Cistanche Tubulosa chráni dopaminergné neuróny prostredníctvom regulácie apoptózy a neurotrofického faktora odvodeného z gliových buniek: in vivo a in vitro-Ⅱ

Behaviorálne testy

Test plávania (Zhu et al., 2014)

Koordinácia pohybu tela u myší bola meraná testom plávania. Myši boli jednotlivo umiestnené do vodnej nádrže (25 cm na výšku a 10 cm v priemere) obsahujúcej 10 cm vody a testované v tichom prostredí, aby sa zaznamenalo ich stacionárne trvanie počas 5 minút.

Test v otvorenom poli (Kawai a kol., 1998)

Lokomotorická aktivita sa merala použitím testu otvoreného poľa. Myši boli testované v tichom a slabo osvetlenom prostredí a jednotlivo umiestnené v priehľadnej akrylovej nádobe s rozmermi 30 cm × 30 cm × 15 cm so separačnou mriežkou 6 cm × 6 cm na dne. Myšiam bolo poskytnutých 10 minút, aby sa prispôsobili prostrediu, a potom sa päťkrát za sebou merala prechádzka číslom mriežky a frekvencia chovu jednotlivých myší, aby sa získali stredné hodnoty.

PRÍRODNÁ CISTANCHE TUBULOSA NA ZLEPŠENIE SEXUÁLNEJ FUNKCIE PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Odber vzoriek mozgového tkaniva

Pred odberom vzoriek tkaniva boli myši kŕmené ad libitum s voľným prístupom k vode a dostávali liekovú intervenciu počas 14 po sebe nasledujúcich dní. Štyri myši v každej skupine boli vybrané a rýchlo dekapitované. SN (Bregma: -2,75 mm -2,92 mm) z každého zvieraťa sa izoloval a umiestnil na ľad. Mozgové tkanivá sa premyli 0,9 % ľadovo studeným roztokom chloridu sodného, ​​aby sa odstránila všetka krv a vysušili sa na filtračnom papieri pred uskladnením pri -80 °C. Štyri myši z každej skupiny boli intraperitoneálne anestetizované a ich hrudníky boli otvorené. Do ľavej komory každého zvieraťa sa potom vložila infúzna ihla. Na odstránenie krvi v obehovom systéme sa odrezal prívesok pravej predsiene a zvieraťu sa infúziou podával fyziologický roztok s teplotou 4 °C, kým pečeň nezbledla, aby sa zabezpečila následná perfúzia. Keď sa výtok z pravej predsiene vyčistil, každé zviera bolo perfundované 4% fixačným prostriedkom paraformaldehydu. Po perfúzii sa mozgové tkanivo každého zvieraťa opatrne rozrezalo a následne sa fixovalo v 4% paraformaldehyde počas 24 hodín. Fixované mozgové tkanivá sa potom opláchli pod tečúcou vodou, dehydratovali sa v odstupňovanej sérii etanolových roztokov a vyčistili sa v xylénovom roztoku. Nasledovalo ponorenie do parafínu a zaliatie.

Zmeny množstva DA merané pomocou HPLC

Nanopráškový SN z každej skupiny sa umiestnil do ľadového kúpeľa obsahujúceho 0,9 % roztok chloridu sodného (pomer 1:9). Mozgové tkanivo sa homogenizovalo pomocou ultrazvukového rozrušovača buniek a centrifugovalo sa pri 1200 ot./min počas 20 minút pri 4 °C, aby sa získal supernatant. Pre HPLC bola použitá Hypersil AA-ODS kolóna (2,1 mm x 200 mm, 5 um) pri teplote kolóny 30 °C. Detekcia fluorescencie sa uskutočnila pri 280 nm λex a 340 nm λem. Objem injekcie bol 10 ul.

