Štúdia o extrakčných a antioxidačných vlastnostiach flavonoidov v Cistanche

Ďalšie informácie:{0}}

Pieseň Yang

(Inštitút dohľadu a kontroly kvality výrobkov Anshan, Anshan 114006, Liaoning)

Abstraktné: CelkomflavonoidyvCistancheboli extrahované „metódou ultrazvukových vibrácií“ a „Soxhletovou extrakčnou metódou“, a ich obsah aantioxidantvlastnosti boli analyzované. Výsledky stanovenia ukázali, že obsah celkflavonoidyvCistancheextrahovaný ultrazvukovou vibračnou metódou bol vyšší ako extrahovaný Soxhletovou extrakčnou metódou. Miera výťažnosti stanovená experimentmi je 96,85 percent -99,46 percent, presnosť je vysoká a roztok vzorky je veľmi stabilný do 2 hodín, čo naznačuje, že UV-Vis spektrofotometria má vysokú presnosť, malú odchýlku a jednoduché ovládanie experimentálnych podmienok. Analýza a stanovenieantioxidantčinnosťflavonoidyvCistanchefluorescenčnou metódou bola miera klírensu 91,5 percenta, čo naznačuje, žeflavonoidyvCistanchemať silnéantioxidantvlastnosti. V experimente sa zistilo, že použitím fluorescenčnej analýzy na stanovenieantioxidantkapacita celkflavonoidyv extrakte má výhody rýchlosti, jednoduchosti, vysokej citlivosti a dobrej reprodukovateľnosti.

Kľúčové slová: Cistanche; flavonoidy; ultrazvuk; Antioxidant

Klasifikačné číslo čínskej knižnice: TQ028 Identifikačný kód dokumentu: A Číslo článku: 1004-0935 (2013) 01-0013-03

Cistanche

Kliknite na organický Cistanche pre anti-aging

Cistancheje široko používaný ako tonikum. Výskum farmakologických účinkov a chemických zložiekCistancheurobila v posledných rokoch veľký pokrok. Vnútorné Mongolsko AlxaCistancheSkupina vyvinula sériu Cistanche, ktorá vyživuje jin a vyživuje jang, zvlhčuje črevá, posilňuje ľudskú imunitnú funkciu, reguluje endokrinný systém a odďaľuje starnutie. likér,cistanchezdravotná tekutina. V Japonsku sa mäsová kýla používa ako zmierňujúci alebo terapeutický prostriedok na sexuálnu dysfunkciu a amnéziu. V Spojených štátoch sa z echinacey vyrábajú aj zdravotné produkty na zlepšenie imunity organizmu. Na tomto základe by sme mali vykonať hĺbkový výskum aktívnych zložiek jeho farmakologických účinkov a mechanizmu ich účinku. Za predpokladu zabezpečenia účinnosti by sme mali zlepšiť prípravky tradičnej čínskej medicíny, zlepšiť úroveň kontroly kvality a vyvinúť jednoznačné liečebné účinky, bezpečné používanie a kontrolovateľnú kvalitu. Nové produkty tradičnej čínskej medicíny; na druhej strane by sme mali posilniť aj výskum technológie pestovania cistanche, realizovať štandardizovanú výsadbu a industrializovanú produkciu cistanche, umelo pestovať cistanche a založiť industrializovanú pestovateľskú základňu cistanche a jej hostiteľských rastlín a vyriešiť problém nedostatku zdrojov. Zároveň sa bude ďalej realizovať environmentálne riadenie v oblasti západnej púšte. Vďaka neustálemu hĺbkovému výskumu v rôznych aspektoch sa táto tradičná čínska medicína našej krajiny určite presadí na medzinárodný trh a urýchli modernizáciu čínskej medicíny.

