Krátkodobé účinky doplnkového L-arginínu, diosmínu, troxerutínu a hesperidínu u diabetických pacientov: Pilotná štúdia

Dosahtina.xiang@wecistanche.comPre viac informácií

Pozadie a ciele.ZápalovéOxidačný stres a endotelová dysfunkcia zohrávajú kľúčovú úlohu v patogenéze dlhodobých kardiovaskulárnych komplikácií u pacientov scukrovka. Predkladaná pozorovacia prospektívna štúdia je zameraná na vyhodnotenie účinkov mikroživín a fytochemikálií obsiahnutých v doplnku výživy Flebotrofifine® (AMNOL Chimica Biologica) na biochemické markery zápalu, endotelovej dysfunkcie a glykemickej kontroly u pacientov s diabetom. Metódy. 105 pacientov s diabetom 1. alebo 2. typu pravidelne užívalo dennú dávku doplnku stravy Flebotrofifine® počas troch po sebe nasledujúcich mesiacov a hematologické a biochemické parametre sa kontrolovali na začiatku liečby, po troch mesiacoch liečby a jeden mesiac po jeho pozastavenie. Štatistické porovnanie laboratórnych parametrov bolo uskutočnené pomocou dvojstranného testu ANOVA pre opakované vzorky s hladinou štatistickej významnosti nastavenou na p < 0:05.="" výsledky.="" každodenné="" užívanie="" flebotrofifinu®="" nezmenilo="" glykemickú="" metabolickú="" kompenzáciu="" zaradených="" pacientov.="" po="" troch="" mesiacoch="" pravidelného="" užívania="" flebotrofifinu®="" sa="" plazmatické="">antioxidant-karotén a arginín boli významne vyššie v porovnaní s východiskovými hodnotami, s poklesom pomeru ADMA/arginín. Naproti tomu apolipoproteín B, pomer ApoB/ApoA1 a počet krvných doštičiek a leukocytov výrazne klesli. Záver. Každodenné užívanie Flebotrofifine® môže byť platným doplnkom arginínu, prekurzora NO a nevyhnutného pri prevencii endoteliálnej dysfunkcie. Pravidelný príjem arginínu a fytochemikálií tiež zlepšil antioxidačný a antitrombotický profil zaradených pacientov. Preto by Flebotrofifin® mohol byť užitočným doplnkom stravy na prevenciu dlhodobých komplikácií u pacientov s cukrovkou.

1. Úvod

Diabetes Podľa najnovšej správy Svetovej zdravotníckej organizácie (WHO) za posledných 20 rokov zostáva medzi 10 najčastejšími príčinami smrti na svete [1]. Nedávne štúdie ukázali, že včasná endoteliálna dysfunkcia je dôležitou zložkou v patogenézediabetikmikro- a makroangiopatie. Nástup inzulínovej substitučnej terapie na začiatku 20. storočia a zvýšené úsilie o metabolickú kontrolucukrovkaMellitus (DM) prostredníctvom perorálnych hypoglykemických látok určite zlepšili kvalitu života a očakávanú dĺžku života pacientov s diabetom. Na druhej strane sa prejavili dlhodobé komplikácie tohto ochorenia súvisiace predovšetkým s cievnym systémom [2]. Množstvo štúdií preukázalo úlohu mikroživín a fytochemikálií, ako je L arginín (L-Arg), flavonoidy aantioxidanty, pri zachovaní endotelovej funkcie [3, 4].

V literatúre sú početné štúdie o arginíne a jeho možnej úlohe pri zlepšovaní schopnosti tela metabolizovať glukózu, podporujúc sekréciu inzulínu [5]. Okrem toho je L-Arg prekurzorom oxidu dusnatého (NO), ktorého význam pri udržiavaní endotelovej funkcie je dobre známy [6]. L-Arg sa tiež ukázal ako dôležitý prostriedok proti niektorým chronickým ochoreniam [3]. Klinické štúdie ukázali, že suplementácia L-Arg zvyšuje medzinárodný zväzok Hindawi BioMed Research 2021, ID článku 3508281, 11 strán https://doi.org/10.1155/2021/3508281antioxidantenzýmové aktivity u pacientov s ischemickou chorobou srdca [7] a zlepšuje endotelovú funkciu a ochranu pred oxidačným stresom u pacientov s 2.cukrovka[8]. Experimentálne štúdie tiež ukázali, že liečba L-Arg zmierňuje poškodenie obličiek a hypertenziu u potkanov a u potomkovdiabetikpotkanov. Po podaní L-Arg sa hladiny krvného tlaku a vaskulárna reaktivita vrátia do normálu [9] a zápal sa zníži v plazme aj v obličkách [10]. Okrem toho hrá L-Arg dôležitú úlohu pri ochrane pankreasu pred oxidačným stresom a je známym sekretagogom inzulínu [11, 12]. Mnohí autori dokonca predpokladajú jeho funkciu pri regulácii postprandiálnej glukózy stimuláciou sekrécie inzulínu a glukagónu podobného peptidu-1 (GLP-1), črevného hormónu, ktorý hrá dôležitú úlohu pri regulácii chuti do jedla [13] . V súčasnosti dostupné údaje napokon dokazujú, že perorálna suplementácia L-Arg môže ovplyvniť vaskulárne funkcie sprostredkované endotelom [14–16].