Expresia TH, GDNF, GFR 1 a Ret detekovaná imunohistochémiou

Z každého zvieraťa sa izolovali parafínové rezy (hrúbka 5 µm) jednotlivého mozgového tkaniva a umiestnili sa do 40◦C teplého vodného kúpeľa, aby sa sploštili a prilepili na sklenené sklíčka. Všetky tkanivové sklíčka sa inkubovali v sušiarni pri 60 °C počas 3–6 hodín, nasledovalo odparafínovanie xylénom, dehydratácia gradientom etanolu a získanie antigénu inkubáciou v tlmivom roztoku kyseliny citrónovej a zahrievaním v mikrovlnnej rúre počas 20 minút. Tkanivové sklíčka sa potom inkubovali v 3% roztoku H202 pri teplote miestnosti počas 10 minút. Po trojnásobnom premytí v PBS sa tkanivové sklíčka inkubovali s normálnym sérom v uzavretej komore pri teplote miestnosti počas 20 minút. Imunohistochemické farbenie sa uskutočnilo podľa pokynov výrobcu. Na výpočet hodnoty integrovanej optickej hustoty v pozitívne zafarbených bunkách sa použil analyzátor obrazu Motic Med 6.0.

Western Blot analýza v mozgových tkanivách myší

Táto štúdia hodnotila proteínovú expresiu tyrozínhydroxylázy (TH), GDNF, GFR 1, Ret, Bcl2 a Bax. Mozgový lyzát z každej skupiny sa homogenizoval 3{{10}} min na ľade, nasledovala centrifugácia pri nízkej teplote, 20,{5}} otáčky za minútu, pri 4 ◦C počas 5 minút na zber supernatantu. Vzorky proteínov boli oddelené za konštantného tlaku s použitím 10% SDS-PAGE gélu, ako je opísané vyššie. Koncentrácia primárnej protilátky: TH 0,15 mg/ml, GDNF 0,5 mg/ml, GFR 1 0,8 mg/ml, Ret 0,63 mg/ml, Bcl-2 0,34 mg/ml a Bax 0,11 mg/ml. Postup bol rovnaký ako vyššie.

PRÍRODNÁ CISTANCHE TUBULOSA PROTI STARNUTIU ANTI-ALZHEIMER PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Štatistická analýza

V tejto štúdii sa na spracovanie a analýzu údajov použil štatistický softvér SPSS 2{1}}.0. Hodnoty parametrov boli vyjadrené ako priemer ± štandardná odchýlka (¯x ± S). ANOVA sa použila na jednofaktorovú analýzu údajov. Na porovnanie skupín bol použitý LSD alebo Games-Howellov test. P< 0.05 (or P < 0.01) was considered as a statistically significant difference.

VÝSLEDKY

Aktívne zložky nanoprášku C. tubulosa

V rozsahu 200–400 nm skenovania mali ECH v C. tubulosa a VER v 330 nm maximálny absorpčný pík, ktorý sa objavil do 20 min. ICA mala maximálne absorpčné píky pri 270 nm a objavila sa po 20 minútach (obrázok 1A). Výsledky ukázali, že negatívne vzorky neinterferovali s detekciou (obrázok 1B). Vzorky a kontrola mali rovnaké chromatografické píky a negatívna vzorka nemala žiadne. To ukázalo, že ostatné zložky vo vzorke neinterferujú s meranou zložkou. Okrem toho tri zložky a susedné píky môžu dosiahnuť základnú líniu separácie a stupeň separácie bol vyšší ako 1,5.

C. tubulosa nanoprášok so zníženým MPP+ -indukovaná cytotoxicita v bunkách MES23.5

Životaschopnosť buniek MES23.5 bola významne znížená so zvyšujúcimi sa koncentráciami MPP+. Obrázok 2F ukazuje významnú cytotoxicitu rôznych koncentrácií MPP+.

Nanoprášok C. tubulosa znížil cytotoxicitu vyvolanú MPP+- a zvýšil životaschopnosť buniek MES23.5. Obrázok 2G ukazuje, že dávky nanoprášku C. tubulosa 10–250 µg/ml mali na dávke závislé ochranné účinky na bunky MES23.5 ošetrené MPP+-.

