Súčasné stanovenie echinakozidu a 2,3,5,4'-tetrahydroxy stilbene-2-Ο- -D-glukozidu v Congrong Tongbian perorálnej kvapaline pomocou HPLC

Abstrakt:Cieľom bolo súčasne stanoviť echinakozid a 2,3,5,4'-tetrahydroxystilben-2-Ο- -D-glukozid v tráviacej orálnej tekutine Congrong pomocou HPLC. Použila sa kolóna Tech Mate C18-ST (4,6 mm × 250.0 mm, 5 μm) s gradientovou elúciou acetonitrilom-0,2 % roztokom kyseliny mravčej; detekčná vlnová dĺžka bola 330nm; prietoková rýchlosť bola 1.{30} ml/min. Výsledky ukázali, že echinakozid a 2,3,5,4'-tetrahydroxystilbén-2-Ο- -D-glukozid vo vzorke vykazovali dobré rozlíšenie od susedných chromatografických píkov s dobrým lineárnym vzťahom v rozsahu 0 .159 3-0.955 8 ug a 0.{31}}.623 5 ug. Zavedená metóda je jednoduchá a presná a možno ju použiť na stanovenie echinakozidu a stilbénového glykozidu v tráviacej orálnej tekutine Congrong.

Kľúčové slová:Congrong Degestive orálna tekutina;echinakozid; 2,3,5,4'-tetrahydroxystilbén-2-Ο- -D-glukozid; HPLC

BIO EXTRAKT CISTANCHE S 30 % ECHINAKOZIDU A 12 % AKTEOZIDU

Súčasné štandardy kvalityCistanche Rongzažívacie Oral Liquid majú problémy, ako sú jednoduché testované položky, zlá funkčnosť a ťažkopádne a časovo náročné operácie. Okrem položiek všeobecnej kontroly má norma len tenkovrstvové identifikačné položky pre Polygonum multiflorum a Citrus aurantium a Polygonum multiflorum a Citrus aurantium. Skutočná metóda identifikácie pomocou chromatografie na tenkej vrstve nie je dostatočne prísna a má zlú funkčnosť. Položka na stanovenie obsahu využíva ultrafialovú spektrofotometriu na detekciu 1,8-dihydroxyantrachinónu v perorálnej tekutine Cistanche purpurea. Pretože táto metóda vyžaduje viacnásobné refluxné extrakcie, operácia je ťažkopádna a časovo náročná a reprodukovateľnosť a presnosť sú slabé. Kvalita originálnych liečivých materiálov sa nedá kontrolovať a kontrola kvality kráľovskej drogy Cistanche deserticola chýba. V tejto štandardnej výskumnej práci je stanovenieechinaceaside v Cistanche deserticolaastilbén glykozid v Polygonum multiflorumv Cistanche deserticola Oral Liquid. Na základe zloženia receptúry a charakteristík procesu bola vytvorená vysoko účinná kvapalná fáza. Chromatografická metóda sa použila na stanovenie echinakozidových a stilbénových glykozidov v tráviacej perorálnej tekutine Cistanche Rong a jej obsahové limity boli formulované na ďalšie zlepšenie a zlepšenie štandardov kontroly kvality. Metóda stanovenia je jednoduchá a rýchla a obsahové limity sú primerane formulované. Po metodickom overení sú presnosť, presnosť, linearita, trvanlivosť a presnosť dosahu dobré a možno ich použiť na určenie obsahu orálnej tekutiny Cistanche Rong Tongbang [1-5].

1 Nástroje a činidlá

1.1 Nástroje

vysokovýkonný kvapalinový chromatograf Waters (2695 a ARC); 1/100,000 elektronické váhy (MS205DU), 1/10,000 elektronické váhy (ME204E, Mettler-Toledo).

1.2 Testujte lieky a činidlá

strana Echinacea (číslo šarže 110670-201706, čistota 89,7 %); stilbénový glykozid (číslo šarže 110844-201915, čistota 90,7 %), všetko od China Institute of Food and Drug Control; in orálna kvapalina Cistanche purpurea (číslo šarže 20191204, 20191205, 20191206, 20200404, 20200405, 20200406, 20200407, 20200404, 202, 02, 02 ; metanol atď. sú chromatograficky čisté; voda je ultračistá voda; ostatné činidlá sú analytickej čistoty.

2 Metódy a výsledky

2.1 Chromatografické podmienky

Ako chromatografickú kolónu použite Tech Mate C{{0}}ST (4,6 mm × 250.0 mm, 5 μm), ako mobilnú fázu A použite acetonitril a použite 0,2 % roztok kyseliny mravčej ako mobilná fáza B. Vykonajte gradientovú elúciu podľa pravidiel v tabuľke 1; teplota kolóny Teplota je 35 stupňov; detekčná vlnová dĺžka je 330 nm; prietoková rýchlosť je 1,0 ml/min; injekčný objem testovanej vzorky a referenčnej látky je každý 10 ul; počet teoretických poschodí by nemal byť menší ako 4000 na základe píku echinaceazidu.

