ČASŤ 2 Antioxidácia a cytoprotekcia akteozidu a jeho derivátov: Porovnanie a mechanická chémia
Mar 08, 2022
Časť 2 Ako antioxidant Cistanche Acteoside chráni bunky?
Kliknite sem pre časť 1
Pre viac informácií kontaktujte:Joanna.jia@wecistanche.com
Cistanche deserticola má mnoho účinkov, kliknite sem a dozviete sa viac
3. Diskusia
Je známe, že antioxidačné pôsobenie prírodných fenolových zlúčenín sa podieľa na prenose elektrónov (ET) [18,19]. Niektoré testy na redukciu kovov na báze ET sa teda široko používajú na hodnotenie antioxidačných hladín fenolov, ako sú testy FRAP a CUPRAC. Pokyny pre test FRAP musia byť splnené pri pH nižšom ako 3,6. Takéto kyslé prostredie úspešne potlačilo H plus ionizáciu z fenolov; preto sa test FRAP považuje za obyčajný ET proces [20,21]. Účinnosťakteozida jeho derivátov v teste FRAP znamená, že ak akteozid a jeho deriváty pôsobia ako antioxidanty, môžu využiť ET dráhu na uplatnenie svojho antioxidačného účinku.
Okrem toho sme tiež vykonali test CUPRAC v pufri s pH 7,4. Ako je vidieť v Suppl. 1,akteozida jeho deriváty v závislosti od dávky zvýšili svoju Cu2 plus-zníženie percent výkonu, čo naznačuje, že by mohli zostať ET potenciálom pri fyziologickom pH. Ich ET potenciál sa však znížil v nasledujúcom poradí:akteozid> forsytozid B > poliumozid (tabuľka 1). Táto dynamika jasne naznačuje, že apiosylová skupina vo forsytozide B a ramnosylová skupina v poliumozide znížili ET potenciál.
Aby sa otestovala možnosť, že sa ET vyskytuje počas ich procesov odstraňovania radikálov, do štúdie bol zavedený voľný radikál PTIO koncentrovaný na kyslík. Dôkazy cyklickej voltametrie odhalili, že PTIO・-scavenging pod pH 5.0 je jediná elektrón-redoxná reakcia. Pozorovanie, žeakteozida jeho deriváty by mohli účinne zachytávať radikál PTIO・ pri pH 4,5, čo naznačuje možnosť ET počas ich procesov zachytávania radikálov. Je zrejmé, že toto zistenie ďalej podporuje vyššie uvedené výsledky testov FRAP a CUPRAC a predchádzajúce výsledky, že darcovský elektrón (e) je znakom fenolových antioxidantov [23].
Pri fyziologickom pH 7,4 však esej PTIO・-scavenging nie je len ET dráhou, ale zahŕňa aj dráhu prenosu protónov (H plus). Počas procesu bolo PTIO・ navrhnuté prijať Hplusz fenolických látok, aby sa vytvoril vrchol produktu ([PTIO-H]plus). Pretože Hplus-prenos je vždy sprevádzaný ET v krokových alebo synchrónnych mechanizmoch [24], realistickým (alebo konečným) produktom je molekula [PTIO-H] [22]. PTIO・-scavenging pri pH 7,4 (Suppl. 1) znamená, žeakteozida jeho deriváty majú tiež potenciál prenosu H plus. Hodnoty IC50 (tabuľka 1) ukázali, že relatívna Hplus-prenosové potenciály boli v zostupnom poradíakteozid>forsytozid B > poliumozid. Je zrejmé, že apiosylové a ramnosylové skupiny tiež oslabili Hplus-prenosový potenciál počas antioxidačného procesu.
Ako už bolo uvedené, počas antioxidačného procesu fenolov je ET zvyčajne sprevádzaný protónom (Hplus) prenos za vzniku niekoľkých antioxidačných mechanizmov [24], ako je prenos atómu vodíka (HAT) [23,25-27], sekvenčný prenos elektrón-protón (SEPT) [26,27], sekvenčná strata protónu s jedným elektrónom transfer (SPLET) [26] a protón-coupled electron transfer (PCET) [24-26,28]. Napríklad ABTS plus • -scavenging, reakcia, ktorej dominuje prenos jedného elektrónu (SET) [29], bola nedávno tiež dokázaná ako ovplyvnená hladinami H plus [30]. ABTS plus • -scavenging je preto antioxidačný test založený na viacerých dráhach [21,31]. Skutočnosť, žeakteozida jeho deriváty by mohli zachytávať ABTS plus ・ radikály, čo naznačuje, že ich antioxidačný účinok môže byť tiež sprostredkovaný viacerými dráhami. Túto hypotézu ďalej potvrdzujú dôkazy z testu DPPH・-scavenging, reakcie zahŕňajúcej HAT, ET, SEPT a PCET viaceré dráhy [26,32]. Avšak kvantitatívna analýza založená na IC50hodnoty (tabuľka 1) odhalili, že v aspektoch ABTS založených na viacerých dráhach plus --scavenging a DPPH*-scavenging,akteozidbol lepší ako jeho vhodný forsytozid B a ramnozid poliumozid. Dá sa teda odvodiť, že apiolové a ramnosylové skupiny nakoniec bránia viaccestným potenciálom (najmä ET a Hplus-prenos) počas procesu odstraňovania voľných radikálov.