Cytomorfologický účinok nanoprášku C. tubulosa

Normálne bunky MES23.5 mali dobrú bunkovú adhéziu a mali vretenovitý tvar s jasnými hranicami buniek a synapsiami. MPP+-poškodené bunky MES23.5 vykazovali slabú bunkovú adhéziu a zmršťovanie a mnohé boli suspendované v médiu so stiahnutými synapsiami. Tieto bunky boli agregované, scvrknuté a okrúhle s vakuolami vo vnútri a jadrá sa rozpadli alebo zrútili. Nanoprášok C. tubulosa v rôznych dávkach zlepšil cytomorfológiu buniek MES23.5 v rôznych stupňoch zlepšením bunkovej adhézie a synaptického klírensu skupiny vehikula. Bunky MES23.5 v skupine liečenej vysokou dávkou C. tubulosa vykazovali morfológiu, ktorá bola podobná normálnej kontrolnej skupine (obrázky 2A–E).

Účinok nanoprášku C. tubulosa na expresiu TH a apoptózu v bunkách

Obrázok 3 ukazuje významné zníženie expresie TH proteínu v skupine s vehikulom. Expresia TH proteínu sa zvýšila rozdielne v skupinách liečených rôznymi dávkami C. tubulosa. Test LSD však ukázal, že medzi tromi liečenými skupinami nebol žiadny významný rozdiel.

Obrázok 4 ukazuje výsledky hodnotenia apoptózy pomocou prietokovej cytometrie. Rýchlosť apoptózy v skupine s vehikulom bola významne vyššia ako v iných skupinách. Bunky ošetrené rôznymi dávkami nanoprášku C. tubulosa vykazovali rôzne stupne poklesu rýchlosti apoptózy v porovnaní so skupinou s vehikulom. Bunky v skupine liečenej strednou a vysokou dávkou C. tubulosa mali najvýznamnejšie zlepšenie rýchlosti apoptózy v porovnaní s inými skupinami liečenými C. tubulosa. Test LSD ukázal, že medzi oboma liečenými skupinami nebol žiadny významný rozdiel, ale významný rozdiel aj medzi skupinou s nízkou dávkou.

Účinok nanoprášku C. tubulosa na expresiu Bcl2/Bax proteínu v bunkách

Obrázok 5 ukazuje, že expresia Bcl2 proteínu v bunkách skupiny s vehikulom bola významne nižšia v porovnaní s normálnou kontrolnou skupinou. Naproti tomu expresia Bax proteínu v bunkách skupiny s vehikulom bola významne vyššia ako v normálnej kontrolnej skupine. Skupiny liečené C. tubulosa vykazovali zvýšenú expresiu proteínu Bcl2 a zníženú expresiu proteínu Bax v bunkách MES23.5 ošetrených MPP+-. Medzi tromi liečenými skupinami boli v teste LSD významné rozdiely. Tieto účinky boli závislé od dávky.

Behaviorálne testy

Výsledky testu plávania naznačili, že myši v skupine s vehikulom mali relatívne dlhé stacionárne trvanie, ktoré sa časom predlžovalo. Na 14. deň mali myši v skupine s vehikulom výrazne dlhšie obdobie stacionárneho pohybu ako myši v normálnej kontrolnej skupine. Stacionárne trvanie myší v

nízka dávkaC. tubulosaliečená skupina sa významne nelíšila od skupiny myší v skupine s vehikulom. Stacionárne trvanie myší v skupine liečenej vysokou dávkou C. tubulosa však bolo významne kratšie ako u myší v skupine s vehikulom.

Výsledky testu v otvorenom poli naznačujú, že po MPTP-indukovanom poškodení u myší, myši v skupine s vehikulom preukázali významný pokles ich schopnosti spontánnej aktivity, ako ukazuje frekvencia chovu. Po 14-dňovom spravovaníC. tubulosa nanoprášok, myši v skupinách so strednou a vysokou dávkou mali významne vyššie frekvencie chovu v porovnaní s myšami v skupine s vehikulom (obrázky 6A, B).

