Štúdie o chemických zložkách Cistanche Tubulosa

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

Úvod

Cistanche tubulosa je druh parazitickej rastliny parazitujúcej na koreňoch rozvetvenej Tamarix vamosissma alebo iných púštnych rastlín. Je distribuovaný v južnom regióne Xinjiang v Číne. Jeho liečivou súčasťou je suchá dužinatá stonka. Jeho liečivými materiálmi sú Cistanche, Grand-Rue alebo Inch-Rue. V tradičnej čínskej medicíne sa bežne používa na tonizáciu obličiek a na posilnenie yang. Moderné farmakologické štúdie sa domnievajú, že má funkcie proti starnutiu, ako je predĺženie života, preto sa nazýva aj „púštny ženšen“. Existuje len málo štúdií o jeho chemických zložkách a niektoré fenyletanoidové glykozidy boli extrahované Kobayashi Hiromi et al. Z extraktu sa izolovalo šesť monomérnych zlúčenín I, IL, III, IV, V a VI, ktoré sa chemickými a spektrálnymi metódami identifikovali ako D-manitol, - sitosterol, daukosterol, 8-epibrucín, echinakozid a cistanosid A. Posledné dva glykozidy sú aktívne zložky na posilnenie Yang a proti starnutiu. Zlúčeniny I, II, III, IV a VI zatiaľ neboli v Cistanche deserticola hlásené.

Experimentálne

1. materiály a nástroje

Experimentálna Cistanche deserticola bola zakúpená od farmaceutickej spoločnosti Hotan, Xinjiang. Makroporézna živica bola typu AB-B, vyrábaná Nankai University. Dextran gel LH-20 bol produktom farmaceutickej továrne Shanghai Long March. Na meranie teploty topenia sa použil mikro prístroj na meranie teploty topenia typu X4 a teplomer nebol kalibrovaný. Použitý infračervený prístroj bol Shimadzu-440 a modely prístrojov H-NMR a C-NMR boli Varian FT-80A.

2. extrakcia a separácia

Vezmite 8 kg Cistanche deserticola, refluxujte a extrahujte 95 percentným EtOH, umiestnite extrakt cez noc, vyzrážajte zlúčeninu I, koncentrujte roztok pri zníženom tlaku do extrakčnej situácie, pridajte vhodné množstvo vody na suspenziu a extrahujte postupne EtOAc a n -BuOH, čím sa získajú 3 diely: EtOAc, n-BuOH a vodné vrstvy. Zlúčeniny II a III sa získali stĺpcovou chromatografiou na silikagéli a eluovali sa CHCl3MeOH (100:1 —> 10:1); Vodná vrstva sa eluovala vodou a 50 % EtOH cez kolónu s aktívnym uhlím a časť eluovaná 50 % EtOH sa eluovala stĺpcovou chromatografiou na silikagéli a CHCl3 EtOH (10:4), čím sa získala zlúčenina IV; Časť n-BuOH eluovaná vodou a metanolom cez kolónu s makroporéznou živicou po dekompresii a koncentrácii, zhromaždiť metanolovú elučnú časť a potom získať fenolové glykozidy cez vrstvu polyamidovej kolóny. Fenolické glykozidy sa potom oddelili a depurovali pomocou silikagélovej kolóny (elúcia CHCl3:MeOH:H20 6:4:1) a dextránového gélu LH-20 (elúcia MeOH:H20 bola 1:1) a žltkastá amorfná prášok V a VI. boli získané.

3. Identifikácia komponentov

Zlúčenina I: bezfarebný ihličkovitý kryštál (EtOH), mp166 ~ 168 stupňov, [a] 15D plus 21,3 stupňa (merané v bóraxe, 1g tejto zložky a 1,28g bóraxu, pridajte vodu na 10ml), IR ( KBr) υ 3400, 3250, 1460, 1350, 1080, 1020 cm-1. 1H-NMR (D20) 5 3,4-4,0 ppm. Bezfarebné štvorcové kryštály sa získali acetyláciou konvenčnou metódou, teplota topenia 121 ~ 122 stupňov, IR (KBr) υ 1735, 1450, 1370, 1370, 1215, 1085, 1030 cm-1, vyššie uvedené údaje sú porovnané smanitolštandardné a výsledky sú konzistentné.

Zlúčenina II: bezfarebný ihličkovitý kryštál (EtOH), teplota topenia 140 ~ 142 stupňov, IR (KBr) υ 3400, 2950, ​​1630, 1460, 1380, 1060 cm-1. A teplota topenia zmesi so štandardom sitosterolu sa neznižuje. Hodnoty Rf tenkovrstvovej chromatografie sú konzistentné, takže zlúčenina II je určená ako- sitosterol.

Zlúčenina III: biely amorfný prášok, - Naftolový test bol pozitívny. mp282-284 stupňov, IR(KBr) υ3400, 2950, ​​1630, 1465, 1380, 1075, 1020 cm-1. V porovnaní so štandardom priamo bol stanovený IIIdaukosterol.