Ako uviedli autori a iní [14,26], počas antioxidačného procesu môže dôjsť aj k RAF reakcii. Na overenie možnosti RAF sa však študovali tri fenylpropanoidové glykozidy spolu s kyselinou kávovou pomocou analýzy UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS. Zistilo sa, že kyselina kávová poskytuje dimérový produkt, zatiaľ čo tri fenylpropanoidové glykozidy neprodukujú žiadny vrchol produktu RAF. Toto zistenie jasne naznačuje, že tri fenylpropanoidové glykozidy nemôžu prejsť dráhou RAF, aby uplatnili svoj antioxidačný účinok. Pretože tri fenylpropanoidové glykozidy možno považovať za estery kyseliny kávovej (obrázok 1), takýto rozdiel medzi kyselinou kávovou a estermi kyseliny kávovej tiež naznačuje, že obrovská časť môže brániť tvorbe RAF.
Celkovo z hľadiska likvidácie voľných radikálovakteozida jeho deriváty môžu podstúpiť viacero ciest, aby uplatnili svoj antioxidačný účinok. Tieto antioxidačné dráhy sa aspoň podieľajú na prenose ET a H plus (ale nie RAF). Naše zistenia sú čiastočne podporené teoretickou štúdiou, ktoráakteozidby mohli pôsobiť antioxidačne prostredníctvom SPLET dráhy. V tomto procese môže akteozid najprv deprotonovať (Hplus-prenos) za vzniku aniónu. Predpokladá sa, že k deprotonácii dochádza v katecholových skupinách so slabou kyslosťou. Následne anión odovzdal elektróny za vzniku fenoxyradikálovej formy [33]. Fenoxy radikály s pn konjugáciou sú však do určitej miery stabilné. Samozrejme, v tomto smere sú v budúcnosti potrebné ďalšie experimentálne práce.
Stojí za zmienku, že bunkový oxidačný stres môže pochádzať aj z prechodných kovov (najmä Fe2 plus). Fe2 plusión však môže transformovať H2O2molekula na najškodlivejšie •OH radikály prostredníctvom Fentonovej reakcie (Fe2plus plus H2O2 T Fe3plus plus ・OH plus OH-). Preto útlm Fe2plus úrovne môžu účinne inhibovať ・OH radikály, aby sa uvoľnil bunkový oxidačný stres. V skutočnosti sa chelatácia železa prírodnými fenolickými antioxidantmi vyvinula v účinnú terapiu niektorých chorôb súvisiacich s oxidačným stresom [34,35].
V tejto štúdii boli akteozid a jeho deriváty navrhnuté ako účinné Fe2 plus-chelátory zmenami spektroskopie a farieb roztoku (obrázok 2). Napriek tomu je akteozid horší ako dva glukozidy pri chelátovaní Fe2 plusa forsytozid B s apiosylovým zvyškom je horší ako poliumozid s ramnosylovým zvyškom. Na základe porovnania ich preferenčných konformácií (obrázok 1 vpravo) sa navrhuje, že apiosylová (alebo ramnosylová) časť môže pomôcť hlavnému ligandu (fenylpropanoidová skupina) pri chelatácii Fe.2 plus. Takýto synergický efekt nepochybne posilňuje Fe2 plus-chelatačná schopnosť a zväčšuje UV-VIS vrcholy. Avšak ramnosyl je vo svojom Fe účinnejší ako apiosyl2 plus- chelatačná schopnosť. Rozdiel možno pripísať skutočnosti, že ramnosyl sa vyskytuje v exocyklickej forme (tj aL-ramnopyranozyl), zatiaľ čo apiosyl je v pentacyklickej forme (tj pD-apiofuransyl). Je známe, že exocyklická forma je väčšia a stabilnejšia. Exocyklický ramnosyl je teda účinnejší v porovnaní s pentacyklickým apiosylom vo svojom Fe2 plus- chelatačná schopnosť.
Aby sme otestovali, či akteozid a jeho deriváty môžu zachytávať ROS, uskutočnili sme test autooxidácie pyrogallolu. Ako je vidieť v Suppl. 1, všetky by mohli účinne vyčistiť radikál — typický ROS vyskytujúci sa v bunkách. Relatívna bioaktivita však klesla v poradí poliumozid > forsytozid B >akteozid. Toto poradie je tiež paralelné s poradím cytoprotektívnych účinkov (tabuľka 2). Toto zistenie naznačuje, že všeobecným účinkom ramnosylovej skupiny alebo apiosylovej skupiny je zvýšenie účinku zachytávania ROS alebo cytoprotektívnych účinkov.