Účinok nanoprášku C. tubulosa na obsah DA u myší

Zmeny v obsahu DA v SN boli stanovené pomocou HPLC. Zistilo sa, že obsah DA v mozgu skupiny s vehikulom bol významne znížený. Obsah DA v mozgu PD myší v skupine liečenej nízkou dávkou C. tubulosa sa významne nelíšil od myší v skupine s vehikulom. však,liečba C. tubulosazvýšili hladiny DA v mozgu PD myší spôsobom závislým od dávky. Mozgy PD myší liečených vysokou dávkou C. tubulosa mali významne vyšší obsah DA ako mozgy myší v skupine s vehikulom (obrázok 6C).

Účinok nanoprášku C. tubulosa na expresiu TH u myší

Počet TH-pozitívnych buniek a úroveň expresie TH proteínu v SN MPTP-indukovaných PD myší boli nižšie v porovnaní s myšami v kontrolnej skupine. Po liečbe C. tubulosa sa zvýšil počet TH-pozitívnych buniek a hladina expresie TH proteínu v SN myší s PD indukovanou MPTP, s významným rozdielom medzi skupinou liečenou vysokou dávkou C. tubulosa a skupinou s vehikulom testom LSD; a medzi tromi liečenými skupinami boli významné rozdiely (obrázok 7).

Účinok nanoprášku C. tubulosa na proteínovú expresiu GDNF a jeho receptorov, GFR 1 a Ret u myší

Proteínová expresia GDNF a jeho receptorov, GFR 1 a Ret, v pozitívne zafarbených bunkách, sa hodnotila pomocou imunohistochémie. Na vyhodnotenie hladín expresie proteínov v SN rôznych skupín myší sa použila analýza Western blot. Zistenia pre rôzne skupiny boli podobné pri použití dvoch metód detekcie. Expresia GDNF a jeho receptorových proteínov, GFR 1 a Ret, v pozitívne zafarbených bunkách v SN myší v skupine s vehikulom, bola významne nižšia ako u myší v normálnej kontrolnej skupine. Rôzne dávky liečby C. tubulosa zvýšili počet GDNF-, GFR 1- a Ret-pozitívnych buniek (obrázky 8A–S).

Proteínová expresia GDNF, GFR 1 a Ret v SN myší v skupine s vehikulom bola významne nižšia ako u myší v kontrolnej skupine. Zvýšenie liečebných koncentráciíC. tubulosa nanopowervýznamne zvýšili expresiu týchto proteínov. Proteínová expresia GDNF, GFR 1 a Ret v SN myší v skupine liečenej vysokou dávkou C. tubulosa bola významne vyššia ako u myší v skupine s vehikulom (P< 0.01; Figures 8T, U). 

Účinok nanoprášku C. tubulosa na proteínovú expresiu Bcl2/Bax u myší

Expresia proteínu Bcl2 bola významne znížená a expresia proteínu Bax bola významne zvýšená v SN myší v skupine s vehikulom (P< 0.01) compared with the mice in the normal control group. High-dose C. tubulosa treatment significantly increased Bcl2 protein expression and significantly reduced Bax protein expression in the brains of the vehicle mice (P < 0.01; Figure 9). LSD test showed there was no significant difference between the middle-dose and high-dose groups but a significant difference between the low-dose group. 

DISKUSIA

PD a apoptóza

PD je neurodegeneratívna porucha. Podľa Zhang et al. (2005), prevalencia je 10,7 % v čínskej populácii vo veku nad 55 rokov a 1,67 % v populácii nad 65 rokov. Počet pacientov s PD sa každoročne zvyšuje so zrýchlením globálneho starnutia, čo predstavuje veľkú finančnú záťaž pre rodiny pacientov. a spoločnosť ako celok. V mozgu sa dopamínergné neuróny podieľajú hlavne na syntéze a sekrécii DA. Sú široko distribuované v centrálnom nervovom systéme a lokalizované primárne v SN (80 %). TH je kľúčový enzým obmedzujúci rýchlosť pre syntézu DA. Inhibícia aktivity TH teda znižuje syntézu DA (Huot a Parent, 2007). Hlavnými patologickými a biochemickými zmenami PD sú apoptóza dopaminergných neurónov v SN, významné zníženie nigrostriatálnej DA a tvorba Lewyho teliesok v dopaminergných neurónoch (Dexter a Jenner, 2013). Etiológia PD zahŕňa pridružené genetické faktory, environmentálne faktory a starnutie nervového systému (Allam et al., 2005). Patogenéza PD zostáva v modernej medicíne nejasná. Od konca 60. rokov 20. storočia sa substitučná liečba levodopou úspešne používa na liečbu PD a bola uznaná ako hlavný bod obratu v liečbe PD. Dlhodobá aplikácia tejto terapie však spôsobuje vedľajšie účinky a terapia nelieči základné príčiny PD (Del Sorbo a Albanese, 2008). Preto je pre liečbu PD rozhodujúci aktívny výskum nových liekov alebo liečebných metód zameraných na ochranu dopaminergných neurónov.

