Čo môže acteozid v cistanche urobiť s benígnou hyperpláziou prostaty?
Mar 17, 2022
Výskum acteozidu o účinku inhiboval benígnu hyperpláziu prostaty u potkanov
KĽÚČOVÉ SLOVÁ: Cistanche,acteozid, benígna hyperplázia prostaty,apoptóza.
Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
ABSTRAKTNÝ:
Bol vytvorený model hyperplázie potkanov prostaty žobráka a tri skupiny dávokacteosideboli ústne spravované po dobu 4 týždňov, aby sa študoval účinokacteosidedestilované odCistanchetubulosa naapoptózaa ultramikro štruktúra prostaty u potkanov sbenígna hyperplázia prostaty. Ultraštrukturálna zmena prostaty bola pozorovaná transmisnou elektrónovou mikroskopiou. Výsledky ukázali, žeApoptózanormálna prostata potkana nebola zrejmá, bola nízka
rýchlosť prostatyapoptózavo modelovej skupine vo vysokých dávkachacteosidezCistancheliečba tubulosa, prostata potkanovapoptózaJe to výrazne viac ako v prípade modelu.
V procese benígnej hyperplázie prostaty, bunkyapoptózaJe to jeden z mechanizmov, ktoré v súčasnosti priťahujú pozornosť. Kódovanie génov ho určuje a umožňuje bunkám kontrolovať naprogramovanú bunkovú smrť reakciou na špecifické signály.
Potom, čo sa prostata vyvinie do veľkosti dospelých, miera proliferácie buniek prostaty sa udržiava na úrovni 1% až 2% prostredníctvom rovnováhy priemernej mieryapoptóza. Akonáhle je rovnováha zlomená, považuje sa za príčinubenígne prostatické hyperplázia. Za normálnych podmienok sú hladiny estrogénu a androgénu a normálny obeh v prostate akýmsi samovyváženým stavom, ktorý existuje v procese proliferácie aapoptóza. Keď je rovnováha medzi šírením aapoptózaje nevyvážený, povedie k ďalšiemu rastu a expanzii žľazy, čo spôsobuje hlavne rozšírenie epiteliálneho bunkového oddelenia [1].
V tomto experimente sme vytvorili model hyperplázie prostaty potkanov, aby sme pozorovali a analyzovali účinokacteoside(glykozid podobný koaction), jedna z chemických zložiekCistanchenaapoptózaa ultraštrukturálne zmeny buniek prostaty potkanov, aby sa vyhodnotil účinokacteosideÚčinok inhibície hyperplázie prostaty poskytuje vedecký základ pre vývoj a využitie nových použití čínskej medicínyCistanche.
Táacteosidedestilované odCistancheMôže ovplyvniťnezhubnýprostatickéhyperplázia.
Materiál a metódy
Experimentálne zviera
Päťdesiat samcov SD potkanov vo veku 6-7 týždňov, čistý stupeň, s hmotnosťou 80-100 g, poskytuje Centrum pre porovnávaciu medicínu Univerzity Yangzhou.
Činidlá a lieky
Injekcia testosterónu propionátu je od spoločnosti Shanghai General Pharmaceutical Co., Ltd., špecifikácia je 25 mg·ml-1, a číslo šarže je 060708. Roztok farbiva PI je z Testovacieho centra univerzity Yangzhou. Obsah Aktiside je 945 g·kg-1, vypracovaná Katedrou čínskej medicíny, Čínska farmaceutická univerzita.
Experimentálne vybavenie
Elektrónový mikroskop Philips Tecnai 12 je od spoločnosti Philips v Holandsku; Prietokový cytometer FACSAria pochádza z BD v Spojených štátoch.
Zoskupenia a modelovanie
Po kastrácii podľa metódy literatúry [3] sa potkanom pichlo 5 mg· (kg·d)-1testosterón propionátu na zadnej strane potkanov po dobu 4 týždňov na vytvorenie modelu hyperplázie prostaty. Model potkanov bol náhodne rozdelený do modelových skupín: model plusacteosidevysokodávková skupina, model plusacteosideskupina so strednou dávkou, model plusacteosideskupina s nízkymi dávkami, desať potkanov v každej skupine; Ďalších desať normálnych potkanov bolo ako kontrolná skupina.
Spôsob podávania
Týždeň po modelingu,acteosideskupiny s vysokými, strednými a nízkymi dávkami boli podané 60, 30, 15 mg· (kg·d)-1podľa gavage, resp. Modelovej skupine a kontrolnej skupine sa podával rovnaký objem normálneho fyziologického roztoku raz denne počas štyroch týždňov, odvážili sa raz týždenne a upravili dávkovanie podľa telesnej hmotnosti.
