Apocynín zlepšuje poškodenie semenníkov vyvolané glutamátom sodným zhoršenou bariérou krvného semenníka a parametrami oxidačného stresuⅠ

Abstrakt:

Východiská: Cieľom tejto štúdie bolo preskúmať účinky apocynínu (APO) na hladiny hormónov, bariéru medzi krvou a semenníkmi a oxidačné biomarkery pri degenerácii semenníkov vyvolanej glutamátom sodným (MSG). Metódy: Samce potkanov Sprague Dawley (150–200 g; n=32) boli náhodne rozdelené do štyroch skupín: kontrola, APO, MSG a MSG plus APO. Skupinám MSG a MSG plus APO sa podával MSG (120 mg/kg) počas 28 dní.

Kliknite pre cistanche herba pre testosterón

Okrem toho skupiny APO a MSG plus APO dostávali APO (25 mg/kg) počas posledných piatich dní experimentu. Všetky podania boli cez orálnu sondu. Nakoniec boli vykonané biochemické analýzy založené na stanovení testosterónu, folikuly stimulujúceho hormónu (FSH), luteinizačného hormónu (LH), malondialdehydu (MDA), glutatiónu (GSH) a superoxiddismutázy (SOD), ako aj svetla a prenosu hodnotili sa elektrónové mikroskopické vyšetrenia, hodnotenie parametrov spermií, ZO-1, okludín, NOX-2 a imunohistochémia TUNEL.

Výsledky: MSG zvýšilo hladinu oxidačného stresu aj apoptózu, znížilo bunkovú proliferáciu a spôsobilo degeneráciu morfológie semenníkov vrátane krvno-testesnej bariéry. Podávanie apocynínu zvrátilo všetky zhoršené morfologické a biochemické parametre v skupine MSG plus APO. Závery: apocynín sa považuje za prevenciu testikulárnej degenerácie udržiavaním integrity bariéry medzi krvou a semenníkmi s vyváženými hladinami hormónov a oxidantov/antioxidantov.

Kľúčové slová: glutaman sodný; apocynín; NOX-2; krvná bariéra semenníkov; ultraštruktúra

1. Úvod

Široko používaná kyselina L-glutámová ako prísada sa prirodzene vyskytuje v rôznych potravinách a je zdrojom zvýrazňovača chuti, glutamanu sodného (MSG) [1]. Mnohé spracované potraviny obsahujú MSG ako prísadu, pričom priemerný denný príjem v európskych priemyselných krajinách je 0,3 až 1.0 g. [2]. Aj keď je konzumácia MSG organizáciami pre bezpečnosť potravín považovaná za bezpečnú, v niekoľkých predklinických a klinických štúdiách je stále spochybňovaná, najmä jej dlhodobá expozícia. Medzi fyziologické funkcie glutamátu patrí jeho neurotransmiterová vlastnosť v centrálnom nervovom systéme ako prekurzor metabolitov, ako je glutatión [1].

Ukázalo sa, že dlhodobá konzumácia MSG má negatívne účinky na mužský reprodukčný systém. Štúdie ukázali, že dlhodobá konzumácia MSG znižuje počet spermií u mužov a ovplyvňuje morfologickú štruktúru spermií a semenníkov [3]. Väčšina predtým citovaných výskumov sa primárne zamerala na toxicitu MSG u potkanov v dávkach 2 000 – 8 000 mg/kg telesnej hmotnosti, čo je pre ľudí na tejto úrovni mimoriadne nepravdepodobné [4].

Alometrická konverzia podľa Shina a kol. [5] preukázali, že táto dávka je ekvivalentná 120 mg/kg telesnej hmotnosti u potkanov. V reprodukčných orgánoch a spermiách je značný počet glutamátových receptorov, čo ich robí náchylnými na excitačné poškodenie z prebytku glutamátu v tele. To robí z reprodukčného systému častým cieľom poškodenia spôsobeného glutamátom. Okrem toho je známe, že toxicita glutamátu priamo poškodzuje os hypotalamus-hypofýza-gonáda, čo vedie k homeostatickej nerovnováhe v reprodukcii [6].

MSG má za následok oxidačné poškodenie (zvýšená peroxidácia lipidov a znížená aktivita antioxidačných enzýmov) a spermatogénne zmeny prejavujúce sa nízkym počtom spermií a morfologickými abnormalitami [3]. Preto sme študovali účinky perorálnej konzumácie MSG na potkanoch, keď požili miernu dávku extrapolovanú priamo z denného príjmu u ľudí. Tento účinok dávky MSG na morfológiu semenníkov potkana bol tiež pozorovaný v experimentálnych štúdiách [3,7].

