Poranenie pri cvičení – – indukovaná ischémia obličiek – – reperfúzia a ochranný účinok Herba Cistanches v kombinácii s vitamínom C u potkanov
Mar 07, 2022
Poranenie obličkovej ischémie-reperfúzie vyvolanej námahou a ochranný účinok herba Cistanches v kombinácii s vitamínom C u potkanov
pre viac informácií:{0}}
Abstrakt:Cieľ: Štúdium Herba Cistanches v kombinácii s ochranným účinkom vitamínu C a mechanizmom pohybu u potkanov pri ischemicko-reperfúznom poškodení obličiek．Metódy: Náhodne rozdeľte 96 7-týždňových samcov potkanov kmeňa Wistar do 6 skupín: kontrolná skupina (skupina C ,12), skupina všeobecného tréningu (skupina M,1 2), skupina pretrénovania (skupina OM,24), skupina cistanche plus pretrénovanie (skupina COM,16), skupina vitamínu C plus skupina pretrénovania (skupina VCOM,16), a cistanche plus vitamín C plus skupina pretrénovania (skupina CVCOM,1 6), absolvujte 56-dňový vyčerpávajúci plavecký tréning. Skupina COM, skupina CVCOM s profesionálnou sondou na výplach žalúdka (ig), raz denne, dávka 6．0 lg．kg-, objem Ig 5 ml．kg-; skupina VCOM, skupina CVCOM IP aplikujte intraperitoneálnu injekciu, 100 mg. kg-, raz denne, objem injekcie je 0．5 ml; iné skupiny, napr. normálny fyziologický roztok. Zistenie biochemických parametrov močovinového dusíka v sére a sérového kreatinínu o 24 hodín neskôr po poslednom tréningu．Výsledky:1)Počas 8 týždňov pretrénovania viedli potkany k pohybu „obličkovej ischémie-reperfúzie“, ultraštruktúra obličky bola vážne poškodená , histopatologické zmeny evidentne, renálna funkcia bola vážne poškodená．2) Zvýšenie sérového kreatinínu a dusíka močoviny v krvi．OM skupina (P<0．01), com=""><0．o1), vcom=""><0．01), cvcom=""><0．05) higher="" than="" in="" group="" c;="" com=""><0．05), vcom=""><0．05), cvcom=""><0．01)lower than="" the="" om="" group;="" com=""><0．05), cvcom=""><0．01)lower than="" the="" vcom="" group．3)sod="" activity="" decreased．om=""><0．01), com=""><0．01), of="" vcom=""><0．01), cvcom=""><0．05)lower than="" in="" group="" c;="" m=""><0．05), com=""><0．05), vcom=""><0．05), cvcom=""><0．01)higher than="" the="" om="" group;="" com=""><0．05), cvcom=""><0．01)higher than="" the="" vcom="" group．4)the="" content="" of="" mda="" increased,="" om=""><0．01), com=""><0．01), vcom="">< 0．o1),="" cvcom=""><0．05)higher than="" in="" group="" c;="" com=""><0．05), vcom="" group=""><0．05), cvcom=""><0．01)lower than="" the="" om="" group;="" com=""><0．05), cv—="" com=""><0．01)lower than="" the="" vcom="" group．conclusion：1)overtraining="" can="" induce="" renal="" ischemia-reperfusion="" in="" rats．2)cistanche="" deserticola="" y．c．ma="" and="" vitamin="" c="" can="" enhance="" the="" activity="" of="" sod,="" scavenging="" oxygen="" free="" radicals,="" reduce="" lipid="" peroxidation,="" they="" have="" a="" protective="" effect="" on="" exercise-induced="" ischemia-reperfusion="" kidney．3)cistanche="" is="" better="" than="" vitamin="" c,="" but="" they="" worked="" even="" better="" when="" taken="">
Kľúčové slová:herba Cistanches; vitamín C; cvičením vyvolaná ischémia-reperfúzia
Kliknite na produkty Cistanche herba
