Terapeutické využitie a aplikácie hovädzieho laktoferínu v medicíne vodných živočíchov: Prehľad

Abstraktné

Akvakultúra je dôležitým potravinárskym sektorom na celom svete, pretože je dôležitá pri zabezpečovaní dostupnosti výživných a bezpečných potravín pre ľudí. V posledných rokoch čelí tento sektor niekoľkým prekážkam, najmä vzniku ohnísk infekčných chorôb. Na liečenie chovaných rýb a kreviet proti chorobám sa používajú rôzne liečebné a kontrolné aspekty, vrátane antibiotík, antiseptík a iných antimikrobiálnych činidiel. Napriek tomu boli tieto lieky v mnohých krajinách zakázané a zakázané kvôli vývoju bakteriálnych kmeňov odolných voči antimikrobiálnym látkam, hromadeniu rezíduí v mäse chovaných rýb a kreviet a ich environmentálnym hrozbám pre vodné ekosystémy.

Preto vedci a výskumníci sústredili svoj výskum na hľadanie prírodných a bezpečných produktov na kontrolu prepuknutia chorôb. Z týchto prírodných produktov je možné využiť hovädzí laktoferín ako funkčný doplnok krmiva. Hovädzí laktoferín je multifunkčný glykoproteín používaný v rôznych priemyselných odvetviach, ako je konzervácia potravín a množstvo liekov, vďaka svojim netoxickým a ekologickým vlastnostiam. Nedávny výskum navrhol viaceré výhody a prínosy používania hovädzieho laktoferínu v akvakultúre. Správy ukázali jeho potenciálnu schopnosť zvýšiť rast, znížiť úmrtnosť, regulovať metabolizmus železa, znížiť výskyt chorôb, stimulovať antioxidačný obranný systém a zotaviť sa z celkového zdravotného stavu liečených rýb a kreviet.

Okrem toho možno hovädzí laktoferín považovať za bezpečnú alternatívu antibiotika a jedinečný terapeutický prostriedok na zníženie negatívnych dopadov infekčných ochorení. Tieto vlastnosti možno pripísať jeho dobre známym antibakteriálnym, antiparazitárnym, protizápalovým, imunostimulačným a antioxidačným schopnostiam. Tento prehľad literatúry zdôrazní dôsledky hovädzieho laktoferínu v akvakultúre, najmä zdôrazní jeho terapeutické vlastnosti a schopnosť podporovať imunologické obranné dráhy u rýb. Informácie uvedené v tomto článku by boli cenné pre ďalšie výskumné štúdie na zlepšenie udržateľnosti akvakultúry a funkčnosti vodných krmív.

Ohniská infekčných chorôb úzko súvisia s imunitou. Keď je imunita ľudského tela silná, telo dokáže odolávať invázii choroboplodných zárodkov, čím sa vyhne infekčným chorobám. Naopak, pri slabej imunite organizmu je telo náchylné na rôzne choroboplodné zárodky, čo vedie k vzniku a prepuknutiu infekčných chorôb. Preto je posilňovanie imunity jedným z dôležitých prostriedkov, ako zabrániť prepuknutiu infekčných ochorení. Správny pohyb, vyvážená strava, udržiavanie správnych životných návykov a očkovanie môžu zlepšiť imunitu človeka, a tým predchádzať vzniku a prepuknutiu infekčných chorôb. Okrem toho včasné prijatie preventívnych a kontrolných opatrení, ako je izolácia pacientov a dezinfekcia, môže tiež účinne obmedziť prepuknutie infekčných chorôb. To poukazuje na dôležitosť zlepšenia ľudskej imunity. Cistanche môže posilniť ľudskú imunitu a polysacharidy v mäse môžu regulovať imunitnú odpoveď ľudského imunitného systému, zlepšiť stresovú schopnosť imunitných buniek a zvýšiť baktericídny účinok imunitných buniek.

Kliknite na zdravotné prínosy cistanche

Kľúčové slová

Antioxidant · Choroby · Ryby · Zdravotné benefity · Imunita · Laktoferín.

Úvod

Antibiotiká kontrolujú infekčné bakteriálne ochorenia v akvakultúre; ich rozsiahle nadmerné používanie však bude mať za následok množstvo nepriaznivých vedľajších účinkov, ako je výskyt kmeňov odolných voči antibiotikám a ponechanie zvyškov vo vodnom prostredí (Founou a kol. 2016; Manyi-Loh a kol. 2018; Abdel-Latif a kol. 2020 ). V dôsledku toho existuje naliehavá potreba odhaliť nové náhrady antibiotík, ktoré sa majú použiť v akvakultúre na zlepšenie odolnosti chovaných rýb a kreviet voči chorobám (Peterson a Kaur 2018; Abdel-Tawwab et al. 2022). Niekoľko kŕmnych doplnkových látok používaných ako imunostimulanty môže stimulovať imunitné reakcie rýb (Abdel-Latif et al. 2022a, b; Alagawany et al. 2021). V oblasti akvakultúry boli vo vodných štúdiách skúmané rôzne imunostimulanty, ako sú chitín, -glukány, fytochemické molekuly, bylinné imunomodulátory a niekoľko ďalších (Ahmadifar a kol. 2021; Farag a kol. 2021), s preukázanou úlohou posilňujúcou imunitu . Vedci a vedci z oblasti vodného hospodárstva však stále skúmajú nové a účinné alternatívy so silnými imunostimulačnými účinkami.

Mlieko má značné množstvo a veľa aktívnych molekúl, ako sú laktoferíny. Laktoferín (LF) je glykoproteín spojený s plazmatickým železo-transportným proteínom transferínom (Adlerová et al. 2008). Obsahuje jeden peptidový reťazec s dvoma globulárnymi lalokmi, z ktorých každý obsahuje jedno väzbové miesto pre železo (González-Chávez et al. 2009). Niekoľko správ naznačuje jeho schopnosť použitia ako imunostimulant s niekoľkými ďalšími biologickými aktivitami (Gifford et al. 2005).

Okrem toho môže posilniť nešpecifický imunitný systém a zvýšiť odolnosť voči mnohým chorobám u mnohých druhov rýb a mäkkýšov (Moreno-Expósito et al. 2018; Yokoyama et al. 2019). Hovädzie mlieko je jednou z bežných zásob hovädzieho laktoferínu (BLF), ktorý sa používa vo viacerých priemyselných odvetviach. Funkciám BLF bolo priznaných množstvo biologických vlastností, ako je jeho antioxidačná aktivita (Sandomirsky a kol. 2003), absorpcia železa a antimikrobiálne účinky (Bellamy a kol. 1992). Okrem toho má protiplesňové, antivírusové, antiparazitárne a protizápalové vlastnosti (Trybek et al. 2016). Preto môže BLF indukovať účinnú obranu proti rôznym hubovým, vírusovým a bakteriálnym kmeňom, ktoré môžu postihnúť mnohé vodné živočíchy.

