Mechanizmus cistanche deserticola podporujúci črevnú funkciu

Yuan Gao, Chuanjie Zong, Fen Liu, Lei Fang, Runlan Cai, Yue Shi, Xi Chen, Yun Qi

Abstraktný

Fenyletanoidglykozidy(PhG), trieda polyfenolických zlúčenín, sa považuje za jednu z hlavných bioaktívnych zložiekCistanchedeserticolaY.C. Ma (CD), ktorého extrakt sa perorálne používa v tradičnej čínskej medicíne. Hoci predchádzajúce farmakologické štúdie uviedli, že PhG vykonávajú mnoho činností, ich profily črevnej transportnosti neboli objasnené. V tejto štúdii sme skúmali črevnú priepustnosť extraktu bohatého na PhG (PRE) zCistancheDeserticolaako integrovaný systém v monovrstvovom modeli Caco-2 s použitím systému biologickej analýzy. Výsledky ukázali, že PRE sa primárne transportuje zle absorbovanou pasívnou difúziou po koncentračnom gradiente bez effluxu, čo poskytuje farmakokinetický základ pre klinickú aplikáciu PhG vCistanche Deserticola. Určili sme tiež črevnú priepustnosť troch hlavnýchPhG[acteozid (AC), izoakteozid (IS) a echinakozid (ES)]Podľa HLPC. Okrem toho sme vyvinuli novú metódu detekcie FLULC fluorescencie, aby sme presne určili množstvo toku striedavého prúdu a IS. Ako sa očakávalo, dopravné charakteristiky týchto trochPhGsú v súlade s normami PRE, čo naznačuje, že súčasný systém biologickej analýzy je vhodný a spoľahlivý na hodnotenie prepravných charakteristík skupín účinných látok (AIG) v PRE. Okrem toho môže byť tento systém vhodný aj pre iné rastlinné extrakty, ktorým sa poskytuje vhodná bioaktivita.

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Cistanche deserticola má mnoho účinkov, kliknite sem a dozviete sa viac

Zavedenie

Bunková línia Caco-2, ktorá bola odvodená z adenokarcinómov ľudského hrubého čreva, vykazuje vlastnosti podobné enterocytom. Za normálnych podmienok sa bunky Caco-2 spontánne odlišujú od zrelých buniek a vytvárajú neporušené jednovrstvové [1]. Priľahlé bunky priľnú cez tesné spojenia vytvorené na apikálnej strane monovrstvy, čo môže diskriminovať pasívne a aktívne transportované lieky cez epiteliálnu vrstvu [2]. Vzhľadom na morfologickú a biochemickú podobnosť s normálnymi enterocytmi slúžia monovary caco-2 buniek ako dobre akceptovaný model in vitro na štúdium potenciálu absorpcie čriev a transportných charakteristík liekov [3, 4].

Na rozdiel od chemických látok sú rastlinné extrakty (PE) zmesi, ktorých biologická aktivita a aktívne zložky často nie sú dobre identifikované [5]. Okrem toho črevné transportné vlastnosti PE, na rozdiel od vlastností jeho zložiek, úzko súvisia s klinickým použitím. Merania toku pre testovaciu vzorku v monovlaji s bunkami Caco-2 bežne zahŕňajú chemické metódy, ako sú HPLC, LC / MS atď. Hoci sú tieto metódy výkonnými nástrojmi, sú zložité, časovo náročné, drahé a príležitostne vyžadujú sofistikované vybavenie. Ešte dôležitejšie je, že ani jedna, ani menšinová zložka nemôžu odrážať PE ako celok. Preto je potrebné zaviesť nový prístup nezávislý od určenia zložiek na identifikáciu a hodnotenie dopravných charakteristík PE.

CistanchedeserticolaY.C. Ma (CD), holoparazitná rastlina, je bežná tradičná čínska medicína používaná hlavne na liečbu nedostatku obličiek, telesnej slabosti a zápchy a tieto použitia boli oficiálne zaznamenané v čínskom liekopise [6]. Fenyletanoidné glykozidy (PhG) vrátane echinakozidu (ES), akteozidu (AC), izoaktozidu (IS) atď., sú triedou polyfenolických zlúčenín [7]. Sú považované za jednu z hlavných bioaktívnych zložiekCistanchedruhy [8]. Farmakologické štúdie ukázali, že bioaktivitaPhGje rôznorodá a zahŕňa antioxidačné [9], protizápalové [10], hepatoprotektívne [11], imunomodulačné [12], protizápalové [7, 13] a neuroprotektívne účinky [14]. Črevné transportné charakteristiky všakPhGneboli vyšetrené. V tejto štúdii sme skúmali priepustnosť črevnej priepustnosti extraktu bohatého na PhG (PRE) z CD ako integrovaného systému a priepustnosť troch hlavných PhG (AC, IS a EC) v diferencovaných bunkách Caco-2. Naše výsledky ukázali, že PRE sa primárne transportuje zle absorbovanou pasívnou difúziou po koncentračnom gradiente bez effluxu, čo poskytuje farmakokinetický základ pre klinickú aplikáciu PhG v CD.