Nadprodukcia reaktívnych foriem kyslíka (ROS) spúšťa oxidačný stres a apoptózu. Vďaka svojim reaktívnym štruktúram môžu voľné radikály interagovať s lipidmi, nukleovými kyselinami a proteínmi a mať škodlivé účinky na telo [8]. Je známe, že oxidačný stres vyvolaný ROS hrá dôležitú úlohu pri mužskej neplodnosti [9]. Štúdie ukázali, že NADPH oxidáza (NOX) je jedným z hlavných zdrojov ROS [10]. Nadmerné ROS a oxidačný stres v mužskom reprodukčnom systéme spôsobujú negatívne zmeny v koncentrácii, pohyblivosti a morfológii spermií. Degenerované spermie a zhoršené parametre spermií vedú k neplodnosti [11]. ROS spôsobuje mužskú neplodnosť v dôsledku poškodenia DNA v spermiách [12]. Oxidačný stres narušuje integritu plazmatickej membrány spermií a vyvoláva skorú kapacitu.

V dôsledku toho klesá schopnosť spermií oplodniť a dochádza k neplodnosti [13]. Apocynín (APO), extrahovaný z koreňov rastliny Apocynum cannabinum, je známy ako účinný inhibítor NOX [14]. Protizápalový účinok APO bol preukázaný v mnohých experimentálnych štúdiách [15]. K aktivácii NOX dochádza migráciou cytosolických zložiek do bunkovej membrány [16,17]. APO pôsobí ako selektívny inhibítor produkcie ROS pôsobením na aktivitu NOX v aktívnych ľudských neutrofiloch.

APO však neovplyvňuje fagocytózu ani iné mechanizmy intracelulárnej smrti [18,19]. Izoformy NOX sú exprimované v rôznych bunkách a majú rôzne fyziologické funkcie. NOX-2 je izoforma NOX, ktorá je prítomná v eozinofiloch, makrofágoch a neutrofiloch [20]. Spermatogénne bunky sú spojené a Sertoliho bunky. Tento dynamický vzťah je regulovaný tesnými spojmi a medzerovými spojmi [21]. Tesné spojenia medzi Sertoliho bunkami sú dôležité pre tvorbu a funkciu krvnej semenníkovej bariéry (BTB).

Štruktúra BTB zahŕňa tesné spojenia, desmozómy, bazálne ektoplazmatické špecializácie a medzerové spojenia. Tesné spojenia epitelového pôvodu sú multimolekulové membránové špecializácie, ktoré obsahujú viaceré integrálne membránové proteíny, ako sú zonula ocludens{0}} (ZO-1) a okludín [21]. Okludíny sú jednou z molekúl, ktoré prispievajú k tvorbe tesných spojení. Proteíny zonula occludens, ako napríklad zonula occludens-1 (ZO-1), ZO-2 a ZO-3, sú dôležité proteíny zahrnuté v tejto štruktúre. Okludín, ZO-1 a ZO-3 interagujú s aktínovým cytoskeletom. Proteín ZO-3 je spojený s cytoplazmatickými doménami ZO-1 a okludínom [22].

Oxidačný stres vzniká vtedy, keď nie je dostatok antioxidantov proti voľným radikálom. Zníženie aktivity antioxidačných enzýmov, ako sú hladiny superoxiddismutázy (SOD) a glutatiónu (GSH), vedie k zvýšeniu oxidačného poškodenia [23]. Malondialdehyd (MDA), parameter poškodenia bunkovej membrány, indikuje hustotu útoku kyslíkových radikálov v reaktívnych bunkách a metabolizmus voľných radikálov in vivo. Znížená SOD a zvýšená MDA spúšťajú oxidačný stres a spôsobujú poškodenie buniek, čo vedie k bunkovej smrti [24]. Štúdie uviedli NOX-2 ako zdroj ROS [20,25]. APO, silný inhibítor NOX-2 [26], by mohol byť účinný pri inhibícii NOX-2, aby sa zabránilo poškodeniu tkaniva v dôsledku oxidačného stresu.

