Terapeutický účinok Cistanche Deserticola na defekáciu v senilnej zápche Rat Model

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Xia Zhang, Fa-Juan Zheng, Zhen Zhang

Abstraktný

POZADIE

Zápcha je jedným z chronických gastrointestinálnych funkčných ochorení. To vážne Ovplyvňuje kvalitu života. Cistanche deserticola (C. deserticola) môže liečiť zápchu Samozrejme, ale jeho mechanizmus nebol objasnený. Predpokladali sme, že jeho mechanizmus zlepšil črevnú pohyblivosť stimuláciou intersticiálneho Cajalu bunky (ICC). Aktivácia receptora C-kitu na povrchu ICC úzko súvisí na funkciu ICC a signálne dráhy kmeňových buniek (SCF)/C-kit hrajú dôležitú úlohu v ňom. Preskúmať mechanizmus, ako C. deserticola zaobchádza zápcha, táto štúdia bola zameraná na vytvorenie modelu zápchy u potkanov a preskúmať úlohu signálnej dráhy SCF /C-kit v liečbe.

CIEĽ

Preskúmať signálne cesty SCF/C-kit v úlohe C. deserticola pre liečba zápchy modelom zápchy potkana.

METÓDY

Štyridsaťosem 8-mo-starých potkanov Sprague-Dawley bolo náhodne rozdelených do 4 skupín metóda hmotnosti: Normálna skupina (n = 12), modelová skupina (n = 12), skupina C. deserticola (n = 12) a blokátorová skupina (n = 12). Normálna skupina dostala normálny fyziologický roztok gavage; modelová skupina dostala loperamid gavage; skupina blokátorov dostal loperamid a C. deserticola gavage a STI571 bol vstreknutý intraperitoneálne. Počas liečby hmotnosť, fekálne granule a fekálna kvalita Boli zaznamenané každých 10 d. Na 20. deň po indukcii modelu, hrubé črevné tkanivá Každá skupina bola odstránená. Na pozorovanie sa použil hematoxylín a farbenie eozínu Patologické zmeny. Expresie génov SCF, C-kitu a Aquaporínu boli zistené imunohistochémiou, západným nadúvaním a kvantitatívnou polymerázovou reťazovou reakciou v reálnom čase. Epiteliálne mitochondrie hrubého čreva a bunky čaše boli pozorované transmisnou elektrónovou mikroskopiou.

VÝSLEDKY

V porovnaní s normálnou skupinou, ako liečba postupovala, hmotnosť potkanov v skupiny modelov a blokátorov sa výrazne znížili, hmotnosť stolice sa znížila, a kvalita stolice bola suchá (P< 0.05).="" c.="" deserticola="" reversed="" the="" decrease="" in="" body="" weight="" and="" stool="" weight="" and="" improved="" stool="" quality.="" histopathological="" analysis="" indicated="" that="" the="" colonic="" mucosal="" epithelium="" in="" the="" model="" group="" was="" incomplete,="" and="" the="" arrangement="" of="" the="" glands="" was="" irregular="" or="" damaged.="" treatment="" with="" c.="" deserticola="" improved="" the="" integrity="" and="" continuity="" of="" the="" epithelial="" cells="" and="" regular="" arrangement="" of="" the="" glands.="" the="" blocking="" agents="" inhibited="" the="" effects="" of="" c.="" deserticola="" immunohistochemistry="" and="" real-timequantitative="" polymerase="" chain="" reaction="" showed="" that="" expression="" of="" scf="" and="" c-kit="" protein="" or="" genes="" in="" the="" colonic="" tissue="" of="" the="" model="" group="" was="" decreased="" (p="">< 0.05),="" while="" treatment="" with="" c.="" deserticola="" increased="" protein="" or="" gene="" expression="" (p="">< 0.05).="" western="" blotting="" showed="" that="" expression="" of="" aquaporin="" apq3="" was="" increased,="" while="" the="" expression="" of="" cx43="" decreased="" in="" the="" model="" group.="" treatment="" with="" c.="" deserticola="" inhibited="" expression="" of="" apq3="" and="" promoted="" expression="" of="" cx43.="" transmission="" electron="" microscopy="" showed="" that="" the="" mitochondria="" of="" the="" colonic="" epithelium="" in="" the="" model="" group="" were="" swollen="" and="" arranged="" disorderly,="" and="" microvilli="" were="" sparse.="" the="" condition="" was="" better="" in="" the="" c.="" deserticola="" group.="" mice="" treated="" with="" sti571="" blocker="" confirmed="" that="" blocking="" the="" scf/c-kit="" pathway="" inhibited="" the="" improvement="" of="" constipation="" by="" c.="">

