Boldine, alkaloid z Peumus Boldus Molina, indukuje vazodilatáciu závislú od endotelu v perfundovanej obličke potkana: Zapojenie oxidu dusnatého a Ca2 plus s malou vodivosťou - aktivovaný kanál K plus

Abstraktné

Boldine, 2,9-dihydroxy-1,10-dimetoxyaporfín, je hlavný alkaloid nachádzajúci sa v listoch a kôre Peumus boldus Molina. V posledných rokoch boldín preukázal niekoľko farmakologických vlastností, ktoré prospievajú endoteliálnej funkcii, kontrole krvného tlaku a znižujú poškodenie pri ochoreniach obličiek. Avšak renálne vazodilatačné účinky a mechanizmy zostávajú neznáme. Tu sa použili perfundované obličky potkanov na štúdium schopnosti boldínu vyvolať vazodilatáciu renálnych artérií. Na tento účel boli prípravky ľavej obličky s funkčným endotelom a bez neho kontrahované fenylefrínom a dostali injekcie 10–300 nmol boldínu. (prípravky sa potom perfundovali 15 minút fenylefrínom plus L-NAME, indometacínom, KCl, tetraetylamóniom, glibenklamidom, apamínom, charybdotoxínom alebo iberiotoxínom. V dávkach 30, 100 a 300 nmol boldin vyvolal od dávky a endotelu závislú relaxačný účinok na obličkové cievne riečisko.V prípravkoch bez funkčného endotelu neboli pozorované žiadne vazodilatačné účinky. Zatiaľ čo inhibícia enzýmu cyklooxygenázy pridaním indometacínu nespôsobila žiadnu zmenu vazodilatačného účinku boldínu, neselektívny inhibítor syntázy oxidu dusnatého L -NAME úplne vylúčil vazodilatačný účinok boldínu vo všetkých testovaných dávkach (e Perfúzia s KCl alebo tetraetylamóniom (neselektívny blokátor K plus kanálov) tiež zrušila vazodilatačný účinok boldínu, čo naznačuje účasť K plus kanálov na obličkovom účinku boldinu. (e perfúzia s glibenklamidom (selektívny blokátor K plus kanálov citlivý na ATP), iberiotoxínom (selektívny blokátor aktivovaných K plus kanálov s vysokou vodivosťou Ca2 plus) a charybdotoxínom (selektívny blokátor aktivovaných kanálov K plus s vysokou a strednou vodivosťou ) nemodifikoval vazodilatačný účinok boldínu. Na druhej strane perfúzia apamínom (selektívny blokátor kanálov K plus aktivovaný s malou vodivosťou Ca2 plus) úplne zabránila vazodilatačnému pôsobeniu boldínu vo všetkých testovaných dávkach. Spoločne táto štúdia ukázala renálne vazodilatačné vlastnosti boldínu, účinok závislý od tvorby oxidu dusnatého a otvorenia kanála K plus aktivovaného Ca2 plus s nízkou vodivosťou.

Kliknutím sem získate výhody Cistanche

Úvod

Peumus boldus Molina, ľudovo známy ako „boldo“ alebo „boldo“, je strom patriaci do čeľade Monimiaceae a pôvodom zo stredného a južného Čile, kde sa hojne vyskytuje. Okrem populárneho použitia na liečbu niekoľkých ochorení, všeobecne známych pre poruchy žalúdka a pečene, sú prípravky na báze boldo opísané v niekoľkých oficiálnych farmakognostických textoch, ako sú oficiálne liekopisy v Brazílii, Čile, Nemecku, Portugalsku, Rumunsku, Španielsku a Švajčiarsko [1, 2].

Aktívne zložky Bolda boli opísané v éterických olejoch (ascaridol, cineol, estery, aldehydy, ketóny a uhľovodíky), alkaloidoch (boldin, izoboldin a iné), glykozidoch a iných (flavonoidy, kyselina citrónová, guma, cukry, taníny). minerály, lipidy atď.). (e Kôry sú bohatšie na alkaloidy [3]. Väčšina farmakologických štúdií bolda opisuje aktivity pozorované pre alkaloid boldín, definovaný ako hlavná zložka čaju boldo [4]. (koncentrácia alkaloidov v listoch boldo sa odhaduje na 0.4 percent a koncentrácia tuldínu môže dosiahnuť viac ako 12 percent [5].