Materiály a metódy

Materiály

Ľudská črevná línia Kakao-2 bola získaná z American Type Culture Collection (ATCC, Rockville, MD, USA). AC, IS a ES (>98%) boli zakúpené od spoločnosti Must Biotechnology Co(Chengdu, Čína). Dulbecco modifikované Eagleovo médium (DMEM), sérum pre hovädzí dobytok plodu (FBS) a neesenciálne aminokyseliny (NEAA) vyrábala spoločnosť Gibco BRL (Grand Island, NY, USA). 6-jamkové dosky TranswellTM (plocha rastu membrány vložte 4,67 cm2 ) boli získané od spoločnosti Corning (Costar) Inc. Kolagén z potkanieho chvosta bol získaný zo Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). Všetky činidlá a chemikálie na analýzu HPLC boli analytickej kvality.

Príprava PRE z Cistanche deserticola

Vzduchom sušený CD materiál bol práškovaný a extrahovaný perkoláciou so 70% etanolom. Frakcia bohatá na PhG bola pripravená tak, ako bola predtým opísaná [10] a extrahovaná vodou nasýteným n-butylalkoholom. Extraktový likér bol koncentrovaný a sušený pod zníženým tlakom. Makroporózna živicovo-UV spektrofotometria [15] merala obsah PhG 78,4%. Konečná vzorka predstavovala 1,75 % výťažnosť suroviny podľa suchej hmotnosti. Získaná vzorka sa skladovala pri teplote −20 °C až do ďalšieho použitia.

Stanovenie striedavého prúdu, IS a ES pomocou HPLC

Systém Shimadzu HPLC vybavený softvérom riešenia LC bol použitý na testovanie obsahu striedavého prúdu, IS a EK v PRE. Kolóna Intersil C18 s reverznou fázou (4,6 mm × 250 mm, 5 μm) bola použitá a udržiavaná pri izbovej teplote. Pohyblivé fázy boli acetonitril a voda obsahujúca 0,1% kyseliny fosforečnej (v/v) s elúciou gradientu (tabuľka 1) pri prietoku 1,0 ml/min. Detektor UV spektrofotometra bol nastavený na 334 nm. Na presné určenie toku striedavého prúdu a IS sme vyvinuli novú metódu HPLC-fluorescenčnej detekcie (HPLC-FLD). Po štrukturálnej analýze a skenovaní fluorescenčnej vlnovej dĺžky (neuvedené údaje) sme získali optimálne podmienky detekcie fluorescencie pre striedavý prúd (Ex: 338 nm, Em: 448 nm) a IS (Ex: 320 nm, Em: 434 nm)

Analytická metóda HPLC bola validovaná pomocou nasledujúcich výkonnostných charakteristík: stabilita, linearita, citlivosť, presnosť (vnútro- a medzidňová variabilita) a presnosť. Analyty v transportnom nárazníku sa skladovali pri teplote 25 °C v tme počas 24 hodín a merala sa ich stabilita. Analyty boli vysoko stabilné v prítomnosti vitamínu C (0,4%), pretože relatívne hodnoty smerodajnej odchýlky (RSD) v oblastiach píku boli vysoko stabilné.< 3.5%.="" the="" linear="" regression="" equation,="" correlation="" coefficient,="" range="" of="" linearity,="" lod,="" and="" loq="" for="" ac,="" is,="" and="" ec="" are="" shown="" in="" table="" 2.="" the="" lods="" (18–30="" nm)="" and="" loqs="" (60–100="" nm)="" values="" illustrate="" that="" the="" hplc-fld="" and="" hplc-uv="" methods="" are="" highly="" sensitive.="" the="" rsd="" values="" that="" express="" the="" precision="" of="" the="" method="" were="" all="">< 2%="" for="" intra-="" and="" inter-day="" variability,="" indicating="" good="" precision.="" for="" recovery="" evaluation,="" ac,="" is,="" and="" ec="" was="" added="" to="" the="" transport="" buffer="" to="" yield="" three="" (high,="" medium,="" and="" low)="" concentration="" levels.="" the="" recovery="" values="" of="" the="" method="" for="" the="" analytes="" are="" summarized="" in="" table="" 3.="" the="" average="" recoveries="" ranged="" from="" 90.0%="" to="" 96.4%,="" indicating="" good="" accuracy.="" in="" conclusion,="" the="" established="" hplc="" methods="" are="" satisfactory="" with="" respect="" to="" linearity,="" sensitivity,="" precision,="" and="" accuracy="" for="" the="" quantification="" of="" ac,="" is,="" and="" ec="" in="" transport="">

