Koľko toho viete o chronickom ochorení obličiek?
Mar 03, 2022
Kontakt: emily.li@wecistanche.com
Hodnotenie albuminúrie a jej vzťahu s krvným tlakom u psov s chronickým ochorením obličiek
Angela Bacic1, Marcia M. Kogika1, a kol
Kľúčové slováalbuminúria, psie,chronické ochorenie obličiekELISA, hypertenzia,funkcie obličiek
PozadieMikroalbuminúria a hypertenzia sú už dlho spojené so stráženou prognózou u ľudských pacientov s rôznymi chorobami. Vo veterinárnej medicíne sa na včasnú detekciu používajú testy na mikroalbuminúriupoškodenie obličiek, ale existuje len málo informácií o jeho súvislosti s vysokým krvným tlakom u psov schronické ochorenie obličiek(CKD). Cieľ: Cieľom tejto štúdie bolo zhodnotiť albuminúriu a jej súvislosť s arteriálnou hypertenziou u psov s CKD.
MetódyU 39 klinicky zdravých psov a 40 psov s CKD sa stanovil pomer albumín: kreatinín (UAC) v moči, pomer bielkovín v moči: kreatinínu (UPC) a systolický krvný tlak.
VýsledkyUAC u psov s CKD (rozsah, {{0}}.002–7,99; medián, {{10}},38) bol štatisticky odlišný od kontrolných psov (rozsah, 0.0005–0.01; medián, {{42} }.002). Mikroalbuminúria (UAC 0,03–0,3) a mikroalbuminúria (UAC 4 0,3) boli zistené u 32,5 percenta a 50 percent psov s CKD. Šesťdesiat percent (24/40) psov s CKD malo systolický tlak Z180 mmHg; u týchto psov bol pomer UAC (rozsah 0,006–7,99; medián 1,72) významne vyšší ako u psov s CKD a systolickým tlakom 180 mmHg (rozsah 0,002–4,83; medián 0,10). Z hypertenzných psov s CKD tí s UPC 41,0 mali zvyčajne makroalbuminúriu, tí s UPC 0,5–1,0 mali zvyčajne mikroalbuminúriu a tí s UPC 0,5 zvyčajne nemali albuminúriu.
ZáveryPomer UAC bol vyšší u hypertonikov ako u normotenzných psov s CKD. Testy určené na detekciu mikroalbuminúrie môžu byť užitočné pre hypertenzných psov s CKD a UPC 1.0 na zistenie nástupu a rozsahu albuminúrie. Akonáhle je makroalbuminúria zjavná, na rovnaký účel možno použiť samotný pomer UPC.
Cistanche lieči ochorenie obličiek
Úvod
Proteinúria sa považuje za nezávislý mediátor progresieobličkové ochorenie.1,2U potkanov s experimentálne vyvolanou proteinúriou au ľudí s prirodzene sa vyskytujúcou proteinúriouzlyhanie obličiekveľkosť proteinúrie koreluje s rýchlosťou progresiezlyhanie obličiek.3,4 Nedávno bola celková úmrtnosť a počet uremických kríz spojené s proteinúriou u psov schronické ochorenie obličiek(CKD).5
Mikroalbuminúria je vo všeobecnosti definovaná ako subklinická albuminúria, tj rýchlosť vylučovania albumínu, ktorá je abnormálne zvýšená, ale nie je detekovateľná štandardnými laboratórnymi postupmi, ako je rutinná metóda pomocou meracích tyčiniek.6 To znamená, že rýchlosť vylučovania albumínu je nad normálnou úrovňou, ale pod zvyčajnou hladinou proteinurie. U ľudí je mikroalbuminúria dlho uznávaná ako prediktívny faktor neskorej klinickej proteinúrie a konečného štádia renálneho ochorenia6ako aj na rozvoj diabetickej nefropatie.7Podobne môže mikroalbuminúria predchádzať proteinúrii u psov s dedičnou nefropatiou,8u psov infikovaných Dirofilaria immitis,9a u pšeničných teriérov s mäkkou srsťou geneticky predisponovaných k rozvoju glomerulárnej choroby.10
Koexistencia hypertenzie a proteinúrie už bola hlásená u psov s hyperadrenokorticizmom11–13a diabetes mellitus,14,15ale neboli publikované žiadne správy o spojení systémového krvného tlaku so závažnosťou proteinúrie a/alebo albuminúrie u psov s CKD. Whittemore a kol16spomenul, že u mačiek existuje významná súvislosť medzi pomerom albumín: kreatinín (UAC) v moči, hypertenziou a azotémiou a podobné výsledky by sa dali očakávať aj u psov, ale štúdia tento záver nepodporila.