Boldine sa skutočne pripisuje široká škála biologických účinkov. Boldine bolo preukázané, že má antioxidačnú aktivitu a protizápalové účinky, a preto sa často skúma pri ochoreniach spojených s oxidačným stresom. Napríklad bol opísaný ochranný účinok boldínu na oxidačné mitochondriálne poškodenie u krýs s cukrovkou vyvolanou streptozotocínom [6] a redukcia oxidačného stresu indukuje jeho gastroprotektívne vlastnosti [7]. Pokiaľ ide o farmakologický účinok na kardiovaskulárny a renálny systém na kontrolu hypertenzie a patológií, ako je diabetes, štúdie preukázali účinok boldínu na zlepšenie endotelovej funkcie u diabetických myší prostredníctvom inhibície vaskulárneho oxidačného stresu a endotelovej dysfunkcie [8]. Štúdie navyše preukázali, že liečba boldínom vykazuje endoteliálne ochranné účinky u spontánne hypertenzných potkanov prostredníctvom inhibície produkcie superoxidu sprostredkovanej NADPH [9]. Boldine zlepšil poškodenie obličiek pri renovaskulárnej hypertenzii vyvolanej Goldblattovým modelom s dvoma obličkami s jedným klipom [10] a preukázal renoprotektívny účinok pri diabete vyvolanom streptozotocínom u potkanov [11].

Napriek širokému používaniu alkaloidu boldínu zostáva jeho mechanizmus účinku na funkciu obličiek nejasný. Vzhľadom na potrebu nových prístupov k liečbe hypertenzie alebo prispievania k renoprotektívnym účinkom proti hypertenzii sa táto štúdia zamerala na skúmanie vazodilatačného účinku boldinu pomocou izolovaného a perfundovaného modelu obličiek potkana na overenie hypotézy, že boldin spôsobuje priamu relaxáciu renálnych artérií. . (Skúmali sa aj mechanizmy zodpovedné za renálne vazodilatačné účinky.

Účinky Cistanche

Materiály a metódy

1. Drogy.

Boldine (čistota väčšia alebo rovná 98 percentám) bol zakúpený od Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). Heparín bol získaný od Crist´alia, (São Paulo, SP, Brazília). Xylazín a ketamín hydrochlorid boli získané od Vetec (Vetec, Duque de Caxias, RJ, Brazília). Acetylcholínchlorid, apamín, charybdotoxín, dextróza, glibenklamid, iberiotoxín, indometacín, tetraetylamóniumchlorid (TEA), metylester Nω-nitro-L-arginínu (L-NAME), fenylefrín, deoxycholát sodný, NaCl, NaHCO3, KCl, CaCl2, KH2P04 a kyselina etyléndiamíntetraoctová (EDTA) boli zakúpené od Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA).

2. Zvieratá.

Samce potkanov Wistar, staré 3 mesiace, boli získané zo zariadenia pre zvieratá Univerzity Vale do Itaja´ı (UNIVALI). (zvieratá boli chované pri kontrolovanej izbovej teplote (22 ± 2 stupne), 12-hodinovom cykle svetlo/tma, s voľným prístupom k vode a potrave. Všetky použité metodiky a postupy boli predložené a schválené Etickou komisiou dňa Použitie UNIVALI na zvieratách, pod autorizačným číslom 022/19p, a dodržiavali všetky odporúčania Národnej kontrolnej rady pre pokusy na zvieratách.

3. Izolácia a perfúzia obličiek potkana.

Aby sa predišlo vzniku zrazenín v obličkovom cievnom riečisku počas procedúry izolácie a perfúzie obličiek, zvieratá boli predtým liečené heparínom (30 UI, intraperitoneálnou cestou), 5 až 10 minútu pred podávanie anestetického činidla. (e Potkany boli potom anestetizované 80 mg/kg ketamínu plus 10 mg/kg xylazínu intraperitoneálnou cestou. Po získaní hlbokej anestézie bola vykonaná laparotómia, ktorá umožnila prístup ku všetkým vnútornostiam zvieraťa. (črevo bolo posunuté na pravú stranu, umožňujúci vizualizáciu ľavej obličky a disekciu brušnej aorty.Pri týchto výkonoch boli vnútornosti, najmä ľavá oblička, udržiavané vlhké chirurgickou gázou namočenou vo fyziologickom soľnom roztoku.Pomocou chirurgickej nite bol podviazaný ľavý močovod , zabránenie prietoku moču a následne aj produkcii moču obličkami. Ďalší chirurgický drôt bol umiestnený do tepny brušnej aorty, medzi pravú a ľavú obličkovú tepnu, aby nasmeroval prietok krvi len na ľavú stranu. Prietok krvi v aorte artéria bola prerušená pod pravou renálnou artériou (sk, v artérii aorty bol urobený malý rez, ktorý umožnil vloženie katétra nasmerovaného do ľavej renálnej artérie a pripevneného k artérii aorty chirurgickými závitmi. (Chirurgická niť umiestnená nad brušnou aortou bola zviazaná, čím sa prerušil prietok obličkami a aktivovala sa peristaltická perfúzna pumpa, čím sa spustil proces perfúzie. V procese kontinuálnej perfúzie sa oblička vybrala z brušnej dutiny a umiestnila sa do platne, aby odstráňte priľahlý tuk a nadobličku, aby sa predišlo vplyvu nadobličiek na obličkové cievne riečisko počas experimentálneho obdobia. (oblička bola umiestnená do komory obsahujúcej 100 ml fyziologického soľného roztoku (PSS; 119 mM NaCl, 4,7 mM KCI, 2,4 mM CaCl2, 1,2 mM MgS04, 25,0 mM NaHC03, 1,2 mM KH2P04, 11,1 mM dextrózy a 0,03 mM EDTA) a napojený na perfúzny systém, udržiavaný pri teplote 7% a konštantnej teplote 93 percent 5 percent CO2, s konštantným prietokom 4 ml/min. Pred začatím experimentálneho hodnotenia sa dodržalo obdobie 30 minút (zaznamenávanie perfúzneho tlaku sa uskutočnilo pomocou tlakového prevodníka pripojeného k perfúznemu systému, pripojeného k počítačovému polygrafu so špecifickým integračným softvérom (systém PowerLab a softvér Chart 7.1, ADInstruments, Castle Hill, Austrália). Schéma experimentálneho nastavenia izolovanej perfundovanej obličky je zobrazená na obrázku 1.

4. Hodnotenie účinkov a mechanizmov Boldine na renálne artérie.

Po stabilizačnom čase 30 minút sa integrita tkaniva overila bolusovou injekciou 120 mmol KCl. (integrita endotelu bola skontrolovaná o 20 minút neskôr pridaním fenylefrínu (300 nmol) a následne acetylcholínu (300 nmol). Počkalo sa ďalších 20 minút a potom boli prípravky kontinuálne perfundované PSS s obsahom fenylefrínu (3 µM) , čo je dostatočné na vyvolanie trvalého zvýšenia renálneho perfúzneho tlaku.Po stabilizácii zvýšenia perfúzneho tlaku dostali prípravky bolusové injekcie s obsahom 10, 30, 100 a 300 nmol boldinu a bolo hodnotené zníženie perfúzneho tlaku. (E bolusové injekcie testovaných látok boli podávané v konečnom objeme 10 alebo 30 ul prístupom v blízkosti prípravku, s minimálnym časovým intervalom 3 min medzi dávkami. Niektoré obličkové prípravky boli perfundované PSS, ktorý obsahoval deoxycholát sodný (1,8 mg/ml) na 30 s, aby sa chemicky odstránil endotel renálnych artérií. Po infúzii deoxycholátu sodného sa na stabilizáciu 40 minút perfundoval bežný PSS (chýbajúca vazodilatácia potvrdila odstránenie endotelu po bolusovej injekcii acetylcholínu). Krivka dávka-odozva (30, 100 a 300 nmol) boldínu bola vytvorená pre prípravky bez endotelu. Odpovede boli zaznamenané 10 s po podaní. Zmeny perfúzneho tlaku (v mmHg) sa zaznamenávali a porovnávali medzi skupinami.

