Časť 3: Kalpastatín zabraňuje poraneniu podocytov sprostredkovanému angiotenzínom II prostredníctvom udržiavania autofágie

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Pls kliknite sem pre časť 2

cistanchemôže liečiťakútne zlyhanie obličiek

Obrázok 8| Nadmerná expresia kalpastatínu zabraňuje autofágovej downregulácii v podocytoch indukovanej angiotenzínom II (Angel) plus diétou s vysokým obsahom soli (HSD). (a,b) Reprezentatívne imunofluorescenčné snímky expresie P62 (zelená) a podokalyxínu (PODXL; červená) v glomerulách zo zelených fluorescenčných proteínových (GFP)-LC3 a CST'9 (kalpastatínových transgénnych) myší GFP-LC3 po 6 týždňoch od Angel plus HSD. Časti obrázku s prvočíslom označujú väčšie zväčšenie. Jadrá boli zafarbené Hoechst (modrá). Bars{10}} um. (c, d) Kvantifikácia P62 plus plocha na glomerulárnu sekciu. n=9 myší divokého typu (WT) a n=7 myší CST'9 v (c) a n=16 GFP-LC3 myši a n=16 CST'9 GFP-LC3 myší v (d). Hodnoty sú prezentované ako jednotlivé grafy a priemer ± SEM. Mann-Whitney test:**P=0.0033 v (c),**P=0.0011 v (d),(e,f) zástupca

imunofluorescenčné obrázky expresie GFP (zelená) a P62 (červená) v glomeruloch od myší GFP-LC3 a CST'9GFP-LC3 po 6 týždňoch liečby Angel plus HSD. Časti obrázku s prvočíslom označujú väčšie zväčšenie. Šípky označujú GFP plus P62 plus autofagozómy. (g) Kvantifikácia počtu LC3 plus P62 plus bodiek na podocyt. n =11 myší GFP-LC3 a n =16 myší CST19 GFP-LC3. Hodnoty sú prezentované ako jednotlivé grafy a priemer ± SEM. Nepárový t-test s rovnakou SD: P=0.1014. Ak chcete optimalizovať zobrazenie tohto obrázka, pozrite si online verziu tohto článku na adrese www. obličky-medzinárodná org.

potvrdili účinok uhla na poškodenie podocytov a génové zacielenie AT1 špecifické pre podocyty preukázali, že aktivácia receptorov AT1 v glomeruloch pri experimentálnej lupusovej nefritíde je dostatočná na urýchlenie poškodenia obličiek v neprítomnosti hypertenzie. Autofágová dysregulácia sprostredkovaná Calpaínom v našom modeli by mohla byť spojená s priamou signalizáciou AngLI-AT1 na podocytoch alebo by mohla byť dôsledkom hypertenzie. Na túto otázku môžeme poskytnúť skorú odpoveď. V modeli DOCA-soľ sme skutočne našli akumuláciu P62 v podocytoch z hypertenzných myší (doplnkový obrázok S3). To naznačuje, že autofágová blokáda sa vyskytuje v podocytoch v tomto modeli, ktorý by mal byť nezávislý od uhla. Na vymedzenie, či takáto regulácia autofágie podocytov závisí od priamych alebo nepriamych účinkov Angi, by boli potrebné ďalšie štúdie hodnotiace poškodenie podocytov týkajúce sa aktivity calpainu a autofagického toku u myší s deficitom AT1 v podocytoch.

Calpain{0}} a calpain{1}} sú všadeprítomné prozápalové proteázy, ktorých aktivita je riadená kalpastatínom, ich špecifickým inhibítorom. Kalpastatín skutočne selektívne inhibuje cal-bolesti a doteraz žiadne iné proteázy. Aktivácia kalpaínu bola nedávno spojená s poškodením obličiek v niekoľkých patologických súvislostiach." Zistilo sa, že potenciálny kanál C6 prechodného receptora pre transportér vápnikového kanála aktivuje kalpaín-1 v podocytoch prostredníctvom aktivácie Ca²f/kalcineurínu. Obličky pacientov s fokálnou a segmentálnou glomerulosklerózou mal zvýšenú expresiu prechodného receptorového potenciálneho kanála C6, zvýšenú aktivitu calpainu a kalcineurínu a zníženú expresiu cieľového talínu calpainu-1, ktorý je rozhodujúci pre cytoskeletálnu stabilitu podocytov.' Prechodný receptorový potenciálny kanál C6 sa tiež priamo viaže na calpain-1 a calpain-2. Táto interakcia je kľúčová pre reguláciu štiepenia talínu{11}} a kontrolu motility podocytov.2

