Ako molekulárnosť vtlačených polymérov absorbuje a čistí acteozid v cistanche tubulosa

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Selektívna adsorpcia a čistenie acteozidu v cistanchovej tubulóze molekulárne vytlačenými polymérmi

Xiaobin Zhao, Wenjing Pei, Ruili Guo, Xuegin Li

ZAVEDENIE

Cistanchetubulosaje jedným z cenných čínskych bylinných liekov (Li et al2016; Morikawa a kol.。 2019), Surový extraktCistanchetubulosaobsahuje hlavne fenyletanoid glykozidy, polysacharidy, oligosacharidy, flavonoidy, polyfenoly a bielkoviny, medzi ktorými sú fenyletanoidné glykozidy najúčinnejšími zložkami cistanchédovej tubulózy (Wang et al.2015, 201Z; Yan et al,2017). Štúdie ukázali, že fenyletanoid glykozidové zlúčeniny majú účinky tonifikácie obličiek Yang, antioxidácie, antinádoru, anti-starnutia, zlepšenia pamäti atď. Fenyletanoid glykozidy majú širokú škálu aplikácií v medicíne, zdravotnej starostlivosti, potravinách. a tak ďalej (Yang et al,2017; Fu et al,2018; Wu et al,2019; Xu a kol., 2019). S cieľom získať výrobky vysokej čistoty je kľúčom k problému vysoko selektívne oddelenie cieľovej látky. Preto. je veľmi dôležité navrhnúť a vyvinúť metódu čistenia s dobrou selektivitou, vysokou účinnosťou, úsporou energie a šetrnosťou k životnému prostrediu pre vývoj a využitie cistanche tubulosa.

acteosidevcistancheMá mnoho účinkov

Pbenyetanoid glykozidy sú najdôležitejšie farmakologické účinné látky v cistanche tubulosa, vrátane echinakozidu (ECH),acteoside(ACT), izomerické a 2-acetyl cistanche tubulosa glykozidy. ECH a ACT (Acteoside)sú hlavnými zložkami fenyletanoidných glykozidov s obsahom až 90%. V súčasnosti sa výskum cistanche tubulosa zameriava hlavne na jej farmakologické zložky. Metódy separácie a čistenia zahŕňajú najmä makroporóznu adsorpčnú živicu, vysokorýchlostnú protiprúdovú chromatografiu, membránovú separáciu a molekulárny odtlačok (Han et al,2012; Dong et al, 2015; Čang a kol., 2018a; Pei et al,2019; Si et al,2019). Makroporózna adsorpčná živica je vyspelá technológia, ale existujú určité nedostatky, ako je veľké množstvo rozpúšťadla, dlhá doba, nízky výnos a zložitý proces. Monomérové zlúčeniny vysokej čistoty sa môžu extrahovať z prírodných produktov vysokorýchlostnou protiprúdovou chromatografiou. Membránová separácia je nový druh separačnej technológie, ktorá môže urobiť účinné zložky prírodných produktov bohatými a s malým množstvom nečistôt, ale proces separácie je komplikovaný (Li et al., 2015ab; Wang et al,2016:Zhang et al,2016.2018b; LiX, et al, 2019). Ako nová separačná technika môže molekulárny odtlačok urobiť aktívne zložky prírodných produktov vysoko koncentrovanými s niekoľkými nečistotami a účinne zlepšiť čistotu výrobkov.Molekulárne vytlačené polyméry(MDC)preukázali dôležité aplikácie na čistenie a prekoncentráciu biomolekúl z komplexných ľudských tekutín, ako je moč alebo posmrtná krv (Lulinski et al,2015.2016).

