Účinok terapeutickej hypotermie na poškodenie obličiek u potkanieho modelu asfyxickej zástavy srdca: Zamerajte sa na mieru prežitia, patofyziológiu a antioxidačné enzýmy
Mar 25, 2022
SO EUN KIM1*, HA-YOUNG SHIN2*, EUI-YONG LEE2, YEO-JIN YOO2, RYUN-HEE KIM2ET AL
Abstraktné.
Hoci multiorgánová dysfunkcia súvisí s mierou prežitia po zástave srdca (ca), väčšina štúdií sa doteraz zamerala na srdce a mozgy a len málo štúdií zvažovalo zlyhanie obličiek. Cieľom tejto štúdie bolo preto preskúmať účinky terapeutickej hypotermie na mieru prežitia, patofyziológiu a antioxidačné enzýmy v obličkách potkanov po asfyxiálnej CA. Potkany boli usmrtené jeden deň po CA. Miera prežitia, ktorá bola odhadnutá pomocou Kaplan-Meierovej analýzy, bola 42,9 percenta jeden deň po cca. Avšak hypotermia, ktorá bola vyvolaná po ca, významne zvýšila mieru prežitia (71,4 percenta). u normotermických potkanov s ca bola hladina dusíka močoviny v sére významne zvýšená jeden deň po ca. okrem toho sa hladina kreatinínu v sére významne zvýšila jeden deň po CA. Avšak u CA potkanov vystavených hypotermii sa hladiny močovinového dusíka a kreatinínu významne znížili po cca. Histochemické farbenie odhalilo významné dočasné zvýšenie poškodenia obličiek po tom, čo bola skupina s normotermou podrobená cca. Poškodenie obličiek sa však významne znížilo v skupine s hypotermiou. imunohistochemická analýza obličky odhalila významný pokles antioxidačných enzýmov (meď-zinok superoxiddismutáza, mangán superoxiddismutáza, glutatiónperoxidáza a kataláza) v skupine s normotermou. Avšak v hypotermickej skupine boli tieto enzýmy významne zvýšené po cca. súhrnne výsledky odhalili, že renálna dysfunkcia po asfyxii môže byť silne spojená s mierou skorého prežitia a terapeutická hypotermia znížila poškodenie obličiek prostredníctvom účinných antioxidačných mechanizmov.
Kľúčové slová: asfyxická zástava srdca, syndróm po zástave srdca, liečba hypotermie, obličky, histopatológia, antioxidačné enzýmy
Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com
cistanche stratené impérium bylinyzabraňujeochorenie obličiek, kliknite sem a získajte vzorku
Úvod
Zastavenie srdca (ca), tiež známe ako kardiopulmonálne zastavenie alebo zastavenie obehu, zahŕňa náhle zastavenie normálneho krvného obehu v dôsledku zlyhania srdca pri adekvátnom čerpaní krvi (1). ca vyvoláva celotelovú ischémiu, ktorá spôsobuje poškodenie viacerých orgánov vrátane mozgu, srdca, obličiek a pečene. Väčšina výskumných štúdií zahŕňajúcich ca za posledné polstoročie sa zamerala na zlepšenie miery úspešného návratu spontánnej cirkulácie (roSc) s významným pokrokom (2‑4). Hoci okamžitá resuscitácia môže zlepšiť roSc, miera prežitia so zlou prognózou je problémom (5‑7). Syndróm post-kardiálnej zástavy (PcaS) označuje patofyziologické následky roSc po úspešnej kardiopulmonálnej resuscitácii (cPr) po ca (8). PcaS je hlavnou príčinou zníženého prežívania po roSc (9). Miera prežitia PcaS v ranom období u pacientov je len 30 percent (5). Niet pochýb o tom, že srdce a mozog sú dôležité orgány v PcaS. Štúdie medzitým zriedkavo skúmali zlyhanie obličiek po ca (1,10,11). Prechodná porucha funkcie obličiek je častá u pacientov, ktorí prežili ca (12). Výskyt a vplyv dysfunkcie obličiek po ca nie sú dobre opísané (13). okrem toho naša predchádzajúca štúdia naznačila, že nízka miera skorého prežitia po roSc v experimentálnych štúdiách (14) môže silne súvisieť so zlyhaním obličiek, ako je akútne poškodenie obličiek. jednou z najčastejších príčin akútneho poškodenia obličiek je ca (15). akútne poškodenie obličiek je bežným PcaS, ktorý sa vyvíja u ~ 30 percent hospitalizovaných pacientov s ca (16).
