Výsledky nemeckej štúdie o chronickej obličkovej chorobe (GCKD) na podporu asociácie relatívnej dĺžky telomér s mortalitou vo veľkej skupine pacientov so stredne ťažkým chronickým ochorením obličiek
Mar 12, 2022
Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com
Federica Fazzini1, Claudia Lamina1, Julia Raschenberger & et al.
Kidney International (2020) 98, 488 – 497; https://doi.org/10.1016/j.kint.2020.02.034
Copyright ª 2020, International Society of Nefrology. Vydal Elsevier Inc. Toto je článok s otvoreným prístupom pod licenciou CC BY
Je známe, že dĺžka telomér je nepriamo spojená so starnutím a bola navrhnutá ako marker chorôb súvisiacich so starnutím. Odieranie telomér môže urýchliť oxidačný stres a zápal, ktoré sa bežne vyskytujú u pacientov s chronickým ochorením obličiek. Tu sme skúmali, či je relatívna dĺžka telomér spojená s mortalitou u veľkej skupiny pacientov s chronickým ochorením obličiek v štádiu G3 a A1-3 alebo G1-2 so zjavnou proteinúriou (A3) pri zaradení. Relatívna dĺžka telomér bola kvantifikovaná v periférnej krvi kvantitatívnou metódou PCR u 4 955 pacientov zo štúdie GCKD, prebiehajúcej prospektívnej pozorovacej kohorty. K dispozícii bolo kompletné štvorročné sledovanie od 4 926 pacientov, u ktorých sme zaznamenali 354 úmrtí. Relatívna dĺžka telomér bola silným a nezávislým prediktorom mortality zo všetkých príčin. Každý pokles o 0,1 relatívnej jednotky dĺžky telomér bol vysoko spojený so 14-percentným zvýšeným rizikom úmrtia (pomer rizika 1,14 [95-percentný interval spoľahlivosti 1.{20}},22]) v upravenom modeli pre vek, pohlavie, východiskovú hodnotu eGFR, pomer albumín/kreatinín v moči, diabetes mellitus, prevalentné kardiovaskulárne ochorenie, LDL-cholesterol, HDL-cholesterol, fajčenie, index telesnej hmotnosti, systolický a diastolický krvný tlak, C-reaktívny proteín a sérový albumín. To sa premietlo do o 75 percent vyššieho rizika pre osoby s najnižším výskytom v porovnaní s najvyšším kvartilom relatívnej dĺžky telomér. Spojenie bolo spôsobené najmä 117 kardiovaskulárnymi úmrtiami (1,20 [1.05-1,35]), ako aj 67 úmrtiami v dôsledku infekcií (1,27 [1.07-1,50]). Naše zistenia teda podporujú asociáciu kratšej dĺžky telomér s mortalitou zo všetkých príčin, kardiovaskulárnou mortalitou a smrťou v dôsledku infekcií u pacientov so stredne závažným chronickým ochorením obličiek.
KĽÚČOVÉ SLOVÁ:chronické ochorenie obličiek; infekcie; úmrtnosť; relatívna dĺžka telomér
Chronické ochorenie obličiek(CKD) je komplexné ochorenie a jeho dedičnosť sa odhaduje na 30 percent – 70 percent .9–12 V posledných rokoch celogenómové asociačné štúdie identifikovali mnohé genetické lokusy spojené s funkciou obličiek a CKD.13–17
Indexové jednonukleotidové polymorfizmy na identifikovaných lokusoch však vysvetľujú iba malú časť dedičnosti a môžu chýbať ďalší genetickí prispievatelia. Doteraz len niekoľko malých štúdií skúmalo súvislosť medzi TL a ochorením obličiek. Niektoré štúdie zistili, že krátka TL koreluje s poruchou funkcie obličiek vo všeobecnej populácii,18,19 ako aj u pacientov so srdcovým zlyhaním.20 Nedávno sme opísali výrazne kratšiu relatívnu TL (RTL) u pacientov so stredne závažným CKD, ktorí majú prevládajúce kardiovaskulárne ochorenie ( CVD),21 ako aj súvislosť s trvaním22 a progresiou CKD.23 Pacienti, u ktorých došlo k zlyhaniu obličiek liečení hemodialýzou, sú popisovaní ako pacienti so zníženou TL v porovnaní so zdravými kontrolami24–27 a znížená TL je nepriamo spojená s mortalitou. 28 U pacientov s obličkami, ktorí nie sú závislí na dialýze, sa vykonalo len niekoľko výskumov.21–23,29,30 Pokiaľ je nám známe, súčasná štúdia je prvou prospektívnou štúdiou, ktorá skúma súvislosť medzi RTL leukocytov a príčinami mortality vo veľkom kohorta CKD nezávislá na dialýze.