2.2 Príprava roztoku

Príprava referenčného roztoku: Vezmite vhodné množstvá referenčnej látky echinaceazid a referenčnej látky stilbénglykozid, presne ich odvážte a pridajte 7 0 % metanolu, aby ste pripravili zmiešaný roztok obsahujúci 7 0 ug echinaceazidu a 150 ug stilbénového glykozidu na 1 ml. , to je všetko. Príprava testovacieho roztoku: Produkt dobre pretrepte, odoberte asi 0,3 g, presne odvážte, vložte do 25 ml hnedej odmerky, pridajte primerané množstvo 70 % metanolu, sonikujte 30 minút, nechajte vychladnúť, pridajte 70 ml. % metanolu na zriedenie na stupnicu, dobre pretrepte, prefiltrujte a odoberte zostávajúci filtrát, aby ste ho získali. Príprava roztoku negatívnej vzorky: Presne odvážte asi 0,3 g negatívnej vzorky a pripravte ju podľa spôsobu prípravy testovacieho roztoku.

Obrázok 1 HPLC chromatogramy tráviacej orálnej tekutiny Congrong

2.3 Metodický prehľad

2.3.1 Pracovná krivka a lineárny rozsah

Presne natiahnite zmiešaný referenčný roztok a pridajte 70% metanol, aby ste pripravili sériu zmiešaných referenčných roztokov. Presne odoberte 1{{20}}} µl každého z vyššie uvedených sérií kontrolných roztokov, vstreknite ho do kvapalinového chromatografu a zmerajte integrovanú hodnotu plochy píku. Zoberte koncentráciu referenčného roztoku (µg/ml) na osi y (x) a integrovanú hodnotu plochy píku na vodorovnú os (y). Nakreslite graf, aby ste získali priamku prechádzajúcu počiatkom. Regresná rovnica je y1=1.510 4×106x-1.177 2×105 (r=0.999 9), {{10} }.644 0×106x-6.3836×105 (r=0.999 9). Výsledky ukazujú, že echinaceazid a stilbénglykozid majú dobrý lineárny vzťah v rozsahu hmotností 0.{19}} až 0.955 8 ug a 0.385 3 až 4.623 5 ug.

Cistanche Tubulosa

2.3.2 Skúška presnosti

Presne odoberte 10 µl zmiešaného referenčného roztoku a vstrek zopakujte 6-krát pri chromatografických podmienkach "2.1". RSD plôch píkov echinakozidu a stilbénového glykozidu boli namerané ako 0,66 %, respektíve 0,59 %, čo naznačuje, že presnosť prístroja je dobrá.

2.3.3 Skúška stability

Podľa metódy v časti 2.1 zoberte tento produkt (číslo šarže 20191205) na prípravu testovacieho roztoku, vstreknite vzorky na meranie o 0 h, 4 h, 8 h, 12 h, 20 h a 24 hodín po príprave a zaznamenajte plochu píku. , relatívna smerodajná odchýlka je medzi 2,37 % a 2,79 %. Výsledky ukazujú, že testovací roztok je stabilný do 24 hodín.

2.3.4 Skúška opakovateľnosti

Odoberte 6 alikvotných častí z rovnakej šarže skúšobných vzoriek (číslo šarže 20191205) a vstreknite vzorky na meranie podľa chromatografických podmienok podľa bodu „2.1“. Výsledky Relatívna štandardná odchýlka echinaceazidu bola 1,48 %, s dobrou opakovateľnosťou; relatívna štandardná odchýlka stilbénového glykozidu bola 1,10 %, s dobrou opakovateľnosťou.

Cistanche Tubulosa

2.3.5 Stanovenie rýchlosti obnovy

Prijmite pridanie a regeneráciu vzorky, aby ste poskytli 50 % množstva vzorky (0,3 g) testovanej vzorky a obsah vzorky 1.0:0 0,5, 1.{{10}}:1.0, 1.{19}}:1,5 a presne absorbovať referenčný rezervný roztok látky 1 (obsah glykozidu echinacey je 0.431 5 mg/ml) 1.0 ml, 2.0 ml a 3,0 ml každý a potom presne pridajte zásobný roztok referenčnej látky 2 (stilbén glykozid hmotnostná koncentrácia 0.8678 mg/ml) 1,25 ml, 2,50 ml a 3,75 ml, v tomto poradí. Pridajte do odmerných baniek s objemom 25 ml

Vyfúkajte dusíkom. Potom presne odvážte 9 vzoriek z tej istej šarže so známym obsahom (číslo šarže 20191205, obsah echinaceazidu je 7.810 2 mg/g, obsah stilbénového glykozidu je 14.232 4 mg/ g) a množstvo vzorky každej vzorky je Množstvo vzorky testovanej vzorky je asi 0,15 g. Pridajte ho do vyššie uvedenej odmernej banky. Pripravte ho podľa metódy pod skúšobným roztokom. Zmerajte to podľa zákona. Vypočítajte mieru obnovy. Výsledok je jednoduchý.

Priemerné výťažky stilbénových glykozidov a stilbénových glykozidov boli 98,28 % a 98,43 %, v uvedenom poradí, a RSD boli 1,56 % a 0,97 %, v uvedenom poradí, čo naznačuje dobrú presnosť prístroja.

AK MÁTE ZÁUJEM O TENTO ČLÁNOK, MÔŽETE NÁS KONTAKTOVAŤ:

E-mail:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel:+86 15292862950

Nakupujte pre ďalšie špecifikácie Podrobnosti:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop