Účinky Cistanche Deserticola na akútne poškodenie pľúc u potkanov so sepsou

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

[Abstrakt]Cieľ: Študovať účinokCistanche deserticolana akútporanenie pľúc(ALI) u potkanov so sepsou. Metódy: Model sepsy bol vyrobený podviazaním slepého čreva a punkciou. Uskutočnili sa histopatologické vyšetrenia a zmerali sa biologické markery ALI. Výsledky: Pod svetelným mikroskopom v skupine s fyziologickým roztokom došlo k edémupľúcny medzipriestor, veľký počet erytrocytov a neutrofilov a plazmatický proteín v alveolárnych dutinách. Thepľúcavlhká/suchá hmotnosť, rýchlosť neutrofilov a obsah proteínov v pľúcnej alveolárnej lavážnej tekutine, pľúcna vaskulárna permeabilita a pľúcna alveolárna permeabilita a MDA, SOD, ako aj MPO, boli zodpovedajúcim spôsobom významne zvýšené. V skupine sCistanche deserticolaliečby boli tieto indexy ALI významne nižšie ako v skupine s fyziologickým roztokom.

Záver: Cistanche deserticolamá skvelé účinky na ALI u potkanov so sepsou. Terapeutický mechanizmus je pravdepodobne prostredníctvom inhibície neutrofilov a oxidačných voľných radikálov.

【Kľúčové slová】sepsa; Akútne poškodenie pľúc; Cistanche deserticola

Sepsa je klinická núdzová a kritická choroba a hľadanie účinných liekov na liečbu bolo vždy hlavným problémom v klinickom a základnom výskume. Patogenéza sepsy tradičnej čínskej medicíny je nedostatok spravodlivosti a bujnosť zla. Útočná terapia zlého blahobytu tela je jedným z účinných liečebných opatrení.Cistancheje tradičné tonikum čínskej medicíny. Farmakologické štúdie potvrdili, že má ochranné funkcie, ako je zvýšenie rýchlosti syntézy bunkovej DNA a odolnosť voči voľným radikálom. Autor experimentálne pozoruje účinokCistanche na poškodenie pľúcpri sepse, aby sa poskytol účinný prieskum na liečbu sepsy.

Cistanche Echinacoside lieči ochorenie pľúc

1 Materiál a metódy

1. 1 ZvieraZdravie 40 samcov potkanov 5D s hmotnosťou 200 ~ 250 g, ktoré poskytlo Experimentálne zvieracie centrum Huazhongskej univerzity vedy a techniky, číslo kontroly kvality: TJLA-2008-1670, bolo náhodne rozdelených do 3 skupín: 8 normálnych fyziologických skupín, Ig/ Boli 12 potkanov v skupine ml baklažánovej pasty a 12 v skupine 5 g/mlCistancheskupina. Experimentálnym zvieratám boli podávané zodpovedajúce lieky rutinnou sondou počas 15 dní, dvakrát denne (t.jCistancheextrakt z deserticoly poskytla prípravovňa tradičnej čínskej medicíny tejto nemocnice) a dávka 200 mg/kg bola použitá u pokusných zvierat podľa metódy z literatúry U] 12 minút po podviazaní a perforácii slepého čreva. Zbierka exemplárov.

1.2 Histologické vyšetrenie pľúc potkanov.Vezmite malé množstvo ľavého laloku zvieraťapľúcaz každej skupiny to zafixujte 10 percentným formaldehydom, rez zaliať parafínom a farbiť HE, pozorovať bežným optickým mikroskopom a na základe toho zobraťpľúcaproblém vyrobiť 1 mm3 za 25 Bol fixovaný v percentnom roztoku glutaraldehydu, potom fixovaný v 1 percentnom roztoku tetoxidu, dehydratovaný etanolom a acetónom, vložený do Eponu 81, pripravené ultratenké rezy, farbené uránom a olovom a pozorované transmisným elektrónom mikroskop.