S rozvojom teórie modernej čínskej medicíny, modernej teórie farmakológie a modernej biotechnológie sa v športovej praxi používa viac samostatných látok alebo vzorcov. Tradičná čínska medicína ukazuje svoje jedinečné výhody vďaka svojmu viaccieľovému, viackanálovému účinku a takmer žiadnym zakázaným komponentom. Prinieslo určité úspechy pri zlepšovaní fyzických funkcií športovcov a zmierňovaní únavy. Keď je telo v stabilnom stave, prietok krvi obličkami môže byť udržiavaný relatívne konštantný prostredníctvom svojho regulačného mechanizmu. Pri namáhavom cvičení sa pod vplyvom nervových a humorálnych faktorov mení prietok krvi obličkami. V dôsledku redistribúcie krvného obehu rôznych orgánov sa zvyšuje prekrvenie aktívnych orgánov, najmä svalov, a obličkový prietok krvi prudko klesá, čo je zreteľnejšie pri neustálej a zvyšujúcej sa intenzite cvičebného procesu. Tento neúplný ischemický stav obličky tvorí "námahom vyvolanú renálnu ischémiu". Po ukončení cvičenia sa obnoví zásobovanie obličiek krvou a po námahou vyvolanej ischémii obličiek sa vytvorí „reperfúzia“. Abnormálne zvýšenie produkcie voľných radikálov hrá dôležitú úlohu v procese ischemicko-reperfúzneho poškodenia. Výsledky ukazujú, že Cistanche deserticola má farmakologické účinky na zvýšenie aktivity peroxiddismutázy a zníženie peroxidu lipidov a môže eliminovať poškodenie buniek tela nadmernými voľnými radikálmi; Vitamín C, ako dôležitý antioxidant v tele, dokáže účinne vychytávať aj voľné radikály. Táto práca študuje účinky Cistanche deserticola v kombinácii s vitamínom C na ischemicko-reperfúzne poškodenie obličiek potkanov a diskutuje o ich účinkoch a mechanizmoch pri ischemicko-reperfúznom poškodení s cieľom poskytnúť teoretický základ pre ich klinickú aplikáciu.
1 materiál
1.1 Zvieratá
100 čistých samcov potkanov Wistar, vek 42 dní, priemerná hmotnosť (201,8 ± 14,1) g, poskytnutých Katedrou vedy o experimentálnych zvieratách, Katedra medicíny Pekingskej univerzity, číslo licencie scxk2006-0008. Počas celého testu sa teplota v laboratóriu udržiava na 22 ± 2 stupne, relatívna vlhkosť je 55 percent ~ 75 percent a doba osvetlenia sa mení s prírodou. Všetky pokusné krysy boli kŕmené základným krmivom (poskytnutým Katedrou vedy o experimentálnych zvieratách, Katedra medicíny Pekingskej univerzity) a destilovanou vodou. Experimentálny čas bol 63 dní a formálny tréningový čas bol 56 dní.
1.2 Experimentálna medikácia
Cistanche deserticola, vyrábaná vo Vnútornom Mongolsku, bola zakúpená v drogérii Tongrentang v Pekingu, šarža č.: 120224536
Injekcia vitamínu C (číslo šarže: 20120406), poskytnutá spoločnosťou Beijing Shuanghe Pharmaceutical Co., Ltd.
1.3 Činidlá
Sérový kreatinín (SCR) bol stanovený metódou Jaffeho kyseliny pikrovej, dusík močoviny v krvi (BUN) metódou diacetyl MONOOXIME a malóndialdehyd (MDA) kolorimetricky; Superoxiddismutáza (SOD) bola stanovená xantínoxidázovou metódou s použitím súpravy poskytnutej Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute, kit č. 2012051
1.4 Nástroje
Elektronické analytické váhy Bs224s (Sartorius, Nemecko), optický mikroskop (Olympus, Japonsko), automatický biochemický analyzátor alcyon300 (Abbott, USA), ultrafialový spektrofotometer 756mc (Shanghai Precision Instrument Factory) a gl-20g high- odstredivka rýchleho mrazenia.