Doposiaľ je dobre známe, že endotel nie je len krycia vrstva cievnej steny, ale dynamický orgán s autokrinnými a parakrinnými hormonálnymi funkciami, schopný aktívnej súhry s leukocytmi a krvnými doštičkami. Celkovo je endotel schopný produkovať parietálne účinky, reguláciou vaskulárneho tonusu a vaskulárnej remodelácie a luminálnych účinkov, moduláciou hemostázy a interakciou s leukocytmi. Všetky tieto funkcie sa dosahujú vďaka množstvu molekulárnych mediátorov syntetizovaných a uvoľňovaných endotelovými bunkami. Medzi nimi vazodilatačné, ako je NO alebo prostaglandíny, majú tiež antitrombotické, antiproliferatívne a antiaterogénne vlastnosti, zatiaľ čo vazokonstriktory ako endotelín vedú k opačným účinkom.
V tomto scenári získal endogénny inhibítor endotelovej syntázy oxidu dusnatého (eNOS) NG, NG, dimetyl-L-arginín (ADMA) záujem ako potenciálny marker endotelovej dysfunkcie pozitívne korelovaný s rizikovými faktormi pre aterosklerózu a kardiovaskulárne ochorenia (CVD) podľa široké spektrum okolností [17–19]. ADMA spolu s jeho neaktívnym stereoizomérnym symetrickým dimetylarginínom (SDMA) a monometyl arginínom (MMA) sa syntetizuje posttranslačne z metylácie L-Arg proteínovými arginín metyltransferázami (PRMT) a súťaží s prekurzorom NO L-Arg, čím obmedzuje produkciu NO. [20, 21]. Zatiaľ čo SDMA je úplne eliminovaný renálnym klírensom, ADMA je najprv katabolizovaný na citrulín dimetylarginín dimetylaminohydrolázou (DDAH), exprimovaný v pečeni, pankrease, obličkách a endoteli, predtým, ako je vylúčený močom, a možno ho považovať za prevládajúci inhibítor eNOS (Obrázok 1) [20].

Napokon kľúčovú úlohu pri dlhodobých komplikáciách pacientov scukrovkasa prejavuje hyperglykémiou, ktorá je zodpovedná za oxidačný stres, ktorý zase podporuje oxidáciu a neenzymatickú glykáciu proteínov, najmä lipoproteínov s nízkou hustotou (LDL), čím sa vytvárajú pokročilé konečné produkty glykácie (AGE). V dôsledku toho endotel stráca svoje antitrombotické vlastnosti, čo vedie k adhézii a infiltrácii monocytov a včasnej aterogenéze. Je zaujímavé, že sa zdá, že oxidačné poškodenie už ovplyvňuje mikrocirkuláciu na endoteliálnej úrovni ešte predtým, ako sa rozvinie makroangiopatia, čo poskytuje príklad patologického kontinua. Najviditeľnejšou zmenou je zhrubnutie bazálnej membrány, čo môže z dlhodobého hľadiska viesť k strate mikrociev a prerezaniu. Táto neovaskularizácia v konečnom dôsledku zhoršuje aterogenézu vo väčších cievach, pravdepodobne prostredníctvom mechanizmu zahŕňajúceho aj hypoxicko-ischemický cyklus ovplyvňujúci vasa vasorum [22].
Predkladaná štúdia je zameraná na vyhodnotenie účinkov doplnkov stravy na biochemické markeryzápalovéa oxidačný stres, endoteliálna dysfunkcia a kontrola glykémie u pacientov scukrovka. Štúdia sa konkrétnejšie zamerala na doplnok stravy Flebotrofifine®, ktorý vyrába Anmol Chimica Biologica (AMNOL Chimica Biologica Srl, Novara, Taliansko), aby sa zistilo, či by integrácia stravy s mikroživinami mohla byť prospešným doplnkom tradičnej liečby u pacientov s diabetom na zlepšenie ich kardiovaskulárny profil.

2. Materiály a metódy

2.1. Študovať dizajn.

105 pacientov scukrovkaodvolávajúc sa naDiabetesCentrum endokrinologického oddelenia Univerzitnej nemocnice Maggiore della Carità (Novara, Taliansko) bolo zaradené a bolo požiadané, aby užívalo dennú dávku doplnku stravy Flebotrofifine® počas troch po sebe nasledujúcich mesiacov. Flebotrofifine® je dostupný ako rozpustný prášok a obsahuje L-Arg, mikronizovaný diosmín, troxerutín, hesperidín a rastlinné extrakty, vrátane extraktov z čiernych ríbezlí a Centella Asiatica (tabuľka 1). L-Arg je známy svojou vazodilatačnou aktivitou, zatiaľ čo diosmín, troxerutín a hesperidín patria do skupiny flavonoidov a majú antioxidačné, antiapoptotické, protizápalové a vazoprotektívne funkcie [4]. Okrem toho ich úloha pri modulácii metabolizmu glukózy ovplyvňovaním jej vychytávania a skladovania a periférnej inzulínovej rezistencie bola opísaná v niekoľkých štúdiách in vivo [23–25]. Je známe, že čierne ríbezle zlepšujú lymfatickú drenáž a pôsobia ako antioxidanty [26], zatiaľ čo Centella Asiatica obsahuje glykozidické triterpenoidy schopné modulovať produkciu NO a kolagénu a má antioxidačné, antiapoptotické a protizápalové vlastnosti [27].

Po obdržaní úplného opisu výskumného projektu všetci účastníci dali svoj informovaný písomný súhlas so zaradením sa do štúdie, s dodržiavaním plánovanej intervencie a s dostavením sa na každú naplánovanú schôdzku, aby sa ich súhlas považoval za platný počas celého trvania štúdie. štúdium. Všetky postupy boli schválené talianskymi etickými komisiami (názov štúdie: FLEBO: CE 23/16) podľa Helsinskej deklarácie.
Kritériá zaradenia boli diagnóza typu 1 alebo typu 2cukrovkaa vek medzi 40 a 85. Kritériami vylúčenia boli akútne a chronické ochorenie pečene a zlyhanie obličiek.
Dodržiavanie suplementov bolo monitorované vďaka plánovaným stretnutiam so zapísanými subjektmi každé 3 týždne. Počas týchto stretnutí bolo poskytnuté dostatočné množstvo Flebo trofifine® na nasledujúcich 21 dní.
Vzorky krvi sa odoberali na začiatku liečby, po troch mesiacoch liečby a jeden mesiac po jej prerušení. V každom časovom bode sa hodnotili hematologické a biochemické parametre so špecifickým zameranímzápalovéstres, endoteliálna dysfunkcia a kontrola glykémie pre celkovo 54 testovaných analytov.

