HydroZitLa inhibuje tvorbu kameňov šťavelanu vápenatého u nefrolitických potkanov a podporuje dlhovekosť u nematód Caenorhabditis Elegans, časť 1

Nízky príjem tekutín, nízke vylučovanie citrátu močom a vysoký oxidačný stres sú hlavnými príčinnými faktormi nefrolitiázy s oxalátom vápenatým (CaOx). HydroZitLa obsahuje citrát a prírodné antioxidanty a je vyvinutý tak, aby korigoval tieto tri faktory súčasne. Antioxidanty môžu teoreticky predĺžiť životnosť organizmov. V tejto štúdii sme predklinicky skúmali antipatogénne účinky HydroZitLa, ktoré predlžujú životnosť a pôsobia proti starnutiu, v bunkách HK-2, samcoch potkanov Wistar a Caenorhabditis elegans. HydroZitLa významne inhibovala agregáciu kryštálov CaOx in vitro a znížila oxidačný stres v bunkách HK-2 vystavených litogénnym faktorom. Pre experimentálnu nefrolitiázu boli potkany rozdelené do štyroch skupín: etylénglykol (EG), EG plus HydroZitLa, EG plus Uralyt-U a neošetrená kontrola. Depozity CaOx v obličkách potkanov EG plus HydroZitLa a EG plus Uralyt-U boli významne nižšie ako u potkanov EG. Intrarenálna expresia 4-hydroxynonenalu u potkanov EG plus HydroZitLa bola významne nižšia ako u potkanov EG. Hladiny oxalátu v moči potkanov EG plus HydroZitLa a EG plus Uralyt-U boli významne nižšie ako hladiny potkanov EG. Hladiny citrátu v moči potkanov EG plus HydroZitLa a EG plus Uralyt-U boli obnovené na úroveň u normálnych kontrolných potkanov. U C. elegans suplementácia HydroZitLa významne predĺžila strednú dĺžku života háďatiek až o 34 percent bez zmeny schopnosti kŕmenia. Akumulácia lipofuscínu v nematódach doplnených HydroZitLa bola významne nižšia ako v kontrolách bez doplnkov. Okrem toho HydroZitLa inhibovala skracovanie telomér, upreguláciu p16 a predčasné starnutie v bunkách HK-2 vystavených litogénnym stresorom. Závery, HydroZitLa inhiboval oxidačný stres a tvorbu CaOx in vitro aj in vivo. HydroZitLa predĺžila životnosť a oddialila nástup starnutia C. elegans a ľudských obličkových buniek. Tieto predklinické dôkazy naznačujú, že HydroZitLa je prospešná pre inhibíciu tvorby CaOx kameňov, podporuje dlhovekosť a spomaľuje starnutie.

Glykozid cistanche môže tiež zvýšiť aktivitu SOD v tkanivách srdca a pečene a výrazne znížiť obsah lipofuscínu a MDA v každom tkanive, účinne zachytáva rôzne reaktívne kyslíkové radikály (OH-, H₂O₂ atď.) a chráni pred poškodením DNA. OH-radikálmi. Cystanche fenyletanoidové glykozidy majú silnú schopnosť zachytávať voľné radikály, vyššiu redukčnú schopnosť ako vitamín C, zlepšujú aktivitu SOD v suspenzii spermií, znižujú obsah MDA a majú určitý ochranný účinok na funkciu membrány spermií. Polysacharidy Cistanche môžu zvýšiť aktivitu SOD a GSH-Px v erytrocytoch a pľúcnych tkanivách experimentálne starnúcich myší spôsobenú D-galaktózou, ako aj znížiť obsah MDA a kolagénu v pľúcach a plazme a zvýšiť obsah elastínu. dobrý čistiaci účinok na DPPH, predĺženie doby hypoxie u starnúcich myší, zlepšenie aktivity SOD v sére a oddialenie fyziologickej degenerácie pľúc u experimentálne starnúcich myší Experimenty ukázali, že pri bunkovej morfologickej degenerácii má Cistanche dobrú antioxidačnú schopnosť a má potenciál byť liekom na prevenciu a liečbu chorôb starnutia kože. Zároveň má echinakozid v Cistanche významnú schopnosť vychytávať voľné radikály DPPH a má schopnosť vychytávať reaktívne formy kyslíka a zabraňovať degradácii kolagénu vyvolanej voľnými radikálmi a tiež má dobrý reparačný účinok pri poškodení aniónom voľných radikálov tymínu.