Prínos Cistanche: zlepšenie funkcie obličiek
VÝSLEDKY
Základné charakteristiky študovanej populácie
RTL bola kvantifikovaná v periférnej krvi metódou kvantitatívnej polymerázovej reťazovej reakcie u 4955 pacientov z NemeckaChronické ochorenie obličiekštúdium. K dispozícii bolo úplné {{0}}ročné sledovanie od 4 926 pacientov. Základné charakteristiky týchto 4926 pacientov podľa kvartilov RTL sú uvedené v tabuľke 1. RTL sa pohybovali od minima {{10}}},40 do maxima 2,31 (doplnkový obrázok S1 ), s priemerom ± SD 0,95 ±0,19 a mediánom 0,92 (1. kvartil ¼ 0,82; 3. kvartil ¼ 1 05). RTL negatívne korelovala s vekom (r ¼ –{{3{32}}}},36, P < 0,001)="" a="" pozitívne="" korelovala="" s="" odhadovanou="" rýchlosťou="" glomerulárnej="" filtrácie="" (egfr;="" r="" ¼="" 0,17,="" p="">< 0,001)="" a="" albumínom="" v="" moči="" –="" pomer="" kreatinínu="" (r="" ¼="" 0,05,="" p="">< 0,001).="" keď="" sme="" upravili="" rtl="" na="" vek="" a="" pohlavie,="" už="" sme="" nepozorovali="" významnú="" koreláciu="" s="" egfr="" a="" pomerom="" albumínu="" a="" kreatinínu="" v="">
Prospektívne sledovanie a mortalita
Celkovo sa vyskytlo 354 úmrtí počas stredného obdobia sledovania 4 roky (1483 dní). Príčiny smrti boli KVO vrátane infarktu myokardu, ischemickej choroby srdca, náhlej srdcovej smrti, kongestívneho zlyhania srdca, pľúcnej embólie, ochorenia srdcových chlopní a ischemickej cievnej mozgovej príhody (117 pacientov, 33,1 percenta), infekcie (67 pacientov, 18,9 percenta), neischemické cerebrovaskulárne príčiny (9 pacientov, 2,5 percenta), ochorenie periférnych ciev (7 pacientov, 2.0 percenta), zlyhanie obličiek (8 pacientov, 2,3 percenta), rôzne iné príčiny (103 pacientov, 29,1 percenta) a neznáme príčiny ( 43 pacientov, 12,1 percenta).
Grafy kumulatívnej incidencie ukazujú, že incidencia úmrtnosti zo všetkých príčin (obrázok 1a) sa zvyšuje s kratšími RTL, s najvyšším výskytom s najnižším kvartilom RTL. V krivkách kumulatívnej incidencie funkčných kriviek kardiovaskulárnej (obrázok 1b) a úmrtnosti na infekcie (obrázok 1c) bol rozdiel medzi kvartilmi menej výrazný, ale poradie kvartilov bolo rovnaké.
Obrázok 1|Kumulatívna incidencia funkcie pre (a) úmrtnosť zo všetkých príčin, (b) úmrtnosť na kardiovaskulárne ochorenia (CVD) a (c) smrť v dôsledku infekcií podľa kvartilov (Q) relatívnej dĺžky telomér (RTL). Q1 je kvartil zahŕňajúci pacientov s najkratšou RTL.
Výsledky Coxových regresných modelov aplikujúcich rôzne úpravy sú uvedené v tabuľke 2 a ukázali významnú súvislosť medzi kratšími RTL a rizikom mortality zo všetkých príčin. Pri priebežnom hodnotení každý pokles o 0,1 RTL jednotiek bol spojený so 16-percentným zvýšeným rizikom úmrtia v modeli upravenom pre vek a pohlavie (pomer rizika [HR], 1,16; 95-percentný interval spoľahlivosti [CI], 1.{50}}8 – 1,24; P ¼ 1,7e-05). Asociácia zostala významná po rozšírenej úprave eGFR, pomeru albumínu a kreatinínu v moči, diabetes mellitus a prevládajúceho kardiovaskulárneho ochorenia (model 2: HR, 1,16; 95-percentný CI, 1,08–1,24), ako aj ďalších rizikových faktorov CVD s nízkou hustotou lipoproteínový cholesterol, lipoproteínový cholesterol s vysokou hustotou, fajčenie, index telesnej hmotnosti, systolický krvný tlak, diastolický krvný tlak, C-reaktívny proteín a sérový albumín na začiatku (model 3: HR, 1,14; 95 percent CI, 1,06–1,22; P ¼ 3,5e-04). Nelineárne P spline analýzy sú uvedené na obrázku 2 a odhalili takmer lineárnu asociáciu RTL s mortalitou zo všetkých príčin. Pacienti s najkratšou RTL (1. kvartil) mali o 75 percent vyššie riziko mortality zo všetkých príčin v porovnaní s pacientmi v kvartile s najdlhšou RTL (doplnková tabuľka S1, plne upravený model: HR, 1,75; 95 percent CI, 1,22–2,50 P=0,0024).
Ďalej sme analyzovali, čo vedie k asociácii RTL s mortalitou zo všetkých príčin (tabuľka 2). Vyhodnotili sme 2 najčastejšie špecifické príčiny smrti a pozorovali sme, že každý pokles o 0,1 RTL jednotiek bol spojený s 20 percentným zvýšeným rizikom úmrtia na KVO v plne upravenom modeli (HR, 1,2 0; 95 percent CI, 1.{26}}5–1,35; P ¼ 0,0052). Znížená RTL bola tiež významne nepriamo spojená so smrťou v dôsledku infekcií. Každý pokles RTL o 0,1 jednotky bol spojený s 1,{18}}krát vyšším rizikom úmrtia v dôsledku infekcií (HR, 1,27; 95-percentný CI, 1,07–1,50; P ¼ 0,0051). Pri pohľade na odhady pre rôzne kvartily v doplnkovej tabuľke S1 sa pre smrť v dôsledku infekcií zistilo, že odhady pre každý z kvartilov 1, 2 a 3 boli podobne zvýšené v porovnaní s odhadmi pre kvartil 4. Analýza s inými príčinami smrti ako aj neznáme príčiny smrti boli zjavne príliš heterogénne a neodhalili žiadnu súvislosť s RTL (údaje nie sú uvedené).
