Apocynín zlepšuje poškodenie semenníkov vyvolané glutamátom sodným zhoršenou bariérou krvného semenníka a parametrami oxidačného stresuⅡ

Výsledky

3.1. Hladiny testosterónu, FSH a LH v sére

Hladiny testosterónu v skupine MSG boli nižšie v porovnaní s kontrolnou skupinou. Hoci skupina MSG plus APO vykazovala zvýšenie hladín testosterónu v porovnaní so skupinou MSG, toto zvýšenie nebolo štatisticky významné (obrázok 1A). Hladina FSH bola vyššia v skupine MSG v porovnaní s kontrolnou skupinou. Hladina FSH v skupine MSG plus APO bola znížená v porovnaní so skupinou MSG (obrázok 1B). Znížené hladiny LH v skupine MSG a zvýšené hladiny LH v skupine MSG plus APO neboli štatisticky významné v porovnaní s experimentálnymi skupinami (obr. 1C).

3.2. Testikulárne hladiny MDA, GSH a SOD

Hladina MDA v tkanivách bola zvýšená v skupine MSG v porovnaní s kontrolnou skupinou. Na druhej strane, pri porovnaní skupiny MSG plus APO so skupinou MSG sa pozoroval významný pokles MDA (obrázok 1D). Hladiny GSH a SOD sa významne znížili v skupine MSG v porovnaní s kontrolnou skupinou a skupinou APO. Významné zvýšenie hladín GSH a SOD bolo zistené v skupine MSG plus APO v porovnaní so skupinou MSG (obrázok 1E, F).

Kliknutím zobrazíte kapsuly cistanche tubulosa na testosterón

3.3. Počet, motilita a morfológia spermií

Normálna morfológia bola pozorovaná vo vzorkách spermií v kontrolnej skupine a APO skupinách (obrázok 2A, B). V skupine MSG sa pozoroval veľký počet spermií s morfologickými abnormalitami (obrázok 2C). V skupine MSG plus APO bolo detegovaných málo abnormálnych spermií, pretože väčšina spermií mala normálnu morfológiu (obrázok 2D).

Počet a motilita spermií boli nižšie v skupine MSG v porovnaní s kontrolnou skupinou a skupinou APO. Tieto parametre sa významne zvýšili v skupine MSG plus APO v porovnaní so skupinou MSG (obrázok 2E, F).

3.4. Pomer hmotnosti semenníkov/telesnej hmotnosti

Hoci sa zistilo, že pomer testikulárnej hmotnosti/telesnej hmotnosti v skupine MSG bol nižší v porovnaní s inými experimentálnymi skupinami, tento pokles nebol štatisticky významný. Medzi experimentálnymi skupinami nebol žiadny štatistický rozdiel v pomere hmotnosť semenníkov/telesná hmotnosť (obrázok 3E).

3.5. Histopatologické výsledky

Svetelné mikroskopické vyšetrenie testikulárneho tkaniva farbením H&E odhalilo normálnu morfológiu semenných tubulov v kontrolnej skupine. (Obrázok 3(A1)). Intaktná morfológia semenníkov bola pozorovaná v skupine APO (obrázok 3 (B1)). V skupine MSG bol germinálny epitel semenných tubulov dezorganizovaný. Vakuoly naznačujúce výrazné poškodenie tkaniva boli detegované v bazálnom kompartmente semenných tubulov (obrázok 3 (C1)). Tieto morfologické poruchy sa prejavili vo výrazne vysokom histopatologickom skóre pre túto skupinu. V skupine MSG plus APO väčšina semenných tubulov odrážala normálnu morfológiu s obmedzeným počtom degenerovaných semenných tubulov (obrázok 3 (D1)).

V porovnaní so skupinou MSG bolo histopatologické skóre významne nízke v kontrolnej skupine a skupine APO. Histopatologické skóre sa významne zvýšilo v skupine MSG a bolo významne znížené v skupine MSG plus APO v porovnaní so skupinou MSG (obrázok 3F). Okrem toho hrúbka semenných tubulov v skupine MSG bola nízka v porovnaní s ostatnými experimentálnymi skupinami. V skupine MSG plus APO došlo k významnému zvýšeniu hrúbky tubulov v porovnaní so skupinou MSG (obrázok 3G). Kontrolná skupina a skupina APO vykazovali silnú PAS pozitivitu (obrázok 3 (A2, B2)) pre bazálne membrány semenných tubulov s pravidelnou morfológiou. Poškodené bazálne membrány semenných tubulov MSG viedli k zníženiu PAS-pozitivity rezov. (Obrázok 3(C2)). PAS-pozitivita skupiny MSG plus APO bola takmer ekvivalentná kontrolnej skupine, s malým počtom narušených semenných tubulov s oddelenými bazálnymi membránami (obrázok 3 (D2)). Morfológie testikulárnych tubulov a tunica albuginea boli normálne v kontrolnej skupine (obrázok 3 (A3)), skupine APO (obrázok 3 (B3)) a skupine MSG plus APO (obrázok 3 (D3)). Avšak v skupine MSG (obrázok 3 (C3)) bolo tukové tkanivo pozorované v tunica albuginea a morfológia tubulárnej strómy bola tiež normálna.

3.6. Výsledky pre PCNA

Veľký počet PCNA-pozitívnych buniek v semenotvornom epiteli, ako tmavohnedé, sa pozoroval v kontrolnej skupine a skupine APO (obrázok 4 (A1, B1)). V skupine MSG bol zaznamenaný pokles počtu PCNA-pozitívnych buniek semenného epitelu (obrázok 4 (C1)). V skupine MSG sú tiež pozorované PCNA-pozitívne spermatogénne bunky v lúmene semenných tubulov. Index proliferácie, najnižší v skupine MSG, bol zvýšený v skupine MSG plus APO v porovnaní so skupinou MSG (obrázok 4E). Skupina MSG plus APO tiež vykazovala zvýšenie PCNA-pozitívnych buniek v semennom epiteli (obrázok 4 (D1)).

