Preexistujúca imunita T-buniek voči SARS-CoV-2 v neexponovaných zdravých kontrolách v Ekvádore, ako sa zistilo testom COVID-19 interferónu-gama

ABSTRAKT

Pozadie: Štúdie imunitných reakcií T-buniek proti SARS-CoV-2 sú dôležité pre pochopenie imunitného stavu jednotlivcov alebo populácií. Tu používame jednoduchý, lacný a rýchly test stimulácie plnej krvi – test interferónu-gama uvoľňovania (IGRA) – na štúdium imunity T-buniek voči SARS-CoV-2 u pacientov v rekonvalescencii COVID-19 a nevystavené zdravé kontakty z Quita v Ekvádore. Metódy: Produkcia interferónu-gama (INF-g) sa merala v heparinizovanej krvi rekonvalescentných a neexponovaných jedincov po 24-hodinovej stimulácii proteínom SARS-CoV-2 Spike S1, proteínom väzbovej domény receptora (RBD), resp. nukleokapsidový (NP) proteín. Prítomnosť IgG-RBD proteínových protilátok v oboch študijných skupinách bola stanovená pomocou "internej" ELISA. Výsledky: Podľa merania produkcie INF-g malo 80 percent pacientov v rekonvalescencii COVID{20}}, všetci séropozitívni na IgG-RBD, silnú odpoveď T-buniek.

Neočakávane však 44 percent neexponovaných zdravých kontrol, všetky IgG-RBD séronegatívne, malo silnú vírusovo špecifickú odpoveď T-buniek na COVID-19 IGRA, pravdepodobne z dôvodu predchádzajúcej expozície bežným koronavírusom spôsobujúcim prechladnutie alebo iným vírusové alebo mikrobiálne antigény. Záver a diskusia: Vysoké percento neexponovaných zdravých jedincov s už existujúcou imunitou naznačuje, že časť ekvádorskej populácie má pravdepodobne T-bunky reaktívne na SARS-CoV{8}}. Vzhľadom na to, že technika IGRA je jednoduchá a možno ju ľahko rozšíriť na vyšetrenia, pri ktorých je potrebný vysoký počet pacientov, táto IGRA COVID{10}} môže slúžiť na určenie, či odpoveď iba T-buniek predstavuje ochrannú imunitu voči SARS-CoV -2 infekcia v populačnej štúdii. © 2021 Autori. Vydal Elsevier Ltd v mene Medzinárodnej spoločnosti pre infekčné choroby.

Zároveň, keď je naša imunita nízka, existuje veľa spôsobov, ako zlepšiť imunitu, príjem potravín, ktoré môžu posilniť imunitu, ako sú cistanche, polysacharidy, bielkoviny, aminokyseliny a ďalšie látky obsiahnuté v cistanche často dokážu regulovaťiimunitný systém.

Click cistanche tubulosa extraktový práškový produkt

Úvod

Imunitná odpoveď na infekciu SARS-CoV-2 zahŕňa nielen produkciu protilátok, ale infekcia spúšťa u pacientov aj reakciu T-buniek (Lipsitch a kol., 2020, Ni a kol., 2020). Vo všeobecnosti sa stanovenie prítomnosti a veľkosti špecifickej odpovede pamäťových T-buniek na túto koronavírusovú infekciu vykonáva pomocou testu ELISPOT stanovením počtu lymfocytov, ktoré produkujú IFN-g po stimulácii antigénmi alebo peptidmi špecifickými pre ochorenie (Ni a kol., 2020, Pai a kol., 2014, Abate a kol., 2013, Braun a kol., 2020, Grifono a kol., 2020, LeBert a kol., 2020, Sekine a kol., 2020).

Pre túto techniku ​​sa mononukleárne bunky periférnej krvi (PBMC) izolujú z čerstvej heparinizovanej krvi centrifugáciou s gradientom hustoty; sekrécia cytokínov jednotlivými T-bunkami sa kvantifikuje mikroskopom alebo špeciálnym prístrojom – čítačkou platní ELISPOT. Test ELISPOT je technika „len pre výskumné laboratóriá“, ktorá je veľmi pracná, technicky náročná, relatívne drahá a nedá sa ľahko použiť v klinickom laboratóriu alebo použiť v populačných štúdiách. Vzhľadom na náklady, infraštruktúru a laboratórne požiadavky potrebné na vykonanie testu môže byť jeho použitie v prostredí s obmedzenými zdrojmi, ako je Ekvádor, minimálne.