V skorších štúdiách aplikácia koncového značenia dUTP nick end sprostredkovaného deoxynukleotidyltransferázou ukázala, že 0,6 % – 4,8 % dopaminergných neurónov v SN pacientov s PD vykazovalo apoptózu (Mochizuki et al., 1996). Elektrónová mikroskopia ukázala apoptotické znaky, vrátane chromatickej kondenzácie a apoptotických teliesok v dopamínergných bunkách (Anglade et al., 1997). Tompkins a kol. (1997) vykonali ultraštrukturálnu analýzu pitiev mozgového tkaniva od pacientov s PD, AD a difúznou chorobou Lewyho teliesok (DLBD). Našli apoptotické telieska v hustej vrstve SN u pacientov s PD a DLBD, čo poskytuje presvedčivý dôkaz o apoptóze neurónov pri PD a súvisiacich ochoreniach. Preto je zníženie alebo potlačenie apoptózy v dopaminergných neurónoch základom liečby PD.

Predchádzajúce štúdie ukázali, že MPTP vyvolal symptómy podobné PD. MPTP prechádza hematoencefalickou bariérou a je metabolizovaný monoaminooxidázami typu B v astrocytoch. Následne sa premieňa na toxický MPP+, ktorý sa hromadí v mitochondriách dopaminergných neurónov prostredníctvom príjmu proteínov DA transportéra. Vytvára tak nadbytok voľných kyslíkových radikálov, ktoré inhibujú aktivitu komplexu I mitochondriálneho dýchacieho reťazca a syntézu ATP. Tieto udalosti ďalej podporujú tvorbu voľných radikálov a reakcie oxidačného stresu a nakoniec vedú k degenerácii a smrti dopamínergných neurónov. Preto táto štúdia použila MPP+ na vytvorenie vehikula in vitro v dopaminergných neurónoch MES23.5 a MPTP na vyvolanie vehikula myši na vzájomné overenie. Podľa výsledkov testu MTT MPP+ významne znížil životaschopnosť buniek MES23.5, čo naznačuje, že MPP+ bol cytotoxický pre dopaminergné neuróny. Výsledky tiež ukázali, že C. tubulosa účinne zosilňuje expresiu antiapoptotických proteínov a inhibuje zvýšenie apoptózy indukovanej MPP{11}}.

PD a GDNF

GDNF je neurotrofný faktor, ktorý ako prvý izolovali Lin et al. (1993). Lin a kol. (1993) tiež ukázali, že GDNF má špecifické nutričné ​​účinky na dopaminergné neuróny v strednom mozgu potkanov. GDNF, neurturín (NTN), persephin (PSP) a artemín (ART) tvoria rodinu GDNF. Sú to štruktúrne podobné a funkčne príbuzné sekrečné proteíny (Kotzbauer a kol., 1996; Baloh a kol., 1998; Milbrandt a kol., 1998; Woodbury a kol., 1998).