1.3 Stanovenie pomeru hmotnosti za mokra k suchej hmotnosti u potkanieho pľúcneho problému, pomeru počtu buniek v alveolárnej lavážnej tekutine a hmotnostného pomeru obsahu bielkovín.Ďalšia skupina potkanov podstúpila alveolárnu laváž po torakotómii a lavážna tekutina sa podrobila spočítaniu buniek a klasifikácii buniek pod mikroskopom. Na stanovenie a výpočet obsahu bielkovín sa používa metóda Coomassie brilantnej modrejpľúcaindex permeability (proteín alveolárnej lavážnej tekutiny/plazmatický proteín, LPI).

1.4 Zmeny pľúcnej vaskulárnej permeability (PVP) u potkanovPodľa spôsobu, ktorý zaviedli Zhou et al. (2), po podaní sa zvieratá v každej skupine podrobili podviazaniu a perforácii slepého čreva a na otvorenie hrudníka a odstránenie pľúc sa použila injekcia do femorálnej žily 50 mg/kg lantánu. Odstráňte okolité problémy, namočtepľúcavo formamidovom roztoku (množstvo formamidu je 20 mg/100 g telesnej hmotnosti), inkubujte v 45-50T inkubátore 72 hodín, počkajte, kým sa vylúhujú všetky pigmenty v problémoch, odstráňte problémy, odstredte a odoberte supernatant, Pomocou ultrafialového spektrofotometra vykonajte kolorimetriu pri 620 nm a vypočítajte obsah etanolu podľa štandardnej krivky na určenie zmeny PVP.

1.5 Stanovenie malondialdehydu (MDA) pri probléme s pľúcami potkanovNa stanovenie aktivity MDA sa použila metóda kyseliny tiobarbiturovej (TBA). Pridajte 4 ml 1,67 mol/l kyseliny sírovej. 0.541 percent kyseliny fosfónovej do 50 ml testovacej vzorky, dobre premiešajte, centrifugujte pri 3000 ot./min. počas 10 minút a spracujte precipitáciu ešte raz, ako je uvedené vyššie, potom pridajte 1 ml dvakrát destilovanej vody, 1 ml roztoku TBA, 95 percent bezvodého kúpeli počas 60 minút, extrakcia 5 ml n-butanolu, tetraetoxypropán ako štandard, konečná koncentrácia lnmol/l, fluorescenčný spektrofotometer pri 532 nm na meranie absorbancie.

1.6 Stanovenie superoxiddismutázy (SOD) pri problémoch s pľúcami potkanovPodľa metódy v literatúre [4] bola aktivita SOD stanovená metódou Huangpuyin oxidázy (súprava zakúpená od Nanjing Jiancheng Institute of Biological Engineering).

1.7 Stanovenie myeloperoxidázy (MPO) u potkanovpľúcaproblém.Vezmite problém s pľúcami, aby ste čo najviac premyli zvyškovú krv v izotonickom fyziologickom roztoku a umiestnite ju do fosfátového tlmivého roztoku obsahujúceho {{0}}.5 percent cetyltrimetylbromidu (PH6.0) Pripravte 5 percent homogenátu, a pracujte podľa pokynov súpravy.

1.8 Štatistické metódyPoužite štatistický softvér SPSS a merajte údaje vo forme (x±s) pomocou t-testu a X2 testu.