Bunkové imunitné reakcie možno určiť aj priamočiarejším testom: testom uvoľňovania interferónu-gama (IGRA). Tento test, krvný test in vitro, kvantifikuje cytokíny vylučované T-bunkami (tj gama interferón (IFN-g); možno však kvantifikovať aj iné cytokíny ako TNF alebo IL-2) po stimulácii celej krvi (nielen izolované lymfocyty) so špecifickými antigénmi (Pai et al., 2014, Abate et al., 2013). Vylučovaný cytokín IFN-g sa meria pomocou testu ELISA, čo je technika ľahko dostupná vo väčšine laboratórií, a výsledky sa odčítajú pomocou čítačky platní ELISA. IGRA našli uplatnenie v klinickom laboratóriu a používajú sa na stanovenie latentnej infekcie Mycobacterium tuberculosis (MTB), ako aj na meranie bunkami sprostredkovanej imunity špecifickej pre cytomegalovírus (CMV) a predpovedanie infekcie CMV u príjemcov transplantátu (Pai et al. , 2014, Abate a kol., 2013). Tieto testy IGRA boli dôkladne vyhodnotené a v porovnaní s testom ELISPOT sa ukázalo, že vykazujú podobné schopnosti na predpovedanie infekcie MTB alebo CMV. Okrem toho je dostupných niekoľko komerčných testov a testov označených FDA alebo CE na detekciu imunity proti TBC alebo CMV, ktoré sa bežne vykonávajú.

V tejto štúdii skúmame použitie COVID-19 IGRA a hodnotíme veľkosť uvoľňovania IFN-g u rekonvalescentných pacientov s COVID-19 a zdravých kontrol COVID-19 naivných v reakcii na špecifické antigény vírusu SARS-CoV-2: proteín RBD; časť S1 Spikeho proteínu; alebo nukleokapsidový (N) proteín. Okrem toho určujeme prítomnosť SARS-CoV-2 špecifických IgG protilátok u týchto účastníkov pomocou „internej“ ELISA (Amanat a kol., 2020, Guevara a kol., 2021). Ukázali sme, že významné percento neexponovaných darcov má SARS-CoV-2 reaktívne T-bunky, a o týchto výsledkoch diskutujeme.

materiál a metódy

Rekonvalescentní pacienti s COVID{0}}, zdravé kontroly a prostredie

Táto štúdia bola vykonaná v Quite v Ekvádore v septembri 2020. Na predurčenie veľkosti vzorky neboli použité žiadne štatistické metódy. Tabuľka 1 ukazuje charakteristiky 32 pacientov v tejto štúdii: trinásť pacientov v rekonvalescencii COVID-19, všetci s nezávažnými symptómami/príznakmi COVID{5}} a pozitívnou diagnózou RT-PCR v júni 2020; a 17 neexponovaných zdravých kontrol. Tieto zdravé kontroly boli počas pandémie mimoriadne opatrné, vyhýbali sa kontaktu s inými ľuďmi a počas trvania pandémie sami nehlásili žiadne z typických príznakov a symptómov COVID{10}}, ako je horúčka, pretrvávajúci kašeľ, alebo strata čuchu alebo chuti. Do tejto štúdie boli zahrnutí aj dvaja asymptomatickí nosiči SARS-CoV{12}}. U týchto dvoch subjektov sa nikdy neprejavili žiadne symptómy ani príznaky ochorenia COVID{13}}; technika RT-PCR na nich však bola vykonaná ako požiadavka na pracovné povolenie v júni 2020 a výsledkom boli pozitívne diagnózy.

sérológia

Sérológia a IGRA pre všetkých pacientov a kontroly boli vykonané počas posledných dvoch týždňov v septembri 2020, tri mesiace po diagnostike RT-PCR u pacientov v rekonvalescencii. Na určenie prítomnosti IgG protilátok špecifických pre koronavírus v našej študijnej skupine sa použila „interná“ ELISA IgG ELISA na väzbovú doménu SARS-CoV{5}} receptora (RBD) (9, 10).