Na vyhodnotenie účinnosti Flebotrofifine® sa použila jednoramenná štúdia kvôli veľkým ťažkostiam pri zaraďovaní zdravej kontrolnej skupiny porovnateľnej z hľadiska veku a pohlavia. Avšak údaje získané po troch mesiacoch suplementácie Flebo trofifine® boli porovnané s údajmi v čase nula a s údajmi získanými po jednom mesiaci vymývania Flebotrofifine®.

2.2. Demografické a klinické charakteristiky účastníkov štúdie.

133 subjektov scukrovkapôvodne súhlasil s účasťou. 8 z nich sa však nedostavilo na prvé stretnutie, takže zaradených subjektov bolo 125. Z nich 20 bolo stratených v sledovaní, celkovo 28 pacientov od začiatku štúdie s mierou predčasného ukončenia štúdie. 21,1 percenta. Počet pacientov, ktorí absolvovali celú štúdiu, bol teda 105.
Spomedzi 105 zaradených subjektov bolo 65 mužov (61,9 percenta) a 40 žien (38,1 percenta). Priemerný vek pre obe kategórie bol 59,1 (59,6 u mužov, 58,5 u žien). 11 pacientov malo DM 1. typu (10,5 percenta), kým väčšina (94) mala diagnózu DM 2. typu (89,5 percenta). Čo sa týka medikamentóznej liečby, 46 subjektov užívalo len perorálne hypoglykemické látky (43,8 percenta), 27 bolo na substitučnej inzulínovej terapii (25,7 percenta), 25 dostalo kombinovanú liečbu (23,8 percenta) a sedem dodržovalo iba diétnu terapiu (6,7 percenta). .

2.3. Analýza biomarkerov.

Laboratórne merania sa uskutočnili v Laboratóriu klinickej biochémie, Katedra zdravotníckych vied, Amedeo Avogadro University of Eastern Piedmont, Novara, Taliansko. Krvné markery zápalu, oxidačného stresu a endoteliálnej dysfunkcie boli hodnotené pred liečbou a dvakrát potom, ako je opísané vyššie.

Vysoko citlivý C-reaktívny proteín (hs-CRP), cholesterol, triglyceridy, lipoproteíny s vysokou hustotou (HDL), lipoproteíny s nízkou hustotou (LDL), apolipoproteín A (ApoA), ApoB a GPT/ALT boli testované v heparinizovanej plazme na ADVIA® 1800 Clinical Chemistry System alebo ADVIA® Chemistry XPT System (Siemens Healthcare GmbH, Erlangen, Nemecko). Hs-CRP bol testovaný pomocou imunoturbidimetrickej metódy optimalizovanej s latexovými časticami [28]. Triglyceridy, cholesterol, HDL a LDL boli merané imunoenzymatickou metódou s konečnou kolorimetrickou Trinderovou reakciou [29, 30]. Pre ApoA a ApoB sa použila imunoturbidimetrická metóda zosilnená polyetylénglykolom (PEG-) [31]. ALT bola stanovená prostredníctvom kinetickej enzymatickej reakcie, ako je opísané v Bergmeyer et al. [32].
L-Arg a ADMA boli analyzované implementáciou nového protokolu založeného na technike vysokoúčinnej kvapalinovej chromatografie/tandemovej hmotnostnej spektrometrie (HPLC-MS/MS) [33–35] pomocou manuálneho postupu zahŕňajúceho zrážanie proteínov pridaním etanolu, nasleduje odparenie s dusíkom. Zvyšok sa derivatizoval na butylester s n-butanolom a HCl (Fisherova esterifikácia) pri 65 °C počas 15 minút, potom sa znovu odparil s dusíkom a rekonštituoval sa zmesou mobilnej fázy a metanolu. Analýza sa uskutočnila pomocou techniky HPLC-MS/MS s izotopovým riedením pomocou systému Agi lent 1290 Infinity II LC a hmotnostného spektrometra Agilent 6410 Triple Quadrupole LC/MS (Agilent, Santa Clara, CA, USA). Separačné podmienky boli v gradientovej elúcii (HCOONH4/HCOOH vo vode ako mobilná fáza A a HCOOH v acetonitrile ako mobilná fáza B) s kolónou s reverznou fázou a monitorovaním viacerých reakcií.

Hladiny vitamínu A a -karoténu boli hodnotené po extrakcii kvapalina-kvapalina hexánom, po ktorej nasledovala injekcia v HPLC a analýza v izokratických podmienkach s použitím mobilnej fázy (acetonitril/dichlórmetán/metanol) s UV detekciou pri 460 nm. Použitý HPLC systém bol Agilent 1260 Infinity II LC System vybavený detektorom diódového poľa (Agilent, Santa Clara, CA, USA) [36].

Na testovanie flavonoidov obsiahnutých vo Flebotrofifine® bola implementovaná nová analytická metóda využívajúca techniku ​​HPLC nasledovanú hmotnostnou spektrometriou [37]. Hesperidín, diosmín a rutín sú metabolizované na aglykón črevnými baktériami, ktoré ich oddeľujú od ich disacharid-glyového kužeľa, absorbujú sa v tejto forme a vylučujú sa ako glukurónové deriváty močom. V dôsledku toho sa vyhodnotili koncentrácie aglykónov hesperetin, diosmetín a kvercetín v krvi. Vzorky séra sa analyzovali s hydrolýzou a bez hydrolýzy a tá sa uskutočnila buď enzymaticky, s použitím glukuronidázy Helix pomatia a inkubáciou pri 55 °C počas 30 minút, alebo pridaním KOH s inkubáciou pri 70 °C počas 30 minút, aby sa predišlo možná interferencia flavonolov s použitou glukuronidázou. Po hydrolýze sa pH roztoku upravilo na 2,5, aby sa umožnila extrakcia flavonolu v organickom rozpúšťadle s HCl. Po pridaní metyl-terc-butyl-éteru a odstredení sa supernatant odparil s dusíkom. Zvyšok sa rekonštituoval metanolom a vodou a analyzoval sa pomocou systému Agilent 1290 Infinity II LC System a hmotnostného spektrometra Agilent 6410 Triple Quadrupole LC/MS (Agilent, Santa Clara, CA, USA). Nebolo však možné implementovať nový protokol na kvantifikáciu troxerutínu, pretože metódy opísané v literatúre naznačujú špecializovanú metódu, ktorá nebola v našom laboratóriu realizovateľná [38, 39].