Je nevyhnutné, aby sa nielen diagnostikovala albuminúria a/alebo proteinúria, ale aby sa identifikovali a kontrolovali ďalšie faktory, ktoré ju tiež zhoršujú.17–19Systémová hypertenzia, s najväčšou pravdepodobnosťou sekundárna u psov sobličkové ochorenie,20môže vyústiť do glomerulosklerózy, glomerulárnej atrofie a proliferatívnej glomerulitídy. Hypertenzné renálne arteriolárne lézie môžu spôsobiť renálnu tubulárnu degeneráciu a intersticiálnu fibrózu.21
Semikvantitatívne testy (napr. testovacie tyčinky) často podceňujú proteinúriu, pretože psy s CKD majú zvyčajne zriedené vzorky moču. Na druhej strane pomer UAC vysoko koreluje s koncentráciou albumínu v moči meranou načasovaným zberom moču a koriguje variabilitu diurézy a koncentrácie moču.22,23 U ľudí je mikroalbuminúria definovaná ako 30–30}0 mg albumínu/g kreatinínu s pomerom UAC 0,03–0,3 mg/mg.24,25Cieľom tejto štúdie bolo teda určiť prevalenciu a veľkosť albuminúrie u psov s CKD a zistiť, či je hypertenzia spojená so zvýšením vylučovania albumínu. Na dosiahnutie tohto cieľa bola vyvinutá kvantitatívna záchytná ELISA na kvantifikáciu albumínu vo vzorkách moču od psov s CKD a na vyhodnotenie závažnosti albuminúrie bol stanovený pomer UAC.
Cistanche na zlepšeniefunkcie obličiek
Materiály a metódy
Zvieratá
Všetky postupy zahŕňajúce použitie zvierat boli schválené Etickou komisiou pre starostlivosť a používanie zvierat Školy veterinárskeho lekárstva, Univerzita v Sa˜o Paulo (protokol č. 378/2003). Kontrolnú skupinu tvorilo 39 klinicky zdravých normotenzných psov oboch pohlaví (23 samcov a 16 sučiek), vo veku 1–5 rokov a rôznych plemien. Skupinu CKD tvorilo 40 psov (20 samcov a 20 sučiek), vo veku 2–18 rokov a tiež rôznych plemien, s klinickou diagnózou CKD kategorizovanou ako štádiá 3 alebo 4 podľa klasifikácie stagingového systému navrhnutej International Renal Interest. Spoločnosť.26 Kritériá na zaradenie psov do skupiny CKD boli: anamnéza a komplementárne laboratórne nálezy kompatibilné s CKD, vrátane neregeneratívnej anémie, izostenúrie a chronickej renálnej azotémie (sérová koncentrácia kreatinínu Z2,0 mg/dl počas 4 2 mesiacov u hydratovaných psov), ako aj žiadne predchádzajúce podávanie antihypertenzív.
Krvný tlak
Systolický arteriálny tlak sa meral pomocou Dopplerovho prietokového detektora (Doppler Ultrasound Parks Medical Model 811B, Las Vegas, NV, USA). Šírka manžety bola zvolená tak, aby bola 30–40 percent obvodu končatiny v mieste umiestnenia. Pre túto štúdiu sa hypertenzia považovala za prítomnú, keď bol priemer aspoň 5 rôznych meraní vykonaných za sebouZ180 mmHg.27 Psy boli pred zákrokom umiestnené a držané v tichom prostredí u majiteľa. Ten istý lekár vykonal merania krvného tlaku u všetkých psov v štúdii.
Analýza moču
Vzorky moču sa asepticky odoberali cystocentézou alebo uretrálnou katetrizáciou a podrobili sa kompletnej analýze moču vrátane mikroskopického hodnotenia močového sedimentu. Zvieratá, ktorých vzorky moču mali makroskopický dôkaz hematúrie a/alebo mikroskopický dôkaz pyúrie a bakteriúrie, boli vylúčené. Alikvóty supernatantu moču boli zmrazené a skladované pri -201C až 1 rok na následné stanovenie pomeru UAC.