ZÁVER

C. deserticola zlepšila defekáciu u potkanov so zápchou a súprava SCF / C Signalizačná cesta, ktorá je kľúčovým článkom funkcie ICC, zohrala dôležitú úlohu v liečbe.

Kľúčové slová:Cistanche deserticola; Senilná zápcha; Faktory kmeňových buniek; Súprava C

čerstvá cistanchová surovina

ZAVEDENIE

Senilná zápcha (SC) je jednou z bežných chronických gastrointestinálnych funkcií ochorenia u geriatrických pacientov, ktoré vyvolávajú alebo zhoršujú cerebrovaskulárne príhody a iné choroby a vážne ovplyvňujú kvalitu života staršej populácie[1,2]. Podľa tradičnej čínskej medicíny je hlavnou etiológiou a patogenézou SC sú gastrointestinálne teplo, nedostatok jin a jin a črevné odmáčanie[3,4], zatiaľ čo Cistanche deserticola (C. deserticola) môže zahriať obličky a uvoľniť črevá. Výskumníci uviedli, že účinok zlepšenia črevnej pohyblivosti a zaobchádzanie so SC je jasné, ale jeho mechanizmus nebol objasnený[5,6]. Intersticiálny Cajal bunky (ICC) sú špeciálnym typom mezenchýmových buniek v gastrointestinálnom trakte. Aktivácia receptora C-kitu na povrchu ICC úzko súvisí s proliferáciou buniek, diferenciáciou a funkciou. ICO sa podieľajú na patogenéze mnohých gastrointestinálne motorické dysfunkcie[7,8]. Aktivácia C-súpravy závisí od viazania jeho ligand kmeňový bunkový faktor (SCF)[9]. Preskúmať účinok a mechanizmus účinku C. deserticola na SC, táto štúdia bola zameraná na vytvorenie modelu SC u potkanov vyvolaných loperidol preskúmať úlohu signálnej dráhy SCF / C-kit pri liečbe zápcha od C. deserticola.

MATERIÁLY A METÓDY

Experimentálne materiály

Pokusné zvieratá:Pokusné zvieratá boli 48 samcov 8-mo-starých potkanov SpragueDawley s hmotnosťou 500-550 g; Kúpiť Changsha Tianqin Biotechnology Co. Ltd. Potkany boli chované v zvieracom laboratóriu Chongqing Weisiteng Biomedical Technology Co.s.r.o., vzhľadom na bežné denné a nočné svetlo, jedlo a pitie. Všetky postupy v súlade s usmerneniami pre riadenie vydanými etickou komisiou Nemocnica tradičnej čínskej medicíny Chongqing.

Primárne činidlá:Medzi primárne činidlá patril loperamid (Sigma, St. Louis, MO, Spojené štáty), C. deserticola z Hubei Jurui Tradičná čínska medicína Odvar z tradičnej čínskej medicíny Co. Ltd., STI571 z čínskej selleck co., Ltd., a SCF, C-kit, connexin 43 (Cx43), akvaporín 3 (AQP3) a β-aktínové protilátky (Abcam, Cambridge, MA, Spojené štáty), PrimeScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit a Premix Taq™ (Ex Taq™ Verzia 2.0) (Takara Co. Ltd., Japonsko).

