Pulzná ľudská CD141+ vakcína proti dendritickým bunkám WT1 má vysoký potenciál v imunoterapii cielenej na solídne nádory

Abstrakt:

Dendritické bunky (DC) sú silné bunky, ktoré zohrávajú rozhodujúcu úlohu v protinádorovej imunite a ich použitie v imunoterapii rakoviny odomyká skryté schopnosti ako účinné liečivo. Aby sme maximalizovali plný potenciál DC, vyvinuli sme DC vakcínu s názvom CellgramDC-WT1 (CDW). CDW bol pulzovaný s WT1, antigénom bežne exprimovaným v solídnych nádoroch, a indukovaný zoledronátom na uľahčenie dozrievania DC. Aj keď sa naša predchádzajúca štúdia zamerala na použitie Rg3 ako induktora dozrievania DC, problémy s kontrolou kvality a prístupom nás viedli k výberu zoledronátu ako lepšej alternatívy. Okrem toho CDW vylučoval IL-12 a IFN- , čo indukovalo diferenciáciu naivných T buniek na aktívne CD{7}} T bunky a vyvolalo odpoveď cytotoxických T lymfocytov (CTL) proti rakovinovým bunkám s antigénmi WT1. Potvrdením identity a funkcie CDW veríme, že CDW je vylepšená vakcína proti DC a má sľubný potenciál v oblasti imunoterapie rakoviny.

cistanche tubulosa - zlepšenie imunitného systému

Kľúčové slová:

DC vakcína; CD141; dendritické bunky; zoledronát; aktivácia T-buniek; imunoterapia rakoviny; solídny nádor; rakovinové antigény; Wilmsov tumor1 (WT1); antigény spojené s nádorom

1. Úvod

Rakovina je hlavnou príčinou smrti na celom svete a zatiaľ čo tradičné spôsoby liečby zahŕňajú chirurgiu, chemoterapiu a ožarovanie, často spôsobujú nepriaznivé vedľajšie účinky v dôsledku neschopnosti rozlíšiť medzi rakovinovými a normálnymi bunkami [1]. Nedávne pokroky v oblasti imunoterapie však umožnili vývoj vakcín proti rakovine, ktorých cieľom je aktivovať imunitný systém tela, aby sa špecificky zameral na rakovinové bunky a následne minimalizoval vedľajšie účinky [2]. Vakcíny proti rakovine primárne využívajú antigény spojené s nádorom alebo antigény špecifické pre nádor na aktiváciu antigénovo špecifických lymfocytov imunitného systému [3]. Aktivované lymfocyty, prevažne T bunky, preberajú efektorové funkcie, ako je cytotoxicita a produkcia cytokínov na kontrolu progresie rakoviny [4]. Rôzne typy vakcín proti rakovine využívajú špecifický súbor imunitných buniek, ako sú prirodzené zabíjačské (NK) bunky [5] a dendritické bunky (DC) [6]. Z nich sú DC bunky prezentujúce antigén (APC) a hrajú rozhodujúcu úlohu pri aktivácii imunitnej odpovede prostredníctvom T buniek. Hlavná charakteristika DC zahŕňa schopnosť zachytiť antigény a spracovať proteín na peptid, ktorý sa má prezentovať T bunkám molekulami hlavného histokompatibilného komplexu (MHC). DC však zahŕňa heterogénnu populáciu s každou podskupinou, ktorá nesie odlišné fenotypy a funkcie [7].

cistanche rastlina zvyšujúca imunitný systém

DC sú rozdelené do značnej miery na klasické/konvenčné DC (cDC), plazmacytoidné DC (pDC) a DC odvodené od monocytov (mo-DC). Existujú dve široké skupiny cDC: typ 1 DC (cDC1), ktorý primárne prezentuje antigény pomocou MHC triedy I na vyvolanie CTL reakcie z CD8+ T buniek (CTL), a typ 2 DC (cDC2), ktorý využíva MHC triedy II na podporu odpovede CD4+ T buniek (pomocných T buniek) [8]. Plazmocytoidné DC sú jedinečnou podskupinou DC, ktoré sa špecializujú na sekréciu interferónu typu I (IFN) [9]. Mo-DC sa primárne podieľa na zápale a podporuje imunitnú odpoveď TH17 [10] (obrázok 1A). Mo-DC sa v súčasnosti najviac využíva v oblasti výskumu protinádorovej imunoterapie DC [11–13]. Hoci je mo-DC dobre tolerovaný a bezpečný, nízka terapeutická účinnosť bráni jeho širokému použitiu. Obmedzenie mo-DC je preukázané in vitro, kde vykazujú obmedzenú schopnosť migrovať do lymfatických uzlín, aby aktivovali silné odpovede cytotoxických T lymfocytov (CTL) [14]. Na prekonanie obmedzení súčasných spôsobov DC vakcíny sa v tejto štúdii vybral cDC1, pretože má najlepšiu schopnosť prezentácie antigénu a vykazuje vysokú CTL odpoveď. Aj keď sú štúdie o vakcínach cDC1 na vzostupe, cDC1 ešte nebol preskúmaný v klinickej štúdii [15].