Podávanie APO by mohlo mať liečebný účinok na parametre oxidačného stresu a histopatologické poškodenie. Cieľom tejto štúdie bolo vyhodnotiť účinky MSG na poškodenie tkaniva semenníkov, bunkovú proliferáciu, apoptózu a oxidačný stres indikovaný expresiou NOX-2 a na hematotetikulárnu bariéru. Okrem toho sa štúdia zamerala na skúmanie, či apocynín môže zlepšiť účinky na všetky tieto parametre.

2. Materiály a metódy

2.1. Experimentálny dizajn

Táto experimentálna štúdia bola schválená etickou komisiou Acibadem Mehmet Ali Aydinlar University Experimental Animals (ACU-HADYEK, číslo schválenia: HDK2020/39). V tejto štúdii boli 8-týždňové samce potkanov Sprague Dawley (n=32) držané v klietkach s teplotou 22 ± 2 ◦C a štandardným svetlom/tmou (12:12 h) cyklu. Potkany boli kŕmené štandardnou potravou pre zvieratá ad libitum počas 28 dní experimentálneho obdobia. Tento výskum bol vykonaný podľa smerníc a nariadení ARRIVE (Animal Research: Reporting of In Vivo Experiments). V tejto štúdii sa samce potkanov Sprague Dawley (n=8 v každej skupine) náhodne rozdelili do 4 kontrolných skupín, APO, MSG a MSG plus APO. Kontrolnej skupine potkanov sa podávala destilovaná voda (1 ml) orálnou sondou počas 28 dní. Skupinám MSG a MSG plus APO sa podávalo 120 mg/kg MSG orálnou sondou počas 28 po sebe nasledujúcich dní [4]. Skupinám APO a MSG plus APO sa podávalo 25 mg/kg APO orálnou sondou v posledných 5 dňoch experimentu [27]. Hmotnosti potkanov v experimentálnych skupinách sa analyzovali týždenne. Po anestézii izofluránom sa potkany usmrtili. Vzorky krvi, ako aj vzorky tkaniva semenníkov a epididymis sa použili na biochemické a mikroskopické hodnotenia.

2.2. Meranie sérových koncentrácií testosterónu, FSH a LH

Koncentrácie testosterónu, folikuly stimulujúceho hormónu (FSH) a luteinizačného hormónu (LH) v sére sa merali pomocou súprav ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay). Krysí testosterón (katalógové číslo: EA0023Ra, ELISA kit Bioassay Technology Laboratory), potkaní FSH (katalógové číslo: EA0015Ra, Bioassay Technology Laboratory, Shanghai, Čína) a potkaní LH ELISA (katalógové číslo: EA0013Ra, Bioassay Technology Laboratory) analýza hladín hormónov podľa postupu súpravy. Výsledky testosterónu boli uvedené ako nmol/l a FSH a LH boli uvedené ako mIU/l

2.3. Meranie testikulárnych hladín MDA, GSH a SOD

Hladiny MDA boli stanovené pomocou komerčnej súpravy (E-BC-K025-M, Elabscience, Houston, TX, USA). MDA, jeden z degradačných produktov peroxidácie lipidov, reaguje s kyselinou tiobarbiturovou (TBA) za vzniku ružového komplexu s absorpčným maximom 532 nm. Hladiny MDA v tkanive boli vypočítané v nmol/g. Analýza GSH v testikulárnom tkanive bola vykonaná podľa Beutlerovho spôsobu [28]. Princíp metódy je založený na skutočnosti, že GSH v analytickej skúmavke reaguje s 5,50 -ditiobis-2-nitrobenzoovou kyselinou (DTNB) za vzniku žltkastej farby. Intenzita svetla tejto farby bola odčítaná na spektrofotometri pri vlnovej dĺžke 410 nm. Tkanivové homogenáty sa odstredili a k ​​získanému supernatantu sa pridal 10 percentný roztok TCA, premiešal sa a znova sa odstredil, aby sa vyzrážali proteíny. Jasne sfarbené supernatanty sa použili na analýzu GSH. Intenzita farby vytvorenej vo vzorkách udržiavaných pri teplote miestnosti počas 5 minút sa odčítala pri 410 nm na spektrofotometri a hladiny GSH v umol/g v tkanive sa stanovili pomocou glutatiónovej štandardnej krivky. Aktivita SOD bola stanovená pomocou súpravy Sigma SOD Determination Kit (E-BC-K019-M, Elabscience, Houston, TX, USA). Hodnoty absorbancie sa odčítali pri 450 nm po inkubácii aktivity SOD s roztokom pracujúcim s enzýmami. Hladiny SOD v tkanive boli vypočítané v IU/g