Cistanche

2 výsledky

2.1 Porovnanie pomeru mokrej/suchej hmotnostipľúcaproblémy, pomer počtu buniek a obsah bielkovín v alveolárnej výplachovej tekutine v každej skupine sú uvedené v tabuľke 1.pľúcapomer vlhkej/suchej hmotnosti v skupine s fyziologickým roztokom bol významne vyšší ako v skupine s fyziologickým roztokomCistancheskupina (P<0.05 or="" 0.01).="" the="" cell="" count="" ratio="" and="" protein="" content="" in="" the="" alveolar="" lavage="" fluid="" of="" the="">Cistancheskupine boli významne nižšie ako v skupine s fyziologickým roztokom (P<0.05 or="" 0.01).="" 0.="" 01),="" and="" with="" the="" increase="" of="" the="" dose="" concentration,="" it="" shows="" a="" significant="">

Tabuľka 1 Porovnanie pomeru vlhkej/suchej hmotnosti pľúcneho problému a pomeru počtu buniek a obsahu bielkovín v alveolárnej výplachovej tekutine potkanov v každej skupine (X ± S)

V porovnaní so skupinou s normálnym soľným roztokom P<0.><001. below="" is="" the="">

2.2 Porovnanie morfologických zmien pľúcnych problémov potkanov v každej skupine. Všeobecné pozorovanie: Thepľúcav skupine s fyziologickým roztokom boli výrazne zväčšené a tmavočervené, s rôznym stupňom prekrvenia a edému na povrchu a veľkým počtom pľúcnych infarktov na okraji; pľúca vCistancheskupina bola svetločervená s povrchom Mierna kongescia a edém, bez zjavného pľúcneho infarktu. Pozorovanie svetelným mikroskopom ukázalo, že v skupine s fyziologickým roztokom sa vyskytla alveolárna a pľúcna intersticiálna kongescia a edém, veľké množstvo difúznej infiltrácie neutrofilov v alveolárnej dutine, určitá tvorba abscesov a rôzne stupne atelektázy, nekrózy a kompenzačného emfyzému. , Trombus a podobná tvorba priehľadnej membrány. Vyššie uvedené lézie v skupine Cistanche boli výrazne znížené. V skupine s fyziologickým roztokom alveolárne epitelové bunky opuchli, lamelárne telieska sa zrejme vyprázdnili, vytvorili sa veľké vakuoly, kapilárne endotelové bunky boli opuchnuté, endotelové bunky boli kontinuálne poranené, medzibunkový priestor sa rozšíril, kapiláry a bazálne membrány alveolov boli uvoľnené a rozšírené. Nepravidelné zahusťovanie, nerovnomerná hrúbka. V skupine Cistanche neboli bunky alveolárneho epitelu opuchnuté, vyprázdňovanie lamelárneho telieska bolo znížené, počet vytvorených vakuol bol malý, spojenie medzi endotelovými bunkami kapilár bolo takmer normálne a bazálna membrána bola mierne uvoľnená a nepravidelne zhrubnutá. V porovnaní so skupinou cistanche Ig/niL mala skupina 5g/ml cistanche menší rozsah morfologických zmien pľúcneho problému a stupeň poškodenia pľúc bol ľahší.

2.3 Porovnanie LPI a PVP potkanov v každej skupine je uvedené v tabuľke 2. LPI a PVP v skupine s fyziologickým roztokom boli významne vyššie ako v skupine s Cistanche (PV0.05 alebo 0,01 ). LPI a PVP v skupine Cistanche boli nižšie, čo malo významný vzťah medzi dávkou a účinkom.

2.4 Porovnanie aktivity MDA.SOD.MPO vpľúcaProblémy potkanov v každej skupine sú uvedené v tabuľke 3. Obsah MDA vpľúcaproblém skupiny s fyziologickým roztokom bol výrazne vyšší ako problém v skupineCistancheskupina, zatiaľ čo aktivita SOD a aktivita MPO pri pľúcnom probléme v skupine Cistanche boli významne zvýšené (F<0.05 or="">