Získali sme mononukleárne bunky (MNC) z kostnej drene a následne sme izolovali CD34+ bunky (hematopoetické kmeňové bunky) pomocou techniky MACS® Cell Separation. Bunky boli proliferované pomocou faktora stimulujúceho kolónie granulocytov a makrofágov (GM-CSF), faktora kmeňových buniek (SCF) a ligandu Fms-podobného tyrozínkinázového receptora 3 (FLT3), ktorý priamo indukuje diferenciáciu na DC [16] a diferenciáciu do DC bola indukovaná pomocou GM-CSF a interleukínu 4 (IL-4). Nezrelé DC rozpoznávajú proteín WT1 ako antigén a dozrievajú pomocou zoledronátu. Antigén WT1 (Wilmsov tumor1) je vysoko exprimovaný pri rôznych malignitách a rôznych solídnych nádoroch. Preto sa WT1 používa ako jeden z cieľov imunoterapie rakoviny [17]. Zoledronát je liek z triedy bisfosfonátov, ktorý sa široko používa na liečbu osteoporózy a metastáz do skeletu. Okrem toho zoledronát inhibuje enzým farnezyldifosfátsyntázu, ktorý hrá úlohu v mevalonátovej dráhe a následnej prenylácii malých proteínov GTPázy, ako je Ras [18]. Vyzreté DC sa potom finalizujú ako DC vakcína (obrázok 1A). Vo všeobecnosti zrelé DC vylučujú rôzne cytokíny na vyvolanie aktivácie imunitných buniek [19] a viažu sa priamo na T bunky na prezentáciu antigénu [20]. T bunky reagovali s DC, aby sa stali pomocnými T bunkami (CD4+), aby pomohli imunitnej odpovedi alebo cytotoxickými T bunkami (CD8+) priamo iniciovať protirakovinové účinky [21] (obrázok 1B). Zloženie DC vakcíny bolo potvrdené prietokovou cytometriou a funkcia vakcíny bola analyzovaná prostredníctvom testu sekrécie cytokínov, zmeny T buniek a testu cytotoxických T lymfocytov (CTL).

cistanche tubulosa - zlepšenie imunitného systému

Kliknite sem pre zobrazenie produktov Cistanche Enhance Immunity

【Požiadať o viac】 E-mail:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

2. Výsledky

2.1. Profily prietokovej cytometrie znázorňujúce DC vakcínu s vysokou CD141+ expresiou

Na potvrdenie identity DC sa analyzovali rôzne markery, vrátane CD141 (najrozšírenejšie používaný marker cDC1), CD1c (marker cDC2) a CD303a (marker pDC). Okrem toho sa analyzovali aj HLA-DR, CD80 a CD{7}}, čo sú aktivačné markery. Na rozdiel od 70 % cDC2 nájdených v ľudských DC krvi, DC, ktorý bol produkovaný, pozostával väčšinou z cDC1 (CD141+ buniek) a dvojnásobne pozitívny výskyt CD141+CD1c+ v aktivovaných DC bol tiež potvrdili [22,23]. Okrem toho výsledky ukázali významne vysokú úroveň aktivity pre DC (obrázok 2A, B). Zmeny morfológie buniek sa tiež sledovali pomocou kompletného krvného obrazu (CBC) pre rôzne časové body v produkcii DC. Zatiaľ čo väčšina buniek proliferuje ako monocyty v proliferačnej fáze (tabuľka 1), diferenciačná fáza viedla k postupnému poklesu monocytov na úroveň vymiznutia ku koncu výrobného procesu.

Obrázok 2. Identifikácia podskupín CDW. Fenotypové charakteristiky DC. Počas procesu diferenciácie boli DC pulzované proteínom WT1 a ošetrené 1 uM zoledronátom počas 3 hodín. Dáta ukazujú expresiu stimulačného markera a podtypu DC reprezentujúceho ľudský DC (n=5) (A). Výsledky sú znázornené ako bodové grafy (B).

Tabuľka 1. Počas procesu proliferácie a diferenciácie z CD34+ buniek na DC sa fenotypové zmeny analyzovali pomocou CBC.