reaktívne formy kyslíka (roS) sú zložené zo série kyslíkových medziproduktov, vrátane voľného radikálového superoxidového aniónu (o2•-), neradikálového peroxidu vodíka (H2o2), vysoko reaktívneho hydroxylového voľného radikálu (OH•), peroxynitritu (onoo) a singletový kyslík (102) (17). Ukázalo sa, že roS hrá zásadnú úlohu pri niekoľkých experimentálnych obličkových stavoch, ako je akútne ischemické zlyhanie obličiek, odmietnutie obličkového štepu, akútna glomerulonefritída a toxické obličkové ochorenia (18). Existujú významné dôkazy podporujúce syntézu roS bezprostredne po akútnej ischemickej cievnej mozgovej príhode (19) a akútnom infarkte myokardu (20). o roS je známe, že sú dôležité pri ischemických ochoreniach, ako je mŕtvica a infarkt myokardu. Napríklad Hackenhaar et al (21) uviedli, že roS sa tvoria v krvi pacientov s PcaS; štúdie však zriedkavo skúmali tvorbu roS v obličkách po ca počas skorého obdobia po PcaS (22,23).
Z tohto dôvodu sa predpokladalo, že roS sú dôležité pri poškodení obličiek po ca a prispievajú k nízkej miere prežitia v skorých štádiách PcaS. Na preskúmanie tejto hypotézy sa u potkanov indukoval asfyxický ca a pozorovala sa miera prežitia počas skorých štádií PcaS. okrem toho sa uskutočnila okamžitá a oneskorená hypotermia, aby sa zvýšila nízka miera prežitia spojená s PcaS po roSc. Ďalej sa histopatologicky analyzovala renálna dysfunkcia a hodnotili sa zmeny vyvolané roS, ako je meď-zinok superoxiddismutáza (Sod-1), mangán superoxiddismutáza (Sod-2), kataláza (caT) a glutatiónperoxidáza (GPX). imunohistochemickou analýzou po roSc.
cistanche pharma špeciál
Materiály a metódy
Pokusné zvieratá a skupiny.Celkovo 62 samcov potkanov Sprague-Dawley (Sd) (hmotnosť, 270-300 g; vek, 10 týždňov) bolo získaných z experimentálneho centra pre zvieratá národnej univerzity Jeonbuk (iksan, Kórejská republika). Boli umiestnené pri teplote 23 ± 2 ° C a vlhkosti 60 ± 10 percent v 12-hodinovom cykle svetlo/tma. Mali voľný prístup k jedlu a vode. všetky experimentálne protokoly boli schválené na základe etických postupov a vedeckej starostlivosti výborom pre inštitucionálnu starostlivosť o zvieratá a ich používanie Národnej univerzity v Jeonbuku (číslo schválenia JBnu 2020‑084).
Experimentálne zvieratá boli rozdelené do troch kategórií [skupina s falošnou operáciou, ca pri normotermii a liečba ca a hypotermie (HT)] nasledovne: i) skupina I, skupina s falošnou operáciou (n{0}}) bola udržiavaná v podmienkach normotermie bez ca; ii) skupina ii, normotermická skupina bez liečby hypotermie (33˚C) po CA (n=17); a iii) skupina iii (n=40), skupina, ktorá podstúpila ca pri normotermii a bola liečená HT po ca 2 h (n=17), 4 h (n=13) a 6 hodín (n=10) po roSc, kde boli všetky potkany znovu zahriate na normotermiu.
Indukcia CA a KPR.Ca a cPr sa uskutočňovali tak, ako už bolo opísané (24, 25) s malými modifikáciami (obr. 1). Stručne povedané, potkany boli anestetizované 2 až 3 percentami izofluránu a mechanicky ventilované na udržanie dýchania pomocou ventilátora pre hlodavce (Harvardov prístroj). Na monitorovanie periférnej saturácie kyslíkom (Spo2) bola k ľavému chodidlu pripojená pulzná oxymetrická sonda saturácie kyslíkom (Nonin Medical, Inc.). Telesná teplota bola udržiavaná na 37±0.5˚C počas a po operácii ca. Na monitorovanie zmien elektrokardiogramu (EKG) boli na končatiny umiestnené elektrokardiografické sondy (cytiva), aby sa poskytli trojzvodové údaje, ktoré sa nepretržite monitorovali. Ľavá femorálna artéria a pravá femorálna žila boli oddelene kanylované, aby sa monitoroval stredný arteriálny tlak (MaP) (MLT 1050/d; ADInstruments, ltd.) a intravenózna injekcia.
Po 5-minútovom stabilizačnom období bol intravenózne podaný vekuróniumbromid (2 mg/kg; Gensia Sicor Pharmaceuticals, inc.), anestézia bola zastavená a mechanická ventilácia bola prerušená. na definovanie CA bola použitá MaP pod 25 mm-Hg a následná bezpulzová elektrická aktivita (25,26). CA bola potvrdená 3-4 minúty po injekcii vekuróniumbromidu. 5 minút po ca sa cPr inicioval intravenóznym podaním bolusovej injekcie adrenalínu (0,005 mg/kg; Sigma-Aldrich;
Merck KGaa) a hydrogénuhličitan sodný (1 meq/kg; Sigma-Aldrich; Merck KGaa), po ktorej nasledovala mechanická ventilácia so 100 percentným kyslíkom a manuálne stláčanie hrudníka rýchlosťou 300/min, kým MaP nedosiahlo 60 mm-Hg a bola pozorovaná elektrokardiografická aktivita . akonáhle bolo zviera hemodynamicky stabilné a spontánne dýchalo (zvyčajne 1 hodinu po roSc), katétre sa odstránili a zviera sa extubovalo.