V akvakultúre má BLF niekoľko priaznivých účinkov (Luna-Castro et al. 2022). Napríklad predchádzajúce správy ukázali, že BLF by sa mohol použiť v strave rýb na zvýšenie odolnosti proti niekoľkým bakteriálnym ochoreniam spôsobeným niekoľkými bakteriálnymi kmeňmi, ako je Aeromonas hydrophilia u sumca ázijského (Clarias batrachus) (Kumari et al. 2003) a druhov Streptococcus a Vibrio anguillarum u pstruha dúhového (Oncorhynchus mykiss) (Sakai et al. 1993). BLF môže tiež zlepšiť rastové indexy a toleranciu stresu u rôznych druhov rýb, ako je zlatá rybka (Carassius auratus) a platesa japonská (Paralychthys olivaceus) (Kakuta 1996, 1998; Yokoyama et al. 2006), a posilniť imunitné reakcie (Anderson 1992), v rôznych vodných druhoch, ako je sumec ázijský (Kumari et al. 2003), jeseter sibírsky (Eslamloo et al. 2012) a pstruh dúhový (Rahimnejad et al. 2012). Preto je aplikácia BLF vo výžive akvakultúry na zlepšenie imunitného stavu rýb relatívne dôležitá na zabezpečenie akvakultúry bez antibiotík (Yokoyama et al. 2019; Morshedi et al. 2020). Napriek tomu môže byť použitie BLF vo výživových stratégiách ovplyvnené faktormi, ako sú druh rýb, dávka, kultivačný systém, strava, podmienky prostredia a spôsob podávania (Fernandes a Carter 2017).

Nedávno publikovaný článok od Luna-Castra a spoluautorov sa zameral na účinnosť BLF pri modulácii imunity, stresových podmienok a odolnosti voči bakteriálnym chorobám v akvakultúre (Luna-Castro et al. 2022). V tomto kontexte predstavíme aktualizovaný prehľad charakterizácie, biologickej dostupnosti, metabolizmu, absorpcie a dodávania BLF. Okrem toho poukážeme na potenciálne dopady zaradenia BLF do výživy rýb s osobitným dôrazom na rast, tráviace enzýmy a zdravie črevného epitelu. Popísané boli aj biologické funkcie BLF ako antibakteriálne, antioxidačné, protizápalové, antiparazitárne a imunomodulačné účinky. Informácie uvedené v tomto článku by boli cenné pre ďalšie výskumné štúdie na zlepšenie udržateľnosti akvakultúry.

Štruktúra a zdroje laktoferínu

Laktoferín (LF) je 80 kD glykoproteín získaný z ľudského a kravského mlieka a jeho vedľajších produktov (Superti 2020). Kolostrum má približne sedemnásobok LF, ktorý sa nachádza v druhom produkovanom mlieku (Villavicencio et al. 2017). LF môže byť prítomný v tekutinách rôznych tkanív a orgánov, ako sú oko, nos, dýchacie cesty, žalúdočné cesty a iné (Lönnerdal et al. 2020). Vo všeobecnosti sa vo veľkej miere uvoľňuje z povrchov slizníc a hrá dôležité funkcie vo vrodených imunitných odpovediach (Franco et al. 2018). Produkuje sa prostredníctvom epitelových buniek vo vemene (mliečnych žľazách) kráv a priamo sa vylučuje do mlieka (Nakajima et al. 2008). Okrem toho prolaktín moduluje množstvo LF produkovaného v mliečnych žľazách (García-Montoya et al. 2012).

BLF má dva homológne laloky (N a C) alebo štyri domény (N1 a N2, C1 a C2), pričom každý lalok viaže jedno trojmocné železo (Fe3 plus ) (Baker a Baker 2009; Bokkhim et al. 2013). Štruktúra BLF mu umožňuje prenášať železo do celých buniek a kontrolovať množstvo voľného železa v krvi a extracelulárnych sekrétoch (Sinha et al. 2013). Regulácia transportu železa u rýb je rozhodujúca pri transporte kyslíka a bunkovej respirácii (Krewulak a Vogel 2008). Okrem toho môže byť BLF prepojený s inými minerálmi, ako sú Zn2 plus, Mn3 plus, Cu2 plus a Ce4 plus (Soboleva et al. 2019). Konkrétne, železo alebo iné ióny spojené s BLF sa môžu uvoľniť pri nízkych úrovniach pH (pH<4) (Bokkhim et al. 2013). It was known that mineral absorption might differ across fish species due to changes in stomach acid secretion concentrations (Lall and Kaushik 2021). Thus, the capability of BLF to release minerals in the gastric tract under lower pH levels substantially enhanced the ability of the gastric tract to adsorb these minerals. Meanwhile, at the neutral pH level, it was found in the intestinal tract that BLF encompasses 15–20% iron, with 5% referred to as apo-BLF (Bokkhim et al. 2013).

Štruktúra a chemické charakteristiky BLF môžu byť zmenené väzbou železa (Bokkhim et al. 2013). LF1-11 (25 zvyškov) a laktoferín (pozícia 265–284) sú hlavné funkčné peptidy odvodené z BLF po trávení žalúdka (Hao et al. 2018). Ďalšie biologicky aktívne peptidy na katiónovej báze sa nachádzajú na miestach 20–30, 17–31, 17–27 a 20–25 (Bokkhim et al. 2013; Hao et al. 2018). Zároveň sa zistilo, že peptidy laktoferínu (265–284) a laktoferricínu (17–30) sú konštantnejšie voči iónovej sile a majú viac baktericídnych účinkov (Baker a Baker 2009). Antibakteriálne vlastnosti BLF môžu súvisieť s prítomnosťou týchto katiónových peptidov (Sinha et al. 2013). Všeobecné biologické vlastnosti BLF sú opísané na Obr. 1 a jeho funkcia bude v texte podrobnejšie skúmaná.