Technológia molekulárneho odtlačku syntetizuje vysoko skrížené MDC (Molekulárne vytlačené polyméry)prostredníctvom orientácie šablóny, vytvárania dutín, ktoré napodobňujú väzbové miesta protilátok, enzýmov a iných biologických materiálov a dávajú prednosť väzbe s molekulami šablóny, čím sa poskytuje účinná metóda molekulárneho rozpoznávania (Hrobonova et al,2018; Liang et al,2018; Hong et al,2019; Ma et al,2019). Mips（Molekulárne vytlačené polyméry)pritiahli širokú pozornosť v oblasti extrakcie v pevnej fáze, senzorov, protilátok, enzýmovej simulácie, receptorov a katalyzátorov (Zhang et al。 2013; Ansari a Karimi, 2017; Diltemiz et al.,2017; Xiao et al,2018; Yu et al。 2019), Nedávno MDC（Molekulárne vytlačené polyméry)majú potenciálne aplikácie v zariadeniach na podávanie liekov alebo chirálnom rozlíšení (Lulinski, 2017; Marc et al, 2018; BelBruno, 2019; Sobiech et al,2019). Hlavné výhody MDC（Molekulárne vytlačené polyméry)sú jednoduchosť prípravy a vytvorenia "vlastných" možných väzobných miest úpravou procesu syntézy cieľovej molekuly potrebného ako šablóna v procese polymerizácie, ako aj výhody nízkych výrobných nákladov, stability, robustnosti a odolnosti voči kyselinám a zásadám (Speltini et al,201Z; Wu et al,2017; Xu a kol., 2017; Li F.et al,2019; Zhang et al 2019). Najmä MDC（Molekulárne vytlačené polyméry)boli úspešne použité ako selektívny adsorbent na extrakciu v pevnej fáze na extrakciu účinných látok z prírodných produktov (Huang et al,2019; Li Z. a kol., 2019; Wang Y.et al,2019). Molekulárny odtlačok sa delí na kovalentný molekulárny odtlačok a nekovalentný molekulárny odtlačok. Kovalentný molekulárny odtlačok má vlastnosti silnej priľnavosti a ťažkého elúcie molekúl šablóny, zatiaľ čo nekovalentný molekulárny odtlačok má vlastnosti silnej priľnavosti a ľahkého elúcie molekúl šablóny. Preto sa na separáciu a čistenie prírodných produktov často používajú nekovalentné polyméry molekulárneho odtlačku. Väzobným režimom nekovalentnej metódy molekulárneho odtlačku a cieľových zložiek je vo všeobecnosti slabá väzba kovalentnej väzby, ako je vodíková väzba, van der Waalsova sila, hydrofóbna interakcia, akumulácia π-Tt (Yoshikawa et al,2016; Vicario et al,2018), atď. Nedávna literatúra uvádza, že interakcia medzi zložkami pred-polymerizačného komplexu môže byť diskutovaná teoretickou analýzou pre návrh funkčných monomérov, skrížených spojovacích činidiel a rozpúšťadiel (Sobiech et al,2014,2017; Cowen et al, 2016; Giebultowicz et al,2019). Polymerizácia zrážok je najčastejšie používanou metódou pri syntéze odtlačkových materiálov, ale hlavnou nevýhodou tejto metódy je, že kroky potrebné na prípravu odtlačkových materiálov sú zložité a početné (Phungpanya et al,2018). Preto táto štúdia získala hlavne akýsi imprintovaný materiál s vysokou selektívnou adsorpčnou kapacitou pre ACT (Acteoside) hromadnou polymerizáciou, čo je jednoduchá a rýchla metóda syntézy (Cantarella et al, 2019; Wang H.et al., 2019).

Cieľom tejto štúdie je získať vytlačený materiál s vysokou selektívnou adsorpčnou kapacitou pre ACT (Acteoside) jednoduchou a rýchlou metódou syntézy. Séria MDC（Molekulárne vytlačené polyméry)rôznych funkčných monomérov a rôznych rozpúšťadiel boli syntetizované hromadnou polymerizáciou. Syntetické materiály sa vyznačovali skenovacou elektrónovou mikroskopiou (SEM) a Fourierovou transformačnou infračervenou spektroskopiou (FT-IR). Hodnotila sa adsorpčná výkonnosť fenyletanoidného glykozidového vodného roztoku a do hĺbky sa skúmala jeho väzbová selektivita. MDC（Molekulárne vytlačené polyméry)s optimálnym adsorpčným výkonom sa použil na adsorbciu a čistenie ACT z surového extraktu cistanche tubulosa.

Cistanche tubulosa

MATERIÁLY A METÓDY

Materiály

Echinakozid(ECH,>98%)aActeoside(ACT),298%)bolo získaných od spoločnosti Sunny Biotech Co., Ltd.(Shanghai, Čína).Cistanche tubulosabol získaný od spoločnosti Cistanche Rongtang Biotechnology Co., Ltd.(Xinjiang, Čína). 4-Vinylpyridín(4-VP,98%), kyselina metokrylová(MAA,98%),2-hydroxyetylmetakrylát (HEMA,98%),etylénglykol dimetyl akrylát akrylát(EGDMA,98%), azobisisobutyronitrile(AIBN,98%),divinyl benzén sú (DVB, 98%) a N,N-dimetylformamid (DMF,99,5%)boli získané z Adamas Reagent Co., Ltd.(Šanghaj, Čína). Acetonitril (ACN,>99,9%), metanol (>99,9%) a kyselina octová (>99,9%) boli získané od spoločnosti ThermoFisher Scientific Co., Ltd. (Šanghaj, Čína). Etanol (≥99,7%) bol získaný od spoločnosti Yong sheng Fine Chemical Co., Ltd. (Tianjin, Čína). Deionizovaná voda sa pripravuje z laboratórneho systému čistej vody Smart-S15 (Šanghaj, Čína).