Purifikácia psieho albumínu a imunizácia králikov
Najprv sa lyofilizovaný psí albumín (Frakcia V, #A9263, Sigma, St Louis, MO, USA) ďalej purifikoval afinitnou chromatografiou na kolónach Blue Sepharose a Q-Sepharose (GE Biotech, Piscataway, NJ, USA). Následne boli 2 králiky imunizované intramuskulárne s
purifikovaný albumín vo Freundovom adjuvans v štrnásťdňových intervaloch a IgG bol izolovaný zo séra.28
Elektroforéza a Western blotting purifikovaného psieho albumínu
Western blot sa uskutočnil modifikáciou skôr opísaného protokolu.29 Stručne, neredukované vzorky moču od zdravého psa a psa s CKD, vzorka séra od zdravého psa a purifikovaný psí albumín boli podrobené elektroforéze v 11-percentnom dodecylsulfátovo-polyakrylamidovom géli.30Proteíny sa preniesli na listy nitrocelulózovej membrány (veľkosť pórov {{0}} 0,22 mm, Sigma) pri 15 V počas 2 hodín s použitím polosuchého prenosového blotovacieho systému (BioRad, Hercules, CA, USA). Membrány sa prepláchli premývacím pufrom (10 mM Tris, 150 mM NaCl, 0,1 percenta [obj./obj.] Tween 20, pH 7,5) a potom sa inkubovali s blokovacím roztokom (5 percent [obj. /v] želatína z kože rýb zo studenej vody [Sigma G7765] rozpustená v premývacom pufri) počas 18 hodín pri 41 °C. Membrány sa inkubovali s protilátkami rozpustenými v premývacom pufri obsahujúcom 0,5 percenta (objem/objem) rybej želatíny počas 2 hodín pri teplote miestnosti za miešania. Na vyhodnotenie špecificity protilátok proti purifikovanému psiemu albumínu sa membrány inkubovali s celkovým králičím IgG proti psiemu albumínu. Po premytí boli prúžky inkubované s kozím anti-králičím IgG-peroxidázovým konjugátom (Sigma A6154) počas 2 hodín pri teplote miestnosti za miešania. Všetky protilátky a konjugáty sa zriedili v premývacom pufri obsahujúcom 0,5 percenta (objem/objem) rybej želatíny. Reakcia bola vyvinutá tak, ako je opísané vyššie.31
ELISA na psí albumín vo vzorkách moču
Na meranie albumínu vo vzorkách moču boli mikrotitračné platne (Maxisorp-Nunc Immunoplate, Montreal, Kanada) cez noc potiahnuté pri 41 °C roztokom 100 mg/ml králičieho IgG proti psiemu albumínu rozpusteného v 0,1 M uhličitanový pufor (pH 9,6) a potom blokovaný 3 percentami kazeínu rozpusteného v uhličitanovom pufri. Šesťbodové štandardné krivky pre albumín boli skonštruované s použitím purifikovaného psieho albumínu, sériovo zriedeného (na koncentrácie 250.0, 83,3, 27,8, 9,3, 3,1 a 1,0 ng/ml) pri inkubácii pufra (0,05 percenta Tween 20 a 0,6 percenta rybej želatíny vo fosfátom pufrovanom fyziologickom roztoku, pH 7,4). Vzorky moču boli tiež vhodne nariedené (1:100, 1:300, 1:500, 1:1000, 1:10,000 a 1:50 000) v inkubačnom pufri, aby reakcie vyskytujú v lineárnom rozsahu štandardnej krivky (1,03–250 ng/ml). Vzorky a štandardy sa analyzovali trojmo. Rovnaká protilátka bola použitá ako sekundárna protilátka, ale bola konjugovaná s biotínom29,32 a použitá v koncentrácii 3,15 ng/ml, rozpustená v inkubačnom pufri. Doštičky sa potom inkubovali so 100 ng/ml konjugátu avidín-peroxidáza (Sigma A3151) a potom s čerstvým činidlom vyvolávajúcim farbu, ako je opísané inde.33 Koncentrácia albumínu v moči pre každú vzorku bola extrapolovaná zo štandardnej krivky a výsledky boli korigované na počiatočné riedenie vzorky.
Cistanche preobličky
Pomery UAC a proteínu v moči: kreatinínu (UPC).