Transgénne myši nadmerne exprimujúce kalpastatín sú chránené pred vaskulárnou remodeláciou a zápalom závislým od AngII; proti zápalu v modeloch glomerulonefritídy, sepsy alebo odmietnutia aloštepu; a proti zápalu súvisiacemu so starnutím./"Poškodenie podocytov u týchto myší nebolo preskúmané. Peltier a kol. ukázali, že nadmerná expresia calpastatínu zabránila Angl-dependentnému perivaskulárnemu zápalu v obličkách. Ochrana obličiek u CST myší by teda mohla byť sprostredkovaná prinajmenšom čiastočne, protizápalovým mechanizmom. V našom modeli hodnotíme infiltráciu makrofágov a lymfocytov a pri analýze globálnej infiltrácie obličkových leukocytov sme nezistili žiadny významný rozdiel v zápale obličiek medzi CST a kontrolnými myšami (doplnkový obrázok S6).

Cistanchemôcťzmierniť ochorenie obličiek

Calpain sa nedávno podieľal na regulácii autofágie (nedávno preskúmané v Weber et al.) so zaujímavými endo-ateroprotektívnymi vlastnosťami inhibície kalpaínu v diabetickom kontexte prostredníctvom obnovenia autofágie. Tu, my

Obrázok 9] Stres glomerulárneho endoplazmatického retikula (ER) a oxidačný stres. (a) Analýza kvantitatívnej polymerázovej reťazovej reakcie mRNA expresie génov ER stresu, oxidačného stresu a dráhy apoptózy pomocou Qiagen kvantitatívnej polymerázovej reťazovej reakcie v glomeruloch z divokého typu (WT), Nphs2.cre Atg5 a CST'9 myši po 6 týždňoch angiotenzínu II (Angel) plus diéta s vysokým obsahom soli (HSD). Údaje sú prezentované ako teplotná mapa Log2 násobnej zmeny v génovej expresii. n=5 myší na genotyp. (b) Zastúpenie génov významne upregulovalo alebo znížilo u Nphs2.cre Atg5 oproti WT myšiam. (c) Zastúpenie génov významne upregulovaných alebo downregulovaných u CST19 oproti WT myšiam. (b,c) Nepárový t-test s rovnakou SD: P<>

cistanchemôcťliečiť akútne zlyhanie obličiek

uviedli, že inhibícia calpainu prostredníctvom nadmernej expresie calpastatínu (i) zabránila poškodeniu podocytov počas hypertenzie a (ii) obnovila autofágiu v podocytoch, čím sa zdôraznila nová škodlivá úloha aktivácie calpainu počas hypertenzie prostredníctvom inhibície autofágie.

Ukázalo sa, že takmer všetky ATGproteíny sú štiepené kalpaínmi in vitro. Tu sme predpokladali, že udržiavanie autofágie u hypertenzných myší CST'8 bolo sprostredkované inhibíciou kalpaínu. Na podporu našej hypotézy sme ukázali, že podocyty z CSTTg majú zníženú aktivitu calpainu, keď sú napadnuté AngLI

in vitro (obrázok 3c). Zistili sme zvýšenú hladinu proteínu ATG5 v podocytoch z CST'号 mic, čo naznačuje, že nadmerná expresia kalpastatínu v tomto kontexte zabránila štiepeniu ATG5 sprostredkovanému kalpaínom (obrázok 5a). Na rozdiel od toho sa ukázalo, že inhibícia kalpaínu sprostredkovaná kalpastatínom môže byť nezávislá od inhibície ich proteázovej aktivity; nemohli sme teda vylúčiť reguláciu autofágie kalpastatínom nezávisle od enzymatickej aktivity kalpaínu.

V súhrne tieto zistenia odhalili predtým nerozpoznanú úlohu kalpastatínu pri regulácii autofágie podocytov a poskytli vodítko pre skúmanie nových terapeutických stratégií na zvýšenie prežitia podocytov počas hypertenzných nefropatií.