Riadenie teploty medzi skupinami.Telesná teplota v normotermickej skupine bola udržiavaná na 37±0.5˚C počas a po operácii CA a udržiavaná až do usmrtenia potkanov podľa časového plánu. v skupine s podchladením bol ca stanovený pri normálnej teplote; potom sa telesná teplota udržiavala pomocou obkladov s ľadom a ventilátormi na 33±0.5˚C bezprostredne po KPR počas 2, 4 a 6 hodín a rýchlo sa znovu zahriali pomocou vyhrievacej podložky na požadovanú teplotu ( 37±0.5˚C). Potkany sa potom vrátili do svojich klietok, kým neboli usmrtené jeden deň po CPR/roSc. Telesná teplota bola monitorovaná pomocou rektálneho teplotného senzora (27).
Biochemická analýza séra.Na anestéziu všetkých zvierat sa použila intraperitoneálna injekcia 30 mg/kg pentobarbitalu sodného (JW Pharm co., ltd.). Krv sa odoberala z brušných žíl každého zvieraťa v každej skupine. Sérum sa odoberalo centrifugáciou krvi (2 774 xg, 15 minút, 4 °C) a uchovávalo sa pri -80 °C až do analýzy. Hladiny močovinového dusíka v krvi (Bun) a kreatinínu v sére boli stanovené podľa metód navrhnutých Medzinárodnou federáciou klinickej chémie (28) s použitím automatického chemického analyzátora Hitachi 2070 (Hitachi, ltd.). všetky testy sa uskutočnili trojmo s použitím čerstvého séra.
Spracovanie tkaniva.Potkany boli hlboko anestetizované intraperitoneálnou injekciou 200 mg/kg pentobarbitalu sodného (JW Pharm co., ltd.) a boli transkardiálne perfundované 0,1 M fosfátom pufrovaného fyziologického roztoku (PBS; pH 7,4), nasledovaného 4 percentami paraformaldehydu v 0,1 M fosfátovom pufri (PB; pH 7,4). Obličky sa izolovali z každého zvieraťa a fixovali sa 4 percentami paraformaldehydu v 0,1 M PB (pH 7,4) pri teplote miestnosti počas 1 týždňa, potom sa sagitálne narezali, zaliali do parafínu a narezali (6 um).
Hematoxylín a eozín (H&E), Periodic Acid-Schiff (PAS) a Massonovo trichrómové farbenie.Farbenie H&e sa uskutočnilo na vyšetrenie patologických zmien v obličkách podľa predtým opísaného postupu (29). Farbenie PaS sa uskutočnilo na vyšetrenie zmien v glomeruloch podľa predtým opísaných postupov (30-32). Massonova metóda farbenia trichrómom sa použila na definovanie tubulárneho poškodenia, berúc do úvahy tubulárnu dilatáciu, tubulárnu atrofiu, tvorbu tubulárneho odliatku, vakuolizáciu, degeneráciu, intersticiálnu fibrózu a odlupovanie tubulárnych epiteliálnych buniek alebo zhrubnutie tubulárnej bazálnej membrány podľa predtým opísaných postupov (33 ,34).
celkovo 2 skúsení patológovia hodnotili histopatologické zmeny dvojito zaslepeným spôsobom. obrazy 10 zafarbených rezov/potkan boli zachytené pri 400-násobnom zväčšení pomocou svetelného mikroskopu Leica dM 2500 (Leica Microsystems GmbH). V každej sekcii bolo analyzovaných celkom 10 polí. Histopatologická analýza renálnych lézií sa uskutočnila podľa predtým opísaných postupov (35,36). Stručne, lézie boli kategorizované ako žiadne významné mikroskopické lézie (nSMl), minimálne, mierne, stredné alebo výrazné lézie, v danom poradí, klasifikované pomocou nasledujúcej stupnice so slepým testom: normálne, 0 bodov;<25% damage,="" 1="" point;="" 26‑50%="" damage,="" 2="" points;="" 51‑75%="" damage,="" 3="" points;="" and="" 76‑100%="" damage,="" 4="">
Glomerulárne lézie boli definované stratou bunkových elementov, kolapsom kapilárneho lúmenu, amorfným hyalínovým materiálom s adhéziami alebo bez adhézií na Bowmanovu kapsulu (30-32) a hodnotené nasledujúcimi číselnými škálami: žiadne poškodenie, { {7}} bodov; veľmi mierny, 1 bod; mierne, 2 body; mierny, 3 body; a ťažké, 4 body. Rúrkové poranenie bolo hodnotené nasledujúcim bodovacím systémom: žiadne tubulárne poranenie, 0 bodov; 1-9 percent tubulov zranených, 1 bod; 10-25 percent tubulov zranených, 2 body; 26-50 percent tubulov zranených, 3 body; 51-75 percent tubulov zranených, 4 body; a najmenej 76 percent tubulov zranených, 5 bodov (33,34).