Graf škálovaných Schoenfeldových rezíduí a test na proporcionálnych predpokladoch nebezpečenstva nenaznačili žiadne časovo premenlivé účinky pre RTL na žiadny zo skúmaných výsledkov. Subdistribúcia HR pre kardiovaskulárnu aj infekčnú smrť, uvedená v doplnkovej tabuľke S2, je len mierne oslabená v porovnaní s HR špecifickou pre príčinu.
We also evaluated whether the effect of RTL on the 3 different outcomes differed between men and women and for patients with and without diabetes mellitus, but we did not detect a significant interaction for these variables, or for age (all P values of interaction >0.1 v plne upravených modeloch). Vzhľadom na to, že sme nedávno pozorovali asociáciu v tvare písmena U medzi trvaním CKD a RTL,22 vykonali sme analýzu citlivosti dodatočne upravujúcu dĺžku trvania CKD na začiatku definovanú ako menej ako 6 mesiacov, medzi 6 mesiacmi a 5 rokmi a viac ako 5 rokov. Táto dodatočná úprava viedla len k okrajovým zmenám HR získaných pre všetky 3 koncové body (doplnková tabuľka S3).
Prínos Cistanche: zlepšenie funkcie obličiek
DISKUSIA
Výsledky tejto štúdie ukázali významnú asociáciu RTL s mortalitou zo všetkých príčin v kohorte CKD bez závislosti na dialýze. Kratšia RTL bola spojená s vyšším rizikom úmrtnosti nezávisle od funkcie obličiek a tradičných rizikových faktorov KVO. Táto asociácia bola spôsobená smrťou v dôsledku CVD, ako aj smrťou v dôsledku infekcií.
Súvislosť s úmrtnosťou zo všetkých príčin
predchádzajúce štúdie,5,6,31–35až na pár výnimiek,36,37 preukázali negatívnu súvislosť medzi RTL a mortalitou zo všetkých príčin vo všeobecnej populácii. Doposiaľ najväčšiu štúdiu (n ¼ 64 637) vykonal Rode et al., s upravenou HR pre mortalitu 1,40 pre decil s najkratšou verzus decil s najdlhšou RTL.35V súlade s týmito výsledkami naša štúdia preukázala s každým poklesom o 0.1 RTL jednotky o 14 percent vyššie riziko úmrtnosti zo všetkých príčin, čo znamená o 75 percent vyššie riziko u osôb s najnižšou úrovňou v porovnaní s najvyššími kvartil RTL. Pokiaľ je nám známe, iba Carrero a spol.28skúmali vzťah medzi RTL a rizikom mortality u pacientov s CKD. Študovali 175 pacientov s terminálnym štádiom ochorenia obličiek liečených hemodialýzou, z ktorých 70 zomrelo počas mediánu 31 mesiacov pozorovania. Autori pozorovali, že TL nezávisle predpovedalo prežitie pacienta po dodatočnej úprave veku, pohlavia a zápalu. Súčasná štúdia rozširuje tieto pozorovania na oveľa väčšiu skupinu jedincov s CKD, ktorí nevyžadujú dialýzu.
Obrázok 2|Upravené nelineárne splajny (a 95-percentné pásma spoľahlivosti) pre súvislosť medzi zvyšovaním relatívnej dĺžky telomér (RTL) a pomerom rizika (HR) (a) úmrtnosti zo všetkých príčin, (b) kardiovaskulárnej smrti a (c) smrti v dôsledku infekcií . HR sa uvádza ako logaritmická stupnica na daniach. Šedá čiara: model úpravy 1 (upravený podľa veku a pohlavia). Modrá čiara: model úpravy 3 (upravený podľa veku, pohlavia, odhadovaný [pokračovanie]
Súvislosť s úmrtnosťou na KVO
Žiadne štúdie doteraz neskúmali súvislosť RTL s úmrtnosťou na CVD u pacientov s CKD, hoci je to hlavná príčina smrti u týchto pacientov. V závislosti od skúmanej etnickej príslušnosti a modelov úpravy údajov niektoré, ale nie všetky štúdie vo všeobecnej populácii uvádzali súvislosť medzi nízkymi RTL a výsledkami CVD.33,38–41Silná podpora pre kauzálnu súvislosť prišla z Mendelovej randomizačnej štúdie, v ktorej sa zistilo, že genetické varianty spojené s kratšími RTL sú spojené s ischemickou chorobou srdca.40V tejto štúdii sme identifikovali významnú súvislosť RTL s kardiovaskulárnymi úmrtiami, s 20 percentami vyšším rizikom pri každom znížení RTL o 0,1 jednotky, alebo o 75 percent vyšším rizikom u tých pacientov v kvartile s najkratšou TL v porovnaní s kvartilom s najdlhšou TL. Toto zistenie je v súlade s našou predchádzajúcou správou o súvislosti s prevládajúcimi kardiovaskulárnymi príhodami v tejto populácii pacientov: každé zníženie RTL o 0,1 jednotky bolo významne spojené s o 6 percent vyššou pravdepodobnosťou prevládajúceho KVO v modeli upravenom podľa veku, pohlavia, aktuálneho stavu. fajčenie, hypertenzia, cukrovka, cholesterol s nízkou hustotou lipoproteínov, s vysokou hustotou
lipoproteínový cholesterol, C-reaktívny proteín, eGFR a index telesnej hmotnosti.21Prospektívne sledovanie u týchto pacientov v tomto výskume odhalilo, že najmä najnižší kvartil RTL bol spojený s výrazne zvýšeným rizikom, zatiaľ čo ostatné 3 kvartily vykazovali veľmi podobné odhady (obrázok 1b).
