Kontakt: emily.li@wecistanche.com

Účinok polysacharidov Cistanche Desertica na funkcie učenia a pamäte a ultraštruktúru mozgových neurónov u experimentálnych starnúcich myší

SUN Yun a kol

ABSTRAKT CieľNa pozorovanie účinkovCistanchedeserticapolysacharidy(CDP) nafunkcie učenia a pamätea cerebrálna ultraštruktúra u experimentálnych starnúcich myší. Metódy: CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)sa podávalo intragastricky 50 alebo 100 mg/kg denne počas 64 po sebe nasledujúcich dní experimentálnym modelom starnutia myšiam indukovaným D-galaktózou, potomfunkcie učenia a pamätePočet myší sa odhadol zostupným testom a testom v Y-bludisku; organely mozgového tkaniva a cerebrálna ultraštruktúra boli pozorované transmisným elektrónovým mikroskopom a fyzická sila bola stanovená plaveckým testom. Výsledky: CDP by zjavne mohol zvýšiťfunkcie učenia a pamäte(FV0. 01) a predĺžte čas plávania (P<0. 05),="" de­crease="" the="" number="" of="" lipofuscins="" and="" slow="" down="" the="" degeneration="" of="" mitochondria="" in=""><0.05), and="" improve="" the="" degeneration="" of="" cerebral="" ultra-structure="" in="" aging="" mice.="" qmdusion:="" cdp="">(Cistanchedeserticapolysacharidy)by mohli zlepšiť zhoršenú fyziologickú funkciu a zmierniť mozgovú morfologickú zmenu u experimentálnych starnúcich myší.

KĽÚČOVÉ SLOVÁstarnutie,funkcie učenia a pamäte, Cistanche desertica polysacharidy, ultraštruktúra, D-galaktóza

Cistanchedesertica, bylinný liek chválený ako „ženšen z púšte“, má špeciálny účinok na posilnenie kostí a drene a predĺženie dĺžky života a jeho účinok proti starnutiu bol potvrdený modernými farmakologickými štúdiami“). Prirodzený proces starnutia začína učením a degradácia pamäte, po ktorej nasledujú degeneratívne zmeny v biologických a morfologických štruktúrach.Cistanchedeserticapolysacharidy(CDP) nafunkcie učenia a pamätea fyzická sila, ako aj ultraštruktúra mozgových tkanív. Výsledky boli uvedené nasledovne.

Cistanche má veľa funkcií. Kliknite sem a dozviete sa viac

METÓDY

Zviera

Myši ICR, 2 mesiace staré, z číreho skla, polovica samcov a polovica samíc, s hmotnosťou 20 až 22 g, boli zakúpené od Experimental Animal Center of Yangzhou University (certifikácia č. 98002). V každej komore bolo chovaných desať myší a všetky zvieratá mali voľný prístup k potrave a vode.

Činidlá

D-galaktóza, zakúpená od Shanghai No. 2 Pharmaceutical Factory, bola zmiešaná s normálnym fyziologickým roztokom na 5 g/l a uložená v chladničke pri 4 stupňoch. CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)bola poskytnutá Nanjing Institute of Wild Plant, s použitím destilovanej vody na jej zloženie na 2,5 g/l a 5, 0 g/l. Súprava Step-down a zariadenie Y-bludisko boli produkty spoločnosti Shanghai Haodun Medical Apparatus Company.

Duplikácia modelu starnutia a experimentálny dizajn1,3,

ICR myši boli náhodne rozdelené do 4 skupín: kontrolná skupina (normálne myši), skupina s modelom starnutia; vysoká dávka CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)skupine a nízkej dávke CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)skupina, 55 myší v každej skupine. Pre kontrolnú skupinu 10 ml – kg-1. d_1 normálny fyziologický roztok bol subkutánne podaný každej myši. Pokiaľ ide o ostatné skupiny, 50 mg. kg-1 - d_1 D-galaktózy sa podkožne injikovala do každého zvieraťa počas 42 dní, aby sa zdvojnásobil model starnutia. Od začiatku duplikácie sa každému zvieraťu zo skupiny modelu starnutia intragastricky podalo 20 ml – kg-1 - d-1 normálneho fyziologického roztoku a 50 mg • kg-1 • d{{16 }}a 100 mg – kg-1 - d-1 CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)sa podávali intragastricky každej myši v nízkej dávke CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)skupina (liečebná skupina I) a vysoká dávka CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)skupine (liečebná skupina U) počas 64 dní.