Stanovenie PRE systémom biologickej analýzy

Bioanalýza (celková antioxidačná kapacita) bola založená na teste FRAP (redukcia železitého/antioxidačného výkonu), ktorý sme predtým opísali [16], a validovaná z hľadiska linearity a presnosti (vnútrodenná a medzidňová variabilita). Linearita metódy biologickej úpravy bola stanovená na základe kalibračných kriviek. Rozsah koncentrácie linearity bol 0,0625 − 40 μg/ml (y = 0,0258x+0,0968, R2 = 0,996). Presnosť zavedenej metódy biologickej analýzy bola stanovená z hľadiska vnútro- a medzidennej variability pre analýzu PRE (10, 0 μg/ml). Vnútrodenná opakovateľnosť metódy sa stanovila na základe piatich po sebe nasledujúcich stanovení v ten istý deň. Medzidenná opakovateľnosť sa merala na základe piatich po sebe nasledujúcich stanovení v troch rôznych dňoch. Hodnoty RSD pre presnosť metódy boli 1,014% a 4,72% pre vnútro- a medzidennú variabilitu, čo naznačuje dobrú presnosť. Zavedená metóda biologickej úpravy je teda uspokojivá, pokiaľ ide o linearitu, presnosť a presnosť na kvantifikáciu PRE v dopravnom nárazníku.

Bunková kultúra

Kakaovo-2 bunky boli kultivované pri teplote 37 °C a 95 % relatívnej vlhkosti v atmosfére obsahujúcej 5 % CO2 a média pozostávajúceho z DMEM, 10 % FBS, 1 % NEAA, 1 % L-glutamínu, penicilínu (100 U/ml) a streptomycínu (100 μg/ml). Médium sa menilo každý druhý deň počas rastu a diferenciácie buniek. Bunky sa pestovali v 75 cm2 plastových baniach a zbierali sa každé 3 až 5 dní s 0,05% EDTA-trypsínu. Pre transportné experimenty boli bunky nasadené v hustote 1×105 buniek / cm2 na vložky Transwell potiahnuté kolagénom. Približne 21 dní po výseve boli monovrstvy použité na dopravné experimenty. Ich integrita bola určená meraním trans-epiteliálneho elektrického odporu (TEER) v monovrstvách s EVOM vybaveným ENDOHM-SNAP (World Precision Instruments, Inc., USA). Hodnoty TEER monovrstvy buniek Caco-2 museli prekročiť 500 O∙cm2.

Dopravné experimenty

Jednovrstvové sa umylo transportným tlmivým roztokom (P-tlmivý roztok obsahujúci 10 mM HEPES, 1 mM pyruvátu sodného, 10 mM glukózy, 3 mM CaCl2 a 145 mM NaCl, pH 7,4) a potom sa predinkuloval na 20 minút pri teplote 37 °C. Po odstránení transportného tlmivého roztoku sa do apikálnej (AP) komory (1,5 ml) v AP do bazolaterálnych (BL) smerových štúdií alebo komory BL (2,5 ml) v BL do smerových štúdií AP pridal čerstvý transportný tlmivý roztok obsahujúci skúšobné vzorky (AP) (1,5 ml) v AP do bazolaterálnych (BL) smerových štúdií alebo do bl komory (2,5 ml) v BL do ap smerových štúdií. V prípade testov striedavého prúdu, IS a ES s použitím HPLC bola z každej komory prijímača odstránená alikvotná časť (300 μl) v rôznych časových intervaloch (30, 60, 90 a 120 minút). Prijímacia komora bola po každom odbere vzoriek doplnená rovnakým objemom čerstvého predhriateho (37°C) prepravného tlmivého roztoku. Odobraté vzorky sa skladovali pri teplote -20 °C na ďalšie použitie. Na stanovenie pred použitím bioanalýzy boli odobraté iba vzorky v 120 minútach. V dôsledku nestability PRE, AC, IS a ES sa pridalo 0,4% (w/v) vitamínu C na stabilizáciu vzoriek s cieľom určiť obsah striedavého prúdu, IS a ES pomocou HPLC a vzorky pre bioanalýzu boli testované okamžite po odobratí vzorky. Vypočítala sa hodnota zdanlivého koeficientu priepustnosti (Papp alebo "Papp) každej vzorky.