V inom experimentálnom súbore s použitím prípravkov s intaktným endotelom boli prípravky perfundované PSS, ktorý obsahoval 3 μM fenylefrínu plus nasledujúce činidlá: 100 μM-NAME (neselektívny inhibítor syntázy oxidu dusnatého), 1 μM indometacín (neselektívny inhibítor cyklooxygenázy), 40 μM mM KCl (depolarizácia sprostredkovaná K plus), 10 mM TEA (nešpecifický blokátor draslíkových kanálov), 10 μM glibenklamid (selektívny blokátor K plus kanálov citlivý na ATP), apamín 10 nM (selektívny nízkovodivý Ca2 plus - aktivovaný blokátor K plus kanálov ), iberiotoxín (selektívny blokátor aktivovaného K plus kanála s vysokou vodivosťou Ca2 plus), 1 nM charybdotoxín (selektívny blokátor aktivovaného kanála K plus s vysokou a strednou vodivosťou). Po 15 minútach perfúzie bol injikovaný boldin (30, 100 a 300 nmol). Jeho schopnosť znižovať perfúzny tlak sa porovnávala s výsledkami získanými s kontrolnými prípravkami perfundovanými iba vehikulom.

5. Štatistická analýza.

výsledky sú vyjadrené ako priemer ± štandardná chyba priemeru zo šiestich prípravkov v každej skupine. (e Štatistické analýzy sa uskutočnili pomocou jednosmernej analýzy rozptylu (ANOVA), po ktorej nasledoval Bonferroniho post hoc test. Hodnoty p < 0,05 sa považovali za štatisticky významné. (Štatistické analýzy sa vykonali pomocou GraphPad Prism verzia softvéru 6.00 pre Windows (GraphPad, La Jolla, CA, USA).

Cistanche prášok

Výsledky a diskusia

Vazodilatačný účinok na renálne artérie s použitím izolovaných a perfundovaných obličiek potkanov je často používanou stratégiou na hodnotenie hemodynamických účinkov izolovaných zlúčenín, s bližšou aproximáciou k mechanizmu účinku, vzhľadom na schopnosť posúdiť rôzne molekulárne ciele [12]. V tejto štúdii podávanie bolínu (30, 100 a 300 nmol) do cievneho riečiska obličky vyvolalo dilatačný výsledok závislý od dávky (obrázok 2(c)), čím sa zodpovedala počiatočná hypotéza práce, ktorá diskutovala možnosť, že boldin má vazodilatačný účinok v renálnom arteriálnom riečisku. (je prvou štúdiou, ktorá demonštruje relaxačné účinky boldínu na obličkové cievne riečisko. Avšak relaxačný účinok boldínu na iné cievne tkanivá bol prvýkrát popísaný v roku 1996, keď Chen a spol. preukázali vazodilatačný účinok tohto alkaloidu u izolovaných potkanov hrudnej aorty [13].

Obrázok 2: Boldine v závislosti od dávky indukovaná vazorelaxácia v izolovaných a perfundovaných obličkách. (a) Molekulárna štruktúra boldinu. (b) Stopový záznam perfúzneho tlaku obličiek ukazujúci účinky acetylcholínu (ACh) a boldínu. (c) Účinky boldínu na perfúzny tlak v izolovaných obličkách s intaktným endotelom. (d) Účinky boldínu na prípravky s neporušeným endotelom (End plus) a s obnaženým endotelom (End-). (údaje sú vyjadrené ako priemer ± SEM zo šiestich experimentov. ∗p < 0.05, v porovnaní s perfúznym tlakom po podaní PSS (identifikované ako číslo 0); # p < 0,05 v porovnaní s predchádzajúcou dávkou boldínu (a) alebo prípravkov zbavených endotelu (b).

Na základe tohto pozitívneho výsledku sa uskutočnili výskumy zapojenia endotelu a základných mechanizmov súvisiacich s relaxačnými účinkami. Ako je znázornené na obrázku 2(d), účinky boldínu v prípravkoch predtým podávaných s deoxycholátom sodným (tj na odstránenie endotelu) úplne chýbali (obrázok 2(d)), čo naznačuje, že funkčný endotel je nevyhnutný pre jeho vazodilatáciu akcie. V súlade s tým sa účinkom všetkých dávok boldínu zabránilo v prípravkoch, ktoré boli liečené neselektívnym inhibítorom syntázy oxidu dusnatého L-NAME (obrázok 3(a)), zatiaľ čo v prípravkoch perfundovaných neselektívnym inhibítorom enzýmu cyklooxygenázy indometacínom sa prejavili vazorelaxačné účinky Boldin zostal nezmenený (obrázok 3(b)), čo naznačuje, že relaxačné vlastnosti boldinu závislé od endotelu boli závislé od tvorby oxidu dusnatého (NO) a nezávislé od produkcie prostanoidov.