Kliknite na položku Funguje Cistanche

【Ďalšie informácie:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:{0}}】

Skratky

BSA Hovädzí sérový albumín

CaOx Oxalát vápenatý

COM Oxalát vápenatý monohydrát

EG Etylénglykol

H2O2 Peroxid vodíka

HZL HydroZitLa

iCOCI index kryštalizácie šťavelanu vápenatého zreagovaného na indol

NaOx Oxalát sodný

ROS Reaktívne formy kyslíka

RTL Relatívna dĺžka telomér

SIPS Predčasné starnutie vyvolané stresom

TA tokoferylacetát

TAC Celková antioxidačná kapacita

4-HNE 4-Hydroxynonenal

Ochorenie močových kameňov je starodávny stav u ľudí zdokumentovaný od egyptskej éry1,2. Toto ochorenie je stále významným urologickým problémom na celom svete s progresívne rastúcou prevalenciou. Močové kamene sa skladajú prevažne z oxalátu vápenatého (CaOx), ktorý sa väčšinou tvorí v obličkách a je veľmi recidivujúci. Hoci obličkový kameň je všeobecne vnímaný ako stav, ktorý nie je život ohrozujúci, má smrteľné následky. Kamene postupne poškodzujú obličky a nakoniec spôsobujú chronické ochorenie obličiek3–7. Ekonomická záťaž spôsobená kameňmi je značná, pretože náklady na liečbu kameňov a ich manažment sú porovnateľné s kombinovanými nákladmi na liečbu rakoviny prostaty a močového mechúra8. Preto je potrebná nová medicínska profylaxia tvorby kameňov.

Nedostatočný príjem tekutín znížil vylučovanie citrátu močom a zvýšený oxidačný stres sú tri hlavné príčinné faktory litogenézy CaOx. Tieto faktory by sa mali korigovať, aby sa zabránilo kalcifikácii CaOx. Príjem tekutín 2,5–3 l/deň je všeobecným preventívnym opatrením9. Citrát draselný je hlavným liekom na liečbu kameňov, pretože hypocitratúria je najznámejšou príčinou tvorby kameňov CaOx a ich recidívy. Keďže na účinnú prevenciu recidívy kameňov je potrebná dlhodobá liečba citrátom draselným, zlá adherencia sa stáva problémom kvôli vedľajším účinkom a zlej/slanej chuti10–12. Ukázalo sa, že zlepšenie chuti pridaním sukralózy zlepšuje toleranciu suplementácie citranu draselného13.

Oxidačný stres vyvolaný reaktívnymi formami kyslíka (ROS) sa životne podieľa na litogenéze CaOx14–19. Ukázalo sa, že diéta s nízkym obsahom antioxidantov prispieva k tvorbe kameňov u experimentálnych potkanov zvýšením produkcie ROS, oxidačným stresom a intrarenálnym ukladaním CaOx20. Antioxidačná intervencia zmiernila oxidačný stres a inhibovala ukladanie CaOx u nefrolitických potkanov16, 21–23. Prostriedky na báze liečivých rastlín a tradičná medicína na ošetrenie kameňa zásadne zmiernili oxidačný stres24.