Analýza údajov

Papp hodnoty v smeroch AP BL alebo BLAP AC, IS a EC boli vypočítané na základe nasledujúcej rovnice: Papp = (4Q/4t)/(A C0), kde Papp je zdanlivý koeficient priepustnosti (cm/s) určený HPLC. (4Q/4t) je rýchlosť výskytu testovanej zlúčeniny (AC, IS alebo ES) na strane prijímača (μmol/s); A je plocha vložky (cm2); C0 je počiatočná koncentrácia testovanej zlúčeniny na strane darcu (μmol/ml). Konkrétne sa pri výpočte "Pappových hodnôt" použila hmotnostná jednotka "μg" namiesto "μmol". Údaje sú vyjadrené ako prostriedky ± SD.

Výsledky

Zloženie Acteozidu, izoacteozidu a Echinakozidu v PRE z Cistanche Deserticola

Pretože AC, IS a EK sú považované za hlavné bioaktívne PhG cistanche druhov [8], analyzovali sme ich obsah v PRE prostredníctvom HPLC-UV. Reprezentatívny chromatogram je znázornený na obr. 1. Identifikácia týchto zložiek bola založená na porovnaní retenčných časov a UV spektra s časmi autentických noriem pri vlnovej dĺžke 334 nm. Obsah AC, IS a ES v PRE bol 26,60%, 1,84% a 32,83%. Tieto tri zlúčeniny teda predstavujú 61,27% PRE; okrem toho vyššie uvedené výsledky naznačujú, že obsah PhG v PRE je 78,4%. Preto AC, IS a ES predstavujú približne 80 % PhG v PRE.

Celkové antioxidačné kapacity PRE, AC, IS a ES

Boli hlásené štúdie antioxidačnej aktivity PhG z CD [9] a AC, IS a ES predstavujú približne 80% PhG v PRE. Celkové antioxidačné kapacity PRE, AC, IS a ES boli teda testované a sú vyjadrené pomocou hodnôt FRAP (× 10 – 6 mmol). Ako je znázornené na obr. 2, keď bola hodnota FRAP 8 × 10 – 6 mmol, konečné koncentrácie PRE, AC, IS a ES boli 6,20 μg/ml, 3,14 μg/ml, 22,92 μg/ml a 4,89 μg/ml, čo naznačuje, že celková antioxidačná kapacita týchto štyroch vzoriek bola hodnotená takto: AC > ES > PRE > IS. Bioaktivita PRE sa pripisuje jeho skupinám účinných látok (AIG). Približne u 60% PRE, AC a EK vykazovali silnejšiu celkovú antioxidačnú aktivitu ako PRE a IS. Pretože IS (1,84%) predstavuje veľmi malý zlomok PRE, ostatné zložky, ako napríklad slabo antioxidačný IS, sú tiež jasne aktívne v PRE. Prekvapivo, celková antioxidačná aktivita sa líšila takmer 7-násobne medzi striedavým prúdom a jeho izomérovým IS, čo naznačuje nielen počet fenolových hydroxylových skupín [9], ale aj pozíciu fenolových hydroxylových skupín v molekule, ktoré ovplyvnili antioxidačný účinok.

Certifikácia monovrstiev Caco-2

Na overenie systému monovrstvových buniek Caco-2 boli pappové hodnoty propranololu (dobre prepravovaná značka) a luciferskej žltej (zle prepravovaná značka) z AP do BL cez monovrstvy Caco-2 stanovené ako 1,51 × 10 – 5 cm/s a 2,8 × 10 – 7 cm/s a tieto hodnoty súhlasili s hodnotami uverejnenými v predchádzajúcich správach [17], 18]. Test aktivity alkalickej fosfatázy tiež potvrdil, že monovary buniek Caco-2 boli kvalitatívne porovnateľné s malým črevným epitelom [19]