2.4. Počet, motilita a morfológia spermií

Vzorky epididymálneho tkaniva od potkanov sa umiestnili do roztoku Earle's Balanced Salts s roztokom Hepes pufra a spracovali sa na analýzu počtu spermií, motility a morfológie na základe predchádzajúcej štúdie [27]. V stručnosti, vzorky tkaniva nadsemenníka potkanov sa preniesli do roztoku Earle's Balanced Salts s roztokom Hepes pufra pridaným po disekcii. Na vyhodnotenie spermií bola použitá rutinná metóda hustotného gradientu. Supernatant sa odstránil a peleta sa zriedila premývacím médiom pre spermie (SAGE, Newcastle upon Tyne, UK) a odstredila sa. Potom sa peleta zriedila médiom na prípravu spermií (SAGE, UK). 10 um peleta sa použila na počítanie spermií v Maclerovej počítacej komore (Sefi cut out Medical Instruments, Haifa, Izrael) s fotomikroskopom na ich počítanie. Na morfologické vyhodnotenie boli pripravené nátery a potom zafarbené pomocou súpravy Diff-Quick (Medion Diagnostics, Grafelfing, Mníchov, Nemecko). Na každom sklíčku bolo vyšetrených 100 spermií pri 100-násobnom zväčšení fotomikroskopom (Zeiss A1 Axio Scope, Oberkochen, Nemecko), aby sa vyhodnotila morfológia spermií.

2.5. Spracovanie tkaniva pre svetelnú mikroskopiu

Testikulárne tkanivá boli fixované Bouinovým roztokom na rutinné histologické vyšetrenia. Na imunohistochemické vyšetrenia boli testikulárne tkanivá fixované 4 percentným roztokom paraformaldehydu (PFA). Po fixácii sa tkanivá podrobili rutinnej procedúre zaliatia do parafínu [29]. Farbenie hematoxylínom a eozínom (H&E) sa aplikovalo na rezy na rutinné histologické vyhodnotenie. Na odhalenie štruktúry bazálnych membrán semenných tubulov sa použila reakcia kyseliny jodistej-Schiff (PAS). Semenné tubuly v rezoch semenníkov zafarbených H&E boli hodnotené na základe modifikovaných Johnsenových histopatologických skórovacích parametrov [30,31]. Okrem toho sa merali hrúbky epitelu 100 semenných tubulov vo všetkých rezoch pomocou programu Image J (softvér Image J, National Institutes of Health).

2.6. Terminálna deoxynukleotidyltransferáza dUTP Nick End Labeling (TUNEL) Imunochémia

Terminálna deoxynukleotidyltransferáza dUTP značenie nick end label (TUNEL) bola aplikovaná na rezy tkaniva semenníkov podľa návodu na použitie súpravy od výrobcu (ApopTag Plus, In situ Apoptosis Detection Kit, S7101, Merck Millipore, Darmstadt, Nemecko). Stručne povedané, po deparafinizácii a rehydratácii boli rezy premyté v PBS a potom zahrievané v mikrovlnnej rúre v citrátovom pufri. Po ochladení sa na tkanivové rezy nakvapkala proteináza K (20 ug/ml). Rezy sa premyli v destilovanej vode a namočili do 3% roztoku pripraveného peroxidom vodíka. Po premytí v PBS sa na rezy umiestnilo 10 ul stabilizačného tampónu na 30 minút pri teplote miestnosti. Potom bolo kvapkaných 10 ul Tdt enzýmu a rezy boli inkubované počas 1 hodiny pri 37 °C. Premývací pufor sa kvapkal 10 minút pri teplote miestnosti. Po premytí PBS bolo na rezy nakvapkané 13 ul anti-digoxigenínu. Po inkubácii pri teplote miestnosti počas 30 minút sa rezy premyli 4-krát počas 2 minút v PBS. Potom bolo prikvapkaných 13 ul roztoku 3,3'-diaminobenzidínu (DAB). Potom boli rezy pretrepané destilovanou vodou. Na kontrastné farbenie boli rezy namočené v Mayerovom hematoxylínovom roztoku (JT Baker, Centre Valley, PA, USA). Po umytí v destilovanej vode boli sekcie namontované s taliančinou. Rezy boli zobrazené svetelným mikroskopom (Zeiss A1 Axio Scope, Oberkochen, Nemecko). Apoptotický index sa odhadol vydelením celkového počtu testikulárnych tubulov počtom semenných tubulov s 3 alebo viacerými TUNEL-pozitívnymi bunkami [32].