Tradičná bylinná medicína alebo fytomedicína má výhodu dlhodobého používania v komunite a pacienti ich vo všeobecnosti považujú za prirodzené a bezpečné režimy. Treba však poznamenať, že pred klinickým zavedením je potrebné poskytnúť vedecké dôkazy o účinnosti a bezpečnosti. Predpokladali sme, že režim kombinujúci modernú a tradičnú medicínu by mohol byť inovatívnym riešením na minimalizáciu vedľajších účinkov bez ohrozenia terapeutickej účinnosti. Vyvinuli sme novú kombináciu tradičnej a modernej medicíny s názvom HydroZitLa (Hydrozitla alebo Hyla) ako alternatívnu liečbu CaOx kameňov.

Hlavnými aktívnymi antipatogénnymi zložkami HydroZitLa sú citrát a vodný extrakt z banánovej stonky. Banánová stonka (Musa spp.) je dlho známy indický ajurvédsky tradičný liek na liečbu močových kameňov25 a jeho inhibičná aktivita na kamene bola experimentálne preukázaná26–29. Poonguzhali a Chegu ukázali, že extrakt z banánových stoniek významne znížil vylučovanie oxalátu močom u hyperoxalurických urolitických potkanov30. Predbežná klinická štúdia Pillaia v roku 1995 ukázala, že jadro banánového pseudostonku by sa mohlo použiť pri liečbe urolitiázy31. Okrem toho má šťava z banánových stoniek diuretický účinok, ktorý môže pomôcť vyplaviť litogénne kryštály a uľahčiť prechod kameňov. Kým citrát draselný dodávaním citrátu koriguje len rizikový faktor hypocitratúrie, nápoj HydroZitLa dokáže súčasne korigovať všetky tri vyššie spomenuté rizikové faktory CaOx zvýšením príjmu tekutín, obnovením citrátu v moči a dodaním prírodných antioxidantov.

V tejto štúdii sme skúmali, či HydroZitLa môže prejavovať inhibičný účinok CaOx na kamene in vitro a in vivo modelov. Stanovila sa predklinická toxicita HydroZitLa v ľudských obličkových (HK-2) bunkách a myšiach. Vzhľadom na to, že HydroZitLa obsahoval antioxidanty rastlinného pôvodu, snažili sme sa zistiť, či môže predĺžiť životnosť a znížiť fenotyp starnutia v modeli Caenorhabditis elegans. Skúmali sme tiež, či HydroZitLa môže inhibovať skracovanie telomér a predčasné starnutie v HK-2 bunkách.

Výsledky

HydroZitLa: bezpečný nápoj na konzumáciu. HydroZitLa bola negatívna na Clostridium spp./{{0}},1 g, Salmonella spp./25 g a Staphylococcus aureus/0,1 g. Arzén nebol zistený. Olovo bolo nájdené na extrémne nízkej úrovni (0.033 ppm). Hladiny kovov, ako sú Tl, As, Se, Mo, Zn, Sb, Pb, Cd, Co, Ni, Fe, Mn, Cr, Mg, V, Be, Ca, Cu, Ti, Sr a Li, v HydroZitLa, merané pomocou indukčne viazanej plazmovej optickej emisnej spektrometrie (ICP-OES) sú uvedené v doplnkovej tabuľke 1. Toxické kovy vrátane Cd, Cr, As, Ni, Tl, Sb, Co, Be, V a Li sa nezistili . Stopové prvky, ako napríklad Mg, Zn, Ca a Fe, sa našli pri 14.04±{{20}}.05, 2,09±0,05, 0. 86±0,02, respektíve 0,16±0,001 ppm.

In vitro, cytotoxicity of HydroZitLa in HK-2 cells using the 3-(4,5-dimethylthiazol-2yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay was performed and reported in our previous study32. Increased HydroZitLa   concentration gradually decreased cell survival. Te IC50 of HydroZitLa in HK-2 cells was 24.7% v/v. In vivo, acute toxicity testing revealed that all HydroZitLa-administered mice survived until the end of the experiment  (14 days). No gross lesions were found in the visceral organs in the HydroZitLa-administered group and the control group. Therefore, the LD50 of HydroZitLa was>20 ml/kg.