4. Materiály a metódy
4.1. Chemikálie a zvieratá
Akteozid (číslo CAS: 61276-17-3, 97 percent), forsytozid B (číslo CAS: 81525-13-5, 97 percent) boli získané od BioBioPha (Kunming, Čína, Suppl. 3). Poliomozid (číslo CAS: 94079-81-9, 97 percent) izoloval náš tím z tradičnej čínskej bylinyCallicarpa periHT Chang (Suppl. 3). DPPH・,(±)-6-hydroxyl-2,5,7,8-tetrametylchromán-2-karboxylová kyselina (Trolox), 2,9-dimetyl{{ 9}},10-fenantrolín (neocuproín), 2,4,6-tripyridyltriazín (TPTZ) a pyrogalol boli zakúpené od spoločnosti Sigma-Aldrich Shanghai Trading Co. (Shanghai, Čína). (NHq'ABTS [2,2'-azino-bis (3-etylbenzén-tiazolín-6-diamónna soľ kyseliny sulfónovej)] bola získaná od Amresco Chemical Co. (Solon, OH, USA). PTIO・radikál bol zakúpený od TCI Development Co., Ltd. (Shanghai, Čína) Kyselina kávová bola zakúpená od Národného inštitútu pre kontrolu farmaceutických a biologických produktov (Peking, Čína) Dulbeccovo modifikované Eagleovo médium (DMEM), fetálne hovädzie sérum (FBS) a trypsín boli zakúpené od Gibco (Grand Island, NY, USA). Testovacia súprava AnnexinV/propidium jodid (PI) bola zakúpená od Invitrogen (Carlsbad, CA, USA).Všetky ostatné činidlá boli analytickej kvality.
Krysy Sprague-Dawley (SD) vo veku 4 týždňov boli získané z Animal Center of Guangzhou University of Chinese Medicine. Protokol tohto experimentu sa uskutočnil pod dohľadom Inštitucionálneho výboru pre etiku zvierat na čínskej univerzite v Guangzhou (číslo schválenia 20170306A).
4.2. Testy na redukciu kovov (FRAP& CUPRAC)
Testy na redukciu kovov zahŕňajú Fe3 plus- test na zníženie výkonu a Cu2 plus- test na zníženie výkonu. Fe3 plus-redukčný test zaviedli Benzie a Strain a formálne sa nazýva FRAP [20]. Experimentálny protokol tohto testu bol opísaný v predchádzajúcej správe [9]. Stručne povedané, činidlo FRAP bolo pripravené čerstvo zmiešaním 10 mM TPTZ, 20 mM FeCl3,a {{0}}.25 M acetátový pufor v pomere 1:1:10 pri pH 3,6. Testovaná vzorka (x=4-20 1, 0,05 mg/ml) sa pridala do (20-x) 95 percentného etanolu a následne 80 RL činidla FRAP. Po 30-minútovej inkubácii pri teplote okolia sa merala absorbancia pri 595 nm pomocou čítačky mikrodoštičiek (Multikan FC, Thermo Scientific, Shanghai, Čína). Relatívna redukčná sila vzorky sa vypočítala pomocou nasledujúceho vzorca:
kdemaxbola maximálna absorbancia reakčnej zmesi so vzorkou a Aminje minimálna absorbancia v teste. A je absorbancia vzorky.
Cu2 plus-redukčná sila môže tiež charakterizovať hladinu antioxidantov, a preto sa nazýva CUPRAC. Tento test sa uskutočnil podľa predtým publikovanej metódy [36]. Stručne povedané, 12 RL vodného roztoku CuSOq (10 mmol/l), 12 RL etanolového roztoku neocuproínu (7,5 mmol/l) a (75 — x) RL CH3COONH4tlmivý roztok ({{0}},1 mol/l, pH 7,5) sa pridali do jamiek s rôznymi objemami vzorky (0,05 mg/ml, 4-20 |^L). Absorbancia pri 450 nm po 30 minútach sa merala pomocou vyššie uvedenej čítačky mikrodoštičiek. Relatívny výkon CUPRAC bol vypočítaný pomocou vzorca pre FRAP. Amaxbola maximálna absorbancia reakčnej zmesi so vzorkou a Aminje minimálna absorbancia v teste. A je absorbancia vzorky.
4.3. PTI0・-ScavengingAssay
Testy zachytávania PTIO* (pri pH 4,5 alebo pH 7,4) boli vykonané na základe našej metódy [16]. Stručne povedané, roztok testovanej vzorky (x=0-20^L, 1 mg/ml pre pH 4,5 a {{10}},5 mg/ml pre pH 7,4) sa pridal do (20 – x) rL 95 % etanolu, nasledovaného 80 RL vodného roztoku PTIO*. Vodný roztok PTIO* sa pripravil použitím roztoku fosfátového masla (0,1 mM, pH 4,5 alebo pH 7,4). Zmes sa udržiavala pri 37 stupňoch počas 2 hodín a absorbancia sa potom merala pri 560 nm pomocou vyššie uvedenej čítačky mikrodoštičiek. Percento inhibície PTIO* sa vypočítalo takto:
kde A stupeň je absorbancia kontroly bez vzorky a A je absorbancia reakčnej zmesi so vzorkou.
