Skúmanie účinku fenyletanoidových glykozidov Cistanche proti rakovine pečene

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

Abstraktné

Cieľ: Štúdium anti-hepatokarcinómuúčinokcistanche fenyletanoidové glykozidy (CPhG),a preskúmať jeho možný mechanizmus účinku. Metódy: Myšací model rakoviny pečene H22 nesúci tumor bol vytvorený subkutánnou injekciou do pravej axily prednej končatiny. Experiment vytvoril slepú kontrolnú skupinu, modelovú skupinu s nádorom pečene H22 a skupinu s pozitívnou liečbou Ganfule (1351,5 mg/kg) s vysokými CPhG. Skupina s dávkou (500 mg/kg), skupina so strednou dávkou (250 mg/kg) a skupina s nízkou dávkou (125 mg/kg), celkovo 6 skupín, každá s 10 zvieratami. Okrem slepej kontrolnej skupiny a modelovej skupiny sa ostatným skupinám podával Ganfule alebo CPhG žalúdočnou sondou počas 10 po sebe nasledujúcich dní. Počas monitorovania celkového stavu myší sa pozoroval rast nádorových tiel myší s nádorom H22 v každej skupine. Na konci experimentu sa odobrali očné buľvy na odber krvi a sérový interleukín 2 (IL-2) a tumor nekrotizujúci faktor sa detegovali pomocou enzýmového imunosorbentného testu (ELISA). a(obsah TNF-∞ a alfa-fetoproteínu (AFP); oddeľte slezinu a pečeň, zvážte ich, vypočítajte orgánový koeficient; úplne odstráňte telo nádoru, vypočítajte mieru inhibície nádoru každej skupiny myší; pozorujte patologické tkanivo telo nádoru farbením HE. Výsledky: Axilárne nádory modelovej skupiny nesúcej nádor sa objavili skoro a rástli najrýchlejšie, nasledovala skupina s nízkou a strednou dávkou CPhG a nádory v skupine s vysokou dávkou a pozitívnou liečbou skupina rástla pomaly. V porovnaní s modelovou skupinou vykazovali CPhG stredný a rýchly rast. Nádorová hmota v skupine s vysokou dávkou bola významne znížená (P<0.05), and="" the="" tumor="" suppressor="" rate="" in="" each="" dose="" group="" increased="" with="" the="" increase="" of="" cphgs="" dose=""><0.05); the="" positive="" treatment="" group="" and="" the="" spleen="" coefficient="" of="" each="" dose="" group="" of="" cphgs="" increased="" significantly="" and="" liver="" coefficients="" were="" significantly="" reduced=""><0.05); the="" levels="" of="" il-2="" in="" cphgs="" medium,="" high-dose="" groups,="" and="" positive="" treatment="" groups="" were="" significantly="" increased=""><0.05), while="" the="" content="" of="" afp="" was="" significantly="" reduced="" (,="">< 0.05);="" tnf-0="" [content="" in="" each="" dose="" group="" and="" a="" positive="" treatment="" group="" of="" cphgs="" was="" significantly="" reduced=""><0.05). pathological="" results="" showed="" that="" the="" growth="" of="" mouse="" liver="" cancer="" cells="" in="" each="" dose="" group="" of="" cphgs="" was="" inhibited,="" the="" number="" was="" smaller,="" the="" heterogeneity="" was="" reduced,="" and="" a="" large="" number="" of="" necrotic="" cells="" were="" accompanied.="" conclusion:="" cphgs="" can="" reduce="" liver="" damage="" in="" h22="" tumor-bearing="" mice="" and="" inhibit="" tumor="" growth,="" which="" may="" be="" related="" to="" cphgs="" reducing="" the="" serum="" afp="" content="" in="" tumor-bearing="" mice="" and="" improving="" the="" immunity="" of="" tumor-bearing="">

[Kľúčové slová]Cistanche; celkové fenyletanoidové glykozidy; bunky H22; rakovina pečene