Celková koncentrácia bielkovín v moči (mg/dl) sa merala pomocou testu Coomassie G{{0}}34; každá vzorka sa analyzovala trojmo a hodnoty sa získali z 8-bodovej štandardnej krivky (0.025, 0.075, {{16 }}.10, 0,50, 1,0, 1,5, 2,0, 2,5 a 3,0 mg/ml). Koncentrácia kreatinínu v moči (mg/dl) sa stanovila pomocou testu kyseliny pikrovej35 na automatizovanom klinickom chemickom analyzátore (Liasys, AMS, Rím, Taliansko) a testovala sa s kontrolami kvality (Precinorm Uplus a Precipath Uplus, Roche Diagnostics, Mannheim, Nemecko). UAC sa stanovila pomocou koncentrácie albumínu (mg/dl) získanej testom ELISA. Pretože všetky analýzy boli uvádzané ako mg/dl, UAC a UPC boli vyjadrené bez jednotiek.
Štatistická analýza
Gaussova distribúcia bola skúmaná pomocou Kolmogorov-Smirnovovho testu. Pomery UPC a UAC neboli normálne rozdelené, takže na porovnanie sa použil Mann-Whitney test. Na štatistickú analýzu bol použitý softvérový balík SigmaStat 3.1 (Chicago, IL, USA). Rozdiely s P 0,05 sa považovali za štatisticky významné.
Výsledky
Králičí IgG anti-psí albumín bol špecifický pre purifikovaný psí albumín na základe Western blottingu (obrázok 1), pretože vo všetkých dráhach bol nájdený iba 1 proteínový pás relatívnej molekulovej hmotnosti podobnej ako psie albumín. Protokol ELISA používaný na meranie koncentrácie albumínu vo vzorkách moču bol mimoriadne citlivý s detekčným limitom približne 0,5 ng/ml.
Pomer UPC u klinicky zdravých normotenzných psov (n {{0}}; rozsah, 0.04–0,29; medián, 0 .10) bola výrazne nižšia (P o.{26}}{{30}}01) ako u psov s CKD (n=40; rozsah 0,13–25,08 ; medián, 1.{14}}). Šesťdesiatpäť percent (26/40) psov s CKD malo UPC 4 1.0, 20 percent (8/40) malo UPC medzi 0,5 a 1,0 a 15 percent (6/40) malo UPC o 0,5 (tabuľka 1). Väčšina (38/40, 95 percent) psov s CKD mala UPC pomer Z0,2.
Pomer UAC u klinicky zdravých psov (rozsah, {{0}}.0005–0.01; medián, 0,002) bol tiež významne nižší (P o,0001) ako u psov s CKD (rozsah, 0,002–7,99; medián, 0,38) (obrázok 2). Pomer UAC sa pohyboval od 0,03 do 0,3 (mikroalbuminúria) u 32,5 percenta (13/40) psov s CKD a bol 4 0,3 (makroalbuminúria) u 50 percent (20/40) psov s CKD (tabuľka 1 ).
Hypertenzia bola zistená u 24/40 (60 percent) psov s CKD. Psy s hypertenziou boli vo veku od 2 do 18 rokov (priemer plus -SD, 9,1 plus - 3,7 roka), zatiaľ čo normotenzné psy boli vo veku od 2 do 12 rokov (7,9 plus - 3,3 roka ).
Ak vezmeme do úvahy mikroalbuminúriu ako rozsah UAC definovaný pre ľudí ({{0}}.03–0,3), mikroalbuminúria bola častejšie detegovaná u normotenzných (7/16, 43,7 percenta) ako u hypertonikov (6 /24, 25 percent ) psov s CKD. Naopak, makroalbuminúria bola častejšie pozorovaná u hypertonikov (15/24, 62,5 percenta) ako u normotenzných (5/16, 31,3 percenta) psov s CKD. Žiadna albuminúria nebola pozorovaná u 3/24 (12,5 percent) hypertonikov a u 4/16 (25,0 percent) normotenzných psov s CKD (tabuľka 1).
Pomer UAC u hypertenzných psov s CKD (n {{0}}; rozsah, {{10}}.006–7,99; medián, 1,72 ) bola významne vyššia (P =,0183) ako u normotenzných psov s CKD (n=16; rozsah, 0,002–4,83; medián, 0,10) (obrázok 3). Hypertenzia bola pozorovaná u 6/13 (46,1 percenta) mikroalbuminurických psov a u 15/20 (75 percent) makroalbuminurických psov s CKD psov. Nebol pozorovaný žiadny významný rozdiel (P =,062) v pomere UPC medzi hypertonikmi (n=24; rozsah, 0,20–25,08; medián, 3,07) a normotenznými (n=16; rozsah, 0,13–4,70; medián, 1,10) psy s CKD.