4.4. ABTSplus*-Vyplachovanie a DPPH*- Scavenging Assays
ABTS*plus-scavenging aktivita bola hodnotená podľa metódy [37]. ABTS plus * sa vyrobil zmiešaním 0,2 ml diamónnej soli ABTS (7,4 mmol/l) s 0,2 ml persíranu draselného (2,6 mmol/l). Zmes sa udržiavala v tme pri izbovej teplote počas 12 hodín, aby sa umožnilo dokončenie tvorby radikálov pred zriedením destilovanou vodou (v pomere približne 1:20), aby jej absorbancia pri 734 nm bola { {16}}.35 土 0.01 pomocou vyššie uvedenej čítačky mikrodoštičiek. Na stanovenie vychytávacej aktivity sa testovaná vzorka (x=4-20 RL, 0,05 mg/ml) pridala do (20 – x) RL destilovanej vody a následne 80 RL činidla ABTS plus * a absorbancia pri 734 nm sa meralo 3 minúty po počiatočnom zmiešaní s použitím destilovanej vody ako slepého pokusu.
Aktivita zachytávania radikálov DPPH* bola stanovená tak, ako už bolo opísané [18]. Stručne, 75 RL roztoku DPPH* (0,1 rM) sa zmiešalo s uvedenými koncentráciami vzorky (0,025 mg/ml, 5-25 RL) rozpustenej v metanole. Zmes sa udržiavala pri teplote miestnosti počas 30 minút a absorbancia sa merala pri 519 nm pomocou vyššie uvedenej čítačky mikrodoštičiek.
Percentá ABTS plus aktivity zachytávania • a aktivity zachytávania DPPH* boli vypočítané na základe vzorca uvedeného v časti 4.3.
4.5. UPLC—ESI-Q-TOF—MS/MS Analýza PPH* Reakčné produkty
Táto metóda bola založená na našej predchádzajúcej štúdii [25]. Metanolový roztok akteozidu sa zmiešal s roztokom DPPH* radikálov v metanole v molárnom pomere 1:2 a výsledná zmes sa inkubovala 24 hodín pri teplote miestnosti. Zmes produktov sa potom prefiltrovala cez filter 0.{5}}Rm filter a analyzovala sa pomocou systému UPLC vybaveného kolónou C18 (2.0 mm id x 100 mm, 1,6 Rm, Phenomenex, Torrance, CA, USA). Mobilná fáza sa použila na elúciu systému a pozostávala zo zmesi metanolu (fáza A) a vody (fáza B). Kolóna sa eluovala prietokovou rýchlosťou 0,3 ml/min s nasledujúcim gradientovým elučným programom: 0-10 min, 60-100 percent A; 10-15 min, 100 percent A. Objem vstreku vzorky bol nastavený na 1 RL na oddelenie rôznych zložiek. Analýza ESI-Q-TOF-MS/MS sa uskutočnila s použitím Triple TOF 5600plusHmotnostný spektrometer (AB SCIEX, Framingham, MA, USA) vybavený zdrojom ESI, ktorý pracoval v režime negatívnej ionizácie. Rozsah skenovania bol nastavený na 100-2000 Da. Systém bežal s nasledujúcimi parametrami: napätie iónového spreja, —4500 V; ohrievač iónového zdroja, 550 stupňov C; clonový plyn (CUR, N2), 30 psi; nebulizačný plyn (GS1, vzduch), 50 psi; Tis plyn (GS2, vzduch), 50 psi. Potenciál deklastrovania (DP) bol nastavený na —100 V, zatiaľ čo energia kolízie (CE) bola nastavená na —40 V s rozptylom energie kolízie (CES) 20 V. Produkty RAF
boli kvantifikované extrakciou zodpovedajúceho molekulového vzorca z celkového iónového chromatogramu (Suppl. 2).
Vyššie uvedený experiment sa opakoval s použitím forsytozidu B, strany pódia a kyseliny kávovej. Zodpovedajúcem/zpíky boli extrahované zo zodpovedajúceho molekulového vzorca z celkového iónového chromatogramu (Suppl. 2).
4.6. UV-Vis-spektrálna analýza Fe2 plus- Chelatačné produkty
Fe2 plus-produkty chelatačnej reakcie akteozidu-Fe2 plusboli hodnotené pomocou UV-Vis-spektroskopie [13]. Pre experiment sa 30000 ml metanolového roztoku akteozidu (0,24 mM) pridalo do 700 ul vodného roztoku FeCl? 4H20 (168 mM). Roztok sa potom intenzívne premiešaval. Následne bola výsledná zmes skenovaná pomocou UV-Vis spektrofotometra po hodine (Unico 2600A, Shanghai, Čína) od 200-850 nm.