Obrázok 3: Úloha oxidu dusnatého a prostanoidov vo vazodilatačných účinkoch boldinu. Účinky boldínu na endotelové intaktné obličkové prípravky, ktoré boli perfundované (a) L-NAME alebo (b) indometacínom. Údaje sú vyjadrené ako priemer ± SEM zo šiestich experimentov. #p < 0.05 v porovnaní s perfundovanými prípravkami len s vehikulom.

Cistanche tubulosa

Hlavným relaxačným faktorom odvodeným od endotelu je NO, ktorý sa považuje za jeden z hlavných mediátorov bunkových procesov. V krvných cievach sa NO produkuje v endotelových bunkách z L-arginínu, ktorý má vazodilatačný účinok. Difunduje do buniek hladkého svalstva a interaguje s rozpustným enzýmom guanylátcyklázou, čím sa stáva aktívnym, čo spôsobuje tvorbu cyklického guanozínmonofosfátu, čo vedie k relaxácii buniek hladkého svalstva ciev [14, 15]. Vzhľadom na to, že odstránenie endotelu alebo potlačenie produkcie NO prostredníctvom podávania L-NAME úplne zabránili vaskulárnym účinkom boldínu, naše zistenia naznačujú, že endotel plnil kľúčovú funkciu pri znižovaní perfúzneho tlaku vyvolaného boldínom. V literatúre už boli skutočne opísané účinky boldínu na vaskulárny endotel. Liečba Boldinem zvýšila maximálnu relaxáciu na acetylcholín v aorte spontánne hypertenzných potkanov [9], zlepšila relaxáciu závislú od endotelu v aortách diabetických potkanov liečených streptozotocínom [16] a zlepšila relaxáciu závislú od endotelu v aortách diabetických myší [17 ].

Obrázok 4: Účinok draslíkových kanálov na vazodilatačný účinok boldínu. Účinky boldínu na endotelové intaktné obličkové prípravky, ktoré boli perfundované (a) KCl alebo (b) TEA. (údaje sú vyjadrené ako priemer ± SEM zo šiestich experimentov. #p < 0,05, v porovnaní s prípravkami s perfúziou len s vehikulom.

Na overenie účinkov súvisiacich s K plus kanálmi sa prípravky premývali živným roztokom, do ktorého sa pridalo 40 mM KCl, čo indukuje depolarizáciu sprostredkovanú K plus, a TEA, neselektívny blokátor K plus kanálov (obrázky 4 (a) a 4(b), v tomto poradí). Pozorovalo sa, že obe liečby blokovali vazorelaxačné účinky vyvolané boldínom, čo naznačuje prevládajúcu úlohu K plus kanálov vo vazodilatačných účinkoch tejto zlúčeniny. Kanály K plus sú proteínové štruktúry prítomné v rôznych typoch buniek a fungujú ako póry v membránach, ktoré umožňujú prechod K plus. (sú rozdelené do 4 hlavných tried: napäťovo závislé K plus kanály, ATP-senzitívne K plus kanály, vnútorné usmerňovacie K plus kanály a Ca2 plus - aktivované K plus kanály [18–20]. (e Liečba glibenklamidom, blokátor K plus kanála citlivý na ATP, udržal vazorelaxačný účinok boldínu nezmenený vo všetkých použitých dávkach (obrázok 5(a)). Podobne perfúzia s charybdotoxínom, selektívnym vysoko- a stredne vodivým Ca2 plus-aktivovaným K plus kanálom blokátor (obrázok 6(a)) a iberiotoxín, selektívny vysokovodivý blokátor kanálov K plus aktivovaný Ca2 plus (obrázok 6(b)), nemodifikovali vazodilatačný účinok boldínu. Na druhej strane perfúzia s apamín, selektívny blokátor kanálov K plus aktivovaný s nízkou vodivosťou Ca2 plus, úplne zabránil vazodilatačnému pôsobeniu boldínu vo všetkých testovaných dávkach (obrázok 5 (b)), čo naznačuje, že tento podtyp kanála K plus sa javí ako rozhodujúci pre relaxačné účinky Súhrnne, ak vezmeme do úvahy, že downstream ciele dráhy oxidu dusnatého v cievach zahŕňajú otvorenie K plus kanálov [21, 22], tento súbor výsledkov naznačuje, že boldínom sprostredkovaná vazodilatácia závislá od endotelu v renálnych artériách závisí od otvorenie kanálov K plus aktivovaných Ca2 plus s nízkou vodivosťou indukovaných oxidom dusnatým v bunkách hladkého svalstva.