Test uvoľňovania gama interferónu (IGRA)

Pre IGRA sa odobrala heparinizovaná vzorka krvi (4 ml) a rozdelila sa na alikvóty po 250 ml a stimulovala sa 2 mg/ml proteínu RBD (izolačný postup z referencie 9) alebo 2 mg/ml komerčne dostupného nukleokapsidu. (N) proteín alebo Spike (S1) proteín (ViroGen, katalógové čísla: 00,221-V a 00,226-V v uvedenom poradí). Na stanovenie optimálnej koncentrácie antigénov na stimuláciu v IGRA sa použila krivka závislosti odozvy na dávke s krvou od IGRA-pozitívnych a IGRA-negatívnych pacientov. Pri 2 ug/ml bola maximálna odpoveď IFN-g v krvi od pacientov s COVID{15}} zistená bez stimulácie u neinfikovaných kontrol. Pre každého účastníka bola zahrnutá nestimulovaná kontrola (NIL) a testovali sme 250 ml krvnú vzorku s mitogénnym fytohemaglutinínom (PHA), čo je pozitívna kontrola na vyhodnotenie miery cytokínovej odpovede vzorky krvi. Stimulácia sa uskutočnila v 96-jamkovej doštičke ELISA s plochým dnom pri 37 °C počas 24 hodín. Odobrala sa plazma a produkcia IFN-g sa stanovila pomocou testu ELISA s ľudským IFN-g (MaxTM Standard Set Biolegend kat. č. 430,101).

Výsledky

RBD IgG ELISA ukázala, že všetci symptomatickí pacienti COVID{{0}} (pozitívni RT-PCR) boli pozitívni na IgG protilátky proti proteínu RBD tri mesiace po diagnostike RT-PCR. Dvaja asymptomatickí RT-PCR pozitívni pacienti a všetci zdraví neexponovaní kontrolní pacienti boli séronegatívni s týmto testom ELISA (pozri tabuľku 1). Výsledky stimulácie plnej krvi v teste COVID-19 IGRA sú znázornené na obrázku 1. Silná indukcia produkcie IFN-g sa zistila u 80 percent symptomatických pacientov COVID-19 s všetky tri antigény, ale proteín N a proteín S boli najsilnejšími stimulátormi odpovede IFN-g (obrázok 1 A, B, C). Dvaja asymptomatickí, ale RT-PCR pozitívni pacienti (pacienti 14 a 15), obaja bez špecifických protilátok SAR-CoV-2, tiež vykazovali silnú indukovateľnú imunitnú odpoveď T-buniek. 45 percent pacientov, ktorí ešte netrpeli COVID{19}}, vykazovalo indukovateľnú T-bunkovú imunitu. Odozva týchto zdravých neexponovaných kontrol s odpoveďou T-buniek sa štatisticky významne nelíšila v rozsahu od zotavujúcich sa pacientov s COVID{23}} na žiadny zo stimulujúcich antigénov (p-hodnota=0.271, 0.437, a 0,719 pre proteíny RBD, N a S1).

Obrázok 1. Produkcia IFN-g po stimulácii plnej krvi rekonvalescentných pacientov s COVID{2}} a zdravých neexponovaných kontrol s RBD, N alebo S1 proteínom.

Výsledky stimulácie pacientov v rekonvalescencii a kontrol s proteínom RBD, N alebo S1 sú znázornené na obr. 1A, B a C. Na obr. 1D sú odpovede INF-g každého pacienta a na tri antigény sú zoskupené. Pacienti s potvrdenou infekciou COVID{4}} sú očíslovaní 1 – 15, z toho pacienti 14 a 15 boli asymptomatickí. Subjekty 16 – 33 sú COVID{11}} naivní pacienti.