Cistanche deserticola má mnoho účinkov, kliknite sem a dozviete sa viac

Cistanche (tubulosa)sa vyrába hlavne v Xinjiang a Alexa League z Vnútorného Mongolska. Je známy ako „púštny ženšen“ a má mimoriadne vysokú liečivú hodnotu. Je to vzácny tradičný čínsky liečivý materiál. Prvýkrát publikovaný v "Shen Nong's Materia Medica" je uvedený ako najlepší stupeň. Má sladkú, slanú a hrejivú povahu. Má účinky vyživovania jangu obličiek, výživnej esencie a krvi a zvlhčuje črevá. Často sa používa na liečbu impotencie u mužov, neplodnosti u žien a pása a kolien. Studená bolesť, suchosť krvi, zápcha a iné symptómy sú posmešné. Domáci vedci vykonali veľa výskumov o chemických zložkáchCistanche, počítajúc do tohofenyletanoidové glykozidyodcistanche(CPhG), iridoidy, lignany, polysacharidy, alkaloidy atď. Najdôležitejšími zložkami sú CPhGso, moderný farmakologický výskum ukázal, že CPhG majú antibakteriálne, protizápalové, antivírusové, protinádorové, antioxidačné, imunitné regulačné vlastnosti, zlepšujú pamäť , jang a ďalšie farmakologické aktivity. Zároveň veľký počet členov výskumného tímu, ktorý sa zaoberal CPhG v ranom štádiu, ukázal, že CPhG Má účinok proti fibróze pečene.“ 71. V tomto experimente boli CPhG izolované zCistancheliečivé materiály sa použili na štúdium jeho účinku proti hepatokarcinómu na myšiach nesúcich nádor H22. Poskytnúť základ pre vývoj liekov.

1. Materiály a metódy

1.1 Testovaná látka a pokusné zvieratá

Cistanchefenyletanoidové glykozidy(CPhG) boli extrahované, oddelené a identifikované výskumníkom Zhao Jun z Xinjiang Institute of Materia Medica, čistota bola 70 percent 91 a v experimente sa použilo 0,5 percenta karboxymetylcelulózy. Sodík (0,5 % CMC-Na) sa rozpustí, pripraví sa na rôzne koncentrácie, uskladní sa pri 4 stupňoch a použije sa do 1 týždňa.

Myši Kunming triedy SPF, 60 samcov, s hmotnosťou 18-22 g, zakúpené od Experimental Animal Research Center of Xinjiang Medical University, číslo certifikátu je SCXK (nové) 2016-0002 a číslo licencie je SYXK (plat: ) 2016—0003.

1.2. Myš bunkovej línie

Bunkovú líniu hepatokarcinómu H22 poskytuje spoločnosť Wuhan Prose Life Technology Co., Ltd., číslo položky je CL-01341.

1.3. Prístroje a hlavné činidlá

Nízkorýchlostná odstredivka (70L-5A, Shanghai Anting); CO, inkubátor (Heal Force, HF240); elektrická nádrž na vodu s konštantnou teplotou (DK-8D, Shanghai ◎Heng Technology Co., Ltd.); Čítačka mikrodoštičiek (Bio-rad); posuvné meradlo (Shanghai Future Experimental Equipment Co., Ltd.); elektronické váhy (Changzhou Wantai Balance Instrument Co., Ltd.).

Gainful je produktom spoločnosti CommScope Pharmaceutical Co., Ltd. (Z20060389); RPMI-1640 médium a 1 percento dvojitej protilátky (Isher IJBI); Fetálne hovädzie sérum (Gibco, USA); 0,4 percenta trypánovej modrej a 4 percentá paraformaldehydu (Jing Suo Lebao); myšací tumor nekrotizujúci faktor IX (TNF-cc), interleukín 2 (IL-2), alfa-fetoproteín (AFP) kit ELISA (Wuhan Huamei).