2.2. Plazmatická hladina IL-12 a IFN-cytokínov Stanovená testom ELISA

Z mnohých cytokínov vylučovaných DC sú najreprezentatívnejšie IL-12 a IFN-. IL-12 reguluje zápal prepojením vrodených a adaptívnych imunitných reakcií. Väčšina IL-12-indukovaných účinkov je sprostredkovaná sekréciou IFN- a ukázalo sa, že je rozhodujúca pre indukciu Th1 buniek. IFN- hrá kľúčovú úlohu pri aktivácii bunkovej imunity a následne stimulácii protinádorovej imunitnej odpovede [24–26]. Aby sa overila účinnosť CDW, IL-12 a hladiny sekrécie IFN- sa analyzovali prostredníctvom interakcie s T bunkami. Zatiaľ čo iba T bunky a T bunky ošetrené nepulzovanými DC podmienkami viedli k hladinám sekrécie, ktoré boli navzájom podobné, keď sa skupiny porovnali s hladinami skupiny T bunky + CDW, indukcia CDW na T bunkách poskytla dvojnásobnú hladinu IL -12(obrázok 3A) a významne zvýšili hladinu IFN- (obrázok 3B).

Obrázok 3. Porovnanie indukcie CDW na T bunkách prostredníctvom analýzy cytokínov. Sekrécia IL-12 (A) a IFN-(B) sa merala iba v T bunke (aktivovaný IL-2 a Trans ACT), T bunke + nepulzované DC a T bunke + CDW kokultivácii supernatant pomocou testu ELISA (n=3). ELISA sa uskutočnila s použitím supernatantu v čase dokončenia. Analýza sa uskutočnila prostredníctvom SigmaPlot. *** p < 0.001.

2.3. Vplyv zoledronátu na diferenciáciu a dozrievanie cDC1 v CDW

V predchádzajúcej štúdii bol Rg3 [27], ginsenosid nachádzajúci sa v Panax ginseng, použitý na vyvolanie dozrievania DC; konečný produkt však pozostával z vrstvy nečistôt, čo spôsobovalo ťažkosti pri kontrole kvality. Zoledronát sa použil ako náhrada za Rg3 na prekonanie tohto problému a analyzoval sa jeho účinok na indukciu dozrievania DC. Najvýznamnejším rozdielom medzi účinkami týchto dvoch látok je schopnosť zoledronátu poskytnúť výnimočne vysokú expresiu povrchového markera cDC1 (CD141+ bunky) (obrázok 4A). Keďže je teda známe, že cDC1 je najlepším podtypom DC v prezentácii antigénu, na indukciu zrenia DC bol vybraný zoledronát [18]. Hodnotil sa aj optimálny čas liečby zoledronátom pri indukcii zrenia DC. Hoci 24-hodinové ošetrenie prinieslo dostatočný podiel CD141+ buniek, podiel CD141+ buniek v 3-hodinovom výsledku liečby bol vyšší približne o 20 % a CD86 (spolu stimulačný marker) podiel v 3-hodinovej liečbe bol tiež vyšší o 30 %. Okrem toho, berúc do úvahy mechanizmus účinku zoledronátu, kratší čas liečby 3 hodiny v porovnaní s 24 hodinami sa považoval za účinnejší pri vytváraní vyššej kvality DC (tabuľka 2).

Obrázok 4. Účinok zoledronátu na diferenciáciu a dozrievanie cDC1 pri výrobe DC vakcíny. Účinky zoledronátu v DC vakcíne. V procese výroby DC vakcíny 3-hodinové ošetrenie zoledronátom indukuje diferenciáciu a dozrievanie DC na cDC1 a poskytuje vyššiu hladinu CD141 markera. Fenotypové markery sa analyzovali prietokovou cytometriou na porovnanie Rg3 (n=4) a zoledronátu (n=5), ktoré sa použili na indukciu dozrievania DC. *** p < 0.001.

Tabuľka 2. Účinok doby ošetrenia zoledronátom (3 hodiny a 24 hodín) na povrchové markery.

2.4. CDW očkovaním indukované odpovede T-buniek špecifické pre antigén WT1

Obrázok 5. CDW zvyšuje CD8+ T bunky na podporu cytotoxicity proti rakovinovým bunkám. Účinok CDW na reakciu T buniek hodnotený prostredníctvom CTL. IL-2 a Trans-Act sú stimulátory T buniek a použili sa na stimuláciu T buniek. Aktivované T bunky boli kokultivované s DC pre prvú indukciu, ktorá trvá sedem dní, a druhú indukciu, ktorá trvá 10 deň. Zmeny v podtype T buniek sa analyzovali prietokovou cytometriou (A). T bunky kultivované 10–14 dní sa spoločne kultivovali s rakovinovými bunkami exprimujúcimi WT1 podľa vhodných pomerov na 96-jamkovej platni. Po{11}} hodine sa miera prežitia rakovinových buniek analyzovala pomocou CCK8 (B–D). T bunky indukované CDW skupinou (B). Skupina iba T buniek (aktivovaný IL-2 a Trans ACT) (C). T bunky indukované nepulzovanou DC skupinou (D). * p < 0,05, *** p < 0,001.