Nakoniec bol vykonaný kompletný krvný obraz (vrátane červených krviniek, leukocytov, diferenciálneho počtu leukocytov a krvných doštičiek) z celej krvi v antikoagulante kyseliny K2-etyléndiamíntetraoctovej (EDTA) na hematologickom systéme XN{1}}™ (Sysmex Corporation, Kobe, Japonsko). Glykovaný hemoglobín (HbA1c) bol meraný v EDTA-plnej krvi programom ARIANT™ II System HbA1c Program (BioRad Laboratories, Hercules, CA, USA). Z organizačných dôvodov nebolo možné zmerať postprandiálnu glykemickú odozvu po 2 hodinách, čo je pre štúdiu určite prvok veľkého záujmu.

2.4. Štatistická analýza.

Štatistická analýza sa uskutočnila na všetkých hematologických a biochemických parametroch hodnotených v troch rôznych časových bodoch pomocou analytického softvéru SPSS v.15.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Normálna distribúcia spojitých premenných bola hodnotená pomocou qq grafu, Kolmogorov-Smirnov a Shapiro-Wilk test a všetky spojité premenné boli reprezentované ako priemer a štandardná odchýlka (SD). Klinické charakteristiky účastníkov a ich laboratórne parametre boli porovnané pomocou Chi-Square a dvojstranných párových testov ANOVA pre kategorické a spojité premenné. Korelačná analýza sa uskutočnila s použitím Spearmanovho korelačného koeficientu a Pearsonovho parametrického koeficientu, ak to bolo vhodné. Štatistická významnosť sa vypočítala pomocou neparametrického Mann-Whitneyho testu s použitím p-hodnoty <>

3. Výsledky

Užívanie Flebotrofifine® počas troch po sebe nasledujúcich mesiacov nezmenilo glykemickú metabolickú kompenzáciu zaradených pacientov, čo potvrdzujú hodnoty HbA1c na začiatku a po 3 mesiacoch suplementácie stravy (7,26 percent vs. 7,15 percent, v uvedenom poradí). HbA1c sa meral namiesto glykémie nielen preto, že je to ideálny test na monitorovanie glykemickej kontroly pacientov s diabetom, ale aj preto, že umožnil vyhodnotiť ich plazmatickú koncentráciu glukózy počas troch mesiacov sledovania s jedinou konečnou analýzou. Laboratórne parametre namerané v každom časovom bode sú uvedené v tabuľke 2. Rozdiely zistené po troch mesiacoch suplementácie Flebotrofifine® a jeden mesiac po prerušení liečby v porovnaní s východiskovou hodnotou sú zvýraznené, ak sú štatisticky významné, pričom sa uvádzajú vypočítané štatistické parametre vrátane p- hodnotu. Grafické znázornenie tých istých významných výsledkov možno nájsť na obrázku 2. Hladiny L-Arg sa výrazne zvýšili po troch

4. Diskusia

Prevažná časť vedeckej literatúry o patofyziológii kardiovaskulárnych komplikácií pri diabete sa zamerala na vaskulárnu endoteliálnu dysfunkciu ako hlavné hybné silydiabetikvaskulopatiou [40, 41]. Endotel, ktorý sa pôvodne považoval len za ochranné pokrytie cievnej steny, bol znovuobjavený ako mnohostranné tkanivo so zložitou fyziológiou, ktorá hrá kľúčovú úlohu v homeostáze krvi, od dynamiky prietoku krvi až po reguláciu koagulácie a zápalu a s potenciálnymi dôsledkami pri cievnych ochoreniach.

Rastúci počet vedeckých údajov ukazuje, že nedostatok mikroživín môže prispievať k dysfunkcii endotelu, ktorú je možné zlepšiť cieleným podávaním týchto látok [42, 43]. Z mikroživín prítomných v doplnkoch stravy a potenciálne užitočných na udržanie mikrovaskulárneho trofizmu a prevenciu endoteliálnej dysfunkcie patria extrakty L-Arg, diosmín, troxerutín, hesperidín a Centella Asiatica, obsiahnuté v doplnku výživy Flebotrofifine®, o ktorom sa uvažuje v tejto štúdii, sú mimoriadne zaujímavé.

Naše údaje ukazujú, že denné užívanie doplnku stravy Flebotrofifine® možno považovať za platnú stratégiu suplementácie L-Arg, pretože plazmatické hladiny aminokyselín sú štatisticky vyššie po troch mesiacoch užívania Flebotrofifine®. Hlavnou počiatočnou obavou bola možnosť premeny L Arg na glukózu s možným negatívnym dopadom na metabolizmus glukózy v kategórii pacientov, ktorí už trpia dysreguláciou glykemickej kontroly. Napriek tomu hodnoty HbA1c pozorované pred a po liečbe Flebotrofifinom® ukázali, že zvýšenie plazmatickej hladiny L-Arg nezmenilo glykemickú kompenzáciu u pacientov s diabetom [44]. Keďže L-Arg je prekurzorom syntézy NO, jeho nedostatok určuje zníženú produkciu NO, čo ohrozuje jeho ochranné účinky na intaktný endotel. NO je v skutočnosti všadeprítomný mediátor pôsobiaci v mozgu ako neurotransmiter, modulujúci imunitnú odpoveď hostiteľa a fungujúci ako vazodilatátor a endogénna antiaterogénna molekula v kardiovaskulárnom systéme [45, 46]. Regulácia metabolizmu NO je pri DM obzvlášť dôležitá aj preto, že sa dokázalo, že aktivácia eNOS je pod kontrolou inzulínu [47, 48]. Každodenné používanie Flebotrofifine® tiež znížilo pomer ADMA/L Arg, aj keď nie významne, moduláciou účinku ADMA, kompetitívneho inhibítora konverzie L-Arg na NO prostredníctvom eNOS. Už predchádzajúce štúdie pozorovali, že suplementácia L-Arg obnovuje pomer ADMA/L-Arg na normálnu úroveň, a tým normalizuje funkciu endotelu [49].