2 metódy
2.1 Zoskupovanie zvierat
Po 4 dňoch adaptívneho kŕmenia boli experimentálne potkany 3 dni testované s 20 minútami denného cvičenia a jednotliví nevhodní plavci boli vyradení. Zvyšné potkany boli náhodne rozdelené do 6 skupín: 12 v kontrolnej skupine (skupina C), 12 v skupine všeobecného tréningu (skupina M), 24 v skupine s pretrénovaním (skupina OM), 16 v skupine s pretrénovaním Cistanche deserticola ( COM skupina) a 16 v skupine s vitamínom C plus pretrénovaním (skupina VCOM) 16 potkanov v skupine Cistanche deserticola plus vitamín C plus skupina pretrénovania (skupina cv com) bolo trénovaných 56 dní. Počas tréningového obdobia bola skupine com a skupine cv com podávaná sonda pomocou profesionálneho žalúdočného prístroja raz denne v dávke 6,01 g/kg a objeme 5 ml/kg; Skupine VCOM a skupine cv com bola intraperitoneálne podaná dávka 100 mg/kg raz denne s objemom injekcie 0,5 ml a rovnakým množstvom normálneho fyziologického roztoku v ostatných skupinách.
2.2 experimentálna metóda
2.2.1 školiaca a skúšobná schéma
Skupina C bola kŕmená rutinne bez akéhokoľvek zásahu a necvičila v bežných časoch. Skupina M absolvovala strednú intenzitu plaveckého výcviku a formálny plavecký výcvik po dobu 8 týždňov. Trénujte 6 dní v týždni, raz denne, prvýkrát zaplávajte 2{11}} kolá a potom postupne zvyšujte. Prvý víkend plávajte vždy 60 minút, druhý víkend 90 minút denne a tretí víkend 120 minút denne. Udržujte toto množstvo cvičenia počas nasledujúcich 5 týždňov. Tréningové usporiadanie ostatných skupín v prvých 3 týždňoch je rovnaké ako v skupine M a od štvrtého týždňa budú prebiehať vysokointenzívne tréningy. Potkany boli zakaždým trénované do vyčerpania. Štandardom vyčerpania bolo, že potkany sa nevynorili z vodnej hladiny 10 sekúnd po potopení. Zvýšte hmotnosť o 0,5 percenta v prvých troch týždňoch, o 1 percento vo štvrtom týždni a o 2 percentá v piatom týždni. Trénujte raz denne. V 6. týždni trénovali raz denne ráno a popoludní a v 7.-8 týždni trénovali raz denne ráno, poobede a večer, čo všetko zvýšilo váhu o 5 percent . Do konca 8. týždňa rástli potkany v skupinách C a M normálne bez náhodného úmrtia. Úmrtnosť potkanov v iných skupinách bola vyššia v dôsledku zvýšenej hmotnosti, neschopnosti zotaviť sa z únavy a náhodnej smrti po tréningu. V skupine OM, skupine com, skupine VCOM a skupine CVCOM bolo 14, 13, 11 a 13 potkanov. Na experiment sa vybralo 10 potkanov v každej skupine a ostatné sa náhodne vylúčili.
2.2.2 stanovenie indexu
24 hodín po poslednom plaveckom tréningu boli potkany v každej skupine mierne anestetizované éterom. Krv bola odobratá zo spoločnej krčnej tepny, antikoagulovaná roztokom citrátu sodného, umiestnená do 37 stupňovej vody na 30 minúty, centrifugovaná pri 4 stupňoch 3000 ot./min počas 10 minút, oddelené a pripravené sérum a uskladnené v chladničke pri mínus 20 stupňov pre budúce použitie. Rýchlo odstráňte obe obličky, odstráňte fascie, vložte ich do vopred vychladeného normálneho fyziologického roztoku na umytie krvavých škvŕn a vizuálne sledujte veľkosť, farbu a štruktúru obličiek. Oddeľte ľavú obličku, odoberte 0,5 g tkaniva horného pólu obličiek, rozdrvte ho s 1,5 ml normálneho fyziologického roztoku pri 12 000 otáčkach za minútu pri 1 stupni, aby ste vytvorili 10 percent homogenátu obličkového tkaniva; Vzorky obličkového tkaniva sa fixovali 10 percentným formaldehydom, zabalili do parafínu, urobili sa z nich 4 um hrubé rezy, zafarbili sa HE a pozorovali sa histopatologické zmeny.