Diskusia
Pomery UAC získané u klinicky zdravých psov pomocou našej techniky kvantitatívneho záchytu ELISA boli podobné ako u zdravých ľudí36,37a mačky.38Veľkosť albuminúrie u psov s CKD podľa hodnotenia UAC bola štatisticky vyššia ako u zdravých kontrolných psov. Ak vezmeme do úvahy, že psi s CKD boli klasifikovaní ako psi v 3. a 4. štádiu choroby, väčší rozsah albuminúrie v tejto skupine môže korelovať s rýchlosťou progresie renálneho ochorenia, ako sa predtým preukázalo u potkanov a ľudí.3,4
Polovica psov s CKD mala koncentrácie albumínu v moči v makroalbuminurickom rozsahu, ako by sa dalo očakávať, ale 32,5 percent psov s CKD bolo mikroalbuminurických a 17,5 percenta bolo normoalbuminurických. Preto by v poslednej skupine mohlo byť použitie rutinných metód na detekciu mikroalbuminúrie určitým prínosom. Okrem toho by sa testy na detekciu mikroalbuminúrie mohli použiť na monitorovanie liečby, ako aj na sledovanie progresie ochorenia nielen u mikroalbuminurických, ale aj u normoalbuminurických psov s CKD. Použitie týchto testov u normoalbuminurických psov by mohlo pomôcť klinickým lekárom rozpoznať skorý nástup albuminúrie a zaviesť primerané terapeutické opatrenia hneď, ako sa zistí; na druhej strane u mikroalbuminurických psov by bolo cieľom pridať nové liečivá do liečebného režimu a/alebo zvýšiť dávkovanie súčasných liečiv, aby sa znížila veľkosť albuminúrie, a teda oddialila jej progresia do makroalbuminúrie.
The data reported herein that all dogs with CKD and macroalbuminuria also had a UPC>1.0 môže naznačovať, že keď sa už makroalbuminúria prejavila, hodnoty UPC sa môžu použiť na účely uvedené vyššie, pretože psy pokročili do zjavnej proteinúrie; bolo by zbytočné používať také citlivé testy ako ELISA. Väčšina psov s CKD s pomerom UPC medzi 0,5 a 1.0 mala mikroalbuminúriu a väčšina z nich s UPC< 0.5="" were="" no="" albuminuria.="" these="" findings="" suggest="" that="" upc="" values="" between="" 0.5="" and="" 1.0="" reflect="" the="" presence="" of="" microalbuminuria.="" for="" upc=""><0.5, the="" specific measurement="" of="" albuminuria="" would="" be="" recommended to="" detect="" the="" initial="" development="" of="">
Hypertenzia bola diagnostikovaná u 60 percent psov s CKD, čo je zistenie v súlade s predchádzajúcimi štúdiami.20,39,40Vysoké percento (62,5 percenta) psov s hypertenziou malo makroalbuminurické CKD. Vysoký systolický arteriálny tlak bol prítomný u 46,1 percent psov s mikroalbuminurickým CKD. Pretože proteinúria je spojená s väčším rizikom rozvoja uremickej krízy, progresie CKD a smrti,5 liečby navrhnuté na zníženie hypertenzie by mohli spomaliť progresiu zlyhania obličiek a predĺžiť prežitie u hypertenzných psov s CKD. Porovnanie medzi hodnotami UAC u normotenzných a hypertenzných psov s CKD sa ukázalo ako štatisticky významné, čo dokazuje pravdepodobný vzťah medzi týmito parametrami a nepriaznivé účinky, ktoré môže mať vysoký systolický arteriálny tlak na rozvoj albuminúrie, podobne ako v prípade ľudí.41–43
Mohli by sa vzniesť otázky týkajúce sa rozdielov v hodnotách UAC medzi hypertenznými a normotenznými psami s CKD v tejto štúdii, pretože ich možno pripísať nerovnakej distribúcii zvierat; avšak všetci psi boli v štádiu 3 a 4 choroby a závažnosť anémie a azotémie bola podobná pre obe skupiny, čo je v súlade s pokročilými štádiami choroby.