2.7. Imunohistochémia proliferujúceho bunkového jadrového antigénu (PCNA).

Rezy sa podrobili PCNA imunohistochémii na stanovenie počtu proliferatívnych buniek a indexu proliferácie. Po deparafinizácii a rehydratácii boli rezy spracované na imunohistochémiu PCNA, ako je opísané v predchádzajúcej štúdii [32]. Stručne povedané, rezy boli uložené v 3% roztoku peroxidu vodíka (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) počas 20 minút. Rezy sa zahrievali v mikrovlnnej rúre pri 200 W v tlmivom roztoku kyseliny etyléndiamíntetraoctovej (EDTA) (Sigma-Aldrich, USA) počas 20 minút. Po trojnásobnom premytí PBS boli rezy namočené v 5-percentnom roztoku blokujúcom kozie sérum (Invitrogen, Waltham, MA, USA) počas 10 minút. Potom sa aplikovala primárna králičia anti-PCNA protilátka (katalógové číslo: SY12-07, Novus Biologicals, Littleton, CO, USA) (1:50). Rezy sa uchovávali vo zvlhčenej komore pri 4 °C cez noc a premyli sa 3-krát PBS vždy 5 minút. Biotínom značená kozia anti-králičia sekundárna protilátka (katalógové číslo: A16100, Invitrogen, Waltham, MA, USA) (1:500) bola nakvapkaná na rezy a udržiavaná pri 37 °C počas 30 minút. Do rezov bola nakvapkaná streptavidínperoxidáza (Invitrogen, Waltham, MA, USA) a ponechaná 10 minút. Po 3-krát premytí PBS boli rezy namočené v 3,30 -diaminobenzidín (DAB) chromogéne (1 ml DAB substrátu plus 30 ul DAB chromogénu) počas 5 minút. Po premytí destilovanou vodou boli rezy zafarbené Mayerovým hematoxylínovým roztokom na kontrastné farbenie. Rezy boli potom pripevnené Kaiserovou glycerolovou želatínou (katalógové číslo: 1.09242, Sigma-Aldrich, Darmstadt, Nemecko). Rezy sa skúmali pod svetelným mikroskopom (A1 Axio Scope, Oberkochen, Zeiss, Nemecko). Na stanovenie indexu proliferácie sa počet PCNA-pozitívnych buniek v 20 tubuloch v každej sekcii vydelil celkovým počtom buniek [32].

2.8. Imunohistochémia ZO-1 a okludínu

Tkanivové rezy fixované 4 percentami PFA boli zbavené parafínu a rehydratované alkoholovými roztokmi. Rezy sa potom namočili do 3 percentného roztoku peroxidu vodíka (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) na 20 minút, aby sa zablokovali endogénne enzýmy. Po premytí PBS sa rezy zahrievali v mikrovlnke pri 200 W v EDTA pufri (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA). Rezy boli ochladené počas 30 minút pri teplote miestnosti a uložené 3-krát po dobu 5 minút v PBS, po čom nasledovalo 10 minút v 10 percentnom pufrovanom kozom sére (Invitrogen, USA). Rezy boli ošetrené králičím anti-ZO-1 (katalógové číslo: 61-7300, Invitrogen, Waltham, MA, USA) a králičím antiokludínom (1:100) (katalógové číslo: {{18} }, Invitrogen, Waltham, MA, USA) protilátky (cez noc, pri plus 4 ◦C). Po 3-krát premytí v PBS počas 5 minút sa na rezy nakvapkala biotínom značená antikráličia sekundárna protilátka (katalógové číslo: 65-6140, Invitrogen, Waltham, MA, USA) (1:1000). Po namočení v PBS 3-krát a 5 minútach sa na rezy aplikovala streptavidín-peroxidáza (Invitrogen, Waltham, MA, USA). Po premytí v PBS bol nakvapkaný AEC Single/Plus Chromogen (Abcam, Cambridge, UK) a rezy boli pretrepané destilovanou vodou a pripevnené Kaiserovou glycerolovou želatínou (katalógové číslo: 1.09242, Sigma-Aldrich, Darmstadt, Nemecko). Rezy boli zobrazené pomocou svetelného mikroskopu (A1 Axio Scope, Oberkochen, Zeiss, Nemecko). Intenzita imunoreaktivity ZO-1 aj okludínu bola vypočítaná pomocou programu Image J (softvér 1,44, National Institutes of Health).