Bohužiaľ, HPLC-MS/MS analýza flavonoidov nedokázala zmerať ich plazmatickú koncentráciu. Je to pravdepodobne spôsobené veľmi rýchlym metabolizmom týchto molekúl, ktoré sa vylučujú močom ako glukuronizované metabolity už 12 hodín po ich požití. Tento aspekt spolu s nízkym množstvom flflavonoidov vo Flebotrofifine® (menej ako 1 g) naznačuje, že sérové ​​hladiny diosmetínu, hesperetínu a kvercetínu už nie sú detekovateľné 24 hodín po ich užití, keď sa vykonal druhý krvný test, dokonca po pravidelnej suplementácii počas troch po sebe nasledujúcich mesiacov. V tomto zmysle by stálo za to vykonať farmakokinetické štúdie na lepšie preskúmanie klírensu a zmeny koncentrácie flavonoidov v čase. Bohužiaľ nebolo možné zmerať plazmatické hladiny NO a ďalšie markery poškodenia endotelu, ako je koagulačný faktor VIII (FVIII), von Willebrandov faktor (vWF) a vaskulárny tonus.

Každodenné zavádzanie diéty s Flebotrofifine® u pacientov s diabetom viedlo k výraznému zvýšeniu - plazmatických hladín karoténu, dôležitého prírodného antioxidantu, prekurzora vitamínu A, nevyhnutného na zabezpečenie správneho fungovania obehového, nervového, kostrového a imunitných systémov. Naopak, nízke plazmatické hladiny -karoténu boli spojené s vyšším kardiovaskulárnym rizikom a vyššou mortalitou [50]. Okrem toho bolo pozorované štatisticky významné zníženie krvných hladín ApoB a pomeru ApoB/ApoA po doplnení stravy Flebo trofifine® [51]. Pomer ApoB/ApoA sa v súčasnosti považuje za lepší prediktor endotelovej dysfunkcie, aterogenézy a kardiovaskulárneho rizika v porovnaní s cholesterolom a triglyceridmi, najmä u jedincov s normálnym alebo takmer normálnym lipidovým profilom [51, 52].
Je dôležité poznamenať, že plazmatické hladiny triglyceridov, celkového cholesterolu, LDL cholesterolu a HDL cholesterolu zostali nezmenené po troch mesiacoch užívania Flebotrofifinu®. Zdá sa teda, že doplnok Flebotrofifin® nemá vplyv na lipidový profil úpravou koncentrácie lipidov v plazme, skôr ovplyvňuje zloženie lipoproteínov, najmä uprednostňovaním expresie antiaterogénneho lipoproteínového fenotypu [53].

Použitie doplnku schopného zvýšiť plazmatické hladiny L-Arg a -karoténu a súčasne zlepšiť rovnováhu lipidov by preto mohlo byť užitočné u pacientov s cukrovkou, ktorí sú dlhodobo vystavení vysokému riziku rozvoja KVO. . Keďže však hladiny L-Arg a -karoténu výrazne klesli už mesiac po prerušení liečby, zdá sa, že tento doplnok stravy by mal byť pravidelný a dlhotrvajúci, aby sa zabezpečila konštantná hladina schopná zaručiť účinnosť jeho vlastností.
Napokon, každodenná diéta s Flebo trofifine® u pacientov s diabetom viedla k významnému zníženiu počtu leukocytov a krvných doštičiek, aj keď nie natoľko, aby vystavila subjekt infekciám alebo riziku krvácania. Krvné doštičky hrajú kľúčovú úlohu v etiológii a progresii aterosklerotického ochorenia, pretože sú schopné interagovať s endoteliálnymi bunkami a leukocytmi, a to tak prostredníctvom kontaktu sprostredkovaného receptorom, ako aj uvoľňovaním vopred vytvorených alebo novosyntetizovaných molekúl s obrovským množstvom funkcií, vrátane pro- zápalové a chemotaktické účinky. Nedávno vytvorený proces trombozápalu tak môže poskytnúť ďalší kúsok do zložitej skladačky aterogenézy [54–56]. Zníženie počtu cirkulujúcich krvných doštičiek by preto mohlo nepriamo viesť k zníženiu kardiovaskulárneho rizika.

Podobne sa WBC podieľajú na zápalových reakciách a konštantnej interakcii s endotelom vo fyziologických aj patologických podmienkach, čo prispieva k vývoju endotelovej dysfunkcie a aterogénneho plaku. Každodenná diéta s Flebotrofifine® by preto mohla mať protizápalový účinok, chrániť pacientov s diabetom pred oxidačným poškodením a zápalom cievnej steny vďaka priamej modulácii zápalovej odpovede.

Na záver, naše výsledky ukazujú, že každodenné užívanie Flebotrofifine® možno považovať za platný doplnok arginínu, prekurzora NO, ktorý je zásadný v prevencii endoteliálnej dysfunkcie. Okrem toho sa zdá, že pravidelný príjem L Arg, diosmínu, troxerutínu, hesperidínu a rastlinných extraktov zlepšuje antioxidačný a antitrombotický profil zaradených pacientov.

Preto by Flebotrofifin® mohol byť užitočnou podporou tradičnej terapie na prevenciu dlhodobých komplikácií diabetu; hoci na potvrdenie týchto záverov sú potrebné ďalšie štúdie na vyhodnotenie ďalších markerov poškodenia endotelu, ako sú NO, prostacyklín (PGI2), tromboxán A2 (TXA2), faktor VIII (FVIII), von Willebrandov faktor (vWF) a vaskulárny tonus .

Dostupnosť údajov

Spracované údaje podporujúce túto observačnú štúdiu sú diskutované v texte a prehľadne a racionálne sú zhrnuté v tabuľkách uvedených v rukopise. Autori si myslia, že pôvodné nespracované údaje neposkytujú žiadne dodatočné informácie k tomu, o čom sa diskutovalo.