doplnky extraktu z cistanche bylín

Metódy

Príprava a zoskupenie modelu SC:Aby sa predišlo vplyvu mätúcich faktorov ako je telesná hmotnosť na experimentálnych výsledkoch, potkany boli náhodne zoskupené podľa metóda blokového náhodného zoskupenia. Štyridsaťosem potkanov bolo kŕmených adaptívne na 1 wk a potkany boli očíslované v poradí hmotnosti od ľahkých po ťažké. Podľa objednávky s telesnou hmotnosťou boli potkany rozdelené do 12 zón (hmotnosť potkanov v každej zóne Bolo to podobné), so 4 potkanmi v každej zóne. 12 zón bolo rozdelených do 4 skupín po 12 (normálny, model, C. deserticola a blokátor). Potkany v modelovej skupine dostali loperamid (0,0625/100 g, 10 ml/kg) podľa gavage. Prvá dávka gavage bola zdvojnásobená, a liek sa podával každý deň o 10:00, raz denne počas 20 po sebe nasledujúcich dní. Tá normálna skupina dostala rovnaké množstvo normálneho fyziologického roztoku gavage. Okrem toho, modelová skupina bola ošetrená C. deserticola (0,156 g/100 g, 10 ml/kg) gavage. Tá blokárska skupina dostala C. deserticola (0,156 g/100 g, 10 ml/kg) gavage a STI571 (25 mg/ml, 1 ml/kg) intraperitoneálnou injekciou. Počas experimentu telo hmotnosť, hmotnosť stolice a stav stolice boli zaznamenané každých 10 d. Žiadna náhoda Smrť nastala u ktoréhokoľvek potkana. O dvadsať dní neskôr boli potkany zabité a hrubé tkanivo bolo odstránené na vyšetrenie a konzerváciu tekutého dusíka. Tá Zvyšné časti boli pevné a vložené.

Histopatologická analýza:Potkany, ktoré sa cez noc postili, boli na druhý deň anestetizované intraperitoneálnou injekciou so 7% chloralhydrátu (5 ml/kg). Brucho bolo otvorili sa na oddelenie hrubého čreva a odstránilo sa 8-10 mm hrubého čreva. Tá črevný obsah bol odstránený jemným pretrepávaním v predchladenom polybutyléne sukcinujte a fixujte na 24 hodín v 4% fixačnom roztoku paraformaldehydu. Konvenčný Vykonalo sa vloženie parafínu. Tkanivové časti (5 μm) boli odstránené pre Pozorovalo sa farbenie hematoxylínu a eozínu a histopatologická morfológia pod mikroskopom.

Detekcia expresie SCF a C-kitu imunohistochemickým zafarbením:Tá parafínové tkanivá vyšetrené histopatológiou vyššie boli rozdelené, rehydratované s sekovaný xylén dewaxovaný gradient etanolu, antigén upravený teplom a utesnený na 1 h s kozím sérom pri izbovej teplote. Boli pridané primárne protilátky SCF a C-kit kvapky a tkanivá sa udržiavali cez noc pri teplote 4 °C. Po opláchnutí polybutylénom sukcunát, peroxidáza chrenu bola vypustená na označenie sekundárnej protilátky, opláchnutá so sukcinátom polybutylénu po dobu 5 min, kvapka 2,4-diaminobutyrovej kyseliny chromogenovej roztok, opätovné farbenie hematoxylínom, dehydratácia alkoholu s reverzným gradientom, priehľadná xylénom a neutrálnym živicovým tesnením. Mikroskopicky boli jadrá purpurovo modré a produkty s pozitívnym výsledkom boli hnedožlté alebo žlté častice.

