SLC37A2, Molekula súvisiaca s fosforom sa zvyšuje v bunkách hladkého svalstva v kalcifikovanej aorte Ⅱ

Výsledky

Vyhľadajte kandidátske molekuly vfosfátom indukované kalcifikovanéAoSMC. Na vyhľadávanie molekúl, ktorých expresia sa zvyšuje v kalcifikovanej AoSMC, sa uskutočnila analýza mikročipov DNA približne 26 000 génov s použitím kalcifikovanej AoSMC a nekalcifikovanej mRNA AoSMC. Obrázok 1 ukazuje teplotnú mapu rôznych génov exprimovaných medzi AoSMC nekultivovanými s 2,6 mM a tými, ktoré sa kultivujú s 2,6 mM P počas 12 dní. Celkovo 3 066 génov vzrástlo viac ako dvojnásobne na kultivovaných v porovnaní s nekultivovanými AoSMC. Gény so zvýšenou expresiou boli molekuly súvisiace s tvorbou osteoblastov, ako je osteopontín, periostínový osteoblastový špecifický faktor (POSTN), Wnt3, interleukín-6 (IL-6) afibroblastový rastový faktor23 (FGF23), ako aj niekoľko molekúl v superrodine SLC (tabuľka 1). Spomedzi týchto molekúl sme sa zamerali na SLC37A2, pre ktorý sa mRNA zvýšila približne 3,1-krát na AoSMC kultivovanom s 2,6 mM P počas 12 dní v porovnaní s AoSMC nekultivovaným s 2,6 mM P. Uvádza sa, že SLC37A2 súvisí s reguláciou P, ale jeho podrobná funkcia je neznámy účinok zápalu pri expresii SLC37A2.Cievna kalcifikáciabolo hlásené, že je podporované zápalom, takže sme skúmali, či je mRNA SLC37A2 ovplyvnená zápalovou odpoveďou. 24 hodín po liečbe LPS sa IL-6 významne zvýšil v porovnaní s AoSMC, ktorá nebola liečená LPS (obr. 2A). Tieto výsledky boli tiež pozorované 72 hodín po liečbe LPS. Medzi skupinami neboli žiadne významné rozdiely v expresii SLC37A2mRNA (obr. 2B).

KLIKNITE SEM A ZÍSKAJTE PRÍRODNÝ BIO EXTRAKT CISTANCHE S 25 % ECHINAKOZIDU A 9 % AKTEOZIDU PRE FUNKCIU OBLIČIEK

Podporná služba Wecistanche - Najväčší vývozca cistanche v Číne:

E-mail:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel:+86 15292862950

Nakupujte pre ďalšie špecifikácie Podrobnosti:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

Expresia SLC37A2 vo fosfátom indukovanej kalcifikovanej AoSMC. Aby sme určili, či sa SLC37A2 podieľa na kalcifikácii, skúmali sme expresiu SLC37A2 mRNA na nekalcifikovanej a kalcifikovanej AoSMC (obr. 3). Kalcifikácia sa pozorovala v AoSMC kultivovaných s 2,6 mM P počas 6 dní a pokročilejšia kalcifikácia sa pozorovala v AoSMC kultivovaných s 2,6 mM P počas 12 dní (obr. 3A). Runx2 mRNA významne vzrástla na kalcifikovanej AoSMC v porovnaní s nekalcifikovanou AoSMC (obr. 3B). 3C). Expresia proteínu SLC37A2 sa významne zvýšila asi dvojnásobne na 6. deň v kalcifikovanej AoSMC v porovnaní s nekalcifikovanou AoSMC (obr. 3D).

Expresia SLC37A2 v CKD modeli potkanov.