Obrázok 5: Účinok blokátorov podtypu draslíkových kanálov na vazodilatačný účinok boldínu. Účinky boldínu na endotelové intaktné obličkové prípravky, ktoré boli perfundované (a) glibenklamidom alebo (b) apamínom. (údaje sú vyjadrené ako priemer ± SEM zo šiestich experimentov. #p < 0,05, v porovnaní s prípravkami s perfúziou len s vehikulom.

Obrázok 6: Účinok blokátorov podtypu draslíkových kanálov na vazodilatačný účinok boldínu. Účinky boldínu na endotelové intaktné obličkové prípravky, ktoré boli perfundované (a) charybdotoxínom alebo (b) iberiotoxínom. (e údaje sú vyjadrené ako priemer ± SEM zo šiestich experimentov.

Je pozoruhodné, že v posledných rokoch boli mnohé zlúčeniny izolované z liečivých rastlín študované na ich obličkové účinky, ktoré odhalili dôležité vazodilatačné, diuretické, antiurolitické a ochranné účinky proti hypertenznému poškodeniu. Nothofagin, mono-C-glykozid 4,2′,4′,6′-tetrahydroxy-dihydrochalkónu nachádzajúci sa v listoch Leandra dasytricha, preukázal schopnosť indukovať diurézu [23], renoprotekciu [24], vazodilatáciu [12] a hypotenzný účinok [25]. Rôzne zlúčeniny z tried xantónov izolovaných z vetiev Garcinia achachairu vykazovali akútne diuretické účinky [26, 27], predĺžené diuretické a renoprotektívne účinky [28] a antiurolitické vlastnosti [29]. Okrem toho glykozylované flavonoidy získané z listov Bauhinia forficata vykazovali vazodilatačné [30], diuretické a protektívne účinky na obličky [31].

Cistanche pilulky

Avšak aj keď tu opísané výsledky nepochybne poukazujú na účasť Ca2 plus-aktivovaných K plus kanálov na obličkových účinkoch vyvolaných boldínom, sú potrebné ďalšie štúdie na preskúmanie iných molekulárnych cieľov a podtypov kanálov s použitím rôznych kombinovaných prístupov inhibítorov. Okrem toho, ďalším dôležitým obmedzením štúdie je, že sme neboli schopní preskúmať receptor zapojený do vazodilatačného účinku boldínu, ktorý sa ešte musí študovať v budúcnosti. Vzhľadom na účinky, ktoré už boli pre tento alkaloid opísané v literatúre, táto štúdia dopĺňa renálny vazodilatačný účinok, čo prispieva k lepšiemu pochopeniu potenciálu boldinu na použitie ako farmakoterapie alebo výživového doplnku.

Referencie

[1] M. d. F. Agra, PF d. Freitas a JM Barbosa-Filho, "Súhrn rastlín známych ako liečivé a jedovaté na severovýchode Brazílie," Revista Brasileira de Farmacognosia, zv. 17, č. 1, s. 114–140, 2007.

[2] MGL Brandão, GP Cosenza, RA Moreira a RLM Monte-Mor, "Liečivé rastliny a iné botanické produkty z brazílskeho oficiálneho liekopisu," Rev Bras Farmacogn, zv. 16, s. 408–420, 2006.

[3] C. Viegas, VS Bolzani, J. Eliezer a EJ Barreiro, "(e natural products and the modern medicalchemistry," Quimica Nova, vol. 29, no. 2, 2006.

[4] ALTG Ruiz, D. Tafarello, VHS Souza a JE Carvalho, "Farmakológia a toxikológia Peumus boldus a Baccharis genistelloides," Rev. bras. Farmacognosia. zv. 18, č. 2, 2008.

[5] P. O'Brien, C. Carrasco-Pozo a H. Speisky, "Boldine a jeho antioxidačné alebo zdravie podporujúce vlastnosti," Chemico-Biological Interactions, zv. 159, s. 1–17, 2006.

[6] YY Jang, JH Song, YK Shin, ES Han a CS Lee, "Ochranný účinok boldinu na oxidačné mitochondriálne poškodenie u diabetických potkanov vyvolaných streptozotocínom", Pharmacological Research, zv. 42, č. 4, s. 361–371, 2000.