1 Experimentálna časť

1.1 Experimentálny prístroj

H, H, S, 21-elektrický ohrievací vodný kúpeľ s konštantnou teplotou (Shanghai No. 5 Medical Instrument Factory); Elektrooptické analytické váhy TG328A (Shanghai Tianping Instrument Factory); 40 mesh sito (Zhejiang Hongxing Instrument Factory) Ultrazvukový extraktor KQ-250B (Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.); Soxhlet Extractor (Továreň na nástroje Zhejiang Hongxing); Model 766-2 sušenie diaľkovým infračerveným žiarením (Shanghai Sunshine Instrument Co., Ltd.); Model HX-200vysokorýchlostný drvič čínskej medicíny (Xi'an Hardware, Zhejiang Yongkang) Medicine Factory); TU-1201 UV spektrofotometer (Beijing Puxi General Instrument Co., Ltd.); presný digitálny merač kyslosti PHS-3C (vyrába Shanghai Tianda Instrument Co., Ltd.); Fluorescenčný spektrofotometer (VARIAN)

1.2 Experimentálne činidlá a liečivá

Cistanche(poskytované v laboratóriu); absolútny etanol (analytická čistota) (Shenyang Xinhua Reagent Factory); rutín (štandard) (poskytovaný v laboratóriu); 50 g/l roztoku dusitanu sodného (domáce); 100g/l roztoku dusičnanu hlinitého (domáce); 40 g/l roztoku hydroxidu sodného (domáce); PH =6,5 zmiešaný roztok fosforečnanu: 0,1 mol/l hydrogenfosforečnan sodný, 0,1 mol/l dihydrogenfosforečnan draselný; roztok kyseliny benzoovej: 0,{10}} g kyseliny benzoovej (AR Shenyang Reagent Factory), rozpustený v zmiešanom fosfátovom roztoku s pH=9,5, zriedený vodou na 100 ml a uskladnený v tme neskoršie použitie; Cu* roztok: 1,0 x IO"g/ml; Peroxid vodíka (AR, Shenyang No. 1 Reagent Factory): 30 percent; 0,1 MoVL zmiešaný fosfát (hydrogenfosforečnan sodný, AR, Shenyang Xincheng Chemical Plant; dihydrogenfosforečnan draselný, AR, Distribúcia chemických činidiel Shenyang Hefu) Roztok; Voda je dvakrát destilovaná voda.

1.3 Extrakcia celkových flavonoidov v Cistanche

1.3.1 Extrakcia flavonoidov z Cistanche deserticola (ultrazvuková metóda)

Presne odvážte 2.{1}} g (prejdite cez sito s 40-okami)Cistanchev 100 ml kónickej banke pridajte 95 percentné etanolové činidlo pri teplote miestnosti v pomere tuhá látka ku kvapaline 1:15 a zakaždým vykonajte ultrazvukovú extrakciu. Po 30 minútach vykonajte saciu filtráciu, izolujte zvyšok filtra, pridajte 95% etanolové činidlo na ultrazvukové pretrepávanie, saciu filtráciu, 3-krát ultrazvukovú extrakciu, spojte 3 filtráty, aby ste získali požadovaný extrakt, pridajte 95% etanolové činidlo, aby bol objem konštantný Vložte ju do 100 ml odmernej banky a odložte.

1.3.2 Extrakcia flavonoidov z Cistanche (Soxhletova extrakčná metóda) P]

Presne odvážte 10.{1}} Og (preosiate cez 40-sitko) baklažánového pyré, zabaľte ho do odtučneného filtračného papiera, zviažte jeden koniec a vložte ho do extrakčnej trubice Soxhletovho extraktora. Pridajte 95 percentné etanolové činidlo extrakčného činidla do extrakčnej fľaše na cca. Je to 1/2 objemu, potom nainštalujte Soxhletov extraktor, použite vodný kúpeľ s konštantnou teplotou mierne vyššou ako je bod varu extrakčného činidla (etanolu) na Soxhletovu extrakciu počas 4 hodín, potom ochlaďte, vykonajte rotačné odparovanie, zahustenie a na stanovenie použite 95-percentný etanol Vložte ho do 100 ml odmernej banky a odložte.