Aby sme odhalili, či sa SLC37A2 podieľa na vaskulárnej kalcifikácii in vivo, skúmali sme expresiu mRNA SLC37A2 na cievach adenínom indukovaných CKD potkanov. Adenínom indukované CKD potkany boli vytvorené podľa protokolu znázorneného na obr. 4A. Tabuľka 2 ukazuje telesnú hmotnosť a biochemické údaje v deň usmrtenia. Telesná hmotnosťadenínom indukované CKDu potkanov bol významne nižší v porovnaní s potkanmi bez CKD. V porovnaní so skupinou bez CKD mali skupiny s CKD vyššie hladiny P a Cr v plazme a nižšie hladiny Ca v plazme a 24-hodinové vylučovanie P, Ca a Cr močom. Ďalej, tieto výsledky boli výraznejšie v skupine s CKD-HP, ako bolo vidieť v predchádzajúcich štúdiách.37,39) Takže renálna funkcia sa znížila v skupine CKD, najmä v skupine CKD-HP. Skúmali sme expresiu mRNA v aortálnych cievach potkanov s CKD (obr. 4). Hoci neboli žiadne významné rozdiely v expresii mRNA Runx2, transkripčného faktora, ktorý sa pohybuje na začiatku mechanizmu vaskulárnej kalcifikácie, medzi skupinami (obr. 4B) sa expresia mRNA osteopontínu významne zvýšila v skupine s CKD-HP v porovnaní so skupinou bez skupina CKD aSkupina CKD-LP(Obr. 4C). Expresia mRNA SLC37A2 bola tiež významne zvýšená v skupine CK D-HP v porovnaní so skupinou bez CKD a skupinou CKD-LP (obr. 4D). Pretože u týchto potkanov boli veľké individuálne rozdiely, skúmali sme koreláciu medzi osteopontínom a mRNA SLC37A2 a našli sme významnú koreláciu medzi týmito molekulami (obr. 4E). Histologické vyšetrenie torakoabdominálnej aorty odhalilo mediálnu kalcifikáciu len v aorte skupiny CKD-HP (obr. 5A). Aby sme preskúmali miesto expresie SLC37A2 na aorte, uskutočnili sme imunofarbenie aorty potkanov CKD-HPrat. SLC37A2 bol silne exprimovaný v oblasti, kdevaskulárna kalcifikáciadošlo (obr. 5B).

Obr. 1. HeatMap rôzne exprimovaných génov medzi AoSMC nekultivovanými s 2,6 mM P a AoSMC kultivovanými s 2,6 mM P. Červená predstavuje gény s vysokou úrovňou signálu a zelená predstavuje gény s nízkou úrovňou signálu. AOSMC bunky hladkého svalstva aorty. Pozrite si obrázok v online verzii.

Diskusia

Skúmali sme kandidátske molekuly súvisiace s P, ktoré sa podieľajú na vaskulárnej kalcifikácii. Naše výsledky ukázali, že SLC37A2 je jednou z molekúl, ktoré sa zvyšujú svaskulárna kalcifikáciain vitro a in vivo.

Rodina SLC37 patrí do superrodiny SLC a zahŕňa proteíny: SLC37A 1-440) Rodina SLC37 obsahuje transmembránové proteíny v membráne endoplazmatického retikula a má sekvenciu homológnu s bakteriálnym organofosfátovým antiporterom.(41) SLC37A4 je známejší akoglukózo6-fosfátový transportér.(2-44 Existuje však málo správ o SLC37A2 a podrobnosti o jeho funkcii nie sú úplne pochopené. SLC37A2, tiež známy ako SPX2, je hojne exprimovaný v myšacích makrofágoch, slezine, týmusu a bielom tukovom tkanive (WAT ) geneticky obéznych myších modelov a buniek podobných osteoklastom odvodených z buniek Raw264.7.(45.6) Proteín SLC37A2 transportuje výmeny glukóza-6-fosfát/fosfát a fosfát/fosfát.(4) Nedávno správy ukázali asociáciu SLC37A2 s chorobou zvierat. (47-49) Defekt SLC37A2 spôsobujekraniomandibulárna osteopatia(CMO), samoobmedzujúce proliferatívne ochorenie kostí u plemien teriérov. (47) U dojníc je homozygotná mutácia SLC37A2 zodpovedná za smrť embryí. (8.9) Okrem toho. SLC37A2 sa považuje za cieľ cieľových génov vitamínu D. (tak) Zvažoval sa aj potenciál cieľového génu progesterónového receptora pre fosfor-Ser294 pri progresii rakoviny prsníka (1) Uvádza sa, že zápal môže spôsobiť aj zhoršiť vaskulárnu kalcifikáciu. (2s26) Ďalej. SLC37A2 je hojne exprimovaný v makrofágoch a WAT, ktoré sú ovplyvnené infiltráciou makrofágov. (s) Preto. usúdili sme, že SLC37A2 môže byť molekula exprimovaná počas zápalu. Naše zistenia však nepreukázali žiadne zvýšenie expresie SLC37A2 v AoSMC vystavenom zápalovej reakcii, nezdá sa však, že by táto molekula bola priamo ovplyvnená zápalovou stimuláciou. SLC37A2 sa môže podieľať na vaskulárnej kalcifikácii prostredníctvom iného mechanizmu ako zápal.