2.9. Imunofluorescenčná analýza ZO-1, okludínu a NOX{3}}

Rezy sa uchovávali v 3% peroxidu vodíka a premyli sa PBS. Potom boli rezy inkubované s králičím anti-ZO-1(1:100) ZO-1(katalógové číslo: 61-7300, Invitrogen, Waltham, MA, USA), králičím anti okludínom (1 :100) (Katalógové číslo: 71-1500, Invitrogen, USA) a králičie anti-NOX{11}} primárne protilátky (1:100) (Katalógové číslo: NBP2-41291, Novus, BioTechne, Minnesota, USA). Sklíčka sa premyli PBS a potom sa inkubovali s kozou antikráličou sekundárnou protilátkou značenou AF 488 (katalógové číslo: ab150077, Abcam, USA) (1:1000). Potom, čo boli rezy naposledy premyté PBS, boli pripevnené roztokom 406-diamino-2-fenylidolu (DAPI) (katalógové číslo: ab104139, Abcam, Boston, MA, USA). Rezy sa zobrazili fluorescenčným mikroskopom (mikroskop Zeiss Axio Scope.A1 s fluorescenčným nástavcom kamerou Zeiss AxioCam MRc 5). Intenzita fluorescencie vo fotografovaných rezoch bola vypočítaná pomocou programu Image J (softvér Image J, National Institutes of Health).

2.10. Spracovanie tkaniva pre transmisnú elektrónovú mikroskopiu

Vzorky tkaniva semenníkov boli fixované pufrovaným 2,5 % roztokom glutaraldehydu (v 0,1 M PBS, pH 7,2) a spracované na rutinnú transmisnú elektrónovú mikroskopickú prípravu podľa predtým publikovaného protokolu [32]. Rezy sa analyzovali pod transmisným elektrónovým mikroskopom (TALOS L 120 C, Thermo Scientific Fisher, Eindhoven, Holandsko).

2.11. Štatistická analýza

Údaje boli analyzované pomocou jednosmernej ANOVA a Tukeyho viacnásobných porovnávacích testov s p < 0.05 považované za významné. Štatistická analýza sa uskutočnila s použitím Graph Pad Prism 8.0 (San Diego, CA, USA).

Ako Cistanche zvyšuje testosterón?

Cistanche je bylina tradične používaná v čínskej medicíne na zvýšenie energie, libida a celkovej vitality. Predpokladá sa, že Cistanche môže zvýšiť hladiny testosterónu inhibíciou aktivity enzýmu nazývaného aromatáza, ktorý premieňa testosterón na estrogén. Zistilo sa tiež, že Cistanche zvyšuje produkciu luteinizačného hormónu (LH) v tele. LH hrá kľúčovú úlohu pri regulácii produkcie testosterónu v semenníkoch. Zvýšením hladín LH môže Cistanche nepriamo zvýšiť produkciu testosterónu. Okrem toho obsahuje Cistanche aj niekoľko fytochemikálií, ako je echinakozid a akteozid, ktoré majú antioxidačné vlastnosti. Tieto zlúčeniny môžu pomôcť chrániť semenníky a iné reprodukčné orgány pred oxidačným poškodením, čím zlepšujú ich funkciu a zvyšujú produkciu testosterónu. Celkovo nie sú presné mechanizmy, ktorými Cistanche zvyšuje hladiny testosterónu, úplne pochopené, ale pravdepodobne ide o súhru inhibície aromatázy, zvýšenia produkcie LH a poskytovania antioxidačnej podpory reprodukčnému systému.

Pokračovanie nabudúce...

Merve Acikel-Elmas 1,*, Salva Asma Algilani 1, Begum Sahin 1, Ozlem Bingol Ozakpinar 2, Mert Gecim 2, Kutay Koroglu 3 a Serap Arbak 1

1 Ústav histológie a embryológie, Lekárska fakulta, Univerzita Acibadema Mehmeta Aliho Aydinlara, Icerenkoy Mah., Kayisdagi Cad. č. 32, Atasehir, Istanbul 34752, Turecko

2 Katedra biochémie, Farmaceutická fakulta, Univerzita v Marmare, Basibuyuk Yolu, 4/A, Basibuyuk, Istanbul 34854, Turecko

3 Ústav histológie a embryológie, Lekárska fakulta, Univerzita v Marmare, Basibuyuk Yolu č. 9 D:2, Maltepe, Istanbul 34854, Turecko