malondialdehyd (MDA).Koncentrácia Mda v obličkovej kôre bola hodnotená podľa skôr opísaného protokolu (23,37,38). v skratke, homogenizácia a centrifugácia obličkových tkanív sa uskutočňovala pri 8 832 xg počas 10 minút pri 4 °C a supernatant sa zhromaždil a skladoval pri -80 °C na analýzu MDA. Obsah MDA bol stanovený podľa inštrukcií testovacej súpravy TBarS (kat. č. 10009055; cayman chemical company).
Imunohistochémia (IHC) pre antioxidačné enzýmy. iHc sa uskutočnil s Sod-1, Sod-2, caT a GPX na štúdium zmien v antioxidačných imunoreaktivitách v obličkách. iHc sa uskutočňoval podľa našej skôr opísanej metódy (22). Stručne povedané, rezy (6 µm) sa inkubovali s primárnym kozím anti-Sod1 (1:500; kat. č. SaB2500976; Sigma-Aldrich; Merck KGaa), kozím anti-Sod2 (1:1 ,000; kat. číslo SaB2501676; Sigma-Aldrich; Merck KGaa), králičie anti-caT (1:1,000; kat. č. ab16731; Abcam) a králičie anti-GPX ( 1:1,000; kat. č. ab22604; Abcam) cez noc pri 4 °C, po ktorej nasledoval biotinylovaný-konjugovaný anti-králičí (1:250; kat. č. Ba-1000-1.5; Vector laboratories , Inc.) a biotinylované-konjugované anti-kozie (1:250; kat. č. Ba-5000-1.5; Vector Laboratories, Inc.) sekundárne protilátky počas 2 hodín pri 24 °C a vyvinuté pomocou Vectastain aBc (Vector laboratories , Inc.). Potom boli vizualizované roztokom 3,3'-diaminobenzidínu (v 0,1 M Tris-HCl pufri).
Na zobrazenie rezov pri 400-násobnom zväčšení bol použitý mikroskop Leica dM 2500. Celkovo sa vybralo 10 sekcií/potkanov a zachytilo sa 10 oblastí. Na meranie percenta ( percent ) relatívnej optickej hustoty (tyč) sa použil softvér na analýzu prahu obrazu verzia 1.52a (národný inštitút zdravia).
Štatistická analýza.Všetky experimenty sa opakovali trojmo. Na analýzu údajov sa použil Graph Pad Prism verzia 5.0 (GraphPad Software, Inc.), ktoré boli vyjadrené ako priemer ± štandardná chyba priemeru (SeM) hodnôt. Prežitie sa analyzovalo pomocou Kaplan-Meierovej štatistiky a log-rank testu. MaP a periférny kyslík sa porovnávali s použitím jedno- a obojsmerných opakovaných meraní analýzy rozptylu na posúdenie vplyvu času. Na určenie významnosti rozdielov sa uskutočnili post hoc analýzy s použitím Tukeyho testu pre všetky párové viacnásobné porovnania. P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">
Výsledky
Fyziologické zmeny, miera prežitia a biochemické premenné v sére. Medzi skupinami nebol žiadny štatisticky významný rozdiel, pokiaľ ide o základné charakteristiky, vrátane telesnej hmotnosti, MaP a Spo2 (tabuľka i a obr. 2). K indukcii ca došlo 3-4 minúty po intravenóznej injekcii vekuróniumbromidu (2 mg/kg). CA bola potvrdená izoelektrickým EKG, Spo2 a MaP a tieto sa zmenili podľa očakávania podľa experimentálneho protokolu (obr. 2a-c). ako je znázornené na obr. 2d, telesná teplota bola medzi všetkými skupinami po roSc odlišná, ako je znázornené na obr. 3, miera prežitia každej skupiny bola hodnotená jeden deň po ca. Miera skupiny II bola 42,9 percenta.