Súvislosť so smrťou v dôsledku infekcií
Hoci experimentálne dôkazy podporujú úlohu starnutia buniek a krátkej TL pri zhoršenej imunitnej odpovedi, epidemiologické štúdie sú zriedkavé, najmä u pacientov s CKD. Helby a kol. vykonali najväčšiu (n ¼ 75 309) prospektívnu populačnú štúdiu skúmajúcu RTL a riziko hospitalizácie pre infekčné ochorenie a riziko úmrtia súvisiaceho s infekciou. Počas 7 rokov sledovania pozorovali vyššie riziko akýchkoľvek infekcií v kvartile s najkratšou v porovnaní s kvartilom s najdlhšou RTL.42 Predchádzajúce štúdie s menšou veľkosťou vzoriek uvádzali protichodné výsledky.32,43,44Naše zistenia u pacientov s CKD po prvýkrát opisujú súvislosť medzi krátkym RTL a vyšším rizikom úmrtia v dôsledku infekcií v tejto vysoko rizikovej populácii.
Prínos Cistanche: zlepšenie funkcie obličiek
Potenciálny mechanizmus
Biologický mechanizmus, ktorý je základom vzťahu medzi RTL a mortalitou, je stále nejasný. Asociácia identifikovaná našou štúdiou neobjasňuje, či skrátenie RTL je v príčinnej súvislosti s kardiovaskulárnym ochorením a infekciami. Avšak celogenómová asociačná štúdia, po ktorej nasledovala analýza skóre genetického rizika kombinujúca varianty olova na 7 genetických lokusoch, ukázala asociáciu alel spojených s kratšími RTL so zvýšeným rizikom ochorenia koronárnych artérií. Toto zistenie poskytuje možnú podporu pre potenciálnu kauzálnu úlohu RTL pri CVD.45,46Okrem toho by starnutie buniek vyvolané opotrebovaním telomér mohlo byť spúšťačom aterosklerózy, ako aj artériosklerózy. Akumulácia starnúcich buniek v cieve prispieva k tvorbe aterosklerotického plátu a kalcifikácii média, čo vedie k zvýšenej tuhosti tepien ako dominantnému znaku uremického arteriálneho ochorenia.47Väčšina štúdií merala RTL v DNA z periférnych leukocytov. Avšak medzi leukocytmi a tkanivom TL aortálnej steny bola preukázaná úzka korelácia.48Preto môže starnutie buniek ovplyvniť endotelové bunky, čo vedie k dysfunkcii cievnej steny a podporuje adhéziu imunitných buniek, čo je primárna udalosť pri ateroskleróze. Okrem toho krátke teloméry aktivujú p53 a autofágiu v srdcových progenitorových bunkách, čím destabilizujú rovnováhu pokoja a proliferácie smerom k diferenciácii a starnutiu, čo vedie k vyčerpaniu srdcových progenitorových buniek.49Ukázalo sa, že telomérová dysfunkcia vyvoláva hlbokú p53-závislú represiu hlavných regulátorov mitochondriálnej biogenézy a funkcie, čo vedie k bioenergetickému kompromisu v dôsledku narušenej oxidatívnej fosforylácie a tvorby adenozíntrifosfátu.50,51
Existuje tiež niekoľko väzieb medzi RTL a infekciami. Strata telomér bola pozorovaná počas diferenciácie T buniek,52pri chronických vírusových infekciách,53a s vekom.54Okrem toho bol krátky leukocytový TL hlásený ako rizikový faktor pri rôznych ochoreniach súvisiacich s imunitou55a cukrovky.56Leukocytový kratší TL spôsobuje starnutie buniek, po ktorom nasleduje zníženie proliferačnej kapacity imunitných buniek. TL sa môže podieľať aj na znížení imunitnej funkcie súvisiacej s vekom v súvislosti s nedostatočnou odpoveďou na vakcíny a akútnymi infekciami.57–59Potenciálnu úlohu TL pri infekciách podporuje aj nedávna celogenómová asociačná štúdia v čínskej populácii. Dorjee a kolegovia pozorovali súvislosť medzi alelou redukujúcou TL a smrťou v dôsledku respiračnej infekcie.60Odieranie RTL môže byť silne spustené prítomnosťou zvýšeného oxidačného stresu, čo je bežný stav pri CKD.61 Niekoľko štúdií in vitro a in vivo ukázalo, že oxidačný stres urýchľuje opotrebovanie telomér.62,63Teloméry s vysokým obsahom guanínu sú skutočne veľmi náchylné na oxidačné poškodenie,64a zlomy jednovláknovej DNA vyvolané oxidačným stresom by mohli byť dôležitým faktorom pre skrátenie telomér počas replikácie DNA.65
Prínos Cistanche: zlepšenie funkcie obličiek
Silné stránky a obmedzenia
Medzi silné stránky tohto vyšetrovania patrí veľká veľkosť vzorky dobre definovanej populácie s mediánom sledovania 4 roky takmer bez straty sledovania, homogenita študovanej populácie a centralizované hodnotenie TL a výsledkov. Obzvlášť dôležité je meranie RTL, pretože štandardizácia medzi laboratóriami nie je jednoduchá, a preto by sa proces mal vykonávať v rovnakom laboratóriu za presne rovnakých podmienok, pokiaľ ide o protokol, referenčný gén, prístroj, personál66 a DNA. extrakčný postup.67
Táto štúdia má určité obmedzenia. Najprv sa meral RTL v periférnych leukocytoch. Je známe, že rýchlosť progresie do starnutia sa medzi podskupinami lymfocytov líši. 59Bohužiaľ, v nemčine neboli k dispozícii žiadne údaje o zložení typov krvných buniekChronické ochorenie obličieka preto nebolo možné tento aspekt preskúmať. Poznanie RTL z rôznych typov obličkových buniek by bolo zaujímavé, ale nie je možné ho získať vo veľkej epidemiologickej štúdii, pretože by to vyžadovalo tkanivový materiál z biopsií. Druhé obmedzenie zahŕňa observačný dizajn štúdie, ktorý neumožňuje objasnenie kauzality alebo biologického mechanizmu. Po tretie, štúdia zahŕňala hlavne pacientov s CKD v štádiu G3 alebo A3 a zistenia nemusia byť zovšeobecniteľné na iné štádiá CKD. Po štvrté, spojenie s konkrétnymi príčinami smrti mohlo byť obmedzené štatistickou silou, ale stále existovalo pre 2 špecifické hlavné príčiny smrti. Nakoniec, aj keď boli naše analýzy upravené pre tradičné kardiovaskulárne rizikové faktory, ako aj parametre funkcie obličiek, nemôžeme vylúčiť možnosť zvyškového zmätku neznámym alebo nemeraným
premenné. Bolo však veľmi zaujímavé vidieť, že odhady RTL upravené podľa veku a pohlavia pre rôzne výsledky boli veľmi stabilné s ďalšou úpravou pre ostatné premenné, čo naznačuje, že RTL je relatívne nezávislá od iných premenných, keď sa údaje upravia podľa veku a pohlavia.