ZVEREJNENIE

Všetci autori nedeklarovali žiadne konkurenčné záujmy.

POĎAKOVANIE

Túto prácu podporil Institut National de la Santé Et de la Recherche Médicale (Inserm) a Université de Paris.IB bola

podporované postgraduálnym štipendiom z Ministerstva školstva národného, ​​de la Recherche et de la Technologie. OL bola financovaná prostredníctvom ceny Európskej nadácie pre štúdium diabetu (EFSD) podporenej programom EFSD/Novo Nordisk pre výskum diabetu v Európe a grantom od Société Francophone du Diabetes (SFD).BR a CH boli financované zo štartovacieho grantu 107037 od Európskej rady pre výskum a Európskej únie (P-LT). YS podporilo absolventské štipendium z Fondation de France.

Ďakujeme Elizabeth Huc, Nicolasovi Perezovi, Corine Suldac a tímu ERI U970 (Université de Paris, PARCC, Inserm, Paríž, Francúzsko) za pomoc pri starostlivosti o zvieratá a manipulácii so zvieratami, Nicolasovi Sorhaindovi za biochemické merania (ICB-IFR2, Laboratoire de Biochimie , Hopital Bichat, Paríž, Francúzsko) a Alain Schmitt a Jean-Marc Masse pre transmisnú elektrónovú mikroskopiu (Institut Cochin, Paríž, Francúzsko). Ďakujeme Morgane Le Gall (Cochin proteomické zariadenie 3P5, Paríž, Francúzsko) za pomoc pri analýze silico. Oceňujeme administratívnu podporu od Véronique Oberweis, Bruno Pillard a Cyrille Mahieux (Université de Paris, PARCC, Inserm, Paríž, Francúzsko).

DOPLNKOVÝ MATERIÁL

Doplnkový súbor (PDF)

Obrázok S1. Primárna kultúra podocytov exprimuje markery podocytov. Western blot analýza expresie podocytových markerov NPHS1 a NPHS2 v primárnej podocytovej kultúre od WT a CST myší. Tubulín (TUBA) slúži ako kontrola zaťaženia. Predstaviteľ n =4 myší na genotyp.

Obrázok S2. Vysoká bazálna hladina autofágie podocytov. (A, B)

Reprezentatívne imunofluorescenčné obrázky expresie GFP (zelená) a NPHS1 (červená) v glomeruloch z myší GFP-LG liečených alebo neliečených CQ (80 mg/kg) 4 hodiny pred usmrtením. Šípky ukazujú GFP plus autofagozómy. (C, D) Reprezentatívne imunofluorescenčné obrázky expresie GFP (zelená) a P62 (červená) v glomeruloch z myší GFP-LC3 liečených alebo neliečených CQ (80 mg/kg) 4 hodiny pred usmrtením. Šípky ukazujú GFP plus P62 plus autofagozómy. (AD)()predstavujú vyššie zväčšenie. Jadrá boli zafarbené s Hoechst （modrá）. Bar=50 μm. N=4 myší na stav (EH) Reprezentatívne imunofluorescenčné snímky expresie GFP (zelená) a P62 (červená) v primárnom podocyte od myší GFP-LC3 liečených (F, H) alebo neliečených (E, G) Bafilomycín A1 (100 nM) počas 4 hodín. N=5 myší na stav.

Obrázok S3.P62 sa akumuluje v podocytoch v DOCA-soľnom modeli hypertenzie. (AC) Reprezentatívne imunofluorescenčné obrázky expresie P62 (zelená) a PODXL (červená) v glomeruloch z myší WT po 2 až 6 týždňoch modelu DOCA-soľ. (')predstavujú väčšie zväčšenie. Jadrá boli zafarbené s Hoechst （modrá）.Bar= 50 μm. (D) Kvantifikácia plochy P62 na plochu podocytov ( percentá ).N=5-6 myší na stav. Jednosmerná analýza rozptylu: čas P= 0.0059, Sidakov test na viacnásobné porovnanie: D42 verzus D14* P=0.0055, D28 verzus D14P=0.8590.