Detekcia expresie MRNA C-kitu v kolonickom tkanive v reálnom čase-kvantitatívne polymerázová reťazová reakcia (RT-qPCR):Zmrazené tkanivo hrubého čreva potkanov bolo rozomleté homogenizátorom a pridal sa 1 ml RNAiso Plus. Celková RNA hrubého čreva bola extrahované metódou chloroform/izopropanol a kvalita RNA bola zistená metódou gélová elektroforéza. Po identifikácii gélovým imagerom Bio-Rad bol 1 μg RNA opačný prepísané do cDNA takara PrimeScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit. Podľa databázy NCBI Gene ID: 64030 bola oblasť CDS génu C-kit nájdené a kombinované s ncbi Primer-Blast dizajn primer sekvencie, ktorá bola syntetizované spoločnosťou Sangon Biotech Co., Ltd, C-kit primer sequence sense strand 5'-AGGTGTACCGTTCCTGTCCC-3', antisense strand 5'-GGCTGGATTTGCTTTGCTGCTT-3', β -actin sense strand 5'-CTTCCTTCCTGGGTATGGAATC-3', antisense strand 5'- CTGTGTTGGCATAGAGGTCTT-3'. Zosilnenie PCR bolo vykonané na Bio-Rad CFX90 PCR prístroj v reálnom čase. Podmienky pre PCR testy boli počiatočné denaturácia pri teplote 95 °C počas 5 min, 30 cyklov 95 °C pri 30 s, 60 °C pri 30 s a 72 °C pri 1 min, po ktorom nasleduje konečné predĺženie pri 72 °C o 10 min. 2 -ΔΔCt (ΔCt = Hodnota Ct - β-aktín Ct hodnota) bola použitá na analýzu relatívnej génovej expresie.

Detekcia hladiny expresie proteínu Cx43 a AQP3 v kolonickom tkanive Západné nadúvanie:Asi 1 cm zmrazeného hrubého čreva tkaniva bolo odobraté a lyzované s RIPA silná pyrolýzna kvapalina (100 μL). Tkanivo bolo homogenizované sklom. homogenizátor 20-krát a prenesený do 1,5 ml odstredivkovej trubice. Supernatant bol extrahovaný po odstreďovaní pri 12000 ot/min pri teplote 4 °C po dobu 5 min a koncentrácia celkový proteín v supernatante bol stanovený metódou BCA. Odstránili sme 25 μg denaturovaného proteínu na vykonanie dodecylsulfátu-polyakrylamidovej gélovej elektroforézy sodného a potom sa proteíny v géli preniesli do polyvinylidénového fluoridu membrána pri konštantnom prúde 200 mA potom utesnená 5% obmedzením odstredeného mlieka kvapalina na 2 hodiny pri izbovej teplote. Zodpovedajúce primárne protilátky boli zriedené s tesniacou kvapalinou, inkubovanou cez noc pri teplote 4 °C, potom umytá membránový odpor a pridali druhé protilátky. Po pridaní ECL tekutiny boli vložené pod expozimeter pre test analýzou optickej hustoty.

Transmisná elektrónová mikroskopia:Vzali sme asi 1 cm proximálneho kolonického tkaniva, opravil ho v 2,5% glutaraldehyde po dobu 24 hodín, dehydroval ho odstupňovaným acetónom, vložený to v Epon812 a rezať 50 nm ultratenké sekcie na ultramikrotómi. Sekcie boli zafarbené octanom oxidu uránu a kvapalinou na farbenie citrátu olovnatého v miestnosti teplota 10 min. Pozorovali sme klky hrubého čreva, epitelové bunkové mitochondrie a čašné články pod elektrónovým mikroskopom Philips Tecnai-10.

Štatistická analýza

Softvér SPSS 19.0 bol použitý na analýzu údajov a softvér GraphPad Prism8.4 bol Používa sa na vykreslenie výsledkov. Shapiro-Wilkov test bol použitý na testovanie normálnosti. Údaje s normálnym rozdelením boli reprezentované priemerným ± SD. Použili sa chybové položky na reprezentáciu stredného ± SD hemoglobínu po liečbe. Bol použitý t-test študenta Porovnanie medzi dvoma skupinami. Na porovnanie sa použila analýza rozptylu medzi viacerými skupinami. Metóda Student-Newman-Keuls bola použitá pre porovnanie viacerých skupín v pároch a Dunnettov test sa použil na meranie rozdiely medzi každou experimentálnou skupinou a kontrolnou skupinou v poradí. Súvisiace údaje boli merané viacerými časovými bodmi a opakovaným meraním Vykonala sa analýza údajov rozptylu. Ak test sférickosti ukázal P > 0,05, použila sa analýza opakovaných meracích údajov rozptylu. Ak p< 0.05,="" the="" generalized="" estimation="" equation="" was="" taken.="" data="" that="" did="" not="" conform="" to="" a="" normal="" distribution="" were="" represented="" by="" m="" (p25,="" p75),="" and="" the="" kruskal-wallis="" h="" rank-sum="" test="" was="" used="" for="" comparison="" between="" groups.="" the="" χ="" 2="" test="" was="" used="" to="" compare="" between="" groups="" when="" the="" data="" was="" unordered="" data,="" and="" pearson’s="" χ="" 2="" test="" was="" used="" if="" the="" proportion="" of="" cells="" with="" theoretical="" frequency="">< 5="" was="">< 20%.="" if="" the="" proportion="" of="" cells="" with="" theoretical="" frequency="">< 5="" was="" ≥="" 20%,="" fisher’s="" exact="" test="" was="" used.="" p="">< 0.05="" was="" used="" to="" determine="" that="" the="" difference="" was="" statistically="">