V humánnej medicíne súbežný nález mikroalbuminúrie a hypertenzie vo všeobecnosti vedie k prijatiu špecifických terapeutických stratégií. Použitie inhibítorov angiotenzín-konvertujúceho enzýmu u ľudí s diabetes mellitus 1. typu, hypertenziou a mikroalbuminúriou môže znížiť progresívny priebeh do masívnej proteinúrie.44Rovnaká liečba je prospešná aj u mikroalbuminurických normotenzných diabetikov.45,46U hypertenzných potkanov so zvyškomobličky,liečba enalaprilom udržiavala systémový krvný tlak na normálnych hladinách a dramaticky obmedzovala rozvoj proteinúrie a glomerulárnych lézií.47Naše zistenia naznačujú, že testovanie na mikroalbuminúriu možno použiť ako následný nástroj na vyhodnotenie progresie ochorenia a stanovenie terapeutických a preventívnych prístupov u psích pacientov, najmä ak sa mikroalbuminúria postupne zhoršuje v dôsledku hypertenzie.
Záverom možno povedať, že pomery UAC u hypertenzných psov s CKD v našej štúdii boli vyššie ako u normotenzných psov, čo naznačuje, že vysoký systolický tlak môže súvisieť so zmenami v glomerulárnej štruktúre. Testy určené na detekciu mikroalbuminúrie môžu byť užitočné u hypertenzných psov s CKD a UPC 1.0 na zistenie nástupu albuminúrie alebo na sledovanie dávkovania antihypertenzív. Akonáhle je makroalbuminúria zjavná, na rovnaký účel možno použiť samotný pomer UPC.
Cistanche na zlepšeniefunkcie obličiek
Poďakovanie
Podporené grantom (#03/10,426-3) od Fundaca˜o de Amparo a` Pesquisa do Estado de Sa˜o Paulo – FAPESP.
Zverejnenie: Autori uviedli, že nemajú žiadne vzťahy ani finančnú účasť so žiadnou organizáciou alebo subjektom s finančným záujmom alebo vo finančnej súťaži s predmetom alebo materiálmi diskutovanými v tomto dokumente.
Od: 'Hodnotenie albuminúrie a jej vzťahu s krvným tlakom u psov s chronickým ochorením obličiekAngela Bacic1, Marcia M. Kogika1, a kol
-----Vet Clin Pathol39/2 (2010) 203–209 c 2010 Americká spoločnosť pre veterinárnu klinickú patológiu DOI:10.1111/j.1939-165X.2009.00207.x
Referencie
1. Burton C, Harris KP. Úloha proteinúrie v progresii chronického zlyhania obličiek. Am J Kidney Dis. 1996;27:765–775.
2. Remuzzi G. Nefropatická povaha proteinúrie. Curr Opin Nephrol Hypertens. 1999;8:655–663.
3. Praga M, Hernandez E, Montoyo C, a kol. Dlhodobé priaznivé účinky inhibície enzýmu konvertujúceho angiotenzín u pacientov s nefrotickou proteinúriou. Am J Kidney Dis. 1992;20:240–248.
4. Williams PS, Fass G, Bone JM. Renálna patológia a proteinúria určujú progresiu neliečeného mierneho/stredne ťažkého chronického zlyhania obličiek. QJ Med. 1988;67:343–354.
5. Jacob F, Polzin DJ, Osborne CA, a kol. Hodnotenie súvislosti medzi počiatočnou proteinúriou a mierou chorobnosti alebo úmrtia u psov s prirodzene sa vyskytujúcim chronickým zlyhaním obličiek. J Am Vet Med Assoc. 2005;226:393–400.
6. Viberti GC, Hill RD, Jarrett RJ a kol. Mikroalbuminúria ako prediktor klinickej nefropatie pri inzulín-dependentnom diabetes mellitus. Lancet. 1982;1: 1430–1432.
7. Mogensens CE, Christensen CK. Predpovedanie diabetickej nefropatie u pacientov závislých od inzulínu. N Engl J Med. 1984;311:89-93.
8. Lees GE, Jensen WA, Simpson DF a kol. Pretrvávajúca albuminúria predchádza nástupu zjavnej proteinúrie u psov samcov s X-viazanou dedičnou nefropatiou. J Vet Intern Med. 2002;16:353.
9. Grauer GF, Oberhauser EB, Basaraba RJ, et al. Vývoj mikroalbuminúrie u psov s ochorením srdcových červov. J Vet Intern Med. 2002;16:352.