3 Diskusia

Viacorgánové zlyhanie je hlavnou príčinou ireverzibilného stavu a vysokej úmrtnosti v neskorom štádiu sepsy (5). Ochrana funkcie orgánov má veľký význam pri znižovaní vysokej miery klinickej úmrtnosti na sepsu. Pľúca sú prvým orgánom so zlyhaním viacerých orgánov. 1/3 pacientov so sepsou zomiera na akútne poškodenie pľúc (ALI) a syndróm akútnej respiračnej tiesne (ARDS). Hlavným patofyziologickým mechanizmom ALI je akumulácia veľkého počtu neutrofilov v pľúcnom probléme a aktivuje sa a priľne k vaskulárnym endotelovým bunkám. Súčasne sa zvyšuje koncentrácia redukovanej oxidázy koenzýmu II, ktorá prenáša jednotlivé elektróny, čo spôsobuje respiračné výbuchy, vytvára veľké množstvo voľných kyslíkových radikálov a spôsobuje poškodenie a funkciu bunkových membrán a membránových štruktúr prostredníctvom silnej oxidácie. Prekážky⑹. Lipidový peroxid odráža zmenu voľných kyslíkových radikálov v probléme a priamo súvisí so stupňom poškodenia pľúc (7). V enzymatickom a neenzymatickom antiradikálovom oxidačnom systéme tela udržiava aktivita SOD dobrú koreláciu so stupňom poškodenia problému ⑺. V porovnaní so skupinou s fyziologickým roztokom vykazovali aktivity MDA a SOD v skupine Cistanche štatisticky významné rozdiely. Cistanche má funkcie posilnenia imunitnej funkcie, proti starnutiu a zvýšenia rýchlosti syntézy bunkovej DNA. Experimentálne výsledky ukázali, že pľúcny koeficient, PLT, pomer neutrofilov v alveolárnej lavážnej tekutine a pľúcna vaskulárna permeabilita v skupine Cistanche boli významne znížené, MDA aktivita pľúcneho problému sa znížila, SOD sa výrazne zvýšila a aktivita MPO sa znížila. Morfologické pozorovanie zároveň ukázalo, že stupeň poškodenia pľúcnymi problémami sa výrazne znížil, infiltrácia neutrofilov sa znížila a skupina s 5 g/ml Cistanche mala menšie poškodenie pľúc ako skupina s Ig/ml Cistanche a bola dobrá vzťah medzi dávkou a účinkom. To naznačuje, že Cistanche má významný ochranný účinok na ALI. Mechanizmus môže byť: (1) Inhibícia migrácie zápalových buniek vpľúcaredukovať voľné kyslíkové radikály produkované neutrofilmi a inými aktivovanými bunkami tak, aby bol biofilm chránený; (2) Podporovať syntézu nukleových kyselín a proteínov a chrániť pred poškodením pľúc Účinok; (3) Posilniť imunitnú funkciu fagocytov a znížiťpľúcaproblémové poškodenie spôsobené endotoxínom. Experimentálne výsledky poskytujú experimentálny základ pre liečbu akútneho poškodenia pľúc pri klinickej sepse posilnením tela a posilnením deficitu.

referencie

[1] Jin Huiming. Model sepsy po podviazaní a perforácii slepého čreva [J]. Chinese Journal of Pathophysiology "990, 6 (2): 126 ~ 127.

[2] Zhou WG, Mc Collum MO, Levine BA a kol. Úloha faktora aktivujúceho krvné doštičky pri akútnom poškodení pľúc spojenom s pankreatitídou u potkanov [J]. Am J Pathol, 1992, 140: 971 -979.

[3] Wang Qian, Zhu Xiaofeng, Zhao Xilong. Experimentálne metódy modernej medicíny [M]. Peking: People's Medical Publishing House, 2007:508.

[4] Zhang Xiuming, Li Jianzhai, Wei Mingjing. Moderná klinická biochemická laboratórna veda [M]. Peking: People's Military Medical Press, 2008: 896.

[5] Luo Zhengyao. Šokové štúdie [M]. Tianjin: Tianjin Science and Technology Press, 2008:345.

[6]Xanthous CA, hala JB. Samsel RW. Endotoxín pri chorobách ľudí, časť 2Biologický účinok a klinické hodnotenie antiendotoxínových teórií[J]