3 Výsledky
3.1 patologické zmeny cvičenia, Cistanche deserticola a vitamín C na obličkách potkanov
Po stanovení SCR a buničiny sa obličkové tkanivá každej skupiny urobili parafínovými rezmi, zafarbili sa HE a histomorfologické zmeny sa pozorovali pod svetelným mikroskopom. Pod svetelným mikroskopom bola štruktúra obličkového tkaniva potkanov v statickej kontrolnej skupine a všeobecnej tréningovej skupine normálna, bez prekrvenia, degenerácie a edému a v lumen renálnych tubulov nebol žiadny tubulárny typ. V skupine s pretrénovaním došlo k prekrveniu glomerulu, edému, vakuolárnej degenerácii a expanzii lúmenu tubulárnych epitelových buniek a malému počtu exfoliovaných klkov a epiteliálnych buniek v lúmene. Histopatologické zmeny v iných skupinách boli ľahšie ako v skupine s pretrénovaním, s miernym edémom, vakuolárnou degeneráciou, expanziou lumenu tubulárnych epitelových buniek a bez proteínového typu trubice a typu bunkovej trubice. Medzi statickou kontrolnou skupinou a všeobecnou tréningovou skupinou nebol žiadny významný rozdiel v Pallerovom skóre renálnych tubulov (P > {{0}}.05), statická kontrolná skupina bola výrazne nižšia ako v iných skupinách (P < 0,01)="" a="" liečená="" skupina="" bola="" významne="" nižšia="" ako="" v="" skupine="" s="" pretrénovaním="" (p=""><>
3.2 účinky cvičenia, Cistanche deserticola a vitamínu C na sérum BUN a SCR u potkanov
Dusík močoviny v krvi a kreatinín v sére sa výrazne zvýšili v každej skupine v porovnaní s kontrolnou skupinou a významne sa znížili v skupine com, skupine VCOM a skupine CVCOM v porovnaní so skupinou OM (P < {{0}}.{{4}="" }5,="" p="">< 0.05="" a="" p="">< 0,01;="" v="" porovnaní="" so="" skupinou="" vcom="" sa="" skupina="" com="" a="" skupina="" cvcom="" výrazne="" znížili="" (p="">< 0,05,="" p=""><>
3.3 účinky cvičenia, Cistanche deserticola a vitamínu C na aktivitu SOD a obsah MDA v obličkovom homogenáte potkanov.
V porovnaní so skupinou OM sa aktivita SOD v skupine COM, skupine VCOM a skupine CVCOM výrazne zvýšila (P < {{0}}.05,="" p="">< 0.{{9}="" }5="" a="" p="">< 0.o1,="" v="" tomto="" poradí);="" v="" porovnaní="" so="" skupinou="" vcom="" sa="" výrazne="" zvýšila="" skupina="" com="" a="" skupina="" cvcom="" (p="">< o.{13}}5,="" p="">< 0.o1).="" obsah="" mda="" v="" každej="" skupine="" bol="" významne="" vyšší="" ako="" v="" kontrolnej="" skupine="" a="" významne="" sa="" znížil="" v="" skupine="" com,="" skupine="" vcom="" a="" skupine="" cvcom="" v="" porovnaní="" so="" skupinou="" om="" (p="">< 0,05,="" p="">< 0,05="" a="" p="">< 0,01="" v="" uvedenom="" poradí);="" v="" porovnaní="" so="" skupinou="" vcom="" sa="" skupina="" com="" a="" skupina="" cvcom="" výrazne="" znížili="" (p="">< 0,05="" a="" p=""><>
4. Diskusia