Nástroje

Povrchová morfológia a mikroštruktúra boli preskúmané skenovacou elektrónovou mikroskopiou (SEM, SU8010, Hitachi, Japonsko). Chemická štruktúra MDC（Molekulárne vytlačené polyméry)(FT-IR, Nicolet AVATAR360, Nikolai, USA)bol meraný FT-IR. Testovacie podmienky FT-IR: dĺžka kroku je 2 cm-I a rozsah skenovania je 4 000 - 500 cm-l a na prípravu MDC sa používa metóda útlmu celkového odrazu（Molekulárne vytlačené polyméry).

Veľkosť pórov, rozloženie a špecifická plocha MDC（Molekulárne vytlačené polyméry)Merajú sa pomocou špeciálnej fyzickejadsorpciazariadenie (Mike, ASAP 2460). Podmienky adsorbentného testu: odplynenie pri teplote 60°C počas 12 h, N,adsorpciaa desorpčné krivky boli namerané pri teplote 196°C.'H boli spektrá jadrovej magnetickej rezonancie ("H NMR) zaznamenané v DMSOd6 na spektrometri AV-300 (Bruker, Švajčiarsko) s TMS ako interným štandardom a hodnoty sú uvedené v ppm (δ).

Vysokovýkonná kvapalinová chromatografia (HPLC) s ultrafialovým (UV) detektorom žiarenia bola vykonaná pomocou systému roztoku 2695 (Waters, USA). Chromatografia sa vykonávala na kolóne C18 v opačnej fáze (Symetria, 250×4,6 mm, 5μm). Analytické metódy boli nasledovné: mobilná fáza bola acetonitrilová (A)a kyselina octová/voda(1:44,v/v)(B) pri prietoku 1 ml/min s objemom injekcie 10- μl a vlnová dĺžka UV detektora bola nastavená na 330 nm. Teplota kolóny bola udržiavaná na 30 °C (Yang et al., 2018). Podmienky elúcie prechodu sú uvedené v tabuľke 1.

Analýza HPLC pomocou ECH a ACT(Acteoside)štandardné roztoky(2 mg/ml, 1 mg/ml, 0,2 mg/ml, 0,04 mg/ml, 0,008 mg/ml a 0,0016 mg/ml) podávali ECH a ACT(Acteoside)kalibrácia. Lineárna regresná rovnica je znázornená v tabuľke 2.

Limity detekcie pre ACT(Acteoside)a ECH boli 0,528 a 0,528 μg/ml. Limity kvantifikácie pre ACT a ECH boli 1,60 a 1,60 μg/ml. Presnosť ACT a ECH bola 1,40 a 1,89%. Tá istá vzorka bola vstreknutá päťkrát, aby sa dosiahla presnosť ACT a ECH 1,40 a 1,71%.

Syntéza MDC（Molekulárne vytlačené polyméry)

Proces prípravy MIP1 je nasledovný: po prvé, molekula šablóny ACT(Acteoside)(125,00 mg) a funkčný monomér 4-VP(210,00 mg) sa dostatočne rozpustili v zmiešanom roztoku (2,50 ml) acetonitrilu a N, N-dimetylformamidu(1:1,5, v/v). Potom sa pred-polymerizačná reakcia zmesi vykonávala pri teplote 25 °C počas 20 minút. Následne boli pridané EGDMA (1,12 g) a AIBN(15,00 mg) a úplne rozpustené do zmesi pred polymerizáciou. Získaný prepolymérový roztok bol evakuovaný a naplnený argónovým plynom. Proces polymerizácie sa uskutočnil pri teplote 60 °C pre 24 h. Nakoniec boli bledožlté sypké polyméry získané a uzemnené na prášok, ktorý bol preosiaty cez obrazovku s 200 okami.