Proti starnutiu

1.3 Stanovenie obsahu vyťaženého materiálu a experiment rýchlosti výťažnosti

1.3.1 Stanovenie obsahu a experiment výťažnosti

Vezmite šesť odmerných baniek s objemom 25 ml, nakreslite 0.10, 0.20 a 0,30 ml z tekutiny vzorky mäsa Shuangrong extrahovanej ultrazvukovou metódou do prvej 3 odmerné banky, pridajte rovnaké množstvo vzorky kvapaliny do posledných 3 odmerných baniek a potom pridajte 1,0 ml štandardného roztoku rutínu, pridajte 1 ml 50 g/l roztoku dusitanu sodného do 6 odmerných baniek, dobre pretrepte a nechajte stáť 7 minút; pridajte 1 ml 100 g/l roztoku dusičnanu hlinitého, dobre pretrepte a nechajte stáť 7 minút; pridajte 10 ml 40 g/l roztoku hydroxidu sodného a tiež dobre pretrepte a nechajte stáť 7 minút; zrieďte po značku 95 % roztokom etanolu, dobre pretrepte a nechajte stáť 15 minút; Slepý roztok tonera je referenčný, absorbancia A sa meria pri 503 nm a koncentrácia sa vypočíta zo štandardnej krivky

Tabuľka 1 Obsahflavonoidy in Cistanche

Vezmite šesť 25 ml odmerných baniek, odoberte 15 ml zo Soxhletovej extrakčnej metódy striata: roztok vzorky pyré a doplňte objem do 100 ml odmernej banky a napipetujte 0 .40, 0,50 a 0,60 ml. V 3 odmerných bankách pridajte rovnaké množstvo roztoku vzorky do posledných 3 odmerných baniek, potom pridajte 1,0 ml štandardného roztoku, pridajte 1 ml 50 g/l roztoku dusitanu sodného, ​​dobre pretrepte a nechajte stáť 7 minút; Potom pridajte 1 ml 100 g/l roztoku dusičnanu hlinitého, dobre pretrepte a nechajte stáť 7 minút; potom pridajte 10 ml 40 g/l roztoku hydroxidu sodného, ​​dobre pretrepte a nechajte stáť 7 minút; zrieďte po značku 95 % roztokom etanolu, dobre pretrepte, nechajte stáť 15 minút, použite slepý roztok ako referenčný, zmerajte absorbanciu A pri 503 nm a vypočítajte koncentráciu C zo štandardnej krivky.

1.3.2 Stanovenie experimentu stability

Napipetujte 0,2 ml roztoku vzorky, pridajte 1 ml roztoku dusitanu sodného s 50 g/l farebného činidla, dobre pretrepte a nechajte stáť 7 minút; pridajte 1 ml 100 g/l roztoku dusičnanu hlinitého, dobre pretrepte a nechajte stáť 7 minút; pridajte 10 ml 40 g/l roztoku hydroxidu sodného a tiež dobre pretrepte a nechajte stáť 7 minút; zrieďte po značku 95 % roztokom etanolu, dobre pretrepte a nechajte stáť 15 minút; vezmite slepý roztok s vývojkou ako referenčný a potom sa meral ultrafialovým spektrofotometrom, čas bol nastavený na 2 hodiny a zistilo sa, že absorbancia roztoku vzorky bola stabilná do 2 hodín a zostala v podstate nezmenená.

Tabuľka 2 Obsahflavonoidyv Cistanche

1.4 Analýza antioxidačnej aktivity flavonoidov v Cistanche cistanche, katalytické kinetické fluorimetrické stanovenie rýchlosti vychytávania čínskej bylinnej medicíny na voľných hydroxylových radikáloch

1.4.1 Experimentálna metóda

Pridajte roztok kyseliny benzoovej do série 25 ml kolorimetrických skúmaviek a potom pridajte určité množstvo Co? plus a peroxid vodíka sa následne zriedia zmiešaným fosfátovým roztokom s pH=6,5 na konštantný objem 25 ml, dobre pretrepú a vložia do vriacej vody. Po 45 minútach státia v kúpeli začne fluorescencia merala sa intenzita každého roztoku.

1.4.2 Stanovenie rýchlosti zachytávania vzorky na hydroxylové radikály

Príprava roztoku vzorky: Presne odvážte 1.000 Og vzorky s veľkosťou častíc 450 μm a pri izbovej teplote extrahujte 3-krát ultrazvukom so 60 ml absolútneho etanolu, zakaždým s použitím 20 ml činidla, s časovým odstupom 10 min. Skombinujte 3 extrakcie Filtrujte a zrieďte filtrát absolútnym etanolom v 100 ml odmernej banke.