Inhibícia agregácie CaOx a antioxidačná funkcia HydroZitLa. HydroZitLa významne inhibovala agregáciu kryštálov monohydrátu oxalátu vápenatého (COM), ale hovädzí sérový albumín (BSA, 1 mg/ml) nie (obr. 1A). Kyselina citrónová silne inhibovala agregáciu COM (doplnkový obrázok 1).

Koncentrácia HydroZitLa pri 10 percentách (v/v) poskytla najväčší antioxidačný účinok s najnižšou cytotoxicitou. Preto sme na následné ošetrenie v modeli bunkovej kultúry použili 10 percent (v/v) HydroZitLa. Produkcia ROS v HK-2 bunkách vystavených H202 a COM bola významne zvýšená v porovnaní s kontrolou, ale bola významne znížená po spoločnom ošetrení HydroZitLa (obr. 1B). Okrem toho, HydroZitLa významne znížila hladiny proteínového karbonylového obsahu v HK-2 bunkách vystavených H2O2 a COM (obr. 1C). Expozícia buniek HK-2 H2O2 (1000 µM) a COM (150 µg/cm2) spôsobila zmeny v morfológii buniek a zvýšenú smrť buniek. Súčasná liečba HydroZitLa zabránila morfologickej zmene, zachránila bunky pred apoptózou a obnovila bunkovú proliferáciu (obr. 1D).

Inhibícia usadenín kryštálov CaOx v obličkách potkanov. Biochemický profil pointervenčných 24-h vzoriek moču (35. deň) získaných od experimentálnych potkanov je uvedený v tabuľke 1. Obličky etylénglykolových (EG) potkanov boli zväčšené a bledé (obr. 2A) a ich hmotnosti boli významne vyššie ako u potkanov EG plus HydroZitLa a EG plus Uralyt-U (obr. 2B). Farbenie hematoxylínom a eozínom (H&E) odhalilo, že obličky potkanov EG mali silné známky zápalu, zatiaľ čo obličky potkanov EG plus HydroZitLa a EG plus Uralyt-U sa zdali normálne, podobne ako u normálnych kontrolných potkanov (obr. 2A). Všetky obličkové rezy zafarbené H&E sú zobrazené na doplnkovom obrázku 2.

Dvojlomné depozity kryštálov CaOx boli výrazne pozorované v obličkových rezoch EG potkanov, ale nenašli sa v obličkových rezoch normálnych kontrolných potkanov (obr. 3A). Tese CaOx depozity takmer zmizli v obličkových rezoch potkanov EG plus HydroZitLa a EG plus Uralyt-U. Polarizované mikrofotografie všetkých obličkových rezov sú zobrazené na doplnkovom obrázku 3.

Farbenie Yasue potvrdilo, že kryštály CaOx (čierne precipitáty) sa vo veľkej miere hromadili v obličkách (v kôre aj dreni) potkanov EG, ale toto ukladanie CaOx bolo pozoruhodne inhibované pomocou HydroZitLa a Uralyt-U (obr. 3A). Počet čiernych CaOx precipitátov v obličkových rezoch potkanov EG plus HydroZitLa a EG plus Uralyt-U bol významne nižší ako počet u potkanov EG (obr. 3B). Výsledky farbenia Yasue všetkých obličkových rezov sú uvedené na doplnkovom obrázku 4.