1.4 Skúšobná metóda

1.4.1 Vytvorenie myšacieho modelu rakoviny pečene nesúceho nádor H22

Resuscitujte bunky H22 pri 37 stupňoch, zlikvidujte supernatant centrifugáciou, pridajte čerstvé kompletné médium RPMI{2}} na resuspendovanie buniek na rýchle zotavenie, kultivujte viac ako 95 percent životaschopných buniek in vitro a naočkujte myši, keď hustota buniek dosiahne 1×106/ml brušná dutina, každá po 0,2 ml. Priechod približne 8,10 d. Myšia peritoneálna nádorová tekutina H22 kultivovaná napravo od 8 dE bola asepticky extrahovaná, zriedená normálnym fyziologickým roztokom, aby sa upravil počet nádorových buniek na 1 x 107/ml, dobre premiešaná a odložená. Okrem toho, že slepej kontrolnej skupine bolo podané rovnaké množstvo normálneho fyziologického roztoku na rovnakom mieste, myši v ostatných skupinách boli dezinfikované a naočkované suspenziou nádorových buniek H22 do pravého podpazušia ich predných končatín, každý o. 2 ml [9,101, 24 hodín po modelovaní, každý deň pozorujte rast nádoru.

1.4.2 Zoskupovanie a správa

Vyššie modelované myši s nádorom H22 boli náhodne rozdelené do 5 skupín, konkrétne do modelovej skupiny a skupiny s pozitívnou liečbou (Ganfule 1351,5 mg/kg), s vysokými CPhG (500 mg/kg), QB ( 250 mg/kg) mg/kg), skupina s nízkou (125 mg/kg) dávkou, každá skupina má 10 zvierat. Po modelovaní sa sonda začala pri 24 hA. Okrem slepej kontrolnej skupiny a modelu bol skupine podaný rovnaký objem 0,5 percentného roztoku CMC-Na, ostatným skupinám bola podávaná dávka pozitívnych liečiv alebo CPhG žalúdočnou sondou počas 10 po sebe nasledujúcich 10 hodín. d"2.1 31. Denne pohovorte pozorovaním stavu duševnej aktivity, veľkosti a času vzhľadu pravého axilárneho opuchu, farby srsti a chuti do jedla myší s nádorom. 24 hodín po poslednom podaní zvážte hmotnosť, odstráňte očné buľvy a odoberte krv a oddeľte sérum Náhradné; Metóda cervikálnej dislokácie zabije myši, oddelí slezinu a pečeň, zváži koeficient pečene a sleziny; úplne odlúpne nádor, utrie filtračným papierom a odváži hmotnosť, vypočíta inhibíciu nádoru pre každú skupinu myší, nádorové tkanivo je patologické Histologické vyšetrenie.

1.4.3 Testovacie indikátory

①Stanovenie koeficientov sleziny a pečene: Po usmrtení myší v každej skupine boli sleziny a pečeň narezané a zvážené a boli vypočítané orgánové koeficienty. Orgánový koeficient=hmotnosť orgánu/4, telesná hmotnosť myši × 100 percent . ② Stanovenie nádorovej hmoty a rýchlosti inhibície nádoru: 24 hodín po poslednom podaní boli myši usmrtené metódou cervikálnej dislokácie a odvážené. Nádor bol úplne odlúpnutý, utretý filtračným papierom a potom odvážený na elektronických váhach. Hmotnosť bola vypočítaná na základe hmotnosti nádoru. Miera inhibície nádoru u myší v každej skupine, ktorej sa podávala, miera inhibície nádoru=(modelová skupina hmoty nádoru-experimentálna skupina nádorovej hmoty) hmota nádoru membránovej skupiny X 100 percent. ③Po odstránení očných buliev a odbere krvi oddeľte sérum a uložte ho na kontrolu pri teplote 80 stupňov. Zistite obsah IL-2, TNF-0 a AFP v sére podľa pokynov súpravy ELISA. ④ Histopatologické vyšetrenie nádoru. Potom, čo boli nádory v každej skupine fixované 4 percentami paraformaldehydu počas 24 hodín, boli rezy vložené do parafínu a zafarbené konvenčným HE. Patologické zmeny nádoru boli pozorované pod svetelným mikroskopom a predbežne bola posúdená oblasť nekrózy nádorových buniek. Účinok liečby liekmi CPhG.