Obrázok S4. Pre vývoj podocytov je nevyhnutná autofágia podocytov. (A)Systolický krvný tlak, (B) pomer albumínu a kreatinínu v moči a (C) hladiny močovinového dusíka v krvi u myší Atgsloxlbx a Nphs2.cre Atg5oxlox. N =5-6 myší na genotyp. Hodnoty sú prezentované ako jednotlivé grafy a priemery ± SEM. Mann-Whitney test: P=0.7273(A),P=0.4286(B) a P=0.6623(C). (DE) Reprezentatívne obrázky Massonových trichrómom zafarbených rezov glomerulov z myší Atg5oxlox a Nphs2.cre Atgsloxlbx. (FG) Reprezentatívne imunofluorescenčné snímky expresie PODXL (zelená) a WT1 (červená) u myší Atg5bxlox a Nphs2.cre Atgsboxlo. Jadrá boli zafarbené pomocou Hoechst (modrá). (DG)Bar=50 um.N=6 myši na genotyp. (HI) Reprezentatívne mikrofotografie rezov glomerulov z transmisnej elektrónovej mikroskopie z myší Atgslox/ox a Nphs2.cre Atgsox/o. Pruh=1 um. N=3 myší na genotyp. Obrázok S5. Nadmerná expresia kalpastatínu neovplyvňuje funkciu obličiek na začiatku liečby. (A)hladiny močovinového dusíka v krvi a (B) plazmatického albumínu u 12-týždňových myší GFP-LC3 a CST'9 GFP-LC3.N=5 GFP-LC3 a N=6CST9 GFP -LC3. Hodnoty sú prezentované ako jednotlivé grafy a priemery ± SEM. Mann-Whitney test: P=0.6623 (A) a P=0.9307(B). (C,D) Reprezentatívne snímky Massonových trichrómom zafarbených rezov glomerulov z myší GFP-LC3 a CST19 GFP-LC3. (EH) Reprezentatívne imunofluorescenčné snímky expresie PODXL(E, F) a NPHS1(G, H) v r. GFP-LC3 a CSr9 GFP-LC3 myši. (CH) Bar =50 um. (UJ) Súvisiaca kvantifikácia PODXL a NPHS1 plochy na glomerulárnu sekciu. N=5 GFP-LG3 a N=6 CST19 GFP-LC3. Hodnoty sú prezentované ako jednotlivé grafy a priemery ± SEM. Mann-Whitney test: P=0.1898(A) a P= 0.8413 (B).

Obrázok S6. Nadmerná expresia kalpastatínu neovplyvňuje globálny zápal obličiek. Reprezentatívna imunohistochémia expresie F4/80(A, B) a CD3 (DE) u myší GFP-LG3 a CS79 GFP-LC3 po 6 týždňoch podávania angiotenzínu I plus HSD.Bar=200 um. (C, F) Súvisiaca kvantifikácia oblasti F4/80 a CD3 na rez obličky. N=7 CST19 GFP-LG3 a N=8 GFP-LC3 myši. Hodnoty sú prezentované ako jednotlivé grafy a priemery ± SEM. Mann-Whitney test: P=0.3969 (C) P=0.3357(F).

Figure S7.Podocyte autophagy deficiency does not induce ER stress or oxidative stress in young adults at baseline.qPCR analysis of the mRNA expression of genes of the ER stress, oxidative stress, and apoptosis pathway by Qiagen qPCR array in glomeruli from WT and Nphs2.cre Atgsoxlomice (A) and WT and CSr9 mice (B).N=4 mice per genotype. For Nox3, Ct >33.

Tabuľka S1. In silico prehliadka miest štiepenia kalpaínom. Miesta štiepenia Calpainu boli predpovedané v proteínoch súvisiacich s podocytmi a autofágiou pomocou GPS-CCD (http://ccdbiocuckoo.org), CaMPDB (http://calpain.org) a DeepCalpain Predict (http://deepcalpain.cancerbio . info/help.php).

Doplnkový súbor (Excel)

Doplnková tabuľka S2. Úplný súbor in silico prehliadok miest štiepenia calpaínom. Miesta štiepenia Calpainu boli predpovedané v proteínoch súvisiacich s podocytmi a autofágiou pomocou GPS-CCD (http://ccd. biocuckoo.org), CaMPDB (http://calpain.org) a DeepCalpain Predict (http://deepcalpain .cancerbio.info/help.php). Predpovedané miesta štiepenia sú obnovené pre každý proteín pre GPS-CCD a DeepCalpain Predict.