2.5. Potvrdenie bezpečnosti vakcíny CellgramDC

V oboch skupinách podávania (3,4 x 104 buniek/zviera alebo 1,7 x 105 buniek/zviera) neboli pozorované žiadne abnormality týkajúce sa úmrtia alebo celkových symptómov v dôsledku podanej látky.

Počas obdobia pozorovania neboli pozorované žiadne toxikologicky významné zmeny v skupinách, ktorým sa podávala látka (3,4 x 104 buniek/zviera alebo 1,7 x 105 buniek/zviera) v dôsledku podanej látky. Pozorovania zahŕňali telesnú hmotnosť (obrázok 6A), analýzu moču (obrázok 6B), príjem krmiva, oftalmologické vyšetrenie, hematologické vyšetrenie, biochemické vyšetrenie krvi, hmotnosť orgánu, pitvu a test lokálnej tolerancie (dodatok 1, tabuľky S1–S9). Rôzne testy boli potvrdené porovnaním DC derivovaných zo stonky (CellgramDC) a DC derivovaných z monocytov (mo-DC). Testovalo sa aj prežitie a veľkosť nádoru myší. Veľkosť nádoru v skupine kmeňových-DC sa znížila o viac ako 50 % v porovnaní s veľkosťou v skupine mo-DC a miera prežitia sa tiež zvýšila, čo potvrdzuje silný protirakovinový účinok (doplnok 2).

Obrázok 6. Subkutánna štúdia toxicity CellgramDC u myší C57BL/6. Na testovanie bezpečnosti a toxickej reakcie CellgramDC sa samiciam a samcom myší kmeňa C57BL/6 subkutánne injikoval CellgramDC celkovo šesť týždňov (jedna injekcia týždenne). Bezpečnosť Cell gramDC bola testovaná subkutánnou injekciou samiciam a samcom myší počas celkovo šiestich týždňov (jedna injekcia týždenne). Skupiny, ktorým sa podávalo, pozostávali z dvoch skupín: 10 myší s injekciou 3,4 x 104 buniek/zviera a 15 myší s injekciou 1,7 x 105 buniek/zviera. Negatívna kontrolná skupina pozostávala z 15 myší a bol im intravenózne injikovaný roztok zložený z pomocnej látky, plazmatický roztok-A/ľudský sérový albumín (HSA) 90 % + DMSO 10 % a fyziologický roztok počas šiestich týždňov (jedna injekcia týždenne). Aby sa otestovala reverzibilná toxická odozva, päť myší z každej porovnávacej skupiny, negatívnej kontrolnej skupiny a 1,7 x 105 buniek/skupina, ktorej sa podávalo zviera, dostali dva týždne obdobia zotavenia. Počas obdobia zotavenia sa sledovala kontrola hmotnosti (A), analýza moču (B), celkové symptómy, meranie príjmu krmiva a oftalmologické vyšetrenie. Po období pozorovania sa vykonali hematologické testy, krvné biochemické testy a meranie hmotnosti orgánov, ako aj vizuálne a histopatologické vyšetrenia pri nekropsii.

Potvrdili sme stabilitu a účinnosť CellgramDC. CDW, ktorý je pulzovaný WT1 a liečený zoledronátom, bude tiež testovaný na toxicitu a účinnosť a očakávajú sa lepšie výsledky.

3. Diskusia

V CDW vakcíne, ktorá bola vyrobená, bol cDC1 najvyšší v pomere a vykazoval vysokú úroveň aktivity. cDC1 sú bunky s najvyššou schopnosťou prezentácie antigénu a sú zodpovedné za hlavnú funkciu DC. Vzhľadom na to, ako cDC1 tvorí vzácnu podskupinu DC [~0,03 % PBMC] [28], prevaha populácie CD141+ v CDW je jasnou výhodou pri zvyšovaní účinnosti vakcína. Okrem toho cDC1 v CDW vylučoval cytokíny (IL-12 a IFN- ) na vysokej úrovni a bol schopný indukovať diferenciáciu naivných T buniek na aktívne CD{10}} T bunky. V našej predchádzajúcej štúdii sa Rg3 použil ako faktor dozrievania, ale vzhľadom na ťažkosti pri získavaní dodávok a kontroly kvality konečného produktu sa ako náhrada na prekonanie týchto problémov použil zoledronát. DC indukované zoledronátom boli študované s cieľom analyzovať jeho úlohu ako induktora aktivácie V 9 δ T buniek [29]. Zoledronát je trieda bisfosfonátov a bisfosfonáty indukujú aktivitu δ T buniek na rýchlu a hojnú produkciu prozápalových cytokínov [30], berúc do úvahy túto skutočnosť, navrhli sme náš experiment na testovanie účinkov krátkodobej liečby. V našej štúdii zoledronát (v porovnaní s Rg3) indukoval aktiváciu CD8+ T buniek v CDW a tiež zvýšil hladinu cDC1. Prvá klinická štúdia bola vykonaná pre DC indukovanú Rg3 (NCT 046158-45) z našej predchádzajúcej štúdie, ale výsledky neboli hlásené. Očakávame však zlepšené výsledky v budúcich klinických štúdiách s použitím DC indukovaných zoledronátom vzhľadom na súčasné zistenia.

