, 25, 95-103. [CrossRef] 59. Patton, SE; O'Callaghan, JP; Miller, DB; Abou-Donia, MB Vplyv orálneho podávania tri-o-krezylfosfátu na in vitro fosforyláciu membránových a cytosolických proteínov z kuracieho mozgu. J. Neurochem. 1983, 41, 897-901. [CrossRef]
60. Lapadula, ES; Lapadula, DM; Abou-Donia, MB Biochemické zmeny v sedacom nerve sliepok liečených tri-o-krezylfosfátom: Zvýšená fosforylácia cytoskeletálnych proteínov. Neurochem. Int. 1992, 20, 247-255. [CrossRef]
61. Abou-Donia, MB Zapojenie cytoskeletálnych proteínov do mechanizmov oneskorenej neurotoxicity vyvolanej organofosforovými estermi. Clin. Exp. Pharm. Physiol. 1995, 22, 358-359. [CrossRef]
62. Torres-Altoro, MI; Mathur, BN; Drerup, JM; Thomas, R.; Lovinger, DM; O'Callaghan, JP; Bibb, JA Organofosfáty dysregulujú dopamínovú signalizáciu, glutamátergickú neurotransmisiu a indukujú markery poškodenia neurónov v striate. J. Neurochem. 2011, 119, 303–313. [CrossRef]
63. Reneman, L.; Schagen, SB; Mulder, M.; Mutsaerts, HJ; Hageman, G.; de Ruiter, MB Kognitívne poškodenie a súvisiaca strata bielej mikroštruktúry mozgu u členov posádky lietadla vystavených výparom motorového oleja. Správanie pri zobrazovaní mozgu. 2016, 10, 437–444. [CrossRef]
64. Petras, JM Soman neurotoxicita. Fundam. Appl. Toxicol. 1981, 1, 242. [CrossRef]
65. Abdel-Rahman, AA; Shetty, AK; Abou-Donia, MB Akútna expozícia sarínu zvyšuje permeabilitu hematoencefalickej bariéry a vyvoláva neuropatologické zmeny v mozgu potkanov: Vzťahy medzi dávkou a odozvou. Neuroveda 2002, 113, 721–741. [CrossRef]
66. Belgrad, J.; De Pace, R.; Fields, RD Autofágia v myelinizačnej glii. J. Neurosci. 2020, 40, 256–266. [CrossRef] [PubMed]
67. Naughton, SX; Beck, WD; Wei, Z.; Qu, G.; Terry, AV, Jr. Multifunkčné zlúčeniny chlorid lítny a metylénová modrá zoslabujú negatívne účinky diizopropylfluórfosfátu na axonálny transport v kortikálnych neurónoch potkanov. Toxikológia 2020, 431, 152379. [CrossRef]
68. Naughton, SX; Terry, AV, Jr. Neurotoxicita pri akútnej a opakovanej expozícii organofosfátom. Toxikológia 2018, 408, 101–112. [CrossRef]
69. Naughton, SX; Hernandez, CM; Beck, WD; Poddar, I.; Yanasak, N.; Lin, P.-C.; Terry, AV, Jr. Opakované expozície diizopropylfluórfosfátu majú za následok štrukturálne poruchy myelinizovaných axónov a pretrvávajúce poruchy axonálneho transportu v mozgoch potkanov. Toxikológia 2018, 406, 92–103. [CrossRef]
70. Gao, J.; Naughton, SX; Beck, WD; Hernandez, CM; Wu, G.; Wei, Z.; Yang, X.; Bartlett, MG; Terry, AV, Jr. Chlorpyrifos a oxón chlorpyrifos zhoršujú transport organel viazaných na membránu v kortikálnych axónoch potkanov. Neurotoxikológia 2017, 62, 111–123. [CrossRef]
71. Qiang, L.; Rao, AN; Mostoslavský, G.; James, MF; Comfort, N.; Sullivan, K.; Baas, PW Preprogramovanie buniek od veteránov vojny v Perzskom zálive na neuróny na štúdium chorôb z vojny v Perzskom zálive. Neurológia 2017, 88, 1968–1975. [CrossRef]
72. Hernandez, CM; Beck, WD; Naughton, SX; Poddar, I.; Adam, B.-L.; Yanasak, N.; Middleton, C.; Terry, AV, Jr. Opakovaná expozícia chlórpyrifosu vedie k predĺženým poruchám axonálneho transportu v mozgu živých hlodavcov. Neurotoxikológia 2015, 47, 17–26. [CrossRef]
73. Rao, AN; Patil, A.; Brodník, ZD; Qiang, L.; Espana, RA; Sullivan, KA; čierna, MM; Baas, PW Farmakologicky zvyšujúca sa acetylácia mikrotubulov koriguje stresom exacerbované účinky organofosfátov na neuróny. Doprava 2017, 18, 433–441. [CrossRef]
74. Terry, AV, Jr. Funkčné dôsledky opakovanej expozície organofosfátom: Potenciálne necholinergné mechanizmy. Pharmacol. Ther. 2012, 134, 355–365. [CrossRef] [PubMed]
75. Joshi, U.; Pearson, A.; Evans, JE; Langlois, H.; Saltiel, N.; Ojo, J.; Klimas, N.; Sullivan, K.; Keegan, AP; Oberlin, S.; a kol. Metabolit permetrínu je spojený s adaptívnymi imunitnými odpoveďami pri chorobe z vojny v Perzskom zálive. Správanie mozgu. Immun. 2019, 81, 545–559. [CrossRef] [PubMed]
76. Vojdani, A.; Thrasher, JD Bunkové a humorálne imunitné abnormality u veteránov vojny v Perzskom zálive. Environ. Zdravotný výhľad. 2004, 112, 840–846. [CrossRef] [PubMed]
77. Skowera, A.; Stewart, E.; Davis, ET; Cleare, AJ; Unwin, C.; Hull, L.; Ismail, K.; Hossain, G.; Wessely, SC; Peakman, M. Antinukleárne autoprotilátky (ANA) u pacientov s chorobou súvisiacou s vojnou v Perzskom zálive a syndrómom chronickej únavy (CFS). Clin. Exp. Immunol. 2002, 129, 354-358. [CrossRef] [PubMed]
78. Hokama, Y.; Empey-Campora, C.; Hara, C.; Higa, N.; Siu, N.; Lau, R.; Kuribayashi, T.; Yabusaki, K. Fosfolipidy akútnej fázy súvisiace s kardiolipínom mitochondrií v sére pacientov s chronickým únavovým syndrómom (CFS), chronickou otravou rýb Ciguatera (CCFP) a inými chorobami pripisovanými chemikáliám, vojne v Perzskom zálive a morským toxínom. J. Clin. Lab. Anal. 2008, 22, 99-105.