Zber a spracovanie vzoriek
Príprava materiálu a vzorky: 24 hodín po poslednom podaní odvážte potkany nalačte nalačno a obetujte potkany dislokáciou krčka maternice. Okamžite otvorte spodnú časť brucha, odlupujte tkanivá okolo prostaty, uvoľnite prostatu a vezmite časť prostaty na použitie v ľadovom kúpeli. Tkanivový homogenizátor homogenizoval, pripravil jednobunkovú suspenziu prostaty a zafarbil jednostupňovou metódou propid jodidu [4]; ďalšia časť tkaniva prostaty bola fixovaná v 25 g· L-1glutaraldehyd na prípravu ultratenkých častí.
Pripravte si jednobunkovú suspenziu: Za aseptických podmienok úplne odstráňte prostatu potkana a presuňte ju do Petriho misky, umyte krv a krvné zrazeniny na povrchu tkaniva prostaty PBS a odstráňte okolitý tuk, prebytočné vlákna a bunkové membrány. Z tej istej potkanej prostaty sa odobralo čerstvé tkanivo prostaty s veľkosťou asi 0,5 cm3 a nakrájalo sa na kúsky na prípravu suspenzie buniek prostaty [5]. Vložte blok tkaniva prostaty do Petriho misky a pridajte malé množstvo PBS; použite oftalmologické nožnice na rezanie tkaniva v ľadovom kúpeli, brúsenie homogenizátora na suspenziu, pridanie 10 ml PBS, pipetovanie homogenátu tkaniva a použitie nylonovej sieťky veľkosti pórov 0,074 mm bola filtrovaná do skúmavky, odstredená pri 1 500 r min min-1po dobu 3 min, a zrazenina bola umytá trikrát PBS, zakaždým pri 500 r min-1krátkodobá nízkorýchlostná odstreďovacia odstreďovačka na odstránenie zvyškov buniek na 0,037 mm nylonový sieťový filter veľkosti pórov na odstránenie zhlukov buniek. Spočítajte bunky a upravte koncentráciu buniek na 2×109 buniek· L-1. Zafarbenie 1 ml roztoku na farbenie PI, chráňte pred svetlom pri teplote 4 °C po dobu 10 minút.
Príprava ultratenkej časti: Pre prípravu ultratenkej časti tkaniva pozri literatúra [6].
Výsledky a analýza
Účinokacteosideo apoptóze prostaty potkana
Obrázok 1 ukazuje vrcholapoptózazistená prietokovou cytometriou, ktorá ukazuje, žeacteosideMá pro-apoptotický účinok. Štatistická analýza bunkyapoptózaVýsledky ukázali, že potkania bunkaapoptózamiera sa výrazne zvýšila (24,7±1,85)% a (16, 1±1, 04)% po liečbe vysokými, strednými a nízkymi dávkamiacteoside. , (14,5±0,68)% a normálna skupina (1,1±0,06)%, modelová skupina (9,5±0,5)%, pozitívna skupina (9,83±0,76) Rozdiel v porovnaní % je významný (P<0.01), indicating="" that="" aktidine="" can="" induce="" cell="">apoptóza, účinok je silnejší ako účinok pozitívneho kontrolného lieku Qianliekang (obrázok 2).
Účinokacteosidena ultraštruktúre buniek hyperplázie prostaty.
Pozorovania elektrónovej mikroskopie ukazujú, že normálna prostata potkana má úplné jadrá, samozrejme jadrá, a rovnomerné rozloženie jadrového chromatínu; hrubé endoplazmatické retikulum má rovnakú veľkosť, je úhľadne usporiadané a nemá vakuoláciu. Na povrchu epitelu nie sú žiadne mikrovlákna podobné prstom, žiadny opuch mitochondrií a málo sekrétov v dutine. Jadrá buniek prostaty v modelovej skupine boli deformované a zmenšené a cytoplazma bola bohatá. Hrubé endoplazmatické retikulum sa rozšírilo v tvare podobnom cyste a cysta bola naplnená bielkovinovými časticami s vysokou hustotou. Mitochondrie boli mierne opuchnuté (boli tam aj vakuoly), V dutine sú sekréty strednej hustoty a v niektorých bunkách sa našli husté okrúhle sekréčné granule. U potkanov liečenýchacteoside, jadro bolo neporušené v porovnaní s modelovou skupinou. Jadro bolo koncentrované, jadrová hustota sa zvýšila, nahromadil sa heterochromatín, cytoplazma mala vakuoly a znížili sa hrubé endoplazmatické retikulumové vakuoly. Nízke dávkyacteosideskupina mala mierne pokrčené jadrá Zmršťovanie, nepravidelnú, bohatšiu cytoplazmu a znížené hrubé endoplazmatické retikulum (obrázok 3).