3.7. Výsledky pre imunocytochémiu TUNEL

V kontrolnej a APO skupine boli TUNEL-pozitívne bunky nízke (obrázok 4 (A2, B2)). Počet TUNEL-pozitívnych buniek bol vyšší v skupine MSG ako v iných experimentálnych skupinách (obrázok 4 (C2)). TUNEL-pozitívnych buniek bolo menej v skupine MSG plus APO ako v skupine MSG (obrázok 4 (D2)). Apoptotický index bol vyšší v skupine MSG ako v iných experimentálnych skupinách. V skupine MSG plus APO došlo k porovnateľnému zníženiu tohto indexu (obrázok 4F).

3.8. Výsledky pre imunofluorescenciu NOX-2

Slabá imunopozitivita NOX{0}} bola pozorovaná v kontrolnej skupine (obrázok 5A–C) a skupine APO (obrázok 5D–F). Najvyššia imunoreaktivita bola pozorovaná v skupine MSG (obrázok 5G–I), zatiaľ čo pokles bol zistený v skupine MSG plus APO (obrázok 5J–L). Negatívne kontroly NOX-2 imunofluorescenčnej analýzy sú znázornené na obrázku S1.

3.9. Výsledky pre ZO-1 a okludínovú imunohistochémiu

Pozitivita ZO-1 a okludínu bola detegovaná ako tmavočervená farba v bazolaterálnej cytoplazme Sertoliho buniek umiestnených v semennom tubule germinálneho epitelu. Zatiaľ čo intenzity ZO-1 a okludínovej imunoreaktivity boli najvyššie v kontrolnej skupine (obrázok 6A–C, obrázok 7A–C, obrázok 8 (A1, A2) a obrázok 9A, B) a APO skupine (obrázok 6D– F, obrázok 7D–F a obrázok 8 (B1, B2)) a pokles distribúcie imunoreaktivít sa pozoroval v skupine MSG (obrázok 6G–I, obrázok 7G–I a obrázok 8 (C1, C2)). Zvýšenie pozitivity ZO-1 a okludínov bolo pozorované v skupine MSG plus APO v porovnaní so skupinou MSG (obrázok 6J–L, obrázok 7J–L a obrázok 8 (D1, D2)).

3.10. Transmisné elektrónové mikroskopické výsledky

V kontrolnej a APO skupine bola pozorovaná normálna ultraštruktúra semenotvorného tubulárneho zárodočného epitelu s početnými spermiami a Sertoliho bunky prepojené tesnými spojeniami (obrázok 10A). Skupina APO mala podobnú ultraštruktúru ako kontrolná skupina (obrázok 10B). V skupine MSG sa pozorovala vakuolizácia a lipidové kvapôčky v zárodočných epiteliálnych bunkách semenných tubulov, separácie medzi spojmi Sertoli-Sertoliho buniek a poškodenou bazálnou laminou semenných tubulov (obrázok 10C). Ultraštruktúra skupiny MSG plus APO odrážala normálnu organizáciu semenných tubulov s niekoľkými lipidovými kvapôčkami v cytoplazme (obrázok 10D)

Ako Cistanche zvyšuje testosterón?

Cistanche je bylina tradične používaná v čínskej medicíne na zvýšenie energie, libida a celkovej vitality. Predpokladá sa, že Cistanche môže zvýšiť hladiny testosterónu inhibíciou aktivity enzýmu nazývaného aromatáza, ktorý premieňa testosterón na estrogén. Zistilo sa tiež, že Cistanche zvyšuje produkciu luteinizačného hormónu (LH) v tele. LH hrá kľúčovú úlohu pri regulácii produkcie testosterónu v semenníkoch. Zvýšením hladín LH môže Cistanche nepriamo zvýšiť produkciu testosterónu. Okrem toho obsahuje Cistanche aj niekoľko fytochemikálií, ako je echinakozid a akteozid, ktoré majú antioxidačné vlastnosti. Tieto zlúčeniny môžu pomôcť chrániť semenníky a iné reprodukčné orgány pred oxidačným poškodením, čím zlepšujú ich funkciu a zvyšujú produkciu testosterónu. Celkovo nie sú presné mechanizmy, ktorými Cistanche zvyšuje hladiny testosterónu, úplne pochopené, ale pravdepodobne ide o súhru inhibície aromatázy, zvýšenia produkcie LH a poskytovania antioxidačnej podpory reprodukčnému systému.

Pokračovanie nabudúce...

Merve Acikel-Elmas 1,*, Salva Asma Algilani 1, Begum Sahin 1, Ozlem Bingol Ozakpinar 2, Mert Gecim 2, Kutay Koroglu 3 a Serap Arbak 1

1 Ústav histológie a embryológie, Lekárska fakulta, Univerzita Acibadema Mehmeta Aliho Aydinlara, Icerenkoy Mah., Kayisdagi Cad. č. 32, Atasehir, Istanbul 34752, Turecko

2 Katedra biochémie, Farmaceutická fakulta, Univerzita v Marmare, Basibuyuk Yolu, 4/A, Basibuyuk, Istanbul 34854, Turecko

3 Ústav histológie a embryológie, Lekárska fakulta, Univerzita v Marmare, Basibuyuk Yolu č. 9 D:2, Maltepe, Istanbul 34854, Turecko