1.5 Štatistické metódy

Na štatistickú analýzu sa použil softvér SPSS 17.0 a výsledky údajov každej skupiny sa vyjadrili ako x ± S a údaje medzi viacerými skupinami sa porovnali pomocou jednosmernej analýzy rozptylu a úrovne testu =0.05.

2. výsledky

2.1 Všeobecné pozorovanie myší

Before administration, there was no statistically significant difference in the bodyweight of the mice between the groups (P>0.05). V modelovej skupine uhynuli 2 myši v dôsledku podania do žalúdka počas experimentu. Po podaní sa v porovnaní so slepou kontrolnou skupinou zvýšila telesná hmotnosť myší v modelovej skupine s rastom nádoru, ale rozdiel nebol štatisticky významný

(P>0.05); Compared with the model group, the bodyweight of mice in the positive treatment group and the CPhGs dose group decreased to a certain extent, but the difference was not statistically significant (P>0.05). Na 4. deň experimentu začali myšiam opúchať podpazušie, stav duševnej aktivity zvieraťa sa zhoršil, zvieratá pomaly reagovali na vonkajšie podnety, znížila sa ich chuť do jedla a farba srsti sa stmavla. Nádorová hmota sa objavila ako prvá v modelovej skupine a rýchlosť rastu bola najrýchlejšia. Vyššie uvedené reakcie boli najzreteľnejšie, po ktorých nasledovala skupina s nízkou a strednou dávkou CPhG. Skupina s vysokou dávkou a skupina s pozitívnou liečbou mali pomalší rast nádoru, lepšiu kvalitu života a žiadne zjavné nepriaznivé účinky.

2.2 Účinok Cistanche CPhG na koeficienty sleziny a pečene u myší s nádorom H22

V porovnaní so slepou kontrolnou skupinou bol koeficient sleziny modelovej skupiny významne znížený a koeficient pečene bol významne zvýšený (P<0.01); compared="" with="" the="" model="" group,="" the="" spleen="" coefficient="" of="" the="" positive="" treatment="" group="" and="" the="" cphgs="" dose="" groups="" were="" significantly="" increased,="" and="" the="" liver="" coefficient="" was="" significantly="" decreased="" (p=""><0.01), indicating="" that="" cphgs="" can="" improve="" the="" immune="" function="" of="" tumor-bearing="" mice="" to="" a="" certain="" extent="" and="" inhibit="" liver="">

3. Diskusia

Primárnyrakovina pečeneje bežný zhubný nádor v klinickej praxi. Predstavuje 4. miesto vo svetovej incidencii nádorov a 2. miesto v úmrtnosti. Jeho prevencia a liečba je v mojej krajine stále horúcou témou výskumu. Postupne sa objavujú výhody tradičnej čínskej medicíny v kontrole vývoja pacientov, zlepšovaní symptómov a prejavov a zlepšovaní kvality života. S cieľom nájsť nízku toxicitu a vysokú účinnosťproti rakovine pečenelieky z čínskej tradičnej medicíny, táto téma využíva H22rakovina pečenebunky na prípravu buniek nesúcich nádor H22. Model myšieho nádoru, porovnajte rôzne dávky liečenej skupiny CPhG s modelovou kontrolnou skupinou a skupinou s pozitívnou liečbou Ganfule, aby ste preskúmali protinádorový účinok CPhG na myši s nádorom H22 a jeho mechanizmus.