Cistanchemôže uľaviťochorenie obličiek

LITERATÚRA

1. Coresh J, Selvin E, Stevens LA a kol. Prevalencia chronického ochorenia obličiek v USA. JAMA.2007;298:2038-2047.

2. Collins A, Vassalotti JA, Wang C, a kol. Na koho by sa malo zamerať CKD 27. Riser BL, Cortes P, Heilig C a kol., Selektívne up-skríning cyklickej naťahovacej sily? Vplyv cukrovky, hypertenzie a kardiovaskulárnych ochorení. Am J Kidney Dis.2009;53:S71-S77.reguluje transformujúce izoformy rastového faktora-beta v kultivovaných potkaních mezangiálnych bunkách. Am J Pathol. 1996;148:{10}}.

3. Chang TL, Liz, Chen SC, et al. Rizikové faktory pre ESRD u jedincov s 28. Kretzler M, Koeppen-Hagemann I, Kriz W. Poškodenie podocytov je kriticky zachovaná odhadovaná GFR s albuminúriou a bez nej: výsledky z včasného hodnotenia obličiek Program (KEEP).Am JKidney Dis.201361:S4-S11.

4. Hsu CY, McCulloch CE, DarbinianJ, et al. Zvýšený krvný tlak a riziko konečného štádia ochorenia obličiek u jedincov bez základného ochorenia obličiek. Arch Intern Med. 2005;165:923-928.

5. Nagase M, Shibata S, Yoshida S, a kol. Poškodenie podocytov je základom glomerulopatie Dahlových potkanov hypertenzných na soľ a je zvrátené blokátorom aldosterónu, Hypertension.2006:47;1084-1093.

6. Garovič VD. Wagner SJ, Turner ST a kol., Vylučovanie podocytov močom ako marker preeklampsie. Am J Obstet Gynecol. 2007;196,320.e321-e327. 7. Craici IM, Wagner SJ, Bailey KR, et al. Podocytúria predchádza proteinúrii

a klinické znaky preeklampsie: longitudinálna prospektívna štúdia. Hypertenzia. 2013; 61:1289-1296.

8. Wang G, Lai FM, Kwan BC a kol. Strata podocytov pri ľudskej hypertenznej nefroskleróze. Am J Hypertens. 2009:22:300-306.

9. Wangi. Kwan BC, Lai FM. et al. Intrarenálna expresia miRNAsínu u pacientov s hypertenznou nefrosklerózou. Som JHypertens. 2010; 23:78-84. 10.Ruggenenti P, Perna A, Gherardi G, et al. Chronická proteinuria

nefropatie: výsledky a odpoveď na liečbu v prospektívnej kohorte 352 pacientov s rôznymi typmi poškodenia obličiek. Am JKidney Dis. 2000;35:1155-1165.

11. Fukuda A. Wickman LT, Venkatareddy MP, a kol. Pretrvávajúca strata podocytov z destabilizovaných glomerulov závislá od angiotenzínu l spôsobuje progresiu konečného štádia ochorenia obličiek. Kidney Int. 2012:81:40-55.

12. Tuncdemir M, Ozturk M. Účinky blokátorov receptora angiotenzínu-II na poškodenie podocytov a glomerulárnu apoptózu na potkanom modeli experimentálnej diabetickej nefropatie vyvolanej streptozotocínom. Acta Histochem. 2011:113:826-832.

13. Nijenhuis T, Sloan AJ, Hoenderop JG a kol. Angiotenzín Ⅱl prispieva k poškodeniu podocytov zvýšením expresie TRPC6 prostredníctvom signálnej dráhy pozitívnej spätnej väzby sprostredkovanej NFAT. J Pathol.2011;179:1719-1732.

14. EUCLID Study Group. Randomizovaná placebom kontrolovaná štúdia lizinoprilu u normotenzných pacientov s inzulín-dependentným diabetom a normoalbuminúriou alebo mikroalbuminúriou. Lancet.1997;349:1787-1792.

15.de Zeeuw D.Remuzi G.Parving HH, et al, Proteinúria, cieľ renoprotekcie u pacientov s diabetickou nefropatiou 2. typu: lekcie z RENTAL. Kidney Int.2004;65:2309-2320.