Zmiešaný roztok metanolu a kyseliny octovej (9:1, v/v)bol použitý na eluáciu molekúl šablóny ACT(Acteoside). Molekuly ACT boli eluované a opakované na umývanie, až kým sa v MIP1 nenašli žiadne molekuly ACT.（Molekulárne vytlačené polyméry). Reziduálna kyselina octová v MIPI sa umyla metanolom a potom sa MIP1 sušila pri teplote 40 °C. ACT(Acteoside)bola použitá ako molekula šablóny a rôzne funkčné monoméry, skrížené spojovače a rozpúšťadlá sú uvedené v tabuľke 3 a používajú sa na syntézu MDC（Molekulárne vytlačené polyméry)a NIP.

Statické adsorpčné experimenty

Desať miligramov ACT(Acteoside)Mips（Molekulárne vytlačené polyméry)boli presne odvážené a umiestnené do 10 ml fľaše s čiernym uzáverom. Desať mililitrov ACT(Acteoside)pridal sa štandardný roztok s koncentráciou 0,50 mg/ml. Fľaša s čiernym uzáverom bola umiestnená v termostatickom šejkri. Teplota bola nastavená na 30°C, rýchlosť bola 150 ot/min aadsorpciaProces bol 24 h. Jeden mililiter roztoku bol použitý na stanovenie obsahu ACT vo filtráte hplc.

Dynamické adsorpčné experimenty

Päťdesiat mililitrov roztoku vzorky (štandardný roztok aleboCistanche tubulosaextrakt) boli umiestnené v uzavretej fľaši a 20,00 mg MDC（Molekulárne vytlačené polyméry)boli pridané a umiestnené do trepačky pri teplote 30 °C počas 24 hodín. Vzorky boli odobraté v stanovenom čase do 24 hodín. V porovnaní so SPE bol d-SPE cennejší, pretože proces d-SPE sa môže vyhnúť problémom s zmenami tlaku a prietoku. Z každej vzorky sa odobralo jedno mililiter roztoku a koncentrácia ACT(Acteoside)v roztoku bol určený hplc.

S cieľom vyšetriťadsorpciaproces, rovnica reakčného modelu pseudo-prvého rádu a rovnica reakčného modelu pseudo-druhého rádu bola použitá na opisadsorpciaProces aktu(Acteoside)na adsorbentoch. Rovnica reakčného modelu pseudo-prvého rádu bola nasledovná:

Kde K₁jeadsorpciakonštanta rýchlosti kinetického modelu pseudo-prvého rádu; t (min) je čas; qt jeadsorpciaKapacita času t.

Rovnica reakčného modelu kvázi druhého rádu je nasledovná:

Kde K₂je konštanta adsorpčnej rýchlosti kinetického modelu pseudo-druhého rádu.

Experimenty selektivity

Štandardné riešenia ACT(Acteoside)a ECH s koncentráciou 0,50 mg/ml boli vložené do fľaše s čiernym uzáverom naadsorpciaExperimenty, ako napríklad statikaadsorpciavyššie uvedených podmienok. Z adsorbovaného roztoku sa extrahoval jeden mililiter a ACT a ECHcontent vo filtráte sa stanovili HPLC.

TáadsorpciakapacitaQ (mg/g) pre vzor viazaný na MDC（Molekulárne vytlačené polyméry)bola vypočítaná podľa nasledujúcej rovnice (Zhao et al,2017):

Kde C₀(mg/ml) a C(mg/m) sú počiatočná koncentrácia a rovnovážna koncentrácia štandardných roztokov (Wang HB. et al,2019), V(ml) je objem štandardného roztoku a m (g)je hmotnosť MDC.

Táadsorpciaselektivita MDC（Molekulárne vytlačené polyméry)bol hodnotený dvoma parametrami, ako je faktor odtlačku (IF)a faktor adsorpčnej separácie (a).

Výpočet faktora odtlačku je nasledovný:

Kde Q_MIPa Q_NIPsúadsorpciakapacitaQ(mg/g)viazanej analyzovanej látky v rovnováhe na MDC a NIP.

Výpočetadsorpciaseparačný faktor je nasledovný:

Kde C₀(mg/ml) je koncentrácia roztoku po vstrebaní, C₀(mg/ml) je počiatočná koncentrácia roztoku, V (ml) je objem roztoku v procese absorpcie a m (g) je hmotnosť sorbentu K_Dšablóna a Kpanalog sú statické distribučné koeficienty smerom k molekulám šablóny a analógové (Singh et al, 2013).