Zníženie expresie 4-hydroxynonenalu (4-HNE) v obličkových tkanivách. Intrarenálna expresia 4-HNE, ako markera oxidačného stresu, bola výrazne zvýšená u EG potkanov v porovnaní s normálnymi kontrolnými potkanmi (obr. 4A). Celkovo boli expresie 4-HNE v obličkách potkanov EG plus HydroZitLa a EG plus Uralyt-U nižšie ako u potkanov EG. Avšak kvantitatívne bol podiel 4-HNE-pozitívnych buniek významne nižší len u potkanov EG plus HydroZitLa ako u potkanov EG (obr. 4A). Výsledky 4-farbenia HNE všetkých obličkových rezov sú uvedené na doplnkovom obrázku 5. V tejto štúdii sme tiež vykonali imunohistochemické farbenie na štiepenú kaspázu-3, ale nepozorovali sme významnú zmenu tohto apoptotického marker medzi skupinami (doplnkový obrázok 6).

Zníženie hladín indexu kryštalizácie oxalátu vápenatého (iCOCI) v moči a reagovaného indolom. Oxalát v moči bol zvýšený u EG potkanov v porovnaní s kontrolnými potkanmi. Toto zvýšenie oxalátu v moči bolo významne znížené po ošetreniach HydroZitLa a Uralyt-U (obr. 4B). Na rozdiel od toho bol citrát v moči znížený u potkanov EG v porovnaní s kontrolnými potkanmi. Hoci liečba HydroZitLa a Uralyt-U významne nezvýšila hladiny citrátu v moči v porovnaní s EG potkanmi, mohli obnoviť hladiny citrátu v moči na úroveň zistenú u normálnych kontrolných potkanov (obr. 4C). Hladiny kyseliny močovej v moči v porovnaní medzi skupinami EG, EG plus HydroZitLa a EG plus Uralyt-U sa významne nelíšili (obr. 4D). Podobne ako u oxalátu v moči boli hladiny iCOCI v moči potkanov EG plus HydroZitLa a EG plus Uralyt-U významne nižšie ako u potkanov EG (obr. 4E).

C. elegans predĺženie životnosti. Suplementácia s HydroZitLa (10–40 percent v/v) výrazne predĺžila maximálnu životnosť divokého typu C. elegans (obr. 5A). Najvyšší účinok na predĺženie životnosti bol s 30 percentami v/v, čo mohlo zvýšiť medián prežitia háďatiek zo 16,0 dní (kontrola) na 21,5 dní (34,4 percentné zvýšenie). Medián prežitia háďatiek doplnených o 10 percent, 20 percent a 40 percent v/v HydroZitLa sa výrazne predĺžil na 18,5 (15,6 percentný nárast), 19,5 (21,9 percentný nárast) a 21,0 (32,3 percentný nárast) dní, v uvedenom poradí. Účinok všetkých testovaných koncentrácií HydroZitLa (od 1 do 100 percent v/v) na prežitie C. elegans sa odráža na doplnkovom obrázku 7.

Správanie pri príjme potravy, indikované rýchlosťou pumpovania hltanom, v dňoch 0, 5, 10 a 15 sa významne nelíšilo medzi suplementáciou HydroZitLa (20 percent, 30 percent a 40 percent v/v) a bez doplnené kontrolné háďatká (obr. 5B).

Hladina autofluorescenčného lipofuscínu (marker starnutia) sa monitorovala vo vnútri háďatiek po suplementácii 20 percentami, 30 percentami a 40 percentami v/v HydroZitLa (obr. 6A). Suplementácie HydroZitLa vo všetkých testovaných koncentráciách významne znížili hladiny akumulácie lipofuscínu v nematódach v porovnaní s kontrolou (obr. 6B).

Inhibícia opotrebovania telomér, upregulácia p16 a predčasné starnutie v bunkách HK-2. Relatívne dĺžky telomér buniek HK-2 ošetrených H202, NaOx a COM boli významne kratšie ako u neošetrených kontrol (obr. 6C). Súbežná liečba HydroZitLa významne bránila skracovaniu telomér v bunkách HK-2 ošetrených H2O2, NaOx a COM.