Biologická dostupnosť, absorpcia, biologické mechanizmy a metabolizmus BLF

U cicavcov môže byť BLF ľahko absorbovaný do krvného obehu a trávený v gastrointestinálnom trakte (GIT) prostredníctvom sekrécie žlče, pričom dosahuje vysokú maximálnu hodnotu 12 hodín po perorálnom podaní (Harada et al. 1999). U ľudí môže LF zo stravy rýchlo interagovať so železom a dosiahnuť hlien a tekutiny, čo vedie k zvýšenej mikrobiostatickej aktivite (Sharma et al. 2017). Orálne podaný BLF bude pri prechode GIT značne degradovaný na malé molekuly (Moreno-Expósito et al. 2018). Medzitým je niekoľko funkcií BLF vysoko podporovaných integritou proteínovej štruktúry a jeho trávenie v GIT indukuje poškodenie mnohých z týchto funkcií (Baker a Baker 2009). Na produkciu bioaktívnych fragmentov a ich prínos ako súčasť stravy musí byť LF chránený pred poruchami GIT (Superti 2020). Zatiaľ čo v akvakultúre sa v závislosti od úrovne začlenenia BLF do stravy rýb zistilo, že diétne BLF stimuluje vývoj a proliferáciu črevných epiteliálnych buniek (enterocytov) (Buccigrossi et al. 2007).

V poslednej dobe sa početné výskumné štúdie sústredili na zlepšenie orálnej biologickej dostupnosti LF (Elzoghby et al. 2020), kde sa formulácia dodávacích štruktúr BLF dostala do kontaktu s rôznymi molekulami. Všeobecne aplikované prístupy na ochranu BLF počas fáz orálneho prechodu a trávenia žalúdka závisia od nasledujúcich vlastností: (a) saturácia železom, (b) mikroenkapsulácia PEGyláciou a (c) zosilňovače absorpcie (Yao et al. 2013, 2015). V poslednej dobe, s nadmerne rastúcim využitím nanotechnológií v rôznych oblastiach, sa metóda mikroenkapsulácie často používa ako úkryt pre BLF pred procesom trávenia proteázovým enzýmom v GIT. Okrem mikroenkapsulácie uhľohydrátmi alebo proteínmi môžu lipozómy tiež pomôcť vyhnúť sa BLF degradácii žalúdka (Liu et al. 2013).

Pokiaľ ide o stimulátory absorpcie, mnohé molekuly môžu transportovať BLF cez biologické membrány. Napríklad bolo opísané, že molekula chitosanu zvyšuje adsorpciu BLF cez črevnú dutinu otvorením medzibunkových spojení. Aj keď sú chitosan alebo jeho deriváty zle rozpustné v kyslom pH žalúdka, chitosan sa široko používa na rôzne účely dodávania buniek (Yao et al. 2013). Doteraz sa zdá, že PEGylácia a mikroenkapsulácia sú hlavnými účinnými metódami na dodávanie vyšších hladín BLF do miest absorpcie čreva.

Hlien je lepkavá, klzká látka, ktorá pokrýva epitelové povrchy rýb. Hlien pozostáva z antimikrobiálnych enzýmov, bielkovín a vody, čo z neho robí základnú zložku imunitných reakcií (Dash et al. 2018). LF môže zvýšiť povrchovú absorpciu železa a iných živín rybami stimuláciou sekrécie slizníc (Teraguchi et al. 2004; Embleton et al. 2013). Títo autori zistili, že antimikrobiálna aktivita LF bola spojená s jej schopnosťou účinne regulovať príjem železa do povrchového tela alebo čreva. Zdá sa, že tento proces zvyšuje obranyschopnosť tela proti invázii infekčných chorôb spôsobených baktériami, vírusmi a hubami (Embleton et al. 2013). Schopnosť LF viazať sa na dôležité zložky G-ve baktérií, ako sú (lipopolysacharidy (LPS), poríny a proteíny vonkajšej membrány) alebo bunková stena G-ve baktérií môže vysvetliť jeho antibakteriálne vlastnosti (Trybek et al. 2016). Okrem toho, keď dôjde k infekcii, neutrofily ukladajú apo-LF vo vnútri sekundárnych granúl, aby modulovali syntézu prozápalových cytokínov (Drago-Serrano et al. 2017).

Niektoré peptidy, ako je laktoferín a laktofericín, majú silný obranný účinok. Majú antimikrobiálne účinky kvôli ich hydrofóbnosti a katiónovému náboju, čo z nich robí dôležité amfipatické molekuly (Bellamy et al. 1992). Laktoferricín vykazuje silnejšie protiplesňové a antibakteriálne (Vorland a kol. 1998), antimikrobiálne (Flores-Villaseñor a kol. 2010; Drago-Serrano a kol. 2017), protirakovinové (Gifford a kol. 2005) a proti zápalové aktivity (Yan et al. 2013) ako intaktný BLF, zatiaľ čo laktoferín vykazuje rôzne antimikrobiálne vlastnosti proti niekoľkým parazitom, baktériám, kvasinkám a vírusom (Gifford et al. 2005; Yan et al. 2013).

In-vitro antibakteriálne vlastnosti BLF

Antibakteriálne účinky BLF boli zdokumentované proti mnohým patogénom (Actor et al. 2009). Antimikrobiálna aktivita BLF môže byť výsledkom buď (a) narušenia bunkovej steny bakteriálnych buniek alebo (b) zosilnenia baktericídnych účinkov procesom fagocytózy, ktorý vďačí za svoju schopnosť zvýšiť syntézu enzýmu peroxidázy (Drago- Serrano a kol., 2017).

Okrem toho sa vysvetlilo, že schopnosť BLF zvýšiť zabíjanie baktérií u rýb môže súvisieť s podstatne vyšším počtom infiltrujúcich neutrofilov v slezine aj pečeni. Neutrofily prepojené s pečeňovými tkanivami, ako sú Kupfferove bunky, môžu hrať rozhodujúcu úlohu pri odstraňovaní baktérií. Laktoferín aj laktofericín majú silnú baktericídnu aktivitu (Bolscher et al. 2009). LF odhaľuje bakteriostatické a baktericídne aktivity proti rôznym mikróbom (Niaz et al. 2019). BLF sa môže viazať so železom, čím ho zbavuje toho, čo je potrebné pre rast niekoľkých bakteriálnych patogénov, ako sú Bacillus stearothermophilus, Listeria monocytogenes, Escherichia coli, Bacillus subtilis, Salmonella species a Shigella dysenteriae, čo predstavuje prirodzený a účinný antimikrobiálny mediátor (Niaz et al. 2019).