GDNF receptor pozostáva z dvoch zložiek. Prvá zložka, GFR, je fixovaná na vonkajšiu membránu glykozylfosfatidylinozitolu (GPI) a ukotvená na povrchu konexínu. Druhou zložkou je proteín Ret. Výskum ukázal, že existujú štyri rôzne typy GFR: GFR 1, GFR 2, GFR 3 a GFR 4. GFR 1 je vysokoafinitný receptor GDNF (Onochie a kol., 2000; Chen a kol., 2001; Lindahl a kol., 2001). Proteín Ret je funkčným receptorom GDNF. Homodimérna molekula GDNF sa priamo viaže na GFR 1 za vzniku komplexov a interaguje s Ret, čo vedie k dimerizácii a aktivácii Ret. Vďaka autofosforylácii Ret aktivuje Ret niekoľko bežných TH signálnych dráh. V neprítomnosti proteínu Ret spôsobuje GDNF okrem expresie mRNA a funkčnej aktivity C-fos prostredníctvom jeho receptorového proteínu GFR 1 proteínovú fosforyláciu MAPK, PI-3 a PLC- (He et al., 2008).

Štúdie preukázali, že GDNF má najsilnejší ochranný účinok na dopaminergné neuróny (Rangasamy a kol., 2010; Campos a kol., 2012). Vo vehikuloch, ktoré používajú MPTP a 6-hydroxydopamín (6-OHDA) na vyvolanie poškodenia dopamínergných neurónov, GDNF chráni dopaminergné neuróny znížením apoptózy a podporou axonálneho rastu na vyvolanie diferenciácie kmeňových buniek (Lucas et al., 2012; Littrell a kol., 2013). Lin a kol. (1993) ukázali, že GDNF špecificky podporoval životaschopnosť, diferenciáciu a axonálny rast dopaminergných neurónov, aby podporil príjem DA v neurónoch. Štúdia tiež ukázala, že GDNF nielenže zabránil akútnej toxicite, ale tiež zmiernil dlhodobú toxicitu MPP+ alebo 6-OHDA v dopaminergných neurónoch, čím navyše zabránil bunkovej smrti v stresovaných alebo poškodených bunkách (Yu et al., 2010). Okrem toho GDNF podporoval proliferáciu a diferenciáciu nervových kmeňových buniek smerom k dopaminergným neurónom v strednom mozgu (Lindsay, 1995), aby zachránil dopaminergné neuróny pred retrográdnou degeneráciou (Hong-Juan et al., 2011).

Štúdie ukázali, že expresia GDNF v SN bola významne znížená vo vehikuloch pre zvieratá (Yang et al., 2010). To naznačuje, že to môže byť jeden z mechanizmov patogenézy u PD potkanov. Injekcia 5 až 15 ug/d GDNF do laterálnej komory alebo striata zvieraťa s nosičom indukovaným MPTP počas troch po sebe nasledujúcich mesiacov podporila nigrostriatálnu opravu dopaminergného systému u zvieraťa s nosičom (Grondin et al., 2002). Štúdie liečby PD GDNF na zvieracích nosičoch ukázali, že intracerebrálna injekcia GDNF do rôznych oblastí mozgu, ako je SN, nucleus caudatus a laterálna komora, zlepšila poruchy pohybu spojené so zvieracími modelmi PD, vrátane zníženej motorickej aktivity, svalovej rigidity a tremor (Grondin et al., 2002). GDNF však nemôže priamo prechádzať cez hematoencefalickú bariéru. Preto lokálna cerebrálna injekcia GDNF predstavuje značné riziko a ťažkosti pri klinickej aplikácii. Aplikácie na zavedenie exogénneho GDNF prostredníctvom mikroguľôčok s riadeným uvoľňovaním, kapsúl s predĺženým uvoľňovaním a vírusových génov sa stále študujú (Liang a kol., 2010; Yang a kol., 2010; Qiao a kol., 2012). Vzhľadom na obmedzenia rôznych techník zavádzania exogénneho GDNF do mozgu sú pre klinické použitie významné neuroprotektívne činidlá, ktoré podporujú uvoľňovanie endogénneho GDNF.