Šesť hodín po poslednej medikácii bolo odobraných 30 myší z každej skupiny na testovaniefunkcie učenia a pamätepostupným testom a testom v Y-bludisku, 15 pre každý test. Plavecký test na vyhodnotenie fyzickej tolerancie myší sa uskutočnil 2 hodiny po poslednej medikácii s 15 myšami z každej skupiny. Okrem toho bolo na konci experimentu usmrtených 10 myší z kontrolnej skupiny, modelovej skupiny a liečebnej skupiny H na histomorfologické vyšetrenie.

Zníženie testu ⑷

Myši sa umiestnili do reakčnej komory, aby sa prispôsobili prostrediu na 3 minúty, potom sa začal tréning pripojením elektriny do komory. Myš bola v bezpečí, keď bola na plošine, ale keď skočila na dno komory (chyba), 36 V elektrická stimulácia prinútila myš skočiť späť na plošinu. Tréning trval 5 minút, zaznamenával sa kumulatívny počet chýb v priebehu 5 minút. Formálny test sa uskutočnil o 24 hodín neskôr, aby sa otestovala kapacita myši pri hľadaní bezpečnej oblasti na únik z elektrickej stimulácie. Myš sa položila na plošinu a zaznamenal sa latentný čas pred prvou chybou (čas zotrvania na plošine) a kumulovaný počet časov chybovania v priebehu 5 minút.

Test Y-bludisko

Y-bludisko je bludisko s tromi radiálne usporiadanými komorami s dnom vyrobeným z medených tyčí a ústiacimi do seba. Na vrchu je umiestnená lampa a na spodok každej komory je pripojený elektrický zdroj. Lampa sa rozsvieti, keď sa preruší elektrický obvod, a potom je komora pre zviera bezpečnou oblasťou. Naopak, keď je elektrický obvod napájaný, zatemnená komora sa stáva oblasťou elektrickej stimulácie, ktorá spôsobí elektrické poškodenie zvieraťa. Myš sa najprv umiestnila do Y-bludiska na 2 minúty, aby sa prispôsobila prostrediu, potom sa pripojil okruh (36 - 40 V) v komore, v ktorej myš zostala, aby myš prinútila uniknúť do bezpečnej oblasti. Tréning sa opakoval 15-krát, aby sa upevnila pamäť bezpečnej oblasti v myši v závislosti od svetla. Potom sa zaznamenal počet správnych a nesprávnych časov 10 testov, aby sa odhadla správna miera.

Test plávania (1)

Myš bola umiestnená do nádoby, ktorá bola 28 cm vysoká a naplnená vodou s teplotou 15 stupňov a plávala vo vode, kým sa nevyčerpala a neutopila. Čas od vloženia do vody po ponorenie sa počítal ako čas plávania, ktorý sa použil na vyhodnotenie fyzickej tolerancie myši.

Príprava vzorky histomorfologického hodnotenia ⑶

Desať myší odobratých z kontrolnej skupiny, starnúcej modelovej skupiny a ošetrovanej skupiny II bolo dekapitovaných a každej myši bola odobratá kôra ľavého veľkého mozgu, dvojnásobne fixovaná 4 percentami glutarovej a 1 percentnou kyselinou osmikovou, dehydratovaná gradientom acetónom, vložené pomocou Epon 812, zafarbené farbením Pb-U. Hlavné organely boli pozorované pod transmisným elektrónovým mikroskopom (TEM, Hitachi H-300, Japonsko).

Štatistická analýza

Údaje boli vyjadrené ako x plus s. Štatistické porovnania výsledkov sa uskutočnili pomocou párového t-testu.

VÝSLEDKY

Účinky CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)o funkciách učenia a pamäte

Ukázal to zostupný testfunkcie učenia a pamätestarnúcich myší klesol výraznejšie v porovnaní s kontrolnou skupinou, čo sa prejavilo skrátením doby latencie a zvýšením kumulatívnych časov robenia chýb. Čas latencie sa predĺžil a kumulatívne časy robenia chýb sa znížili v liečebnej skupine I a U; bol zistený významný rozdiel v porovnaní s modelovou skupinou starnutia. Výsledky ukázali, že CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)mohlo by to samozrejme zlepšiťfunkcie učenia a pamäte. Pozri tabuľku 1.

Výsledky testu Y-bludisko boli podobné ako pri postupnom teste, ktorý ukázal, že miera správnej bezpečnostnej pamäte bola u starnúcich myší znížená. Významný rozdiel existoval, keď sa liečebné skupiny I a H porovnávali s modelovou skupinou, čo naznačuje mieru správnej bezpečnostnej pamäte zvýšenej po CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)liečbe.

Účinok CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)o fyzickej tolerancii

Čas plávania u starnúcich myší sa výrazne skrátil v porovnaní s kontrolnou skupinou. Ukázalo sa, že iba vysoká dávka CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)môže výrazne predĺžiť čas plávania, má teda funkciu proti únave. Pozri tabuľku 2.