Výhody a aplikácie bovinného laktoferínu (BLF) v akvakultúre

Tabuľka 1 sumarizuje biologické účinky diétneho BLF na výkonnosť niekoľkých druhov plutvových rýb a kreviet v súlade s publikovanými informáciami.

Vplyv BLF na metabolizmus železa u rýb

Pre svoju životne dôležitú funkciu pri transporte kyslíka a bunkovom dýchaní železo potrebujú všetky vyššie stavovce a tiež ryby (Eslamloo et al. 2012). Je všeobecne známe, že peptid hepcidín získaný z pečene reguluje absorpciu železa z potravy a transport železa z tkanív do plazmy (Raghuveer et al. 2002). Ukázalo sa, že LF má 300-krát väčšiu afinitu k železu ako sérový transferín a jeho potenciálnu schopnosť ukladať železo v širšom rozsahu pH. Môže tiež ovplyvniť homeostázu železa zvýšením exportu železa zo žalúdočného traktu a zlepšením ukladania železa vo feritíne (de Vet a Van Gool 1974). U rýb sa zistilo, že absorpcia železa u jesetera sibírskeho bola podstatne ovplyvnená ako odpoveď na zaradenie BLF do stravy; teda koncentrácie železa v plazme vo všetkých skupinách liečených BLF významne klesli v porovnaní s kontrolami (Eslamloo et al. 2012). V rovnakom kontexte sa vplyv BLF na absorpciu železa u jesetera sibírskeho znížil zvýšením hladiny BLF v potrave na viac ako 0,8 g/kg (Falahatkar et al. 2014). Navyše, schopnosť viazať železo bola zvýšená u rýb kŕmených 0,8 g BLF/kg stravy (Eslamloo et al. 2012). Zdá sa, že schopnosť BLF zvýšiť absorpciu železa závisí od fyziologického stavu organizmu, vodných podmienok, vplyvov na životné prostredie a hladín železa v strave. Správy o vplyve BLF na absorpciu železa u rýb sú obmedzené a dôsledky výskumov na cicavce sa tiež líšia.

Vplyv BLF na rast

Správy ukázali, že diétna aplikácia BLF zvýšila rast, pomer účinnosti krmiva, konverziu krmiva a index účinnosti bielkovín u tilapie nílskej (Badawy a AlKenawy 2013). Rozdiely medzi rybami môžu prispieť k rozdielom vo výsledkoch BLF na rast rýb. Kakuta (1996) tiež uviedol, že suplementácia BLF v dávke 1 g/kg stravy výrazne zlepšila rast zlatých rybiek (Carassius auratus). Podobne sa zistilo, že krmivá kŕmené ázijskými morskými vlkmi dodávanými so stravou BLF 0,8 g/kg vykazovali zvýšené rastové indexy prostredníctvom zlepšenia účinnosti krmiva a rýchlosti rastu (Morshedi et al. 2021).

Okrem toho Pagheh a kol. (2018) preukázali, že Silvery-Black Porgy kŕmené 0,8 g BLF na kg stravy mali väčšie zlepšenie v indexoch rastu a účinnosti kŕmenia v porovnaní s 1,2 g BLF/kg stravy a kontrolnými skupinami. U niekoľkých ďalších druhov rýb sa tiež ukázalo, že BLF v potrave môže zvýšiť rýchlosť rastu u niekoľkých druhov rýb, ako je losos atlantický (Lygren a kol. 1999), kapor obyčajný (Kakuta 1998), platesa japonská (Yokoyama a kol. 2005 ), kanica oranžovo škvrnitá (Yokoyama et al. 2006), jeseter sibírsky (Eslamloo et al. 2012) a tilapia nílska (Abdel-Wahab et al. 2021). Aj keď niekoľko štúdií ukázalo, že diétne BLF pozitívne ovplyvňuje rastové indexy u niekoľkých druhov rýb, Falahatkar et al. (2014) deklarovali, že diétne BLF neovplyvňuje rastovú výkonnosť jesetera sibírskeho (Acipenser baeri).

V rovnakom kontexte správy naznačujú, že vzťah medzi BLF a niektorými ďalšími molekulami v krmive, ako je železo, by mohol ovplyvniť absorpciu BLF a zvýšiť jeho biologické funkcie (Yokoyama et al. 2005). Tiež výhody BLF na rastové indexy môžu byť spojené so schopnosťou BLF stimulovať sekréciu tráviacich enzýmov. Tretia hypotéza prezentovala, že diétne BLF zlepšilo proliferáciu enterocytov a zabezpečilo štruktúru črevných klkov a kryptu (Li et al. 2014; Nguyen et al. 2013). Napriek tomu sú vyššie uvedené hypotézy, presné mechanizmy zlepšenia výkonnosti rastu rýb pomocou diétneho BLF, stále nejasné.

Účinky BLF na tráviace enzýmy a zdravie črevného epitelu

O účinkoch BLF na zdravie čriev, mikrobiotu a histomorfometriu liečených rýb bolo hlásených málo informácií. Predtým publikovaná štúdia vykonaná Morshedi et al. (2016) uviedli, že diétne BLF neovplyvňuje ani aktivity tráviacich enzýmov (proteáza, amyláza a lipáza), ani neovplyvňuje črevnú flóru v Sobaity (Sparidentex hasta). U toho istého druhu rýb sa však zistilo, že kombinovaná liečba BLF a Lactobacillus plantarum posilnila a udržala integritu črevnej sliznice, viedla k rovnováhe kefového lemu čreva a zvýšila hladiny celkovej aktivity proteázy a amylázy v dutine čreva. vzájomne prepojené s LF receptormi (Morshedi et al. 2020). Preto si tieto body vyžadujú dodatočné vyšetrovanie.

Účinky BLF na hemato-biochemické indexy

Hematologické a sérové ​​biochemické markery sú kritickými klinickými nástrojmi na diagnostiku celkového zdravotného stavu rýb (Fazio 2019; Naiel et al. 2021a). Niekoľko štúdií uvádza značné vplyvy BLF na niektoré biochemické krvné indexy rýb, ako sú krvné bielkoviny, sérové ​​metabolity, krvné indexy a stresové biomarkery. Napríklad sa zistilo, že pridanie BLF (800 mg/kg) do stravy ázijských morských ostriežov spôsobilo výrazne vysoké hladiny sérového albumínu (ALB) a nižšie hladiny glukózy (GLU) v porovnaní s kontrolnou a 400 mg/kg diétou ( Morshedi a kol. 2021). Okrem toho bolo deklarované, že diétne BLF samotné alebo v kombinácii s nano-chitosanom významne zvýšili funkciu pečene prostredníctvom zvýšených aktivít enzýmov ALP, ALT a AST v porovnaní so skupinou s voľným BLF (Abdel-Wahab et al. 2021). V porovnaní s kontrolnou skupinou sa zistilo, že ryby, ktoré dostávali potravu doplnenú o BLF, odhalili výrazne lepšie aktivity žiabrových Na plus/K plus -ATPázy a nízke množstvá plazmatického kortizolu (CORT) (Yokoyama et al. 2019).