Konflikt záujmov

Autori vyhlasujú, že v súvislosti s uverejnením tohto článku neexistuje konflikt záujmov.

Marco Bagnati, 1 Chiara Puricelli, 1,2 Giulia Bauce, 1 Matteo Basile, 1 Barbara Grigollo,
1 Flavia Prodam,3 Umberto Dianzani,1,2 Giorgio Bellomo,2 a Roberta Rolla 1,21 Laboratórium klinickej chémie SCDU, Univerzitná nemocnica Maggiore della Carità, Novara, Taliansko
2 Katedra zdravotníckych vied, Amedeo Avogadro University of Eastern Piedmont, Novara, Taliansko
3 SCDU Endokrinológia, Univerzitná nemocnica Maggiore della Carità – Katedra translačnej medicíny, Univerzita Amedeo Avogadro vo východnom Piemonte, Novara, Taliansko
Korešpondenciu treba adresovať Chiare Puricelli; 20032501@studenti.uniupo.it Prijaté 12. augusta 2021; Revidované 6. novembra 2021; Prijaté 16. novembra 2021; Publikované 2. decembra 2021 Akademický redaktor: Atef M. Al Attar
Copyright © 2021 Marco Bagnati a kol. Toto je článok s otvoreným prístupom distribuovaný pod licenciou Creative Commons Attribution License, ktorá umožňuje neobmedzené používanie, distribúciu a reprodukciu na akomkoľvek médiu za predpokladu, že pôvodné dielo je správne citované.

Referencie

[1] Odhady úmrtnosti a globálneho zdravia, Stredná dĺžka života a hlavné príčiny smrti a invalidity, Svetová zdravotnícka organizácia, 2021, https://www.who.int/data/gho/data/themes/ mortality-and-global-health - odhady.

[2] J. La Fontaine, LB Harkless, CE Davis, MA Allen a PK Shireman, "Current concepts in diabetic microvascular dysfunction," Journal of American Podiatric Medical Association, zv. 96, č. 3, s. 245–252, 2006.

[3] G. Wu, FW Bazer, TA Davis a kol., "Arginínový metabolizmus a výživa v raste, zdraví a chorobe," Amino Acids, zv. 37, č. 1, s. 153–168, 2009.

[4] GR Gandhi, ABS Vasconcelos, DT Wu a kol., "Citrusové flavonoidy ako sľubné fytochemikálie zamerané na diabetes a súvisiace komplikácie: systematický prehľad štúdií in vitro a in vivo," Nutrients, vol. 12, č. 10, s. 2907–2932, 2020.

[5] F. Trabelsi, R. Helie, R. Bergeron a JM Lavoie, "Účinok inhibície glukoneogenézy na sekréciu inzulínu vyvolanú arginínom," Physiology & Behavior, zv. 57, č. 4, s. 797–802, 1995.

[6] A. Lass, A. Suessenbacher, G. Wölkart, B. Mayer a F. Brunner, "Functional and analytický dôkaz pre zachytávanie kyslíkových radikálov L-arginínom," Molecular Pharmacology, zv. 61, č. 5, s. 1081–1088, 2002.

[7] P. Tripathi a MK Misra, "Terapeutická úloha L-arginínu v systéme zachytávania voľných radikálov pri ischemických chorobách srdca", Indian Journal of Biochemistry & Biophysics, zv. 46, č. 6, s. 498–502, 2009.

[8] P. Lucotti, E. Setola, LD Monti a kol., "Priaznivé účinky dlhodobej perorálnej liečby arginínom pridanej k hypokalorickej diéte a cvičebnému programu u obéznych, inzulín-rezistentných pacientov s diabetom 2. "American Journal of Physiology-Endocrinology and Metabolism, zv. 291, č. 5, s. E906– E912, 2006.

[9] M. de Fatima Cavanal, GN Gomes, AL Forti a kol., "Vplyv L-arginínu na krvný tlak, vaskulárny oxid dusnatý a renálnu morfometriu u potomkov matiek s diabetom," Pediatric Research, zv. 62, č. 2, s. 145–150, 2007.

[10] M. Correa-Costa, MA Landgraf, MF Cavanal a kol., "Zápalové prostredie ako skorý marker poškodenia obličiek u potomkov potkanov od diabetických matiek," European Journal of Pharmacology, zv. 689, č. 1-3, s. 233 – 240, 2012.

[11] MS Krause, N. McClenaghan, PR Flatt, PIH de Bitten court, C. Murphy a P. Newsholme, „L-arginín je nevyhnutný pre funkčnú integritu buniek pankreasu, metabolizmus a obranu pred zápalovou výzvou,“ Journal of Endocrinology, roč. 211, č. 1, s. 87–97, 2011.

[12] PA Smith, H. Sakura, B. Coles, N. Gummerson, P. Proks a FM Ashcroft, "Elektrogénny transport arginínu sprostredkuje spojenie stimul-sekrécia v myších pankreatických beta-bunkách", The Journal of Physiology, zv. 499, č. 3, s. 625–635, 1997.

[13] C. Clemmensen, S. Smajilovic, EP Smith a kol., "Orálny L arginín stimuluje sekréciu GLP-1 na zlepšenie tolerancie glukózy u samcov myší," Endocrinology, zv. 154, č. 11, s. 3978–3983, 2013.

[14] B. Bednarz, T. Jaxa-Chamiec, P. Maciejewski a kol., "Účinnosť a bezpečnosť perorálneho L-arginínu pri akútnom infarkte myokardu. Výsledky multicentrického, randomizovaného, ​​dvojito zaslepeného, ​​placebom kontrolovaného pilota ARAMI súd,“ Kardiologia Polska, zv. 62, s. 421–427, 2005.

[15] SP Schulman, LC Becker, DA Kass a kol., "L-arginínová terapia pri akútnom infarkte myokardu: randomizovaná klinická štúdia Vascular Interaction with Age in Myocardial Infarction (VINTAGE MI), Journal of American Medical Association, vol. . 295, č. 1, s. 58–64, 2006.