10. Vaden SL, Jensen WA, Longhofer SL, a kol. Pozdĺžna štúdia mikroalbuminúrie u mäkko osrstených pšeničných teriérov. J Vet Intern Med. 2001;15:300.
11. Ortega TM, Feldman EC, Nelson RW a kol. Systémový arteriálny krvný tlak a pomer proteín/kreatinín v moči u psov s hyperadrenokorticizmom. J Am Vet Med Assoc. 1996;209:1724–1729.
12. Cavalcante CZ, Kogika MM, Simo˜es DMN a kol. Mikroalbuminúria u psov s hyperadrenokorticizmom a vzťahom k krvnému tlaku. J Vet Intern Med. 2007;21:647.
13. Cavalcante CZ, Kogika MM, Santoro ML a kol. Hodnotenie elektroforézy proteínov v moči a albuminúrie u psov s hyperadrenokorticizmom a vzťah k systémovému arteriálnemu tlaku krvi. J Vet Intern Med. 2008;22:798–799.
14. Struble AL, Feldman EC, Nelson RW, a kol. Systémová hypertenzia a proteinúria u psov s diabetes mellitus. J Am Vet Med Assoc. 1998;213: 822–825.
15. Kogika MM, Cavalcante CZ, Simo˜es DMN a kol. Mikroalbuminúria u psov s diabetes mellitus. J Vet Intern Med. 2007;21:647.
16. Whittemore JC, Miyoshi Z, Jensen WA, a kol. Asociácia mikroalbuminúrie a pomeru albumínu ku kreatinínu v moči so systémovým ochorením u mačiek. J Am Vet Med Assoc. 2007;230: 1165–1169.
17. Brown SA, Walton CL, Crawford P, Bakris GL. Dlhodobé účinky antihypertenzných režimov na renálnu hemodynamiku a proteinúriu. Kidney Int. 1993;43:1210–1218.
18. Brown SA, Finco DR, Brown CA. Hodnotenie účinkov inhibície enzýmu konvertujúceho angiotenzín enalaprilom u psov s indukovanou chronickou renálnou insuficienciou. Am J Vet Res. 2003;64:321–327.
19. Grauer GF, Greco DS, Getzy DM, et al. Účinky enalaprilu oproti placebu ako liečba idiopatickej glomerulonefritídy u psov. J Vet Intern Med. 2000;14:526–533.
20. Ross LA. Patofyziológia a manažment systémovej hypertenzie spojenej srenálna dysfunkcia. In: Osborne CA, Finco DR, eds. Nefrológia a urológia psov a mačiek. Baltimore, MD: Lippincott Williams & Wilkins; 1995:392–399
21. Bartges JW, Willis AM, Polzin DJ. Hypertenzia aobličkové ochorenie. Vet Clin North Am Small Anim Pract. 1996;26:1331–1345.
22. Bakker AJ. Detekcia mikroalbuminúrie. Analýza prevádzkovej charakteristiky prijímača uprednostňuje pomer albumínu ku kreatinínu pred koncentráciou albumínu. Diabetes Care. 1999;22:307–313.
23. Harvey JN, Hood K, Platts JK a kol. Predpoveď rýchlosti vylučovania albumínu z pomeru albumínu ku kreatinínu. Diabetes Care. 1999;22:1597–1598.
24. Weir GC, Nathan DM, spevák DE. Štandardy starostlivosti o diabetes. Diabetes Care. 1994;17:1514–1522.
25. Sabharwal RK, Singh P, Arora MM, Somani BL, Ambade V. Výskyt mikroalbuminúrie u hypertonikov. Indian J Clin Biochem. 2008;23:71–75.
26. Polzin DJ, Osborne CA, Ross S. Chronické ochorenie obličiek. In: Ettinger SJ, Feldman E, eds. Učebnica veterinárneho interného lekárstva. 6. vyd. Philadelphia, PA: Saunders; 2005:1767–1785.
27. Brown S, Atkins C, Bagley R, a kol. Pokyny na identifikáciu, hodnotenie a manažment systémovej hypertenzie u psov a mačiek. J Vet Intern Med. 2007;21:542–558.
28. Mckinney MM, Parkinson A. Jednoduchý nechromatografický postup na čistenie imunoglobulínov zo séra a ascitovej tekutiny. J Immunol Methods. 1987;96:271–278.