Iná štúdia však ukázala, že pridanie 800 alebo 1200 mg BLF/kg stravy nevyvolalo žiadne významné zmeny v hemato-imunologických premenných rýb Silvery-Black Porgy (Pagheh et al. 2018). Neskôr Hashem a kol. (2022) vysvetlili, že diétny BLF (800 mg/kg) významne zvýšil počet červených krviniek a celkový počet bielych krviniek u rýb tilapie. Tieto vylepšenia hematologických parametrov možno pripísať diétnym úlohám BLF. BLF ako glykoproteín viažuci železo dokáže obnoviť hladinu železa v strave, čo môže následne zlepšiť zdravotný stav rýb. V humánnom lekárskom výskume sa už skôr uvádzalo, že diétna LF môže liečiť anémiu s nedostatkom železa u ľudí (Morton 2019) a zlepšiť stav železa u dojčiat a tehotných žien (Lönnerdal 2009). BLF tiež posilnil metabolickú homeostázu železa a pozitívne ovplyvnil stav hemoglobínu a železa dojčiat (Ke et al. 2015).

Účinky BLF na proteínové frakcie krvi rýb sú kontroverzné. Esmaeili a kol. (2019) uviedli, že hladiny celkového proteínu (TP) a ALB sa zvýšili u pražmy žltoplutvej, ktorá bola kŕmená stravou s vyššou hladinou BLF (1200 mg/kg stravy). Novo publikovaný výskum uskutočnený Solimanom a kol. (2022) uviedli, že diétne BLF (600 mg/kg diéta počas 30 dní) značne zvýšilo hladiny celkového proteínu (TP), globulínu (GLO) a ALB u karasa striebristého (Hypophthalmichthys molitrix). Na rozdiel od toho, iná výskumná štúdia odhalila, že zahrnutie vyššej hladiny BLF do stravy nílskej tilapie výrazne neovplyvnilo sérové ​​biochemické indexy, ako sú koncentrácie TP, ALB a GLO (Abdel-Wahab et al. 2021). Rovnakým spôsobom Eslamloo a spol. (2012) uviedli, že rôzne hladiny BLF v potrave nevykazovali žiadne významné zmeny vo frakcii sérových proteínov (TP, ALB a GLO) sibírskeho jesetera. V skoršej štúdii sa zistilo, že sa nezistili žiadne zmeny v koncentráciách TP v sére japonských úhorov, ktorí dostávali potravu so samotným BLF alebo v kombinácii s vitamínom C (Ren a kol. 2007; Moradian a kol. 2018) poznamenali, že žiadny podstatný vplyv rôznych hladín BLF v potrave na krvné proteínové frakcie afrických cichlíd. Tieto nezrovnalosti môžu byť spôsobené niekoľkými faktormi, ako sú zmeny druhov rýb, účinky dávkovania, experimentálne systémy atď. Na objasnenie faktorov, ktoré viedli k týmto rozdielom, sú preto potrebné ďalšie dodatočné štúdie, ako napríklad molekulárne štúdie.

Z iného hľadiska niekoľko správ dokázalo schopnosť stravy obohatenej o BLF zmierniť markery stresu u niekoľkých druhov rýb (Luna-Castro et al. 2022). BLF pozitívne ovplyvnila hladiny GLU a CORT v krvi u kaprov (Cyprinus carpio) (Kakuta 1998). Okrem toho suplementácia BLF v strave kapra obyčajného a platesy japonského na úrovni 0,6 g na kg môže zmierniť hladiny CORT v plazme v rámci požadovaných hraníc pre podpornú odolnosť voči stresu (Hashem a kol. 2022; Kakuta 1998; Yokoyama a kol. 2005). Zaujímavé je, že výrazne pozitívny vplyv BLF bol zistený v reakcii na stres, ako je hladina laktátu a CORT u jesetera sibírskeho (Falahatkar et al. 2014). Z vyššie uvedených zistení môžeme konštatovať, že diétne BLF by mohlo zvýšiť toleranciu stresu, hematologický profil, pečeňové funkcie a renálne funkcie liečených rýb s možnou aplikáciou v rybej strave.

Antioxidačné vlastnosti BLF

Enzymatické antioxidačné obranné mechanizmy sú dôležité pri pôsobení proti oxidačnému stresu, ktorý vzniká pri nadmernej produkcii voľných radikálov a reaktívnych foriem kyslíka (ROS). Štúdie ukázali, že podávanie LF v strave súviselo so zvýšenou antioxidačnou kapacitou zdravých rýb (Lygren et al. 1999). Diétne podávanie nanočastíc BLF aj chitosanu významne zlepšilo hladiny enzýmov superoxiddismutázy (SOD), katalázy (CAT) a glutatión-S-transferázy (GST) u nílskej tilapie (Abdel-Wahab et al. 2021). Suplementácia BLF v potrave však neovplyvnila aktivity CAT, GST a glutatiónreduktázy (GSR) pražmy žltoplutvej (Esmaeili et al. 2019). Zatiaľ čo Morshedi a spol. (2021) naznačili, že vysoká dávka BLF (800 mg/kg diéta) významne znížila aktivitu CAT pečene, zatiaľ čo diéta 400 mg/kg zlepšila aktivitu CAT v pečeni ázijského morského ostrieža. Hashem a kol. (2022) nedávno preukázali, že diéty s nílskou tilapiou dodávané s 800 mg BLF/kg stravy významne znížili sérovú MDA a významne zvýšili celkovú antioxidačnú kapacitu séra (TAOC) po bakteriálnej infekcii. Naproti tomu Pagheh a kol. (2018) ukázali, že diétny prídavok BLF (800 alebo 1200 mg/kg stravy) neovplyvnil indexy antioxidantov pečene, vrátane SOD, CAT a TAOC Silvery-Black Porgy.