V skupine iii bola miera po 2 h-HT 42,9 percenta, miera po 4 h-HT bola 57,1 percenta a miera po 6 h-HT bola 71,4 percenta. v tomto experimente nebol žiadny rozdiel medzi potkanmi v skupine ii a potkanmi s 2 h-HT v skupine iii.
ako je ukázané na obr. 4B, hladina Bun v sére v skupine i bola 13,8 mg/dl jeden deň po cca. v skupine ii bola hladina Bun významne zvýšená na 35,3 mg/dl. v skupine iii bola hladina Bun 3{{10}}},7 mg/dl po 2 h‑HT, 25.0 mg/dl po 4 h‑HT a 22,7 mg/dl dl po 6 h-HT. okrem toho, ako je znázornené na obr. 4c, hladina kreatinínu v sére v skupine I bola {{20}},23 mg/dl. v skupine ii bola hladina kreatinínu významne zvýšená na 0,43 mg/dl. v skupine iii boli hladiny kreatinínu nižšie ako hladiny pozorované v skupine ii nasledovne: 0,39 mg/dl po 2 h-HT, 0,37 mg/dl po 4 h-HT a 0,36 mg/dl po 6 h-HT.
Histopatologické nálezy. v skupine I (sham) boli intaktné histologické štruktúry odhalené farbením H&e, PaS a Massonovým trichrómom (obr. 5A). Intersticiálna fibróza sa nezistila vo všetkých skupinách, zatiaľ čo v skupine ii sa jeden deň po roSc skúmala renálna histopatológia indukovaná ca pomocou farbenia H&e, PaS a Massonovým trichrómom. Závažné poškodenie obličiek vyvolané CA sa významne zvýšilo v proximálnych tubuloch a glomeruloch; najmä kefkové okraje renálnych tubulárnych epitelových buniek boli vážne erodované (obr. 5a a B). okrem toho v tejto skupine boli glomerulárne kapiláry rozšírené zápalovými bunkami a intersticiálny edém a akútna renálna tubulárna nekróza boli vážne v porovnaní s tými, ktoré boli pozorované v skupine I (obr. 5a).
v skupine iii bolo poškodenie obličiek oslabené jeden deň po roSc (obr. 5a a B). konkrétne poškodenie indukované ca v proximálnych tubuloch sa výrazne znížilo po 6 h-HT v porovnaní s tým, ktoré sa pozorovalo v skupine ii. okrem toho sa lokálna expanzia proximálnych tubulov znížila v porovnaní s expanziou zistenou v skupine ii (obr. 5A). Pre glomeruly 6h-HT významne zoslabilo poškodenie glomerulov v porovnaní s tým, ktoré sa zistilo v skupine ii (obr. 5a a B).
úroveň MDA. ako je znázornené na obr. 4a, hladina Mda v renálnej kôre bola významne zvýšená jeden deň po ca v skupine ii v porovnaní so skupinou i. Avšak v skupine III bola hladina MDA významne znížená po 4 h- a 6 h-HT. bol tiež znížený v 2 h-HT, ale nebol tam žiadny štatisticky významný rozdiel v porovnaní so skupinou ii.
Zistenia imunoreaktivity antioxidačných enzýmov.
V skupine I sa hodnotili normálne imunoreaktivity Sod-1, Sod-2, GPX a caT, čo odhalilo, že sa nachádzali hlavne v tubuloch (obr. 6a). v skupine ii boli imunoreaktivity Sod-1, Sod-2, GPX a CAT významne znížené jeden deň po roSc v porovnaní s tými, ktoré boli zistené v skupine i (obr. 6a a B).
v skupine iii sa imunoreaktivity Sod-1, Sod-2, GPX a caT po 2 h-HT významne nelíšili od tých, ktoré sa pozorovali v skupine ii (obr. 6a a B). v prípade 4h-HT boli štyri imunoreaktivity významne vyššie ako tie, ktoré boli odhalené v skupine ii (obr. 6a a B), čo dokazuje, že najmä imunoreaktivita GPX bola významne vyššia v porovnaní s inými imunoreaktivitami. v prípade 6h-HT boli všetky imunoreaktivity vyššie ako tie, ktoré boli identifikované u potkanov, ktoré dostali 4h-HT, čo ukazuje, že tyčinka každej imunoreaktivity Sod-1, Sod-2, GPX a caT bola 78,4, 67,4, 86,5 a 79,5 percenta v porovnaní so skupinou i (obr. 6a a B).
herba epimedium sagittatum
Diskusia
V štúdiách na zvieratách sú srdce a mozog najviac postihnutými orgánmi po ischemickom/reperfúznom (i/r) poranení po ca (39,40). napriek tomu niektoré štúdie uvádzajú, že akútne poškodenie obličiek má vplyv na neurologické zotavenie (41, 42). Preto je dôležité vyšetriť akútne poškodenie obličiek po ca a cPr. v tejto štúdii sa dospelí samci potkanov Sd použili na asfyxiu ca injekciou vekuróniumbromidu. CA bola potvrdená 3-4 minúty po indukcii asfyxie a cPr bola vykonaná 5 minút po ca. MaP, ecG a Spo2 boli zmenené podľa očakávania počas ca a po roSc. v našej súčasnej štúdii bola miera prežitia v skupine iii 42,9 percent jeden deň po roSc u potkanov vystavených 2 h-HT, 57,1 percenta u potkanov liečených 4 h-HT a 71,4 percenta u potkanov vystavených 6 h-HT. che et al (26) uviedli, že miera prežitia bola 40 percent dva dni po roSc na potkanom modeli asfyxického ca. okrem toho Wang et al (43) uviedli, že u potkanov kombinácia hypotermie a levosimendanu (senzibilizátor vápnika a otvárač draslíkových kanálov) po roSc významne zvýšila prežitie. Na základe týchto zistení môže HT u potkanov s ca zvýšiť mieru prežitia niekoľko dní po roSc. Avšak u ľudí HT po ca sotva zvyšuje mieru prežitia po roSc (44).