Výsledky ukázali, že modelová skupina mala ako prvá opuchnutý axilárny nádor a jeho rast bol najrýchlejší. Psychický stav myší sa znížil, chuť do jedla sa znížila a farba srsti začala slabnúť. Skupina s nízkou a strednou dávkou CPhG, po ktorej nasledovala skupina s vysokou dávkou a Ganfule pozitívny. Liečebná skupina bola pomalšia a telesná hmotnosť myší v každej dávkovej skupine CPhG a nedošlo k žiadnemu významnému poklesu v skupine s pozitívnou liečbou Ganfule, čo naznačuje, že lieky CPhG môžu relatívne zlepšiť kvalitu života myší s nádorom H22 a znížiť toxicita nádorov pre telo. Kvalita nádoru každej dávkovej skupiny CPhG a pozitívnej liečebnej skupiny na Ganfule bola významne nižšia ako v modelovej kontrolnej skupine a miera inhibície nádoru v skupine s vysokou dávkou bola ekvivalentná s mierou inhibície nádoru v skupine s pozitívnou liečbou Ganfule, čo naznačuje, že CPhG môže ovplyvniť myši s nádorom H22 Nádory in vivo majú určitý inhibičný účinok. Okrem toho výsledky tejto štúdie ukazujú, že koeficienty sleziny v skupine s pozitívnou liečbou Ganfule a v skupinách s dávkou CPhGs sú vyššie ako v modelovej skupine, zatiaľ čo koeficienty pečene sú nižšie ako v modelovej kontrolnej skupine, čo naznačuje, že liek je účinný, Tento projekt používa H22rakovina pečenebuniek na prípravu myších nádorových modelov s nádorom H22, porovnáva rôzne dávky skupiny liečenej CPhG s modelovou kontrolnou skupinou a skupinou s pozitívnou liečbou Ganfule a skúma protinádorové účinky CPhG na myši s nádorom H22. Jeho mechanizmus.

Výsledky ukázali, že modelová skupina mala ako prvá opuchnutý axilárny nádor a jeho rast bol najrýchlejší. Psychický stav myší sa znížil, chuť do jedla sa znížila a farba srsti začala slabnúť. Skupina s nízkou a strednou dávkou CPhG, po ktorej nasledovala skupina s vysokou dávkou a Ganfule pozitívny. Liečebná skupina bola pomalšia a telesná hmotnosť myší v každej dávkovej skupine CPhG a skupine s pozitívnou liečbou Ganfule sa významne neznížila, čo naznačuje, že lieky CPhG môžu relatívne zlepšiť kvalitu života myší s nádorom H22 a znížiť toxicitu nádorov do tela. Kvalita nádoru každej dávkovej skupiny CPhG a pozitívnej liečebnej skupiny na Ganfule bola významne nižšia ako v modelovej kontrolnej skupine a miera inhibície nádoru v skupine s vysokou dávkou bola ekvivalentná s mierou inhibície nádoru v skupine s pozitívnou liečbou Ganfule, čo naznačuje, že CPhG má určitý účinok na nádory u myší s nádorom H22 Inhibícia. Okrem toho výsledky tejto štúdie ukázali, že koeficienty sleziny v skupine s pozitívnou liečbou Ganfule a v skupinách s dávkou CPhG boli vyššie ako v modelovej skupine, zatiaľ čo koeficienty pečene boli nižšie ako v modelovej kontrolnej skupine, čo naznačuje, že CPhG môžu inhibovať nádory pri rovnaký čas. Do určitej miery zlepšuje imunitnú funkciu myší s nádorom a má aj ochranný účinok na pečeň, ale účinok na slezinu a pečeň sa výrazne nelíši od Ganfule.

IL-2 je typ bunkového rastového faktora v imunitnom systéme. Podieľa sa na bunkovej imunite a zohráva centrálnu regulačnú úlohu v komplexnej imunitnej sieti organizmu. Môže zlepšiť imunitnú funkciu tela podporou proliferácie a diferenciácie T buniek a môže produkovať protinádorovo aktívne imunitné bunky. Štúdie zistili, že IL-2 môže podporovať prežitie, expanziu a aktiváciu zabíjačských buniek aktivovaných lymfokínom. Tento typ bunky je druhom zabíjačských buniek s vysokým obsahom protinádorových buniek produkovaných lymfocytmi v kontakte s IL-2 a tieto zabíjačské bunky rozpoznávajú iba nádorové antigény a nemajú žiadny vplyv na normálne hostiteľské bunky.“ 5.161. výsledky tohto experimentu ukazujú, že skupiny s vysokou a strednou dávkou CPhG môžu významne zvýšiť obsah IL-2 u myší, čo naznačuje, že CPhG môžu zvýšiť imunitu myší s nádorom H22 Schopnosť pomôcť telu zabíjať nádorové bunky.