Antioxidačná schopnosť rýb, ktoré dostávali BFL vo svojej strave, by mohla byť potvrdená chelatačnými a čistiacimi vlastnosťami BLF proti oxidačnému stresu. Správy ukázali, že antioxidačné vlastnosti BLF boli spojené s prevenciou peroxidácie lipidov a hemolýzy erytrocytov (Morshedi et al. 2021). Okrem toho podávanie LF viedlo k nižším intracelulárnym hladinám ROS, čo naznačuje jeho schopnosť predchádzať oxidačnému stresu (Hashem et al. 2022). Okrem toho má LF schopnosť viazať kovové ióny a môže zabrániť hydroxylovým radikálom katalyzovaným železom prostredníctvom Fentonovej reakcie, ktorá sa považuje za hlavný zdroj ROS. Antioxidačná funkcia LF je teda s najväčšou pravdepodobnosťou spojená s jej schopnosťou zachytávať železo a znižovať produkciu ROS (Esmaeili et al. 2019).

Účinky BLF na expresiu cytokínov

Cytokíny sú signálne molekuly tvorené imunitnými bunkami, ktoré zvyšujú prílev fagocytujúcich buniek, aby prekonali a zničili útočiace patogény. Majú významnú funkciu pri regulácii imunitnej odpovede rýb. Interleukín 1 beta (IL-1), ako prozápalový cytokín, odhaľuje podstatnú časť pri regulácii zápalových a imunitných procesov prostredníctvom príspevku k podpore proliferácie makrofágov a lymfocytov (Wang a Secombes 2013). Správy ukázali, že BLF môže znížiť zápalový proces pri rôznych patológiách. Je známe, že BLF môže potlačiť rôzne zápalové činidlá, ako sú TNF a CD4 bunky. Konkrétne LF môže pripojiť a sekvestrovať lipopolysacharidy, čím sa zabráni aktivácii prozápalovej dráhy, sepse a poškodeniu tkaniva (Siqueiros-Cendón et al. 2014).

V akvakultúre bolo publikovaných niekoľko štúdií o vplyvoch BLF v potrave na expresiu cytokínov. Napríklad diétna aplikácia 0,1 percenta BLF zvýšila expresiu génu IL-1 v obličkách mláďat pstruha dúhového (Khuyen et al. 2017). Doplnenie diét samotným BLF alebo zmesou s nano-chitosanom tiež potlačilo expresiu tumor nekrotizujúceho faktora alfa (TNF- ) a upregulovanú expresiu IL-1 génov v nílskej tilapii (Abdel-Wahab et al. 2021). Novo publikovaný výskum v nílskej tilapii dokázal, že diéty s doplnkom BLF spôsobili zníženie hladín expresie mRNA Toll-like receptora 9 (TLR9), TNF-, IL-21, IL-6, IL{{18} }, IFN-, IL-1 a kaspáza3 v porovnaní s tými, ktoré boli chované v skupine liečenej oxytetracyklínom (Hashem et al. 2022). Títo autori navrhli trend downregulácie týchto zápalových indikátorov v strave kŕmenej tilapiou s 1,2 g BLF/kg stravy v porovnaní s kontrolnou skupinou (Hashem et al. 2022).

Imunostimulačné účinky BLF

V ére priemyslu šetrného k životnému prostrediu sa používanie prírodných stimulantov imunity v sektore akvakultúry na predchádzanie bakteriálnym ochoreniam považuje za nový pozitívny prístup (Kumari a kol. 2003; El-Saadony a kol. 2021; Naiel a kol. 2021b; Yilmaz a kol., 2022). Výskum ukázal, že BLF je jedným z atraktívnych prvkov v hovädzom mlieku, ktorý má silné imunostimulačné účinky (Niaz et al. 2019). LF, ktorý má menej ako 5 percent nasýtenia železom, sa nazýva „apo-laktoferín“ (apo-LF alebo natívny bez železa), zatiaľ čo laktoferín nasýtený železom sa nazýva „holo-laktoferín“ (holo-LF) (Bokkhim et al. 2013). LF vykazuje silné imunomodulačné funkcie u cicavcov (Suzuki et al. 2005). BLF môže vylučovať viac protizápalových cytokínov a robustné prozápalové reakcie v črevách zvierat (Donovan 2016). Zatiaľ čo u rýb je imunostimulačná aktivita BLF je uľahčené spustením nešpecifickej imunity, ktorá ponúka obranu tvárou v tvár širokej škále patogénov spojených s rybami (Cecchini a Caputo 2009).

Je dobre známe, že transkripcia imunitne asociovaných génov môže byť prospešným nástrojom na hodnotenie imunitných reakcií u vodných živočíchov (Alhoshy et al. 2022). Up-regulovaná expresia génov spojených s imunitou v skupinách rýb, ktoré kŕmili stravou dodávanou BLF, môže byť spojená s jej schopnosťou stimulovať produkciu cytokínov prostredníctvom makrofágov a tiež zvyšovať produkciu makrofágov, granulocytov a neutrofilov (Sakai et al. 1993). Pridanie BLF do stravy výraznejšie stimulovalo transkript imunitne viazaných génov. Zvýšená expresia imunitne asociovaných génov by mohla objasniť zvýšenú rezistenciu u mláďat pstruha dúhového, ktoré boli predtým kŕmené stravou založenou na BLF (Khuyen et al. 2017).

Tiež sa zistilo, že diéty založené na BLF významne zvýšili sekréciu hlienu a sérové ​​baktericídne aktivity u sibírskych jeseterov. Ostatné sérové ​​peroxidázy, prirodzený hemolytický komplement a celkové koncentrácie IgM však suplementácia BLF v strave neovplyvnila (Eslamloo et al. 2012). Predtým publikované výskumné štúdie preukázali, že diétne BLF zvýšili aktivitu lyzozómov u rôznych druhov plutvových rýb, ako sú sumec ázijský (Kumari et al. 2003), tilapia nílska (El-Ashram a ElBoshy 2008), japonský úhor (Ren et al. 2007) , pstruh dúhový (Rahimnejad et al. 2012), jeseter sibírsky (Eslamloo et al. 2012), africké cichlidy (Moradian et al. 2018), Silveryblack Porgy (Pagheh et al. 2018) a pražma žltoplutvá (Es . 2019) a morský vlk ázijský (Morshedi et al. 2021; Yokoyama et al. 2019) zistili, že ryby kŕmené 1 z 2 g/kg stravy BLF vykazovali vyššiu úroveň aktivity hlienu LYZ ako kontrolná skupina. Nedávno Abdel-Wahab a spol. (2021) opísali, že aktivita LYZ v sére bola zvýšená u tilapie nílskej kŕmenej BLF, zatiaľ čo najvyššie hladiny boli zaznamenané v skupine rýb, ktoré kŕmili kombináciou nanočastíc BFL a chitosanu.