Vyššie uvedený experiment sa opakoval s použitím forsytozidu B alebo strany pódia namiesto akteozidu.
4.7. Autooxidačný test pyrogalolu pre superoxidový anión (•O2~) Čistenie
Meranie aktivity zachytávania superoxidových aniónov (・.{{0}}) bolo založené na našej metóde [17]. Stručne, vzorka sa rozpustila v etanole na 1 mg/ml. Roztok vzorky (x rL) sa zmiešal s Tris-HCl pufrom (980 x rL, 0,05 M, pH 7,4) obsahujúcim EDTA (1 mM). Keď sa pridalo 20 ul pyrogallolu (60 mM v 1 mM HCI), zmes sa ihneď pretrepala pri teplote miestnosti. Absorbancia zmesi pri 325 nm sa merala (Unico 2100, Shanghai, Čína) oproti pufru Tris-HCl ako slepému pokusu každých 30 s počas 5 minút. Schopnosť čistenia sa vypočítala takto:
4.8. Cytoprotektívny účinok na oxidatívne stresované bmMSC (MTT test)
BmMSC boli kultivované podľa našich predchádzajúcich správ [38] s miernymi modifikáciami. Stručne povedané, kostná dreň sa získala zo stehennej kosti a holennej kosti potkana. Vzorky drene boli zriedené DMEM (nízka hladina glukózy) s obsahom 10 percenta FBS. BmMSC boli pripravené gradientovou centrifugáciou pri 900 g počas 30 minút pri 1,073 g/ml Percoll. Pripravené bunky sa oddelili pôsobením 0,25 percenta trypsínu a preniesli sa do kultivačných baniek pri 1 x 104/cm2. BmMSC v pasáži 3 sa hodnotili na homogenitu kultivovaných buniek pomocou detekcie CD44 pomocou testu MTT [39].
Na vyhodnotenie cytoprotektívneho účinku akteozidu a jeho derivátov na bmMSC sa použil MTT test [40]. Model zranenia bol vytvorený na základe predchádzajúcej štúdie [41]. Experimentálny protokol je stručne znázornený na obrázku 3.
4.9. Štatistická analýza
Každý experiment v sekciách 4.2-4.4 a 4.7 sa uskutočnil trojmo a experiment s testom MTT sa uskutočnil v päťnásobnom vyhotovení. Údaje boli zaznamenané ako priemer土SD (štandardná odchýlka). Krivky dávka-odozva boli vynesené pomocou profesionálneho softvéru Origin 6.{2}} (OriginLab, Northampton, MA, USA). Hodnota IC50 bola definovaná ako konečná koncentrácia 50-percentnej inhibície radikálov (relatívna redukčná sila) [42]. Štatistické porovnania sa uskutočnili pomocou jednosmernej ANOVA na zistenie významných rozdielov pomocou SPSS 13.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA) pre Windows.p< 0.05 sa považovalo za štatisticky významné.
5. Závery
Tri prírodné fenylpropanoidové glykozidy, menovite akteozid, forsytozid B a strana pódia, sa môžu podieľať na viacerých dráhach na uplatnenie antioxidačného účinku, vrátane prenosu ET, H plus; a Fe2 plus-chelatačné, ale nie RAF. ET a Hplus-transferové dráhy môžu byť brzdené ramnosylovou skupinou alebo apiosylovou skupinou; avšak Fe2 plus-chelatačná dráha môže byť posilnená cukrovými zvyškami (najmä ramnosylovou skupinou). Všeobecným účinkom ramnosylovej skupiny alebo apiosylovej skupiny je zvýšenie schopnosti zachytávať ROS s použitím viacerých dráh. Forsytozid B a poliumozid sú teda lepšie ako akteozid v cytoprotektívnych účinkoch.
Doplnkové materiály:Doplnkové materiály sú dostupné online. 1. Krivky dávka-odozva; 2. HPLC-MS spektrá; 3. Analytické certifikáty akteozidu, forsytozidu B a poliumozidu.
Poďakovanie:Túto prácu podporili Národná vedecká nadácia Číny (81573558, 81603269), Vedecký a technologický projekt Guangdong (2017A050506043) a Nadácia prírodných vied provincie Guangdong (2 017A030312009, 2015A01031044).
Príspevky autora:Xian Li a Dongfeng Chen navrhli a navrhli experimenty; Aichi Wu pripravil poliumozid; Yulu Xie, Qian Guo a Penghui Xue vykonali antioxidačné experimenty; Ke Li a Wei Zhao vykonali experimenty MTT; Hong Xie analyzoval údaje; Jiasong Guo vykonal experiment na obrázku 2D; Xian Li napísal noviny. Všetci autori prečítali a schválili konečný rukopis.