PD aC. tubulosaNanoprášok

PD je bežnejšia u dospelých v strednom veku a starších ľudí. Teória TČM predpokladá, že PD sa primárne nachádza v mozgu a je spôsobená najmä nedostatkom pečene a obličiek, okrem vitálnej energie a nedostatku krvi. Podľa tejto teórie by sa teda liečba PD mala zamerať na oživenie obličiek a kostnej drene.Yang a kol. (2010)použili randomizované, dvojito zaslepené a placebom kontrolované klinické štúdie a zistili, že kombinovaná liečba s použitím Madoparu a receptov na tonizáciu obličiek zmierňuje motorické dysfunkcie pacientov s PD. Výsledok liečby bol lepší ako jedna terapia s použitím Madoparu. Liečebná účinnosť monoterapie TCM alebo predpisovania zlúčenín pri PD bola potvrdená na zvieracích modeloch PD a klinických aplikáciách. Aplikácie TČM na tonizáciu obličiek a podporu krvného obehu znížili dávkovanie monoterapie pri PD pomocou Madoparu. Niektoré štúdie naznačujú, že TCM zlepšil symptómy PD a chránil dopaminergné neuróny, čo mohlo úzko súvisieť s podporou endogénnej expresie GDNF (Hong-Juan a kol., 2011; Qiao a kol., 2012).

Zlúčenina na tonizáciu obličiek použitá v tejto štúdii,C. tubulosananoprášok, obsiahnutýCistanche, epimedium, aRhizoma polygonati. Moderný výskum naznačuje, že chemické zloženieCistancheje ECH, ktorý chráni dopaminergné neuróny v SN u MPTP-indukovaných PD myší a inhibuje redukciu DA a transportéra DA (Zhao a kol., 2010). Okrem toho zabraňuje 6-OHDA-indukovanému zníženiu DA a chráni striatálne dopaminergné neuróny (Chen a kol., 2007). Epimedium inhibuje aktiváciu kaspázy-3 a vykonáva neuroprotektívne úlohy (Liu a kol., 2011). Flavonoidy Epimedium účinne podporujú proliferáciu a diferenciáciu nervových kmeňových buniek (Yao a kol., 2010).

V tejto štúdiiC. tubulosananoprášok antagonizoval zvýšenie MPP+-indukovaná apoptóza spôsobom závislým od dávky. Výrazne zlepšil expresiu TH vin vitrovehikulum a malo významné antiapoptotické účinky v dopamínergných neurónoch. Myši s vehikulom indukované MPTP vykazovali poruchy správania a významne znížili expresiu TH v tkanivách stredného mozgu a hladiny DA, čo sú typické patologické znaky PD. Rôzne dávkyC. tubulosananoprášok skrátil stacionárne trvanie, zvýšil autonómne aktivity, zlepšil poruchy správania, zvýšil hladiny DA v mozgu a zvýšil expresiu TH vo vozidlách. Tieto výsledky tomu nasvedčovaliC. tubulosananoprášok mal ochranné účinky v dopamínergných neurónoch, čím sa zlepšili poruchy správania vozidiel. Rôzne dávkyC. tubulosananoprášok zvýšil expresiu GDNF proteínu a jeho receptorových proteínov v mozgu myší s vehikulom. Vysoká dávkaC. tubulosaliečba významne upregulovala expresiu Bcl2 a znížila expresiu Bax, čo nasvedčovalo tomuC. tubulosananoprášokmôže podporovať expresiu a sekréciu GDNF v mozgu myši poškodenej MPTP. Okrem toho môže mať neuroprotektívne účinky v dopamínergných neurónoch a minimalizovať neuronálnu apoptózu prostredníctvom neurotrofických podporných úloh GDNF.

Táto štúdia to preukázalaC. tubulosananoprášok vykazoval ochranné účinky v dopaminergných neurónoch v obochin vitroain vivoa zvýšená expresia TH na zlepšenie obsahu DA. Tiež zlepšil poruchy správania u myší s vehikulom indukovaným MPTP, reguloval proteínovú expresiu GDNF a jeho receptorových proteínov v SN a mal antiapoptotické účinky u PD myší. Mechanizmus, ktorý je základom klinických účinkovC. tubulosananoprášok pri PD môže zahŕňať zvýšenie obsahu endogénneho GDNF v mozgu a tým zníženie poškodenia dopaminergných neurónov.

PRÍRODNÁ CISTANCHE TUBULOSA NA ZLEPŠENIE SEXUÁLNEJ FUNKCIE PHGS75% ECH 30% ACT 12