Účinok CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)o organelách v mozgových neurónoch

Pod elektrónovým mikroskopom sa pozorovalo 10 neurónov z každej vzorky a zmeral sa počet organel⑷. Výsledky ukázali, že hladiny lipofuscínu a lyzozómu sa zvýšili v neurónoch, počet mitochondrií a Golgiho komplexu sa znížil v skupine modelov starnutia. Tieto dve kritériá sa do určitej miery obnovili po veľkej dávke CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)liečbe. Pozri tabuľku 3.

Účinok CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)na ultraštruktúre mozgového tkaniva

Ukázalo sa, že mitochondriálna crista sa rozpadla a riedko distribuovala s vakuolárnou degeneráciou. Znížil sa počet teliesok NissP a objavila sa degranulácia v niekoľkých zdrsnenom povrchu endoplazmatického retikula, zredukovali sa glykogénové granule, sploštené Golgiho vakykomplex mierne rozšírený, so zníženým počtom synapsií a zníženým počtom synaptických vezikúl v presynaptickej zložke. Pozri obr.

Obr. 1 Mitochondrie sa nafúkli a ich synapsia zmizla v neurónoch. Skupiny modelov starnutia 10,000

Degeneratívne zmeny sa po CDP mierne zmiernili(Cistanchedeserticapolysacharidy)liečba zjavne zvýšenými nukleopórmi, telieskami a procesmi NissPs a zníženým lipofuscínom. Pozri obr. 2 a 3.

Obr. 2 Nisslove telá neurónov sa znovu objavili a stále je možné vidieť určité množstvo lipofuscínu. Liečebná skupina II, X 10, 000

Obr. 3 Jadrový pór sa zväčšil a v neurónoch je vidieť jadierko, cytoplazma je bohatá. Liečebná skupina K, X 10, 000

DISKUSIA

The mechanism of E>-galaktóza pri vyvolávaní starnutia je založená na teórii voľných radikálov starnutia. V dôsledku toho by D-galaktóza mohla zvýšiť obsah voľných radikálov v organizmoch a zhoršiť funkcie organel prostredníctvom poškodenia oxidáciou. Mitochondrie ako „energetická továreň“ buniek môžu v dýchacom procese produkovať množstvo voľných radikálov a tieto voľné radikály môžu byť ľahko napadnuté. Mitochondrie starnúceho organizmu sú ľahko poškodené voľnými radikálmi, poškodenie nebolo možné opraviť kvôli nedostatku reparačnej kapacity.) a bolo by čoraz horšie až do konečnej smrti. Lipofuscín je dôležitým znakom starnutia, jeho tvorba úzko súvisí s poškodením voľnými radikálmi, preto sa často používa ako kritérium pri hodnotení úrovne starnutia.

Výsledky tejto štúdie ukázali, že CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)vo vysokých dávkach by mohli zvýšiť fyzickú toleranciu u starnúcich myší a zlepšiť ichfunkcie učenia a pamätea zmierniť úroveň poškodenia mozgovej ultraštruktúry. Všetky tieto výsledky sú v zhode s naším predchádzajúcim výskumom (1,2) a naznačujú, že CDP(Cistanchedeserticapolysacharidy)môže predĺžiť životnosť, jeho účinok proti starnutiu môže súvisieť s jeho antioxidačnou schopnosťou a účinkami na zachytávanie voľných radikálov⑵ na stabilizáciu membránového systému a udržanie stabilného vnútrobunkového prostredia.

Z: „Vplyv polysacharidov Cistanche Desertica na funkcie učenia a pamäte a ultraštruktúru mozgových neurónov u experimentálnych starnúcich myší“ od SUN Yun a kol.

---CJIM2001;7(4) =288--292

LITERATÚRA

1. SUN Y, LIN AP, ZHANG HQ. Výskum Sin-ťianguCistanchedeserticana antioxidačné poškodenie spôsobené voľnými radikálmi. China J Chinese Material Medica 1994; 19 (7): 433.

2. SUN Y, WANG DJ, SHEN SQ a kol. Pozorovanie Sin-ťianguCistanche deserticana hepatocytoch a mozgovej kôre starnúcich myší transmisným elektrónovým mikroskopom. Tradičný čínsky výskum drog 1997;8(1) * 30.

3. GONG GQ, XU FB. Štúdia modelu starnutia u myší. J China Pharmaceutical University 1991;22(2):101.

4. LI YK. Experimentálna metodológia čínskych bylín vo farmakológii. Shanghai: Science and Technology Publishing House 1991: 172.

5. ZENG ZH, ZHANG ZY. Oxidačné poškodenie mitochondriálnej DNA a starnutie voľnými radikálmi. Progr Biochem a Biophys 1995; 22 (5): 430.