Konflikt záujmov:Autori nedeklarujú žiadny konflikt záujmov.
akteozidvcistanche
A skratky
ABTS plus • radikál 2,2'-azino-bis (3-etylbenzo-tiazolín-6-sulfónová kyselina)
bmMSCs mezenchymálne kmeňové bunky odvodené z kostnej drene
CUPRAC meďnatý znižujúci antioxidačnú kapacitu
dAMP 2'-deoxyadenozín-5'-monofosfátový radikál
DMEM Dulbeccovo modifikované Eagleovo médium
dGMP 2/-deoxyguanozín-5'-monofosfátový radikál
DPPHe 1,1-difenyl-2-pikrylhydrazínový radikál
ET prenos elektrónov; FBS: Fetálne hovädzie sérum
FRAP železité ióny znižujúce antioxidačnú silu;
HAT prenos atómu vodíka
MTT 3-(4,5-dimetyltiazol-2-yl)-2,5-difenyl
PCET prenos elektrónov spojený s protónom
PTIOe 2-fenyl-4,4,5,5-tetrametylimidazolín-1-oxyl3-oxidový radikál
Tvorba radikálového aduktu RAF
ROS reaktívne formy kyslíka
Transfer jadra somatickej bunky SCNT
SEPT sekvenčný prenos elektrón-protón
SPLET sekvenčný prenos jedného elektrónu so stratou protónu
TPTZ 2,4,6-tripyridyltriazín
Trolox (±)-6-hydroxyl-2,5,7,8-tetrametylchróman-2-karboxylová kyselina
Referencie
1. Kubica, P.; Szopa, A.; Ekiert, H. Produkcia verbascozidu a fenolových kyselín v biomase Verbena Officinalis L. (vervain) kultivovanej za rôznych podmienok in vitro. Nat. Prod. Res. 2017, 31, 1663-1668.
2. Lee, JH; Chun, JL; Kim, KJ; Kim, EY; Kim, DH; Lee, BM; Han, KW; Park, KS; Lee, KB; Kim, MK Účinok akteozidu ako bunkového ochrancu na produkciu klonovaného psa. PLoS ONE 2016,11, e0159330.
3. Wang, veliteľstvo; Xu, YX; Yang, J.; Zhao, XY; Sun, XB; Zhang, YP; Guo, JC; Zhu, CQ Acteoside chráni bunky ľudského neuroblastómu SH-SY5Y proti |3-amyloidom vyvolanému poškodeniu buniek. Brain Res. 2009,1283,139-147.
4. Yang, JH; Yan, Y.; Liu, HB; Wang, JH; Hu, JP Ochranné účinky akteozidu proti poškodeniu spôsobenému röntgenovým žiarením vo fibroblastoch ľudskej kože. Mol. Med. Rep. 2015, 12, 2301-2306.
5. Liu, CH; Liu, TS; Luo, CQ; Zhang, J.; Zeng, XY; Cui, L.; Xie, LJ Stanovenie forsytiazidu B a poliumozidu rôzneho pôvodu a častí z Callicarpa kwangtungensis. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi 2013, 38, 3324-3326.
6. Jiang, WL; Tian, JW; Fu, FH; Zhu, HB; Hou, J. Neuroprotektívna účinnosť a terapeutické okno forsytozidu B: Ina Rat Model cerebrálnej ischémie a reperfúzneho poškodenia. Eur. J. Pharmacol. 2010, 640, 75-81.
7. Pan, N.; Hori, H. Antioxidačný účinok akteozidu a jeho analógov na peroxidáciu lipidov. Redox Rep. 1996, 2, 149-154.
8. Zheng, RL; Shi, YM; Jia, ZJ; Zhao, CY; Zhang, Q.; Tan, XR Rýchla oprava radikálov DNA. Chem. Soc. Rev. 2010, 39, 2827-2834.
9. Li, XC; Mai, WQ; Chen, DF Chemická štúdia o ochrannom účinku proti poškodeniu DNA vyvolanému hydroxylom a antioxidačnom mechanizme myricitrínu. J. Chin. Chem. Soc. 2014, 61, 383-390.
10. Shi, YM; Wang, WF; Huang, CY; Jia, ZJ; Yao, S.; Zheng, RL Rýchla oprava oxidačného poškodenia DNA fenylpropanoidovými glykozidmi a ich analógmi. Mutagenéza 2008, 23, 19-26.
11. Jiang, Q.; Li, XC; Tian, YG; Lin, QQ; Xie, H.; Lu, WB; Chi, YG; Chen, DF Lyofilizované vodné extrakty z Mori Fructus a Mori Ramulus chránia mezenchymálne kmeňové bunky pred poškodením ošetreným eOH: Biotest a antioxidačný mechanizmus. Doplnok BMC. Altern. Med. 2017,17,242.
12. Wang, TT; Zeng, GC; Li, XC; Zeng, HP In vitro štúdie o antioxidačnom a ochrannom účinku 2-substituovaných-8-derivátov hydroxychinolínov proti H2O2-indukovanému oxidačnému stresu v BMSC. Chem. Biol. Drug Des. 2010, 75, 214-222.