U rýb tilapie sa imunologické premenné, ako sú IgM a IgG, významne zvýšili zahrnutím 0,8 alebo 1,2 g/kg BLF do stravy (Hashem et al. 2022). Naopak, Welker a kol. (2007) prezentovali suplementáciu BLF, ktorá neovplyvnila sérové ​​hladiny LYZ v diétach s nílskou tilapiou. Hodnoty aktivity LYZ u pražmy kŕmenej BLF tiež nepredstavovali výrazné výkyvy v porovnaní s prebiotickou a kontrolnou skupinou (Morshedi et al. 2020). Tieto nezrovnalosti v literatúre môžu súvisieť s faktormi, ako sú dávky BLF, kvalita vody, experimentálne podmienky, druhy rýb a aktivity pepsínu v žalúdkoch rýb, ktoré môžu ovplyvniť ich schopnosť tráviť BLF do črevného lúmenu, a tým ovplyvniť biologickú dostupnosť. z BLF.

Nedávno publikovaná práca Solimana a spoluautorov ukázala, že diétne BLF významne zvýšilo bunkami sprostredkovanú imunitu u karasa striebristého (Soliman et al. 2022). Títo autori zistili, že diétna BLF významne zvýšila percento lymfocytov a monocytov, fagocytárnu kapacitu (fagocytárny index a fagocytárnu aktivitu) a počet lymfocytov v čreve a makrofágov v pečeni, pankrease a slezine karasa striebristého (Soliman et al. 2022 ). V prípade kreviet, predtým publikovaná štúdia tiež ukázala, že diéty dodávané s BLF v dávke 100 mg/kg stravy počas siedmich dní vyvolali významné zvýšenie aglutinačných titrov proti A. hydrophila a enzýmovej aktivite fenoloxidázy v Macrobrachium rosenbergii (Chand et al. 2006).

Úlohy BLF pri zvyšovaní odolnosti proti bakteriálnym infekciám

Bolo preskúmané, že BLF môže posilniť imunitný systém rýb a zvýšiť odolnosť voči chorobám po bakteriálnej infekcii (Luna-Castro et al. 2022). Správy ukázali, že diétna aplikácia BLF môže zmeniť imunitu črevnej sliznice, a preto môže pomôcť zvýšiť odolnosť proti bakteriálnym infekciám (Taherah 2021). V rovnakom zmysle aplikácia BLF do stravy sumca ázijského (Clarias batrachus) významne zlepšila schopnosť prežitia po stimulácii baktériami A. hydrophila v porovnaní s rybami bez BLF (Kumari et al. 2003). Podobne sa uvádza, že BLF zvýšil odolnosť proti bakteriálnym infekciám u niekoľkých druhov rýb, ako je Edwardsiella ictaluri u sumca kanálového (Welker et al. 2010), Streptococcus agalactiae u hybridnej tilapie (O. nilotica × O. mossambicus) (Wang et al. al. 2013), A. salmonicida chromogens u pstruha dúhového (Khuyen et al. 2017), V.harveyi u pražmy žltoplutvej (Esmaeili et al. 2019) a nedávno V. vulnificus u tolstolobika (Hypophthalmichthys molitrix) (So al. 2022). Pri druhoch kreviet sa tiež zistilo, že LF v potrave významne zvýšilo odolnosť Macrobrachium rosenbergii voči chorobám a mieru prežitia po expozícii A. hydrophila (Chand et al. 2006).

Skoršia správa ukázala, že antibakteriálne vlastnosti BLF in vivo možno pripísať antimikrobiálnej aktivite BLF prostredníctvom podpory železa nevyhnutného pre rast baktérií, čo potom povedie k potlačeniu rastu baktérií (González-Chávez et al. 2009). . V rovnakom zmysle sa zistilo, že diétne BLF zvýšilo odolnosť proti bakteriálnym infekciám rýb tilapie nílskej, ako je Streptococcus iniae (Welker et al. 2007) a nedávno A. veronii (Hashem et al. 2022). Nedávno sa tiež zistilo, že tilapia nílska, ktorá dostávala stravu obohatenú o odstupňované množstvá samotného BLF alebo kombinovanú s nanočasticami chitosanu, mala po experimentálnej infekcii A. hydrophila podstatne vyššie relatívne percentuálne hodnoty prežitia ako kontrolná skupina (Abdel-Wahab et al. 2021).

Antiparazitárne vlastnosti BLF

V štúdiách uskutočnených v humánnej medicíne sa predpokladalo, že antiparazitické vlastnosti BLF sa zdajú byť spojené s interferenciou v hemostáze železa Pneumocystis carinii (Cirioni et al. 2000), alebo niekedy je BLF reprezentovaný ako špecifický donor železa u iných parazitov, ako je Tritrichomonas fetus (Giansanti et al. 2013). Štúdie vykonané v štúdiách in vitro odhalili, že LF má overiteľnú aktivitu týkajúcu sa ľudských patogénnych húb, ako sú rôzne druhy Candida, a môže potlačiť rast Plasmodium berghei (Larkins 2005). Obrázok 2 predstavuje navrhované antiparazitické aktivity BLF.

U rýb sa navrhlo, že začlenenie BLF do stravy má pozitívny vplyv na rôzne ektoparazity, ako sú Ichthyophthirius multifiliis a Cryptocaryon irritans, ktoré infikujú povrchy tela rýb (Kakuta 1996, 1998). Tiež zlepšuje sekréciu kožného hlienu, aktivitu LYZ a lektínové aktivity u pražmy červenej (Kakuta 1996) a kanice oranžovej (Epinephelus coioides) (Yokoyama et al. 2006). V poslednej dobe sa zistilo, že gorily Neobenedenia kŕmené stravou obohatenou o 1 g/kg BLF mali menej parazitov ako tie, ktoré boli poskytnuté v kontrolnej strave (Yokoyama et al. 2019). Okrem toho títo autori tiež zistili, že počet parazitov na jednotku plochy povrchu tela rýb bol nižší u rýb, ktoré dostávali diétne BLF, ako v kontrolnej skupine. Dietetická aplikácia BLF zvýšila lektínové aktivity v dermálnom hliene a môže odstrániť možnosť väzby rekombinantného patogénu na telo rýb. Ako je známe, lektín je uznávaný ako hlavný problém spojený s antiparazitickou aktivitou povrchu tela rýb. Bolo tiež naznačené, že aktivita lyzozýmu kožného hlienu bola výrazne zvýšená u rýb, ktoré dostávali BLF. Toto zvýšenie aktivity lyzozýmu súviselo s nízkou mierou infekcie N. girlie (Yokoyama et al. 2019)