cistanche rastlina zvyšujúca imunitný systém

V poslednej dobe sa uskutočnilo mnoho štúdií o imunoterapii proti rakovine a najviac preskúmané terapie sú CAR-T [31,32] a CAR-NK [33,34]. Tieto terapie potvrdili svoju účinnosť a sú veľmi očakávané pri liečbe rakoviny. CAR-T je však obmedzená na liečbu rakoviny krvi, ktorá predstavuje veľmi malý podiel všetkých typov rakoviny [35]. Okrem toho môžu pacienti trpieť vedľajšími účinkami liečby, ako je syndróm uvoľnenia cytokínov (CRS) [36]. S cieľom prekonať tieto nedostatky sa skúma imunitná terapia pomocou NK buniek. NK bunky sú vysoko účinné lymfocyty a zameriavajú sa na rakovinu prostredníctvom viacerých široko exprimovaných aktivačných ligandov. V dôsledku toho môžu NK bunky riešiť obmedzenia autológnej terapie CAR T bunkami. Existuje však niekoľko potenciálnych nevýhod používania NK buniek, ako sú ťažkosti s bunkovou kultúrou, bezprostrednosť vo vrcholovej aktivite bunkovej kinetiky a kratšia vnútorná dlhovekosť, ako aj obmedzený fenotyp pamäte v dĺžke života a odozve [34,37 ,38]. Ďalší výskum zahŕňa kombinovanú terapiu využívajúcu DC alebo T bunky a inhibítory imunitného kontrolného bodu, ako je anti-PD1 (proteín programovanej bunkovej smrti1) [39] alebo anti-PD-L1 (ligand programovanej smrti1) [40]. Súbežné podávanie týchto liekov umožňuje zacielenie na imunosupresívne nádorové mikroprostredie a prebieha ďalší výskum na zvýšenie účinnosti týchto terapií.

Výhody cistanche tubulosa-posilnenie imunitného systému

Výskum vývoja DC vakcíny pre imunoterapiu sa neustále zvyšuje a v tejto oblasti sa robí mnoho pokrokov. DC hrá ústrednú a rozhodujúcu úlohu v pokročilom imunitnom systéme a vakcína proti DC môže ponúkať výhodu v porovnaní s inými spôsobmi imunoterapie rakoviny. Pretože DC priamo nezabíja rakovinové bunky, normálne bunky nie sú ovplyvnené, čo eliminuje nepriaznivé vedľajšie účinky. Okrem toho, pulzovaním DC pomocou WT1, antigénu bežne exprimovaného v mnohých solídnych nádoroch [17], môže vakcína proti DC zacieliť modely solídnych nádorov. Pred rozhodnutím o proteínovom antigéne WT1 sme experimentovali s rôznymi typmi antigénov. Použitím kvalitných garantovaných produktov, ako aj rôznych antigénov ako peptid, captivator, či pop mix, bol antigén s najväčším účinkom pri použití ako proteín. V dôsledku toho sme použili proteín WT1 na pulzovanie antigénu. Najviac študovaný prístup v terapii DC využíva pulzný mo-DC s WT1 v spojení s chemoterapiou [12]. Bezpečnosť a imunogenicita mo-DC bola potvrdená klinickými štúdiami [13]. Zatiaľ čo ďalší výskum vakcín proti DC vyvíja svoje vakcíny pomocou DC odvodených od monocytov z krvi, predpovedali sme, že DC odvodené z kmeňových buniek bude mať zvýšený potenciál. Okrem toho je známe, že cDC má väčší výkon ako mo-DC, čo nás poháňa k tomuto výskumu. Preto môže byť CDW lepšou alternatívou k mo-DC, pretože jeho primárnou zložkou je cDC1, podtyp DC s najúčinnejšou schopnosťou krížovej prezentácie. Hoci cytotoxická aktivita bola podobná v skupine T buniek + nepulzovanej DC skupine a CDW skupine, predpokladáme, že je to preto, že nepulzované DC sú tiež typom cDC1 bunky. Bez ohľadu na to môže CDW účinne vyvolať silnú protinádorovú imunitnú odpoveď zvýšením populácie cDC1. Prostredníctvom predklinickej štúdie sme testovali toxicitu DC vakcíny po opakovanom podaní. Proces vývoja a výroby CDW bol overený a dúfame, že vykonáme ďalšie štúdie na testovanie zlepšených účinkov CDW. Zatiaľ čo účinnosť bola potvrdená in vitro, vykonala sa štúdia toxicity dávky na overenie účinnosti in vivo. Po zverejnení výsledkov klinických skúšok s použitím CDW máme v úmysle viesť náš výskum smerom, ktorý zlepší súčasný výskum.