13. Liu, JJ; Li, XC; Lin, J.; Li, YR; Wang, TT; Jiang, Q.; Chen, DF Sarcandra Glabra (Caoshanhu) chráni mezenchymálne kmeňové bunky pred oxidačným stresom: Biohodnotenie a mechanická chémia. Doplnok BMC. Altern. Med. 2016, 16, 423.
14. Li, XC; Han, L.; Li, YR; Zhang, J.; Chen, JM; Lu, WB; Zhao, XJ; Lai, YT; Chen, DF; Wei, G. Ochranný účinok sinapínu proti poškodeniu mezenchymálnych kmeňových buniek vyvolanému hydroxylovými radikálmi a možným mechanizmom. Chem. Pharm. Bull. 2016, 64, 319-325.
15. Bertolo, A.; Capossela, S.; Frankl, G.; Baur, M.; Potzel, T.; Stoyanov, J. Oxidačný stav predpovedá kvalitu ľudských mezenchymálnych kmeňových buniek. Stem Cell Res. Ther. 2017, 8, 3.
16. Li, XC 2-fenyl-4,4,5,5-tetrametylimidazolín-1-oxyl 3-oxid (PTIOe) Radical Scavenging: Nový a jednoduchý antioxidant Test in vitro. J. Agric. Food Chem. 2017, 65, 6288-6297.
17. Li, X. Vylepšená metóda autooxidácie pyrogalolu: Spoľahlivý a lacný test na zachytávanie superoxidu vhodný pre všetky antioxidanty. J. Agric. Food Chem. 2012, 60, 6418-6424.
18. Li, XC; Jiang, Q.; Wang, TT; Liu, JJ; Chen, DF Porovnanie antioxidačných účinkov kvercitrínu a izokvercitrínu: Pochopenie úlohy skupiny 6〃-OH. Molekuly 2016, 21,1246.
19. Leopoldini, M.; Marino, T.; Russo, N.; Toscano, M. Antioxidačné vlastnosti fenolových zlúčenín: H-atóm verzus mechanizmus prenosu elektrónov. J. Phys. Chem. A 2004,108, 4916^922.
20. Benzie, MFF; Kmeň, JJ Schopnosť plazmy redukovať železo (FRAP) ako miera "antioxidačnej sily": Skúška FRAP. Anal. Biochem. 1996, 239, 70-76.
21. Gulcin, I. Antioxidačná aktivita zložiek potravy: prehľad. Arch. Toxicol. 2012, 86, 345-391.
22. Goldstein, S.; Russo, A.; Samuni, A. Reakcie PTIO a karboxy-PTIO s ・NO, ・NO2 a O2. J. Biol. Chem. 2003, 278, 50949-50955.
23. Li, X.; Han, WJ; Mai, WQ; Wang, L. Antioxidačná aktivita a mechanizmus tetrahydroamentoflavónu in vitro. Nat. Prod. komun. 2013, 8, 787-789.
24. Zhang, HY; Wu, W.; Mo, YR Štúdia protónovo viazaného prenosu elektrónov (PCET) so štyrmi explicitnými diabatickými stavmi na úrovni ab Initio. Výpočet. teor. Chem. 2017, 1116, 50-58.
25. Lin, J.; Li, XC; Chen, L.; Lu, WZ; Chen, XW; Han, L.; Chen, DF Ochranný účinok proti poškodeniu DNA vyvolanému hydroxylovými radikálmi a antioxidačný mechanizmus [6]-gingerolu: Chemická štúdia. Bull. Korean Chem. Soc. 2014, 35, 1633-1638.
26. Iuga, C.; Alvarez-Idaboy, JR; Russo, N. Antioxidačná aktivita trans-resveratrolu smerom k hydroxylovým a hydroperoxylovým radikálom: Štúdia kvantovej chemickej a počítačovej kinetiky. J. Org. Chem. 2012, 77, 3868-3877. [CrossRef] [PubMed]
27. Li, XC; Hu, QP; Jiang, SX; Li, F.; Lin, J.; Han, L.; Hong, YL; Lu, WB; Gao, YX; Chen, DF Flos Chrysanthemi Indici Chráni pred poškodením DNA a MSC spôsobeným hydroxylom prostredníctvom antioxidačného mechanizmu. J. Saudi Chem. Soc. 2015, 19, 454-460.
28. Amic, A.; Markovič, Z.; Markovič, JMD; Stepanič, V.; Lucic, B.; Amic, D. Smerom k zlepšenej predikcii schopnosti flavonoidov zachytávať voľné radikály: Význam dvojitých mechanizmov PCET. Food Chem. 2014, 152, 578-585.
29. Lee, CH; Yoon, JY UV Priama fotolýza 2,2'-a-bis(3-etylbenzotiazolín-6-sulfonátu) (ABTS) vo vodnom roztoku: Kinetika a mechanizmus. J. Photochem. Photobiol. A 2008, 197, 232-238.