Po 24 hodinách stimulácie sa stanovili koncentrácie IFN-g v plazme pomocou komerčne dostupnej súpravy na báze imunosorbentného testu s enzýmom spojeným s ľudským IFN-g (Biolegend kat. č. 430,101). Veľkosť stimulácie bola vyjadrená ako optická hustota pri 450 nm (OD450) pre krv stimulovanú antigénom mínus OD450 pre krv bez stimulácie antigénom. OD 1,0 zodpovedala približne 400 pg/ml IFN-g. Fytohemaglutinín (PHA) sa použil ako mitogén v konečnej koncentrácii 5 mg/ml v IGRA na posúdenie kvality a schopnosti reakcie krvi. Všetci pacienti a kontroly vykazovali maximálnu produkciu cytokínu týmto mitogénom so strednou optickou hustotou (OD450) 2,54 (SD=0 0,13), čo predstavuje približne 1000 pg/ml IFN-g. Neexistoval žiadny rozdiel v mediáne hladiny IFN-g v nestimulovanej krvi pacientov v rekonvalescencii a zdravých kontrol (OD450=0.38, SD=0.14 oproti OD450=0.32. SD=0.16). Tieto výsledky nie sú zobrazené. V každom grafe bola nakreslená vodorovná čiara, ktorá predstavuje hraničnú hodnotu pre stimuláciu. Táto hodnota bola stanovená výpočtom priemeru plus dvoch štandardných odchýlok odpovede deviatich subjektov (pacientov 16, 18, 19, 22, 27–31) z kontrolnej skupiny s najnižšou produkciou INF–g po stimulácii.

Diskusia a závery

Pomocou ľahko vykonateľného testu plnej krvi, ktorý hodnotí reakcie T-buniek, sme zistili, že väčšina pacientov v rekonvalescencii a významná časť zdravých neexponovaných jedincov mala špecifickú a silnú reakciu T-buniek zistenú produkciou INF-g po stimulácii. so špecifickými antigénmi SARS-CoV-2 (obrázok 1). Niekoľko štúdií, všetky využívajúce test ELISPOT, uviedlo prítomnosť odpovede T-buniek u väčšiny alebo všetkých pacientov v rekonvalescencii COVID{9}} (Braun a kol., 2020, Grifono a kol., 2020, LeBert a kol. , 2020, Sekine a kol., 2020, Moderbacher a kol., 2020, Mateus a kol., 2020, Peng a kol., 2020).

Čo sa však týka reakcie T-buniek u zdravých neexponovaných kontrol, boli hlásené miery odpovede medzi 28 a 50 percentami (Doshi, 2020, de Vries, 2020, Lipsitch a kol., 2020, Sagar a kol., 2020) a niekoľko štúdie neuvádzajú žiadnu odpoveď T-buniek u pacientov s naivnou kontrolou COVID{8}} (de Vries, 2020, Moderbacher a kol., 2020, Schwarzkopf a kol., 2021). Väčšina týchto štúdií sa uskutočnila pomocou testu ELISPOT, ale v Taliansku a USA sa na detekciu reakcie T-buniek SARS-CoV-2 použil aj IGRA (Petrone a kol., 2020, Murugesan a kol. ., 2020). V oboch štúdiách sa u pacientov v rekonvalescencii zistila špecifická odpoveď T-buniek; avšak IGRA nezistila odpoveď INF-g u zdravých neexponovaných jedincov.

Preexistujúca imunita T-buniek voči SARS-CoV-2 u pacientov naivných COVID-19 bola preskúmaná v niekoľkých publikáciách (Altmann a Boyton, 2020, Dosho et al., 2020, de Vries, 2020, Sette a Crotty, 2020). Dôvod, prečo by sa u zdravého neexponovaného subjektu mohla zistiť špecifická odpoveď T-buniek COVID{9}}, zostáva nejasný a je predmetom špekulácií. Väčšina štúdií ELISPOT na pacientoch, ktorí ešte nikdy neboli na COVID{11}}, používala vzorky ľudskej krvi získané pred objavením vírusu SARS-CoV-2 v roku 2019, teda pred akoukoľvek možnosťou expozície. Z tohto dôvodu tieto štúdie ELISPOT dospeli k záveru, že odpoveď T-buniek u neexponovaných zdravých jedincov pravdepodobne pochádza z predchádzajúceho kontaktu s cirkulujúcimi koronavírusmi „bežného prechladnutia“ (Grifoni a kol., 2020, Matheus a kol., 2020) alebo z predchádzajúcej expozície chrípke. a/alebo CMV vírusy (Mahajan et al., 2020) alebo iné vírusové alebo mikrobiálne antigény (Tan et al., 2020). V našej štúdii sa použila krv odobratá počas pandémie od dobrovoľníkov, ktorí sami nahlásili nulový kontakt, bola séronegatívna na antigén COVID{21}} RBD a nikdy sa u nich neprejavili žiadne príznaky ani symptómy COVID-19.