Kliknite sem pre časť II.

Od: SelektívneAdsorpciaa očistiťActeosidevCistanche tubulosaMolekulárne potlačené polyméry Xiaobin Zhao, Wenjing Pei, Ruili Guo, Xuegin Li

---Náklady v chémii | www.frontiersin.org /január 2020 | Zväzok 7 | Článok 903

REFERENCIE

1. Ansar, S a Karimi, M.(2017). Nový vývoj a trendy analytických metód analýzy liekov v biologických a environmentálnych vzorkách molekulárne vytlačenými polymérmi Trendy Anal Chem.89.146-162 DOI: 10.1016/j.tra 2017.02.002

2. BelBruno,J. J. (2019). Molekulárne vtlačené polyméry. Chem. Zjv 119,94-119. dol:10.1021/acs.chemrev.8b00171

3. Cantarell, M, Carroccio,Cistanche tubulosaDattilo,S.Awoli,R,Castako,R.Puglsi, C, et al (2019). Molekulárne vytlačený polymér pre selektívnyadsorpciadiklofenaku z kontaminovanej vody. Chem. Eng.J.367,180-188 dol:10.1016/j.cei.2019.02.14

4. Cowen, T, Karim, K a Piletsky, S.(2016). Výpočtový prístup pri návrhu syntetických receptorov-A review.Anal. Chim.Ack 936,62-74 dol: 10.1016/j aca2016.07.027

5. Ditemiz,S.E,Kecil,R,Ersoez,A,a Say,R(2017). Technológia vtlačenia moleculru do snímačov quartzcrystal mikrobalnce (QCM). Sensr 17,454-454 doi; 10.3390/s17030454

6. Dong,B.Yuan,X,Zha0,Q.,Feng,Q.,Lu,B.Guo,Y,Y,et al.(2015). Ultrazvukom asistovaná vodná dvojfázová extrakcia fenyletanokdových glyokoskdov zCistanchedeserticol Y.C. Ma stonky.J. Sep. Sd.38,1194-1203 dol: 10.1002/sc.201401410

7. Fu, C,L,J,Aipire,A,Xh,L,Yang,Y,Chen, Q,et al(2018). CGistanche tubulosa fenyletanoid glykozidy indukujú apoptózu v bunkách Eca-109 cez mitochondriálnu cestu závislú od mitochondrií. Raz lettf.17.303-313 dol: 10.3892/oL20189635

8. Gao,D.,Yang,F, Xia,Z a Zhang,Q.(2016). Molekulárne vytlačený polymér na selektívnu extrakciu luteolínu z mortória Chryzantém Ramat J. Separácia Sdence.39, 3002-3010.doi:10.1002/ssc201600520

9. Giebultowicz,J, Sobiech, M, Ruycka, M a Lulinski, P. (2019). Teoretický a experimentálny prístup k hydrofilnej interakcii disperznej extrakcie 2-amino tiazolínu-4-karboxylovej kyseliny z ľudskej postmortálnej krvi.J. Chromatogr.A 1587,61-72 doi:10.1016/ichroma2018.12.028

10. Haginaka,J,Nshimura,K,Kimachi,T,Inamoto,K,Takemoto,Y a Kobayashi, Y.(2019). Retenčné a molekulárne rozpoznávacie mechanizmy molekulárne vytlačených polymérov pre promazínové deriváty Talan ta 205-20149. dol:10.1016/].takanta_2019.120149

11. Hammam, M. A, Wagiy, H. A, a El Nashar, R M.(2018). Elektrochemická detekcia hydrochloridu moxifloxacínu na základe novo navrhnutého molekulárne potlačeného polyméru. Sens Actua. B-Chem.275,127-136 dol: 10.1016/jsnb.2018.08.041

12. Han,L,Ji,L.,Boakye-Yiadom, M, Li, W., Song,X,and G30,X.(2012). Predparatívna izolácia a čistenie štyroch zlúčenín odCistanchesdeserticola Y.C. Ma vysokorýchlostnou protiprúdovou chromatografiou. MoLecules17,826-8284 DOI; 103390/molekuly17078276

13. Hong.S. She, Y, Cao, X, Wang, M, He, Y., Zheng L.et al.(2019). Nová skúška fluorescencie cdSe/ZnS kvantových bodiek založená na molekulárne vtlačených citlivých membránach na stanovenie zvyškov triazofov v kapuste a jablku. Z. Chemt.7:130.dol; 103389/fchem201900130