[16] NN Abumrad a A. Barbul, "Arginínová terapia pre akútny infarkt myokardu," Journal of American Medical Association, zv. 295, č. 18, s. 2135–2139, 2006.

[17] P. Willeit, DF Freitag, JA Laukkanen a kol., "Asymetrický dimetylarginín a kardiovaskulárne riziko: systematický prehľad a metaanalýza 22 prospektívnych štúdií," Journal of American Heart Association, zv. 4, č. 6, článok e001833, 2015.

[18] H. Miyazaki, H. Matsuoka, JP Cooke a kol., "Endogénny inhibítor syntázy oxidu dusnatého: nový marker aterosklerózy," Circulation, zv. 99, č. 9, s. 1141–1146, 1999.

[19] R. Rolla, M. Vidali, M. Sartori, et al., "Predpovedá asymetrická plazmatická koncentrácia dimetylarginínu (Adma) varixy pažeráka u pacientov s cirhózou?," Clinical Laboratory, zv. 60, č. 5, s. 791–798, 2014.

[20] P. Vallance a J. Leiper, "Kardiovaskulárna biológia asymetrického dimetylarginínu: dráha dimetylarginínu dimetylaminohydrolázy", Arteriosclerosis, Thrombosis and Vascular Biology, zv. 24, č. 6, s. 1023–1030, 2004.

[21] RJ MacAllister, H. Parry, M. Kimoto a kol., "Regulácia syntézy oxidu dusnatého dimetylarginín dimetylaminohydrolázou," British Journal of Pharmacology, zv. 119, č. 8, s. 1533–1540, 1996.

[22] G. Orasanu a J. Plutzky, "The pathologic continuum of diabetic vascular disease," Journal of American College of Cardiology, zv. 53, č. 5, s. S35–S42, 2009.

[23] AM Mahmoud, OM Ahmed, MB Ashour a A. Abdel Moneim, "In vivo a in vitro antidiabetické účinky citrusových flavonoidov; štúdia o mechanizme účinku," International

Journal of Diabetes in Developing Countries, roč. 35, č. 3, s. 250–263, 2015.

[24] C.-C. Hsu, M. Lin, J.-T. Cheng a M. Wu, "Diosmín, citrusová živina, aktivuje imidazolínové receptory na zmiernenie glukózy a lipidov v krvi u diabetických potkanov typu 1-," Nutrients, vol. 9, č. 7, str. 684, 2017.

[25] S. Jia, Y. Hu, W. Zhang a kol., "Hypoglykemické a hypolipidemické účinky neohesperidínu odvodeného z Citrus aurantium L. u diabetickej KK-Aymice," Food & Function, zv. 6, č. 3, s. 878–886, 2015.

[26] M. Staszowska-Karkut a M. Materska, "Fenolové zloženie, obsah minerálov a prospešné bioaktivity listových extraktov z čiernych ríbezlí (Ribes nigrum l.), maliny (Rubus idaeus) a arónie (Aronia melanocarpa)," Živiny, zv. 12, č. 2, str. 463, 2020.

[27] B. Sun, L. Wu, Y. Wu a kol., "Terapeutický potenciál Centella Asiatica a jej triterpénov: prehľad," Frontiers in Pharmacology, zv. 11, článok 568032, 2020.

[28] T. Komoriya, Y. Terashima, M. Ogawa, M. Moriyama a H. Kohno, "Vývoj vysoko citlivého latexového činidla na detekciu C-reaktívneho proteínu," Journal of Immunological Methods, zv. 373, č. 1-2, s. 63 – 66, 2011.

[29] P. Trinder, "Stanovenie krvnej glukózy pomocou systému oxidázy peroxidázy s nekarcinogénnym chromogénom," Journal of Clinical Pathology, zv. 22, č. 2, s. 158–161, 1969.

[30] P. Fossati a L. Prencipe, "Triglyceridy v sére stanovené kolorimetricky pomocou enzýmu, ktorý produkuje peroxid vodíka," Clinical Chemistry, zv. 28, č. 10, s. 2077–2080, 1982.

[31] JN Mount, EM Kearney, M. Rosseneu a BM Slavin, "Imunoturbidimetrické testy na sérové ​​apolipoproteíny A1 a B pomocou odstredivého analyzátora Cobas Bio", Journal of Clinical Pathology, zv. 41, č. 4, s. 471–474, 1988.

[32] HU Bergmeyer, M. Hørder a R. Rej, "Vedecký výbor Medzinárodnej federácie klinickej chémie (IFCC), analytická sekcia: schválené odporúčanie (1985) o metódach IFCC na meranie katalytickej koncentrácie enzýmov. Časť 3. Metóda IFCC pre alanínaminotransferázu (L-alanín: 2-oxoglutarátaminotransferáza, EC 2.6.1.2),“ Journal of Clinical Chemistry and Clinical Biochemistry, zv. 24, č. 7, s. 481–495, 1986.

[33] E. Schwedhelm, J. Tan-Andresen, R. Maas, U. Riederer, F. Schulze a RH Böger, "Metóda kvapalinovej chromatografie-tandemovej hmotnostnej spektrometrie na analýzu asymetrického dimetylarginínu v ľudskej plazme", Klinická chémia , zv. 51, č. 7, s. 1268–1271, 2005. [34] MZ Gad, SI Hassanein, SM Abdel-Maksoud, GM Sha ban, K. Abou-Aisha a HA Elgabarty, "Hodnotenie sérových hladín asymetrického dimetylarginínu, symetrického dimetylarginínu a l-arginín pri ochorení koronárnych artérií," Biomarkers, zv. 15, č. 8, s. 746–752, 2010.

[35] F. Andrade, M. Llarena, S. Lage a L. Aldámiz-Echevarría, "Kvantifikácia arginínu a jeho metylovaných derivátov u zdravých detí pomocou kvapalinovej chromatografie-tandemovej hmotnostnej spektrometrie," Journal of Chromatographic Science, zv. 53, č. 5, s. 787–792, 2015.