Diskusia
ApoptózaJe to proces naprogramovanej bunkovej smrti v mnohobunkových organizmoch, ktorý reguluje vývoj tela a udržuje stabilitu vnútorného prostredia a určujú ho genetické kódy.
Apoptotické bunky majú svoje jedinečné morfologické a biologické vlastnosti: zmršťovanie jadrového chromatínu, rozsiahlu degradáciu a fragmentáciu DNA, zmršťovanie buniek v plnom rozsahu, zmršťovanie bunkových membrán a vonkajších výčnelkov pokrývajúcich organely (ako sú mitochondrie a ribozómy) a tvorbu charakteristických jadrových fragmentov Apoptotické teleso, apoptotické bunky si nielen zachovávajú kompletnú štruktúru a funkciu bunkovej membrány, ale majú aj kompletnú štruktúru organel, Ktorá sa líši od nekrózy buniek.
Molekulárny mechanizmus bunkyapoptózaDoteraz nebol úplne objasnený. Štúdie [7] ukázali, že existuje mnoho génov zapojených do génovej regulácie buniekapoptóza.
ApoptózaJe to procesnezhubnýprostatickéhyperpláziaTo v súčasnosti priťahuje väčšiu pozornosť. Je určený génovým kódovaním a umožňuje bunkám kontrolovať bunkovú smrť reakciou na špecifické signály [1]. Potom, čo sa prostata vyvinie do veľkosti dospelého, miera proliferácie buniek prostaty sa udržiava na úrovni 1% až 2% prostredníctvom rovnováhyapoptózasadzba. Zničenie tejto rovnováhy sa vždy považovalo za príčinunezhubnýprostatickéhyperplázia[8]. Za normálnych podmienok je hladina estrogénu a androgénu a pravidelný obeh v prostate akýmsi samovyváženým stavom, ktorý existuje v procese proliferácie aapoptóza. Keď sa šíria aapoptózasú nevyvážené, spôsobí to, že žľazy budú rásť a ďalej sa rozširovať, najmä v dôsledku rozšírenia epitelového bunkového oddelenia [9]. Prerušenie tejto rovnováhy môže byť spôsobené zmenami hladín androgénov alebo funkcií; môže to byť spôsobené aj akoukoľvek reakciou vyvolanou ar stimuláciou DHT alebo zmenami hladín rastového faktora sprostredkovaných DHT [2]. V tejto štúdii FCM detegovala bunkuapoptózaa zistil, žeapoptózamiera buniek prostaty u potkanov, ktorým boli podané vysoké dávkyacteosidevýrazne sa zvýšili. Výsledky elektrónovej mikroskopie ukázali, že jadrá buniek prostaty v modelovej skupine boli deformované, hrubé endoplazmatické retikulum bolo vysoko rozšírené v tvare podobnom cyste a cysta bola naplnená bielkovinovými časticami s vysokou hustotou a zistila sa vakuolácia. Mitochondrie boli mierne opuchnuté a súvisiace štúdie[10-11] Správa je konzistentná.
Poacteosideintervencia, stupeň hyperplázie prostaty u potkanov bol nižší. Skupina s vysokými dávkami tiež vykazovala skoré príznakyapoptóza: jadro buniek prostaty zostalo neporušené a endoplazmatické retikulum vakuoly boli výrazne nižšie. Kondenzácia jadier, zvýšená jadrová hustota, akumulácia heterochromatínu, podobne ako charakterizácia buniek tkaniva prostaty u potkanov po kastrácii [12-13]. Ukazuje to, žeacteosidezcistanchemôže vyvolať bunkuapoptózau potkanov s hyperpláziou prostaty regulujú a obnovujú rovnováhu buniek prostatyapoptózaa proliferáciu a hrať úlohu pri inhibícii proliferácie buniek prostaty. Výsledky tejto štúdie a predchádzajúcich štúdií [14] naznačujú, že inhibičný účinokacteosidechemická zložkaCistanchetubulosa, na prostatickej hyperplázii môže súvisieť s jej propagáciou buniekapoptóza, zníženie nadmernej expresie AR a TGF-UR1. Podrobný mechanizmus činnosti je ešte potrebné ďalej preskúmať.
Referencie:
Zdroj je od autorov: Sun Weidong1, Chen fei2, Slnko yun2(1. Nemocnica tradičnej čínskej medicíny Yangzhou, Yangzhou 225009, Jiangsu; 2. Lekárska fakulta, Univerzita Yangzhou, Yangzhou 225001, Jiangsu)