TNF- je jedným z biologicky aktívnych faktorov s najsilnejším priamym protinádorovým účinkom, ktorý bol doteraz zistený." 7-81. TNF indukuje apoptózu nádorových buniek, zvyšuje imunitnú funkciu hostiteľa a pôsobí na vaskulárne endotelové bunky nádoru väzbou na receptory. Cievna dysfunkcia vedie k nádorovému krvácaniu a nekróze, ktorá má protinádorový účinok“91, ale TNF- vykazuje dualitu v nádoroch, čo môže spôsobiť nádorovú nekrózu a podporovať rast nádoru.“ TNF- v normálnych organizmoch Nízka koncentrácia má účinky inhibícia proliferácie nádorových buniek, podpora tvorby krvných ciev nádorových buniek a trombóza spôsobujúca krvácanie a nekrózu a posilnenie protinádorovej imunitnej funkcie tela.TNF je zároveň endogénny faktor podporujúci nádor a je produkovaný samotnými nádorovými bunkami. TNF- môže stimulovať rast nádorových buniek a inhibovať toxický účinok imunitných efektorových buniek na nádorové bunky, preto biologický účinok TNF- úzko súvisí s jeho hladinou v organizme. Zistilo sa, že v porovnaní s normálnou skupinou sa v modelovej skupine významne zvýšil TNF-, čo je v súlade so zvýšením nádorového TNF-. Hladina TNF- u myší v každej dávkovej skupine CPhG sa významne znížila, čo naznačuje, že CPhG môžu inhibovať abnormálne zvýšenie TNF- v sére myší s nádorom H22, inhibovať výskyt nádorov.

Za normálnych okolností AFP pochádza hlavne z embryonálnych pečeňových buniek. AFP zmizne z krvi asi dva týždne po narodení. Preto je obsah AFP v sére normálnych dospelých menej ako 20 gg/ml. dvadsaťjeden. U dospelých môže byť AFP zvýšený v sére približne o 80 percentrakovina pečenepacienti31. Keď sa ľudské pečeňové bunky stanú rakovinovými, obnovia funkciu produkcie proteínu AFP a ako sa ochorenie zhorší, prudko sa zvýši aj jeho obsah v sére. Ako špecifický klinický indikátor na diagnostiku primárnychrakovina pečene, koncentrácia AFP v sére zvyčajne pozitívne koreluje s veľkosťourakovina pečene1. Výsledky tohto experimentu ukazujú, že skupiny s vysokou a strednou dávkou CPhG môžu významne znížiť obsah AFP u myší, čo naznačuje, že CPhG môžu inhibovať expresiu AFP v sére myší s nádorom H22 a inhibovať rast nádoru.

Farbenie HE ukazuje, že v porovnaní s modelovou skupinou môžu CPhG významne podporovať apoptózu nádorových buniek, inhibovať rast nádorových buniek, znižovať heterogenitu nádorových buniek a sú sprevádzané veľkým počtom bunkových nekróz. Spomedzi nich sa CPhG v rôznych dávkových skupinách zvyšuje s dávkou So zvyšujúcou sa nekrotickou oblasťou nádorových buniek sa tiež zväčšuje a skupina s vysokou dávkou CPhG a skupina s pozitívnou liečbou Ganfule majú značné množstvo nekrózy nádorových buniek, čo naznačuje, že CPhG má dobrý protinádorový účinok na H22rakovina pečenemyši s nádorom.

Stručne povedané, CPhG majú dobréproti rakovine pečeneúčinok, ktorý môže súvisieť s tým, že CPhG znižujú obsah AFP v sére u myší s nádorom a zlepšujú imunitnú schopnosť myší s nádorom. Táto štúdia poskytuje základné údaje pre vývoj novýchproti rakovine pečenelieky používajúce CPhG vCistanche.

Referencie

[1] Peng Fang, Xu Rong, Wang Xia a kol. Pokrok vo výskume v spracovaní a spracovaní liečivých materiálov rodu Mesquite [JI Modern Chinese Medicine, 2015, 17(4): 406-412.

[2] Zhong Yaoxin. Výklad "Shen Nong's Materia Medica" 32[J], Je užitočné otvoriť zväzok (vyhľadať lekársku pomoc),

2015, 35(8): 40-41.