[36] H. Esterbauer, H. Puhl, M. Dieber-Rotheneder, G. Waeg a H. Rabl, "Effect of antioxidants on oxidative Modification of LDL," Annals of Medicine, vol. 23, č. 5, s. 573–581, 1991.

[37] M. Spanakis, S. Kasmas a I. Niopas, "Simultánne stanovenie flavonoidných aglykónov diosmetínu a hesperetínu v ľudskej plazme a moči overenou metódou GC/MS: metabolická redukcia diosmetínu na hesperetin in vivo," Biomedicínske Chromatografia, zv. 23, č. 2, s. 124–131, 2009.

[38] G. Mishra, V. Kumar Srivastava a A. Tripathi, "Vývoj a validácia analytickej metódy na stanovenie diosmínu a hesperidínu v kombinovanej tabletovej dávkovej forme pomocou RP-HPLC," International Journal of Pharmacy & Life Sciences, zv. 4, s. 2834–2839, 2013.

[39] M. Jianshe, Y. Zhang, M. Zhang a kol., "Stanovenie troxerutínu v králičej plazme pomocou LC-ESI-MS a jeho aplikácia na farmakokinetickú štúdiu," Latin American Journal of Pharmacy, zv. 30, s. 613–618, 2011.

[40] A. Magenta, S. Greco, MC Capogrossi, C. Gaetano a F. Martelli, "Nitric Oxide, Oxidative Stress, and Interplay in Diabetic Endotelial Dysfunction," Biomed Research International, zv. 2014, č. 2014, ID článku 193095, 2014.

[41] M. Joshi, SR Kotha, S. Malireddy a kol., "Hádanka o patogenéze diabetickej kardiomyopatie: úloha vaskulárnej endotelovej dysfunkcie, reaktívnych foriem kyslíka a mitochondrií," Molecular and Cellular Biochemistry, zv. 386, č. 1-2, s. 233 – 249, 2014.

[42] LB Bailey, PJ Stover, H. McNulty a kol., "Biomarkers of nutrition for development-folate review," The Journal of Nutrition, zv. 145, č. 7, s. 1636S–1680S, 2015.

[43] LRB Weitzel, WJ Mayles, PA Sandoval a PE Wisch Meyer, "Účinky farmakonutrientov na bunkovú dysfunkciu a mikrocirkuláciu pri kritických chorobách", Current Opinion in Anaesthesiology, zv. 22, č. 2, s. 177–183, 2009.

[44] V. Leiss, K. Flockerzie, A. Novakovic a kol., "Sekrécia inzulínu stimulovaná arginínom a jeho metabolitmi - ornitínom závisí od G i2," American Journal of Physiology. Endokrinológia a metabolizmus, roč. 307, č. 9, s. E800–E812, 2014.

[45] JP Cooke, "Kľúčová úloha oxidu dusnatého pre zdravie ciev," The Canadian Journal of Cardiology, zv. 20, s. 7B – 15B, 2004.

[46] PR Myers, Q. Zhong, JJ Jones, MA Tanner, HR Adams a JL Parker, "Uvoľňovanie EDRF a NO in ex vivo perfundovaná aorta: inhibícia in vivo endotoxémiou E. coli," American Journal of Physiology- Fyziológia srdca a krvného obehu, zv. 268, č. 3, str. H955–H961, 1995.

[47] R. Muniyappa a MJ Quon, "Účinok inzulínu a inzulínová rezistencia vo vaskulárnom endoteli," Current Opinion in Clinical Nutrition and Metabolic Care, zv. 10, č. 4, s. 523–530, 2007.

[48] ​​MA Vincent, M. Montagnani a MJ Quon, "Molekulárne a fyziologické účinky inzulínu súvisiace s produkciou oxidu dusnatého vo vaskulárnom endoteli," Current Diabetes Reports, zv. 3, č. 4, s. 279–288, 2003.

[49] RH Böger, "Farmakodynamika L-arginínu," The Journal of Nutrition, zv. 137, č. 6, s. 1650S–1655S, 2007.

[50] J. Karppi, JA Laukkanen, TH Mäkikallio, K. Ronkainen a S. Kurl, "Sérový karotén a riziko náhlej srdcovej smrti u mužov: populačná následná štúdia," Atherosclerosis, zv. 226, č. 1, s. 172–177, 2013.

[51] G. Walldius, I. Jungner, I. Holme, AH Aastveit, W. Kolar a E. Steiner, „Vysoká hladina apolipoproteínu B, nízka hladina apolipoproteínu AI a zlepšenie predikcie fatálneho infarktu myokardu (štúdia AMORIS): prospektívna štúdia," Lancet, zv. 358, č. 9298, s. 2026–2033, 2001.

[52] G. Walldius, AH Aastveit a I. Jungner, "Úmrtnosť na mozgovú príhodu a pomer apo B/apo AI: výsledky prospektívnej štúdie AMORIS," Journal of Internal Medicine, zv. 259, č. 3, s. 259–266, 2006.

[53] RM Krauss, "Aterogénny lipoproteínový fenotyp a interakcie génov výživy," The Journal of Nutrition, zv. 131, č. 2, s. 340S–343S, 2001.

[54] CA Gleissner, P. Von Hundelshausen a K. Ley, "Chemokíny krvných doštičiek pri vaskulárnom ochorení", Arterioskleróza, trombóza a vaskulárna biológia, zv. 28, č. 11, s. 1920–1927, 2008.

[55] E. d'Alessandro, C. Becker, W. Bergmeier a kol., „Trombový zápal pri kardiovaskulárnych ochoreniach: odborný konsenzuálny dokument z tretej Maastrichtskej konsenzuálnej konferencie o trombóze“, Trombóza a hemostáza, zv. 120, č. 4, s. 538 – 564, 2020.

[56] R. Rolla, C. Puricelli, A. Bertoni a kol., "Platelets: "Multiple choice" efektory v imunitnej odpovedi a ich implikácia v COVID-19 trombo zápalovom procese, International Journal of Laboratory Hematológia, roč. 43, č. 5, s. 895 – 906, 2021.