Závery a perspektíva

Tento článok popisuje potenciálne využitie BLF ako kŕmnej doplnkovej látky v akvakultúre. Zdôraznil tiež významné účinky diétneho BLF na rastové indexy, tráviace enzýmy, účinnosť krmiva, metabolizmus železa, krvné metabolity, imunitu, odolnosť voči chorobám, antioxidačný stav a expresiu prozápalových reakcií u liečených rýb a kreviet. Na základe citovanej literatúry sa BLF môže použiť ako alternatíva k aplikácii antibiotík. Okrem toho môže byť použitý ako doplnok krmiva na zníženie negatívnych dopadov stresových podmienok postihujúcich ryby a krevety. Tieto funkcie môžu byť spojené s jeho potenciálnymi antimikrobiálnymi, protizápalovými, antiparazitárnymi a antivírusovými aktivitami. Hoci vyššie uvedené sú životne dôležité biologické aktivity BLF, skutočné mechanizmy BLF pri zlepšovaní zdravia rýb si stále vyžadujú ďalšie výskumy a výskumné štúdie.

Autorský príspevok

Všetci autori prispeli rovnakým dielom ku konceptualizácii, implementácii a výstupom tejto výskumnej práce prezentovanej v tomto článku.

Financovanie Financovanie s otvoreným prístupom poskytované Úradom pre financovanie vedy, technológií a inovácií (STDF) v spolupráci s Egyptskou vedomostnou bankou (EKB)

Dostupnosť kódu

Nepoužiteľné.

Dostupnosť údajov

Autori potvrdzujú, že údaje podporujúce zistenia tejto štúdie sú dostupné na základe primeranej žiadosti príslušného autora.

vyhlásenia

Súhlas so zverejnením

Autori schvaľujú spracovanie tohto článku na publikovanie.

Konkurenčné záujmy

žiadne.

Etické schválenie

Nebude sa vyžadovať etické schválenie, pretože budú dostupné a analyzované údaje z predtým publikovaných štúdií, v ktorých primárni výskumníci získali informované povolenie.

Otvorený prístup

Tento článok je licencovaný na základe Creative Commons Attribution 4.{1}} Medzinárodná licencia, ktorá povoľuje používanie, zdieľanie, adaptáciu, distribúciu a reprodukciu na akomkoľvek médiu alebo formáte, ak uvediete pôvodného autora (autorov) ) a zdroj, uveďte odkaz na licenciu Creative Commons a uveďte, či boli vykonané zmeny. Obrázky alebo iný materiál tretích strán v tomto článku sú zahrnuté v licencii Creative Commons článku, pokiaľ nie je uvedené inak v úverovom limite k materiálu. Ak materiál nie je zahrnutý v licencii Creative Commons k článku a vaše zamýšľané použitie nie je povolené zákonnými predpismi alebo prekračuje povolené použitie, budete musieť získať povolenie priamo od držiteľa autorských práv.

Referencie

1. Abdel-Latif HMR, Dawood MAO, Alagawany M, Faggio C, Nowosad J, Kucharczyk D (2022a) Zdravotné prínosy a potenciálne aplikácie fukoidánu (FCD) extrahovaného z hnedých morských rias v akvakultúre: aktualizovaný prehľad. Fish Shellfish Immunol 122:115–130.

2. Abdel-Latif HMR, Dawood MAO, Menanteau-Ledouble S, El-Matbouli M (2020) Povaha a dôsledky koinfekcií pri tilapii: prehľad. J Fish Dis 43(6):651-664.

3. Abdel-Latif HMR, El-Ashram S, Yilmaz S, Naiel MAE, Abdul Kari Z, Hamid NKA, Kucharczyk D (2022b) Účinnosť Arthrospira platensis a mikrorias pri zmierňovaní stresových podmienok ovplyvňujúcich druhy plutvákov a mäkkýšov: prehľad. Aquaculture Rep 24:101135.

4. Abdel-Tawwab M, Khalil RH, Nour AM, Elkhayat BK, Khalifa E, Abdel-Latif HMR (2022) Účinky fermentovaných ryžových otrúb Bacillus subtilis na kvalitu vody, výkonnosť, antioxidanty/oxidanty a biomarkery imunity bielej nohy krevety (Litopenaeus vannamei) chované pri rôznych slanostiach s nulovou výmenou vody. J Appl Aquac 34(2):332-357.

5. Abdel-Wahab MM, Taha NM, Lebda MA, Elfeky MS, Abdel-Latif HMR (2021) Účinky nanočastíc hovädzieho laktoferínu a chitosanu na biochemické indexy v sére, antioxidačné enzýmy, transkriptomické reakcie a odolnosť nílskej hydrofilie proti Aeromonas. Fish Shellfish Immunol 111:160–169.

6. Herec JK, Hwang SA, Kruzel ML (2009) Laktoferín ako prirodzený imunitný modulátor. Curr Pharm Des 15 (17): 1956–1973.

7.Adlerová L, Bartošková A, Faldyna M (2008) Laktoferín: recenzia. Vet Med 53(9):457-468.

8. Ahmadifar E, Yousefi M, Karimi M, Fadaei Raieni R, Dadar M, Yilmaz S, Abdel-Latif HMR (2021) Výhody diétnych polyfenolov a aditív bohatých na polyfenoly pre zdravie vodných živočíchov: prehľad. Recenzie v Fisheries Science & Aquaculture 29 (4): 478 – 511.

9. Alagawany M, Farag MR, Abdelnour SA, Dawood MAO, Elnesr SS, Dhama K (2021) Kurkumín a jeho rôzne formy: prehľad výživy rýb. Akvakultúra 532:736030.

10. Alhoshy M, Shehata AI, Habib YJ, Abdel-Latif HMR, Wang Y, Zhang Z (2022) Nutrigenomika u kôrovcov: súčasný stav a vyhliadky. Fish Shellfish Immunol 129:1–12.

For more information:1950477648nn@gmail.com