Príprava činidla: Navážte 7,16 g hydrogenfosforečnanu sodného a pridajte 2 00 ml vody, aby ste získali roztok 0,1 mol/l; odvážte 2,72 g dihydrogenfosforečnanu draselného a pridajte 20}0 ml vody, aby ste získali 0,1 mol/l roztok. Zmiešajte dva roztoky a pomocou pH metra pripravte zmiešaný fosfát s pH=6,5; odvážte 0.{13}} g kyseliny benzoovej (AR Shenyang Reagent Factory), rozpustite ju v zmiešanom fosfátovom roztoku s pH=9,5 a rozrieďte na objem vodou WOmL, uskladnite v tme na neskoršie použitie použitie; Odvážte 0,1547 g Ci/ a rozpustite ho s] mol/l kyselinou chlorovodíkovou, aby ste pripravili 100 ml 1 mol/l roztoku Cu*. Pripravte 30-percentný roztok peroxidu vodíka.

Vezmite 0,2 ml roztoku vzorky do 25 ml kolorimetrickej skúmavky, postupne pridajte kyselinu benzoovú, peroxid vodíka a Cu oči, zrieďte na 25 ml zmiešaným fosfátovým roztokom s pH=6. 5, dobre pretrepte a zmerajte podľa vzorca pre rýchlosť odstránenia. Zistite rýchlosť zachytávania vzorky na hydroxylové radikály.

1.4.3 Výsledky výpočtu

Tabuľka 3 Výsledky výpočtu

Záver: Flavonoidy v Cistanche majú silné antioxidačné vlastnosti.

flavonoidy v cistanche pôsobia proti starnutiu

2 Výsledky a diskusia

(1) Použitie "ultrazvukovej metódy" a "Soxhletovej extrakčnej metódy" na extrakciu súčtuflavonoidyvCistanche deserticola, porovnanie týchto dvoch metód ukazuje, že ultrazvuková metóda výrazne skracuje dobu extrakcie a zlepšuje rýchlosť extrakcie účinných zložiek. Miera využitia tak šetrí suroviny. Naopak, metóda extrakcie Soxhlet je časovo náročná a prácna a extrakčný efekt nie je dobrý. Preto ultrazvuková extrakcia celkflavonoidyje najlepší extrakčný proces, ktorý má veľký praktický význam.

(2) Kvalitatívna analýza celkflavonoidyUV spektroskopiou sa ukázalo, že rutín je veľmi vhodný štandardný produkt. Z experimentálneho výpočtu vyplýva, že obsah celkflavonoidyvCistancheje veľmi vysoká, s vysokou presnosťou a miera obnovy je 96,85 percent ~ 99,46 percent, vzorka zostala stabilná do 2 hodín.

(3) Antioxidačná analýza a stanovenie celkového množstvaflavonoidyvCistanchepúšte sa uskutočnili fluorescenčnou metódou. Záver: Vypočítaná miera klírensu bola 91,5 percenta, čo naznačuje, žecistanchesamotná pasta má silný antioxidačný účinok, ktorý dokáže zachytávať voľné radikály a inhibovať lipidy. Oxidácia atď. má veľkú hodnotu pri výskume anti-agingu, karcinogenézy, zápalu, radiačnej ischémie tkaniva a iných chorôb v oblasti medicíny.

Referencie:

[1] Cheng Xiyu, Guo Bin, Ni Wen, Liu Chunchao. Pokrok vo výskumeCistanche[J]. Výskum a vývoj prírodných produktov, 2005, 17 (2): 235-240.

[2] Hou Dongyan, Hui Ruihua a kol. Spektrálna analýza celkflavonoidyu medovky a stanovenie antioxidačnej aktivity [J]. Analytický test, 2004, 23 (11): 52-55.

[3] Zhou Gui, Deng Guanghui, Liang Dawen.'Štúdia o extrakciiflavonoidyz listov hlohu ultrazvukovou metódou[J]. Journal of Southwest Agricultural University, 2005, 27 (5): 605-607.