Preto nemôžeme vylúčiť, že odpoveď T-buniek v niektorých našich „naivných“ zdravých kontrolách COVID{1}} pochádza z asymptomatických infekcií vírusom SARS-CoV-2. Pacienti 14 a 15 našej štúdie sú toho príkladom. Títo jedinci boli klasifikovaní ako pacienti s COVID-19 kvôli pozitívnej RT-PCR; boli však asymptomatické a nevyvinula sa u nich protilátková odpoveď proti proteínu RBD, ale obe vykazovali silnú odpoveď T-buniek.

Je možné, že po kolonizácii nosohltanu SARS-CoV-2 im imunitný systém týchto dvoch asymptomatických pacientov zanechal reakciu iba na pamäťové T-bunky a žiadne protilátky špecifické pre SARS-CoV-2 vyvolané. Ďalším vysvetlením je, že odpoveď T-buniek pochádza z predchádzajúcej infekcie podobnej koróne a už existujúca imunitná odpoveď T-buniek chránila týchto dvoch pacientov pred rozvojom invazívnejšieho modelu ochorenia. Preexistujúce skrížene reaktívne T-bunky by mohli byť významné pri vysvetľovaní niektorých rozdielov v miere infekcie alebo patológii (Le Bert a kol., 2020, Sagar a kol., 2020). Pokiaľ ide o kohortu naivných kontrol, vylúčili sme, že táto skupina obsahuje značný počet jedincov infikovaných SARSCoV-2 s nezistenou asymptomatickou infekciou, v podstate preto, že všetky integrandy kontrolnej skupiny sú IgG séronegatívne pre antigén RBD.

Ďalším dôvodom je, že prevalencia infekcie v Ekvádore je relatívne nízka. V čase tejto štúdie, v septembri 2020, Ekvádor hlásil približne 200000 potvrdených prípadov COVID-19 (približne 1,1 percenta populácie). Samozrejme, skutočná prevalencia infekcie mohla byť niekoľkonásobne vyššia, ale aj tak je nepravdepodobné, že sa nakazilo 45 percent tejto kontrolnej skupiny, a preto sa pozeráme na reakciu T-buniek špecifickú pre SARS-CoV{ {9}} infekcia.

Na záver, zistenie vysokého percenta neexponovaných zdravých jedincov s už existujúcou imunitou v Quite v Ekvádore vyvoláva očakávania, že významná časť našej populácie bude mať pravdepodobne T-bunky reaktívne na SARS-CoV{2}}, pretože predchádzajúcej expozície chrípke, CMV vírusom alebo bežným koronavírusom spôsobujúcim prechladnutie. Cieľom budúcich výskumov by malo byť zistenie, či už existujúca imunitná odpoveď chráni a/alebo môže prekonať závažnejšie ochorenie COVID{6}} alebo či prispieva k rýchlejšiemu uzdraveniu.

Význam a obmedzenia tejto štúdie

Naša štúdia ukázala, že COVID-19 IGRA je užitočný a citlivý nový nástroj, ktorý dokáže posúdiť expozíciu koronavírusom alebo krížovú reaktivitu s podobnými vírusmi stanovením uvoľňovania IFN-g po stimulácii antigénmi špecifickými pre vírus. Technika je jednoduchá, relatívne lacná a možno ju použiť v klinickom laboratóriu. Toto rozhodne nie je prípad testu ELISPOT. Okrem toho je možné test IGRA jednoducho rozšíriť pre populačné štúdie a vyšetrenia, kde je potrebný vysoký počet pacientov. Spolu so sérológiou sa IGRA môže použiť na skríning protilátkových a T-bunkových reakcií jednotlivých pacientov, aby sa lepšie porozumelo imunite na úrovni populácie a určila sa už existujúca imunita u séronegatívnych jedincov.