[3] Liu Xiong, Li Chengming, Gao Jiande a kol. Pokrok vo výskume pasty z mäsového popola[J]. China Journal of Traditional Chinese Medicine and Technology, 2013, 20(5): 575-576.

[4] Geng Huijie, Yu Guangen. Vývoj a využitie rastlín rodu Sargassum [J]. Tianjin Science and Technology, 2012, 21 (4): 66-68.

[5] You Shuping, Zhao Jun, Ma Long a kol. Účinok a mechanizmus etanolového extraktu pasty z mäsového popola na imunitnú fibrózu pečene u potkanov [J]. Čínsky žurnál farmakológie a toxikológie,

2016, 30(5): 504-510.

[6] Mu Ke Remu • Di Mai Ti, You Shu Ping, Zhao Jun a kol. Experimentálna štúdia o účinkuFenyletanoidové glykozidyoxím z popola z mäsa na BSA-indukovanú fibrózu pečene u potkanov[J]. Journal of Xinjiang Medical University, 2015, 38(5): 567-570.

[7] You Shuping, Zhao Jun, Mu Keremu•Di Mai Ti, a kol. Účinky fenyletanoidu Roucong Rong na expresiu transformujúceho rastového faktora|31 u potkanov s fibrózou pečene indukovanou BSA [JL Cancer Transformation. Distortion•Mutation, 2015, 27(6): 409-414.

[8] You Shuping, Zhao Jun, Ma Long a kol. Účinok fenetylalkoholu pyré z celkového mäsového popola na expresiu signálnej dráhy TGF-01/Smad v stelátových pečeňových bunkách potkanov[J]. Karcinogenéza. Skreslenie a mutácia, 2016, 28(5): 372-376.

[9] Zhang Jianwu, Pu Qigong, Chen Doujia a kol. Štúdia účinku komplexu aspirín-nikotínamid-zinok u myší s H22rakovina pečene［J］. Sichuan Journal of Physiological Sciences, 2012, 34(4): 148-149.

[10] Shen Julio. Protinádorový účinok Kuiling Huajijian na myšie bunky hepatokarcinómu H22 a jeho vplyv na expresiu C-my a nm23-Hl [D]. Dalian: Dalian Medical University, 2013: 8-9.

[11] Hao Mingzhi, Chen Wujin, Lin Hailan a kol. Pozorovanie klinickej účinnosti embolizačnej chemoterapie hepatálnej artérie kombinovanej s kapsulou Ganfule pri liečbe pokročilýchrakovina pečene［J］. Zhongnan Pharmaceutical, 2013, 11⑵: 147-150.

[12] Guo Shengqi, Huang Tingzhang, Li Yuanhui a kol. Štúdia o protinádorovom účinku vodných extraktov zo stoniek jazmínu na myšiach nesúcich nádor H22]. Chinese Journal of Clinical Pharmacology, 2015, 31(10): 855-857.

[13] Zhang Wenjuan, Jiang Weizhe, Lan Xianli a kol. Štúdia protinádorového mechanizmu extraktu hmyzu Wu Gu na H22rakovina pečenemyši s bunkovým nádorom]. Guangxi Medicine, 2017, 39(2): 215-219.

[14] Ye Shenglong. Nový pokrok v oblastirakovina pečenev roku 2013［J］. Chinese Journal of Hepatology, 2014, 22(1): 2-4.

[15] Liu Xiaorui, Wang Jian. Pokrok v klinickej aplikácii zabíjačských buniek vyvolaných cytokínmi proti nádorom［J］. Guangdong Medicine, 2016, 37(18): 2840-2843.

[16] Pieseň Haojie. Nízkodávková chemoterapia kombinovaná s geneticky modifikovanou vakcínou proti dendritickým bunkám na liečbu pečene

Experimentálny výskum rakoviny［D］. Guangzhou: Southern Medical University, 2012.

[17] Zuo Shaoyuan, Qian Jintao, Fang Shuhuan a kol. Protinádorová aktivita polysacharidu včelieho peľu ［J］. Frontier of Medicine, 2014, 4(1): 42-43.