Priepustnosť acteozidu, izoaktozidu a echinakozidu

Vo všeobecnosti boli Papp hodnoty dobre absorbovaných liekov vysoké (> 1,0 × 10 – 5 cm/s), zatiaľ čo hodnoty zle absorbovaných liekov boli nízke (< 1.0="" ×="" 10–6="" cm/s)="" [3].="" as="" shown="" in="" table="" 4,="" the="" papp="" values="" of="" ac,="" is="" and="" ec="" was="" nearly="" on="" the="" order="" of="" 10–7="" cm/s,="" indicating="" that="" these="" compounds="" were="" poorly="" permeable.="" furthermore,="" efflux="" or="" active="" transport="" were="" not="" observed="" because="" the="" ratios="" of="" papp="" bl="" to="" ap="" papp="" ap="" to="" bl="" for="" ac,="" is="" and="" ec="" was="" between="" 0.90="" ~="" 1.55,="" and="" the="" criterion="" of="" net="" efflux="" proposed="" by="" the="" fda="" guidance="" is="" a="" ratio="" less="" than="" 2="" [20].="" based="" on="" the="" kinetic="" curves="" presented="" in="" fig.="" 3,="" the="" bidirectional="" transport="" percentages="" of="" ac,="" is="" and="" ec="" at="" 200="" μm="" increased="" linearly="" with="" time.="" the="" transport="" rate="" (tr)="" values="" of="" the="" three="" compounds="" increased="" linearly="" in="" both="" directions="" between="" approximately="" 100="" and="" 300="" μm="" (fig.="" 4).="" these="" results="" indicate="" that="" the="" main="" transport="" mechanism="" of="" ac,="" is="" and="" ec="" is="" also="" passive="">

Priepustnosť PRE

Vyššie uvedené výsledky naznačujú, že celková antioxidačná kapacita PRE je spôsobená aspoň 61,27% AIG od PRE. Tr PRE sme teda vyhodnotili na základe krivky koncentrácie a účinku celkovej antioxidačnej kapacity a vypočítali sme "Hodnoty Papp s cieľom zohľadniť dopravné charakteristiky PRE. "Papp hodnoty PRE pre AP! Bl alebo BL! AP bola (2,16 ± 0,26) × 10 – 7 cm/s a (3,13 ± 0,29) × 10 – 7 cm/s, čo naznačuje, že táto zlúčenina je zle priepustná. Okrem toho efflux alebo aktívna doprava nebola zrejmá, pretože pomer "Papp BL k AP / "Papp AP k BL pre PRE bol 1,45 [20]. Okrem toho sa obojsmerný TR PRE lineárne zvýšil medzi približne 300 a 900 μg/ml (obr. 5). Nedostatočná smerová preferencia výsledkov naznačuje, že pasívna difúzia je hlavným dopravným mechanizmom PRE.

Diskusia

V porovnaní s vysoko čistenými liekmi je PE vo všeobecnosti zmesou, ktorá sa skladá zo stoviek zložiek so široko odlišnými fyziochemickými vlastnosťami. Pe preto vyvíja systematickú, multitargetovú a viackanálovú synergickú činnosť vďaka svojej komplexnej AIG [21], ktorá bráni analýze dopravných charakteristík PE. Na vedeckejšie hodnotenie prepravných vlastností PE niektorí výskumníci identifikovali v PE viaceré zložky, a nie jednu zložku [22 – 24]. Obmedzený počet zložiek však nemôže odrážať PE ako celok. Určenie všetkých zložiek v PE však nie je možné. Okrem toho, ak rôzne komponenty v PE vykazujú úplne odlišné dopravné charakteristiky, holistické dopravné charakteristiky PE bude ťažké identifikovať.

V deväťdesiatych rokoch minulého storočia sa na hodnotenie TR antimikrobiálnych látok používali systémy biologickej analýzy [25]. Do roku 2005 Eguchi a jeho kolegovia [26] hodnotili antioxidačnú aktivitu extraktu z mrkvy pomocou BL médií z diferencovaných buniek Caco-2; tento prístup je vhodnejší na zohľadnenie situácií in vivo.