29. Harlow E, Lane D. Antibodies: A Laboratory Manuál. New York, NY: Cold Spring Harbor Laboratory; 1988: 471–510.
30. Laemli UK. Štiepenie štrukturálnych proteínov počas zostavovania hlavy bakteriofága T4. Príroda. 1970;227:80–685.
31. Pukac LA, Carter JE, Morrisonn KS, et al. Zosilnenie kolorimetrického signálu diaminobenzidínu pri imunoblotovaní. Biotechnika. 1997;23:385–388.
32. Olovsson M, Larsson A. Biotínové značenie kuracích protilátok a ich následné použitie v ELISA a imunohistochémii. Comp Immunol Microbiol Infect Dis. 1993;16:145–152.
33. Santoro ML, Barbaro KC, Flores da Rocha TR, a kol. Simultánna izolácia doštičkového faktora 4 a komplexu glykoproteínu IIb-IIIa z králičích krvných doštičiek a charakterizácia špecifických kuracích protilátok na ich testovanie. J Immunol Methods. 2004;284:55–72.
34. Bradford MM. Rýchla a citlivá metóda na kvantifikáciu mikrogramových množstiev bielkovín využívajúca princíp väzby proteín-farbivo. Anal Biochem. 1976;72:248–254.
35. Lustgarden JA, Wenk RE. Jednoduchá, rýchla, kinetická metóda na meranie sérového kreatinínu. Clin Chem. 1972;8:1419–1422.
36. Lima CSP, Bottini PV, Garlipp CR a kol. Presnosť pomeru albumínu a kreatinínu v moči ako prediktor albuminúrie u dospelých s kosáčikovitou anémiou. J Clin Pathol. 2002;55:973–975.
37. Jefferson SA, Greene MA, Smith RF, a kol. Pomer albumínu a kreatinínu v moči - odpoveď na cvičenie pri cukrovke. Arch Dis Child. 1985;60:305–310.
38. Syme HM, Markwell PJ, Pfeiffer D, a kol. Prežitie mačiek s prirodzene sa vyskytujúcou chronickouzlyhanie obličieksúvisí so závažnosťou proteinúrie. J Vet Intern Med. 2006;20:528–535.
39. Jacob F, Polzin DJ, Osborne CA, a kol. Súvislosť medzi počiatočným systolickým krvným tlakom a rizikom rozvoja uremickej krízy alebo úmrtia u psov s chronickým zlyhaním obličiek. J Am Vet Med Assoc. 2003;222: 322–329.
40. Cowgil L, Kallet A. Systémová hypertenzia. In: Kirk R, ed. Súčasná veterinárna terapia IX. Philadelphia, PA: WB Saunders; 1986: 360–364.
41. Ruilope LM, Rodicio JL. Klinický význam proteinúrie a mikroalbuminúrie. Curr Opin Nephrol Hypertens. 1993;2:962–967.
42. Ritchie CM, Mcknight JA, Hadden DR, a kol. Prevalencia hypertenzie a albuminúrie v diabetologickej ambulancii fakultnej nemocnice. Diabetes Res Clin Pract. 1995;27:69–76.
43. Campos-Pastor MM, Escobar-Jimenez F, Mezquita P, a kol. Faktory spojené s mikroalbuminúriou pri diabetes mellitus 1. typu: prierezová štúdia. Diabetes Res Clin Pract. 2000;48:43–49.
44. Hermans MP, Birchard SM, Colin I, a kol. Dlhodobé zníženie mikroalbuminúrie po 3 rokoch inhibície enzýmu konvertujúceho angiotenzín perindoprilom u hypertenzných diabetikov liečených inzulínom. Am J Med. 1992;92 (Suppl 4B):102S–107S.
45. Mathiesen ER, Hommel E, Giese J, et al. Účinnosť kaptoprilu pri odložení nefropatie u normotenzných inzulín-dependentných diabetických pacientov s mikroalbuminúriou. BMJ. 1993;303:81–87.
46. Marre M, Chatelier G, Leblanc I, a kol. Prevencia diabetickej nefropatie enalaprilom u normotenzných diabetických pacientov s mikroalbuminúriou. BMJ. 1999;302:210–216.
47. Anderson S, Rennke HG, Brenner BM. Terapeutická výhoda inhibítorov konvertujúceho enzýmu pri zastavení progresívnehoobličkové ochoreniespojené so systémovou hypertenziou u potkanov. J Clin Invest. 1986;77:1993–2000.