renálna dysfunkcia bola hlásená u 12-28 percent pacientov s ca po úspešnej resuscitácii (13). okrem toho sa akútne poškodenie obličiek vyvinulo u 43 percent pacientov resuscitovaných po ca a viac ako 75 percent týchto epizód sa vyskytlo do troch dní po ca (45). na zvieracích modeloch bolo akútne poškodenie obličiek vyvolané i/R (tj ROSC po CA) významne oslabené HT (43,46,47). Napríklad Tissier et al (47) uviedli významné zoslabenie obličkových lézií vplyvom HT na králičom modeli ca na základe histopatológie a elektrónovej mikroskopie v porovnaní s kontrolnou skupinou. v našej súčasnej štúdii sa skóre histopatologických glomerulárnych a tubulárnych lézií obličiek v skupine ii zjavne zvýšilo jeden deň po roSc. v tejto skupine boli hladiny Bun a kreatinínu v sére významne zvýšené po ROSC v porovnaní s falošnou skupinou (skupina i). Tieto výsledky boli podobné ako v predchádzajúcich štúdiách zahŕňajúcich modely ca psov, králikov a prasiatok (47–49). Poškodenie obličiek sa teda vážne zvýšilo v skorej fáze po ca u experimentálnych zvierat. v našej súčasnej štúdii boli renálne glomerulárne a tubulárne lézie a histopatologické skóre v skupine iii významne znížené po 4 h- a 6 h-HT jeden deň po roSc v porovnaní so skupinou ii. Ribeiro a kol. (46) a Souza a kol. (50) uviedli, že HT bola účinná na zvieracích modeloch poškodenia obličiek i/r. Islam a kol. (23) a Jawad a kol. (22) zistili, že HT znižuje závažnosť poškodenia obličiek a zvyšuje mieru prežitia v modeli asfyxickej ca. Zistenia naznačujú, že HT má významný renálny ochranný účinok, ktorý bol spojený so zvýšenou mierou prežitia.
Endogénne antioxidačné enzýmy zahŕňajú hlavne Sods, CAT a GPX. Tieto enzýmy poskytujú prvú líniu obrany proti o2•- a OH•. SOD‑1 a SOD‑2 poskytujú obranu proti oxidačnému stresu tým, že katalyzujú dismutáciu o2•‑ na o2 a H2o2 (51). oxidačný stres je kľúčovým faktorom pri poranení orgánov a hemodynamickej dysfunkcii počas PcaS a tvorbe roS počas i/r poranenia. Aktivita antioxidačných enzýmov je zmenená i/r poranením po cca (21). naša štúdia odhalila, že hladiny Sod-1, Sod-2, GPX a caT boli znížené po roSc v skupine ii v porovnaní so skupinou i. Hladiny týchto antioxidačných enzýmov sú znížené po i/r, čo spôsobuje poškodenie buniek a smrť v dôsledku spotreby endogénnych antioxidantov v dôsledku uvoľňovania roS (52).
Xia et al (53) uviedli zvýšenú antioxidačnú aktivitu v obličkových tkanivách myší vystavených HT pri renálnom i/r poškodení. Hackenhaar et al (21) pozorovali významné zvýšenie aktivity Sod-1, Sod-2, GPX a caT po 6, 12, 36 a 72-h HT u ľudí po roSc. v predchádzajúcich štúdiách s použitím potkanieho modelu asfyxickej ca, Islam et al (23) uviedli, že HT po ca znižuje oxidačný stres v obličkách, a Jawad et al (22) uviedli, že HT po ca chráni obličky pred poškodením vyvolaným ca, demonštrujúce, že nrf2/Ho‑1 bol zvýšený v obličkách. v našej súčasnej štúdii sa imunoreaktivity Sod-1, Sod-2, GPX a caT významne zvýšili po 4 h-HT a 6 h-HT v skupine iii v porovnaní so skupinou ii, čo naznačuje, že HT aktivoval antioxidačné enzýmy a znížil oxidatívny stres.