Závery
Krátke relatívne TL kvantifikované z leukocytov periférnej krvi boli nezávisle spojené s mortalitou zo všetkých príčin počas 4 rokov sledovania u pacientov so stredne ťažkou CKD. Táto asociácia bola spôsobená smrťou v dôsledku CVD, ako aj smrťou v dôsledku infekcií.
Prínos Cistanche: zlepšenie funkcie obličiek
METÓDY
Študijná populácia
NemecChronické ochorenie obličiek study is an ongoing prospective multicenter observational cohort. A detailed description of the study has been published previously.68 Briefly, 5217 patients under regular care by nephrologists were enrolled. Inclusion criteria were moderately reduced kidney function defined as eGFR of 30–60 ml/min per 1.73 m2 (stage G3, A1–A3) or an eGFR >60 ml/min na 1,73 m2 v prítomnosti zjavnej proteinúrie (štádium G1–G2, A3). Kritériami vylúčenia boli nekaukazská etnická príslušnosť, transplantácia solídneho orgánu alebo kostnej drene, aktívna malignita v priebehu 24 mesiacov pred skríningom, zlyhanie srdca v štádiu IV podľa New York Heart Association a zákonná účasť alebo neschopnosť poskytnúť súhlas. Prezentované laboratórne parametre boli všetky merané z odobratých biologických vzoriek v centrálnom laboratóriu, ako bolo opísané vyššie.68 Informácie o sociodemografických faktoroch, zdravotnej a rodinnej anamnéze, liekoch a kvalite života súvisiacej so zdravím získal vyškolený personál prostredníctvom štandardizovaných dotazníkov. Prevalentné kardiovaskulárne ochorenie na začiatku bolo definované ako anamnéza nefatálneho infarktu myokardu, bypassu koronárnej artérie, perkutánnej transluminálnej koronárnej angioplastiky, cievnej mozgovej príhody a intervencií na karotických artériách (karotidová endarterektómia a/alebo karotická balóniková angioplastika alebo implantácia stentu).
Všetci účastníci poskytli písomný informovaný súhlas a štúdia bola schválená etickými komisiami všetkých zúčastnených inštitúcií a zaregistrovaná v národnom registri pre klinické štúdie (DRKS 00003971). Všetky metódy boli vykonané v súlade so schválenými usmerneniami a Helsinskou deklaráciou. Údaje sa zhromažďujú a spravujú pomocou Askimed (https://www.askimed.com) ako cloudovej webovej platformy na zhromažďovanie a správu formulárov prípadových správ a laboratórnych údajov.
Klinické koncové body počas prospektívneho sledovania
Ako bolo nedávno opísané, 69 pacientov každoročne sleduje vyškolený personál, ktorý strieda osobné návštevy s návštevami po telefóne. Počas týchto návštev sa v rámci štruktúrovaného rozhovoru aktualizujú údaje o hospitalizáciách, výsledných udalostiach a anamnéze. Všetky správy o prepustení z nemocnice sa zhromažďujú od ošetrujúcich lekárov a/alebo nemocníc. Koncové body sú z týchto správ priebežne abstrahované vyškoleným a kontrolovaným výborom pre ukazovatele zloženým z 3 nezávislých lekárov podľa vopred špecifikovaného katalógu cieľov. Informácie o príčine úmrtia sa preberajú z týchto správ, ako aj z úmrtných listov zozbieraných z matričných úradov vždy, keď je študijný personál informovaný o úmrtí účastníka štúdie.
Aktuálna analýza zahŕňa všetky koncové body, ktoré sa vyskytli do 4-ročného sledovania. Ak pacient vynechal 4-ročnú následnú návštevu, zahrnuli sme všetky koncové body do 4,5 roka po príslušnej základnej návšteve. Preto bol čas cenzúry buď 4-ročný dátum sledovania alebo 4,5 roka po základnej hodnote. Primárnym výsledkom bola úmrtnosť zo všetkých príčin. Na vyhodnotenie toho, či identifikované asociácie možno pripísať konkrétnej príčine smrti, sa smrť z kardiovaskulárnych príčin a infekčné choroby považovali za sekundárne výsledky. Skupina úmrtí na KVO zahŕňala infarkt myokardu, koronárne ochorenie srdca, náhlu srdcovú smrť, kongestívne srdcové zlyhanie, pľúcnu embóliu, ochorenie srdcových chlopní a ischemickú cievnu mozgovú príhodu. Boli zaznamenané aj iné príčiny smrti, ale tieto podskupiny neboli dostatočne veľké na vykonanie ďalších analýz špecifických pre príčinu.