Referencie

1. Padma, VV Prehľad cielenej terapie rakoviny. BioMedicine 2015, 5, 19. [CrossRef] [PubMed]

2. Schirrmacher, V. Vakcíny proti rakovine a onkolytické vírusy majú výrazne nižšie vedľajšie účinky u pacientov s rakovinou ako iné systémové terapie: Porovnávacia analýza. Biomedicína 2020, 8, 61. [CrossRef] [PubMed]

3. Smith, CC; Selitsky, SR; Chai, S.; Armistead, PM; Vincent, BG; Serody, JS Alternatívne nádorovo špecifické antigény. Nat. Rev. Rakovina 2019, 19, 465–478. [CrossRef] [PubMed]

4. Lu, H.; Zhao, X.; Li, Z.; Hu, Y.; Wang, H. Od CAR-T buniek k CAR-NK bunkám: Vyvíjajúca sa imunoterapeutická metóda pre hematologické malignity. Predné. Oncol. 2021, 11, 720501. [CrossRef]

5. Chu, J.; Gao, F.; Yan, M.; Zhao, S.; Yan, Z.; Shi, B.; Liu, Y. Prirodzené zabíjačské bunky: Sľubná imunoterapia rakoviny. J. Transl. Med. 2022, 20, 240. [CrossRef] [PubMed]

6. Sabado, RL; Balan, S.; Bhardwaj, N. Imunoterapia založená na dendritických bunkách. Cell Res. 2017, 27, 74–95. [CrossRef] [PubMed]

7. Patente, TA; Pinho, poslanec; Oliveira, AA; Evangelista, GCM; Bergami-Santos, PC; Barbuto, JAM Ľudské dendritické bunky: Ich heterogenita a potenciál klinickej aplikácie v imunoterapii rakoviny. Predné. Immunol. 2019, 9, 3176. [CrossRef]

8. Collin, M.; Bigley, V. Podmnožiny ľudských dendritických buniek: Aktualizácia. Imunológia 2018, 154, 3–20. [CrossRef]

9. Fitzgerald-Bocarsly, P.; Dai, J.; Singh, S. Plazmacytoidné dendritické bunky a IFN typu I: 50 rokov konvergentnej histórie. Cytokínový rastový faktor Rev. 2008, 19, 3–19. [CrossRef]

10. Segura, E.; Touzot, M.; Bohineust, A.; Cappuccio, A.; Chiocchia, G.; Hosmalin, A.; Dalod, M.; Soumelis, V.; Amigorena, S. Ľudské zápalové dendritické bunky indukujú diferenciáciu Th17 buniek. Imunita 2013, 38, 336–348. [CrossRef]

11. Geskin, LJ; Damiano, JJ; patrón, CC; Butterfield, L.; Kirkwood, JM; Falo, LD Tri metódy zavádzania antigénu do vakcín dendritických buniek pre metastatický melanóm. Melanoma Res. 2018, 28, 211. [CrossRef] [PubMed]

12. Guo, Z.; Yuan, Y.; Chen, C.; Lin, J.; Ma, Q.; Liu, G.; Gao, Y.; Huang, Y.; Chen, L.; Chen, L.-Z.; a kol. Trvalá úplná odpoveď na vakcínu s dendritickými bunkami nabitú neoantigénom po anti-PD-1 liečbe metastatického karcinómu žalúdka. Npj Precis. Oncol. 2022, 6, 34. [CrossRef] [PubMed]

13. Bol, KF; Schreibelt, G.; Rabold, K.; Wculek, SK; Schwarze, JK; Dzionek, A.; Teijeira, A.; Kandalaft, LE; Romero, P.; Coukos, G.; a kol. Klinická aplikácia imunoterapie rakoviny založenej na prirodzene cirkulujúcich dendritických bunkách. J. Immunother. Rakovina 2019, 7, 109. [CrossRef] [PubMed]