Na základe prežitia, histopatológie, biochemických a imunohistochemických výsledkov tejto štúdie sa zistilo, že renálna dysfunkcia je bežná a spojená s mortalitou v skorých štádiách PcaS po roSc, v našom modeli asfyxického ca. Avšak 4 h- alebo 6 h-HT po ROSC významne znížilo poškodenie obličiek, čo naznačuje, že HT indukuje aktiváciu antioxidačných enzýmov, ako sú Sod-1, Sod-2, GPX a caT, čo vedie k zníženiu oxidačného stresu v obličkách. v dôsledku toho sa predpokladalo, že HT znižuje poškodenie obličiek antioxidačným mechanizmom a zvyšuje mieru skorého prežitia. Na objasnenie mechanizmu poškodenia obličiek a HT v ca po roSc je však potrebná analýza Western blot. Toto je potenciálne obmedzenie tejto štúdie a zdôrazňuje potrebu ďalších štúdií.
myricetín
1oddelenie urgentnej medicíny, výskumný ústav klinickej medicíny národnej univerzity Jeonbuk, Jeonju, Jeollabuk‑do 54907;
2vysoká škola výskumného ústavu veterinárnej medicíny a biologickej bezpečnosti, národná univerzita Jeonbuk, san, Jeollabuk‑do 54596;
3oddelenie biomedicínskej vedy a výskumný ústav pre biovedu a biotechnológiu, Hallym University, chuncheon, Gangwon‑do 24252;
4 chirurgické oddelenie, Kangwonská národná univerzitná nemocnica,
Lekárska fakulta, Kangwonská národná univerzita, chuncheon, Gangwon-do 24289; 5. Katedra neurobiológie, Lekárska fakulta, Kangwonská národná univerzita, chuncheon, Gangwon-do 24341, Kórejská republika
Poďakovanie
nepoužiteľné.
Financovanie
Táto štúdia bola podporená Programom základného vedeckého výskumu prostredníctvom Národnej výskumnej nadácie Kórey financovanej Ministerstvom školstva (granty č. nrF-2019r1c1c1002564, nrF-2019r1F1a1062696 a nrF-2021r1F1a1059992).
Dostupnosť údajov a materiálov
Súbory údajov použité a/alebo analyzované počas súčasnej štúdie sú k dispozícii od príslušného autora na primeranú žiadosť.
Príspevky autorov
SeK, HYS, MHW a HJT boli zodpovedné za návrh experimentu, zber údajov, analýzu údajov a písanie rukopisov. Experimenty a analýzu údajov vykonali eYl, YJY, rHK, JHc a TKl. dca, BYP, JcY, SKH a iSK vykonali analýzu údajov a vyjadrili kritické pripomienky k celému procesu štúdie. všetci autori si prečítali a schválili konečný rukopis. HYS a HJT potvrdzujú pravosť všetkých nespracovaných údajov.
Etický súhlas a súhlas s účasťou
všetky experimentálne protokoly boli schválené na základe etických postupov a vedeckej starostlivosti Inštitucionálnym výborom pre starostlivosť o zvieratá a ich používanie národnej univerzity v Jeonbuku (číslo schválenia JBnu 2020‑084; Jeonju, Južná Kórea).
Súhlas pacienta so zverejnením
nepoužiteľné.
Konkurenčné záujmy
Autori vyhlasujú, že nemajú žiadne konkurenčné záujmy.
Referencie
1. Girotra S, chan PS a Bradley SM: Poresuscitačná starostlivosť po mimonemocničnej a nemocničnej zástave srdca. Srdce 101: 1943-1949, 2015.
2. ROH Yi, Jung WJ, Hwang So, Kim S, Kim HS, Kim JH, Kim TY, Kang HS, Lee JS a Cha KC: Kratší interval defibrilácie podporuje úspešné výsledky defibrilácie a resuscitácie. resuscitácia 143: 100-105, 2019.
3. Xanthos T, iacovidou n, Pantazopoulos i, Vlachos I, Bassiakou e, Stroumpoulis K, Kouskouni e, Karabinis a a Papadimitriou l: Ischémiou modifikovaný albumín predpovedá výsledok kardiopulmonálnej resuscitácie: experimentálna štúdia. resuscitácia 81: 591-595, 2010.
4. Yeh ST, Cawley RJ, aune Se a Angelos MG: potreba kyslíka počas kardiopulmonálnej resuscitácie (cPr) na dosiahnutie návratu spontánnej cirkulácie. resuscitácia 80: 951-955, 2009.
5. lópez‑Herce J, del castillo J, Matamoros M, canadas S, rodriguez‑calvo a , cecchetti c , rodríguez‑núnez a a carrillo Á; iberoamerican Pediatrická zástava srdca Sieť štúdie riBePci: Po návrate spontánnych obehových faktorov spojených s mortalitou pri zástave srdca u detí v nemocnici: prospektívna multicentrická medzinárodná observačná štúdia. crit care 18: 607, 2014.
6. Mongardon n, Dumas F, stal sa S, Grimaldi d, Hissem T, Pène F a cariou a: Syndróm postkardiálnej zástavy: od okamžitej resuscitácie k dlhodobému výsledku. intenzívnej starostlivosti 1: 45, 2011.