30. Aliaga, C.; Lissi, EA Reakcia radikálov odvodených od 2,2'-azinobis(3-etylbenzotiazolín-6-kyseliny sulfónovej (ABTS) s hydroperoxidmi. Kinetics and Mechanism. Int. J. Chem. Kinet. 1998, 30, { {8}}.
31. Osman, AM; Wong, KKY; Fernyhough, A. ABTS Radical-Driven Oxidation of Polyphenols: Isolation and Structural Elucidation of Covalent Addducts. Biochem. Biophys. Res. komun. 2006, 346, 321-329.
32. Osman, AM Multiple Pathways of the Reaction of 2,2-Difenyl-1-Picrylhydrazyl Radiical (DPPHe) s (plus)-katechínom: Dôkaz tvorby kovalentného aduktu medzi DPPHe a oxidovanou formou polyfenolu. Biochem. Biophys. Res. komun. 2011, 412, 473-478.
33. Lopez-Munguia, A.; Hernandez-Romero, Y.; Pedraza-Chaverri, J.; Miranda-Molina, A.; Regla, I.; Martinez, A.; Castillo, E. Phenylpropanoid Glycoside Analogues: Enzymatic Synthesis, Antioxidačná aktivita a teoretická štúdia ich mechanizmu zachytávania voľných radikálov. PLoS ONE 2011, 6, e20115.
34. Perron, NR; Brumaghim, JL Prehľad antioxidačných mechanizmov polyfenolových zlúčenín súvisiacich s viazaním železa. Cell Biochem. Biophys. 2009, 53, 75-100.
35. Devos, D.; Moreau, C.; Devedjian, JC; Kluza, J.; Perrault, M.; Laloux, C.; Jonneaux, A.; Ryckewaert, G.; Garcon, G.; Rouaix, N.; a kol. Zameranie na chelatovateľné železo ako terapeutickú modalitu pri Parkinsonovej chorobe. Antioxid. Redoxný signál. 2014, 21, 195-210.
36. Cekič, SD; Baskan, KS; Totem, E.; Apak, R. Test modifikovanej antioxidačnej kapacity redukcie medi (CUPRAC) na meranie antioxidačných kapacít proteínov obsahujúcich tiol v zmesi s polyfenolmi. Talanta 2009, 79, 344-351.
37. Li, XC; Chen, DF; Mai, Y.; Wen, B.; Wang, XZ Súlad medzi antioxidačnými aktivitami in vitro a chemickými zložkami Radix Astragali (Huangqi). Nat. Prod. Res. 2012, 26, 1050-1053.
38. Chen, DF; Li, XC; Xu, ZW; Liu, XB; Du, SH; Li, H.; Zhou, JH; Zeng, HP; Hua, ZC kyselina hexadekanová z odvaru Buzhong Yiqi indukovala proliferáciu mezenchymálnych kmeňových buniek kostnej drene. J. Med. Jedlo 2010, 13, 967-975.
39. Li, X.; Liu, JJ; Lin, J.; Wang, TT; Huang, JY; Lin, YQ; Chen, DF Ochranné účinky dihydromyricetínu proti »OH-indukovanému poškodeniu mezenchymálnych kmeňových buniek a mechanická chémia. Molekuly 2016,21,604.
40. Wang, GR; Li, XC; Zeng, HP Synthesis, Antioxidačná aktivita (E)-9-p-tolyl-3-2-(8-hydroxy-chinol- 2-yl)vinyl-karbazolu a (E){{8 }}(p-anizyl)-3-2-(8-hydroxy-chinol-2-yl)vinyl-karbazol a ich indukcia proliferácie mezenchymálnych kmeňových buniek. Acta Chim. Sin. 2009, 67, 974-982.
41. Li, X.; Wei, G.; Wang, X.; Liu, D.; Deng, R.; Li, H.; Zhou, J.; Li, Y.; Zeng, H.; Chen, D. Zacielenie dráhy Shh atraktylenolidmi podporuje chondrogénnu diferenciáciu mezenchymálnych kmeňových buniek. Biol. Pharm. Bull. 2012, 35, 1328-1335.
42. Li, XC; Gao, YX; Li, F.; Liang, AF; Xu, ZM; Bai, Y.; Mai, WQ; Han, L.; Chen, DF Maclurin chráni pred poškodením mezenchymálnych kmeňových buniek vyvolaným hydroxylovými radikálmi: Hodnotenie antioxidantov a mechanistický pohľad. Chem. Biol. Interagujte. 2014, 219, 221-228.
Dostupnosť vzorky: Vzorka zlúčeniny poliumozidu je dostupná od autorov.
© 2018 od autorov. Držiteľ licencie MDPI, Bazilej, Švajčiarsko. Tento článok je článok s otvoreným prístupom distribuovaný za podmienok licencie Creative Commons Attribution (CC BY) (http:ZZcreativecommons.org/licenses/byZ4.0Z).