Obrázok 1 Kolonické histopatologické zmeny.

VÝSLEDKY

Všeobecné podmienky

Jeden deň po gavage loperamidu v porovnaní s normálnou skupinou, telo hmotnosť a hmotnosť stolice v skupine modelov sa výrazne znížila (P< 0.05),="" but="" there="" was="" no="" significant="" difference="" in="" stool="" quality="" score="" (p="">0.05). C. deserticolala liečba v modelovej skupine spomalila zníženie telesnej hmotnosti a hmotnosti stolice (P< 0.05),="" but="" the="" bodyweight="" in="" the="" blocker="" group="" was="" not="" significantly="" reduced.="" after="" 10="" d="" of="" treatment,="" compared="" with="" the="" normal="" group,="" the="" body="" weight="" and="" stool="" volume="" of="" rats="" in="" the="" model="" group="" were="" further="" significantly="" reduced,="" and="" the="" stools="" were="" dry="" and="" almost="" contained="" no="" water="" (p="">< 0.05).="" the="" body="" weight="" loss="" of="" rats="" was="" also="" significantly="" reduced="" by="" treatment="" with="" c.="" deserticola="" (p="">< 0.05).="" the="" bodyweight="" of="" rats="" in="" the="" blocker="" group="" was="" not="" significantly="" different="" from="" that="" in="" the="" model="" group="" (p="">0.05). V 20. deň pred odberom vzoriek telesná hmotnosť potkanov v modeli skupina bola výrazne nižšia ako v normálnej skupine a kvalita stolice Skóre sa výrazne zvýšilo (P< 0.05),="" while="" the="" weight="" loss="" caused="" by="" constipation="" was="" inhibited="" by="" c.="" deserticola="" treatment,="" and="" the="" stool="" quality="" score="" was="" decreased="" (p=""><>

Colonická histopatológia

Hematoxylín a eozínové farbenie hrubého čreva tkaniva potkanov je znázornené na obrázku 1. V normálna skupina, črevné klky boli neporušené, črevná sliznica bola neporušená a nepretržitá, Bunky a žľazy boli usporiadané pravidelne. Sliznica a submukóza neboli infiltrované zápalovými bunkami a štruktúra tkaniva bola normálna. V modelovej skupine črevné klky a sliznica boli z veľkej časti zničené, miestne klky boli preliate a voľne usporiadané, a časť žľazovej štruktúry zmizla. V skupine C. deserticola bolo histopatologické farbenie menšie ako v modelovej skupine, ale v niektorých prípadoch došlo k nekróze. čašné bunky. Po intraperitoneálnej injekcii v skupine s blokátormi v porovnaní s C. skupina deserticola, stále došlo k lokálnej strate črevných klkov a došlo k zlomenine a strate črevnej sliznice.

Obrázok 2 Expresia faktora kmeňových buniek a pomer relatívnej optickej hustoty v kolonickom tkanive imunohistochemickou detekciou.