[18] Ni Yang. Účinok polysacharidu Lithospermum na imunitné orgány a cytokíny TNF-a a IFN-y u myší s nádorom S180［J］. Heilongjiang Medicine, 2014, 27(3): 512-514.

[19] Gu Cuiping, Zhang Yiping. Nové pokroky v protinádorovom mechanizme TNF-a [J]. Čínsky nádor, 2007, 16⑵: 102-105.

[20] Zhu Bo, Zhang Wei, Chen Yanhua a kol. Aplikácia tumor-špecifického rastového faktora a tumor nekrotizujúceho faktora v diagnostike a prognózerakovina pečene［J］. Moderná onkologická medicína, 2008, 16(5): 765-766.

[21] Lin Yu. Predbežná štúdia o anti-hepatokarcinómovom účinku a mechanizme pavúkov zapáchajúcich drog [D]. Chengdu: Juhozápadná univerzita Jiaotong, 2015.

[22] Wang Shimo, Hu Yonghao, Li Qiang a kol. Korelačná analýza medzi hladinou AFP a prognózou pacientov s primárnou operáciou hepatocelulárneho karcinómu［J］. Chinese Journal of Hepatobiliary Surgery, 2017, 23(2): 134-136.

[23] Pieseň Wei. Klinický význam kombinovanej detekcie sérových AFP, AFU, GP73 a IL-8 v diagnostike primárnychrakovina pečene[J] Chinese Journal of Clinicians (elektronické vydanie), 2016, 10(9): 1266-1270.

[24] Guan Yu, Yu Xinfa, Zhou Chengyu a kol. Klinická hodnota alfa-fetoproteínu v diagnostike a prognóze primárnychrakovina pečene［J］. Hainan Medicine, 2016, 27(6): 891 894.

RANKL a ich vplyv na ochorenia kostí[J]. Prog Mod Biomed, 2010, 10(20): 3963-3966.

[14]FRANCESCHI RT, XIAO G. Regulácia transkripčného faktora špecifického pre osteoblasty, Runx2: citlivosť na viaceré dráhy prenosu signálu[J]. J Cell Biochem, 2003, 88(3): 446-454.

[15]FRANCESCHI RT, XIAO G. Regulácia transkripčného faktora špecifického pre osteoblasty, Runx2: citlivosť na viaceré dráhy prenosu signálu[J]. J Cell Biochem, 2003, 88(3): 446-454.

[16]GUICHEUX J, LEMONNIER J, GHAYOR C, a kol. Aktivácia p38 mitogénom aktivovanej proteínkinázy a c-Jun-NH2-terminálnej kinázy pomocou BMP-2 a ich implikácia pri stimulácii diferenciácie osteoblastických buniek^]. J Bone Mineral Res, 2003, 18 (11): 2060.

[17]GE C, CAWTHORN WP, LI Y, a kol. Recipročná kontrola osteogénnej a adipogénnej diferenciácie fosforyláciou ERK/MAP kinázy transkripčných faktorov Runx2 a PPARgamma[J]. J Cell Physiol, 2016, 231(3): 587 -596.

[18]GE C, XIAO G, JIANG D a kol. Identifikácia a funkčná charakterizácia fosforylačných miest ERK/MAPK v transkripčnom faktore Runx2[J]- J Biol Chem, 2009, 284(47): 32533-32543.

[19]GREENBLATT MB, Shim JH, GLIMCHER L H. Mitogénom aktivované proteínkinázové dráhy v osteoblastoch[J]. Annual Rev Cell Dev Biol, 2013, 29 (1): 63.

[20] Li Feng, Liu Wenfeng, Liu Rushi a kol. Malondialdehyd inhibuje osteogénnu diferenciáciu mezenchymálnych kmeňových buniek aktiváciou dráh p38 a JNK[J]. Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology, 2012, 28(9): 804-810.

[21]ZHANG G M. Ubikvitín ligáza Smurfl riadi aktivitu osteoblastov a homeostázu kostí zameraním na degradáciu MEKK2^]. Cell, 2005, 121(1): 101-113.