Na základe predchádzajúcej správy o činnosti PhG [9] a našich výsledkov (obr. 2) možno TR AIG v PRE vyhodnotiť stanovením celkovej antioxidačnej kapacity média v prijímacej komore. Po dopravných experimentoch sme zistili, že TR PRE bol podobný v oboch smeroch a tento transport bol nenasýtený a zle absorbovaný ("Papp"< 1.0="" ×="" 10–6="" cm/s)="" [3],="" and="" it="" did="" not="" indicate="" efflux,="" suggesting="" that="" passive="" diffusion="" down="" a="" concentration="" gradient="" is="" the="" main="" transport="" mechanism="" of="" pre="" (fig.="" 5).="" furthermore,="" the="" transport="" characteristics="" of="" pre="" are="" consistent="" with="" those="" of="" ac,="" is,="" and="" ec,="" the="" effective="" components="" that="" display="" anti-oxidative="" activity="" in="" pre="" (fig.="" 4="" and="" table="" 4).="" this="" result="" was="" expected="" and="" indicated="" that="" the="" present="" bioassay="" system="" is="" appropriate="" and="" reliable="" for="" the="" evaluation="" of="" the="" transport="" characteristics="" of="" aig="" in="" pre="" in="" differentiated="" caco-2="">

Na rozdiel od kanonickej Pappovej hodnoty, ktorá sa bežne používa na odraz transportu jednej zlúčeniny, "Pappova hodnota získaná z TR na základe krivky koncentračného účinku môže odrážať nielen zložky, ktoré prenikajú do jednovrstiev s neporušenou štruktúrou, ale zahŕňať aj iné faktory súvisiace s cieľovou aktivitou, ako sú metabolity zložiek", chemicky degradované produkty a dokonca aj niektoré cytokíny vylučované z buniek Caco-2 v reakcii na stimuláciu, ktorá môže ovplyvniť cieľovú bioaktivitu. Vyššie uvedený multifaktor, a nie iba prepravované neporušené komponenty, teda určujú "Pappovu hodnotu. Preto "Papp môže v situáciách Vivo korelovať silnejšie ako kánonická pappská hodnota [26]. V tejto štúdii sme objasnili pasívne rozptýlenú a zle absorbovanú povahu PRE na základe jej "Pappovej hodnoty" a táto povaha môže súvisieť s vysokou dávkou a dlhou klinickou dobou liečby CD [27]. Napriek tomu tieto zistenia poskytnú systematickejšie usmernenie pre klinických lekárov pri aplikácii CD, keď boli identifikované iba dopravné charakteristiky väčšiny AIG v CD, nielen PhG.

Vybraná položka bioaktivity však musí byť dostatočne citlivá na to, aby sa mohla zistiť v médiu komory prijímača, čo predstavuje výzvu pre zriadenie systému biologickej analýzy na vyhodnotenie prepravných charakteristík PE. Okrem toho by bioaktivita mala závisieť aj od čo najväčšieho počtu zložiek. V našej štúdii bola celková skúška antioxidačnej kapacity vhodnejšia ako niekoľko iných metód (S1 Obr.). Ale aj tak náš test dokáže zistiť TR PRE len v 120 min.

Súčasná štúdia spoločne vytvorila nový bioanalýzny systém na vyhodnotenie črevnej priepustnosti PRE v diferencovaných bunkách Caco-2. Získané výsledky ukázali, že zle absorbovaná pasívna difúzia po koncentračnom gradiente bez effluxu je hlavným transportným mechanizmom PRE (obr. 5), ktorý poskytuje farmakokinetický základ pre klinickú aplikáciu PhG v CD. Použitie nového systému biologickej analýzy na vyhodnotenie TR, a tým aj na výpočet "Pappových hodnôt na posúdenie vlastnosti črevnej prepravy AIG v PE, je jednoznačne uskutočniteľné. Tento prístup môže byť vhodný aj pre iné PE vzhľadom na vhodnú bioaktivitu

Podporné informácie

S1 Obr. Účinky PRE na (A) superoxidový anión, (B) hydroxylový radikál, (C) produkt peroxidácie lipidov a (D) DPPH radikál. Skúšobné postupy sa vykonávali podľa predchádzajúcich správ [1, 2] bez použitia prepravnej rezervy. Hodnoty IC50 (50% inhibičná koncentrácia) a SC50 (50% koncentrácia zachytávania) sa vypočítali na základe štandardných kriviek koncentrácie a odozvy. (DOCX)

Autorské príspevky

Koncipoval a navrhol experimenty: YG XC YQ. Vykonal experimenty: YG CZ FL LF RC RR YS. Analyzované údaje: CZ YG YQ. Prispievané činidlá/materiály/analytické nástroje: RC. Pôvodný názov: YG YQ

Katedra Výskumného centra farmakológie a toxikológie, Inštitút vývoja liečivých rastlín, Čínska akadémia lekárskych vied & Peking Union Medical College, Peking, P.R. Čína,

Univerzita čínskej medicíny Heilongjiang, Harbin, Heilongjiang, P.R. Čína