Uvádza sa, že SLC37A2 pôsobí ako P-spojenýantivrátnik. (41) Okrem toho sa uvádza, že SLC37A2 je cieľovým génom pre vitamín D a gén SLC37A2 obsahuje hlavné miesto viažuce vitamín Dreceptor(ss2) Systematicky korelované zmeny v expresii génov SLC37A2 a cirkulujúcich foriem vitamínu D. bol pozorovaný v ľudských mononukleárnych bunkách periférnej krvi. (50) Receptory vitamínu D sa viažu na 1a, 25-dihydroxy vitamín D, ktorý je metabolitom vitamínu D, a regulujú génovú expresiu. h, 25-dihydroxyvitamín D, funguje pri absorpcii Ca a P v čreve, mobilizácii Ca v kostiach a reabsorpcii Cain v obličkách. (3) Existuje správa, že u adenínom indukovaného modelu CKD potkanov bolo sérum la, 25-dihydroxy vitamín D, významne vyššie u potkanov s vysokým p diétnym príjmom, s pokročilou vaskulárnou kalcifikáciou, v porovnaní s potkanmi s nízkou -p príjem stravy.39) SLC37A2 môže súvisieť s reguláciou P prostredníctvom vitamínu D. Na objasnenie toho, že vitamín D ovplyvňuje expresiu SLC37A2 in vitro a vivo, sú potrebné ďalšie štúdie.

Ukázalo sa, že mechanizmus vaskulárnej kalcifikácie je podobný ako pri tvorbe kostí. Nedostatok SLC37A2 spôsobený CMO je klinicky porovnateľný s ľudskou infantilnou kortikálnou hyperostózou, tiež známou ako Caffeyova choroba.7 Okrem toho existujú správy, že SLC37A2 je exprimovaný v kostnej dreni a osteoklastoch. Hytone a kol. (7 predpokladali, že dysfunkcia SLC37A2 by spôsobil nerovnováhu vo funkcii tvorby osteoblastickej a osteoklastickej kosti a v dôsledku toho by viedol k hyperostóze.

Runx2 je nevyhnutným transkripčným faktorom pre vaskulárnu kalcifikáciu. Tiež sa uvádza, že Runx2 je osteoblastový diferenciačný transkripčný faktor exprimovaný vo vývoji epitelových buniek prsníka. (s435) Runx2 sa javí ako nevyhnutný na reguláciu cieľových génov fosfor-Ser294 progesterónu, ktoré sú spojené s progresiou rakoviny prsníka. SLC37A2 sa považuje za kandidátsky cieľový gén progesterónového receptora pre fosfor-Ser294. (s1) Preto sa predpokladá, že Runx2 môže regulovať SLC37A2 V tejto štúdii expresia mRNA SLC37A2 v aorte potkanov CkD korelovala s mRNA osteopontínu, ktorá sa zameriava na gén Runx2.