Renálne ischemicko-reperfúzne (R/R) poškodenie je komplexný patofyziologický proces a jeho špecifický mechanizmus nie je úplne objasnený. Voľné radikály bez kyslíka (OFR) však zohrávajú významnú úlohu pri výskyte a rozvoji I / R. Za normálnych okolností môže byť v tele produkované malé množstvo voľných radikálov, ale v dôsledku inaktivácie enzýmu voľných radikálov systému v tele sú voľné radikály rýchlo odstránené bez poškodenia. Počas cvičenia I/R zvyšuje produkciu voľných radikálov, čo môže viesť k peroxidácii membránových lipidov, čo má za následok zmeny fluidity, fluidity a permeability membrány a následne spôsobiť dysfunkciu membrány, najmä deštrukciu mitochondriálnej membrány, čo ovplyvní bunkový metabolizmus a funkcia a zasahujú do fyziologickej funkcie celého orgánu. Antioxidačné enzýmy sú hlavnými látkami v tele, ktoré eliminujú voľné radikály a znižujú ich poškodenie. Sod je jediný enzým s voľnými radikálmi ako substrát spomedzi tisícok enzýmov v aeróbnych organizmoch. Odstraňuje superoxidový anión katalýzou superoxidového aniónu za vzniku peroxidu vodíka a chráni telo pred poškodením. Zároveň sa v určitom rozsahu SOD kompenzovateľne zvýši, keď sa zvýši metabolizmus voľných radikálov. Preto je úroveň aktivity SOD znakom sily antioxidačnej kapacity. MDA je hlavným produktom bunkovej lipidovej peroxidácie. Obsah MDA v mitochondriách sa považuje za citlivý index na meranie metabolizmu voľných radikálov. Kreatinín a močovinový dusík sú katabolické produkty svalov a bielkovín. Z obličiek sa vylučujú najmä krvným obehom. Ich koncentrácia v krvi závisí od kapacity glomerulárnej filtrácie. Keď je obličková esencia poškodená a rýchlosť glomerulárnej filtrácie klesne na kritický bod, ich koncentrácia výrazne stúpne.
Výsledky ukázali, že pretrénovanie počas 8 týždňov malo za následok významné zmeny v histopatológii obličiek. Experimentálne výsledky ukazujú, že Cistanche deserticola a vitamín C môžu účinne vychytávať voľné radikály, znižovať renálnu ischémiu a hypoxiu, inhibovať peroxidáciu lipidov a zlepšovať aktivitu SOD. Môže účinne znížiť renálne ischemicko-reperfúzne poškodenie a hrať ochrannú úlohu. Možné mechanizmy sú nasledovné: 1) Cistanche deserticola môže zlepšiť aktivitu antioxidačných enzýmov a urýchliť elimináciu voľných radikálov. Rôzne polyfenoly, glykozidy a flavonoidy zároveň zohrávajú pozitívnu úlohu pri vychytávaní voľných radikálov, znižovaní poškodenia mitochondriálnej membrány a membrány sarkoplazmatického retikula voľnými radikálmi a pri znižovaní oxidačného poškodenia enzýmových proteínov. 2) Vitamín C je dôležitý antioxidačný vitamín. Ako silný antioxidant dokáže účinne eliminovať voľné kyslíkové radikály, inhibovať spustenie kaskády apoptózy a redukovať ischemicko-reperfúzne poškodenie buniek a orgánov. Okrem toho výsledky troch liečebných skupín naznačujú, že Cistanche deserticola môže byť lepšia ako vitamín C pri liečbe námahou vyvolaného renálneho ischemicko-reperfúzneho poškodenia; Kombinácia týchto dvoch môže byť vhodnejšia na ochranu obličiek pred ischemicko-reperfúznym poškodením.
Záverom možno konštatovať, že veľké zaťaženie plaveckým tréningom spôsobilo obličkovéischemicko-reperfúzne poškodenieu potkanov.Cistanche deserticolaa vitamín C majú zrejméochranné účinky na renálne ischemicko-reperfúzne poškodenie,ktorý môže byť týmzvýšenie aktivity superoxiddismutázy,odstraňovanie voľných radikálov,zníženie peroxidácie lipidov, azlepšenie funkcie obličiek. Z hľadiska liečebného účinku je kombinácia oboch lepšia ako samotná a Cistanche deserticola ako vitamín C, ale môže to súvisieť aj s dávkou oboch v aplikácii. Vzťah medzi dávkou a liečebným účinkom je potrebné ďalej skúmať.