Výsledky dvojitého farbenia galaktozidázy spojenej so senescenciou (SA- -gal) a p16 preukázali, že H2O2, NaOx a COM-indukované stresom indukované predčasné starnutie (SIPS), ako naznačuje zvýšený podiel SA{{8 }}gal-pozitívne bunky a upregulácia p16 v HK-2 bunkách (obr. 6D). p16 bol intenzívne značený v týchto SA- -gal-pozitívnych bunkách. Súbežná liečba HydroZitLa významne inhibovala SIPS (zníženie SA- -gal pozitivity) a upreguláciu p16 v HK-2 bunkách vystavených H2O2, NaOx a COM (obr. 6D).

Diskusia

Pokrok vo vývoji liekov na obličkové kamene je pomerne pomalý a už desaťročia neboli klinicky implementované žiadne nové lieky33. Substitučná liečba alkalickým citrátom je stále široko používaným liekom na prevenciu recidívy kameňov. Gastrointestinálne vedľajšie účinky a zlá chuť sú hlavnými nevýhodami liečby citrátom draselným, ktoré spôsobujú slabú komplianciu11–13. V smernici EAU o urolitiáze sa uvádza, že ideálny liek by mal zastaviť tvorbu kameňov, nemal by mať žiadne vedľajšie účinky a mal by sa ľahko podávať a tieto prvky sú dôležité na dosiahnutie dobrej compliance9. V tejto štúdii sme vyvinuli HydroZitLa, aby sme sa zaoberali nevýhodami citranu draselného a aby sme čo najviac splnili kritériá ideálneho lieku. Nápoj Te HydroZitLa má lahodnú kyslo-sladkú chuť. Verili sme, že zlú chutnosť citrátu draselného by mohla vyriešiť HydroZitLa podobne ako správy Mechlina a kol. ktorí preukázali, že pridanie lieku Splenda k citrátu draselnému pomohlo zlepšiť komplianciu liečby citrátom draselným13.

Nízky príjem tekutín je dôležitým rizikovým faktorom pre tvorbu CaOx kameňov. Pacientom s kamenným ochorením sa odporúča zvýšiť príjem tekutín na 2,5–3.0 l/deň, no je pre nich pomerne náročné udržať adherenciu, najmä z dlhodobého hľadiska. Súčasné lieky na kameň sa vyrábajú vo forme prášku alebo tabliet. Príjem vody týmito liekmi je zvyčajne nedostatočný a medzi pacientmi sa líši. Naproti tomu pitie HydroZitLa umožnilo pacientom zvýšiť príjem vody najmenej o 500 ml s každým spotrebovaným vreckom. Pri dlhodobom používaní môže HydroZitLa podporiť zmeny v stravovacích návykoch smerom k zvýšeniu denného príjmu tekutín. Údaje hodnotenia toxicity zabezpečili, že HydroZitLa je bezpečný na konzumáciu. Nápojový koncentrát Te HydroZitLa bol oficiálne schválený Tai Food and Drug Administration (FDA) a lokálne dostupný v Thajsku od roku 2019. Pokiaľ je nám známe, spotrebitelia nehlásili toxicitu ani závažné vedľajšie účinky.

HydroZitLa významne inhiboval agregáciu kryštálov COM in vitro. Hoci albumín bol hlásený ako inhibítor agregácie CaOx34, v našom testovacom systéme sme nepozorovali významnú inhibíciu agregácie CaOx pomocou BSA. Na rozdiel od toho kyselina citrónová silne inhibovala agregáciu COM v našom teste. Je pravdepodobné, že kyselina citrónová obsiahnutá v HydroZitLa bola zodpovedná za zablokovanie agregácie COM.