14. Koya, T.; Dátum, I.; Kawaguchi, H.; Watanabe, A.; Sakamoto, T.; Togi, M.; Kato, JT; Yoshida, K.; Kojima, S.; Yanagisawa, R.; a kol. Dendritické bunky vopred pulzované Wilmsovým nádorom 1 v optimalizovanej kultúre na očkovanie proti rakovine. Pharmaceutics 2020, 12, 305. [CrossRef] [PubMed]

15. Zhou, Y.; Slone, N.; Chrisikos, TT; Kyrysyuk, O.; Babcock, RL; Medik, YB; Li, HS; Kleinerman, ES; Watowich, SS Účinnosť vakcíny proti primárnej a metastatickej rakovine s konvenčnými dendritickými bunkami CD103+ generovanými in vitro. J. Immunother. Rakovina 2020, 8, e000474. [CrossRef]

16. Cueto, F.; Sancho, D. Os Flt3L/Flt3 v biológii dendritických buniek a imunoterapii rakoviny. Rakoviny 2021, 13, 1525. [CrossRef]

17. Yanagisawa, R.; Koizumi, T.; Koya, T.; Sano, K.; Koido, S.; Nagai, K.; Kobayashi, M.; Okamoto, M.; Sugiyama, H.; Shimodaira, S. WT1-pulzná vakcína proti dendritickým bunkám kombinovaná s chemoterapiou pre resekovaný karcinóm pankreasu v štúdii fázy I. Protirakovinové. Res. 2018, 38, 2217–2225. 18. Orsini, G.; Failli, A.; Legitimo, A.; Adinolfi, B.; Romanini, A.; Consolini, R. Kyselina zoledrónová moduluje dozrievanie dendritických buniek odvodených od ľudských monocytov. Exp. Biol. Med. 2011, 236, 1420–1426. [CrossRef] [PubMed]

19. Schmidt, SV; Nino-Castro, AC; Schultze, JL Regulačné dendritické bunky: Existuje viac než len aktivácia imunity. Predné. Immunol. 2012, 3, 274. [CrossRef]

20. Tai, Y.; Wang, Q.; Korner, H.; Zhang, L.; Wei, W. Molekulárne mechanizmy aktivácie T buniek dendritickými bunkami pri autoimunitných ochoreniach. Predné. Pharmacol. 2018, 9, 642. [CrossRef]

21. Alfei, F.; Ho, P.-C.; Lo, W.-L. DC-tvorba v nádoroch riadi T bunkovú protinádorovú imunitu. Oncogene 2021, 40, 5253–5261. [CrossRef] [PubMed]

22. Granot, T.; Senda, T.; Tesár, DJ; Matsuoka, N.; Weiner, J.; Gordon, CL; Miron, M.; Kumar, BV; Griesemer, A.; Ho, S.-H.; a kol. Dendritické bunky vykazujú podskupinu a tkanivovo špecifickú dynamiku dozrievania počas ľudského života. Imunita 2017, 46, 504–515. [CrossRef] [PubMed]

23. Breton, G.; Lee, J.; Zhou, YJ; Schreiber, JJ; Keler, T.; Puhr, S.; Anandasabapathy, N.; Schlesinger, S.; Caskey, M.; Liu, K.; a kol. Cirkulujúce prekurzory ľudských CD1c+ a CD141+ dendritických buniek. J. Exp. Med. 2015, 212, 401–413. [CrossRef] [PubMed]

24. Tugues, S.; Burkhard, SH; Oh, I.; Vrohlings, M.; Nussbaum, K.; vom Berg, J.; Kulig, P.; Becher, B. Nové poznatky o supresii nádoru sprostredkovanej IL-12-. Cell Death Differ. 2015, 22, 237–246. [CrossRef]

25. Ashour, D.; Arampatzi, P.; Pavlovič, V.; Förstner, KU; Kaisho, T.; Beilhack, A.; Erhard, F.; Na indukciu Th1 je potrebný Lutz, MB IL-12 z endogénneho cDC1, a nie vakcinačný DC. JCI Insight. 2020, 5, e135143. [CrossRef]

26. Jorgovanovič, D.; Song, M.; Wang, L.; Zhang, Y. Úlohy IFN- v progresii a regresii nádoru: prehľad. Biomark. Res. 2020, 8, 49. [CrossRef]

27. Syn, K.-j.; Choi, KR; Lee, SJ; Lee, H. Imunogénna bunková smrť vyvolaná ginsenozidom Rg3: Význam v protinádorovej imunoterapii na báze dendritických buniek. Immune Netw. 2016, 16, 75–84. [CrossRef]