16. Benigni A, Gagliardini E, Remuzzi G. Zmeny v glomerulárnej permselektivite vyvolané angiotenzínom II naznačujú dysfunkciu podocytov a preskupenie proteínov štrbinovej bránice. Semin Nephrol, 2004; 24:131-140. 17. Wang L Flannery PJ, Spurney RF. Charakterizácia subtypov receptora angiotenzínu II v podocytoch. JLab Clin Med. 2003:142:313-321.

18. Langham RG, Kelly DJ, Cox A a kol. Proteinúria a expresia proteínu diafragmy štrbiny podocytov, nefrínu, pri diabetickej nefropatii: účinky inhibície enzýmu konvertujúceho angiotenzín. Diabetológia. 2002;45:1572-1576.

19. Nakamura T, Ushiyama C, Suzuki S, a kol. Účinky inhibítora enzýmu konvertujúceho angiotenzín, antagonistu receptora angiotenzínu Ⅱ a antagonistu vápnika na močové podocyty u pacientov s nefropatiou IgA. Am J Nephrol. 2000; 20:373-379.

20. Henger A, Huber T, Fischer KG a kol. Angiotenzín II zvyšuje aktivitu cytosolického vápnika v podocytoch potkanov v kultúre. Kidney Int. 199752:687-693.

21. Praga M, Hernandez E, Montoyo C, a kol. Dlhodobé priaznivé účinky inhibície enzýmu konvertujúceho angiotenzín u pacientov s nefrotickou proteinúriou. Am J Kidney Dis. 1992:20:240-248.

22. Nitschke R, Henger A. Ricken S, a kol. Angiotenzín Ⅱl zvyšuje aktivitu vnútrobunkového vápnika v podocytoch intaktného glomerulu. Kidney Int, 200057:41-49.

23. Gloy J, Henger A. Fischer KG a kol. Angiotenzín II moduluje bunkové funkcie podocytov. Kidney Int Suppl. 1998:67S168-S170.

24. Micelil, Burt D., Taraba E, a kol. Stretch znižuje expresiu nefrínu prostredníctvom mechanizmu závislého od angiotenzínu IL-AT(1) v ľudských podocytoch: účinok rosiglitazónu. Am J Physiol Renal Physiol.2010;298:F381-F390. 25. Endlich N, Endlich K. Natiahnutie, napätie a adhézia – adaptačné mechanizmy aktínového cytoskeletu v podocytoch. Eur j Cell Biol. 2006;85:{11}}.

krok vo vývoji glomerulosklerózy u uninefrektomizovaných deoxykortikosterónových hypertenzných potkanov. Archív Vircows. 1994;425:181-193.

29. Jung HS, Chung KW, Won Kim J, et al. Strata autofágie znižuje hmotu a funkciu beta-buniek pankreasu s následnou hyperglykémiou. Cell Metab.2008;8:318-324.

30. Ebato C, Uchida T, Arakawa M, et al. Autofágia je dôležitá pri homeostáze ostrovčekov a kompenzačnom zvýšení hmoty beta-buniek v reakcii na diétu s vysokým obsahom tukov, Cell Metab.2008;8:325-332. 31, L

Lenoir O, Jasiek M, Henrique C, et al. Autofágia endotelových buniek a podocytov synergicky chráni pred glomerulosklerózou vyvolanou cukrovkou. Autofágia. 2015; 11:1130-1145.

32. Hartleben B, Godel M, Meyer-Schwesinger C, et al. Autofágia ovplyvňuje vnímavosť glomerulárnych ochorení a udržiava homeostázu podocytov u starnúcich myší. J Gin Invest. 2010;120:1084-1096.

33. Sato S, Kitamura H, Adachi A, a kol. Dva typy autofágie v podocytoch vo vzorkách renálnej biopsie: ultraštrukturálna štúdia. J Submiarosc Cytol Pathol, 2006;38:167-174,

34. Asanuma K. Tanida 1., Shirato 1. a kol. MAP-LC3, sľubný autofagozomálny marker, sa spracováva počas diferenciácie a obnovy podocytov z nefrózy PAN. FASEBJ.2003;17:1165-1167. 35. Mizushima N, Levine B, Cuervo AM, et al. Autofágia bojuje proti chorobe prostredníctvom bunkového samotrávenia. Nature.2008;451:{10}}.