Detekcia expresie faktora kmeňových buniek a proteínu C-kit imunohistochemické farbenie

Imunohistochemické farbenie ukázalo, že SCF a C-kit boli vyjadrené v hrubom čreve kontrolnej skupiny. V porovnaní s kontrolnou skupinou, výraz SCF a C-kit v modelová skupina sa výrazne znížila (P< 0.05).="" compared="" with="" the="" model="" group,="" expression="" of="" scf="" and="" c-kit="" in="" the="" c.="" deserticola="" group="" was="" significantly="" increased="" (p="">< 0.05).="" there="" was="" no="" difference="" in="" expression="" of="" scf="" and="" c-kit="" between="" the="" blocker="" and="" model="" groups="" (p="">< 0.05,="" figures="" 2="" and="">

RT-qPCR

RT-qPCR ukázala, že výraz MRNA C-kitu v modelovej skupine bol výrazne nižšia ako v normálnej skupine (obrázok 4, P< 0.05).="" compared="" with="" the="" model="" group,="" c-kit="" in="" the="" c.="" deserticola="" group="" was="" significantly="" increased="" (p="">< 0.05).="" there="" was="" no="" significant="" difference="" in="" c-kit="" mrna="" level="" between="" the="" model="" and="" blocker="" groups="" (p="">0.05). Tieto výsledky naznačovali, že výraz C-kit upravený C. deserticola podieľali sa na zlepšení zápchy a blokátory inhibovali účinnosť C. deserticola.

Výhody cistanche salsy

Západné nafúknutie

Západné nadúvanie ukázalo, že proteín AQP3 bol vyjadrený na nízkej úrovni v normálna kontrolná skupina, zatiaľ čo v skupine modelov sa výrazne zvýšila v porovnaní s kontrolnou skupinou (obrázok 5) (P< 0.05).="" expression="" of="" aqp3="" protein="" was="" decreased="" after="" treatment="" with="" c.="" deserticola,="" and="" the="" inhibitory="" effect="" of="" c.="" deserticola="" on="" the="" expression="" of="" aqp3="" was="" inhibited="" by="" blocker="" treatment="" (p="">< 0.05).="" expression="" of="" cx43="" was="" the="" opposite="" of="" that="" of="" aqp3.="" these="" results="" suggested="" that="" the="" pharmacology="" effect="" of="" c.="" deserticola="" on="" rats="" with="" sc="" was="" achieved="" by="" promoting="" the="" expression="" of="" cx43="" and="" inhibiting="" the="" expression="" of="" aqp3="" (figures="">

Transmisná elektrónová mikroskopia

Po indukcii loperamidu sa u niektorých vyskytli mitochondriálne opuchy a autofágia kolonických slizničných epitelových buniek v modelovej skupine. Počet a dĺžka črevné mikrovilly sa znížili a vyskytla sa pyknóza buniek čaše (obrázok 8). Po liečba C. deserticola, počet črevných mikrovlákien sa zvýšil. Tá mikrovilli boli usporiadané úhľadne a štruktúra bola kompletná. Bunky čaše kratšia dĺžka, nepravidelná morfológia mitochondrií a ťažká pyknóza čaše bunky.

Obrázok 3 Expresia C-súpravy a pomer relatívnej optickej hustoty v kolonickom tkanive imunohistochemickou detekciou.

DISKUSIA

Zápcha je bežná u staršej populácie a je jednou z bežných príznaky, ktoré ovplyvňujú zdravotný stav a kvalitu života starších ľudí[10,11]. V Termíny tradičnej čínskej medicíny, Bai et al[12] veril, že základná patogenéza SC bola dysfunkcia funkcie vedenia hrubého čreva, senilné zlyhanie tela, postupná strata funkcií pečene a obličiek, nedostatok čchi a krvi a strata telesnej tekutiny, čo viedlo k suchej stolici, čo viedlo k zápche[13]. SC vyvíja tlak na pacientov a ich rodiny v mnohých aspektoch a je dôležité preskúmať ich patogenézu.

C. deserticola má funkcie tonifikácie obličky Yang, prospieva krvi a regulácia imunity tela[14]. C. deserticola a čínsky bylinný odvar obsahujúci C. deserticola boli široko používané pri liečbe zápchy a klinickej Účinok je pozoruhodný. Du et al[15] nájdený v potkanom modeli nedostatku Jangu a zápcha, že C. deserticola zlepšila kontrakciu amplitúdy izolovaného hrubého čreva, posilnila kontraktilitu črevného traktu a vrátila úroveň Gastrointestinálne hormóny do normálu. Okrem toho vláknina C. deserticola, vedľajší produkt spracovania C. deserticola, zlepšuje schopnosť výkalov zadržiavať vodu a má výhodu nízkej dávky a dobrého účinku vo vyživujúcich črevách a zlepšenie defekácie[16]. Naša štúdia zistila, že liečba C. deserticola zlepšila fekálie vlhkosť a kolonická histopatológia potkanov so zápchou.