28. Jongbloed, SL; Kassianos, AJ; McDonald, KJ; Clark, GJ; Ju, X.; Angel, CE; Chen, C.-JJ; Dunbar, PR; Wadley, RB; Jeet, V.; a kol. Ľudské CD141+ (BDCA-3)+ dendritické bunky (DC) predstavujú jedinečnú myeloidnú podskupinu DC, ktorá krížovo prezentuje antigény nekrotických buniek. J. Exp. Med. 2010, 207, 1247–1260. [CrossRef]

29. Noguchi, A.; Kaneko, T.; Kamigaki, T.; Fujimoto, K.; Ozawa, M.; Saito, M.; Ariyoshi, N.; Goto, S. Imunoterapia na báze V 9 δ T buniek aktivovaná zoledronátom je uskutočniteľná a obnovuje poškodenie δ T buniek u pacientov so solídnymi nádormi. Cytoterapia 2011, 13, 92–97. [CrossRef]

30. Hewitt, RE; Lissina, A.; zelená, AE; Slay, ES; Cena, DA; Sewell, AK Bisfosfonátová odpoveď akútnej fázy: Rýchla a hojná produkcia prozápalových cytokínov gd T bunkami periférnej krvi ako odpoveď na aminobisfosfonáty je inhibovaná statínmi. Clin. Exp. Immunol. 2005, 139, 101-111. [CrossRef]

31. júna, CH; O'Connor, RS; Kawalekar, OU; Ghassemi, S.; Milone, MC CAR T bunková imunoterapia pre ľudskú rakovinu. Veda 2018, 359, 1361–1365. [CrossRef] [PubMed]

32. Sterner, RC; Sterner, RM CAR-T bunková terapia: Súčasné obmedzenia a potenciálne stratégie. Blood Cancer J. 2021, 11, 69. [CrossRef] [PubMed]

33. Xie, G.; Dong, H.; Liang, Y.; Ham, JD; Rizwan, R.; Chen, J. CAR-NK bunky: Sľubná bunková imunoterapia rakoviny. EBioMedicine 2020, 59, 102975. [CrossRef] [PubMed]

34. Zhang, L.; Meng, Y.; Feng, X.; Han, Z. CAR-NK bunky pre imunoterapiu rakoviny: Od lavice po posteľ. Biomark. Res. 2022, 10, 12. [CrossRef] [PubMed]

35. Marofi, F.; Motavalli, R.; Safonov, VA; Thangavelu, L.; Yumashev, AV; Alexander, M.; Shomali, N.; Chartrand, MS; Pathak, Y.; Jarahian, M.; a kol. CAR T bunky v solídnych nádoroch: výzvy a príležitosti. Stem Cell Res. Ther. 2021, 12, 81. [CrossRef]

36. Santomasso, B.; Bachier, C.; Westin, J.; Rezvani, K.; Shpall, EJ Druhá strana terapie CAR T-bunkami: Syndróm uvoľňovania cytokínov, neurologická toxicita a finančná záťaž. Am. Soc. Clin. Oncol. Vychovávať. Kniha 2019, 39, 433–444. [CrossRef]

37. Liu, S.; Galát, V.; Galat, Y.; Lee, YKA; Wainwright, D.; Wu, J. Imunoterapia rakoviny na báze NK buniek: Od základnej biológie po klinický vývoj. J. Hematol. Oncol. 2021, 14, 7. [CrossRef]

38. Streltsová, M.; Ustiuzhanina, M.; Baršov, E.; Kust, S.; Velichinskii, R.; Kovalenko, E. Telomerázová reverzná transkriptáza zvyšuje proliferáciu a životnosť ľudských NK buniek bez imortalizácie. Biomedicína 2021, 9, 662. [CrossRef]

39. Garris, CS; Arlauckas, SP; Kohler, RH; Trefný, poslanec; Garren, S.; Piot, C.; Engblom, C.; Pfirschke, C.; Siwicki, M.; Gungabeesoon, J.; a kol. Úspešná imunoterapia proti rakovine proti PD-1 vyžaduje presluchy T buniek a dendritických buniek zahŕňajúce cytokíny IFN- a IL-12. Imunita 2018, 49, 1148–1161.e7. [CrossRef]

40. Thongchot, S.; Jirapongwattana, N.; Luangwattananun, P.; Chiraphapphaiboon, W.; Chuangchot, N.; Sa-Nguanraksa, D.; O Charoenrat, P.; Thuwajit, P.; Yenchitsomanus, P.-T.; Thuwajit, C. Adoptívny transfer anti-nukleolínových T buniek kombinovaný s PD-L1 inhibíciou proti triple-negatívnej rakovine prsníka. Mol. Cancer Ther. 2022, 21, 727–739. [CrossRef]