36. Yang LLP, Fu S, et al. Defektná autofágia pečene pri obezite podporuje ER stres a spôsobuje inzulínovú rezistenciu. Cell Metab.2010;11:467-478. 37.Xie Z, DJ Klionsky. Tvorba autofagozómov: jadrové mechanizmy a adaptácie. Nat Cell Biol.2007;9:1102-1109.

38. Kume S, Thomas MC, Koya D. Snímanie živín, autofágia a diabetická nefropatia. Diabetes. 2012; 61:23-29.

39. Kume S, Uzu T, Maegawa H, et al. Autofágia: nový terapeutický cieľ pre ochorenia obličiek. Clin Exp Nephrol.2012;16:827-832.

40. Huber TBC. Edelstein CL, Hartleben B, et al. Vznikajúca úloha autofágie vo funkcii obličiek, chorobách a starnutí, Autofágia. 2012: 8:1009-1031.

41. Weide T, Huber TB. Dôsledky autofágie pre glomerulárne starnutie a ochorenie. Cell Tissue Res. 2011;343:467-473.

42. Bork T, Liang W, Yamahara K a kol. Podocyty si udržiavajú vysoké bazálne hladiny autofágie nezávisle od signalizácie mTOR.Autofágia.2020;16:1932-1948.

43. Peltier J, Bellocg A, Perez a kol. Aktivácia a sekrécia calpaínu podporujú poškodenie glomerulov pri experimentálnej glomerulonefritíde: dôkazy z myší transgénnych s calpastatínom. JAm Soc Nephrol, 2006:17:3415-3423. 44. Moeller M, Sanden SK, Soofi A, et al. Podocytovo špecifická expresia Cre-rekombinázy u transgénnych myší. Genesis.2003;35:{10}}.

45. Hara T, Nakamura K, Matsui M, et al. Potlačenie bazálnej autofágie v nervových bunkách spôsobuje neurodegeneratívne ochorenie u myší. Nature.2006;441:885-889.

46. ​​Lazareth H, Henrique C, Lenoir O, et al. Tetraspanín CD9 riadi migráciu a proliferáciu parietálnych epiteliálnych buniek a progresiu glomerulárnej choroby. Nat Commun. 2019:10:3303.

47. Bolle G, Flamant M, Schordan S, a kol. Receptor epidermálneho rastového faktora podporuje glomerulárne poškodenie a zlyhanie obličiek pri rýchlo progresívnej crescentickej glomerulonefritíde. Nat Med. 2011; 17:1242-1250.

48. Lenoir O, Milon M, Virsolvy A, a kol. Priame pôsobenie endotelínu-1 na podocyty podporuje diabetickú glomerulosklerózu. J Am Soc Nephrol. 2014; 25:1050-1062.

49. Henrique C, Bollee G, Lenoir O, a kol. Erytroidný faktor 2 súvisiaci s jadrovým faktorom 2- riadi podocytovo špecifickú expresiu receptora Y aktivovaného peroxizómovým proliferátorom, ktorý je nevyhnutný pre rezistenciu na crescentic GN.J Am Soc Nephrol,. 2016:27:172-188.

50. Perez, Dansou B, Herve R. et al. Calpaíny uvoľnené T lymfocytmi štiepia TLR2, aby kontrolovali expresiu IL-17. J Immunol. 2016;196;168-181. 51. Raimbourg Q, Perez J, Vandermeersch S, a kol. Calpain/calpastatin

systém má protichodné úlohy v raste a metastatickom šírení melanómu. PLoS One.2013:8;e60469.

52. Letavernier B, Zafrani L, Nassar D, a kol. Kalpaíny prispievajú k vaskulárnej oprave pri rýchlo progresívnej forme glomerulonefritídy: potenciálna úloha ich externalizácie. Arterioscler Thromb Vasc Biol, 2012:32:335-342.

26. Durvasula RV, Petermann AT, Hiromura K, et al. Aktivácia miestneho

53. Weber J, Pereira Sena P, Singer E, a kol. Zabitie dvoch nahnevaných vtákov s jedným tkanivovým angiotenzínovým systémom v podocytoch mechanickým namáhaním. Kidney Int. 2004;65:30-39.kameň: aktivácia autofágie inhibíciou calpaínov pri neurodegeneratívnych ochoreniach a mimo nich. Biomed Res Int. 2019;2019:4741252.