14. Hrobonov,K,Machynakova, A a CimarikI. (2018). Stanovenie dicoumarolu v MeliLofs Officinalis L. použitím molekulárne potlačenej polymérnej extrakcie pevnej fázy spolu s vysoko výkonnou kvapalnou chromatografiou. I. Ctrortatogr. A 1539.93-102.bodka 10.1016/ichroma201801.03

15. Huang,Y, Pan, J.,Liu,Y,Wang,M,DengS a Xia,Z.(metóda ASPE 2019.ASPE s dvoma MB v dvoch krokoch fr zlepšenie selektivity MDC（Molekulárne vytlačené polyméry)AnalL Chemt 91.8B36-8442 DOI; 10.1021/acsanalchem.9b01453

16. Li. C, Ma.X.Zhanm, X, Wang R, Chen, Y.,and Li,Z(2016). Magnetická molekulárne potlačená extrakcia polymérnych nanočastíc na báze pevných fáz spolu s plynovou chromatografiou-mas spektrometriou na selektívne stanovenie stopového di-(2-etylhexylftalátu vo vzorkách vody. AmaL Bioanal Chemt.408,7857-7864.dol:10.1007/s00216-016-9889-x

17. Li, F, G3o, J., Li, X.Li Y,He, X,Chen,L,et al.(2019). Príprava molekulárne vtlačených polymérov funkcionalizovala uhlíkové nanotrubice odstránenie aristolochickej ai. J. Chromater, A 16168-177. dol:10.1016/ichroma.2019.06.0-3

18. LI.X.Gher.Y.Zhamr.H. Wang S.Jiang ZGuo, Ret al. (2015a). Efektívne CO, zachytenie funkcionalizovanými nanošetmi oxidu grafénu ako plnivá na výrobu multi spermia selektívnej zmiešanej matricovej membrány ACS Appl.Mater. Medzifaes.7, 5528-5537.dol: 10.1021/acsami5b00106

19. Li, X, Hou, J., Guo, R, Wang, Z a Zhang, I. (2019). Vytvorte jedinečné membrány zmiešanej matrice so štruktúrou skrížených kostí začlenením ultratenkých mikroporéznych nanošetov pre efektívnu separáciu CO2. ACS Appl Mater. 11,24618-24626. bodka 10. 1021/asmi9b 07815

20. Li X.Ma,LZhang.H,Wang, S.Jiang.Z,Guo. R,et al.(2015b). Synergický účinok kombinácie uhlíkových nanotrubíc a oxidu grafénu v zmiešaných matricových membránach 6r efektívne CO, separácia. Si. 479,1-1a dol; 10.1016/imemsci2015.01.014

21. Li,ZWang JChen, X,Hu, S.Gong. T.and Xian, Q.(2019). Nová molekulárne potlačená metóda extrakcie polymérno-pevnej fázy spojená s vysoko výkonnou kvapalnou chromatografiou-tandemovou hmotnostnou spektrometriou na stanovenie nitrozamínov vo vzorkách vody a nápojov. Potraviny Chem.292, 267-274.dor 10.1016/j_foodchem2019.04036

22. Liang, R, Wang.T, Zhang H, Y30, R a Qin, W.(20181. Rozpustné molekulárne vtlačené nanorody pre homogénne molekulárne rozpoznávanie. Predný. Chem 6-81 dol:103389/fchem.2018.00081

23. Liu, B., Ouyang.J.Yun, X, Wang L, and Zhao, B.(2013),Adsorpciavlastnosti a preparatívne oddelenie fenyletanoidných glykozidov z Cistanche deserticola použitím makroporéznych živíc. J.Chromatogr.B 937, 84-90. bodka 101016/j.jchromb2013. 08 018

24. L.ulinsi,P. (2017). Molekulárne vytlačené zariadenia na dodávanie liekov na báze polymérov: spôsob aplikácie v modernej farmakoterapii. Recenzia. Mater. Sd.Eng 76 1344-1353,dol; 10.1016imsec207.02.138

25. Luinsk.P,Bamburowic-Klimkowska,M,Dana.M,Szutowsk.M,a Madiejewska, D.(2016). Účinná stratégia selektívneho stanovenia dopamínu v ľudskom moči molekulárne vtlačenou extrakciou v pevnej fáze. J.

    Separ.Sci.39.895-903.doi∶10.1002/201501159

acteozid Cistanche tubulosa