7. Neymar RW, Nolan JP, Adrie c, Hibiki M, Berg RA, Böttiger BW, Callaway c, Clark rS, Geocadin RG, Jauch EC a kol.: Syndróm post-kardiálnej zástavy: epidemiológia, patofyziológia, liečba a prognóza. konsenzuálne vyhlásenie Medzinárodného styčného výboru pre resuscitáciu (American Heart Association, Austrálska a Novozélandská rada pre resuscitáciu, Európska rada pre resuscitáciu, Heart and Stroke Foundation of Canada, Interamerican Heart Foundation, resuscitačná rada Ázie a Rada pre resuscitáciu južnej Afriky ); výbor pre núdzovú kardiovaskulárnu starostlivosť Americkej asociácie srdca; rada pre kardiovaskulárnu chirurgiu a anestéziu; rada pre kardiopulmonálnu, perioperačnú a kritickú starostlivosť; rada pre klinickú kardiológiu; a Rada pre mŕtvice. tiráž 118: 2452-2483, 2008.
8. Nolan JP, Neumann RW, Adrie c, Hibiki M, Berg RA, Böttiger BW, Callaway c, Clark rS, Geocadin rG a kol.: Syndróm post-kardiálnej zástavy: epidemiológia, patofyziológia, liečba a prognóza. Vedecké vyhlásenie Medzinárodného styčného výboru o resuscitácii; výbor pre núdzovú kardiovaskulárnu starostlivosť Americkej asociácie srdca; rada pre kardiovaskulárnu chirurgiu a anestéziu; rada pre kardiopulmonálnu, perioperačnú a kritickú starostlivosť; rada pre klinickú kardiológiu; rada o mŕtvici. resuscitácia 79: 350‑79, 2008. DOI: 10.1016/j.resuscitation.2008.09.017
9. Jentzer Jc, zmena Md a dezfulian c: Dysfunkcia myokardu a šok po zástave srdca. BioMed res int 2015: 314796, 2015.
10. Madl c a Holzer M: Funkcia mozgu po resuscitácii po zástave srdca. curropin crit care 10: 213-217, 2004.
11. Roberts BW, Kilgannon JH, chansky Me, Mittal n, Wooden J, Parrillo Je a Trzeciak S: Multiorgánová dysfunkcia po návrate spontánnej cirkulácie pri syndróme zástavy srdca. crit care Med 41: 1492-1501, 2013.
12. Zeiner a, Sunder‑Plassmann G, Sterz F, Holzer M, porazení H, laggier an a Müllner M: Vplyv miernej terapeutickej hypotermie na funkciu obličiek po kardiopulmonálnej resuscitácii u mužov. resuscitácia 60: 253-261, 2004.
13. Yanta J, Guyette FX, Doshi a, Callaway CW a Rittenberg Jc; Služba po zástave srdca: renálna dysfunkcia je bežná po resuscitácii po zástave srdca mimo nemocnice. resuscitácia 84: 1371-1374, 2013.
14. lee JH, Lee TK, Kim iH, lee Jc, Won MH, Park JH, Ahn JH, Shin Mc, ohk TG, Moon JB, et al: zmeny v histopatológii a hladinách faktora nekrózy nádorov v srdciach potkanov po asfyxická zástava srdca. Clin Exp Emerg Med 4: 160-167, 2017.
15. Lucchino S, Kellum Ja, Bellomo r., Doig GS, Morimatsu H, Morgera S, Schetz M, Tan i, Bouman c, Macedo a kol.; Začiatok a koniec výskumníkov s podpornou terapiou obličiek (Najlepšie obličky): akútne zlyhanie obličiek u kriticky chorých pacientov: medzinárodná, multicentrická štúdia. JAMA 294: 813-818, 2005.
16. Mattana J a Singhal Pc: Prevalencia a determinanty akútneho zlyhania obličiek po kardiopulmonálnej resuscitácii. arch intern Med 153: 235-239, 1993.
17. Sachse a a Wolf G: reaktívne formy kyslíka indukované angiotenzínom II a obličky. J am Soc Nephrol 18: 2439-2446, 2007.
18. Baud l a ardaillou r: reaktívne formy kyslíka: Produkcia a úloha v obličkách. am J Physiol 251: F765-F776, 1986.
19. rodrigo r, Fernández-Gajardo r, Gutiérrez r, Matamala JM, carrasco r, Miranda-Merchak a Feuerhake W: oxidačný stres a patofyziológia ischemickej cievnej mozgovej príhody: nové terapeutické možnosti. CNS Neurol Disord Drug Targets 12: 698-714, 2013.
20. Shahzad S, Hasan a, Faizy AF, Mateen S, Fatima n a Moin S: zvýšené poškodenie DNA, oxidačný stres a narušená reakcia obranného systému u pacientov s infarktom myokardu. Clin Appl Thromb Hemost 24: 780-789, 2018.