Meranie RTL
Genómová DNA bola extrahovaná z celej krvi v centrálnom laboratóriu pomocou Chemagic Magnetic Separation Module I (PerkinElmer chromagen Technologie GmbH, Baesweiler, Nemecko). Súčasná analýza bola založená na 4 926 pacientoch, u ktorých boli k dispozícii merania RTL vo východiskových krvných vzorkách a údaje o mortalite. RTL sa merali v štyroch vyhotoveniach pomocou kvantitatívneho testu založeného na polymerázovej reťazovej reakcii vyvinutého spoločnosťou Cawthon70 a upraveného tak, ako je opísané vyššie. 71 vzoriek DNA sa analyzovalo v 15-ml reakciách obsahujúcich 1x hlavný mix Quantifast TM SYBR Green PCR (Qiagen, Hilden, Nemecko), 10 ng DNA, 1 mM telomérového priméru alebo 250 nm priméru prevádzkového génu 36B4. Stanovili sme relatívny pomer počtu kópií telomérových opakovaní (T) k počtu kópií génu s jednou kópiou (gén 36B4, kódujúci ribozomálny fosfoproteín PO, lokalizovaný na chromozóme 12; S). Pomery T/S sú úmerné jednotlivým RTL. Automatizácia tohto vysoko výkonného postupu viedla k veľmi dobrým opatreniam na kontrolu kvality s nízkym medzitestovým variačným koeficientom pomerov T/S. Na kontrolu účinnosti testu počas celej štúdie sa použila komerčne dostupná DNA zahrnutá vo všetkých doštičkách pre kvantitatívnu polymerázovú reťazovú reakciu. Intertestový koeficient variácie pomerov T/S tejto vzorky analyzovanej v 112 nezávislých experimentoch bol 9,6 percenta pred normalizáciou a znížil sa na 4,0 percenta po normalizácii (doplnkový obrázok S2).
Štatistická analýza
Porovnali sme základné charakteristiky účastníkov (tabuľka 1) pomocou Kruskal-Wallisovho testu pre spojité premenné a chí-kvadrát testov pre kategorické premenné. Na odhad kumulatívnej incidencie rôznych príčin smrti, ktoré zodpovedajú konkurenčnému riziku, sa použili krivky kumulatívnej incidencie. ii) smrť v dôsledku KVO a (iii) smrť v dôsledku infekcií. Pre oba koncové body špecifické pre príčinu (ii a iii) boli pacienti cenzurovaní, ak smrť nastala z akejkoľvek inej príčiny. Okrem toho sa skúmali súvislosti s týmito koncovými bodmi špecifickými pre danú príčinu pomocou regresie prežitia s konkurenčným rizikom, pričom sa všetky úmrtia z iných príčin považovali za konkurenčné udalosti. Preto sa HR špecifická pre danú príčinu aj HR pododdielu uvádzajú ako smrť v dôsledku KVO alebo infekcií. Coxove modely proporcionálnych rizík boli prispôsobené pomocou 3 rôznych úrovní nastavenia: model 1 upravený podľa veku a pohlavia; model 2 dodatočne upravený na základnú hodnotu eGFR, pomer albumínu a kreatinínu v moči, prevládajúce CVD a diabetes; model 3 ďalej upravený pre tradičné rizikové faktory CVD, ako je cholesterol lipoproteínov s nízkou hustotou, cholesterol lipoproteínov s vysokou hustotou, index telesnej hmotnosti, fajčenie, systolický a diastolický krvný tlak, C-reaktívny proteín a albumín. Výber premenných upravených pre rôzne modely bol založený na rozdieloch v klinických charakteristikách medzi kvartilmi RTL uvedenými v tabuľke 1. V regresných modeloch sa RTL analyzovala nepretržite a ako kategorický prediktor (v kvartiloch RTL). Vzhľadom na to, že počiatočné výsledky naznačovali vyššie riziko, najmä pre nízke hodnoty RTL, (príčina-špecifická) HR sa uvádza aj pre kvartily 1, 2 a 3 v porovnaní s kvartilom 4 ako referencia (doplnková tabuľka S1). Ďalšia následná analýza bola založená na vizuálnej kontrole P-spline, aby sa odvodil tvar vzťahu medzi RTL a rizikom úmrtnosti. Na posúdenie asociácie medzi premennými štúdie sme použili Spearmanov koeficient poradovej korelácie. Všetky štatistické analýzy sa uskutočnili s použitím R 3.3.2 (https://www.r-project.org); P-hodnoty<0.05 were="" considered="" statistically="">
LITERATÚRA
1. Moyzis RK, Buckingham JM, Cram LS, a kol. Vysoko konzervovaná opakujúca sa sekvencia DNA, (TTAGGG)(n), prítomná na teloméroch ľudských chromozómov. Proc Natl Acad Sci USA 1988;85:6622–6626.
2. Baird DM. Dynamika telomér v ľudských bunkách. Biochimie. 2008;90:116–121.
3. von Zglinicki T, Martin-Ruiz CM. Teloméry ako biomarkery pre starnutie a choroby súvisiace s vekom. Curr Mol Med. 2005;5:197–203.
4. Forero DA, González-Giraldo Y, López-Quintero C, a kol. Dĺžka telomér pri Parkinsonovej chorobe: metaanalýza. Exp. Gerontol. 2016;75:53–55.