[7] T. Boeing, LNB Mariano, AC Dos Santos a kol., "Gastroprotektívny účinok alkaloidu boldin: zapojenie neproteínových sulfhydrylových skupín, prostanoidov a zníženie oxidačného stresu," Chemico-Biological Interactions, zv. 327, ID článku 109166, 2020.

[8] YS Lau, WC Ling, D. Murugan a MR Mustafa, "Boldine zmierňuje vaskulárny oxidačný stres a endoteliálnu dysfunkciu," Journal of Cardiovascular Pharmacology, zv. 65, č. 6, s. 522–531, 2015.

[9] Y.-S. Lau, A. Machha, FI Achike, D. Murugan a MR Mustafa, "(e aporfínový alkaloid boldín zlepšuje endotelovú funkciu u spontánne hypertenzných potkanov," Experimental Biology and Medicine, zv. 237, č. 1, str. 93-98 , 2012.

[10] GI G´omez a V. Velarde, "Boldine zlepšuje poškodenie obličiek v modeli Goldblatt 2K1C, pričom sa vyhýba zvýšeniu TGF-", International Journal of Molecular Sciences, zv. 19, č. 7, str. 1864, 2018.

[11] R. Hern'andez-Salinas, AZ Vielma, MN Arismendi, MP Boric, JC S'aez a V. Velarde, "Boldine zabraňuje renálnym zmenám u diabetických potkanov", Journal of Diabetes Research, zv. 2013, ID článku 593672, 2013.

[12] AAM Marques, CHF da Silva, P. de Souza a kol., "Oxid dusnatý a Ca2 plus aktivované vysoko vodivé kanály K plus sprostredkovávajú notofaginom indukovanú vazodilatáciu závislú od endotelu v perfundovaných obličkách potkana," Chemico- Biological Interactions, zv. 327, ID článku 109182, 2020.

[13] KS Chen, FN Ko, CM Teng a YC Wu, "Protidoštičkové a vazorelaxačné účinky niektorých aporfinoidov," Planta Medica, zv. 62, č. 2, s. 133–136, 1996.

[14] GA Shiekh, T. Ayub, SN Khan, R. Dar a KI Andrabi, "Znížená hladina dusičnanů u jedincov s hypertenziou a cukrovkou," Journal of Cardiovascular Disease Research, vol. 2, č. 3, s. 172–176, 2011.

[15] ES Underbakke, AT Iavarone, MJ Chalmers a kol., "Oxidom dusnatý-indukované konformačné zmeny v rozpustnej guanylátcykláze," Structure, zv. 22, č. 4, s. 602–611, 2014.

[16] YS Lau, XY Tian, ​​Y. Huang, D. Murugan, FI Achike a MR Mustafa, "Boldine chráni endotelovú funkciu pri oxidačnom strese vyvolanom hyperglykémiou prostredníctvom antioxidačného mechanizmu," Biochemical Pharmacology, zv. 85, č. 3, s. 367–375, 2013a.

[17] YS Lau, XY Tian, ​​MR Mustafa a kol., "Boldine zlepšuje endoteliálnu funkciu pri diabetickom zániku prostredníctvom inhibície BMP4-kaskády oxidačného stresu sprostredkovaného angiotenzínom II," British Journal of Pharmacology, zv. . 170, č. 6, s. 1190 – 1198, 2013b.

[18] M. Baranowska, H. Kozłowska, A. Korbut a B. Malinowska, Draslíkové kanály v krvných cievach: ich úloha v zdraví a chorobe, Postepy Higieny I Medycyny Doswladczalnej, zv. 61, s. 596–605, 2007.

[19] WF Jackson, "Kanály draslíka v periférnej mikrocirkulácii", Microcirculation, zv. 12, č. 1, s. 113–127, 2005.

[20] BF Palmer a DJ Clegg, "Fyziológia a patofyziológia homeostázy draslíka," Advances in Physiology Education, zv. 40, č. 4, s. 480–490, 2016.

[21] SL Archer, JM Huang, V. Hampl, DP Nelson, PJ Shultz a EK Weir, "Oxid dusnatý a cGMP spôsobujú vazorelaxáciu aktiváciou charybdotoxín-senzitívneho K kanála proteínkinázou závislou od cGMP," Proceedings of the Národná akadémia vied, roč. 91, č. 16, s. 7583–7587, 1994.