IPC sa nachádzajú v celom črevnom trakte a zohrávajú dôležitú úlohu v neuróne kontrola črevného pohybu ako kardiostimulátorov a prenosu črevného nervu[17]. Proto-onkogenový kódovací receptor tyrozínkinázy, C-kit, je vyjadrený ICC a SCF je ligand c-kitu[18]. Systém SCF/C-kit je rozhodujúci pri vývoji ICC. Signálna dráha SCF/C-kit bola analyzovaná počas liečby pomalého prenosu zápcha u potkanov akupunktúrou[19]. Elektroakupunktúra v bode Tianshu zvýšil počet IIC hrubého čreva u myší liečených ACK2, čím sa zvýšila regulácia expresie Proteíny SCF a C-kit a zvrátili fenotyp ICC. Predpis na povzbudzujúca čchi a slezina môže zvýšiť expresiu ICC v kolonickom tkanive a regulujte expresiu C-kitu a SCF mRNA, čím sa zlepšuje zápcha príznaky[20]. V našej štúdii imunohistochémia ukázala, že C. deserticolala výrazne regulovaná expresia proteínu SCF a C-kitu v potkanom modeli SC a RT-qPCR ukázala, že C. deserticola výrazne zvýšila reguláciu výrazu C-kitu Mrna. Blokátor C-kit inhiboval upreguláciu výrazu SCF a C-kitu vyvolanú C. deserticola.

Obsah fekálnej vody a preprava kolonickej vody úzko súvisia s AQP, ktoré hrať dôležitú úlohu v metabolizme črevnej vody[21]. V štúdii potkanov s pomalým transportná zápcha, defekačný odvar výrazne zlepšil zápchu príznaky reguláciou absorpcie črevnej vody prostredníctvom downregulácie AQP3 a AQP4[22]. V potkanom modeli funkčnej zápchy, liečebný mechanizmus Orálna tekutina Xiaofu Tongjie pre funkčnú zápchu sa môže realizovať reguláciou expresie vazoaktívneho črevného polypeptidu a AQP3 v hrubom čreve[23]. Medzera križovatky zohrávajú zásadnú úlohu pri sprostredkovaní synchrónnej kontrakcie hladkého svalové bunky. Cx43 je najdôležitejším proteínom počas tohto procesu[24]. Strata Cx43 expresia môže byť čiastočne zodpovedná za dysfunkciu motora hladkého svalstva[25]. Oprava štruktúry siete črevného nervového systému u potkanov s pomalým tranzitom zápcha môže zlepšiť expresiu Cx43 atď. a príznaky zápchy[26]. Tieto výsledky naznačujú, že zvýšená expresia AQP3 znižuje fekálnu vodu obsah, ktorý vedie k zápche, ktorá môže byť dôležitým mechanizmom zápcha. Expresia Cx43 môže súvisieť s kontrakciou črevnej hladkosti svalov a znížiť výskyt zápchy. V našej štúdii, západné blotting ukázalo sa, že expresia Cx43 bola zvýšená a expresia AQP3 bola inhibovaná C. liečba deserticola, ktorá viedla k zvýšenej kontrakcii hladkého svalstva a znížená absorpcia vody a liečba blokátorom tieto účinky zvrátila.

Cistanche tubulosa extrakt tabletyZlepšujezápchavyvolanéloperamína znižujepoškodenie hrubého čreva.

Pre viac informácií kliknite sem.

ZÁVER

Na záver, C. deserticola môže inhibovať vyjadrenie AQP3 a podporovať vyjadrenie Cx43 prostredníctvom cesty SCF / C-kit, čím sa zlepšuje zápcha vyvolaná loperamín a zníženie poškodenia hrubého čreva u starých potkanov. Táto štúdia poskytla dobrý teoretický základ pre klinické využitie C. deserticola.