5. Mons U, Müezzinler A, Schöttker B, a kol. Dĺžka telomér leukocytov a všetky príčiny, kardiovaskulárne ochorenia a úmrtnosť na rakovinu: výsledky z metaanalýzy údajov jednotlivých účastníkov z 2 veľkých prospektívnych kohortových štúdií. Am J Epidemiol. 2017;185:1317–1326.
6. Wang Q, Zhan Y, Pedersen NL a kol. Dĺžka telomér a mortalita zo všetkých príčin: metaanalýza. Ageing Res Rev. 2018;48:11–20.
7. Wills LP, Schnellmann RG. Teloméry a telomeráza v zdraví obličiek. J Am Soc Nephrol. 2011;22:39–41.
8. Kordinas V, Tsirpanlis G, Nicolaou C, a kol. Existuje súvislosť medzi zápalom, aktivitou telomerázy a stavom transkripcie telomerázovej reverznej transkriptázy pri zlyhaní obličiek? Cell Mol Biol Lett. 2015;20:222–236.
9. Cañadas-Garre M, Anderson K, Cappa R a kol. Genetická náchylnosť na chronické ochorenie obličiek – niekoľko ďalších kúskov do hádanky dedičnosti. Predná Genet. 2019;10:453.
10. Satko SG, Freedman BI. Rodinné zoskupenie obličkových ochorení a súvisiace fenotypy. Med Clin North Am. 2005;89:447–456.
11. Regele F, Jelencsics K, Shiffman D, a kol. Štúdie v celom genóme na identifikáciu rizikových faktorov ochorenia obličiek so zameraním na pacientov s cukrovkou. Transplantácia nefrolového číselníka. 2015;30:iv26–iv34.
12. Wuttke M, Köttgen A. Prehľady ochorení obličiek z celogenómových asociačných štúdií. Nat Rev Nephrol. 2016;12:549–562.
13. Böger CA, Gorski M, Li M, a kol. Asociácia lokusov súvisiacich s eGFR identifikovaných pomocou GWAS s incidentom CKD a ESRD. PLoS Genet. 2011;7: e1002292.
14. Chambers JC, Zhang W, Lord GM a kol. Genetické lokusy ovplyvňujúce funkciu obličiek a chronické ochorenie obličiek. Nat Genet. 2010;42:373–375.
15. Köttgen A, Pattaro C, Böger CA, a kol. Nové lokusy spojené s funkciou obličiek a chronickým ochorením obličiek. Nat Genet. 2010;42:376–384.
16. Pattaro C, Teumer A, Gorski M, a kol. Genetické asociácie na 53 lokusoch zdôrazňujú typy buniek a biologické dráhy relevantné pre funkciu obličiek. Nat Commun. 2016;7:10023.
17. Wuttke M, Li Y, Li M a kol. Katalóg genetických lokusov spojených s funkciou obličiek z analýz milióna jedincov. Nat Genet. 2019;51:957–972.
18. Bansal N, Whooley MA, Regan M, a kol. Spojenie medzi funkciou obličiek a dĺžkou telomér: štúdium srdca a duše. Am J Nephrol. 2012;36:405–411.
19. Eguchi K, Honig LS, Lee JH a kol. Krátka dĺžka telomér je spojená s poruchou funkcie obličiek u japonských subjektov s kardiovaskulárnym rizikom. PLoS One. 2017;12:e0176138.
20. Wong LSM, Van Der Harst P, De Boer RA a kol. Renálna dysfunkcia je spojená s kratšou dĺžkou telomér pri srdcovom zlyhaní. Clin Res Cardiol. 2009;98:629–634.
21. Raschenberger J, Kollerits B, Titze S, et al. Asociácia relatívnej dĺžky telomér s kardiovaskulárnym ochorením vo veľkej kohorte chronického ochorenia obličiek: štúdia GCKD. Ateroskleróza. 2015;242:529–534.
22. Raschenberger J, Kollerits B, Titze S, a kol. Majú teloméry vyššiu plasticitu, ako sa predpokladalo? Výsledky nemeckej štúdie chronickej choroby obličiek (GCKD) ako vysoko riziková populácia. Exp. Gerontol. 2015;72: 162–166.
23. Raschenberger J, Kollerits B, Ritchie J, et al. Asociácia relatívnej dĺžky telomér s progresiou chronického ochorenia obličiek v dvoch kohortách: modifikácia účinku fajčením a cukrovkou. Sci Rep. 2015;5:1–8.
24. Betjes MGH, Langerak AW, Van Der Spek A, a kol. Predčasné starnutie cirkulujúcich T buniek u pacientov v konečnom štádiu ochorenia obličiek. Kidney Int. 2011;80:208–217.
25. Hirashio S, Nakashima A, Doi S, a kol. Dĺžka telomerického G-tailu a hospitalizácia pre kardiovaskulárne príhody u hemodialyzovaných pacientov. Clin J Am Soc Nephrol. 2014;9:2117–2122.
26. Ramírez R, Carracedo J, Soriano S, a kol. Stresom vyvolané predčasné starnutie v mononukleárnych bunkách od pacientov na dlhodobej hemodialýze. Am J Kidney Dis. 2005;45:353–359.
27. Tsirpanlis G, Chatzipanagiotou S, Boufidou F, a kol. Aktivita telomerázy je znížená v mononukleárnych bunkách periférnej krvi hemodialyzovaných pacientov. Am J Nephrol. 2006;26:91–96.
28. Carrero JJ, Stenvinkel P, Fellström B, a kol. Odieranie telomér je spojené so zápalom, nízkymi hladinami fetuínu-A a vysokou mortalitou u prevažujúcich hemodialyzovaných pacientov. J Intern Med. 2008;263:302–312.