Dôležitým obmedzením našej štúdie je, že študijná vzorka nie je reprezentatívna pre populáciu. Na predurčenie veľkosti vzorky neboli použité žiadne štatistické metódy. Okrem toho náš test nerozlišoval medzi produkciou IFN-g buniek CD4 plus alebo CD8 plus, ale možno zvážiť stimuláciu s definovanými peptidmi CD8(plus) a CD4(plus) (Grifoni et al., 2020, Peng et al. , 2020) a bol použitý v IGRA opísaných v Petrone a kol., 2020 a Murugesan a kol., 2020). Pomocou tohto IGRA možno merať aj indukciu iných cytokínov (Petrone et al., 2020). Podobne sa IGRA môže použiť na sledovanie očkovania na určenie vývoja reakcie T-buniek u očkovaných jedincov alebo sa môže použiť na určenie, či je prítomnosť skrížene reaktívnych pamäťových T-buniek spojená s ochrannou imunitou a môže zmierniť prejavy ochorenia spôsobené infekciou SARS-CoV-2 (Sagar et al., 2020).

Etický súhlas a súhlas s účasťou

Krv bola odobratá po informovanom písomnom súhlase. Etická komisia Ministerstva zdravotníctva Ekvádoru schválila protokol štúdie 004–2020.

Konflikt záujmov

Autori vyhlasujú, že nemajú žiadne konkurenčné záujmy.

Autorské príspevky

Študovať dizajn; JHW a GE; Zber údajov a laboratórne experimenty: GE, AG, JC, AMR a MMV; Analýza dát; JHW, GE a ET; Písanie: JHW, GE a ET.

Poďakovanie

Vyjadrujeme našu vďačnosť všetkým darcom a zdravotníckemu personálu zapojenému do tejto práce, najmä Sandre Vivero a Sandre Fonseca, za pomoc pri odbere vzoriek. Túto štúdiu podporil výskumný fond z Universidad de las Américas. Inštitút udržateľných vied, San Francisco, Kalifornia, USA, a nadácia „Por Todos“ v Ekvádore poskytli proteín RBD a „internú“ ELISA. Ďakujem Howardovi E. Takiffovi a Flor Pujol (IVIC, Venezuela), Pauline E. Andrade (USFQ, Ekvádor) a Lilly Verhagen (UMC, Holandsko) za ich plodné diskusie.

Referencie

Abate D, Saldan A, Mengoli C, Fiscon M, Silvestre C, Fallico L a kol. Porovnanie testov uvoľňujúcich gama interferón s enzýmom spojeným s cytomegalovírusom (CMV) a kvantifikátorom CMV pri hodnotení rizika infekcie CMV u príjemcov transplantovanej obličky. J Clin Microbiol 2013;51(8):2501–7.

Altmann DM, Boyton RJ. T bunková imunita SARS-CoV-2: špecifickosť, funkcia, trvanlivosť a úloha pri ochrane. Sci Immunol 2020;5(49)eabd6160.

Amanat F, Stadlbauer D, Strohmeier S, Nguyen THO, Chromikova V, McMahon M a kol. Sérologický test na detekciu sérokonverzie SARS-CoV-2 u ľudí. Nat Med 2020;26:1033–6.

Braun J, Loyal L, Frentsch M, Wendisch D, Georg P, Kurth F a kol. SARS-CoV-2- reaktívne T bunky u zdravých darcov a pacientov s COVID-19. Príroda 2020;587:270–4.

de Vries RD. SARS-CoV-2-špecifické T-bunky u neexponovaných ľudí: prítomnosť skrížene reaktívnych pamäťových buniek sa nerovná ochrannej imunite. Sig Transduct Target Ther 2020;5:224.

Doshi P. Covid-19: má veľa ľudí už existujúcu imunitu? BMJ 2020;370: m3563.

Grifoni A, Weiskopf D, Ramirez SI, Mateus J, Dan JM, Moderbacher ČR a kol. Ciele odpovedí T-buniek na koronavírus SARS-CoV-2 u ľudí s ochorením COVID-19 a neexponovaných jedincov. Cell 2020;181(7)1489-501.

Guevara A, Vivero S, Nipaz V, Guaraca V, Coloma J. Nízkonákladová SARS-CoV-2 rRBD ELISA na zistenie sérostatu v ekvádorskej populácii s COVID-19. Am J Trop Med Hyg [39_TD$DIFF]2021.