Fenolický obsah v HydroZitLa pochádza z banánových stoniek, kvetov modrého hrachu a sappanového dreva. Antioxidačné vlastnosti výťažkov z banánovej stonky 35, kvetov modrého hrachu 36 a drieňového dreva sappanu 37 sú dobre zdokumentované. Táto štúdia ukázala, že HydroZitLa významne znížila intracelulárnu produkciu ROS a oxidáciu proteínov v HK-2 bunkách vystavených H2O2 a COM. Okrem toho HydroZitLa hlboko zachránil bunky HK-2 pred apoptotickou bunkovou smrťou vyvolanou H2O2 a COM. Tieto údaje zdôraznili, že HydroZitLa mal antioxidačnú funkciu na zmiernenie oxidačného stresu v renálnych tubulárnych bunkách.

V tejto štúdii sme demonštrovali na potkanom modeli CaOx nefrolitiázy, v ktorej HydroZitLa významne inhiboval ukladanie CaOx v obličkách potkanov a jeho antipatogénna účinnosť bola ekvivalentná lieku Uralyt-U. Je zaujímavé, že HydroZitLa významne znížila intrarenálnu expresiu 4-HNE, ale Uralyt-U nie. HydroZitLa obsahoval antioxidanty, ale Uralyt-U nie. Naše údaje naznačujú, že zmiernenie oxidačného stresu bolo výhodou HydroZitLa oproti citrátu draselnému. HydroZitLa a Uralyt-U mali porovnateľnú účinnosť na zníženie oxalátu v moči u nefrolitických potkanov, hoci to bolo výraznejšie pri HydroZitLa. Významné zníženie hladín iCOCI v moči (ukazovateľ schopnosti moču kryštalizácie CaOx38) sa pozorovalo aj u potkanov liečených HydroZitLa a Uralyt-U. Tieto indikovali, že potenciál kryštalizácie CaOx v moči sa po ošetreniach HydroZitLa a Uralyt-U znížil. Zdá sa, že HydroZitLa poskytuje antipatogénnu aktivitu primárne prostredníctvom zníženia vylučovania oxalátu močom. Financovanie bolo potvrdené správami Poonguzhaliho a Chegu, ktorí ukázali, že hyperoxalurické potkany liečené vodným extraktom z banánových stoniek významne znížili vylučovanie oxalátu močom30. Na základe súčasných zistení HydroZitLa vyvolala inhibičné účinky na kamene CaOx ekvivalentné v súčasnosti používanému citrátu draselnému a mohla by byť klinicky užitočná ako nová terapeutická alternatíva pre CaOx nefrolitiázu.

Významné zvýšenie hladín citrátu v moči u nefrolitických potkanov po liečbe HydroZitLa a Uralyt-U nebolo zistené. Bol však pozorovaný trend zvýšeného vylučovania citrátu močom po oboch liečeniach. Možno to vysvetliť malou veľkosťou vzorky (n=6) alebo nedostatočnou dávkou citrátu (2 mEq za deň, čo sa v priemere rovná 0,4 g/kg na deň). Yasui a kol. použili citrát draselný (Uralyt, Nippon Chemifar, Japonsko) v množstve 0,5 g/kg (nízka dávka) a 20 g/kg (vysoká dávka) denne vo svojich experimentoch, aby zistili významné zvýšenie hladín citrátu v moči pokusné potkany39. Ghaeni a kol. liečených EG potkanov citrátom draselným (Sepidaj, Irán) v dávke 2,5 g/kg za deň, aby sa po liečbe pozorovalo významné zvýšenie vylučovania citrátu močom40. Nízka dávka citrátu bola teda pravdepodobne dôvodom, prečo sa v našom modeli potkanov po liečbe HydroZitLa a Uralyt-U nezistilo významné zvýšenie obsahu citrátu v moči. Avšak liečba HydroZitLa a Uralyt-U by mohla obnoviť močový citrát na hladiny pozorované u normálnych kontrolných potkanov. Táto normalizácia citrátu v moči by mohla prispieť, aspoň čiastočne, k inhibícii tvorby CaOx.

【Ďalšie informácie:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:{0}}】