29. Mazidi M, Rezaie P, Covic A, a kol. Opotrebenie telomér, funkcia obličiek a prevládajúce chronické ochorenie obličiek v Spojených štátoch. Oncotarget. 2017;8:80175–80181.
30. Kidir V, Aynali A, Altuntas A, a kol. Aktivita telomerázy u pacientov s chronickým ochorením obličiek v štádiu 2–5D. Nefrologia. 2017;37:592–597.
31. Batsis JA, Mackenzie TA, Vasquez E, a kol. Asociácia adipozity, dĺžky telomér a úmrtnosti: údaje z NHANES 1999-2002. Int J Obes. 2018;42:198–204.
32. Fitzpatrick AL, Kronmal RA, Kimura M, a kol. Dĺžka a úmrtnosť telomér leukocytov v štúdii kardiovaskulárneho zdravia. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2011;66A:421–429.
33. Needham BL, Rehkopf D. Dĺžka a úmrtnosť telomér leukocytov v National Health and Nutrition Examination Survey, 1999–2002. Epidemiológia. 2015;26:528–535.
34. Pusceddu I, Kleber M, Delgado G, a kol. Dĺžka telomér a úmrtnosť v štúdii rizika a kardiovaskulárneho zdravia v Ludwigshafene. PLoS One. 2018;13:e0198373.
35. Rode L, Nordestgaard BG, Bojesen SE. Dĺžka telomér leukocytov v periférnej krvi a úmrtnosť medzi 64 637 jednotlivcami z bežnej populácie. J Natl Cancer Inst. 2015;107:djv074.
36. Loprinzi PD, Loenneke JP. Dĺžka telomér leukocytov a úmrtnosť medzi dospelými v USA: modifikácia účinku správaním fyzickej aktivity. J Sports Sci. 2018;36:213–219.
37. Gao X, Zhang Y, Mons U a kol. Dĺžka telomér leukocytov a skóre rizika úmrtnosti založené na epigenetike: asociácie s úmrtnosťou zo všetkých príčin u starších dospelých. Epigenetika. 2018;13:846–857.
38. D'Mello MJJ, Ross SA, Briel M, a kol. Asociácia medzi skrátenou dĺžkou telomér leukocytov a kardiometabolickými výsledkami: systematický prehľad a metaanalýza. Circ Cardiovasc Genet. 2015;8:82–90.
39. Haycock PC, Heydon EE, Kaptoge S, a kol. Dĺžka telomér leukocytov a riziko kardiovaskulárnych ochorení: systematický prehľad a metaanalýza. BMJ. 2014;349:g4227.
40. Madrid AS, Rode L, Nordestgaard BG a kol. Krátka dĺžka telomér a
ischemická choroba srdca: observačné a genetické štúdie u 290 022 jedincov. Clin Chem. 2016;62:1140–1149.
41. Mwasongwe S, Gao Y, Griswold M, a kol. Dĺžka telomér leukocytov a kardiovaskulárne ochorenie u Afroameričanov: The Jackson Heart Study. Ateroskleróza. 2017;266:41–47.
42. Helby J, Nordestgaard BG, Benfield T a kol. Kratšia dĺžka telomér leukocytov je spojená s vyšším rizikom infekcií: prospektívna štúdia 75 309 jedincov z bežnej populácie. Hematologická.2017;102:1457–1465.
43. Cawthon RM, Smith KR, O'Brien E, a kol. Súvislosť medzi dĺžkou telomér v krvi a úmrtnosťou u ľudí vo veku 60 rokov alebo starších. Lancet. 2003;361:393–395.
44. Njajou OT, Hsueh WC, Blackburn EH, a kol. Asociácia medzi dĺžkou telomér, špecifickými príčinami smrti a rokmi zdravého života v oblasti zdravia, starnutia a zloženia tela: populačná kohortová štúdia. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2009;64:860–864.
45. Codd V, Nelson CP, Albrecht E, a kol. Identifikácia siedmich lokusov ovplyvňujúcich strednú dĺžku telomér a ich asociácia s ochorením. Nat Genet. 2013;45:422–427.
46. Zhan Y, Hägg S. Dĺžka telomér a riziko kardiovaskulárnych ochorení. Curr Opin Cardiol. 2019;34:270–274.
47. Stenvinkel P, Luttropp K, McGuinness D, a kol. Expresia CDKN2A/p16INK4a je spojená s vaskulárnou progériou pri chronickom ochorení obličiek.
Starnutie (Albany. NY). 2017;9:494–507.
48. Wilson WRW, Herbert KE, Mistry Y, a kol. Obsah telomérovej DNA krvných leukocytov predpovedá obsah vaskulárnej telomérovej DNA u ľudí s vaskulárnym ochorením a bez neho. Eur Heart J. 2008;29:2689–2694.
49. Matsumoto C, Jiang Y, Emathinger J, a kol. Krátke teloméry indukujú p53 a autofágiu a modulujú zmeny súvisiace s vekom v osude srdcových progenitorových buniek. Kmeňové bunky. 2018;36:868–880.
50. Lai L, Leone TC, Zechner C, a kol. Transkripčné koaktivátory PGC-la a PGC-lb riadia prekrývajúce sa programy potrebné na perinatálne dozrievanie srdca. Genes Dev. 2008;22:1948–1961.
51. Moslehi J, Depinho RA, Sahin E. Teloméry a mitochondrie v starnúcom srdci. Circ Res. 2012;110:1226–1237.
52. Rufer N, Brümmendorf TH, Kolvraa S, a kol. Merania fluorescencie telomér v podskupinách granulocytov a T lymfocytov poukazujú na vysokú hodnotu.