[22] VM Bolotina, S. Najibi, JJ Palacio, PJ Pagano a RA Cohen, „Oxid dusnatý priamo aktivuje draslíkové kanály závislé od vápnika v hladkom svalstve ciev“, Nature, zv. 368, č. 6474, s. 850–853, 1994.

[23] CLB de Almeida, T. Boeing, LB Somensi a kol., "Diuretický, natriuretický a draslík šetriaci účinok nothofagínu izolovaného z listov Leandra dasytricha (A. Gray) Cogn. u normotenzných a hypertenzných potkanov," Chemico- Biological Interactions, zv. 268, s. 103–110, 2017.

[24] CLB de Almeida, V. Cechinel-Filho, T. Boeing a kol., "Predĺžený diuretický a saluretický účinok nothofagínu izolovaného z listov Leandra dasytricha (A. Gray) Cogn. u normotenzných a hypertenzných potkanov: úloha antioxidačného systému a ochrana obličiek," Chemico-Biological Interactions, zv. 279, s. 227–233, 2018.

[25] CH da Silva, RA Palozi, P. de Souza a kol., "Signálna dráha oxidu dusnatého/cGMP a draslíkové kanály prispievajú k hypotenzívnym účinkom nothofagínu," Minerva Cardioangiologica, zv. 68, č. 6, s. 602 – 608, 2020.

[26] LN Bolda Mariano, T. Boeing, R. d. CMV d. AF da Silva a kol., "1,3,5,6-tetrahydroxyxantón, prírodný xantón, indukuje diurézu a salutuje u normotenzných a hypertenzných potkanov," Chemico-Biological Interactions, zv. 311, ID článku 108778, 2019.

[27] LN Bolda Mariano, T. Boeing, V. Cechinel-Filho, R. Niero, L. Mota da Silva a P. de Souza, "(akútne diuretické účinky s nízkymi dávkami prírodných prenylovaných xantónov u potkanov, " European Journal of Pharmacology, zv. 884, Article ID 173432, 2020.

[28] LN Bolda Mariano, T. Boeing, V. Cechinel Filho, et al., "Predĺžené diuretické a renoprotektívne účinky xantónu získaného z Garcinia achachairu rusby u normotenzných a hypertenzných potkanov," Evid-based Complement Alternative Medicine, zv. 2021, ID článku 5510053, 9 strán, 2021.

[29] LNB Mariano, T. Boeing, V. Cechinel Filho, R. Niero, L. Mota da Silva a P. de Souza, „1,3,5,6-tetrahydroxyxantón podporuje diurézu, ochranu obličiek a antiurolitické vlastnosti u normotenzných a hypertenzných potkanov," Journal of Pharmacy and Pharmacology, zv. 73, č. 5, s. 700 – 708, 2021.

[30] CC Cechinel-Zanchett, R. d. CMV d. AF da Silva, A. Tenfen a kol., "Bauhinia forficata link, brazílska liečivá rastlina tradične používaná na liečbu kardiovaskulárnych porúch, prejavuje endotelovo závislú a nezávislú vazorelaxáciu v hrudnej aorte normotenzných a hypertenzných potkanov," Journal of Ethnopharmacology, vol. . 243, s. 112118, 2019.

[31] CC Cechinel-Zanchett, LN Bolda Mariano, T. Boeing a kol., "Diuretický a renálny ochranný účinok kaempferolu 3- O-alfa-l-ramnozidu (afzelín) u normotenzných a hypertenzných potkanov," Journal of Natural Products, zv. 83, č. 6, s. 1980–1989, 2020.

Priscila de Souza , 1 Rita de C´assia Vilhena da Silva, 1 Luisa Mota da Silva, 1 Viviane Miranda Bispo Steimbach, 1 Karyne Garcia Tafarelo Moreno, 2 a Arquimedes Gasparotto Junior 2

1 postgraduálny program vo farmaceutických vedách, jadro chemicko-farmaceutických výskumov (NIQFAR), University of Vale do Itaja´ı, Itaja´ı, SC, Brazília

2 Laboratórium elektrofyziológie a kardiovaskulárnej farmakológie, Fakulta zdravotníckych vied, Universidade Federal da Grande Dourados, Dourados, Mato Grosso do Sul, Brazília