Zlúčenina IV: bezfarebný ihličkovitý kryštál (EtOH), mp147 ~ 150 stupňov, IR (KBr) υ 340{{105}}3}}, 2800~2400 , 1680, 1630, 1430 cm-1. 1H-NMR (C5D5N) 5 1,16 (3H, D, j=7Hz, CH3), 2,1~ 2,6 (2h, m, H-6), 2,7 (1H, m, H{{26 }}), 3,25 (1H, m, H-9), 3,5 (1H, m, H-5), 4,3 ~ 5,2 (H-7, maskované glykozylovým protónovým signálom), 5,4 (1H, D, j=7Hz, koncový protón), 5,82 (1H, D, j=4Hz, h-1), 7,85 (1H, s, H{{52} }}) ppm. C-NMR (C5D5N) 5 15,8 (C-10), 29,6 (C-5), 43,2 (C-8), 44,2 (C-6), 47,3 (C -9), 63,0 (C-6',), 71,7 (C-4'), 74,3 (C-2'), 78,1 (C-7, C-3'), 78,5 (C-5'), 95,0 (Cl), 100,5 (C-1'), 114,7 (C-4), 150,4 (C{ {98}}), 170,3 (C{101}}) ppm. Penta acetylát (IV A) zlúčeniny IV: 70 mg kryštálu IV sa rozpustilo v 0,7 ml pyridínu a 0,7 ml acetanhydridu a umiestnilo sa pri teplote miestnosti na 2 hodiny. Reakčný produkt sa eluoval stĺpcovou chromatografiou na silikagéli a CHCl3MeOH (20:1), čím sa získalo 40 mg bieleho pentaacetylátu. IČ (KBr) 3350, 1750, 1675, 1630, 1365 cm{116}}. 1H-NMR (CDCI3) 5 0,99 (3H, d, j=7 Hz, CH3), 1,96 (3H, s, OCH3), 2,02 (9H, s, OCOCH3*3), 2,10 (3H, s, OCOCH3), 2,15 ~ 2,50 (2H, m, H-6), 2,7 (1H, m, H-8), 2,95 (1H, m, H-9), 3,75 (1H , m, H-5), 4,2 ~ 5,3 (H-7 maskované signálom glykozylových protónov), 5,35 (1H, D, J=2,5Hz, H-1) , 7,43 (1 H, s, H -3) ppm. Podľa vyššie uvedených spektrálnych údajov IV a IVa v kombinácii s hodnotami z literatúry bola IV identifikovaná ako8-epibrucín.

Zlúčenina V: amorfný prášok, tenkovrstvová chromatografia na silikagéli Rf hodnota {{0}}},3 (CHCl3: MeOH: H2O pre expanziu 6:4:l, 1% FeCl3 sprejová detekcia), UV (H2O) λ 222 320nm. IR(KBr) υ 3350, 1690, 1625, 1596, 1515 cm-1. H-NMR (D20) 5 1.{68}}7 (3H, d, CH3), 2.{24}} (2H, t, AR-CH2-CH2 -) , 4,3, 4,37, 5,16 (po 1 H, protóny glukózovej a ramnosylovej koncovej skupiny), 6,6 ~ 7,1 (6H, aryl H), 6,4 a 7,7 (po 1 H, d, J=16 Hz, protóny kofeoylénu) ppm. C-NMR (D20 plus DSS) 5 133,8, 119.{{80}}, 145.{108}}, 146,5, 119,4, 123,8, 73,0, 37,0 (fenyletanolová skupina vyššie), 1219,3, 1 150,7, 147,1, 117,9, 125,3, 170,7, 116,0, 149,6 (skupina kyseliny kávovej vyššie), 104,6, 76,8, 83,6, 71,8, 75,2, 7, medziprodukt, skupina 3, vyššie, 70,3 (medziprodukt 23,5) 19,6 (vyššie uvedená skupina ramnózy), 105,0, 75,8, 78,3, 72,5, 78,3, 63,1 (vyššie uvedená koncová glukózová skupina) ppm. V porovnaní s literatúrou je V identifikovaný akoechinakozid.

Zlúčenina VI: amorfný prášok, tenkovrstvová chromatografia na silikagéli RF 0.35 (podmienky vývoja a detekcie sú rovnaké ako vyššie), UV a IR spektrá sú veľmi podobné spektrám echinakozidu a je tu δ 3,8{ {13}} vrchol v H-NMR spektre, v C-NMR spektre je vrchol 5 57,1, dokázané, že na ňom je skupina OCH3. C-NMR (D20 plus DSS) 5 134.0, 116.{25}}, 149,5, 146,4, 119,3, 123,9, 73{34}}, 37,2 (vyššie uvedené je fenyletanolová skupina, 5 149,5 označuje substitučnú polohu OCH3), 129,5, 116.0, 150,7, 147,2, 117,9, 125,4, 170,9, 116,5, 149,6), 7, 810,62,62 kafeoyl vyššie 71,8, 75,3, 70,3 (vyššie uvedený medziprodukt glukozyl), 104,0, 73,5, 73,5, 74,3, 72,3, 19,7 (vyššie uvedený ramnosyl), 105,1, 75,9, 78,3, syltermin, 783,3- 72,505. ) ppm. Vyššie uvedené údaje sú v súlade so spektrálnymi údajmiCistanosid Aizolovaný z rovnakého rodu Cistanche salsa.