Le Bert N, Tan AT, Kunasegaran K, Tham CYL, Hafezi M, Chia A a kol. Imunita T-buniek špecifická pre SARS-CoV{1}} v prípadoch COVID-19 a SARS a neinfikované kontroly. Príroda 2020;584(7821):457–62.

Lipsitch M, Grad YH, Sette A, Crotty S. Krížovo reaktívne pamäťové T bunky a stádová imunita voči SARS-CoV-2. Nat Rev Immunol 2020.

Mahajan S, Kode V, Bhojak K, Magdalene CM, Lee K, Manoharan M a kol. Imunodominantné T-bunkové epitopy z spike antigénu SARS-CoV-2 odhaľujú robustnú už existujúcu T-bunkovú imunitu u neexponovaných jedincov. bioRxiv 2020.

Mateus J, Grifoni A, Tarke A, Sidney J, Ramirez SI, Dan JM a kol. Selektívne a skrížene reaktívne T bunkové epitopy SARS-CoV{1}} u neexponovaných ľudí. Science 2020;370 (6512):89–94.

Moderbacher RC, Ramirez SI, Dan JM, Grifoni A, Hastie KM, Weiskopf D a kol. Antigénovo špecifická adaptívna imunita voči SARS-CoV-2 pri akútnom COVID-19 a súvislosti s vekom a závažnosťou ochorenia. Cell 2020; S0092-8674(20):31235–6.

Murugesan K, Jagannathan P, Pham TD, Pandey S, Bonilla HF, Jacobson K a kol. Test uvoľňovania interferónu-gama na presnú detekciu SARS-CoV-2 T-bunkovej odpovede. Clin Infect Dis 2020; ciaa1537.

Ni L, Ye F, Cheng ML, Feng Y, Deng YQ, Zhao H a kol. Detekcia SARS-CoV-2- špecifickej humorálnej a bunkovej imunity u pacientov v rekonvalescencii COVID-19. Imunita 2020;52(6)971–7.

Pai M, Denkinger CM, Kik SV, Rangaka MX, Zwerling A, Oxlade O a kol. Testy uvoľňovania gama interferónu na detekciu infekcie Mycobacterium tuberculosis. Clin Microbiol Rev 2014;27(1):3–20.

Peng Y, Mentzer AJ, Liu G, Yao X, Yin Z, Dong D a kol. Široká a silná pamäť CD4 plus a CD8 plus T bunky vyvolané SARS-CoV-2 u pacientov v rekonvalescencii v Spojenom kráľovstve po COVID-19. NatImmunol 2020.

Petrone L, Petruccioli E, Vanini V, Cuzzi G, Fard SN, Alonzi T a kol. Test plnej krvi na meranie -2-špecifickej odozvy na SARS-CoV u pacientov s COVID-19. Clin Microbiol Infect 2020.

Sagar M, Reifler K, Rossi M, Miller NS, Sinha P, White L a kol. Nedávna endemická infekcia koronavírusom je spojená s menej závažným ochorením COVID-19. J Clin Invest 2020.

Schwarzkopf S, Krawczyk A, Knop D, Klump H, Heinold A, Heinemann FM a kol. Bunková imunita u COVID-19 rekonvalescentov s infekciou potvrdenou PCR, ale s nedetegovateľným SARS-CoV-2-špecifickým IgG. Emerg Infect Dis. 2021;27(1).

Sekine T, Perez-Potti A, Rivera-Ballesteros O, Strålin K, Gorin JB, Olsson A a kol. Robustná imunita T buniek u pacientov v rekonvalescencii s asymptomatickým alebo miernym ochorením COVID-19. Cela 2020;183(1)158–68.

Sette A, Crotty S. Preexistujúca imunita voči SARS-CoV-2: známe a neznáme. Nat Rev Immunol. 2020;20(8)457–8.

Tan CCS, Owen CJ, Tham CYL, Bertoletti A, van Dorp L, Balloux F. Preexistujúca skrížená reaktivita sprostredkovaná T bunkami na SARS-CoV-2 sa nedá vysvetliť iba predchádzajúcou expozíciou endemickým ľudským koronavírusom. bioRxiv 2020; 2020.

For more information:1950477648nn@gmail.com